Projeto I 2015/16 - 1º semestre · 2020-04-25 · Projeto I 2015/16 - 1º semestre: • Tema: Alterações na membrana eritrocitária associadas à anemia da doença renal crónica,

Projeto I 2015/16 - 1º semestre:

• Tema:

Alterações na membrana eritrocitária associadas à anemia da doença renal crónica,

estadio 5

• Orientador(es):

Alice Santos-Silva e Cristina Catarino

• Resumo:

Pré-requisitos: Aprovação às unidades curriculares de Biologia Celular, Bioquímica I,

Bioquímica II e Hematologia

Critérios de seriação dos candidatos:

- experiência como aluno (a) do Núcleo de Investigação da FFUP (experiência em técnicas

de eletroforese)

- melhor média das disciplinas com aprovação até ao momento

- entrevista, se necessário

Resumo do projeto:

A hemodiálise aumenta a longevidade dos doentes renais crónicos terminais, removendo

os produtos finais do metabolismo e o excesso de água. Apesar dos desenvolvimentos

tecnológicos associados ao procedimento de hemodiálise e de apoio médico, nos últimos

anos, a morbidade e a mortalidade destes doentes permanece alta, cerca de 10 a 20 vezes

maior que a encontrada na população em geral. A anemia é uma complicação frequente

associada à doença renal crónica, e deve-se principalmente à redução da produção renal

de eritropoietina.

Existe evidência crescente de que as espécies reativas de oxigénio (ROS) estão envolvidas

na progressão de lesão renal e dos sintomas urémicos. Diversos fatores têm sido descritos

como associados ao desenvolvimento de stress oxidativo em doentes renais terminais em

hemodiálise, nomeadamente uremia, inflamação, alterações no metabolismo do ferro, e

redução dos mecanismos de defesa antioxidantes. Esta redução dos mecanismos

antioxidantes inclui os sistemas enzimáticos eritrocitários, com alterações na concentração

de algumas enzimas, nomeadamente a peroxiredoxina 2 (Prx2). Esta enzima tem um papel

importante na desintoxicação das células em ROS, protegendo-as dos seus efeitos

nefastos.

O desenvolvimento de stress oxidativo no interior do eritrócito favorece a oxidação da

hemoglobina, que se liga ao domínio citoplasmático da banda 3 promovendo a sua

agregação e marcando a célula para a remoção.

O estudo inclui um grupo de 25 doentes em hemodiálise e um grupo de 20 controlos. Estas

amostras são processadas de modo a se obter as frações de citosol e membranas de

eritrócitos.

O objetivo deste trabalho é avaliar alterações na enzima Prx2, envolvida na defesa

antioxidante dos eritrócitos, em doentes renais crónicos em hemodiálise, e a sua relação

com parâmetros hematológicos e inflamatórios, a fim de avaliar a importância do sistema

antioxidante eritrocitário na apresentação e gravidade da anemia destes doentes.

Pretende-se também avaliar lesões oxidativas ao nível da membrana dos eritrócitos,

nomeadamente peroxidação lipídica, hemoglobina ligada à membrana e perfil da proteína

banda 3. O estudo do perfil de banda 3 inclui a separação eletroforética das proteínas da

membrana do eritrócito, “immunoblot” de banda 3 e avaliação por densitometria.


• Tema:

Subprodutos da indústria agroalimentar: caracterização nutricional e viabilidade de

valorização

• Orientador(es):

Beatriz Oliveira e Anabela Costa

• Resumo:

A valorização de subprodutos da indústria agroalimentar permite diminuir o impacto

ambiental e constituir uma oportunidade para a investigação e desenvolvimento de

produtos com valor acrescentado. A adição de ingredientes com potencial antioxidante a

produtos alimentares é um exemplo.

Este projeto tem como objetivo a caracterização um tipo de subproduto e a viabilidade da

sua utilização na indústria alimentar. Pretende-se ainda avaliar extratos obtidos com

diferentes solventes. Os parâmetros a avaliar serão escolhido de acordo com os resultados

obtidos ao longo do estudo.

Pretende-se que o envolvimento do aluno neste projeto reforce as suas competências a

nível analítico, de trabalho de equipa, espírito crítico, capacidade de resolução de

problemas reais e autonomia.


• Tema:

Verificação do cumprimento da legislação na rotulagem de infusões de ervas

• Orientador(es):

Beatriz Oliveira e Filipa Pimentel

• Resumo:

A Camellia sinensis é utilizada na preparação de vários tipos de chás consumidos

mundialmente pelas suas características organoléticas e medicinais. Pelo referido, têm

surgido no mercado variadíssimos tipos de infusões, com e sem a planta do chá. Dada a

grande variedade de misturas de plantas e outro tipo de ingredientes combinados,

considerou-se de grande importância verificar a rotulagem desses produtos.

O projeto que se propões pretende avaliar o cumprimento das leis da rotulagem e da

legislação vigente relativamente a produtos para infusão. Assim será feito um estudo

exaustivo do tipo de rotulagem e os ingredientes referidos. Das informações recolhidas

serão escolhidas algumas amostras para avaliação laboratorial de parâmetros com

importância para o consumidor.

Pretende-se que o aluno adquira competências para fazer/ler um rótulo de um produto

alimentar, bem como adquira espírito crítico, capacidade de resolução de problemas reais

e autonomia nesta área do conhecimento.


• Tema:

Desenvolvimento e caracterização de um gel com subprodutos de Castanea sativa

• Orientador(es):

Beatriz Oliveira e Francisca Rodrigues

• Resumo:

A indústria do processamento da castanha utiliza, principalmente, o fruto para fins

alimentares. Embora sejam gerados muitos subprodutos, a grande maioria não tem

qualquer utilização. A valorização destes resíduos (casca e ouriço) pode conduzir a novos

ingredientes com qualidades biológicas interessantes, visando a sua utilização em diversas

indústrias, como por exemplo a indústria cosmética. Estudos recentes comprovaram o

elevado teor destes extratos em antioxidantes, bem como a sua atividade microbiana.

Com efeito, dadas as imensas propriedades atribuídas a estes resíduos, pretende-se com

este projeto avaliar a sua potencialidade como novo ingrediente cosmético veiculado num

gel, nomeadamente, atividade antioxidante e o perfil fenólico, bem como citotoxicidade

em linhas celulares da pele. Será igualmente determinada a sua estabilidade, bem como

feita a avaliação sensorial por um painel de potenciais consumidores finais.

Este projeto pretende envolver o aluno no ambiente de investigação, potencializando as

suas competências a nível analítico, de trabalho de equipa, espírito crítico, capacidade de

resolução de problemas reais e autonomia.


• Tema:

Aplicação de subprodutos da indústria agroalimentar - efeito na estabilidade nutricional

de alimentos

• Orientador(es):

Beatriz Oliveira e Maria Antónia Nunes

• Resumo:

A valorização de subprodutos da indústria agroalimentar permite diminuir o impacto

ambiental e constituir uma oportunidade para a investigação e desenvolvimento de

produtos com elevado interesse nutricional.

A adição de ingredientes com potencial antioxidante a produtos alimentares é um

exemplo de como é possível obter valor acrescentado utilizando os subprodutos.

Este projeto tem como objetivo avaliar o efeito da adição de extratos de subprodutos na

estabilidade nutricional de um produto alimentar, ao longo do tempo.

Será determinado o teor de compostos fenólicos totais, o perfil fenólico, o perfil de ácidos

gordos e a resistência à oxidação.





• Tema:

Cannabinoid signaling in human placenta: effects of cannabinoids in cytotrophoblast cells

• Orientador(es):

Georgina Correia da Silva

• Resumo:

Cannabinoids (CBs) are active compounds of Cannabis sativa. The most prevalent

psychoactive substance is Δ9-tetrahydrocannabinol (THC), whose effects are achieved

through the activation of specific cannabinoid receptors – CB1 and CB2. Due to its

medicinal properties, or as drugs of abuse, some cannabinoids started to be synthetized

artificially. On the other hand, there are endogenous lipid compounds, called

endocannabinoids (eCBs), that are capable of binding and activate the same cannabinoid

receptors. The major eCBs are anandamide (AEA) and 2-arachidonoylglycerol (2-AG). The

eCBs, their receptors, proteins of transport and the synthesis and degradation enzymes,

represent the endocannabinoid system [1]. Placenta development requires a tight

regulated proliferation, differentiation and apoptosis of cytotrophoblasts, the specialized

placental epithelial cells. Studies in the last few years, including the ones from our group,

have shown that eCBs are implicated in pregnancy events such as implantation and

decidualization [2,3]. However their function during placentation requires further

investigation.

In this project, we intend to study the effects of different cannabinoids in BeWo cells, a

choriocarcinoma cell line and a well-accepted cytotrophoblast cell model. Our preliminary

results indicate that the synthetic cannabinoid WIN-55,212 is able to decrease cell viability.

Cells will be treated with different concentrations of endocannabinoids, THC and synthetic

cannabinoids.. It will be performed assays to access cell viability and proliferation, cell

death and cell morphological analysis. The study of the effects of cannabinoids on

maternal-fetal interface may be relevant to understand the impact of exo- and

endogenous cannabinoids in pregnancy, contributing to the knowledge of cannabinoid

signaling in placenta.

References:

[1] Rapino C, Battista N, Bari M, Maccarrone M.. Endocannabinoids as biomarkers of

human reproduction. Hum Reprod Update. 2014 ;20(4):501-16.

[2] Fonseca BM, Correia-da-Silva G, Teixeira NA The endocannabinoid anandamide induces

apoptosis of rat decidual cells through a mechanism involving ceramide synthesis and p38

MAPK activation. Apoptosis. 2013 ;18(12):1526-35.

[3] Costa MA, Keating E, Fonseca BM, Teixeira NA, Correia-da-Silva G. 2-

Arachidonoylglycerol impairs human cytotrophoblast cells syncytialization: influence of

endocannabinoid signalling in placental development. Mol Cell Endocrinol. 2015;399:386-

94.


• Tema:

Estudo in vitro da citotoxicidade e captação intracelular de nanopartículas metálicas com

potencial interesse para aplicações biomédicas e na indústria alimentar

• Orientador(es):

Helena Carmo e Diana Dias da Silva

• Resumo:


• Média (50 %)

• Entrevista (50 %)

Resumo do projeto:

Para garantir a utilização segura de nanopartículas, em particular de nanopartículas de

ouro no campo biomédico, tem surgido a necessidade de caracterizar o seu perfil

toxicológico. No nosso laboratório conduzimos diversos estudos de citotoxicidade de

nanopartículas de ouro, cujos revestimentos e forma foram modificados com vista a

optimizar a sua biocompatibilidade. A capacidade de captação intracelular e a

subsequente localização subcelular destas partículas têm sido também motivo de

interesse desta linha de investigação do Laboratório de Toxicologia. Havendo igualmente

referência ao uso deste tipo de nanopartículas para fins alimentares é também muito

importante avaliar a capacidade de absorção ao nível intestinal podendo, para esse efeito,

ser utilizado um ensaio in vitro realizado com uma linha celular que mimetiza o epitélio

intestinal humano, as células Caco-2. Assim, os objectivos do projecto presentemente

proposto são (i) a caracterização in vitro da citotoxicidade de nanopartículas de ouro com

diferentes formas, tamanhos e revestimentos, (ii) a avaliação da capacidade de

internalização destas partículas através da medição dos níveis intracelulares de ouro após

exposição a diferentes concentrações de nanopartículas, e (iii) a avaliação in vitro da

capacidade de absorção ao nível intestinal utilizando como modelo a linha celular Caco-2.

No decurso do presente projecto o estudante deverá desenvolver:

• A aprendizagem das metodologias de cultura celular (técnica asséptica e manutenção da

cultura celular).

• A aprendizagem das metodologias para a avaliação in vitro da citotoxicidade e

mecanismos subjacentes (avaliação da mortalidade celular e quantificação de marcadores

de stress oxidativo). As metodologias empregues incluem a microscopia óptica e diversos

métodos espectrofotométricos para as determinações bioquímicas.

• A aprendizagem da metodologia analítica de espectrofotometria de absorção atómica

com atomização electrotérmica para a quantificação do ouro nas amostras obtidas após

exposição.

• A aprendizagem da metodologia para os estudos in vitro de biodisponibilidade

recorrendo à incubação da linha celular Caco-2 em sistemas de cultura transwell

adequados à realização deste ensaio.

• A aprendizagem das metodologias de tratamento dos dados analíticos obtidos e

respectiva análise estatística.


• Tema:

Estudo da citotoxicidade e transporte de novos substratos da glicoproteína P com

potencial aplicação terapêutica

• Orientador(es):

Helena Carmo e Renata Silva

• Resumo:


• Média (50 %)

• Entrevista (50 %)

Resumo do projecto:

Os transportadores da família ABC (glicoproteína P, MRP, BCRP) actuam como bombas de

efluxo que limitam a absorção e/ou distribuição de compostos endógenos e de

xenobióticos potencialmente tóxicos. Por exemplo, tem-se tornado evidente que a

diminuição do efluxo do péptido β-amilóide mediado pela glicoproteína P, ao nível da

barreira hematoencefálica, tem impacto no início e progressão da doença de Alzheimer.

Por outro lado, a possibilidade de aumentar o efluxo de compostos causadores de

intoxicação pode ser uma via antidotal eficiente e muito promissora. Assim, o objectivo

desta linha de investigação no Laboratório de Toxicologia é a caracterização da acção de

novos compostos de estrutura (tio)xantónica, sintetizados em colaboração com o

Laboratório de Química Orgânica, quanto à sua capacidade para induzir e/ou activar a

glicoproteína P. Para este efeito, após a caracterização do seu perfil de citotoxicidade in

vitro em modelos celulares relevantes será estudada a sua capacidade de indução e

activação da glicoproteína P.


• Tema:

Criação e caracterização de linhas celulares tumorais resistentes a fármacos

• Orientador(es):

Helena Vasconcelos Meehan e Cristina Xavier

• Resumo:

Critérios de seriação dos candidatos: 1) Experiência prévia em cultura celular; 2)

Entrevista.

Resumo do projeto:

A resistência à terapia antineoplásica é muito frequente nos doentes com cancro, sendo

necessária a identificação dos possíveis mecanismos de resistência aos diferentes

fármacos. Uma das formas de estudar mecanismos de resistência a fármacos

antineoplásicos consiste na comparação de pares isogénicos de linhas celulares tumorais

sensíveis e resistentes a fármacos. Existem várias abordagens para estabelecer pares

isogénicos de linhas celulares sensíveis e resistentes a fármacos. Durante este processo de

criação de linhas celulares tumorais resistentes, são frequentemente observadas

alterações de fenótipo celular.

Este projeto tem três objetivos: i) tentar estabelecer pares isogénicos de linhas celulares

tumorais sensíveis e resistentes a fármacos, usando vários modelos de linhas celulares

tumorais e diferentes protocolos; ii) estudar alterações de fenótipo observadas ao longo

desse processo; iii) caracterizar as diferenças de expressão em proteínas apoptóticas e

bombas de efluxo de fármacos, num par de linhas celulares resistentes e sensíveis a

fármacos já existente no nosso laboratório.

Referências:

McDermott et al. (2014). Frontiers in Oncology 4: article 40.


• Tema:

Desenvolvimento de nanosensores para monitorização de moléculas de relevância

biológica

• Orientador(es):

João Luís Machado dos Santos

• Resumo:

O objetivo deste projeto é desenvolver sensores matriciais baseados na imobilização de

nanocristais ou pontos quânticos (QDs) em suportes sólidos para monitorização de

moléculas biologicamente relevantes. A proposta permitirá também combinar a tecnologia

de QDs com as metodologias analíticas de micro-fluxo, com vista a monitorização

fluorimétrica da interação de superfície entre os QDs e as moléculas alvo.

Estão previstas tarefas que incluem:

- Aquisição de conhecimentos básicos sobre a tecnologia de pontos quânticos, incluindo a

sua síntese e caracterização físico-química, e sobre os sistemas de micro-fluxo. O aluno

adquirirá competências várias no domínio da nanotecnologia, nomeadamente sobre a

síntese aquosa de nanocristais, e também ao nível da utilização de distintas técnicas

analíticas como a Espectrofotometria UV/Vis, Espectrofluorimetria, Quimioluminometria,

Dispersão Dinâmica de Radiação Electromagnética, ICP-AES e FT-IR, assim como conceitos

de automação e de utilização de sistemas de fluxo Multi-impulsão e de Interface de

Reação Única.

- Implementação de procedimentos de imobilização de pontos quânticos em matrizes

sólidas (vidro ativado, microsílica, papel e polímeros) com recursos a distintas técnicas,

nomeadamente através de tecnologia sol-gel e formação de ligações covalentes.

- O trabalho abrangerá também a avaliação do potencial analítico de sensores,

nomeadamente para implementação de sistemas de análise point-of-care, que possam ser

aplicados na monitorização de moléculas que funcionem como biomarcadores de

patologias associadas ao envelhecimento, ou importantes em termos de Química Verde.


• Tema:

Desenvolvimento, caracterização e avaliação da eficácia de Nanodispersões contendo

colagénio

• Orientador(es):

Maria Helena Amaral

• Resumo:

Pré-requisitos: Aprovação nas UC de Tecnologia Farmacêutica II e III e Dermofarmácia e

Cosmética

Critérios de seriação dos candidatos: Experiência na área em que se insere o projeto

Resumo do projecto:

O envelhecimento da pele é um processo dinâmico, acelerado por diversos fatores

externos como a exposição à radiação solar e a utilização de detergentes. O colagénio é

uma proteína de importância fundamental na constituição da matriz extracelular do tecido

conjuntivo da derme, conferindo firmeza e resistência à pele. A utilização de produtos

cosméticos contendo colagénio protege a pele contra os efeitos indesejáveis dos fatores

do meio externo. Este trabalho tem como objetivo o desenvolvimento de nanodispersões

contendo colagénio, a sua caracterização (avaliação dos tamanhos de partícula, pH e

eficácia de encapsulação) e avaliação da estabilidade ao longo do tempo de

armazenamento a diferentes temperaturas. Posteriormente, as nanodispersões serão

incorporadas num sistema semissólido o qual será caracterizado em termos de textura,

reologia, estabilidade acelerada por centrifugação e eficácia cosmetológica (através da

realização de ensaios de biometria).


• Tema:

Estudo comparativo formulações hidratantes contendo promotores de permeação

cutânea

• Orientador(es):

Maria Helena Amaral

• Resumo:

Pré-requisitos: Aprovação nas UC de Tecnologia Farmacêutica II e III e Dermofarmácia e

Cosmética

Critérios de seriação dos candidatos: Experiência na área em que se insere o projeto

Resumo do projecto:

A elevada impedância elétrica associada ao estrato córneo pode ser drasticamente

reduzida por hidratação da pele, o que é normalmente conseguido pela utilização de

agentes humectantes, agentes oclusivos e promotores de penetração cutânea. A ureia

promove a hidratação cutânea e forma canais de difusão hidrofílicos, facilitando a

permeação de diversas substâncias através do estrato córneo. Neste trabalho, serão

desenvolvidas várias formulações contendo ureia e propilenoglicol como agentes

potenciadores da penetração cutânea. As formulações desenvolvidas serão caracterizadas

e posteriormente serão aplicadas no antebraço de voluntários humanos saudáveis com o

objetivo de avaliar o respetivo efeito hidratante por corneometria, sendo também avaliada

a perda transepidérmica da água.


• Tema:

Desenvolvimento, caracterização tecnológica e otimização de supositórios

• Orientador(es):

Marilene Estanqueiro e Paulo Costa

• Resumo:

Pré-requisitos: Frequência e aprovação às UCs Tecnologia Farmacêutica I, II e III

Critérios de seriação dos candidatos: Classificação obtida nas UCs supracitadas; média

geral; motivação para desenvolver o presente trabalho.

Resumo do projeto: A via oral é a via de administração preferencial para a maior parte dos

medicamentos existentes no mercado. No entanto, em situações de obstrução desta via,

como náuseas, vómitos e convulsões, e para populações específicas como a população

pediátrica e geriátrica, a via retal pode constituir uma boa alternativa. Adicionalmente a

via rectal pode também ser vantajosa para fármacos irritantes do trato digestivo, sensíveis

ao meio ácido ou que sofrem extenso efeito de primeira passagem. Neste trabalho

pretende-se investigar a influência de diferentes parâmetros como os excipientes

utilizados, os adjuvantes e a utilização do fármaco como matéria-prima ou a partir de

comprimidos nas características dos supositórios obtidos, incluindo características físicas e

o perfil de libertação do fármaco. Neste trabalho o aluno irá aplicar alguns conhecimentos

já adquiridos nas aulas de Tecnologia Farmacêutica III, assim como empregar novos

métodos para caracterizar os supositórios obtidos e validar o método de doseamento do

fármaco modelo utilizado.


• Tema:

Caracterização da presença de tetrabromobisfenol em leites maternos

• Orientador(es):

Sara Cunha e José Fernandes

• Resumo:

O tetrabromobisfenol (TBBPA)é um composto sintético resultante da bromação do

bisfenol A muito usado em polímeros diversos, nomeadamente em plásticos

policarbonados resistentes ao fogo e em resinas epóxidas usadas em placas electrónicas. A

presença residual de TBBPA no ambiente e em especial a possibilidade de o composto ser

alvo de bioacumulação no organismo humano é particularmente preocupante devido às

suas propriedades de desregulação endócrina. O trabalho proposto consiste em avaliar a

presença de TBBPA em amostras de leite materno no âmbito de um trabalho mais

alargado de pesquisa de desreguladores endócrinos neste tipo de matriz. A cromatografia

líquida associada à espectrometria de massa em tandem (LC-MS/MS) será utilizada como

técnica analítica.


• Tema:

Controlo de qualidade de pão ralado I – avaliação do teor em micotoxinas

• Orientador(es):

Susana Casal e Sara Cunha

• Resumo:

O pão ralado é um produto processado largamente vendido em padarias sem qualquer

rotulagem ou controlo. Dando sequência a um trabalho alargado de análise deste produto,

o presente projeto pretende avaliar a sua segurança no que respeita ao teor em

micotoxinas, avaliadas por cromatografia gasosa.

Projeto I 2015/16 - 1º /2º semestre:

• Tema:

Caracterização da presença de fenóis voláteis – 4-etilfenol e 4-etilguaiacol – em vinhos

tintos

• Orientador(es):

José Fernandes e Sara Cunha

• Resumo:

A deterioração organoléptica dos vinhos tintos causada pela formação de etilfenóis

voláteis constitui um sério problema económico, especialmente em vinhos de elevada

qualidade, que requerem longos tempos de maturação em cascos de carvalho. O trabalho

proposto consiste em desenvolver uma nova metodologia analítica baseada na técnica

extractiva de microextracção líquido-líquido dispersiva (DLLME) e na cromatografia gasosa

associada à espectrometria de massa (GC-MS) para a quantificação destas substâncias em

vinho tinto


• Tema:

Caracterização antioxidante de suplementos ayurvédicos (Triphala e seus constituintes)

• Orientador(es):

Beatriz Oliveira e Joana Santos

• Resumo:

A Triphala é uma mistura constituída por 3 frutos (Amalaki, Bibhitaki e Haritaki) muito

usada na medicina ayurvédica. O seu consumo está associado à melhoria da função

imunitária e resistência em geral.

Dadas as imensas propriedades atribuídas a este produto, pretende-se com este projeto

avaliar a sua atividade antioxidante e o perfil fenólico da mistura e dos seus constituintes

individualmente.

Será igualmente determinada a sua composição nutricional e de acordo com os valores

obtidos, o perfil em ácidos gordos, aminoácidos e vitamina E.





• Tema:

Avaliação de modelos biomembranares na descoberta de fármacos

• Orientador(es):

Carlos Afonso e José F. Xavier Soares

• Resumo:

A lipofilicidade dos fármacos afeta a farmacocinética e a farmacodinâmica. Um dos

parâmetros mais importantes da lipofilicidade é a possibilidade de previsão da permeação

passiva de um fármaco.

Geralmente, a lipofilicidade é expressa como log P. O log P de uma substância é o

logaritmo do coeficiente de partição entre o n-octanol e a água.

Apesar de muito utilizado, o sistema de partição n-octanol/água é claramente insuficiente,

uma vez que não leva em conta várias particularidades das membranas biológicas. As

interações dos fármacos com as membranas biológicas são mais complexas do que as

avaliadas por este modelo simplista.

Ao longo dos últimos anos, os modelos de biomembranas, tais como lipossomas e micelas,

surgiram como alternativas para o sistema de partição n-octanol/água na avaliação da

lipofilicidade. O coeficiente de partição no sistema biomembrana / tampão (log Kp) é

representa uma descrição mais realista da distribuição dos fármacos entre a fase aquosa e

lipídica da membrana. O arranjo molecular dos modelos biomembranares é semelhante ao

das membranas naturais. Além disso, os modelos biomembranares permitem avaliar o

comportamento electroestático durante a partição (entre o fármaco e a membrana). Ainda

em relação a estes modelos biomembranares, os lipossomas mimetizam melhor a

bicamada fosfolipídica das membranas biológicas, mas as micelas, não sendo tão

ilustrativas, são mais fáceis de preparar.

Até hoje, nenhum estudo sistemático foi realizado no sentido de comparar lipossomas e

micelas de forma a avaliar, usando as mesmas moléculas, as verdadeiras diferenças

encontradas nos dois modelos.

A OCDE apresenta valores padrão de log P (octanol-água) para 60 moléculas.

O objetivo deste trabalho é:

i. Determinar por espectrofotometria derivativa e usando lipossomas e micelas/tampão, os

valores de log Kp para moléculas padrão da OCDE com valores de log P entre 3 e 5, valores

habitualmente encontrados para os fármacos comercializados.

ii. Determinar por espectrofotometria derivativa e usando lipossomas e micelas/tampão,

os valores de log Kp para uma pequena biblioteca de pequenas moléculas anticancerígenas

(comercializadas e da biblioteca de substâncias do LQOF).


• Tema:

Impacto da cirurgia bariátrica nos níveis de DNA livre circulante em doentes com

obesidade mórbida

• Orientador(es):

Cristina Catarino e Alice Santos-Silva

• Resumo:

Pré-requisitos: Aprovação às unidades curriculares de Biologia Celular, Bioquímica I,

Bioquímica II


- experiência como aluno (a) do Núcleo de Investigação da FFUP

- melhor média das disciplinas com aprovação até ao momento

- entrevista, se necessário

Resumo do projeto:

O trabalho a desenvolver tem como objetivo a avaliação do efeito da cirurgia bariátrica

nos níveis de DNA livre circulante (cfDNA) bem como de alguns marcadores inflamatórios

em doentes com obesidade mórbida.

O estudo consiste no recrutamento de doentes com obesidade mórbida (T=1), submetidos

a cirurgia bariátrica e nova avaliação 12 meses após a cirurgia (T=2). A avaliação clínica dos

doentes será realizada por médicos do Hospital da Prelada. O estudo analítico

complementar será realizado por um estudante da FFUP, e incluirá a quantificação no soro

dos níveis de DNA circulante bem como de alguns marcadores inflamatórios.

Pretende-se que o estudante aprenda a efetuar pesquisa bibliográfica e interpretar

estudos publicados em revistas científicas; aprenda a elaborar um plano de trabalho e a

conduzir o processamento laboratorial de amostras de sangue; aprenda a efetuar

tratamento de dados e sua interpretação e desenvolva capacidade de expressão escrita na

redação de um relatório final.


• Tema:

Deteção de colonização intestinal de bovinos por bactérias resistentes aos antibióticos

• Orientador(es):

Helena Maria Neto Ferreira

• Resumo:

A produção animal pode condicionar a selecção de bactérias resistentes aos antibióticos

na flora intestinal dos animais. Apesar da restrição do uso de antibióticos como

promotores de crescimento na produção animal na Europa, a sua utilização com fins

profiláticos e terapêuticos, parece condicionar a selecção de bactérias resistentes na flora

comensal, constituindo um risco em termos de contaminação ambiental e disseminação na

cadeia alimentar, devido a contaminação acidental das carcaças. Desta forma, este pode

ser um elo relevante na disseminação da resistência aos antibióticos.

É objectivo deste projecto, a detecção e caracterização de isolados de coliformes

resistentes a cefalosporinas de terceira geração na flora fecal de bovinos do Norte do País.

O estudo permitirá o contacto com metodologias fenotípicas e moleculares na área da

resistência aos antibióticos.


• Tema:

Deteção de colonização intestinal por bactérias resistentes aos antibióticos em crianças

• Orientador(es):

Helena Maria Neto Ferreira

• Resumo:

A colonização intestinal com bactérias resistentes aos antibióticos, em humanos saudáveis,

é uma realidade pouco documentada no nosso País. Esta realidade quando aplicada à

população infantil é ainda menos conhecida no nosso País.

A toma frequente de antibióticos na infância pode condicionar a selecção de bactérias

resistentes aos antibióticos na flora intestinal deste nicho particular de população.

É objectivo deste projecto, a detecção e caracterização de isolados de bacilos de Gram

negativo multirresistentes aos antibióticos, particularmente enterobacteriáceas

resistentes a oxiimino-beta-lactâmicos, na flora intestinal de crianças do Norte do País.

Para o efeito, o estudante terá contacto com técnicas de avaliação fenotípica e molecular

da resistência aos antibióticos.


• Tema:

Estudo do mecanismo de ação de extratos de erva-cidreira na inibição do crescimento de

linhas celulares tumorais humanas

• Orientador(es):

Helena S. Vasconcelos Meehan e Isabel C.F.R. Ferreira

• Resumo:


Entrevista.

Resumo do projeto:

A erva cidreira (Melissa officinalis L.) tem sido recentemente descrita como tendo

propriedades inibidoras de crescimento de linhas celulares tumorais. Os nossos estudos

preliminares confirmaram essa atividade. No entanto, os mecanismos de ação envolvidos

não foram investigados.

O objetivo deste projeto é estudar o mecanismo de ação de extratos aquosos de erva-

cidreira (Melissa officinalis L.), nomeadamente o efeito no ciclo celular, na proliferação e

na apoptose celular.

Metodologias relevantes:

- Cultura celular de linhas celulares tumorais humanas;

- Análise do efeito inibidor da proliferação celular, pelo ensaio de incorporação de BrdU;

- Análise do perfil do ciclo celular por citometria de fluxo;

- Análise dos níveis de morte celular após marcação com Anexina V/PI, por citometria de

fluxo.

Referências:

1) Encalada MA et al (2011). Plant Foods Hum Nutr. 66:328-334.

2) de Sousa AC et al. (2004). J Pharm Pharmacol. 56:677-81.

3) Queiroz RM et al. Cancer Invest. 32:226-35.


• Tema:

Estudo da atividade antitumoral de extratos hidro-alcoólicos de milefólio na inibição do

crescimento de linhas celulares tumorais humanas

• Orientador(es):

Helena Vasconcelos Meehan e Cristina Xavier

• Resumo:


Entrevista.

Resumo do projeto:

O milefólio (Achillea millefolium L.) tem conhecidas propriedades medicinais tais como

antidiarreico, antiespasmódico, antisético, digestivo e vasodilatador. Experiências em

animais demonstraram que é bem tolerado. Adicionalmente, alguns estudos têm sugerido

que extratos metanólicos, etanólicos e aquosos desta planta poderão demonstrar

atividade antitumoral (1,2).

O objetivo deste projeto é verificar o potencial antitumoral de extratos hidro-alcoólicos de

milefólio (Achillea millefolium L.), preparados utilizando diferentes proporções de

etanol/metanol e água.

Metodologias relevantes:

- Cultura celular de linhas celulares tumorais humanas;

- Ensaios de “screening” de atividade antitumoral (MTT e/ou SRB);

- Ensaios de morte celular programada (TUNEL);

- Ensaios de proliferação celular (BrdU e “colony forming assay”)

Referências:

(1) Li Y., et al. (2011). Biosci Biotechnol Biochem 75:1554-1556.

(2) Dias M.I., et al. (2013). Food Chem 141: 4152–4160.


• Tema:

Síntese do flavonoide CPX e seus derivados com atividade antitumoral

• Orientador(es):

Honorina Maria de Matos Cidade e Andreia Palmeira

• Resumo:

Pré-requisitos: Frequência às UC Química Orgânica I e II, Química Farmacêutica I e II,

Química

Farmacêutica Avançada. Aprovação a, pelo menos, três das unidades curriculares

ministradas no

laboratório de Química Orgânica.

Critérios de seriação dos candidatos: Avaliação curricular e entrevista (sentido crítico e

inovador,

interesse e motivação pela área de pesquisa de investigação pré-graduada; interesse na

integração em

projectos de investigação).

Resumo do projeto:

Os flavonoides são compostos polifenólicos amplamente distribuídos na Natureza, que

apresentam uma

diversidade de atividades biológicas, sendo a atividade antitumoral uma das mais

estudadas. Em

decurso de trabalhos de investigação a decorrer no Laboratório de Química orgânica e

Farmacêutica o

flavonoide CPX foi identificado como potente inibidor do crescimento de linhas celulares

tumorais

humanas. Os estudos de elucidação do mecanismo de ação têm evidenciado a capacidade

deste

composto para interferir com a mitose e inibir a interação da proteína supressora tumoral

p53, com o

seu regulador endógeno negativo MDM2.

O trabalho de investigação proposto tem como principal objetivo a obtenção de CPX em

quantidade

suficiente para proceder a estudos que visam avaliar o seu potencial em ensaios in vivo,

assim como a

otimização da seletividade deste composto para células tumorais através de uma

abordagem

nanotecnológica. Estudos in silico de docking da CPX com a MDM2 e a tubulina serão

também realizados

tendo em vista planear a síntese de análogos mais potentes com melhor perfil drug like.

Adicionalmente, prevê-se a síntese de análogos da CPX mediante metodologias clássicas e

mais recentes

que seguem os princípios de Química Verde, incluindo a síntese assistida por microondas.

A elucidação estrutural dos compostos sintetizados será realizada por métodos

espectroscópicos (IV,

UV, RMN de 1H e 13C).

A participação do Estudante neste projeto de investigação contribuirá para a formação de

Estudantes

em Química Medicinal, nomeadamente na aquisição de conhecimentos em Química

computacional,

síntese, purificação e caracterização estrutural de compostos orgânicos.


• Tema:

Desenvolvimento e validação de uma metodologia analítica para avaliação da captação do

radical peroxilo baseada na sonda espectrofotométrica piranina

• Orientador(es):

Marcela Segundo e Inês Isabel Barros Moreira Ramos

• Resumo:

A metodologia ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity) tem sido amplamente

utilizada na caracterização de mecanismos antioxidantes. Genericamente, estes ensaios

baseiam-se na termólise de 2,2’-azinobis(2-amidinopropano) (AAPH), a 37 °C, para a

geração de radicais peroxilo na presença de uma molécula-alvo oxidável que funciona

simultaneamente como sonda para acompanhamento do desenvolvimento da reação.

Para compreender a extensão da ação antioxidante de um dado composto, a sua

capacidade (eficiência termodinâmica) e reatividade (cinética de reação) de captação de

radicais peroxilo devem ser determinadas. Geralmente, esta avaliação é feita realizando

ensaios ORAC com duas moléculas-alvo de reatividades diferentes para os radicais

peroxilo. Recentemente, foi proposta a utilização de sondas espectrofotométricas em

alternativa à sonda clássica fluoresceína (3',6'-di-hidroxiespiro[2-benzofuran-3,9'-xanten]-

1-ona), nomeadamente o vermelho de pirogalol (PGR) e a piranina (ácido 8-hidroxipireno-

1,3,6-trissulfónico). Ortiz e colaboradores (2012) estabeleceram um protocolo de análise

de rotina da capacidade antioxidante de amostras, em formato de microplaca, usando o

PGR como molécula-alvo. Contudo, os ensaios que empregam a piranina não se encontram

padronizados o que impossibilita frequentemente a comparação de resultados entre

trabalhos.

No presente projeto de investigação, pretende-se estabelecer um protocolo de ORAC em

formato de microplaca no qual a piranina será a molécula-alvo/sonda. Será efetuada a

caracterização cinética das reações envolvidas no ensaio, assim como a avaliação das

condições experimentais que proporcionam maior sensibilidade como compostos modelo.

Uma vez definidas as condições experimentais, serão conduzidos estudos de relação

estrutura-reatividade/capacidade antioxidante para compostos fenólicos, utilizando o PGR

e a piranina. Posteriormente, será levada a cabo a automatização do protocolo de

microplaca utilizando um método de análise por injeção em fluxo (FIA) programável de

forma a aumentar a frequência de amostragem, monitorizar a reação desde os seus

instantes iniciais e controlar as condições de geração das espécies reativas in situ de uma

forma mais rigorosa. A aplicabilidade de ambos os métodos em amostras complexas será

também avaliada e interpretada.


• Tema:

Utilização da fluoresceína como sonda de oxidação em ensaios de avaliação antioxidante:

aspetos metodológicos

• Orientador(es):

Marcela Segundo e Luisa Maria Ribeiro da Silva Barreiros

• Resumo:

A fluoresceína é usada frequentemente como sonda de oxidação em ensaios de avaliação

da captação do peroxilo, designado por ORAC (proveniente do inglês Oxygen Radical

Absorbance Capacity). Neste contexto, o presente projeto visa dois objetivos: (i) avaliar a

forma como são expressos os resultados na metodologia ORAC; (ii) estudar a viabilidade

da utilização da fluoresceína como sonda em ensaios para a avaliação da captação de

outras espécies reativas de oxigénio (ROS) e de nitrogénio (RNS).

Na primeira parte do projeto, serão avaliadas as diversas formas como os valores ORAC

são calculados, nomeadamente com base na área sob a curva que define o perfil de

oxidação da fluoresceína; com base no lag-time, ou seja, no tempo necessário após o início

do ensaio para que seja visível a oxidação da sonda; com base na taxa de decaimento da

fluorescência, relacionada com a cinética de oxidação da sonda e, finalmente, com base no

tempo total de ensaio, definido pelo consumo fixo de uma dada percentagem de

fluoresceína. Estes parâmetros serão obtidos experimentalmente com recurso a

metodologias realizadas em microplaca para vários compostos modelo. É pretendida a

correlação entre aspetos cinéticos e o parâmetro usado na avaliação da capacidade

antioxidante. Na segunda parte do projeto, é esperado o desenvolvimento de novas

metodologias, adaptadas a um contexto de high-throughput screening (HTS) para a

avaliação da capacidade antioxidante multi-paramétrica, usando a mesma sonda

(fluoresceína), e diferentes compostos para a geração das espécies reativas,

nomeadamente para o radical hidroxilo e para o óxido nítrico.


• Tema:

Automatização de bioensaios em meios de líquidos iónicos

• Orientador(es):

Maria Lúcia Saraiva e Marieta Leite de Castro Passos

• Resumo:

Pré-requisitos: Experiência prévia em actividades de investigação na área em que está

inserido o projecto. Conhecimentos sobre métodos instrumentais de análise,

nomeadamente técnicas espectrofotométricas e fluorimétricas.


Grau de cumprimento dos pré-requisitos (máximo 100 pontos; factor de ponderação 70%).

Média da licenciatura (cadeiras feitas até à data) (20 valores = 50 pontos; 10 valores = 0

pontos; factor de ponderação 10%). Classificações obtidas nas unidades curriculares de

Química Geral, Química Analítica, Química-Física e Métodos Instrumentais de Análise I e II

na disciplina de Métodos Instrumentais de Análise I (20 valores = 50 pontos; 10 valores = 0

pontos; factor de ponderação 10%).

Resumo do projecto:

Na última década os líquidos iónicos (LIs) têm sido alvo de crescente atenção devido às

suas características particulares, sendo considerados atualmente um meio reacional muito

promissor no âmbito da Química Verde. Como solventes, os LIs apresentam em relação

aos solventes convencionais a vantagem de terem baixa volatilidade, o que reduz a

exposição por via respiratória e a sua libertação para o ar.

Estes solventes têm vindo a ser utilizados em procedimentos biocatalíticos, como uma

alternativa aos solventes orgânicos, uma vez que inúmeras enzimas mantêm a sua

atividade neste meio reacional podendo, em alguns casos, até aumentá-la. A capacidade

adicional de permitir a solubilização de uma variedade ampla de substratos com baixa

solubilidade em água apresentada pelos LIs, reforça esta classe como uma alternativa aos

solventes orgânicos, e por outro lado conduz ao aparecimento de novas aplicações para

procedimentos enzimáticos operados neste meio reacional.

A automatização destes ensaios enzimáticos em meios constituídos por LI pode aumentar

significativamente a sua aplicabilidade. A implementação em sistemas de fluxo baseados

na técnica SIA é vantajosa, uma vez que assegura um consumo reduzido de solvente e dos

diferentes reagentes envolvidos e possibilita a mecanização destes ensaios em sistemas

aquosos contendo LI com uma elevada versatilidade.

Neste contexto, o objetivo deste projeto consiste na avaliação das potencialidades de uma

metodologia SIA baseada em reações de biocatálise em sistemas aquosos contendo Lis

para aplicação em substratos com baixa solubilidade em água.

Em termos gerais, no final da unidade curricular o estudante deverá ser capaz de elaborar

um plano de investigação, contemplando as vertentes relacionadas com a recolha de

informação, metodologia experimental, interpretação e divulgação dos resultados. Em

termos particulares, o estudante deverá ser capaz de dominar os conceitos associados aos

estudos farmacocinéticos e de toxicidade realizados.


• Tema:

Desenvolvimento e caracterização de um gel bucal contendo nanopartículas de

metronidazol para tratamento da doença periodontal

• Orientador(es):

Marilene Estanqueiro e Jaime da Conceição

• Resumo:

Pré-requisitos: Frequência e aprovação às UCs Tecnologia Farmacêutica I, II e III


geral; motivação para desenvolver o presente trabalho.

Resumo do projeto: As doenças periodontais consistem num grupo de doenças infeciosas

e inflamatórias, incluindo gengivite e periodontite, que afetam os tecidos que suportam os

dentes. O tratamento consiste na administração oral de antibióticos que, por ser um

tratamento sistémico é mais suscetível de desencadear efeitos adversos. A solução poderá

ser a administração local de uma preparação de libertação controlada. As nanopartículas

lipídicas têm sido estudadas para administração de fármacos ao nível da mucosa bucal. No

entanto é necessário criar um sistema farmacêutico que permita um aumento do tempo

de retenção na mucosa, ou seja, um sistema mucoadesivo. Neste sentido, os objetivos

deste trabalho consistirão no desenvolvimento e caracterização de nanopartículas lipídicas

incorporando metronidazol; desenvolvimento e validação do método de doseamento do

fármaco; incorporação das nanopartículas lipídicas em geles obtidos por polímeros

mucoadesivos e sua caracterização tecnológica; estudo da libertação in vitro do fármaco.


• Tema:

Desenvolvimento de formulações com base em NLC e nanoemulsões contendo óleo de

calêndula para alívio sintomático de pele atópica

• Orientador(es):

Marilene Estanqueiro e Maria Helena Amaral

• Resumo:

Pré-requisitos: Frequência e aprovação às UCs Tecnologia Farmacêutica I, II e III; média

geral igual ou superior a 14 valores


geral; motivação e experiência no trabalho a desenvolver

Resumo do projeto: A dermatite atópica é uma afeção cutânea extremamente comum,

particularmente na infância, na qual a função de barreira cutânea se encontra

comprometida. As nanopartículas lipídicas têm revelado ser bastante vantajosas para

aplicação cutânea, uma vez que, quando aplicadas na pele, provocam uma redução da

perda transepidérmica de água e consequentemente um aumento da hidratação. A

calêndula é uma planta tradicionalmente utilizada em produtos de aplicação cutânea

devido às suas propriedades anti inflamatórias, cicatrizantes, antissépticas, calmantes e

suavizantes. Este trabalho terá como objetivos o desenvolvimento de NLC e nanoemulsões

contendo óleo de calêndula; desenvolvimento de uma preparação semissólida, sua

caracterização tecnológica e estudo de estabilidade ao longo do tempo e avaliação da

eficácia in vivo através de técnicas de biometria cutânea.


• Tema:

Desenvolvimento de um creme de mãos contendo nanopartículas lipídicas

• Orientador(es):

Marilene Estanqueiro e Maria Helena Amaral

• Resumo:

Pré-requisitos: Frequência e aprovação às UCs Tecnologia Farmacêutica II, III e

Dermofarmácia e Cosmética


geral; motivação e experiência no trabalho a desenvolver

Resumo do projeto: Nos últimos anos as nanopartículas lipídicas, tanto SLN (Solid Lipid

Nanoparticles) como NLC (Nanostructured Lipid Carriers) têm recebido grande atenção,

particularmente no âmbito da aplicação em cosméticos. As nanopartículas lipídas

revelaram ser bastante vantajosas para aplicação cutânea, uma vez que, quando aplicadas

na pele, provocam uma redução da perda transepidérmica de água e consequentemente

um aumento da hidratação. Os produtos de cuidado pessoal para pele seca, por sua vez,

devem promover proteção contra vários fatores externos. A pele das mãos é um bom

exemplo, uma vez que está exposta a vários fatores como clima e detergentes entre outros

químicos. Neste sentido, a pele das mãos deve ser protegida com produtos eficazes e

agradáveis de aplicar. O objetivo deste trabalho visa o desenvolvimento de uma fórmula

apropriada para as mãos, incorporando nanopartículas lipídicas (SLN ou NLC) sua

caracterização tecnológica e avaliação da estabilidade ao longo do tempo. Finalmente,

pretende-se estudar a eficácia através de técnicas de biometria cutânea, após lavagem das

mãos.


• Tema:

Synthesis and investigation of potential allosteric inhibitors of coagulation enzymes

• Orientador(es):

Marta Correia da Silva e Maria Emília Sousa

• Resumo:

- Resumo dos trabalhos a realizar

In our group a new class of sulfated small molecules with anticoagulant activity was

discovered [1-4]. New sulfated small molecules preserve interesting molecular properties

of the sulfated polysaccharide anticoagulant agents but with smaller molecular size,

reduced anionic character, higher hydrophobic nature and feasible synthesis and may

represent a new generation of cardiovascular agents.

The main objective of this project is to investigate the molecular mechanisms of action of

these compounds in serine proteases of the coagulation cascade (FXa, FXIa,

FIXa).Considering that allosteric regulation of FXa, FXIa and FIXa has been demonstrated

earlier for highly charged polyanions such as dextran sulfate, heparin, and for a wide range

of sulfated inhibitors of coagulation enzymes [5, 6], we predict that some of the sulfated

compounds synthesized in our group would inhibit FXa, FXIa or FIXa in an allosteric

manner. Normally, allosteric inhibitors display noncompetitive Michaelis−Menten kinebcs

with VMAX reduced in a dose-dependent manner without a significant change in the KM.

If the time schedule for the project will allow, the synthesis of new compounds will be

performed.

This work is expected to afford an opportunity to discover different molecules from the

known ligands with possibly higher specificity and better toxicological profile.

- Metodologias mais relevantes

Anticoagulant activity will be screened by in vitro chromogenic assays, with purified

enzymes, namely FXa, FXIa, FIXa. To assess the mechanism of inhibition, studies on the

rate of substrate hydrolysis will be performed using a wide range of substrate

concentrations in the presence of fixed concentrations of sulfated compounds. Analysis of

the profiles using the traditional Michaelis−Menten kinebc equabon will reveal the

mechanism of inhibition.

- Bibliografia

[1] M Pinto, M E Sousa, M C Silva, F Marques, F Carvalho. Portugal Patent no. 104739:

Xantonas Sulfatadas e Análogos Xantónicos Glicosilados Sulfatados com Actividade

Anticoagulante e Processos para a sua Preparação. Publication in Boletim da Propriedade

Industrial no. 47/2011, in 09-03-2011.

[2] Correia-da-Silva M, et al. Flavonoids with an oligo-polysulfated moiety: a new class of

anticoagulant agents. J Med Chem 2011, 54, 95-106.

[3] Correia-da-Silva M, et al. Polysulfated Xanthones: Multipathway Development of a New

Generation of Dual Anticoagulant/Antiplatelet Agents. J Med Chem 2011, 54, 5373-5384.

[4] Correia-da-Silva M, et al. Dual anticoagulant/antiplatelet persulfated small molecules.

Eur J Med 2011, 46, 2347-2358.


• Tema:

Caracterização da presença de fragrâncias sintéticas em águas residuais

• Orientador(es):

Sara Cunha e José Fernandes

• Resumo:

As fragrâncias sintéticas constituem um grupo particular de contaminantes emergentes,

cuja presença residual nos diversos compartimentos ambientais, em particular na água,

tem vindo a causar preocupações gradualmente crescentes. O trabalho proposto consiste

em avaliar a presença de alguns dos compostos mais representativos deste grupo em

amostras águas residuais efluentes e afluentes colhidas em 15 estações de tratamento de

águas residuais (ETAR´s) distribuídas ao longo do país. A cromatografia gasosa associada à

espectrometria de massa (GC-MS) será utilizada como técnica analítica.


• Tema:

Controlo de qualidade de snacks

• Orientador(es):

Susana Casal e Rebeca Cruz

• Resumo:

A crescente preocupação com o teor em sal dos alimentos processados, e a constatação da

variabilidade deste componente no âmbito das aulas laboratoriais de alimentação Humana

II, está na origem do presente projeto, onde se pretende avaliar a coerência com a

rotulagem do teor em sal de snacks, tendo por base analítica métodos oficiais

(argentometria) e fotometria de chama.


• Tema:

Avaliação da presença de ácidos gordos trans em leites maternos

• Orientador(es):

Susana Casal e Sara Cunha

• Resumo:

Os ácidos gordos trans (AG-trans) são compostos que podem ter uma origem natural,

resultante da metabolização de ácidos gordos insaturados pelos animais ruminantes, mas

cuja presença na dieta humana provem fundamentalmente do consumo de alimentos

processados, com gorduras obtidas por hidrogenação parcial de óleos e gorduras.

Desempenham um papel importante numa série de distúrbios metabólicos,

nomeadamente doenças cardiovasculares, diabetes do tipo II por aumento da resistência à

insulina e diferentes processos inflamatórios. A possibilidade dos AG-trans serem alvo de

bioacumulação no leite materno é particularmente preocupante devido à sensibilidade

aumentada dos recém-nascidos. O trabalho proposto consiste em avaliar a presença de

AG-trans em amostras de leite materno no âmbito de um trabalho mais alargado de

pesquisa de contaminantes neste tipo de matriz. A cromatografia gasosa será utilizada

como técnica analítica.


• Tema:

Unraveling the mechanisms responsible for ulcerogenic properties of resveratrol: a

membrane biophysical approach

• Orientador(es):

Salette Reis

• Resumo:

Resveratrol is a natural polyphenol found in grape skin and seeds. Its great therapeutic

potential is attributed to the anticancer effect, cardiovascular protection, antioxidant

activity, anti-inflammatory capacity and neuroprotection [1]. However, apart from its

therapeutic effects, resveratrol also possesses contraindicative ulcerogenic properties [2].

In fact, it was demonstrated that resveratrol delayed the healing of gastric ulcers possibly

by the inhibition of cyclooxygenase (COX), which reduces the synthesis of prostaglandin

(PG) E2 that is responsible for the protection of the gastric mucosal barrier [3]. The way by

which resveratrol modulates COX activity seems to be related with the inhibition of protein

kinase C (PKC) signal transduction pathway at multiple levels [3]. However, the biophysical

mechanisms underlying these effects are far from being fully understood and seem to be

closely connected with the interaction of this compound with lipid membranes.

In this context, the current project work aims to study the interaction between resveratrol

and biomembranes to elucidate the effects of this compound in gastric mucosal barrier.

Large unilamellar vesicles (LUVs) made of 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine

(DPPC) will be used as membrane model systems of: (i) a typical cell membrane (at

physiological pH of 7.4 and 37°C); and (ii) the protective membrane lining of the gastric

mucosa (at acidic pH of 5.0 and 37°C).

The studies will include the determination of partition coefficients of resveratrol in the

membrane model systems using UV–vis derivative spectrophotometry, the membrane

location of resveratrol will be studied by fluorescence quenching of probes by steady-state

and time-dependence measurements and fluorescence anisotropy data will provide

insights into the fluidity of the membrane and lipid order. The molecular packing and order

of bilayers will be investigated by small- and wide-angle X-ray diffraction measurements

(SAXS and WAXS), being the necessary beam time assured at Elettra Synchrotron, Trieste,

Italy (under the project 20150418). Langmuir isotherms, Brewster angle microscopy

(BAM), infrared reflection-absorption spectroscopy (IRRAS) and grazing incidence X-ray

diffraction (GIXD) will provide the study of resveratrol interaction with lipid monolayers.

GIXD studies will be performed at the beamline SIRIUS in Soleil Synchrotron, Paris, France

(under the project 20141247). The formation of lipid rafts involved in several important

biological functions will be also studied through Förster resonance energy transfer (FRET).

References

[1] Neves, A.R., et al. Curr. Med. Chem. 2012, 19, 1663-1681.

[2] Guha, P., et al. J Pharmacol, 2010. 159(3): p. 726-34.

[3] Subbaramaiah, K., et al. J Biol Chem, 1998. 273(34): p. 21875-82.


• Tema:

Cardiotoxicity early biomarkers in anticancer therapy

• Orientador(es):

Vera Marisa Costa

• Resumo:

Anticancer drug therapy should be considered a cardiovascular risk factor. Its long term

cardiac side effects have high social and economic impact, especially considering the

increasing number of cancer survivors. Cardioncology is assuming an increasing role, being

its Holy Grail to unveil the mechanisms underlying the cardiotoxicity of anticancer drugs

[namely mitoxantrone] and therefore modify them to prevent and/or repair cardiac

damage. However, a more realistic approach and with high immediate impact is the

discovery of biomarkers that enable an early cardioprotective intervention.

The main question to be answered by this project: Is it possible to assess early

cardiotoxicity after anticancer therapy?

Resumo dos trabalhos a realizar:

The student will be given the opportunity to work in the toxicology laboratory and to

perform several determinations of already collected samples gathered from an in vivo

experiment performed in mice. The work is already ongoing and with published results,

being the main goal to assess new biomarkers related to cardiotoxicity.

The determinations to be performed in samples obtained from in vivo assays:

b) Evaluation of proteasome activity.

b) Evaluation of cardiac oxidative stress parameters, namely glutathione levels and anti-

oxidant enzymes activity.

c) Evaluation of energetic parameters.

Metodologias mais relevantes:

1. Western Blot.

2. Spectrophotometric, bioluminescence and fluorescent assays, using microplate reader.

3. Oxidative stress related biochemical determinations.

Bibliografia:

1. Costa VM, Carvalho F, Duarte JA, Bastos ML, Remião F. The heart as a target for

xenobiotic toxicity: the cardiac susceptibility to oxidative stress. Chem Res Toxicol. 2013,

26:1285-1311.

2. Seiter, K. Toxicity of the topoisomerase II inhibitors. Expert Opin Drug Saf. 2005, 4, 219-

234.

3. Dores-Sousa JL, Duarte JA, Seabra V, Bastos ML, Carvalho F, Costa VM. The age factor

for mitoxantrone's cardiotoxicity: multiple doses render the adult mouse heart more

susceptible to injury. Toxicology. 2015, 329:106-19.

Documents

Projeto I 2015/16 - 1º semestre · 2020-04-25 · Projeto I 2015/16 - 1º semestre: • Tema: Alterações na membrana eritrocitária associadas à anemia da doença renal crónica,