MINISTÉRIO DA AGRICULTURA, PECUÁRIA E ABASTECIMENTO Secretaria de Defesa Agropecuária

PNCEBT - Departamento de Defesa Animal/SDA/MAPA

MINISTÉRIO DA AGRICULTURA, MINISTÉRIO DA AGRICULTURA, PECUÁRIA E ABASTECIMENTO PECUÁRIA E ABASTECIMENTO

Secretaria de Defesa AgropecuáriaDepartamento de Defesa Animal

Coordenação de Vigilância e Programas Sanitários

Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e da Tuberculose Animal

- PNCEBT -


PRESIDENTE DA REPÚBLICA• Luiz Inácio Lula da Silva

MINISTRO DA AGRICULTURA, PECUÁRIA E ABASTECIMENTO• Roberto Rodrigues

SECRETÁRIO EXECUTIVO• José Amauri Dimarzio

SECRETÁRIO DE DEFESA AGROPECUÁRIA• Maçao Tadano

DIRETOR DO DEPARTAMENTO DE DEFESA ANIMAL• Jorge Caetano Júnior

COORDENADOR DE VIGILÂNCIA E PROGRAMAS SANITÁRIOS• Jamil Gomes de Souza

PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE E ERRADICAÇÃO DA BRUCELOSE E DA TUBERCULOSE ANIMAL - PNCEBT• José Ricardo Lôbo • Ana Margarida Pantaleoni• Vera Cecilia Ferreira de Figueiredo


Andrey Pereira Lage Universidade Federal de Minas Gerais

Eliana Roxo Instituto Biológico de São Paulo

Ernst Eckehardt Muller Universidade Estadual de Londrina

Fernando Padilla Poester Consultor do LARA/MG - MAPA

João Crisostomo Mauad Cavalléro SSA/DFA/MS - MAPA

José Soares Ferreira Neto Universidade de São Paulo

Pedro Moacyr Pinto Coelho Mota LARA/MG - MAPA

Vitor Salvador Picão Gonçalves Universidade de Brasília

Material Elaborado pelo Comitê Material Elaborado pelo Comitê Científico Consultivo do PNCEBTCientífico Consultivo do PNCEBT


BRUCELOSE BRUCELOSE BOVINA BOVINA


Temas AbordadosTemas Abordados

• Definição

• Etiologia

• Epidemiologia

• Importância econômica

• Transmissão

• Patogenia

• Sinais clínicos

• Diagnóstico

• Controle


Brucelose BovinaBrucelose Bovina

• DEFINIÇÃO

– Doença infecto-contagiosa provocada por bactérias do Gênero Brucella.

– Caracteriza-se por provocar abortos geralmente no terço final da gestação, nascimento de bezerros fracos, retenção de placenta, repetição de cio e descargas uterinas com grande eliminação da bactéria, podendo ainda transmitir-se ao homem.


– BOVINOS

Doença de Bang;

Aborto contagioso;

Aborto infeccioso.

• SINONÍMIA

– HOMEM

Febre ondulante;

Febre de Malta.

BruceloseBrucelose BovinaBovina


EtiologiaEtiologiaB. melitensis - Bruce 1887 - Malta - 3 biovares

B. abortus - Bang 1897 - Dinamarca - 7 biovares

B. suis - Traum 1914 - EUA - 5 biovares

B. ovis - Buddle 1953 - Nova Zelândia

B. neotomae - Stoenner 1957 – EUA

B. canis - Carmichael 1968 - EUA Ross et al. 1994 - Escócia – isolamento em mamíferos marinhos

Proposta: “Brucella cetaceae” - isolamentos de cetáceos

“Brucella pinnipediae” - isolamentos de focas


Brucella abortus Brucella abortus Resistência Resistência

• Luz solar direta 4 - 5 horas• Solo seco 4 dias• Solo úmido 66 dias

– a baixas temperaturas 151 - 185 dias• Fezes 120 dias• Dejetos a altas temperaturas 2 - 4 horas• Esgoto 8 - 240/700 dias• Água potável 5 - 114 dias• Água poluída 30 - 150 dias• Feto à sombra 180 dias• Exsudato uterino 200 dias

Fonte: Wray, 1975.


• Leite 17 dias• Leite congelado > 800 dias• Queijos até 6 meses• Manteiga até 4 meses• Iogurte até 96 dias• Temperatura de 60ºC 10 minutos• Temperatura de 71,7ºC 15 segundos

Brucella abortus Brucella abortus Resistência Resistência


• DESINFETANTES– Álcool 96oGL– Hipoclorito de sódio 5%– Hipoclorito de cálcio 5%– Formol 3%– Fenol 5%

• CALOR– Autoclavação: 120oC por 20 minutos– Pasteurização lenta: 65oC por 30 minutos– Pasteurização rápida: 72 a 74oC por 15-20 segundos– Fervura

Fonte: WHO/VPH/84.4.

Brucella abortus Brucella abortus Destruição Destruição


• DISTRIBUIÇÃO

– Mundial

Maior prevalência em países em desenvolvimento.

Erradicada ou em erradicação em alguns países desenvolvidos.

EpidemiologiaEpidemiologia


• DISTRIBUIÇÃO– Brasil

– 1975 - - Último estudo nacional oficial:

Região Norte 4,1%

Região Nordeste 2,5% Região Centro-Oeste 6,8% Região Sudeste 7,5% Região Sul 4,0%

Fonte: MINISTÉRIO DA AGRICULTURA E DO ABASTECIMENTO. Diagnóstico de Saúde Animal, 1977.



Brucelose - % Animais Reagentes

Norte 9,53

Nordeste 3,74

Centro-Oeste 2,59

Sudeste 1,02

Sul 0,76

Total 2,75

Fonte: MINISTÉRIO DA AGRICULTURA E DO ABASTECIMENTO. Boletim de Defesa Sanitária Animal. V. 29, n. 1-4. 1996.

• DISTRIBUIÇÃO



B. abortus: biovares 1,2 e 3 B. suis: biovar 1

B. ovis B. canis

Brucelose

Brucelas confirmadas no Brasilaté 1985

Fonte: Carrillo,1990.


Importância EconômicaImportância Econômica

• PERDAS PARA A PECUÁRIA

Aborto

Repetição de cio

Bezerros fracos

Diminuição na produção de leite

Redução do tempo de vida produtiva

Custos de reposição de animais

Limitação na comercialização de animais


Cadeia deCadeia de TransmissãoTransmissão

• Fonte de Infecção– Animais infectados

• Vias de Eliminação– Feto e anexos fetais, secreções vaginais, leite,

sêmen, fezes e urina

• Vias de Transmissão– Água, pastagem e fômites contaminados

– Sêmen

– Leite e derivados crus


• Porta de Entrada

– Oro-faríngea

– Mucosas (conjuntiva, respiratória e genital)

– Pele com solução de continuidade

• Suscetíveis

– Mamíferos domésticos e silvestres

– Homem

Cadeia de TransmissãoCadeia de Transmissão


OralConjuntiva ocular

GenitalPele lesada Respiratória

Linfonodo regional

Hemática Linfática

Linfonodos Baço

Fígado Sistema reprodutivo

Útero Úbere

Articulações

Porta de Entrada

PatogeniaPatogenia

Disseminação


AbortoBezerros fracos

Natimortos

Tropismo pelo útero gestante e placenta

Placentite necrótica

Doença na FêmeaDoença na Fêmea

Retenção de placentaEndometriteInfertilidade


Inflamação aguda sistema reprodutivo

Orquite uni ou bilateral(pus, fibrose ou necrose),

Epididimite,VesiculiteInfertilidade

TestículoEpidídimo

Vesículas seminaisAmpolas seminais

Cronificação(assintomática)

Doença no MachoDoença no Macho


• DIRETOS

– Presença do agente etiológico:

Isolamento do agente em meio de cultura e identificação bioquímica

Detecção de DNA (PCR)

• INDIRETOS

– Pesquisa de anticorpos específicos

Métodos de Diagnóstico Métodos de Diagnóstico da Brucelose Bovinada Brucelose Bovina


Equipamentos de biossegurança nível 3 para pesquisa de Brucella sp

Diagnóstico da Brucelose Diagnóstico da Brucelose BovinaBovina


Diagnóstico BacteriológicoDiagnóstico Bacteriológico da Brucelose da Brucelose

• Meio de Farrell: agar triptose + soro (5%) + antibióticos(Polimixina B, Bacitracina, Cicloheximide, Nistatina, Ácido Nalidíxico, Vancomicina).

• MATERIAL– Da vaca : linfonodos (parotídeo, pré-escapular, bronquial, ilíaco

interno, supra-mamário) cotilédone, suabe vaginal, baço, leite.

– Do feto : linfonodo bronquial, conteúdo estomacal, baço, fígado, pulmão, suabe retal.


Diagnóstico Sorológico da Diagnóstico Sorológico da BruceloseBrucelose

• Reação antígeno-anticorpo em resposta à infecção.

• Infecção por brucelas lisas induzem anticorpos anti-brucelas lisas:

– reação cruzada entre: B. abortus, B. melitensis e B. suis.

• Infecção por brucelas rugosas induzem anticorpos anti-brucelas rugosas:

– reação cruzada entre: B. canis e B. ovis.

• Principal antígeno envolvido: Lipopolissacarídeo.


Fácil execução e interpretação

Rapidez na obtenção dos resultados

Baixo custo

(triagem e algumas confirmatórias)

Provas padronizadas internacionalmente



0

50

100

150

200

250

0 5 12Tempo em meses

Títu

lo d

e A

ntic

orp

os

em U

I

IgG1

IgM

IgA

IgG2

• Título de anticorpos em bovinos infectados com

Brucella abortus ao longo do tempo.

Fonte: Adaptado de Nielsen et al., 1996.



• Título de anticorpos em bezerras vacinadas entre 3 e 8 meses de idade com Brucella abortus amostra B19.

0

50

100

150

200

250

0 2 4 5 8 10 12

Tempo em meses

Tít

ulo

de

An

tic

orp

os

em

UI

IgG1

IgM

IgA

IgG2

Fonte: Adaptado de Nielsen et al., 1996.



Diagnóstico Sorológico da BruceloseDiagnóstico Sorológico da Brucelose(Provas Oficiais PNCEBT)(Provas Oficiais PNCEBT)

Teste de triagem diagnóstica: Teste de triagem diagnóstica: Teste do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT)(Rosa de Bengala)(Rosa de Bengala)

Teste confirmatório de diagnóstico: Teste confirmatório de diagnóstico: Teste do 2-Mercaptoetanol (2-ME)(2-Mercaptoetanol + Soroaglutinação Lenta)(2-Mercaptoetanol + Soroaglutinação Lenta)

Teste de referência para trânsito internacional:Teste de referência para trânsito internacional:Teste de Fixação de Complemento (FC)

Teste para vigilância epidemiológica:Teste para vigilância epidemiológica:Teste do Anel em Leite (TAL)

Teste de triagem diagnóstica: Teste de triagem diagnóstica: Teste do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT)(Rosa de Bengala)(Rosa de Bengala)

Teste confirmatório de diagnóstico: Teste confirmatório de diagnóstico: Teste do 2-Mercaptoetanol (2-ME)(2-Mercaptoetanol + Soroaglutinação Lenta)(2-Mercaptoetanol + Soroaglutinação Lenta)

Teste de referência para trânsito internacional:Teste de referência para trânsito internacional:Teste de Fixação de Complemento (FC)

Teste para vigilância epidemiológica:Teste para vigilância epidemiológica:Teste do Anel em Leite (TAL)


Teste do Antígeno Acidificado Tamponado

positivo negativoReação positiva

Teste do Anel em Leite



Teste do 2-Mercaptoetanol

1:50 1:100 1:2001:25

positivo negativo positivo

Teste de Fixação de Complemento



Interpretação do teste do 2-ME para fêmeas com idade Interpretação do teste do 2-ME para fêmeas com idade igual ou superior a 24 meses, que foram vacinadasigual ou superior a 24 meses, que foram vacinadas

entre três e oito meses de idade. entre três e oito meses de idade.

2-ME

SAL

NR 25I 25 50I 50 100I 100 200I 200

NR -

25I - -

25 - - +

50I - - + +

50 - - + + +

100I - - + + + +

100 Inc Inc + + + + +

200I Inc Inc + + + + + +

200 Inc Inc + + + + + + +

2-ME: 2-mercaptoetanol SAL: soro-aglutinação lenta NR: não reagiu I: reação incompleta Inc: reação inconclusiva


Interpretação do teste do 2-ME para fêmeas nãoInterpretação do teste do 2-ME para fêmeas não vacinadas e machos com mais de 8 meses. vacinadas e machos com mais de 8 meses.

2-ME

SAL

NR 25I 25 50I 50 100I 100 200I 200

NR -

25I - -

25 - - +

50I - - + +

50 Inc Inc + + +

100I Inc Inc + + + +

100 Inc Inc + + + + +

200I Inc Inc + + + + + +

200 Inc Inc + + + + + + +

2-ME: 2-mercaptoetanol SAL: soro-aglutinação lenta NR: não reagiu I: reação incompleta Inc: reação inconclusiva


Vacinação contra BruceloseVacinação contra Brucelose

• Vacina B19

Amostra B19 B. abortus, lisa, viva atenuada

Aplicação em bezerras entre 3 e 8 meses de idade (preferencialmente até os 6 meses)

Cuidados na aplicação

Não pode ser usada fora das especificações

Patogênica para o homem


É de reduzida virulência É estável e causa reações mínimas Protege cerca de 70% dos animais Imunidade por aproximadamente 7 anos Dose única Não tem ação curativa Vacinação de fêmeas entre 3 a 8 meses de idade Persistência de anticorpos em animais vacinados

acima de 8 meses de idade

Amostra B19 de B. abortus



• Amostra rugosa viva atenuada de Brucella abortus

• Não interfere nas provas sorológicas oficiais

• Vacina oficial nos EUA e Chile

• Uso permitido, juntamente com B19, na Colômbia, México,

Costa Rica, Paraguai e Venezuela

• EUA: vacinação de bovinos entre 4 a 12 meses de idade

• Outros países: revacinação após 12 meses

• Proteção semelhante à B19Fonte: OIE, 2004.

Vacina não Indutora de Anticorpos Aglutinantes



Vacina não Indutora de Vacina não Indutora de Anticorpos AglutinantesAnticorpos Aglutinantes

Permitirá aumentar a cobertura vacinal

Recomendado o uso em:

– Fêmeas adultas que nunca foram vacinadas

– Falha na imunidade do rebanho (FOCO), com eliminação dos animais reagentes ao teste, seguido de vacinação dos restantes

– Situações de alto risco de infecção

– Vacinações estratégicas


Vacina não Indutora de Vacina não Indutora de Anticorpos AglutinantesAnticorpos Aglutinantes

Não deve ser utilizada em machos e fêmeas prenhes

Cuidados na aplicação

Não pode ser usada fora das especificações

Potencialmente patogênica para o homem


Combate à Brucelose BovinaCombate à Brucelose Bovina

Educação sanitária

Vacinação

Rotina de testes sorológicos

Abate sanitário ou destruição dos animais reagentes

Desinfecção das instalações e destruição de restos placentários, fetos abortados e secreções

Piquetes maternidade

Quarentena de animais introduzidos no rebanho

Exame de saúde das pessoas envolvidas


Fotos gentilmente cedidas pelas Instituições:

LARA/MG/MAPA

UFMG

Instituto Biológico


www.agricultura.gov.br

[email protected]

Obrigado por sua atenção

Documents

MINISTÉRIO DA AGRICULTURA, PECUÁRIA E ABASTECIMENTO Secretaria de Defesa Agropecuária