TCC Paulo Augusto Marques Chagas

8/20/2019 TCC Paulo Augusto Marques Chagas

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Departamento de Ciências BiológicasCURSO DE ENGENHARIA BIOTECNO!GICA

IBERA"#O SUSTENTADA DE DICO$ENACO DE

%OT&SSIO UTII'ANDO BIO(E(BRANAS DE &TE)NATURA CO(O SU%ORTE

Monografia apresentada para

conclusão do Curso de Bacharelado

em Engenharia Biotecnológica

Al*no + %a*lo A*g*sto (ar,*es C-agas

Orientador + Rondinelli Doni.etti Herc*lano


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Assis/ 0123

%RE$&CIO

Este Trabalho de conclusão de curso tem como base o projeto de iniciação científica

“Emprego das técnicas de microscopia ótica !"#"$%& e por $nfra'ermelho para a a'aliação

da liberação do diclofenaco de pot(ssio por biomembranas de l(te) natural*+ , iniciação

científica foi reali-ada na .aculdade de Ci/ncias e 0etras da !1E%2 3 !ni'ersidade

Estadual 2aulista 45lio de Mes6uita .ilho no 0aboratório de .ísica7 Biofísica e Biomateriais7

sob a orientação do 2rof+ 8r+ 9ondinelli 8oni-etti :erculano7 tendo como objeti'o a an(lise

da liberação controlada de f(rmaco # neste estudo7 utili-ou#se o diclofenaco de pot(ssio+ ;

período de reali-ação do e)perimento ocorreu entre fe'ereiro a julho de ?


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AGRADECI(ENTOS

,gradeço aos meus pais@ 2aulo %érgio 9ibeiro Chagas e %ueli $maculada+ $rmãs@

2atrícia Mar6ues Chagas7 2oliana Mar6ues Chagas7 2mela Mar6ues Chagas e 2enélope

Mar6ues Chagas+ ,migos@ 2amela de ,lmeida Terni7 8anillo Maciel7 :eloisa %orato7 2atrícia ,ielo e 9aphael Danandréa Moda+ E agradeço os membros da banca a'aliadora@ 9ondinelli

8oni-etti :erculano7 abriela %terle7 "inícius %imão+


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SU(&RIO

>+ $1T9;8!FG;++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++=H

>+> ; l(te) da seringueira Hevea brasiliensis++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++=H

>+< 8iclofenaco de pot(ssio+++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++=I


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RESU(O

; diclofenaco de pot(ssio é um medicamento anti#inflamatório não esteroidal7

analgésico e antipirético ,$1Es& 6ue ajuda na redução da inflamação e dor+ %eu uso

clínico é amplamente utili-ado7 mas alguns efeitos colaterais e seu curto tempo de meia'ida limitam seu uso+ Membranas de l(te) e)traído da seringueira Hevea brasiliensis 'em

sendo usadas de'ido a sua biocompatibilidade7 estímulo natural O angiog/nese e utili-ação

como um sistema de liberação controlada %0C&+ , agregação dos f(rmacos em %0C 'isa a

interação f(rmaco#membrana7 para uma maior otimi-ação nos processos de cicatri-ação

tecidual7 garantindo também uma ação anti#inflamatória locali-ada7 e'itando algumas

complicaçPes plausí'eis desse processo+ , longo pra-o7 um dos objeti'os do projeto é

inferir implicaçPes biológicas a partir das propriedades das membranas de l(te) agregadas

com f(rmacos+ Testes in vivo utili-ando a membrana de l(te) natural mostraram tra-er nenhum tipo de rejeição ao hospedeiro7 o 6ue aumenta as chances de aplicação+ ;

comportamento do sistema de liberação controlada %0C& foi estudado utili-ando o

diclofenaco de pot(ssio como f(rmaco+ , escolha deste f(rmaco para o projeto de pes6uisa

de'e#se ao fato de este composto possuir propriedades antipiréticas7 analgésicas e anti#

inflamatórias+ ; comportamento da liberação foi obser'ado retirando alí6uotas da solução

onde a membrana se encontra'a+ , ta)a de liberação do diclofenaco de pot(ssio foi

monitorada e 6uantificada utili-ando#se o método de espectroscopia ótica !"#"$%&+ ;

método utili-ado na preparação das membranas é reprodutí'el e a biomembrana de l(te) é

muito est('el+ , biomembrana de l(te) foi capa- de libertar


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27 INTRODU"#O

%istemas de liberação de princípios ati'os são importantes de'ido ao fato de 6ue

raramente um f(rmaco agregado a solução a6uosa7 ou numa forma con'encional7 consegue

atingir um al'o específico no organismo em concentraçPes ade6uadas para pro'ocar oefeito terap/utico esperado :E9C!0,1;7 & é um material de ele'ado 'alor econKmico para a ind5stria7 principalmente a

automobilística7 de'ido a suas características físicas7 como elasticidade7 plasticidade7

resist/ncia ao desgaste fricção& e propriedades de isolamento elétrico+


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Com tratamento

Semtratamento

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.igura >@ Corte para sangria da seringueira em meia espira e coleta do l(te)+

; l(te) e)traído da seringueira Hevea brasiliensis tem se mostrado promissor em

aplicaçPes biomédicas+ Membranas feitas deste material t/m sido usadas como próteses e

en)ertos médicos de'ido a suas características de biocompatibilidade e estímulo natural a

angiog/nese E9E1;7 =&+ ; l(te) da seringueira H. brasiliensis forma um sistema

coloidal polif(sico e polidisperso+ 8epois de centrifugado7 o l(te) pode ser representado

como sendo formado por tr/s componentes fundamentais@ hidrocarboneto isopr/nico7 soro e

fração de fundo+

Trabalhos recentes t/m mostrado 6ue o l(te) natural é um material biocompatí'el

com in5meras aplicaçPes+ Ele apresenta alta resist/ncia mecnica e apresenta bai)o custo+

; trabalho de ,l'es et al mostrou 6ue o l(te) possui a propriedade de acelerar a

angiog/nese .igura


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270 Diclo:enaco de pot8ssio

; diclofenaco de pot(ssio .igura & é um anti#inflamatório não esteróide ,$1E&+ Tal

grupo de substncias distingue#se pela ação anti#inflamatória7 antipirética e analgésica+

Como 4ohn "ane %,M2,$;7 =& esclareceu7 em >AR>7 seu mecanismo de atuaçãoresume#se7 basicamente7 em inibir as en-imas ciclo#o)igenases cuja função principal é

catalisar a con'ersão do (cido ara6uidKnico em prostaglandinas e trombo)anos7

substncias modulantes no processo inflamatório+

.igura @ Estrutura Molecular do 8iclofenaco de 2ot(ssio+

; diclofenaco de pot(ssio é rapidamente absor'ido após administração oral e

parenteral+ ,pós a absorção7 ele se liga Os proteínas plasm(ticas em uma proporção de

AA7RQ+ , meia#'ida de eliminação é de > a < horas7 e a droga tende a se acumular no

li6uido sino'ial7 sendo e)cretado atra'és da urina+

07 OB;ETI


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=70 Espectroscopia óptica

, caracteri-ação por espectroscopia óptica !"#"$%&7 foi reali-ada no 0aboratório de

.itoter(picos do 8epartamento de Engenharia Biotecnológica da .aculdade de Ci/ncias e

0etras de ,ssis?!1E%27 utili-ando aparelho 0%7 BE0 2hotonics .igura &+ ,lí6uotas datriplicata foram retiradas e analisadas em diferentes inter'alos de tempo7 de = a = horas+

,pós coleta dos dados7 as informaçPes foram compiladas e discutidas utili-ando o softZare

de estatística OriginPro 8 SR47 da ;rigin0ab Corporation+

.igura 3 E6uipamento de espectroscopia ótica empregado+

=7= (icroscopia eletrnica de 4arred*ra

; Microscópio eletrKnico de 'arredura7 ME" Scanning Electron Microscope7 %EM& é

um e6uipamento 'ers(til 6ue permite a obtenção de informaçPes estruturais e 6uímicas de

amostras di'ersas+ !m fei)e fino de elétrons de alta energia incide na superfície da amostra7

na 6ual7 ocorrendo uma interação7 parte do fei)e é refletida e coletada por um detector 6ue

con'erte este sinal em imagem de B%E # imagem de elétrons retroespalhados # nesta

interação a amostra emite elétrons produ-indo a chamada imagem de E% elétrons

secund(rios& T,T,7>AI=&+ Esta técnica é importante para a obser'ação da distribuição dos

poros nas membranas de l(te) natural7 além da incorporação do f(rmaco O membrana+ ;

teste ME"#E8% foi reali-ado no 0aboratório Multiusu(rio de Caracteri-ação Vuímica do8epartamento de Vuímica da .aculdade de .ilosofia7 Ci/ncias e 0etras da 9ibeirão

2reto?!%27 9ibeirão 2reto7 %ão 2aulo+ .oram en'iadas amostras para an(lise@ uma

membrana de l(te)7 uma membrana de l(te) com solução de diclofenaco de pot(ssio

mg?m0 e uma c(psula de diclofenaco de pot(ssio de >==mg+


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7 RESUTADOS E DISCUSS#O

72 An8lise da li?era@o

8urante = horas7 foi obser'ado o comportamento das membranas de diclofenaco

de pot(ssio em solução+ ,s primeiras alí6uotas da solução onde se encontra a membrana&

foram retiradas nas primeiras horas de e)posição da membrana com a solução em

inter'alos de > em > minutos+ ,s outras alí6uotas foram retiradas em inter'alos de 'inte

6uatro horas durante > dias+

; gr(fico > mostra a leitura de espectroscopia óptica na 6ual tem#se a absorbncia

pelo comprimento de onda+ 2ara calcular a 6uantidade de f(rmaco liberado ao longo do

e)perimento7 uma cur'a de calibração foi reali-ada7 onde uma solução a6uosa do f(rmaco

com concentração conhecida foi analisada por espectroscopia !"#"$%+ ; gr(fico < mostra

essa cur'a de calibração7 na 6ual as absorbncias foram medidas para '(rias

concentraçPes de diclofenaco7 'ariando entre =7=>< a =7=> mg?m0+ , cur'a de calibração

permite relacionar a absorbncia com a concentração do f(rmaco+ Cada concentração do

medicamento pontos& foram feitos em triplicata7 onde o erro estimado foi menor 6ue Q+ ;

comprimento adotado para a reali-ação do teste de liberação foi de nm+ 8iferentes

comprimentos de onda foram encontrados na re'isão bibliogr(fica7 porém7 'ale ressaltar 6ue

cada instrumento de an(lise possui suas peculiaridades e des'ios+ ,pós a definição do

comprimento de onda7 o teste de liberação foi iniciado+

, b s o r b n c i

a u + a + &

Comprimento de onda nm&r(fico > # ,bsorbncia pelo comprimento de onda+ 1ote 6ue absorbncia m()ima é em nm+


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, b s o r b n c i a u + a + &

Concentração mg?m0& r(fico < # $ntensidade da absorbncia em função da concentração de diclofenaco de pot(ssio em

solução+

1o estudo presente7 o ponto de saturação acontece após H horas+ ,o analisar a

figura I7 conclui#se 6ue ocorre um r(pido pico de liberação7 o 6ue corresponde ao

diclofenaco pró)imo O superfície da membrana+ 2ortanto7 o processo de liberação mais

lenta seria associado O difusão lenta do diclofenaco ao longo da matri- da membrana+

C o n c e n t r a ç ã o

m g ? m 0 &

Tempo horas&r(fico # Cur'a de liberação do diclofenaco de pot(ssio em função do tempo+ ;bser'e 6ue a

concentração de diclofenaco de pot(ssio atinge o pico após apro)imadamente H horas+

2or meio da an(lise das cur'as de liberação de diferentes membranas encontradas

em estudos de mesmo escopo de :erculano et al é possí'el perceber um padrão+ ;s

dados e)perimentais no gr(fico foram plotados utili-ando uma função bi e)ponencial ,&


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[t& \ [= ] ,>eWt?^> ] ,


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7 CONCUS#O

.oi demonstrado 6ue o diclofenaco pode ser incorporado em membranas de l(te)

natural+ 1este estudo7 compro'ou#se 6ue o l(te) pode7 também7 ser usado como carreador

do diclofenaco de pot(ssio7 liberando este por até A dias+ .oi obser'ado 6ue


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37 RE$ERNCIAS

>+ :E9C!0,1; 987 B9!1E00; C, and 9,E.. C.;+ ;ptimi-ation of a no'el 1itric

;)ide %ensor using a late) rubber matri)+ ;o*rnal o: Applied Sciences+


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>>+ ,0"E% MC;+ Teste da angiogênese estim*lada por mem?ranas de l8te9 nat*ral +

8issertação de Mestrado7 ..C092 # !ni'ersidade de %ão 2aulo7 9ibeirão 2reto?%2+

7>@H+ T,T, %4+ 8istribution of proteins betZeen the fractions of :e'ea late) separated b[

ultracentrifugation+ ;o*rnal o: t-e R*??er Researc- Instit*te o: (alaFsia+ g>AI=U

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