-
Laboratorijska analiza Salmonella
-
Salmonele
• Salmonele su najčešći prouzrokovači crevnih infekcija •
Rasprostranjene su u prirodi i mogu kolonizovati različite
domaćine• salmoneloze su značajne i zbog kliconoštva koje može
trajati veoma
dugo zavisno od starosti inficiranog organizma. • Čest su uzrok
alimentarnih toksiinfekcija kod ljudi• Kao intestinalni paraziti,
salmonele se nalaze u digestivnom sistemu• Fekalno-oralni put je
osnovni način prenošenja salmoneloza
-
Izgled Sallmonela
• Salmonelle pripadaju gram negativnim štapićastim nesporegenim,
akapsularnim bakterijama
• veličine su od 2-4 µm x 0-5 µm. • Većina Salmonella se ubraja
u pokretne bakterije zahvaljujući peritrihijalno
raspoređenim flagelama
-
Salmonelle pripadaju familiji Enterobacteriaceae koju čini
veliku grupu različitih mikroorganizama. Postoji 32 roda sa preko
130 vrsta.
Glavne osobine članova ove familije:• gram negativni bacili, •
asporogeni,• fakultativni anaerobi• Fermentuju glukozu, • Redukuju
nitrate do nitrita • Ne produkuju citohrom oksidazu • Svi članovi
su pokretni, osim bakterija iz rodova Klebsiella i Shigella.•
Yersinia spp. su pokretne na 18-25 C, ali ne i na 37 C
-
Vrste Salmonella• S. enterica, • S. bongori • S
.subteranea.Vrsta Salmonella enterica sadrži šest podvrsta koje se
razlikuju na osnovu fenotipskih i genotipskih karakteristika: -S.
enterica subspec. enterica, -S. enterica subspec. arizonae,-S.
enterica subspec. diarizonae, -S. enterica subspec. houtenae,- S.
enterica subspec. indica I- S. enterica subspec. salamae.
-
Salmonella vrste imaju tri glavna antigena: • 1. Somatski O
antigen • 2. Flagelarni H antigen • 3. Kapsularni Vi antigen -
imaju ga inkapsulirane bakterije roda
Salmonella (S.typhi)
-
• Na osnovu antigenih osobina somatskih O antigena, Salmonella
vrste se dele u grupe od A-60 i od 61-67.
• 98% humanih izolata pripadaju grupama od A do G.•
S.enteritidis je na našim prostorima najčešći uzročnik
infekcija
izazvanih bakterijama iz roda Salmonella zato se koristi serum
za dokazivanje somatskog O antigena i antiserume za dokazivanje
flagelarnog H antigena za ovu vrstu.
• Ukoliko su izolati suspektni na jedan od sledeća tri serotipa
S.typhi, S. cholerasuis ili S.paratyphi, zbog kliničkog i
epidemiološkog značaja, moraju biti biohemijski identifikovani i
serološki potvrđeni.
-
Laboratorijska dijagnostika SalmonelaDijagnostičko ispitivanje
vrši se iz uzorka: -fecesa - krvi - bioptički materijal - brisevi
–rektalni - povraćajni sadržajRezultat bakteriološkog pregleda
fecesa dobija se za 2-4dana(najkasnije 7-10dana).
-
Laboratorijska dijagnostika Salmonela
Ispitivanje se vrši na osnovu morfoloških, kulturelnih i češće
fiziološko-biohemijskih osobina. Antigenske karakteristike:-
zasnivaju se na ispitivanju O somatskog antigena izvođenjem testa
brze aglutinacije na pločici uz primenu polivalentnih i
monovalentnih seruma koji sadrže antitela protiv O, H i V
antigena.
-
Laboratorijska dijagnoza
U stolici i uzorcima bioptičkog materijala traže se:• leukociti•
bakterije• toksini• makroskopskim pregledom uočava se prisustvo
krvi, sluzi, gnoja
-
U ostacima hrane i povraćajnim masama traže se: • bakterije•
toksiniU krvi se mogu tražiti:• bakterije• Toksini• antitela
specifična
-
• Salmonele na hranljivim podlogama rastu aerobno ali mogu da
rastu i u anaerobnoj sredini, zbog čega se smatraju fakultativno
anaerobnim bakterijama.
• Karakteriše ih oksidativni i fermentativni tip
metabolizma.
-
• Zasejane u podlogu sa glukozom stvaraju gas, a sa dekstrozom
stvaraju gas i kiselinu
• Ne razlažu šećer laktozu a za izvor ugljenika koriste citrate.
• Optimalna temperatura rasta im je 37ºC ali mogu da rastu i na
temperaturi od 43ºC kada se izoluju iz kontaminiranih
materijala.• Reakcija sa metil crvenim ( MR) i produkcija H2S im je
pozitivna,
reakcija sa acetil-metil karbinolom ili Voges Proskauer (VP) i
indol su negativne a imaju sposobnost da vrše i redukciju nitrata u
nitrite.
-
Izolacija Salmonella
Na standardnim hranljivim podlogama rastu u vidu gustih
sivo-belih kolonija sa pravilnim ivicama čija se veličina kreće od
2-4 mm
-
Izolacija Salmonella
Za izolaciju Salmonella koriste se brojne selektivne i
diferncijalne podloge: -Od čvrstih podloga to su Brilijant zeleni
agar, Endo agar, SS- agar (Salmonella-Shigella agar), XLD-agar
(ksilozalizin-dezoksiholat agar), MacConkey agar - od polutečnih
Wilson-Blair i -tečnih hranljivih podloga za obogaćenje: Selenit F
bujon, Rappaport-Vassiliadis (RV), tetrationat bujon,dektrozni
bujon i drugi.
-
Zasejavanje • 2 SS agara (Salmonella, Shigella, Yersinia
enterocolitica)• selenit F bujon (Salmonella, Shigella) • sorbitol
agar Inkubacija • SS agar: aerobno, 35 - 37˚ C, 16-24 h • SS agar:
aerobno, sobna temperatura, 16-24 h • Selenit F bujon: aerobno, 35
- 37ºC, 8-12 h, a potom presijati na SS
agar koji se inkubira aerobno, 35 - 37ºC, 16-24 h • sorbitol
agar: aerobno, 35 - 37ºC, 16-24 h
-
Izolati Salmonella spp. i Shigella spp. iz fecesa,se ispituje na
osetljivost za ampicilin, fluorohinolone,
trimetoprim/sulfametoksazol i nalidiksnu kiselinu. Kod
ekstraintestinalnih izolata salmonela treba ispititivati i
izveštavati i cefalosporine treće generacije. Pri tome je
testiranje indikovano samo za tifoidne salmonele (Salmonella Typhi
i Salmonella Paratyphi A, B i C) iz intestinalnih ili
ekstraintestinalnih izvora.
Slide 1SalmoneleIzgled SallmonelaVrste SalmonellaSlide 6Slide
7Laboratorijska dijagnostika SalmonelaLaboratorijska dijagnostika
SalmonelaLaboratorijska dijagnozaSlide 11Slide 12Slide 13Slide
14Slide 15Izolacija SalmonellaIzolacija SalmonellaSlide 18Slide
19
