35
UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINÁRIA ______________________________________________________________________________ ANNA JÚLIA PORTZ AVALIAÇÃO DA PRESENÇA DE RESÍDUOS DE ANTIBIÓTICOS E DA QUALIDADE MICROBIOLÓGICA EM LEITES CRU E BENEFICIADO NO DISTRITO FEDERAL. BRASÍLIA 2011

UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

  • Upload
    buikhue

  • View
    216

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA

FACULDADE DE AGRONOMIA E MEDICINA VETERINÁRIA

______________________________________________________________________________

ANNA JÚLIA PORTZ

AVALIAÇÃO DA PRESENÇA DE RESÍDUOS DE ANTIBIÓTICOS E DA QUALIDADE

MICROBIOLÓGICA EM LEITES CRU E BENEFICIADO NO DISTRITO FEDERAL.

BRASÍLIA

2011

Page 2: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

ANNA JÚLIA PORTZ

AVALIAÇÃO DA PRESENÇA DE RESÍDUOS DE ANTIBIÓTICOS E DA QUALIDADE

MICROBIOLÓGICA EM LEITES CRU E BENEFICIADO NO DISTRITO FEDERAL.

Monografia apresentada à Faculdade de

Agronomia e Medicina Veterinária da

Universidade de Brasília como requisito parcial

para obtenção do grau de médico veterinário.

Orientadora: Profa. Dra. Márcia de Aguiar

Ferreira

Brasília

2011

Nome do autor: Portz, Anna Júlia

Page 3: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

2

Título: Avaliação da Presença de Resíduos de Antibióticos e da Qualidade Microbiológica em

Leites Cru e Beneficiado no Distrito Federal.

Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada à Faculdade de

Agronomia e Medicina Veterinária da Universidade de Brasília.

Aprovada em: ____ de fevereiro de 2011.

Banca Examinadora

Profa. Dra. Márcia de Aguiar Ferreira Instituição: Universidade de Brasília

Julgamento:______________________ Assinatura:______________________

Prof. Dr.Luiz Antonio Borgo. Instituição: Universidade de Brasília

Julgamento:______________________ Assinatura:______________________

Msc. Marcio Antonio Mendonça Instituição: Universidade de Brasília

Julgamento:______________________ Assinatura:_______________________

Page 4: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

AGRADECIMENTOS

Agradeço

Em, primeiro lugar a Deus, por me permitir o ingresso no curso de Medicina Veterinária na

Universidade de Brasília, em 2006, e sua conclusão, em 2011.

À minha orientadora, Dra. Márcia, que sempre demonstrou muita dedicação à sua profissão e que

me ajudou muito na escolha do tema desse trabalho, mostrando a importância do veterinário

atuando como higienista, responsável pela segurança alimentar do homem.

Ao coordenador do curso de Gestão do Agronegócio da UnB, prof. Msc. Marlon Brisola, por me

proporcionar oportunidades de crescimento profissional e desenvolvimento intelectual.

Ao coordenador da CRC/SDA/MAPA, Leandro Feijó, pelo aprendizado adquirido estagiando em

sua coordenação e por incentivar o estudo sempre, visando o crescimento profissional.

À MADASA, especialmente à Andrea, pelo fornecimento dos Kit’s de análise SNAP Duo Beta

Tetra, empréstimo de equipamento para análise, auxílio e presteza no esclarecimento de dúvidas.

À minha família, que indiretamente me orientou na escolha dessa profissão, me proporcionando

o contato com os animais desde pequena, pelo apoio financeiro e emocional para concluir meus

estudos, nos momentos de estresse e desânimo e, principalmente ao meu pai, por me incentivar

nos estudos em busca da profissão que me agrade.

Aos amigos que fiz ao longo desse curso, que me mostraram a importância da amizade,

principalmente nos momentos de maior pressão ao longo do curso.

Page 5: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

RESUMO

PORTZ, Anna Júlia. Avaliação da presença de resíduos de antibióticos em leite cru e beneficiado

no Distrito Federal. 2011. 36 f. Monografia (Conclusão do Curso de Medicina Veterinária) –

Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade de Brasília, Brasília, DF.

A inocuidade alimentar é de fundamental importância em uma sociedade civilizada que busca o

aumento da perspectiva de vida através, principalmente, da medicina preventiva. A ausência de

resíduos de medicamentos veterinários em alimentos é um dos quesitos de garantia da segurança

alimentar, pois evita a ocorrência de doenças no homem, como também dá garantias de respeito

às boas práticas ao longo da cadeia agroalimentar; além disso, no caso do leite, é importante para

evitar prejuízos à indústria de produção de derivados, pois a presença dessas substâncias afeta a

qualidade do leite como matéria-prima. Este trabalho realiza um estudo da presença de resíduos

de antibióticos em leites cru e processado produzidos e comercializados no Distrito Federal, por

meio da análise de 30 amostras com a utilização de Kit`s SNAPduo* Beta-tetra. Os resultados

obtidos nas análises das amostras demonstraram ausência resíduos de tetraciclinas e β-lactâmicos,

em níveis superiores aos LMR`s definidos pelo fabricante, indicando que até o momento da

realização dessa pesquisa, o leite produzido e comercializado no Distrito Federal não representa

perigo químico em relação à presença dessas substâncias.

Palavras- chave: Leite; Resíduos de antibióticos; Segurança alimentar.

Page 6: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

SUMÁRIO

REVISÃO BIBLIOGRÁFICA .................................................................................................... 9

1. INTRODUÇÃO .............................................................................................................. 9

2. IMPORTÂNCIA DO LEITE NA ALIMENTAÇÃO HUMANA ................................... 10

3. IMPORTÂNCIA DA PECUÁRIA LEITEIRA NO BRASIL ......................................... 11

4. ASPECTOS DA QUALIDADE DO LEITE NO BRASIL ............................................. 13

5. IMPORTÂNCIA DOS MEDICAMENTOS VETERINÁRIOS NA BOVINOCULTURA

LEITEIRA ............................................................................................................................ 15

6. BOAS PRÁTICAS NA PRODUÇÃO LEITEIRA ......................................................... 16

7. RISCOS DOS RESÍDUOS ............................................................................................ 17

8. MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO PARA PESQUISA DE RESÍDUOS DE

ANTIBIÓTICOS EM LEITE................................................................................................. 20

9. CONSIDERAÇÕES FINAIS....................................................................................... 21

REFERÊNCIAS ........................................................................................................................22

OBJETIVOS ..............................................................................................................................25

INTRODUÇÃO .........................................................................................................................26

MATERIAL E MÉTODOS........................................................................................................27

RESULTADOS E DISCUSSÃO ................................................................................................30

CONCLUSÃO ...........................................................................................................................34

REFERÊNCIAS ........................................................................................................................35

Page 7: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

9

REVISÃO BIBLIOGRÁFICA

1. INTRODUÇÃO

O leite é um alimento de alto valor nutricional, pois possui em sua composição água,

gordura, proteínas, sais minerais, vitaminas, carboidratos (NASCIMENTO et al, 2001) e cálcio,

essencial para a formação e manutenção dos ossos, sendo um importante alimento para pessoas

de todas as faixas etárias (FERREIRA, 2007). Devido a sua relevância na alimentação humana,

deve seguir alguns parâmetros para que seja um produto de qualidade. No Brasil, esses

parâmetros são definidos na Instrução Normativa 51, que define características físico-químicas e

microbiológicas que o leite deve apresentar, desde sua produção, transporte, até sua chegada na

indústria, além de outras informações sobre os estabelecimentos onde o leite é produzido

(BRASIL, 2002).

A condição sanitária do rebanho também é importante para que o leite atenda os requisitos

desejáveis de qualidade. A mastite, inflamação da glândula mamária, ocorre com muita

frequência nos rebanhos de gado leiteiro, provocando muitos prejuízos à produção leiteira,

principalmente devido à queda na produção e a inviabilidade do leite para processamento e

consumo. Para evitar sua ocorrência, muitos produtores realizam o tratamento preventivo com

antibióticos no seu rebanho, durante o período em que os animais não estão produzindo leite.

Quando algum animal apresenta mastite no período de produção leiteira, deve ser afastado da

produção desde o início do tratamento até que acabe o período de carência recomendado para o

medicamento, evitando, assim, a passagem de resíduos da corrente sanguínea para o leite (LAGE,

2010).

Resíduo de drogas veterinárias, segundo o Codex Alimentarius, é “a fração da droga, seus

metabólitos, produtos de conversão ou reação e impurezas que permanecem no alimento

originário de animais tratados” (BRASIL, 1999). Os antibióticos mais utilizados em bovinos

produtores de alimento, segundo Tenório (2007), são aqueles dos grupos dos beta-lactâmicos,

sulfonamidas, macrolídeos, aminoglicosídeos e tetraciclinas. Dentre esses, os mais utilizados para

tratamento de bovinos leiteiros, portanto os mais detectados no leite, pertencem ao grupo dos

beta-lactâmicos.

A presença de resíduos de medicamentos veterinários em alimentos é um assunto muito

discutido atualmente, já que influencia o consumo alimentar quanto a aspectos econômicos,

Page 8: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

10

comerciais e sanitários. Seu controle deve ser pautado na análise de risco, uma ferramenta que

auxilia nos processos de tomadas de decisão quanto à segurança alimentar (FAO & WHO, 2006).

Resíduos de antibióticos no leite podem causar diversos malefícios à saúde, desde

distúrbios gastrointestinais até hipersensibilidades, teratogenias e choque anafilático em

indivíduos alérgicos; também podem provocar resistência bacteriana, trazer prejuízos aos

laticínios por inibir o crescimento de micro-organismos benéficos para a produção de derivados

de leite (NERO et al., 2007) e causar restrições à exportação. A fim de promover a segurança do

leite produzido no país, o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento instituiu, em 1999,

o Plano Nacional de Controle de Resíduos e Contaminantes, por meio do qual são coletadas

amostras de leite de estabelecimentos sorteados e analisadas quanto à presença de resíduos e

contaminantes (BRASIL, 1999).

Além disso, para que o Brasil mantenha sua posição de destaque no agronegócio leiteiro,

considerado como o quinto maior produtor de leite desde 2008 (USDA, 2010), é necessário que

sejam respeitadas as boas práticas de produção, que incluem, entre outras, a separação do leite

dos animais sob tratamento, evitando o consumo de leite que contenha resíduos de medicamentos

que podem ocasionar os prejuízos supracitados (FAO, 2011).

2. IMPORTÂNCIA DO LEITE NA ALIMENTAÇÃO HUMANA

O leite, devido aos componentes, é considerado um alimento completo, essencial para o

desenvolvimento adequado de crianças e adolescentes e importante na alimentação de adultos e

idosos, principalmente por apresentar, em sua composição, proteínas (3,6%), que contem um

grande número de aminoácidos essenciais, como triptofano, treonina, isoleucina, leucina, lisina,

metionina, histidina, fenilalanina e valina (MARTINS, 2005).

Outros componentes do leite são: lactose (4,5%), lipídios (3,6%), água (87,5%), vitaminas

e sais minerais (0,8%). (FERREIRA,2007).

O mineral de maior importância presente no leite é o cálcio, pois é essencial ao ser

humano em todas as fases, sendo importante para a formação dos ossos ao fim da gestação, para

o desenvolvimento ósseo adequado em crianças e adolescentes e para a prevenção da reabsorção

óssea e da osteoporose em adultos e idosos. As proteínas encontradas no leite previnem a

desnutrição por apresentarem elevado valor biológico e, conforme Almeida (2010), um litro de

Page 9: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

11

leite, por dia, supre as necessidades proteicas de crianças com até seis anos, mais de 60% das

necessidades protéicas de adolescentes e 50% das necessidades dos adultos.

Devido à sua importância nutricional, o Ministério da Saúde recomenda doses de Ingestão

Diária Recomendada (IDR) de leite de: dois copos para crianças, de três a quatro copos para

adolescentes e de três copos para adultos e idosos (YAMAGUCHI et al, 2005).

3. IMPORTÂNCIA DA PECUÁRIA LEITEIRA NO BRASIL

O controle dos resíduos de antibióticos em leite é de fundamental importância, pois é uma

questão de interesse crescente no comércio internacional de alimentos, devido à preocupação com

a saúde do consumidor.

O Brasil ocupa uma posição de destaque no comércio de lácteos, sendo o quinto maior

produtor de leite. A partir da década de 90, devido à estabilidade econômica do Plano Real, ao

estabelecimento de nova governança na cadeia em função da liberação dos preços do leite em

1991, entre outros fatores, a produção do leite no Brasil aumentou de 12,1 para 27 bilhões de

litros por ano, aumentando mais de 123% entre 1985 e 2007 ( Tabela 1 e Gráfico 1).

A competitividade do Brasil nesse mercado é vantajosa devido ao econômico sistema de

produção, que é, em sua maior parte, a pasto. Além disso, há possibilidade de crescimento

horizontal da produção, com aumento da área de rebanho de gado leiteiro e vertical, com

melhoramento genético, nutricional e de manejo (LEITE, 2008).

Tabela 1.

Produção mundial de leite fluido.

Produção de leite fluido 2006 2007 2008 2009 (p) 2010 (f) 2011

North America

Canada 8,041 8,212 8,27 8,28 8,35 8,35

Mexico 10,051 10,657 10,907 10,866 11,033 11,06

United States 82,455 84,211 86,174 85,881 87,461 88,768

Sub-total 100,547 103,08 105,351 105,027 106,844 108,178

South America

Argentina 10,2 9,55 10,01 10,35 10,6 11,07

Brazil 25,23 26,75 27,82 28,795 29,948 30,846

Sub-total 35,43 36,3 37,83 39,145 40,548 41,916

European Union 132,206 132,604 133,848 133,7 135,35 136,6

Former Soviet Union

Russia 31,1 32,2 32,5 32,6 31,9 31,2

Ukraine 12,89 11,997 11,524 11,37 10,95 10,57

Page 10: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

12

Sub-total 43,99 44,197 44,024 43,97 42,85 41,77

South Asia

India 41 42,89 44,5 48,16 50,3 52,5

Asia

China 31,934 35,252 34,3 28,445 29,1 30,5

Japan 8,137 8,007 7,982 7,91 7,721 7,55

Sub-total 40,071 43,259 42,282 36,355 36,821 38,05

Oceania

Australia 10,395 9,87 9,5 9,326 9,327 9,6

New Zealand 15,337 15,918 15,58 16,983 17,173 18,049

Sub-total 25,732 25,788 25,08 26,309 26,5 27,649

TOTAL 418,976 428,118 432,915 432,666 439,213 446,663

Notes:

(p) Preliminary.

(f) Forecast.

(1) Based on deliveries

(2) Year ending June 30 for the

period 2006-2008 ISAD/OGA/FAS

July 2011

Fonte: FAS post reports, official statistics, and office research.. Modificado.

Figura 1 - Produção mundial de leite fluido.

Fonte: FAS post reports, official statistics, and office research. Modificado.

Page 11: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

13

4. ASPECTOS DA QUALIDADE DO LEITE NO BRASIL

O leite, como citado anteriormente, é um alimento de grande importância nutricional para

o homem em todas as fases de sua vid; porém, para que possua suas características nutricionais e

não prejudique a saúde do consumidor, é necessário que seja um produto de qualidade. No Brasil,

essa qualidade é regulada, desde 18 de setembro de 2002, pela Instrução Normativa 51 (IN 51),

que aprova os regulamentos técnicos de produção, identidade e qualidade de Leite tipo A, B, C,

pasteurizado e cru refrigerado, bem como o regulamento técnico da coleta de leite cru refrigerado

e seu transporte a granel (BRASIL, 2002).

Esta Normativa tem como objetivo a melhoria da qualidade do leite brasileiro, por meio

do Programa Nacional de Melhoria da Qualidade de Leite, estabelecendo a padronização dos

parâmetros físico-químicos e microbiológicos do diversos tipos de leite, bem como as

características estruturais necessárias para sua produção e transporte, obrigando os

estabelecimentos com Serviço de Inspeção Federal (SIF) a implantarem a Análise de Perigo e

Pontos Críticos de Controle - APPCC e as Boas Práticas de Fabricação – BPF (PERIN et al,

2009).

Segundo a IN 51, o leite é classificado por tipos, de acordo com as características de sua

produção e o processamento ao qual foi submetido. O leite do tipo A é produzido, beneficiado e

envasado em granjas leiteiras; o leite tipo B é aquele mantido na propriedade em que foi

produzido, refrigerado, por até 48 horas, em temperatura de 4°C, atingida até 3 horas após a

ordenha, e beneficiado em laticínio, sendo que deve chegar ao laticínio na temperatura de até 7°C.

O leite tipo C teve seu prazo de vigência expirado em 01/07/2007 em todo o país sendo

substituído pelo cru refrigerado, que deve ser mantido em condições de refrigeração, transportado

em carro-tanque isotérmico da propriedade em que foi produzido até um posto de refrigeração ou

estabelecimento industrial; após o tratamento térmico recebe a denominação de leite pasteurizado.

Todos os tipos são classificados quanto ao teor de gordura em: integral (maior ou igual a

3%), padronizado (igual a 3%), semidesnatado (de 2,9 a 0,6%) e desnatado (igual ou menor que

0,5%). O tratamento térmico deve ser, preferencialmente, a pasteurização rápida (72°C a 75°C/15

a 20 segundos), que ocorre em circuito fechado, seguido de resfriamento a 4oC.

Ainda, a Portaria 370 de 04 de setembro de 1997, do MAPA, que regulamenta o leite

Ultra Alta Temperatura (UAT) ou Ultra High Temperature (UHT), estabelece que esse leite deve

Page 12: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

14

ser submetido a tratamento térmico em circuito fechado, em média de 140oC de 1s a 4s, seguido

de resfriamento a 32oC e esse leite, obrigatoriamente, deverá ser homogeneizado. Os parâmetros

microbiológicos estabelecidos para os tipos de leite cru estão contidos na Tabela 2 e a Tabela 3

contém os critérios microbiológicos para os leites tipos A, B, Pasteurizado e UAT (BRASIL,

2002; BRASIL, 1997).

Tabela 2.

Critérios para Contagem Padrão em Placas (CPP) e de Células Somáticas (CS)

para os leites tipos A, B e cru refrigerados.

Critério Tipo A

refrigerado

Tipo B

refrigerado

Cru refrigerado

CPP (UFC/mL)) 104

5,0x105

7,5x105

CCS (CS/mL) 6,0x105 6,0x105 7,5x105

Fonte: BRASIL,2002.

Tabela 3.

Critérios microbiológicos para os leites tipos A, B e pasteurizado.

Critério Tipo A Tipo B Pasteurizado UAT

Contagem Padrão

em Placas (CPP)

n=5; c=2

m=5x102

M= 1x103

n=5; c=2

m=4x104

M= 8x104

n=5; c=2

m=4x104

M= 8x104

n=5; c=0 m≤

100

Coliformes a 35oC n=5; c=0; m<1

n=5; c=2

m=2; M=5

n=5; c=2

m=2; M=4

--

Coliformes a 45oC n=5; c=0; m=aus.

n=5; c=1;

m=1; M=2

n=5; c=1

m=1; M=2

--

Salmonella spp. n=5; c=0; m=aus. n=5; c=0;

m=aus.

n=5; c=0; m=aus. --

Fonte: BRASIL,2002.

Page 13: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

15

5. IMPORTÂNCIA DOS MEDICAMENTOS VETERINÁRIOS NA

BOVINOCULTURA LEITEIRA

A produção de um leite de qualidade tem como premissa os cuidados com a saúde do

rebanho, já que a maioria das doenças nos bovinos produtores de leite interfere direta ou

indiretamente na produção leiteira da propriedade. A fim de evitar a ocorrência dessas doenças e

o prejuízo econômico decorrente das mesmas, são utilizados alguns medicamentos para tratar o

rebanho de forma preventiva e alguns para tratamento terapêutico.

Febre aftosa, brucelose, tuberculose, raiva e carbúnculo sintomático, são doenças que

requerem vacinação do rebanho. As vermifugações devem ser realizadas em esquemas de acordo

com a região, com a utilização de produtos que atuem sobre a maioria dos vermes,

principalmente em animais e cria e recria (MARTINS, 2005).

Para tratamento preventivo de cascos, que apresentam mais problemas se a criação de

bovinos for intensiva, pode ser utilizado pedilúvio com solução de sulfato de cobre e formol a 5%.

Quanto ao tratamento terapêutico, realiza-se limpeza cirúrgica da ferida e curativos, evitando a

contaminação. Carrapaticidas são utilizados para evitar a espoliação dos animais e a Tristeza

Parasitária Bovina. O tratamento para berne geralmente é feito durante a primavera, para reduzir

a população de moscas durante o verão (MARTINS, 2005).

As doenças provocadas por micro-organismos causam enormes prejuízos para a produção

leiteira, devendo ser tratadas da forma correta a fim de evitar a contaminação do leite e sua

transmissão para o consumidor. Dentre os micro-organismos que podem ser veiculados pelo leite

ao homem, de origem endógena, que passam do animal para o leite, são predominantes, em

condições higiênicas adequadas, Micrococcus, Corynebacterium, Streptococcus e lactobacilos

saprófitas do úbere e canais galactóforos (JAY, 2005 apud ALMEIDA, 2010).

Dentre os causadores de mastite, doença muito frequente nos rebanhos de bovinos

leiteiros, podem ser encontrados Corynebacterium SSP, Staphylococcus aureus, Staphyilococcus

spp, Streptococcus agalactiae e Streptococcus spp (BIRGEL JUNIOR, 2006). O tratamento

preventivo de mastites deve ser feito no período em que a vaca não esteja produzindo leite,

período seco, a fim de aumentar a eficácia do tratamento e evitar a passagem de resíduos de

antibióticos para o leite (BRASIL, 2009 apud SILVA, 2009).

Para tratamento de infecções provocadas por esses micro-organismos, são utilizados

antibióticos, que são substâncias químicas capazes de impedir as funções vitais de determinados

Page 14: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

16

micro-organismos, de forma temporária ou permanente (BRASL, 1999a apud ARAÚJO, 2010).

Os antibióticos mais utilizados em animais de produção, segundo MITCHELL et al (1998 apud

ARAUJO, 2010), são a penicilina e cefalosporinas ( β-lactâmicos), oxitetraciclina e tetraciclina

(tetraciclinas), a sulfametazina (sulfonamidas), a eritromicina, a estreptomicina, gentamicina e

neomicina (macrolídeos).

Os antibióticos também são utilizados, em doses subterapêuticas, como aditivos na ração

e água para aumentar o ganho de peso e melhorar a conversão alimentar dos animais (BRITO e

PORTUGAL, 2003). Seu uso deve ser feito de forma controlada, sempre com prescrição

veterinária, a fim de evitar a passagem de seus resíduos para o leite e também diminuir as

chances de ocorrência de resistência bacteriana.

6. BOAS PRÁTICAS NA PRODUÇÃO LEITEIRA

Prevenir é a melhor solução para evitar problemas sanitários, gastos com medicamentos,

queda na produção leiteira e descarte de leite por estar impróprio para o consumo humano. Para

realizar essa prevenção da forma correta, deve-se fazer uso das boas práticas agropecuárias.

Segundo o Guia de Boas Práticas Agrícolas Leiteiras (FAO, 2011), as boas práticas na

produção leiteira devem garantir que o leite e seus produtos sejam seguros e adequados ao seu

destino. Para isso, o estabelecimento de boas práticas deve ocorrer no âmbito da saúde do animal,

da ordenha higiênica, da nutrição adequada dos animais leiteiros, da garantia do bem estar animal,

dos cuidados com o ambiente em que ocorre a produção, da gestão sócio-econômica.

Em relação à saúde do animal, as boas práticas devem garantir o estabelecimento de um

rebanho livre de doenças, evitar a entrada de novas doenças no rebanho através de novos animais,

possuir um bom plano de saúde para o rebanho e fazer uso dirigido dos medicamentos

veterinários aplicados nos animais, respeitando os períodos de carência, utilizando apenas

medicamentos registrados e aplicando a dose necessária para a doença específica.

Quanto à ordenha higiênica, os cuidados que devem ser observados são: coleta de leite

apenas de animais saudáveis, evitando a contaminação do leite e dos equipamentos de ordenha; a

higienização dos materiais utilizados durante a ordenha e o armazenamento higiênico do leite

após a ordenha.

Em relação à alimentação, os animais devem receber comida e água livres de

contaminantes, em quantidade adequada e com a qualidade nutricional necessária para cada tipo

Page 15: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

17

de animal; o armazenamento do alimento deve ser feito de forma correta e deve ser garantida a

rastreabilidade desse alimento.

O bem estar deve ser garantido evitando que o animal apresente medo, fome, sede,

desnutrição, maus tratos, doença, desconforto e proporcionando condições que permitam que ele

expresse seu comportamento natural.

A questão ambiental deve ser tratada com a adoção de um sistema de produção

ambientalmente sustentável, com destinação adequada do lixo produzido e utilização de práticas

que não causem impactos negativos ao meio ambiente. Por último, as boas práticas também

devem ocorrer com uma boa gestão dos recursos humanos, garantindo condições adequadas e

seguras de trabalho, bem como uma viabilidade financeira da propriedade.

7. RISCOS ASSOCIADOS À PRESENÇA DE RESÍDUOS DE

ANTIMICROBIANOS NO LEITE E DERIVADOS

Os resíduos de antibióticos no leite são um risco por não serem inativados por nenhum

tratamento tecnológico do leite, daí a importância das boas práticas agrícolas na sua produção,

como citado anteriormente.

A definição de risco, segundo o Codex Alimentarius (2003 apud ANVISA, 2008) é

“Função da probabilidade da ocorrência de um efeito adverso à saúde e da gravidade desse efeito,

causado por um perigo ou perigos existentes no alimento.”

Os resíduos de medicamentos, que são subprodutos da biotransformação dos antibióticos,

podem passar para o leite independente da via de aplicação do medicamento (oral, tópica,

alimentar, intramamária, intrauterina ou intramuscular), pois são absorvidos pelas células de

secreção do alvéolo da glândula mamária e passam para o leite produzido nos quatro quartos do

úbere do animal medicado (FONSECA & SANTOS, 2001 apud SILVA, 2009).

Entre os riscos que os resíduos de antibióticos podem trazer à saúde humana, estão:

carcinogenicidade, toxicidade, desencadeamento de fenômenos alérgicos, desequilíbrio da

microbiota intestinal e selecão de bactérias resistentes (ARAÚJO 2010; FOLLY e MACHADO,

2001).

Segundo Tozzeti et al (2008, apud ARAÚJO, 2010), a presença de antimicrobianos,

mesmo em níveis baixos, pode prejudicar a saúde dos seus consumidores. Araújo (2010) cita

ainda, baseado em experimentos realizados com animais, que os nitrofuranos podem causar o

Page 16: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

18

surgimento de tumores malignos no homem e o cloranfenicol pode causar anemia aplástica em

indivíduos susceptíveis.

Também podem ocorrer efeitos teratogênicos em fetos e embriões de mulheres que

consomem leite contendo resíduos de antibióticos, segundo Silva (2009).

Nascimento et al (2001) citam casos de reações alérgicas dos tipos asmática, digestiva e

cutânea, após consumo de leite e realização de teste negativo para alergia a leite e positivo para

alergia à penicilina.

Quanto aos prejuízos para as indústrias, os resíduos de antibióticos afetam o processo de

produção dos derivados de leite, principalmente por inibição da atividade das bactérias ácido-

láticas, interferência nos processos de fermentação e formação de odores desagradáveis em

produtos lácteos, especialmente nos queijos e fermentados (FOLLY e MACHADO, 2001). Na

tabela 4 são descritos os principais efeitos da presença de resíduos de antibióticos em leite

utilizado na produção de queijos.

Diversas pesquisas têm relatado a ocorrência de resíduos de antibióticos em leite cru e

pasteurizado. Nero et al (2007) analisaram 210 amostras de leite cru coletadas em propriedades

leiteiras de quatro regiões do Brasil, sendo 50 de Botucatu (SP), 47 de Viçosa (MG), 50 de

Pelotas (RS) e 63 de Londrina (PR), sendo que foram encontradas 24 amostras positivas para β-

lactâmicos, sulfonamidas, gentamicina e tilosina, através de análise com o Kit Charm testTM

.

Folly e Machado (2001) analisaram 300 amostras de leites tipo C e Integral, já embaladas,

da região norte do estado do Rio de Janeiro, utilizando o Kit “Delvotest P” e o “βL Snap Test” , e

encontraram 13 resultados positivos.

Macedo e Freitas (2009) encontraram resíduos de antibióticos em 11 amostras de leite,

dentre 103 analisadas, provenientes de propriedades leiteiras, usinas de beneficiamento e varejo

de Belém. As análises foram realizadas com a utilização dos Kit’s: BL Snap Test para

Tetraciclina, Charm SL Test e Copan CH ATK, para análise de beta-lactâmicos, tetraciclinas e

sulfonamidas.

Nascimento et al (2001) analisaram 96 amostras de leite pasteurizado dos tipos A, B, C e

integral, de seis marcas diferentes, provenientes de Piracicaba (SP), por meio de ensaios

microbiológicos, encontrando 48 amostras com resíduos de antibióticos, sendo 33 com resíduos

de β-lactâmicos.

Page 17: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

19

Além desses, outros trabalhos citam a presença de resíduos de antimicrobianos em leite:

24,26% em amostras de leite cru provenientes da região metropolitana de Belo Horizonte

(TENÓRIO, 2007), 9,95% em amostras de leite pasteurizado padronizado analisadas no estado de

Goiás, 38,5% em amostras de leite pasteurizado tipo C analisadas em Salvador e 33% em

amostras de leite cru analisadas no Triângulo Mineiro (SILVA, 2009).

Em pesquisa realizada no Distrito Federal foram analisadas 19 amostras de leite cru e 95

de leites pasteurizados por meio do teste Eclipse 50 (Zeu Inmnotec S.L., Zaragoza, Espanha),

sendo encontrada uma amostra de leite cru positiva para a presença de resíduos de antibióticos

(SILVA, 2010).

Entretanto, os resultados do Plano Nacional de Controle de Resíduos em Produtos de

Origem Animal também indicam pouco risco para o consumidor de leite cru, já que não foram

encontrados resultados de violações aos Limites Máximos de Resíduos (LMR`s) para resíduos de

antimicrobianos nas amostras de leite analisadas nos últimos anos (SILVA, 2009; BRASIL, 2010;

BRASIL, 2011). Também, os resultados do Programa de análises de Medicamentos Veterinários

em Produtos de Origem Animal (ANVISA, 2009) indicam que o risco de exposição aos resíduos

de antibióticos devido à ingestão de leite UHT e leite em pó é baixo.

Tabela 4. Defeitos na produção de queijos, decorrentes da presença de resíduos antibióticos no leite.

Etapa Defeitos

Aquecimento a 100 °C. Ausência de coagulação do leite.

Cozimento e agitação prolongada. Massa úmida e pastosa, não há produção de acidez dentro do grão.

Dessoragem e prensagem.

Queijo apresenta-se macio demais, soltando soro em quantidade

anormal.

Fermentação

pH alto; para o Mussarela e o Provolone, a massa demora a filar; risco

de formação de gás por coliforme é maior, pois é mais resistente aos

resíduos de antibióticos.

Maturação Queijo não matura adequadamente, apresentando-se borrachento e com sabor e aroma fracos.

Fonte: FURTADO, 1999 apud BRITO e PORTUGAL, 2003.

Page 18: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

20

8. MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO PARA PESQUISA DE

RESÍDUOS DE ANTIBIÓTICOS EM LEITE

Atualmente, estão disponíveis no mercado diversos métodos para pesquisa de resíduos de

medicamentos veterinários em alimentos, sendo que os utilizados pelo MAPA, segundo a

Instrução Normativa 42/1999, são por ensaio imunoenzimático (ELISA), cromatografia líquida

de alta eficiência (CLAE), cromatografia por camada delgada (CCD), densitometria (DST),

cromatografia Gasosa (CG) e espectrofotometria de absorção atômica (EAA) (BRASIL, 1999).

Para pesquisa de resíduos de antibióticos em leite, os métodos disponíveis são a

cromatografia gasosa, cromatografia em camada delgada, cromatografia líquida em alta pressão,

testes imunológicos, microbiológicos e imunoenzimáticos (KONDO, 2010 apud ARAÚJO, 2010).

Os testes mais utilizados pelas indústrias, por apresentarem resultados em pouco tempo, são Kit`s

comerciais de detecção dos resíduos, que podem funcionar através dos seguintes métodos:

microbiológicos, físico-químicos ou imunoenzimáticos (RAMIREZ et al, 2001 apud TENORIO,

2007).

Os testes microbiológicos, que funcionam por inibição microbiana, apresentam um meio de

cultura, uma cultura de micro-organismo teste e um indicador de pH, sendo que na presença de

resíduos de antibióticos, após inoculação da amostra, não haverá multiplicação do micro-

organismo, não ocorrendo alteração do meio. Como exemplo de testes que utilizam esse princípio

pode-se citar: Teste de Disco, Charm Farm Test, COPAN ATK P&S Microplate, Delvotest- P.

Esse tipo de teste não tem apresentado bons resultados para detecção de tetraciclinas em leite,

para os LMR`s adotados pela Legislação Brasileira (LAGE, 2010).

Os testes imunoenzimáticos detectam presença de resíduos de antibióticos no leite por meio

de reações nas quais ocorre ligação do resíduo de antimicrobiano a proteínas conjugadas com

receptor específico observando-se alteração da coloração no círculo de ativação da amostra,

sendo que dentre os mais utilizados, destacam-se o SNAPduo*Beta-Tetra e as diversas

apresentações da linha CHARM TEST (ARAÚJO, 2010).

A espectrofotometria de massa consiste na geração de íons com base em compostos

orgânicos ou inorgânicos por meio de um método de ionização apropriado, em seguida, os íons

são separados por meio de sua relação massa-carga em um analisador de massas e detectados

qualitativamente ou quantitativamente por meio de um detector. A magnitude do sinal elétrico é

convertida por meio de um processador de dados e então é gerado um espectro correspondente à

Page 19: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

21

magnitude do sinal elétrico produzido (SOCIEDADE BRASILEIRA DE ESPECTROMETRIA

DE MASSAS, 2011).

A técnica de referência para detecção de resíduos em leite, na maioria dos casos, é a LC-MS-

MS (Ferreira et al, 2009), porém, trata-se de um método confirmatório, não utilizado em triagem

por ser caro e requerer mão de obra altamente qualificada.

9. CONSIDERAÇÕES FINAIS

A produção de leite no Brasil tem uma grande importância econômica, tanto para o comércio

nacional quanto o internacional. Para que o leite seja um produto de qualidade, é necessário que

sejam seguidas as boas práticas de produção, dentre elas, o respeito ao período de carência e

descarte de leite contaminado com resíduos de antibióticos, garantindo segurança na alimentação

dos consumidores de leite, que, em sua maior parte, fazem parte de grupos imunologicamente

mais suscetíveis, como idosos e crianças.

Page 20: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

22

REFERÊNCIAS

ALMEIDA, G. M. Qualidade microbiológica do leite cru refrigerado no município de Ouro

Preto do Oeste – Rondônia- Brasil. 2010. 117 f. Tese (Doutorado em Ciências da Saúde) –

Universidade de Brasília, Brasília, 2010.

ARAÚJO, M. M. P. Validação de métodos imunoenzimáticos para determinação de resíduos

de antimicrobianos no leite. 2010. 46 f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) –

Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, 2010.

ANVISA. Perspectiva sobre a análise de risco na segurança dos alimentos. Curso de

sensibilização. Rio de Janeiro: Área de Vigilância Sanitária, prevenção e controle de Doenças,

OPAS/OMS, 2008.

BIRGEL JUNIOR, E. H. Características físico-químicas, celulares e microbiológicas do leite

de bovinos das raças Holandesa, Girolando e Gir, criados no estado de São Paulo. 2006. 335

f. Tese (Livre Docência) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2006.

BRASIL. Instrução Normativa n. 42, de 20 de dezembro de 1999. Altera o Plano Nacional de

Controle de Resíduos em produtos de origem animal – PNCR e os Programas de Controle de

Resíduos em Carne – PCRC, Mel – PCRM, Leite – PCRL e Pescado – PCRP. In: BRASIL.

Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Diário Oficial da União, Brasília, 22

dez.,1999.

BRASIL. Instrução Normativa n° 51, de 18 de setembro de 2002. Aprova os Regulamentos

Técnicos de Produção, Identidade e Qualidade do Leite tipo A, do Leite tipo B, do Leite tipo C,

do Leite Pasteurizado e do Leite Cru Refrigerado e o Regulamento Técnico da coleta de Leite

Cru Refrigerado e seu transporte a Granel. In: BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e

Abastecimento. Diário Oficial da União, Brasília, 20 set. 2002.

BRASIL. Instrução Normativa n° 06, de 16 de março de 2010. Publica Resultados do

Acompanhamento dos Programas de Controle de Resíduos e Contaminantes em carnes (Bovina,

Suína, Aves e Equina), Leite, Ovos, Mel e Pescado, do exercício de 2009, na forma dos anexos à

presente Instrução Normativa, em conformidade com a Instrução Normativa n°14, de 25 de maio

de 2009. In: BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Diário Oficial da

União, Brasília, 23 mar. 2010.

BRASIL. Instrução Normativa n° 06, de 25 de fevereiro de 2011. Publica Resultados do

Acompanhamento dos Programas de Controle de Resíduos e Contaminantes em carnes (Bovina,

Suína, Aves e Equina), Leite, Ovos, Mel e Pescado, do exercício de 2010. In: BRASIL.

Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Diário Oficial da União, Brasília, 28 fev.

2011.

BRITO, J. R. F.; PORTUGAL,J. A. B. Diagnóstico da qualidade do leite, impacto para a

indústria e a questão dos resíduos de antibióticos. 1°Ed. Juiz de Fora: EMBRAPA Gado de

Leite, 2003.

Page 21: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

23

FAS. Post reports, official statistics, and office research. Disponível em:

<http://www.fas.usda.gov/psdonline/circulars/dairy.pdf>. Acesso em: 18 out. 2011.

FERREIRA, M. A. Controle de qualidade físico químico em leite fluido. Brasília:

Universidade de Brasília, 2007. 17 p. Dossiê Técnico.

FERREIRA, M. A. Análises microbiológicas para leite fluido. Brasília: Universidade de

Brasília, 2007. 18 p. Dossiê Técnico.

FERREIRA, C.R. et al. Princípios e aplicações da espectrometria de massas em produção animal.

In: Simpósio de Biologia Molecular Aplicada à Produção Animal, 2., 2009, São Carlos. Anais...

São Carlos: Embrapa Pecuária Sudeste, 2009, p.109-136. Disponível em:

<http://www.thomson.iqm.unicamp.br/Palestra9_Christina.pdf>.

FOLLY M.M., MACHADO, S. C. A. Determinação de resíduos de antibióticos, utilizando-se

métodos de inibição microbiana, enzimático e imuno-ensaios no leite pasteurizado

comercializado na região Norte do estado do Rio de Janeiro, Brasil. Ciência Rural, Santa Maria,

v. 31, n. 1, p.95-98, 2001.

Food and Agriculture Organization of the United Nations FAO, Animal production and Health.

Guide to good dairy farming practice. Rome: FAO; 2006. Disponível em:

<http://www.fao.org/docrep/012/a0822e/a0822e.pdf>. Acesso em 06/09/2011.

Food and Agriculture Organization of the United Nations FAO, Animal production and Health.

Guide to good dairy farming practice. Rome: FAO; 2011. Disponível em:

<http://www.fao.org/docrep/014/ba0027e/ba0027e00.pdf>. Acesso em: 05/12/2011.

IDEXX Laboratories. Folheto SNAP DUO®. 2010. Disponível em:

<http://www.verusmadasa.com.br/produtos_pdf/snapduo.pdf>. Acesso em: 17 de outubro. 2011.

LAGE, A. D. Avaliação de Kits de inibição microbiana para a detecção de resíduos de

antimicrobianos em diferentes concentrações no leite. 2010. 44f. Dissertação (Mestrado em

Ciência Animal) – Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, 2010.

LEITE, J.L.B et al. Comércio Internacional de Lácteos. Juiz de Fora: Templo, 2008.

MACEDO, L. C. S; FREITAS, J. A. Ocorrência de Resíduos de Antimicrobianos em Leite.

Ciências Agrárias, Belém, 52, p.147:157, julho-dezembro, 2009.

MARTINS, C.E et al. Aspectos técnicos, econômicos, sociais e ambientais da atividade

leiteira. Juiz de Fora: EMBRAPA Gado de Leite, 2005.

NASCIMENTO, G. G. F., et al. Ocorrência de resíduos de antibióticos no leite comercializado

em Piracicaba, SP. Revista Nutrição, Campinas, 14 (2), 119-124, maio/agosto, 2001.

Page 22: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

24

NERO, L.C. et al. Resíduos de antibióticos em leite cru de quatro regiões leiteiras no Brasil.

Ciência e Tecnologia de Alimentos, Campinas, 27(2), 391:393, abril-junho, 2007.

ORGANIZAÇÕES RURAIS E AGROINDUSTRIAIS. Lavras: Universidade Federal de Lavras,

v. 8, n.3, p. 368-377, 2006.

PERIN, O. R. et al. Percepção de qualidade no processo produtivo do leite: um estudo de caso no

Rio Grande do Sul. Organizações Rurais e Agroindustriais, Lavras, v.11, n.3, 2009.

SOCIEDADE BRASILEIRA DE ESPECTROMETRIA DE MASSAS. Espectrometria de massas:

princípios e aplicações. Disponível em: <http://www.espectrometriademassas.com.br/>. Acesso

em: 09/12/2011.

SILVA, P.H.C. Qualidade do leite produzido e beneficiado no Distrito Federal (BRASIL)

quanto à adequação à Instrução Normativa n °51/2002. 2010.81f. Dissertação (Mestrado em

Ciências Animais) – Universidade de Brasília, 2010.

SILVA, T. S. Abordagem crítica sobre o Programa Nacional de Controle de Resíduos e

Contaminantes em Leite com ênfase em antibióticos. 2009. 39f. Seminário (Mestrado em

Ciência Animal) – Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2009.

TENÓRIO, C. G. M. S. C. Avaliação da eficiência do teste COPAN (Microplate e Single) na

detecção de resíduos de antimicrobianos no leite. 2007. 59f. Dissertação (Mestrado em Ciência

Animal) – Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, 2007.

USDA. Dairy: World Market and Trade Circular Archives. Disponível em:

<http://www.fas.usda.gov/dairy_arc.asp >. Acesso em 08 de agosto. 2011.

YAMAGUCHI, L.C.T., et al. Pecuária de Leite: Novos Desafios. Juiz de Fora: EMBRAPA

Gado de Leite, 2005.

Page 23: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

25

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Analisar o perigo químico pela presença de resíduos de antibióticos nos leites, cru,

pasteurizado e UHT, produzidos e comercializados no Distrito Federal.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Quantificar a presença de micro-organismos dos grupos dos aeróbios mesófilos e

coliformes em amostras de leite cru;

Avaliar a qualidade higiênica e sanitária dos leites pasteurizado e UAT, por meio

da pesquisa de micro-organismos indicadores;

Quantificar a presença de micro-organismos psicrotróficos em amostras de leites

cru, pasteurizado e UAT;

Avaliar a correlação entre as análises qualitativas de lactofermentação e de teste

imunoenzimático para a detecção de resíduos de inibidores em amostras de leite

cru e beneficiado.

Page 24: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

26

AVALIAÇÃO DA PRESENÇA DE RESÍDUOS DE ANTIBIÓTICOS EM LEITE CRU E

BENEFICIADO NO DISTRITO FEDERAL.

INTRODUÇÃO

O Brasil está entre os 10 maiores produtores no mercado da pecuária leiteira,

proporcionando a geração de renda para os produtores e crescimento significativo na atividade

leiteira. Isso porque o leite é um produto de grande importância nutricional, essencial para

determinadas faixas da população e por seus derivados fazerem parte da cesta básica.

A manutenção das características do leite, assim como a sua inocuidade e seu valor

nutricional, são tópicos de preocupação tanto para a indústria quanto para os órgãos reguladores e

o que se observa em pesquisas realizadas no Brasil é que, no geral, a matéria-prima chega à

indústria com diversos parâmetros alterados, indicando deficiências na produção e a oferta de

produtos para o consumo abaixo da qualidade estabelecida pela legislação vigente (MARCÍLIO

et al., 2009; TEBALDI et al., 2008; ARRUDA et al., 2007; ROCHA et al., 2006; NERO et al.,

2005).

A ausência de resíduos de medicamentos veterinários e contaminantes nos alimentos,

como garantia de segurança alimentar, é um assunto relativamente novo no Brasil, porém muito

tem sido discutido e exigido pelo comércio internacional. Os países que se destacam no comércio

internacional de alimentos possuem um programa de controle desses resíduos e contaminantes,

com limites máximos de resíduos (LMR`s) permitidos de substâncias veterinárias nos alimentos

de origem animal bem definidos.

Os LMR`s são definidos internacionalmente pela Comissão do Codex Alimentarius e

visam o controle de substâncias químicas (antibióticos, hormônios, pesticidas e parasiticidas)

usados na produção animal (BRITO, 2003).

No Brasil, o controle da segurança do leite em relação à presença de resíduos é realizado

por meio de dois programas: o Programa de Análise de Resíduos de Medicamentos Veterinários

em Alimentos de Origem Animal (PAMVET-ANVISA/MS), que realiza o controle da segurança

alimentar no produto final, e o Programa Nacional de Controle de Resíduos (PNCR-MAPA), que

avalia a segurança da cadeia agroalimentar quanto à presença de resíduos e contaminantes

inorgânicos na matéria prima.

Page 25: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

27

A contaminação do leite por substâncias químicas, em especial por antibióticos, também

foi verificada por outros autores em pesquisas realizadas em diferentes regiões brasileiras (Nero

et al., 2007; Emanuelli et al., 2005; Nero et al., 2004); entretanto, ainda não há pesquisas

publicadas sobre ocorrência de perigos químicos associados ao leite produzido e beneficiado

comercializado no Distrito Federal, justificando-se, plenamente, a realização dessa pesquisa.

MATERIAL E MÉTODOS

Coleta das amostras

Foram coletadas 10 amostras de leite cru (n=10) provenientes de propriedades leiteiras

localizadas no Distrito Federal, sendo nove de leite armazenado em latões e uma de tanque de

resfriamento, 10 de leite pasteurizado e 10 de leite UAT adquiridas no comércio local,

totalizando n=30. As amostras de leite cru e pasteurizado foram transportadas e mantidas sob

refrigeração até o seu processamento no Laboratório de Análises de Leite e Derivados

(LABLEITE/FAV).

Processamento das amostras

Tratamento das amostras

Após homogeneização foram coletados 5 mL de cada amostra, que foram mantidas

congeladas, para as análises de resíduos de antibióticos. Em seguida, foram realizadas as

diluições decimais seriadas, em solução salina 0,85%, para as análises microbiológicas. As

amostras de leite cru e pasteurizado eram analisadas imediatamente após sua chegado ao

laboratório, e as amostras de leite cru eram incubadas a 35oC durante sete dias, antes das análises

microbiológicas, conforme preconizado pela Portaria 370/1997 (BRASIL, 1997).

Análises microbiológicas

As análises microbiológicas foram realizadas conforme metodologias preconizadas pela

Instrução Normativa 62/2003 (BRASIL,2003). Para contagem de micro-organismos Aeróbios

Mesófilos (AM), as amostras foram semeadas em Ágar Padrão para Contagem (Acumedia,

Page 26: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

28

Lasing, Michigan, EUA) e incubadas a 35°C durante 48 horas. Os resultados obtidos foram

expressos em Unidades Formadoras de Colônias (UFC/mL).

Para a pesquisa de micro-organismos do grupo dos coliformes pela técnica de tubos

múltiplos, as diluições selecionadas foram semeadas em Caldo Bile Verde Brilhante 2% Lactose

(CBVBL) para enumeração de Coliformes Totais (CT) com incubação a 35oC durante 24-48horas;

a partir dos tubos positivos no CBVBL, as amostras foram semeadas para enumeração de

Coliformes Termotolerantes (CTt) em Caldos EC e Triptona (Acumedia, Lasing, Michigan, EUA)

com incubação a 45oC durante 24-48horas. Os resultados obtidos foram expressos em Número

Mais Provável (NMP/mL).

Para pesquisa de micro-organismos psicrotróficos (PSI) as diluições selecionadas foram

semeadas em superfície e em duplicata em Ágar Padrão de Contagem (Neogen/Acumedia, Lasing,

Michigan, EUA) e incubadas a 10ºC por sete dias. Os resultados foram expressos em Unidades

Formadoras de Colônia (UFC/mL).

Análise de lactofermentação

Para realização dessa análise, 10 mL de cada amostra foram transferidos para tubos

esterilizados e incubados a 35oC/24 horas; após esse período, os coágulos formados eram

classificados em esfacelado, caseoso, gelatinoso ou líquidos (sem formação de coágulo).

Análises de resíduos de antibióticos

Para pesquisa de antibióticos, utilizou-se o teste SNAPduo* Beta-Tetra (IDEXX

Laboratories, Maine, USA) em todas as amostras, conforme recomendações do fabricante; esse

teste detecta resíduos de penicilina G, tetraciclina, clortetraciclina e oxitetraciclina, em níveis

iguais ou inferiores aos limites máximos estipulados para resíduos em leite de vaca, conforme

quadro abaixo:

Page 27: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

29

Quadro 1

LMR`s de Antibióticos adotados pelo MERCOSUL, Codex e União Européia e detectados pelo Kit

SNAPduo* Beta-Tetra

Resíduo

LMR`s detectados

pelo SNAPduo*

Beta-Tetra

LMR `s

estabelecidos pelo

Mercosul

LMR`s

estabelecidos

pelo CODEX

LMR`s

estabelecidos

pela EU

Penicilina G 4 ppb 4 ppb 4 ppb 4 ppb

Tetraciclina 50 ppb 100 ppb 100 ppb 100 ppb

Clortetraciclina 100 ppb 100 ppb 100 ppb 100 ppb

Oxitetraciclina 50 ppb 100 ppb 100 ppb 100 ppb

Fonte: IDEXX Laboratories (2010), Codex Alimentarius, FDA (2010).

Page 28: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

30

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Nessa pesquisa, todas as amostras de leite analisadas apresentaram resultados negativos

para resíduos de antibióticos. Nas amostras de leite cru, esses resultados podem indicar respeito

às boas práticas agropecuárias na produção leiteira, pois de acordo com Andrew et al (2009), se a

aplicação de antibióticos ocorrer apenas no período em que a vaca não está produzindo leite e for

respeitado o período de carência indicado pelo fabricante, será baixo o risco de passagem de

resíduos de antibióticos para o leite.

Nas amostras de leites beneficiados, a ausência de resíduos de antibióticos pode indicar

eficiência no controle de qualidade das indústrias do Distrito Federal e na fiscalização.

Entretanto, não se deve descartar a possibilidade de efeito diluição, já que esses leites são

provenientes do conjunto de grandes volumes, que poderia resultar em limites não detectáveis.

Estes resultados diferem dos encontrados por outros autores. Nero et al (2007) analisaram

210 amostras de leite cru coletadas em propriedades leiteiras de quatro regiões do Brasil, sendo

50 de Botucatu (SP), 47 de Viçosa (MG), 50 de Pelotas (RS) e 63 de Londrina (PR), sendo que

foram encontradas 24 amostras positivas para β-lactâmicos, sulfonamidas, gentamicina e tilosina,

através de análise com o Kit Charm testTM

.

Macedo e Freitas (2009) encontraram resíduos de antibióticos em 11 amostras de leite,

dentre 103 analisadas, provenientes de propriedades leiteiras, usinas de beneficiamento e varejo

de Belém. As análises foram realizadas com a utilização dos Kit’s: BL Snap Test para

Tetraciclina, Charm SL Test e Copan CH ATK, para análise de beta-lactâmicos, tetraciclinas e

sulfonamidas.

Além desses, diversas pesquisas relatam a presença de resíduos de antimicrobianos em

leite: 24,26% em amostras de leite cru provenientes da região metropolitana de Belo Horizonte

(TENÓRIO, 2007), 9,95% em amostras de leite pasteurizado padronizado analisadas no estado de

Goiás, 38,5% em amostras de leite pasteurizado tipo C analisadas em Salvador e 33% em

amostras de leite cru analisadas no Triângulo Mineiro (SILVA, 2009).

Em pesquisa realizada no Distrito Federal, foram analisadas 19 amostras de leite cru e 95

de leites pasteurizados por meio do teste Eclipse 50 (Zeu Inmnotec S.L., Zaragoza, Espanha),

sendo encontrada apenas uma amostra de leite cru positiva para a presença de resíduos de

antibióticos (SILVA, 2010).

Page 29: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

31

A Tabela 1 contém os resultados obtidos nas análises microbiológicas e da prova de

lactofermentação das amostras de leite analisadas (n=30). Com relação à análise de

lactofermentação, todas as amostras de leites crus e pasteurizados, apresentaram formação de

coágulos e, nas amostras de leite UAT, como esperado, não ocorreu formação de coágulos já que

esse leite passa por tratamento térmico que destrói 100% das formas bacterianas vegetativas. A

análise de lactofermentação é considerada como qualitativa para a presença de substâncias

inibidoras da fermentação, como os antibióticos, pois na ausência de fermentação natural, pode-

se suspeitar da presença de inibidores.

Na avaliação dos coágulos formados, observou-se uma predominância de coágulos

classificados como esfacelados (65%), seguido do caseoso (25%) e gelatinoso (10%). No coágulo

do tipo esfacelado observa-se produção de gás e geralmente é proveniente de fermentação

pseudolática devido à presença de coliformes; no tipo caseoso o coágulo apresenta-se contraído

de um lado ou em todo o seu contorno, o soro é claro ou leitoso e com odor desagradável, sendo

associado à fermentação proteolítica causada por Proteus spp., Pseudomonas spp.,

Achromobacter spp, Flavobacterium spp e Clostridium spp.; no tipo gelatinoso o coágulo

apresenta-se uniforme e geralmente associado à fermentação láctica por Lactobacillus spp,

Leuconostoc spp., Streptococcus cremoris e S. lactis, por exemplo. (FERREIRA, 2007)

Esses resultados são semelhantes aos relatados em outras pesquisas, que também

demonstraram maior ocorrência de coágulos do tipo esfacelado, confirmando o efeito deletério

das enzimas proteolíticas termoresistentes no produto final (ZOCCHE et al.,2002; SILVA et al.,

2008).

Ainda, a partir dos resultados obtidos na pesquisa de antibióticos por meio do teste

imunoenzimático SNAPduo*Beta-Tetra e da prova da lactofermentação, observou-se 100% de

resultados coincidentes, já que nenhuma amostra de leite cru e pasteurizado apresentou-se

positiva no teste e todas apresentaram formação de coágulo.

Com relação às análises microbiológicas, os resultados obtidos demonstraram que 20%

das amostras de leite cru, 50% das de leite pasteurizado e 100% de leite UAT apresentaram-se de

acordo com os padrões estabelecidos pela legislação vigente quanto a contagem de AM. Os

micro-organismos AM são indicadores da qualidade higiênico-sanitária em alimentos, e altas

contagens no leite indicam práticas de produção inadequadas, conservação em temperaturas altas

e podem resultar em redução na vida de prateleira do produto final, sendo importante ressaltar

Page 30: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

32

que todos os micro-organismos patogênicos em alimentos são mesófilos (Franco & Landgraf,

2005).

Para CT não há critério microbiológico estabelecido para leite cru, entretanto, duas

amostras (20%) apresentaram altas contaminações; para leite pasteurizado, 50% das amostras

apresentaram-se em desacordo com o padrão estabelecido e o leite UAT apresentou 100% das

amostras em concordância com o padrão vigente. Os CT, por serem fermentadores da lactose,

quando em altas contagens causam acidez excessiva e perda da qualidade nutricional (Franco &

Landgraf, 2005), além de riscos de toxinfecções e zoonoses. Nessa pesquisa, nenhuma amostra

apresentou contaminação por CTt.

Os resultados obtidos nas análises microbiológicas das amostras de leites cru e

pasteurizado não diferem daqueles relatados em diversas pesquisas realizadas, demonstrando que

ainda não se atingiu o padrão de qualidade proposto pela Instrução Normativa 51/2002 (Marcílio

et al., 2009; Ataíde et al., 2008; Tebaldi et al., 2008; Arruda et al., 2007; Martins et al., 2007;

Nero et al., 2007; Arcuri et al., 2006) e os altos níveis de contaminação podem representar risco à

saúde dos consumidores devido a possibilidade de conter de micro-organismos patogênicos.

Na pesquisa de psicrotróficos 40% das amostras de leite pasteurizado apresentaram

contagens que podem ser consideradas em desacordo com o RIISPOA (Brasil, 2008), que

preconiza que a contagem de PSI no leite não deve exceder 10% da contagem de AM observada

na amostra. Esses micro-organismos são produtores de enzimas proteolíticas e lipolíticas e

responsáveis por processos de deterioração da matéria prima e perdas dos componentes sólidos

do leite. Contagens iguais ou maiores de 105 UFC/mL são suficientes para promoverem

alterações significativas pela presença dessas enzimas termoresistentes, comprometendo a

qualidade final do leite e seus derivados (MARTH & STEELE, 2001; SØRHAUG &

STEPANIAK, 1997). As amostras de leite cru apresentaram contagens menores do que 1,0

UFC/mL e uma (10%) amostra de leite UAT apresentou contagem de 10UFC/mL.

Os resultados obtidos indicam que o leite produzido e comercializado no Distrito Federal

não apresenta risco químico, porém, ainda ocorrem falhas na produção que resultam em

contaminações microbianas que representam riscos à saúde do consumidor. São necessários mais

estudos que corroborem os achados nessa pesquisa.

Page 31: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

33

Tabela 1.

Resultados das análises microbiológicas e de fermentação em amostras de leite cru,

pasteurizado e UAT (n=30) colhidas Distrito Federal.

Leites Amostras AM

(UFC/mL)

CT 30°C

(NMP/mL)

PSI

(UFC/mL) Lactofermentação

CTt

(NMP/mL)

Cru

1 1,0x105 3,6 ausência

<1,0 Esfacelado

2 1,9x108 <3,0 ausência <1,0

Esfacelado

3 2,2x106 <3,0 ausência <1,0

Caseoso

4 1,0x107 75 ausência <1,0

Esfacelado

5 5,0x106 3 ausência <1,0

Caseoso

6 1,0x107 <3,0 ausência <1,0

Caseoso

7 2,1x108 >1100 ausência <1,0

Gelatinoso

8 1,0x107 <3,0 ausência <1,0

Esfacelado

9 5,0x105 <3,0 ausência <1,0

Esfacelado

10 1,55x109 3,6 ausência <1,0

Gelatinoso

Pasteurizado

11 5,0 x 103 >1100 ausência

4,0 x10 Esfacelado

12 10 x105 93 ausência

<1,0 Caseoso

13 5,0 x102 <3,0 ausência

1,3 x102 Esfacelado

14 3,4 x104 >1100 ausência

<1,0 Esfacelado

15 4,5 x106 >1100 ausência

1,5 x106 Esfacelado

16 3,0 x103 <3,0 ausência

1,5 x10 Esfacelado

17 8,5 x106 >1100 ausência

1,1 x104 Esfacelado

18 4,5 x103 <3,0 ausência

<1,0 Esfacelado

19 7,8 x104 <3,0 ausência

1,0 x103 Caseoso

20 2,0 x102 <3,0 ausência

<1,0 Esfacelado

UAT

21 ausência ausência ausência <1,0 -

22 ausência ausência ausência <1,0 -

23 ausência ausência ausência <1,0 -

24 ausência ausência ausência <1,0 -

25 ausência ausência ausência 1,0 x 10 -

26 ausência ausência ausência <1,0 -

27 ausência ausência ausência <1,0 -

28 ausência ausência ausência <1,0 -

29 ausência ausência ausência <1,0 -

30 ausência ausência ausência <1,0 -

Page 32: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

34

CONCLUSÕES

Os resultados obtidos permitem concluir que os leites crus e beneficiados comercializados

no Distrito Federal, até o momento dessa pesquisa, não representam riscos químicos pela

presença de resíduos de antibióticos, entretanto, podem representar riscos microbiológicos tendo

em vista a significativa quantidade de amostras com altas contagens microbianas.

Ainda, pode-se concluir que o leite UAT comercializado no Distrito Federal apresenta

qualidade superior quando comparado com o leite pasteurizado e que a prova da

lactofermentação apresenta correlação de 100% quando comparada com o teste imunoenzimático

utilizado.

Page 33: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

35

REFERÊNCIAS

ANDREW, S.M, et al. Factors associated with the risk of antibiotic residues and intramammary

pathogen presence in milk from heifers administered prepartum intramammary antibiotic therapy.

Veterinary microbiology, USA, v. 134, p. 150-156, 2009.

ARCURI, E.F.; BRITO, M.A.V.P.; BRITO, J.R.F., et al. Qualidade microbiológica do leite

refrigerado nas fazendas. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 58, n. 3,

p. 440-446, 2006.

ARRUDA, P.M.; CRUZ, A.G.; ZOELLNER, S.S. et al. Características físico-químicas do leite

pasteurizado tipo C e leite Ultra Alta Temperatura comercializados na cidade do Rio de Janeiro.

Revista do Instituto Adolf Lutz, v. 66, n. 2, p. 126-129, 2007.

ATAÍDE, W.S.; MACIEL, J.F.; LIMA, P.L.A. et al. Avaliação microbiológica e físico-química

durante o processamento do leite pasteurizado. Revista Instituto Adolf Lutz, v. 67, n. 1, p. 73-

77, 2008.

BRASIL. Instrução Normativa n. 42, de 20 de dezembro de 1999. Altera o Plano Nacional de

Controle de Resíduos em produtos de origem animal – PNCR e os Programas de Controle de

Resíduos em Carne – PCRC, Mel – PCRM, Leite – PCRL e Pescado – PCRP. In: BRASIL.

Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Diário Oficial da União, Brasília, 22

dez.,1999.

BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Instrução Normativa n. 62

de 18 de setembro de 2004. Oficializa os Métodos Analíticos Oficiais para Análises

Microbiológicas para Controle de Produtos de Origem Animal e Água, 2003. Diário Oficial

da União, Brasília, 18 set. Seção 1, p. 14, 2003.

BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Portaria 370, de 4 de setembro de

1997. Aprova a inclusão do citrato de Sódio no Regulamento Técnico para fixação de Identidade

e Qualidade do Leite U.H.T. (U.A.T.), 1997. Diário Oficial da União, Brasília, 08 set. Seção 1, p.

19700, 1997.

BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Decreto 6835, de 27 de fevereiro

de 2008. Dá nova redação aos artigos 854 e 918 do Regulamento de Inspeção Industrial e

Sanitária de Produtos de Origem Animal, aprovado pelo Decreto 30.691, de 29 de março de

1952 . Diário Oficialda União, Brasília, 28 fev. Seção 1, p. 4, 2008.

BRITO, J. R. F.; PORTUGAL,J. A. B. Diagnóstico da qualidade do leite, impacto para a

indústria e a questão dos resíduos de antibióticos. Juiz de Fora: EMBRAPA Gado de Leite,

2003.

Page 34: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

36

EMANUELLI, T.; SANTOS, J.S.; BECK, L. et al. Nitrato e Nitrito em Leite produzido em

sistemas convencional e orgânico. Ciência e Tecnologia de Alimentos, v. 25, n. 2, p. 304-

309, 2005.

FERREIRA, M. A. Análises microbiológicas para leite fluido. Brasília: Universidade de

Brasília, 2007. 18 p. Dossiê Técnico.

FRANCO, B.D.G.M.; LANDGRAF, M. Microbiologia dos Alimentos. São Paulo: Editora

Ahteneu, 2005. 182p.

MACEDO, L. C. S; FREITAS, J. A. Ocorrência de Resíduos de Antimicrobianos em Leite.

Ciências Agrárias, Belém, 52, p.147:157, julho-dezembro, 2009.

MACHADO, S.C.A; FOLLY, M. M. Determinação de resíduos de antibióticos, utilizando-se

métodos de inibição microbiana, enzimático e imuno-ensaios no leite pasteurizado,

comercializado na região norte do estado do Rio de Janeiro, Brasil. Ciência Rural, Santa Maria,

v. 31, n. 1, p. 95:98, 2001.

MARCÍLIO, T.; PICININ, L.C.A.; OLIVEIRA, S. et al. Diagnóstico de situação da qualidade do

leite e água de propriedades leiteiras do município de Urupema (SC). Revista Leite e Derivados,

n. 113, p. 38-51, jul. 2009

MARTH, E.H.; STEELE, J.L. Applied Dairy Microbiology. 2nd Ed., New York: Marcel

Dekker, 2001. 736p

MARTINS, P.R.G.; FISCHER, V.; RIBEIRO, M.E.R. et al. Produção e qualidade do leite em

sistemas de produção da região leiteira de Pelotas, RS, Brasil. Ciência Rural, Santa Maria, v. 37,

n. 1, p.212-217, jan/fev, 2007

NASCIMENTO, G. G. F., et al. Ocorrência de resíduos de antibióticos no leite comercializado

em Piracicaba, SP. Revista Nutrição, Campinas, 14 (2), 119-124, maio/agosto, 2001.

NERO, L.C. et al. Resíduos de antibióticos em leite cru de quatro regiões leiteiras no Brasil.

Ciência e Tecnologia de Alimentos, Campinas, 27(2), 391:393, abril-junho, 2007.

NERO, L.A.; MATTOS, M.R.; BELOTI, V. et al. Hazards in non-pasteurized milk on retais

sale in Brazil: prevalence of Salmonella spp, Listeria monocytogenes and chemical residues.

Brazilian Journal of Microbiology, n.35, p. 211-215, 2004.

NERO, L.A.; MAZIERO, D.; BEZERRA, M.M.S. Hábitos alimentares.

NERO, L.A.; MATTOS, M.R.; BELOTI, V. et al. Leite cru de quatro regiões leiteiras brasileiras:

perspectivas de atendimento dos requisitos microbiológicos estabelecidos pela Instrução

Page 35: UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA FACULDADE DE AGRONOMIA …bdm.unb.br/bitstream/10483/3057/1/2011_AnnaJuliaPortz.pdf · Monografia de conclusão de Curso de Medicina Veterinária apresentada

37

Normativa 51. Ciência e Tecnologia de Alimentos, Campinas, v.25, n. 1, p. 191-195, jan.-mar.

2005.

ROCHA, J.S.; BURITI, F.C.A.; SAAD, S.M.I. Condições de processamento e comercialização

de queijo-de-minas frescal. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 58, n.

2, p. 263-272, 2006.

SILVA, M.C.D.; SILVA, J.V.L.; RAMOS, A.C.S. et al. Caracterização microbiológica e físico-

química de leite pasteurizado destinado ao programa doleite no Estado de Alagoas. Ciência e

Tecnologia de Alimentos, Campinas, v. 28, n. 1, p. 226-230, jan.-mar. 2008.

SILVA, P.H.C. Qualidade do leite produzido e beneficiado no Disrito Federal (BRASIL)

quanto à adequação à Instrução Normativa n °51/2002. 2010.81f. Dissertação (Mestrado em

Ciências Animais) – Universidade de Brasília, 2010.

SILVA, T. S. Abordagem crítica sobre o Programa Nacional de Controle de Resíduos e

Contaminantes em Leite com ênfase em antibióticos. 2009. 39f. Seminário (Mestrado em

Ciência Animal) – Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2009.

SØRHAUG, T.; STEPANIAK, L. Psychrotrophs and their enzymes in milk and dairy products:

Quality aspects. Trends in Food Science & Technology, v. 8, p. 35-41, feb. 1997.

TEBALDI, V.M.R.; OLIVEIRA, T.L.C.; BOARI, C.A. et al. Isolamento de coliformes,

estafilococos e enterococos de leite cru provenientes de tanques de refrigeração por expansão

comunitários: identificação, ação lipolítica e proteolítica. Ciência e Tecnologia de Alimentos,

Campinas, v. 28, n. 3, p. 753-760, jul./set. 2008.

TENÓRIO, C. G. M. S. C. Avaliação da eficiência do teste COPAN (Microplate e Single) na

detecção de resíduos de antimicrobianos no leite. 2007. 59f. Dissertação (Mestrado em Ciência

Animal) – Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, 2007.

ZOCCHE, F.; BESSOT, L.S.; BARCELLOS, V.C. et al. Qualidade microbiológica e físico-

química do leite pasteurizado produzido na região oeste do Paraná. Archives of Veterinary

Science, Curitiba, v. 7, n. 2, p. 59-67, 2002.