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Plantas do tubo de ensaio ao luar Bárbara Ribeiro, Beatriz Almeida, Miriam Pereira, Sara Ribeiro, Patrícia Figueiredo, Inês Ferreira, Diego Vazquez, Sérgio Pereira, Filomena Gomes CERNAS, Escola Superior Agrária de Coimbra, ESAC/IPC, Bencanta 3040-316 Coimbra, Portugal Introdução Introdução A multiplicação multiplicação in in vitro vitro de de várias várias plantas plantas é uma uma técnica técnica conhecida conhecida que que permite permite a propagação propagação vegetativa vegetativa de de plantas plantas de de cruzamento cruzamento entre entre várias várias espécies espécies e de de plantas plantas seleccionadas seleccionadas pela pela qualidade qualidade do do fruto fruto e o nível nível de de produção produção. Dentro Dentro das das plantas plantas produzidas produzidas na na Agrária Agrária através através desta desta técnica técnica encontramos encontramos a oliveira, oliveira, o castanheiro castanheiro e o medronheiro, medronheiro, sendo sendo que que no no caso caso específico específico do do estágio, estágio, a planta planta multiplicada multiplicada foi foi o medronheiro medronheiro devido devido às às suas suas diversas diversas utilizações utilizações e escassez escassez no no mercado mercado. Etapas na produção de medronheiros Etapas na produção de medronheiros por micropropagação por micropropagação Após Após uma uma selecção selecção de de modo modo a garantir garantir uma uma variabilidade variabilidade genética genética dos dos medronheiros, medronheiros, são são cortados cortados alguns alguns ramos ramos de de arbustos arbustos seleccionados seleccionados por por produtores produtores dos dos mesmos mesmos introduzindo introduzindo-se se de de seguida seguida num num liquido liquido desinfectante, desinfectante, fungicida fungicida (Fig (Fig. 1a) a). Passado Passado algum algum tempo tempo os os ramos ramos são são retirados retirados do do líquido líquido sendo sendo que que posteriormente posteriormente as as suas suas extremidades extremidades superiores superiores são são banhadas banhadas com com parafina, parafina, garantindo garantindo assim assim a inibição inibição da da desidratação desidratação do do ramo ramo (Fig (Fig. 1b) b). Para Para além além da da regulação regulação das das condições condições de de humidade, humidade, o controlo controlo da da luminosidade luminosidade e da da temperatura temperatura também também é necessário necessário para para o desenvolvimento desenvolvimento dos dos gomos gomos dormentes dormentes (Fig (Fig. 1 c) c). Torna Torna-se se necessário necessário a preparação preparação dos dos meios meios de de cultura cultura que que contêm contêm substâncias substâncias necessárias necessárias ao ao crescimento crescimento da da planta planta (Fig (Fig. 2a e 2b) b). Figura Figura 1 – Preparação Preparação do do material material vegetal vegetal: a – desinfecção desinfecção com com fungicida fungicida; b - tratamento tratamento da da extremidade extremidade com com parafina parafina e c – colocação colocação de de um um saco saco para para aumentar aumentar a humidade humidade. a c b a b c Estágio 'As plantas desde o tubo de ensaio até ao Luar' que decorreu de 09 Estágio 'As plantas desde o tubo de ensaio até ao Luar' que decorreu de 09-07 07-2012 a 13 2012 a 13-07 07-2012, na ESAC / CERNAS, integrado no 2012, na ESAC / CERNAS, integrado no programa Ciência Viva no Laboratório programa Ciência Viva no Laboratório - Ocupação Científica de Jovens nas Férias Ocupação Científica de Jovens nas Férias 2b) b). Na Na câmara câmara de de crescimento crescimento é necessário necessário proceder proceder à multiplicação multiplicação das das culturas culturas para para novos novos meios meios de de cultura cultura (Fig (Fig. 2c) c). A manipulação manipulação das das culturas culturas é realizada realizada na na câmra câmra de de fluxo fluxo laminar laminar em em condições condições assépticas assépticas (Fig (Fig. 3). Após Após a multiplicação multiplicação procede procede-se se ao ao enraizamento enraizamento e aclimatização aclimatização das das plântulas plântulas micropropagadas micropropagadas para para um um substrato substrato inerte inerte (perlite) (perlite) para para contentores contentores que que mantêm mantêm numa numa primeira primeira fase fase uma uma humidade humidade relativa relativa elevada elevada (Fig (Fig. 4). CONCLUSÕES CONCLUSÕES O estágio estágio “As “As plantas plantas desde desde o tubo tubo de de ensaio ensaio ao ao luar” luar” permitiu permitiu-nos nos tomar tomar conhecimento conhecimento de de todo todo o processo processo de de produção produção de de medronheiro medronheiro. Tendo Tendo-nos nos auxiliado auxiliado no no esclarecimento esclarecimento de de algumas algumas dúvidas dúvidas relativas relativas a perspectivas perspectivas futuras futuras a nível nível superior superior. E também também nos nos permitiu permitiu conhecer conhecer o mundo mundo da da investigação investigação. Figura Figura 4 – Processo Processo de de aclimatização aclimatização: a – suporte suporte com com plântulas plântulas a aclimatizar aclimatizar; b e c – remoção remoção da da plântula plântula do do tubo tubo de de ensaio ensaio; d – processo processo de de lavagem lavagem e desinfecção desinfecção; e – contentor contentor com com estacas estacas após após indução indução de de enraizamento enraizamento; f – colocação colocação de de plântulas plântulas enraizadas enraizadas em em contentor contentor Figura Figura 2 – Preparação Preparação dos dos meios meios de de cultura cultura: a – esterilização esterilização na na autoclave autoclave; b preparação preparação para para transporte transporte e c câmara câmara de de crescimento crescimento, após após a repicagem repicagem de de culturas culturas. Figura Figura 3 – Repicagem Repicagem de de culturas culturas de de diferentes diferentes clones clones para para novos novos meios meios de de cultura cultura. Manipulação Manipulação em em condições condições assépticas assépticas a f e d c b

Plantas do tubo de ensaio ao luar - Ciência Viva - Plantas desde o...Estágio 'As plantas desde o tubo de ensaio até ao Luar' que decorreu de 09reu de 09--07-07 -2012 a 13 2012 a

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Plantas do tubo de ensaio ao luar

Bárbara Ribeiro, Beatriz Almeida, Miriam Pereira, Sara Ribeiro,Patrícia Figueiredo, Inês Ferreira, Diego Vazquez, Sérgio Pereira, Filomena GomesCERNAS, Escola Superior Agrária de Coimbra, ESAC/IPC, Bencanta 3040-316 Coimbra, Portugal

IntroduçãoIntrodução

AA multiplicaçãomultiplicação inin vitrovitro dede váriasvárias plantasplantas éé umauma técnicatécnica conhecidaconhecida queque permitepermite aa propagaçãopropagação vegetativavegetativa dede plantasplantas dede cruzamentocruzamentoentreentre váriasvárias espéciesespécies ee dede plantasplantas seleccionadasseleccionadas pelapela qualidadequalidade dodo frutofruto ee oo nívelnível dede produçãoprodução..

DentroDentro dasdas plantasplantas produzidasproduzidas nana AgráriaAgrária atravésatravés destadesta técnicatécnica encontramosencontramos aa oliveira,oliveira, oo castanheirocastanheiro ee oo medronheiro,medronheiro, sendosendo queque nonocasocaso específicoespecífico dodo estágio,estágio, aa plantaplanta multiplicadamultiplicada foifoi oo medronheiromedronheiro devidodevido àsàs suassuas diversasdiversas utilizaçõesutilizações ee escassezescassez nono mercadomercado..

Etapas na produção de medronheirosEtapas na produção de medronheirospor micropropagaçãopor micropropagação

••ApósApós umauma selecçãoselecção dede modomodo aa garantirgarantir umauma variabilidadevariabilidadegenéticagenética dosdos medronheiros,medronheiros, sãosão cortadoscortados algunsalguns ramosramos dede arbustosarbustosseleccionadosseleccionados porpor produtoresprodutores dosdos mesmosmesmos introduzindointroduzindo--sese dedeseguidaseguida numnum liquidoliquido desinfectante,desinfectante, fungicidafungicida (Fig(Fig.. 11a)a)..

••PassadoPassado algumalgum tempotempo osos ramosramos sãosão retiradosretirados dodo líquidolíquido sendosendo quequeposteriormenteposteriormente asas suassuas extremidadesextremidades superioressuperiores sãosão banhadasbanhadas comcomparafina,parafina, garantindogarantindo assimassim aa inibiçãoinibição dada desidrataçãodesidratação dodo ramoramo(Fig(Fig.. 11b)b)..

••ParaPara alémalém dada regulaçãoregulação dasdas condiçõescondições dede humidade,humidade, oo controlocontrolo dadaluminosidadeluminosidade ee dada temperaturatemperatura tambémtambém éé necessárionecessário parapara oodesenvolvimentodesenvolvimento dosdos gomosgomos dormentesdormentes (Fig(Fig.. 11 c)c)..

••TornaTorna--sese necessárionecessário aa preparaçãopreparação dosdos meiosmeios dede culturacultura quequecontêmcontêm substânciassubstâncias necessáriasnecessárias aoao crescimentocrescimento dada plantaplanta (Fig(Fig.. 22aa ee22b)b)..

FiguraFigura 11 –– PreparaçãoPreparação dodo materialmaterial vegetalvegetal:: aa –– desinfecçãodesinfecção comcom fungicidafungicida;;bb -- tratamentotratamento dada extremidadeextremidade comcom parafinaparafina ee cc –– colocaçãocolocação dede umum sacosacoparapara aumentaraumentar aa humidadehumidade..

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Estágio 'As plantas desde o tubo de ensaio até ao Luar' que decorreu de 09Estágio 'As plantas desde o tubo de ensaio até ao Luar' que decorreu de 09--0707--2012 a 132012 a 13--0707--2012, na ESAC / CERNAS, integrado no 2012, na ESAC / CERNAS, integrado no programa Ciência Viva no Laboratório programa Ciência Viva no Laboratório -- Ocupação Científica de Jovens nas FériasOcupação Científica de Jovens nas Férias

22b)b)..

••NaNa câmaracâmara dede crescimentocrescimento éé necessárionecessário procederproceder àà multiplicaçãomultiplicaçãodasdas culturasculturas parapara novosnovos meiosmeios dede culturacultura (Fig(Fig.. 22c)c)..

•• AA manipulaçãomanipulação dasdas culturasculturas éé realizadarealizada nana câmracâmra dede fluxofluxolaminarlaminar emem condiçõescondições assépticasassépticas (Fig(Fig.. 33))..

•• ApósApós aa multiplicaçãomultiplicação procedeprocede--sese aoao enraizamentoenraizamento eeaclimatizaçãoaclimatização dasdas plântulasplântulas micropropagadasmicropropagadas parapara umum substratosubstratoinerteinerte (perlite)(perlite) parapara contentorescontentores queque mantêmmantêm numanuma primeiraprimeira fasefaseumauma humidadehumidade relativarelativa elevadaelevada (Fig(Fig.. 44))..

CONCLUSÕESCONCLUSÕESOO estágioestágio “As“As plantasplantas desdedesde oo tubotubo dede ensaioensaio aoao luar”luar” permitiupermitiu--nosnos tomartomar conhecimentoconhecimento dede todotodo oo processoprocesso dede produçãoprodução dede medronheiromedronheiro.. TendoTendo--nosnos auxiliadoauxiliado nonoesclarecimentoesclarecimento dede algumasalgumas dúvidasdúvidas relativasrelativas aa perspectivasperspectivas futurasfuturas aa nívelnível superiorsuperior.. EE tambémtambém nosnos permitiupermitiu conhecerconhecer oo mundomundo dada investigaçãoinvestigação..

FiguraFigura 44 –– ProcessoProcesso dede aclimatizaçãoaclimatização:: aa –– suportesuporte comcom plântulasplântulas aa aclimatizaraclimatizar;; bb ee cc –– remoçãoremoção dada plântulaplântula dodo tubotubo dede ensaioensaio;; dd –– processoprocesso dede lavagemlavagem ee desinfecçãodesinfecção;; ee –– contentorcontentor comcom estacasestacas apósapós induçãoindução dedeenraizamentoenraizamento;; ff –– colocaçãocolocação dede plântulasplântulas enraizadasenraizadas emem contentorcontentor

FiguraFigura 22 –– PreparaçãoPreparação dosdos meiosmeios dede culturacultura:: aa –– esterilizaçãoesterilização nanaautoclaveautoclave;; bb –– preparaçãopreparação parapara transportetransporte ee cc –– câmaracâmara dedecrescimentocrescimento,, apósapós aa repicagemrepicagem dede culturasculturas..

FiguraFigura 33 –– RepicagemRepicagem dede culturasculturas dede diferentesdiferentes clonesclones parapara novosnovos meiosmeios dede culturacultura.. ManipulaçãoManipulação emem condiçõescondiçõesassépticasassépticas

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