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> TECHNOTHROMBIN® TGA é baseado na monitorização da fluorescência gerada pela clivagem do substrato fluorogênico durante o tempo de geração de trombina
A cascata da coagulação é ativada na adi-ção de diferentes concentrações de fator tissular e fosfolípideos
Permite a visualização de diferentes fases da formação do coágulo.
> Lag phase (= tempo do coágulo)Desde a adição do reagente até o início da geração de trombina.
> Slope Taxa de liberação da trombina por minuto:
Velocity Index (nM/s) = Peak thrombin ___________________
Peak time – lag time
> Peak Max [FIIa] formado
> Tempo do Peak
> AUC = ETP (Potencial da trombina endo-gena): quantidade de trabalho que pode ser potencialmente feita pela trombina: Quanto e por quanto tempo isso fica ativado?
> Inativation phase
> Identificação de defeitos na coa-gulação / pacientes trombofílicos em mais detalhes. • Obtem-se o quadro geral da tendên-cia trombótica de pacientes com riscos de trombose ou sangramento. • Mede-se desordens trombóticas adqui-
ridas como no uso de contraceptivos orais • Monitoramento de terapias anticoa-gulantes (por exemplo: warfarin, heparina, drogas anti-plaquetárias).
> Desenvolvimento de drogas anti-trombóticas
> Monitora terapia de pacientes com Hemofilia A e B • Monitoramento de tratamentos com FVIII, FVIIa, FEIBA
> Microparticulas
XI
IX
X V
VIII
APC-PS
α2-MG
Prothrombin Thrombin
Fibrinogen Fibrin
IXa - VIIIa
Platelet-activation
VII/VIIa
TF
ATIII
TFPI
XIa
Xa - Va
PARÂMETROS DE GERAÇÃO DE TROMBINA
PRINCÍPIO DO MÉTODO
Peak Thrombin
Lag Phase
Inactivation phase
time
Thro
mbi
n
Slop
e
APLICAÇÕES CLÍNICAS
Rua Dr. Sardinha, 29 • Santa Rosa Niterói • RJ • CEP: 24240-660 [email protected] www.dpmdiagnostica.com.br
> Para dosagem da geração de trombina utilizando-se o Technotrombin TGA neces-sita-se de um leitor fluorescente equipado com filtros de 360 nm a 460 nm(excitação /emissão) como BioTek® FLx 800TM TC com um software adaptado para TECHNO-THROMBIN® TGA.
> Aplicação são disponíveis para: • BioTek® FLx 800™ TC * • BMG Labtech FLUOstar OPTIMA • Molecular Devices Gemini/SpectraMax • Perkin Elmer® Victor Wallac • TECAN Genios • Thermo Fluoroskan
CEVERON® ALPHA COAGULÔMETRO
MEDIÇÃO QUANTITATIVA DA GERAÇÃO DE TROMBINATECHNOTHROMBIN® TGALEITORAS E SOFTWARES
a l p h a
> Ideal para utilizar o kit Technothrombin® TGA
> A Geração de Trombina é medida com uma especial adaptação, módulo TGA fluorométrico, o qual é colocado sobre o rotor de cuvetas.
> Emissor de UV (360 nm) é coloca-do no módulo.
> Os gráficos do TGA podem ser mostrados por simples
avaliações ou múltiplas comparações.
Rua Dr. Sardinha, 29 • Santa Rosa Niterói • RJ • CEP: 24240-660 [email protected] www.dpmdiagnostica.com.br
Medindo a Tendência TrombofílicaEstados trombofílicos podem ser detectados medindo o TGA em PPP
APLICAÇÕESMICROPARTÍCULAS
Monitoramento da Terapia de Anti-Coagulação
> A determinação da atividade da coagulação das micropar-tículas permite a relação direta com níveis de micropartículas que possam induzir tendências trombóticas.
> As micropartículas geradas durante uma endotexemia são trom-bogênicas e podem ser medidas pelo TGA.
> Todas as formas de anti-coagulação como terapia com heparina,inibidores da trombina ou anti-vitamina k podem ser mo-nitoras com o TGA.
> Quando são utilizados calibradores (AK-Calibrador), o TGA poder ser usado para determinação direta do INR. Há uma alta relação entre valores de INR obtidos com o TGA e outras dosagens utilizando diferentes tipos de tromboplastina, como exemplo, o Thrombotest.
Peak – Trombin – Probabilidade em Trombose Venosa Recorrente
Prob
abili
dade
acu
mul
ativ
a de
reco
rrên
cia
(%)
Anos após ter abandonado a terapia com antagonistas da vitamina K.
0
5
1 2 3 4
10
15
20
25
6,5% (95% CI, 4,0%-8,9%)
< 400nM
Hron G. et al., JAMA, July 26, 2006 – Vol 296, No. 4, 397-402Peak Trombin - Relativo risco de recorrência
Depois do ajuste por idade,sexo, localização da 1ª trombose, duração do uso de anticoagulante oral, FV Leiden e Mutação FII G2021OA
0
0,2
> 400 nM < 400 nM
0,4
0,6
0,8
1
N = 305
N = 609
67%
_
RR
Peak TECHNOTHROMBIN TGA (RC) / INR
R2 = 0,9999R2 = 0,88470
1
2
3
INR Thrombotest
log
nM T
hrom
bin
AK Calibrant patients
Thrombotest
500
450
400
350
300
250
200
150
100
50
0
Micropartículas 106
Tempo (min)
Micropartículas 105
Micropartículas 104
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
Gera
ção
de T
rom
bina
(nM
) 400
300
200
100
0
Tempo (min)10 20 30
Gera
ção
de T
rom
bina
(nM
)
LPS-pre (1X105 MPs)LPS-2h (1X105 MPs)LPS-4h (1X105 MPs)LPS-8h (1X105 MPs)