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D O U T O R A N D A F E R N A N D A S A N C H E S M E N D O N Ç A
Métodos in vivo de avaliação de alimentos para cães e gatos
N U T R I Ç Ã O E A L I M E N T A Ç Ã O D E C Ã E S E G A T O S
Principais Métodos
Atualmente, o ensaio com animais é o melhor método de avaliação qualitativa dos alimentos completos e balanceados (Case et al., 2000)
Palatabilidade
Digestibilidade
EM
pH urinário
Palatabilidade/Apetibilidade
Método utilizado para verificação dos aspectos sensoriais envolvidos na ingestão do alimento.
PALATABILIDADE
Odor
Paladar Textura Formato
Tamanho
Sensação de mastigação
Aplicações
Aceitação por um produto;
Preferência por um palatabilizante;
Inclusão de ingredientes e palatabilizantes;
Processamento;
Comparação entre concorrentes;
Estudos de preferência alimentar;
Tipos
Aceitabilidade
Preferência
Animais
n elevado ( mínimo 20)
Treinados/Qualificados
Período Recomenda-se 120 observações
Ex: 30 animais – 4 dias de teste
Palatabilidade/Apetibilidade
Aceitabilidade
Determina se os animais apresentam consumovoluntário suficiente para manter o peso corporal;
Simular as condições de ingestão na casa dosproprietários;
Apenas um único alimento por vez.
Protocolo Aceitabilidade
2 alimentos, períodos diferentes
Evitar efeito de momento
Dia 1 Dia 2
Momento 1Grupo 1 – Alim. A Grupo 1 – Alim. B
Grupo 2 – Alim. B Grupo 2 – Alim. A
Momento 2Grupo 1 – Alim. B Grupo 1 – Alim. A
Grupo 2 – Alim. A Grupo 2 – Alim. B
Preferência
Confrontar dois alimentos verificar qual opreferido;
Empregado para comparar:
duas rações presentes no mercado;
mudanças de formulação industrial de uma mesma ração;
diferentes palatabilizantes em uma mesma fórmula.
Dois alimentos simultaneamente mensura qualo mais consumido alimento preferido
Protocolo de Preferência
2 Alimentos simultâneos;
Excesso de alimento;
Alimento disponível por 20-60 min. (consumo);
Alterar posição de comedouro;
Pode ser dividido em 2 períodos: adaptação e desafio.
Protocolo de Preferência
Adaptação
1 ração 2 potes
Assegurar consumo ad libtum
Ração diferente da teste
Objetivo: minimizar neofobia e neofilia
Desafio
Alimento 1 ou 2 x ao dia
Pesa oferecido e recusado
Primeira escolha (First Bite)
Protocolo de Preferência
Resultado dado como Razão de Ingestão;
Pesos e ingestões diferentes
Considera o consumo percentual;
20 a 30 (RI≥0,60) acima 30 (RI≥0,55) preferido
Fatores que influenciam
Matérias-primas: Animal vs. Vegetal;
In natura vs. Processadas;
Qualidade (oxidação, contaminação, etc)
Composição da ração: Teor de gordura, fibra e/ou
proteína;
Processamento: Umidade, moagem,
condições de extrusão, aplicação de líquidos;
Palatabilizantes: Composição e tipos;
Digestibilidade
É a porção do alimento ingerido que não foi excretado
na fezes e que portanto, se supõe ter sido absorvido(Jones, 1981; Close et al., 1986; McDonald et al., 1988)
Aparente → não desconta-se as perdas endógenas /relação entre o ingerido e o excretado;
Verdadeira → desconta-se as perdas endógenas / coletacom jejum;
Ileal → conteúdo ileal / canulação do animal → digestacoletada antes do IG;
Importância da Digestibilidade
Avaliação de alimentos completos
comparações concorrentes
avaliação de processamento
mudanças em formulações
Avaliação de ingredientes
tipos de processamento
percentuais de inclusão em fórmula
fontes alternativas
Avaliação de indivíduos
faixa etária
condição corporal
raças
sexo
Fatores importantes
Idade
Gatos idosos tem redução da digestibilidade de algunsnutrientes (Teshima et al, 2006);
Cães e gatos jovens (< 1 ano) ainda não atingiram maturidadedo sistema digestório, isso digestibilidade (Weber et al.,2002, 2003);
Fatores importantes
Raça:
Portes variados:
Menor tamanho do TGI em raças grandes e gigantes em proporção ao corpo (Weber et al., 2001, 2004);
Fatores importantes
Homogeneidade dos animais
Raça;
Escore corporal;
Idade;
Saúde;
Sexo;
Manter 70% de ingestão de alimento ao longo dadigestibilidade;
Consumo aumenta PE e diminui Dig. por sobrecargaalimentar.
Digestibilidade Aparente
Animais sadios;
Mínimo 1 ano de idade;
Determina-se
EM
MS
MM
PB
EE
FB ou FDT
MO
Minerais
Vitaminas
Digestibilidade Aparente
Água;
NE baseada no NRC, 2006;
Alimentação sempre no mesmo horário: Cães: 1 ou 2 vezes ao dia; Gatos: a disposição;
Composição química da dieta conhecida;
Digestibilidade Aparente
Métodos
Coleta total (com ou sem coleta de urina)
Coleta por indicador;
Coleta parcial;
Protocolo Coleta Total
n mínimo de 6 animais
Quantificar Alimento ingerido;
Excretas sólidas;
Gaiolas metabólicas individuais
Período Adaptação
Coleta
Adaptação
5 dias adaptar o animal ao alimento e a gaiola metabólica;
Observar Consumo
Escore fecal
Pesagem dos animais;
Cães e Gatos
Coleta
5 dias para cães e 7 dias para gatos;
Ração
Cálculo de NE (NRC, 2006) Cães 95 kcal x PCkg0,75
Gatos 100 kcal x PCkg0,67
Oferecido/Recusado
Coleta
Fezes
Colhidas e pesadas 2x/dia: 24 horas de coleta;
Armazenadas em recipientes apropriados eidentificados;
Congeladas em freezer -15°C;
Avaliação quantitativa e qualitativa;
Coleta
Urina
Adicionar ao frasco coletor 1ml de ácido sulfúrico 1Eq/L;
24 horas de coleta Cães: guardar apenas 30%; / Gatos: todo o volume;
Armazenar congelada;
Verificar a EM;
Coleta Total
Desvantagens:
Nem sempre é fácil recolher todo o material;
Espaço reduzido stress = gaiola metabólica;
Mais trabalhoso: lavagem e secagem;
Detalhes são importantes durante o experimento:
Variações na colheita do material;
Coprofagia;
Cálculos
CDA Coleta Total:
CDA(MS) = ingerido – excretado x 100
ingerido
CDA(PB) = (ingeridoxPBr) – (excretado x PBf) x 100
ingerido x PBr
Coleta por Indicador
Coleta total inviável;
Não há necessidade de gaiolas;
Indicador ideal:
Indigerível – TR= 100%;
Função fisiológica ausente;
Processado com o alimento;
Ser de fácil determinação química;
Coleta por Indicador
Externos – adicionado ao alimento:
Cr2O3 (confiável);
Internos – presente no alimento
Porção fibrosa
Minerais indigeríveis
Teor de cinza insolúvel em ácido (CIA);
Protocolo por Indicador
Período:
5 dias adaptação;
5 dias coleta;
Mínimo 6 animais;
Não há necessidade de quantificação de consumo efezes;
Quantificação OC: colorimetria/espectofotometria
Coleta por Indicador
Desvantagens:
Erros laboratoriais;
Adicionar indicador externo antes da extrusão ou remoeralimento depois de pronto;
Cálculos
CDA Coleta por Indicador:
CDA(MS)= 100 - 100 x % indicador no alimento
% indicador fezes
CDA(PB)= 100- 100 x % Ind ração x %PB fezes
%Ind fezes %PB ração
Coleta Parcial
Cânulas na porção ileal do intestino delgado;
Recomendações de uso
Avaliação de aminoácidos;
Avaliação de amido;
Avaliação de processo;
Taxa de passagem;
Fases da digestão ao longo do trato digestivo;
Fatores que influenciam a digestibilidade
Composição química;
Teor de fibra bruta, cinzas e proteínas de baixaqualidade;
Interações entre os ingredientes;
Processamento inadequado.
Cálculo da Energia Metabolizável
EMA sem coleta de urina:
Pding(g) = (consumo total ração x PBr) – (fezes totais x PBf)
100 100
EMA (Kcal/g) = (consumo total ração x EBr) – (fezes totais x EBf) – (FC*x Pding)
consumo total ração
*FC Cães: 1,25/g de PDing / Gatos: 0,85/g de PDing
Cálculo da Energia Metabolizável
EMA com coleta de urina:
EMA = (consumo total ração x EBr) – (fezes totais x EBf) + (urina total x EBu)
consumo total ração
(Kcal/g)
Pontos importantes
Dias de coleta
Impossibilidade de
colher todo material
Animal derruba alimento
Animal defeca na água
Animal não come
Coprofagia
Diarréia/vômito
Urina no alimento e
água
pH urinário
Importância
Distúrbios metabólicos
SSR
Urolitíase (gatos)
Fatores que influenciam
Individualismo
Composição mineral da dieta (cátions e ânions)
Aminoácidos sulfurados
Distúrbios metabólicos
pH urinário
Saúde do trato urinário
pH ideal - 6,2 a 6,8
Urólitos
Oxalato de cálcio
Estruvita Urólito de Estruvita
Urólito de Oxalato de Cálcio
pH urinário
Controle do pH que a dieta vai gerar;
Ca, P, Mg, Na, K, Cl e S;
Excesso de bases e Predição do pH;
EB (mEq/kg MS) = (49,9 x Ca) + (82,3 x Mg) + (43,5 x Na) +(25,6 x K) - (64,6 x P) - (62,4 x S) - (28,2 x Cl)
pH urinário = 6,269 + (0,0036 x EB) + (0,000003 x EB2)
Protocolo de pH urinário
Mínimo 6 animais (saudáveis) por dieta;
5 dias de adaptação e 3 dias de colheita;
Limpeza diária (água destilada);
Alimento (adaptação e coleta);
Períodos de 24h
Protocolo de pH urinário
Refrigeração
T°C Ambiente
Coleta 3x
Timol
• Conservante urinário(evita proliferação
bacteriana)
• Não altera pH e densidade
Considerações Finais
Outros protocolos – padronização;
Escolha do método de avaliação:
Nutriente ou alimento avaliado;
Efeito biológico esperado;
Sensibilidade do parâmetro biológico;
Sensibilidade do método laboratorial;
Aspectos éticos da pesquisa;
Conhecimento da fisiologia da espécie;