Parasitologia – Amebas e B.coli

Professor MSc. Eduardo Arruda

Escola Superior da Amazônia – ESAMAZCurso Superior de Farmácia

Entamoeba histolytica

HistóricoHistórico

Hipócrates (460 – 377 a.C.): Verão / Hipócrates (460 – 377 a.C.): Verão / quentes & úmidas;quentes & úmidas;

Hebreus: Doenças disentéricas Hebreus: Doenças disentéricas contagiosas;contagiosas;

Fedor Lösh (1875): Trofozoíto / São Fedor Lösh (1875): Trofozoíto / São Petesburgo / cães / reprodução Petesburgo / cães / reprodução experimental / experimental / Amoeba coliAmoeba coli;;

HistóricoHistórico

Koch (1883): Egito / 5 disenteria / 2 Koch (1883): Egito / 5 disenteria / 2 Abscesso Hepático Amebiano (AHA);Abscesso Hepático Amebiano (AHA);

Kartilus (1886-1887): 150 disenteria / 20 Kartilus (1886-1887): 150 disenteria / 20 AHA;AHA;

Fritz Schaudinn (1903): Fritz Schaudinn (1903): E.histolytica;E.histolytica;

HistóricoHistórico

Clifford Dobell (1919): Clifford Dobell (1919): The Amoebae Living The Amoebae Living a Man / E.histolytica / a Man / E.histolytica / Teoria unicista;Teoria unicista;

Emile Brumpt (1925): Emile Brumpt (1925): E.histolytica E.histolytica & & E.dispar E.dispar / Teoria dualista;/ Teoria dualista;

Diamond&Clark (1993): Status taxonômico.Diamond&Clark (1993): Status taxonômico.

BiologiaBiologia

Membrana Plasmática: 10nm / bicamada Membrana Plasmática: 10nm / bicamada lipídica;lipídica;

Núcleo: Esférico / cromatina periférica RNA;Núcleo: Esférico / cromatina periférica RNA;

Citoesqueleto / complexo de Golgi / retículo Citoesqueleto / complexo de Golgi / retículo endoplasmático, mitocondrias.endoplasmático, mitocondrias.

MorfologiaMorfologia

TrofozoítaTrofozoíta:: Forma vegetativa;Forma vegetativa;

Pleomórficos(12 – 60 Pleomórficos(12 – 60 m);m);

01 núcleo (5 – 7 01 núcleo (5 – 7 m);m);

Citoplasma: Ectoplasma (claro) e Citoplasma: Ectoplasma (claro) e Endoplasma (granuloso) vacúolos/restos Endoplasma (granuloso) vacúolos/restos alimentares.alimentares.

MorfologiaMorfologia

CistoCisto:: Forma de resistência;Forma de resistência;

Esférico ou oval (8,5 – 19 Esférico ou oval (8,5 – 19 m);m);

01 - 04 núcleos;01 - 04 núcleos;

Citoplasma: Corpos cromatóides (Bastão);Citoplasma: Corpos cromatóides (Bastão);

Vacúolo de glicogênio. Vacúolo de glicogênio.

MorfologiaMorfologia

de.wikipedia.org

www.msu.edu www.msu.edu

www.msu.edu

MorfologiaMorfologiaPré-cistoPré-cisto::

Forma intermediária (trofozoíto – cisto);Forma intermediária (trofozoíto – cisto); Uninucleado;Uninucleado; Oval ou arredondado.Oval ou arredondado.

Trofozoíto-metacísticoTrofozoíto-metacístico:: Multinucleada;Multinucleada; Intestino delgado Trofozoíto.Intestino delgado Trofozoíto.

Ciclo BiológicoCiclo Biológico

Fonte: www.germology.com/ Amebiasis_LifeCycle.gif, (modificado).

PatogeniaPatogenia

E.histolyticaE.histolytica: Invadir tecidos;: Invadir tecidos;

Perfil genético(zimodemos 7/11) & Perfil genético(zimodemos 7/11) & hospedeiro;hospedeiro;

Egito, México, Índia e América do Sul;Egito, México, Índia e América do Sul;

PatogeniaPatogenia

EUA & Canadá: Assintomático;EUA & Canadá: Assintomático;

Lectina: N-acetil galactosamina inibidora da Lectina: N-acetil galactosamina inibidora da galactose;galactose;

Lise: Amebaporos (proteínas);Lise: Amebaporos (proteínas);

Enzimas proteolíticas (invasão/inflamação).Enzimas proteolíticas (invasão/inflamação).

Manifestações ClínicasManifestações Clínicas1.1. Forma assintomática intestinalForma assintomática intestinal (90%). (90%).

Cistos (Fezes);Cistos (Fezes); E.disparE.dispar..

2.2. Formas sintomáticas.Formas sintomáticas. Amebíase intestinalAmebíase intestinal

Úlceras: cólon, sigmoide e reto;Úlceras: cólon, sigmoide e reto; Disenteria AmebianaDisenteria Amebiana: Agudo, cólica, diarréia : Agudo, cólica, diarréia

(10x) muco-sanguinolentas, complicando-se (10x) muco-sanguinolentas, complicando-se frequentemente com frequentemente com perfurações intestinais.perfurações intestinais.

Manifestações ClínicasManifestações Clínicas

A: região cecal B: região reto-sigmoidiana.

Manifestações ClínicasManifestações Clínicas Amebíase intestinalAmebíase intestinal

Colite não disentéricaColite não disentérica: Comum, diarréia ou não, : Comum, diarréia ou não, cólicas, fadiga;cólicas, fadiga;

Apendicite amebianaApendicite amebiana: Ulceração ceco-apendicular / : Ulceração ceco-apendicular / sintomas da bacteriana;sintomas da bacteriana;

Colite necrotizanteColite necrotizante: 0,5%, necrose, hemorragia, : 0,5%, necrose, hemorragia, isquemia, intestino grosso, fatal 100%;isquemia, intestino grosso, fatal 100%;

AmebomaAmeboma: Invasão / tecido conjuntivo / massa : Invasão / tecido conjuntivo / massa granulomatosa / 0,5 - 1%. granulomatosa / 0,5 - 1%.

Manifestações ClínicasManifestações Clínicas Amebíase Extra-intestinalAmebíase Extra-intestinal

Amebíase hepáticaAmebíase hepática: Mesentérica superior e sistema : Mesentérica superior e sistema porta;porta;

Lesões granulomatosas e necrose tissular;Lesões granulomatosas e necrose tissular;

Única, lobo direito (80%);Única, lobo direito (80%);

Dor no hipocôndrio direito, febre e hepatomegalia.Dor no hipocôndrio direito, febre e hepatomegalia.

Manifestações ClínicasManifestações Clínicas Amebíase pleuropulmonarAmebíase pleuropulmonar: Ruptura AHA / direito / : Ruptura AHA / direito /

escarro.escarro.

Amebíase cerebralAmebíase cerebral: Rara / nunca s pleuropulmonar / : Rara / nunca s pleuropulmonar / circulação esquerda.circulação esquerda.

Diagnóstico LabotatorialDiagnóstico Labotatorial

Exame Parasitológico das Fezes:Exame Parasitológico das Fezes: Fezes formadas: Cistos;Fezes formadas: Cistos; Fezes diarréicas: Trofozoítas;Fezes diarréicas: Trofozoítas; E.histolytica E.histolytica x x E.disparE.dispar;; Parasitas rompidos;Parasitas rompidos; Extra-intestinal (1/3);Extra-intestinal (1/3); LimitaçõesLimitações: Facilidade de execução e : Facilidade de execução e

baixo custo.baixo custo.

Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial Métodos ParasitológicosMétodos Parasitológicos

Método Direto (Amostras diarréicas);Método Direto (Amostras diarréicas); Sedimentação Espontânea (Hoffman, Pons e Sedimentação Espontânea (Hoffman, Pons e

Janer ou LUTZ, 1934);Janer ou LUTZ, 1934); Flutuação (Faust Flutuação (Faust et al., et al., 1939);1939); OBS: Recomenda-se o uso conjunto das OBS: Recomenda-se o uso conjunto das

técnicas de flutuação e sedimentação na rotina técnicas de flutuação e sedimentação na rotina laboratorial – conduta impraticável para a laboratorial – conduta impraticável para a maioria dos laboratórios.maioria dos laboratórios.

Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial Métodos ImunológicosMétodos Imunológicos

1.1. Detecção de anticorpos:Detecção de anticorpos: Áreas endêmicas inconclusivo;Áreas endêmicas inconclusivo; Paises desenvolvidos;Paises desenvolvidos; 75 a 85% em pacientes sintomáticos;75 a 85% em pacientes sintomáticos; ELISA, RIFI, LÁTEX e fixação do ELISA, RIFI, LÁTEX e fixação do

complemento;complemento; Incremento:Sorologia+detecção do parasito.Incremento:Sorologia+detecção do parasito.

Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial Detecção de anticorpos no soro:

ELISA & IFI

IFI

Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial Métodos ImunológicosMétodos Imunológicos

2.2. Pesquisa de antígenos:Pesquisa de antígenos: Kits comercialmente disponíveis (ELISA) ®Kits comercialmente disponíveis (ELISA) ® Diferencia, sensibilidade e especificidade;Diferencia, sensibilidade e especificidade; Rápida e fácil execução;Rápida e fácil execução; Saliva, soro e fluidos de abscessos.Saliva, soro e fluidos de abscessos.

Diagnóstico LabotatorialDiagnóstico Labotatorial Biologia MolecularBiologia Molecular

1.1. Reação em cadeia da polimerase (PCR):Reação em cadeia da polimerase (PCR): Amplificação enzimática Amplificação enzimática in vitro in vitro de DNA;de DNA; Fontes de DNA: amostras fecais, exsudatos, Fontes de DNA: amostras fecais, exsudatos,

biópsias, cultivo;biópsias, cultivo; E.histolytica E.histolytica x x E.disparE.dispar;; Sensibilidade & especificidade;Sensibilidade & especificidade;

Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial Biologia MolecularBiologia Molecular::

PCRPCR RT- PCRRT- PCR

Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial Exames ComplementaresExames Complementares::

Ultra-sonografia,Ultra-sonografia, TomografiaTomografia

http://www1.lf1.cuni.cz/~hrozs/jatra/ameba2.gif

http://www.toshiba.co.jp/hospital/culture/img/20ame2.jpg

EpidemiologiaEpidemiologia

100.000 mortes / ano;100.000 mortes / ano;

Américas do Sul e Central, África e Índia: Américas do Sul e Central, África e Índia: Invasivos / extra-intestinal;Invasivos / extra-intestinal;

Endêmica: Clima tropical (Ac 50%);Endêmica: Clima tropical (Ac 50%);

Desenvolvidos: homossexual, imigrantes, Desenvolvidos: homossexual, imigrantes, imunodeprimidos;imunodeprimidos;

EpidemiologiaEpidemiologia Reavaliar dados (480 48 milhões);Reavaliar dados (480 48 milhões);

México: 8,4% invasiva /1 milhão por ano;México: 8,4% invasiva /1 milhão por ano;

11%:5 e 9 anos;11%:5 e 9 anos;

Ramos Ramos et al. et al. (2005):13,8% (2005):13,8% Eh Eh e 9,6% e 9,6% EdEd;;

Brasil: Superestimativa x subestimativa;Brasil: Superestimativa x subestimativa;

Kobaiashi Kobaiashi et al. et al. (1995):3,2% (1995):3,2% EhEh//EdEd;;

Shnack Shnack et al. et al. (2003):56,4% (2003):56,4% Eh;Eh;

EpidemiologiaEpidemiologia

Região AmazônicaRegião Amazônica:precária condição sócio-:precária condição sócio-econômica e de infra-estrutura;econômica e de infra-estrutura;

Martins & Menezes (1994) PA:84% Martins & Menezes (1994) PA:84% EhEh//Ed;Ed; Póvoa Póvoa et al. et al. (2000) PA: 28,99% (2000) PA: 28,99% EhEh;; BenetonBeneton (2003) AM: 21,50% (2003) AM: 21,50% EhEh//EdEd;; Araújo&Fernández (2005) AM:13,3% Araújo&Fernández (2005) AM:13,3% EhEh//Ed.Ed. Silva Silva et al.et al. (2005) PA:29,35% (2005) PA:29,35% Eh.Eh.

No ParáNo Pará: Colite necrotizante & AHA: Colite necrotizante & AHA

TratamentoTratamentoMetronidazol;Metronidazol;Secnidazol;Secnidazol;Teclozan;Teclozan;Cloroquina (Cloroquina (extra-intestinal)extra-intestinal);;Tetraciclina (Tetraciclina (extra-intestinal)extra-intestinal);;Emetina (extra-intestinal).Emetina (extra-intestinal).

Amebas Comensais

Não são patogênicas;Não necessita tratamento;Mesmo risco de contaminação com

patogênicas.

Entamoeba coli

Loesh: 1875;Vive no intestino grosso sem provocar

danos;Trofozoíto: 20 – 50 m;Cisto: 15 – 20 m com até 8 núcleos,

corpos cromatóides finos (palitos).

Entamoeba gingivalis

Gross: 1849;Encontrada no tártaro dentários,

gengivites;Patogênica?Trofozoítos: 5 – 30 m;Não produz cistos;Baixa higiene bucal: 75% prevalência;Beijos, talheres etc.

Iodameba butschlii

Prowazek: 1911;Cisto/ Trofozoítos: 10 – 15 m;Um núcleo e um vacúolo de glicogênio

característico;Vive no ceco e colo humano;Não patogênica.

Endolimax nana

Wenyon & O´coonor: 1917;Menor ameba encontrada no homem;Trofozoíto: 10 – 12 m;Cisto: 8 m;Contem 4 núcleos pequenos;Vive no cólon humano.

Blastocystis hominis

Alexeief: 1911;Era considerado como “levedura”;Diarréia, constipação, fraqueza

(patogênico?);Trofozoíto: 10 – 15 m, com vacúolo

central que separa os dois núcleos;Cistos: 4 – 10 m, com vacúolo e dois

núcleos;Vive no intestino grosso.

Balantidium coli

IntroduçãoIntroduçãoBalantidium coli:Balantidium coli: Malmsten, 1857/ Malmsten, 1857/

Stein, 1863;Stein, 1863;Maior Protozoário e único ciliado que Maior Protozoário e único ciliado que

parasita o homem;parasita o homem;Distribuição Cosmopolita;Distribuição Cosmopolita;

IntroduçãoIntrodução

Casos humanos raros (presença de Casos humanos raros (presença de suínos infectados); suínos infectados);

Porco, Chipanzé, vários macacos Porco, Chipanzé, vários macacos raramente em cães, ratos e cobaias.raramente em cães, ratos e cobaias.

MorfologiaMorfologia

EsféricoEsférico 40-60mm40-60mm 2 núcleos: macro e 2 núcleos: macro e

micronúcleomicronúcleo Vacúolos Vacúolos

digestivosdigestivos Parede LisaParede Lisa

Apresenta o corpo Apresenta o corpo recoberto de cíliosrecoberto de cílios

60-100mm x 50-80mm60-100mm x 50-80mm CitóstomaCitóstoma 2 núcleos: macro e 2 núcleos: macro e

micronúcleomicronúcleo Vacúolos digestivosVacúolos digestivos

MorfologiaMorfologia

Fonte: http://www.dpd.cdc.gov/DPDx/HTML/Balantidiasis.htm

Ciclo BiológicoCiclo Biológico

Patogenia e SintomatologiaPatogenia e SintomatologiaForma assintomática intestinal (50-

70%). Formas sintomáticas:

Lesão na mucosa do colo e/ou ceco Hialuronidase Necroses localizadas Úlceras

Fonte: http://www.dpd.cdc.gov/DPDx/HTML/Balantidiasis.htm

Patogenia e SintomatologiaPatogenia e Sintomatologia1.1. Forma crônica & aguda sintomática:Forma crônica & aguda sintomática: Diarréia, dor abdominal, anorexia, Diarréia, dor abdominal, anorexia,

fraqueza e febre;fraqueza e febre; Nas formas mais graves, além de Nas formas mais graves, além de

evacuações mucossanguinolentas evacuações mucossanguinolentas pode haver hemorragias intestinais, pode haver hemorragias intestinais, desidratação e óbito;desidratação e óbito;

Extra-intestinal: Rara Extra-intestinal: Rara (imunodeprimidos).(imunodeprimidos).

Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial Parasitológico:Parasitológico:

Fezes formadas Cistos (raros)Fezes formadas Cistos (raros) Fezes diarréicas TrofozoítosFezes diarréicas Trofozoítos

HistopatológicoHistopatológico:: Detecção de trofozoítos em tecidos coletados

durante endoscopia.

Difícil de ser feito(sintomas semelhantes)Difícil de ser feito(sintomas semelhantes)Diagnóstico ClinicoDiagnóstico Clinico

TratamentoTratamentoDieta Láctea (Amido);Dieta Láctea (Amido);Metronidazol;Metronidazol;Tetraciclina.Tetraciclina.

EpidemiologiaEpidemiologia Distribuição Mundial Suínos;Distribuição Mundial Suínos;Tratadores, criadores, abatedores..Tratadores, criadores, abatedores..