-
Universidade de São Paulo Escola Superior de Agricultura ‘‘Luiz
de Queiroz’’
Uso de óleos essenciais e doses de suplemento proteico
energético, para bovinos mantidos em pastagens: consumo,
digestibilidade aparente dos nutrientes, parâmetros ruminais e
crescimento microbiano
Murilo Garrett Moura Ferreira dos Santos
Tese apresentada para obtenção do título de Doutor em Ciências.
Área de concentração: Ciência Animal e Pastagens
Piracicaba 2019
-
2
Murilo Garrett Moura Ferreira dos Santos Médico Veterinário
Uso de óleos essenciais e doses de suplemento proteico
energético, para bovinos mantidos em pastagens: consumo,
digestibilidade aparente dos
nutrientes, parâmetros ruminais e crescimento microbiano
versão revisada de acordo com a resolução CoPGr 6018 de 2011
Orientador: Prof. Dr. FLÁVIO AUGUSTO PORTELA SANTOS
Tese apresentada para obtenção do título de Doutor em Ciências.
Área de concentração: Ciência Animal e Pastagens
Piracicaba 2019
-
2
Dados Internacionais de Catalogação na Publicação
DIVISÃO DE BIBLIOTECA – DIBD/ESALQ/USP
Santos, Murilo Garrett Moura Ferrreira dos
Uso de óleos essenciais e doses de suplemento proteico
energético para bovinos mantidos em pastagens: consumo,
digestibilidade aparente dos nutrientes, parâmetros ruminais e
crescimento microbiano / Murilo Garrett Moura Ferreira dos Santos.
- - versão revisada de acordo com a resolução CoPGr 6018 de 2011. -
- Piracicaba, 2019.
63 p.
Tese (Doutorado) - - USP / Escola Superior de Agricultura “Luiz
de Queiroz”.
1. Forragem tropical 2. Suplementação a pasto 3. Promotores de
crescimento 4. Metabolismo I. Título
-
3
A Ari Crispiniano Ferreira dos Santos e a Maria Moura Santos,
meus pais e a meus irmãos Mauricio Kit e Maria Lizzia
Dedico
-
4
AGRADECIMENTOS
À Deus, por ter me dado o dom da vida e ter me guiado para mais
um sonho
realizado.
Agradeço aos meus pais, Ari Crispiniano Santos e Maria Moura
Santos, por
todo amor, carinho educação, por sempre acreditarem em mim, pela
educação e
felicidade, por toda torcida, incentivo e todo esforço para
proporcionar o caminho e a
realização deste sonho. Vocês são a base deste sonho.
Aos meus irmãos, Maria Lizzia e Mauricio Kit, por toda a
torcida, toda
admiração e todo amor que nenhuma distância é capaz de superar.
Que sejamos
sempre companheiros e felizes sempre perto um do outro.
À Anesita e todos os demais familiares pela admiração, carinho,
apoio e
torcida.
À Débora agradeço pela admiração, carinho, apoio e pelo
incentivo.
À Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz” (ESALQ/USP)
por me
proporcionar um excelente treinamento acadêmico e, me capacitar
para que eu
possa continuar meu desenvolvimento profissional.
Ao Prof. Flávio Augusto Portela Santos pela orientação e
amizade, por ter
acreditado e aceitado esse desafio.
Aos amigos Pedro, Carol e ao Beto, João e familia pelas
conversas,
conselhos e ajuda, que me auxiliaram no desenvolvimento deste
projeto.
Aos meus colaboradores e amigos do Nutribov - Diogo Fleury,
Camila, Titanik,
Erika, Mauricio, Andres, Ludmila, Anzol por terem me ajudado
durante a execução
deste trabalho.
Aos funcionários de todo o Departamento de Zootecnia,
principalmente ao
Cesar e a Sandra.
A todos os funcionários da fazenda Caçadinha/MS e do centro de
inovação e
pesquisa da DSM, por ter me acolhido durante um ano, por ter me
ajudado durante
todo o experimento de campo, em especial ao Josivaldo e a Bruna.
À empresa
DSM/Tortuga pela confiança do trabalho desenvolvido na fazenda e
pela parceria.
Ao CNPq/CAPES, pela concessão da bolsa de estudos.
E a todos que contribuíram direta e indiretamente na realização
deste
trabalho.
-
5
SUMÁRIO
RESUMO…………………………………………………..........………….........................6
ABSTRACT………………………………………………………….……………................8
1. INTRODUÇÃO
GERAL.............………………………………………………............11
Referências................................................................................................................12
2 DOSES DE MISTURA DE ÓLEOS ESSÊNCIAIS NO SUPLEMENTO
PROTEICO-
ENERGÉTICO (0,3% DO PC) PARA BOVINOS MANTIDOS EM PASTEJO DE
CAPIM
TROPICAL.....................................................................................................15
RESUMO....................................................................................................................15
ABSTRACT................................................................................................................15
2.1
INTRODUÇÃO.................................................................................................16
2.2 MATERIAIS E
MÉTODOS...............................................................................17
2.3
RESULTADOS................................................................................................21
2.4
DISCUSSÃO...................................................................................................22
2.5
CONCLUSÃO..................................................................................................25
REFERÊNCIAS.........................................................................................................25
ANEXOS....................................................................................................................32
3 INTERAÇÕES ENTRE ADITIVOS (MONENSINA SÓDICA X MISTURA DE
ÓLEOS ESSENCIAIS COMBINADO COM α-AMILASE) E DOSES DE
SUPLEMENTO (1,0 X 1,5% DO PV) PARA BOVINOS TERMINADOS EM
PASTAGENS.............................................................................................................39
RESUMO....................................................................................................................39
ABSTRACT................................................................................................................40
3.1
INTRODUÇÃO................................................................................................41
3.2 MATERIAIS E
MÉTODOS..............................................................................43
3.3
RESULTADOS................................................................................................47
3.4
DISCUSSÃO...................................................................................................48
3.5
CONCLUSÃO..................................................................................................52
REFERÊNCIAS.........................................................................................................52
ANEXOS...................................................................................................................59
-
6
RESUMO
Uso de óleos essenciais e doses de suplemento proteico
energético, para bovinos mantidos em pastagens: consumo,
digestibilidade aparente dos
nutrientes, parâmetros ruminais e crescimento microbiano
A inclusão de óleos essenciais em suplementos concentrados de
bovinos de corte recriados e terminados em pastejo pode melhorar a
eficiência da fermentação ruminal, devido às suas propriedades
antimicrobianas e terapêuticas. Dois experimentos foram conduzidos
para investigar a inclusão de uma mistura de óleos essenciais (MOE;
Crina ®) composta por Timol, Eugenol, Vanilina e Limoneno sobre o
consumo de forragem e total, digestibilidade aparente dos
nutrientes, parâmetros ruminais e o crescimento microbiano. Para a
realização do do Experimento 1, 12 bovinos machos não castrados, da
raça Nelore com 436 ± 34,14 kg de peso corporal inicial médio (PCI)
foram distribuídos em três Quadrados Latinos 4 X 4. Foram avaliadas
doses da MOE e os tratamentos consistuídos por: Controle (0 mg),
100 mg, 200 mg e 400 mg de MOE para cada 100 kg peso corporal (PC).
Todos os animais receberam suplemento proteico-energético na dose
de 0,3% do PC (matéria natural) com os respectivos tratamentos. Os
animais foram alocados em um piquete de 2,2 ha de Brachiaria
brizantha cv. Xaraés, sob lotação contínua. No Experimento 2, foram
utilizados oito bovinos, machos não castrados da raça Nelore com
481,8 ± 28,2 kg de PCI, dispostos em 2 Quadrados Latinos 4 X 4.
Foram avaliados 2 aditivos, monensina sódica (Rumensin®) e MOE+AM
(Crina® combinado com α-amilase) para bovinos na fase de terminação
em pasto com dois níveis de suplementação (1% x 1,5% do PC). Os
tratamentos testados foram: T1) monensina + 1% do PC; T2) monensina
+ 1,5% do PC; T3) MOE+AM + 1,0% do PC; T4) MOE+AM + 1,5% do PC de
suplemento proteico-energético. Os animais foram alocados em um
piquete de 2.2 ha de Brachiaria brizantha cv. Xaraés, sob lotação
contínua. As análises estatísticas foram conduzidas com a
utilização do programa estatístico SAS. No Experimento 1 a inclusão
de doses da MOE na dieta não afetou (P>0,10) o consumo e a
digestibilidade aparente dos nutrientes, a concentração de AGCC
totais, as proporções molares de acetato, propionato, butirato,
isobutirato, isovalerato, a relação acetato:propionato e a
concentração de N-NH3 no fluido ruminal. Houve efeito linear
positivo de doses crescentes da MOE na dieta sobre o pH ruminal e
efeito quadrático na proporção molar de valerato. A inclusão de
doses de MOE na dieta também não afetou (P>0,10) o N ingerido, N
excretado (fezes), N absorvido e a síntese microbiana em bovinos
mantidos em pastagens tropicais suplementados com suplemento
proteico-energético na dose de 0,3% do PC. No Experimento 2, houve
interação entre aditivo e nível de suplemento para todas as
variaveis de consumo (kg e %PC) avaliadas (P
-
7
molar de AGCC e maior proporção molar de C2 que a monensina
(P
-
8
ABSTRACT
Use of essential oils and dose of protein energy supplement for
grazing cattle: intake, apparent digestibility of nutrients,
ruminal parameters and microbial
growth
The inclusion of essential oils in supplements for growing and
finishing grazing cattle can improve the efficiency of ruminal
fermentation due to its antimicrobial and therapeutic properties.
Two experiments were conducted to investigate the effects of of the
inclusion of a mixture of essential oils (EOM; Crina®) composed of
Timol, Eugenol, Vanillin and Limonene in supplements for grazing
beef cattle on forage intake, total dry matter intake, apparent
digestibility of nutrients, ruminal parameters and microbial
growth. In Experiment 1, twelve Nellore bulls with IBW of 436 ±
34.14 kg were alloted to three 4 X 4 Latin Squares. Four doses of
EOM were evaluated: Controll (0 mg), 100 mg, 200 mg e 400 mg for
every 100 kg of body weight (BW). All the animals were fed an
energy-protein supplement at 0.3% BW (AF). The animals grazed a 2.2
ha paddock of Brachiaria brizantha cv. Xaraés, under continuous
stocking. In Experiment 2, eight Nellore bulls with IBW of 481.8 ±
28.2 kg, were allotted to two 4 x 4 Latin Squares. Two feed
additives, monensin (MON; Rumensin®) and a mixture of essential oil
(EOM+AM; Crina® combined with exogenous α-amylase), were compared
for grazing cattle fed an energy-protein supplement at 1.0 or 1.5%
of BW (AF). Treatments were: MON+1%, M+1.5%, EOM+1.0% and EOM+1.5%.
The animals grazed a 2.2 ha paddock of Brachiaria brizantha cv.
Xaraés, under continuous stocking. Statistical analyzes were
performed using the SAS statistical program. In Experiment 1, doses
of EOM had no effect (P>0.10) on DMI, apparent digestiibility of
nutrientes, ruminal concentration of SCFA, molar concentrations of
acetate, propionate, butirate, isobutirate, isovalerate, the C2:C3
ratio and on the rumen concentration of N-NH3. There was a positive
linear effect (P
-
9
however, the monensin effect occurred only when combined with
supplement fed at 1.0% of BW. The EOM+AM increased (P0.10) on those
parameters.
Keywords: Tropical forrages; Suplementation; Performance
enhancer; Metabolism
-
10
-
11
1. INTRODUÇÃO GERAL
No intuito de aumentar a produtividade dos animais, abater
animais jovens,
com maior peso de carcaça, acabamento de gordura desejável e ao
mesmo tempo,
mitigar a produção de gases do efeito estufa oriundos da
fermentação ruminal,
práticas como manejo adequado das pastagens, suplementação com
concentrado e
uso de aditivos vêm sendo aplicadas de forma crescente por
produtores nacionais.
Para melhorar a eficiência e o desempenho animal em sistemas de
pastejo, os
produtores têm adotado cada vez mais a recria intensiva e
terminação a pasto com
alimentos concentrados, em níveis que variam normalmente de 0,3%
a 2,0% do PC
(base seca) (PAULINO et al., 2006, BOMFIM et al., 2001; REIS et
al., 2011;
SIQUEIRA et al., 2013; RESENDE et al., 2014; PEREIRA et al.,
2017).
Devido às novas pressões regulatórias, o uso de antibióticos,
seja como
melhoradores de desempenho, seja como anticoccidianos,
apresentam cada dia
mais restrições. No caso dos ruminantes, o uso de ionóforos como
promotores de
crescimento foi banido pela União Europeia. Dessa forma, o uso
de alternativas que
modulem a fermentação no rúmen e a saúde intestinal vêm sendo
estudadas. A
primeira geração de substitutos foram as leveduras e probióticos
bacterianos. Uma
segunda geração são os óleos essenciais (OE), que podem ser
usados isolados ou
em sinergia, conferindo-lhes diferentes modos de ação,
dificultando um possível
aparecimento de resistência bacteriana (ACAMOVIC & BROOKER,
2005).
Os primeiros dados com OE como moduladores da fermentação
ruminal foram
descritos na década de 50 (CRANE et al., 1957) quando foram
demonstrados os
efeitos dos OE sobre a fermentação ruminal, verificando que
alguns desses óleos
eram capazes de reduzir a formação de metano. Em diversos
estudos “in vitro”
(MCINTOSH et al., 2003; CASTILLEJOS et al., 2006) foi reportado
o efeito positivo
da MOE (CRINA® Ruminants, DSM Nutritional Products Ltd., Suíça)
na redução da
degradação ruminal da proteína, especialmente na deaminação de
aminoácidos. O
mesmo também tem sido observado em estudos “in vivo” (MOLERO et
al., 2004;
NEWBOLD et al. 2004; YANG et al., 2010; GERACI et al., 2012;
MESCHIATTI et al.,
2016) os quais demonstraram a redução na concentração ruminal de
N-NH3 com
suplementação de MOE (CRINA® Ruminants, DSM Nutritional Products
Ltd., Suíça)
em combinação com amilase em comparação com monensina.
-
12
De acordo com Beauchemin & Mcginn et al. (2006), a inclusão
de MOE em
dietas para gado de corte confinado não teve efeito no consumo
de MS em
comparação com controle sem aditivo. Newbold et al. (2004)
reportaram redução na
deaminação de aminoácidos em ovinos que foram confinados.
Mcintosh et al.
(2003) observaram inibição das bactérias hiper produtoras de
amônia, enquanto
Coneglian et al. (2009) relataram aumento do pH ruminal em dieta
com teor alto de
grãos
Desta forma, o objetivo deste trabalho foi utilizar duas
estratégias a fim de
investigar a inclusão da MOE (Crina®) em dietas para bovinos de
corte. No
Exerimento 1 foram avaliadas doses da MOE no suplemento
proteico-energético
para bovinos mantidos em pastagem tropical durante a recria,
enquanto no
Experimento 2 foi avaliada a interação entre fonte de aditivo
(monensina x MOE) e
nível de suplementação proteico-energética (1,0 x 1,5% do PC)
para bovinos
mantidos em pastagens durante a terminação. Em ambos, foi
realizada a avaliacão
de consumo, digestibilidade aparente dos nutrientes, parâmetros
ruminais, eficiência
microbiana e crescimento microbiano.
Referências
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secondary metabolites and their effects in animals. The proceedings
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d-limonene and alfa-d-pinene on in-vitro carbohydrate dissimilation
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-
15
2 DOSES DE MISTURA DE ÓLEOS ESSÊNCIAiS NO SUPLEMENTO
PROTEICO-ENERGÉTICO (0,3% DO PC) PARA BOVINOS MANTIDOS EM PASTEJO
DE CAPIM TROPICAL
Resumo
O objetivo deste estudo foi investigar a inclusão de uma mistura
de óleos essenciais (MOE; Crina ®) composta por Timol, Eugenol,
Vanilina e Limoneno sobre o consumo de forragem e total,
digestibilidade aparente dos nutrientes, parâmetros ruminais e o
crescimento microbiano. Foram utilizados 12 bovinos machos não
castrados, da raça Nelore com 436 ± 34,14 kg de peso corporal
inicial médio (PCI) distribuídos em três Quadrados Latinos 4 X 4.
Foram avaliadas doses da MOE constituindo os seguintes tratamentos:
Controle (0 mg), 100 mg, 200 mg e 400 mg de MOE para cada 100 kg
peso corporal (PC). Todos os animais receberam suplemento
proteico-energético na dose de 0,3% do PC (matéria natural) com os
respectivos tratamentos. Os animais foram alocados em um piquete de
2,2 ha de Brachiaria brizantha cv. Xaraés, sob lotação contínua. As
análises estatísticas foram conduzidas com a utilização do programa
estatístico SAS. A inclusão de doses da MOE na dieta não afetou
(P>0,10) o consumo e a digestibilidade aparente dos nutrientes,
a concentração de AGCC totais, as proporções molares de acetato,
propionato, butirato, isobutirato, isovalerato, a relação
acetato:propionato e a concentração de N-NH3 no fluido ruminal.
Houve efeito linear positivo (P0.10) on DMI, apparent
digestiibility of nutrientes, ruminal concentration of SCFA, molar
concentrations of acetate, propionate, butirate, isobutirate,
isovalerate, the C2:C3 ratio and on the rumen concentration of
N-NH3. There was a positive linear
-
16
effect (P
-
17
dietas para gado de corte confinado não teve efeito no consumo
de MS em
comparação com controle sem aditivo (BEAUCHEMIN & MCGINN et
al. 2006),
reduziu a deaminação de aminoácidos em ovinos confinados
(NEWBOLD et
al.,2004), causou inibição das bactérias hiper produtoras de
amônia (MCINTOSH et
al., 2003) e aumentou o pH ruminal em dieta com teor alto de
grãos (CONEGLIAN et
al., 2009), Porém dados sobre OE para bovinos em pastagens são
escassos na
literatura.
A hipotese deste trabalho é que existe uma dose ótima da MOE
(Crina ®) para
bovinos em pastejo suplementados diariamente com 0,3% PC de
suplemento
proteico-energético, a qual otimizaria a fermentação ruminal, a
digestibilidade dos
nutrientes e o metabolismo de N, sem deprimir o consumo de
forragens. Desta
forma, objetivou-se avaliar o efeito de doses de uma MOE (Crina
®) no suplemento
proteico-energético para bovinos mantidos em pastagem tropical
durante a
terminação, sobre o consumo, digestibilidade aparente dos
nutrientes, os parâmetros
ruminais, e a eficiência e crescimento microbiano.
2.2 MATERIAL E MÉTODOS
O projeto obteve parecer favorável da comissão de Ética no Uso
de Animais
(CEUA), da Universidade de São Paulo Escola Superior de
Agricultura “Luiz de
Queiroz”, protocolo 201751097119 ESALQ/USP.
O experimento foi conduzido nas instalações do Centro de
Pesquisa da DSM
na fazenda Caçadinha, localizada no município de Rio
Brilhante/MS, durante 80
dias, no período de março a junho de 2015. A área experimental
era constituída por
um piquete de 2,2 ha, formado com Brachiaria brizantha cv.
Xaraés, manejada sob
lotação contínua.
Foram utilizados 12 machos,com 19 meses de idade, não castrados,
da raça
Nelore com peso corporal inicial médio de 436 ± 34,14 kg, com
cânulas no rúmen.
Os animais foram submetidos aos protocolos sanitários de rotina
do Centro de
Pesquisa da DSM como vacinações e controle de ectoparasitas e
endoparasitas. Os
animais foram previamente suplementados nos períodos de seca e
águas que
antecederam este estudo.
Os tratamentos consistiram de doses de uma (MOE): Controle (0
mg), 100
mg, 200 mg e 400 mg para cada 100 kg peso corporal (PC),
adicionada ao
suplemento comercial (Fosbovi® Proteico-Energético 25) com 67,5%
de NDT, 25%
-
18
de PB, sendo 67,5% da PB representada por nitrogênio não
proteico (NNP). A MOE
continha Timol, Eugenol, Vanilina e Limoneno (CRINA® Ruminants,
DSM Nutritional
Products Ltd). O suplemento foi previamente pesado e
administrado diretamente no
rúmen do animal, via fístula ruminal, na dose de 0,3% PC
(matéria natural),
diariamente as 10:00 horas da manhã, a fim de garantir o consumo
total da dose de
aditivo de cada tratamento. O experimento teve quatro períodos
de 20 dias,
totalizando 80 dias. Cada período foi constituído de 12 dias de
adaptação e oito dias
de coletas. Os animais foram pesados no ínicio de cada período
para ajuste da
quantidade diária de suplemento.
A área de pastagem recebeu uma única aplicação de 60 kg N ha-1
(via ureia)
em 12 de março de 2015. As alturas do dossel pastejado foram
tomadas em 20
pontos distintos ao longo da maior diagonal do piquete, com o
uso de transparência
e régua graduada em centímetros no 1° dia de cada período
(FAGUNDES, 1999).
A massa de forragem foi estimada no 1° dia de cada período pelo
método
destrutivo, através do corte da planta a 3 cm do nível do solo,
em 4 pontos do
piquete, com utilização de moldura de 0,25 m x 0,25 m. As quatro
amostras foram
tomadas em pontos onde a altura de cada uma correspondia à
altura média do
dossel. As quatro amostras colhidas foram compostas, pesadas in
natura e duas sub
amostras de aproximadamente 300 g foram retiradas, uma para a
determinação da
matéria seca (MS) total e a outra para a determinação da
composição morfológica,
sendo estas últimas separadas em lâmina foliar, colmo (inclui
bainha) e material
senescente. As amostras foram secas em estufa a 55ºC por 72
horas.
Para fins de análises bromatológicas, amostras do suplemento
coletadas
durante cada batida e compostas em uma única amostra e amostras
do pastejo
simulado, coletadas nos dias 1°, 7° e 14° de cada período também
compostas em
uma única amostra por período, foram secas em estufa a 55ºC por
72 horas, moídas
com peneira de malha de 1 mm (moinho tipo Willey) e analisadas
para Matéria seca
(MS) , matéria mineral (MM), extrato etéreo (EE) segundo a AOAC
(1990). O teor de
proteína bruta (PB) foi obtido mediante combustão das amostras
segundo o método
Dumas, utilizando-se um auto-analizador de nitrogênio (LECO)
(WILES et al., 1998).
A fibra em detergente neutro (FDN), fibra em detergente ácido
(FDA) e lignina foram
determinadas segundo Van soest (1991), utilizando amilase
termoestável (somente
para as amostras do suplemento) e sulfito de sódio. O N-FDN e o
N-FDA foram
determinados por método macro Kjeldahl (AOAC, 1990) após
digestão das amostras
-
19
em solução detergente neutra e ácida (VAN SOEST et al., 1991).
As amostras de
forragens foram analisadas para nitrogênio solúvel
(KRISHNAMOORTHY et al.,
1982) e para nitrogênio não proteico (NNP) (LICITRA et al.,
1996) para o
fracionamento de proteínas de acordo com o CNCPS (SNIFFEN et
al., 1992).
Nas Tabelas 1 e 2 são apresentados os dados descritivos da
pastagem
utilizada. Com base nos dados das Tabelas 1 e 2 fica demonstrado
que os animais
foram mantidos em pastagem de gramínea tropical bem manejada,
com oferta de
forragem e com composição morfológica favoráveis à colheita
eficiente da forragem
e com teores altos de PB, médios de FDN e baixos de lignina, que
favorecem o
processo de digestão de FDN no rúmen.
Todos os fatores mencionados acima criam condições favoráveis ao
consumo
elevado de forragem pelos animais em pastejo (da SILVA et al.,
2006; SANTOS et
al., 2014; NRBC, 2016). A oferta de forragem adequada foi
mantida ao longo de todo
o período experimental. A principal alteração qualitativa
observada foi a redução das
frações proteicas solúveis A e B1 e aumento das frações não
solúveis e de média e
lenta degradação ruminal B2 e B3 em função do tempo.
A ingestão de forragem foi calculada a partir da excreção fecal
total e da
digestibilidade dos alimentos. Durante os 17 primeiros dias de
cada período, óxido
de cromo previamente pesado em cápsulas de papel (5g cada
cápsula) foi inserido
no rúmen dos animais logo após o fornecimento do suplemento pela
manhã
(10h00min) e novamente à tarde (17h00min ). As amostras fecais
foram coletadas
entre o 13º e o 17º dia de cada período, duas vezes por dia
(10h00min e 17h00min)
diretamente do reto dos animais (150 g por coleta) e congeladas
à -20ºC.
Posteriormente, as amostras foram descongeladas, compostas por
animal e período,
secas em estufa a 55ºC por 72 horas, e moídas com peneira de
malha de 1 mm
(moinho tipo Willey).
As amostras de fezes foram analisadas para matéria seca (MS)
segundo a
AOAC (1990). O teor de proteína bruta (PB) foi obtido mediante
combustão das
amostras segundo o método Dumas, utilizando-se um
auto-analizador de nitrogênio
(LECO) (WILES et al., 1998). A fibra em detergente neutro (FDN)
foi determinada
segundo Van Soest et al. (1991), em equipamento analisador de
fibra Ankom200®
utilizando amilase termoestável e sulfito de sódio.
-
20
As digestibilidades aparentes da MS, MO, PB e FDN das dietas
foram
estimadas utilizando os valores individuais de consumo, excreção
fecal total e da
concentração dos nutrientes nos alimentos e fezes.
As análises de cromo foram realizadas no laboratório
multiusuário em
produção vegetal do Departamento de Produção Vegetal da
ESALQ/USP. As
amostras foram irradiadas usando o espectrômetro de
fluorescência de raios X por
dispersão de energia (modelo EDX-720 Shimadzu) de acordo com
Wastowski et al.
(2010).
A excreção fecal total com o marcador externo foi calculada
dividindo a
quantidade do marcador administrado pela concentração do
marcador nas fezes.
Para a determinação de consumo de forragem foi utilizado o
marcador interno FDNi.
A contribuição fecal proveniente do concentrado foi determinada
como sendo a
quantidade de concentrado oferecida no período da avaliação,
multiplicada por sua
indigestibilidade. Do valor obtido da excreção fecal total foi
descontada a
contribuição do concentrado e o valor obtido foi dividido pelo
resíduo indigestível das
fezes (FDNi). O FDNi foi determinado de acordo com Krizsan &
Huhtanen (2013).
No 18° dia foram realizadas as coletas de urina, obtendo-se
amostras “spot”
durante micção espontânea dos animais, aproximadamente quatro
horas após o
fornecimento dos suplementos, para determinação dos derivados de
purina e cálculo
da síntese microbiana. As sub-amostras de urina (10 mL) foram
acidificadas (pH
-
21
congelada a -20ºC para análises posteriores de AGCC. Ao término
do período
experimental as amostras de fluido ruminal foram descongeladas à
temperatura
ambiente, centrifugadas (15.000 g, 4ºC, 30 min) e analisados
para AGCC utilizando
cromatografia gasosa (PALMQUIST, CONRAD, 1971) e N-NH3 por
colorimetria, pelo
método de reação hipoclorito-fenol, segundo método proposto por
Chaney e
Marbach (1962).
As análises de purina foram realizadas pelo laboratório de
Bioquímica e
Fisiologia Animal da Faculdade de Medicina Veterinária e
Zootecnia da Universidade
de São Paulo (FMVZ/USP). As análises das concentrações dos
parâmetros
Creatinina e Ácido Úrico foram realizadas por meio de kits
comerciais (Bioclin® e
CELM®) que utilizam método enzimático colorimétrico de ponto
final e cinético,
sendo a leitura realizada em analisador automático de bioquímica
(Sistema de
Bioquímica Automático SBA-200 - CELM®). A análise das
concentrações do
parâmetro Alantoína foram realizadas por meio de metodologia
descrita por Young
and Conway (1942), citada por Chen e Gomes (1992).
Para cálculos de síntese microbiana, a concentração de
creatinina foi utilizada
para estimar o volume total de urina. Após o cálculo de volume
urinário e tendo as
concentrações de alantoína e ácido úrico, foi calculada a
excreção diária de
derivados de purina de acordo com Chen e Gomes (1992).
O delineamento experimental utilizado foi o quadrado latino
triplo 4 x 4, com 3
animais por tratamento por período. Todas as variáveis foram
analisadas pelo PROC
MIXED do pacote estatístico STATISCAL ANALYSIS SYSTEM – SAS
(2003),
adotando-se as características do modelo específico para cada
variável. As médias
foram calculadas pelo LSMEANS e o efeito do tratamento foi
avaliado pelos
contrastes polinomiais ortogonais (avaliação dos efeitos
lineares, quadráticos e
cúbicos) considerando nível de significância a 10%.
Obrigatoriamente, todos os
conjuntos de dados foram testados antes da análise geral final
com a intenção de
assegurar que todas as premissas testadas da análise de
variância (aditividades do
modelo, independência dos erros, normalidade dos dados e
homocedasticidade)
estivessem sendo respeitadas.
2.3 RESULTADOS
A suplementação com MOE não teve efeito (P>0,10) sobre o
consumo e a
digestibilidade aparente da MS, MO, FDN e PB da dieta (Tabela
3).
-
22
Na Tabela 4 são apresentados os dados de fermentação ruminal.
A
suplementação com MOE não teve efeito (P>0,10) sobre a
concentração de AGCC
totais, sobre as proporções molares de acetato, propionato,
butirato, isobutirato,
isovalerato, relação C2:C3 e sobre a concentração de N-NH3 no
rúmen. Houve efeito
quadrático (P
-
23
Diversos autores têm relatado ausência de efeito de MOE (CRINA®
Ruminants,
DSM Nutritional Products Ltd., Suíça) sobre o CMS de bovinos
confinados
(BEAUCHEMIN & McGINN, 2006; BENCHAAR et al. 2006; MEYER et
al., 2009).
Outros estudos também observaram que tanto o OE e a MOE não
afetaram o CMS
de bovinos tais como eugenol (YANG et al., 2010b) e timol ou
cinemaldeído (VAKILI
et al., 2013; KORRAMI et al., 2015). Nas comparações com OE ou
MOE a
monensina normalmente reduz o CMS de bovinos em confinamento
(MEYER et al.,
2009; CHAGAS et al., 2012a; MESCHIATTI et al. 2016). Dados sobre
OE para
bovinos em pastagens são escassos na literatura. Tomkins et al.
(2015) não
observaram efeito de MOE (CRINA® Ruminants, DSM Nutritional
Products Ltd.,
Suíça) no consumo de bovinos alimentados com feno de gramínea
(Rhodes) de
média a baixa qualidade, assim como relatado no presente estudo
(Tabela 3) com
bovinos mantidos em pastagens de Brachiaria brizantha cv.
Xaraés. Em virtude da
ausência de efeito de doses da MOE no CMS e dos animais terem
pastejados em
grupo a mesma área de pasto, o consumo de nutrientes também não
diferiu entre os
tratamentos.
A ausência de efeito de MOE na digestibilidade dos nutrientes no
presente
estudo também tem sido observada por outros pesquisadores. No
estudo de
metabolismo com bovinos canulados no rúmen, Meschiatti et al.
(2016) reportaram
ausência de efeito de MOE (CRINA® Ruminants, DSM Nutritional
Products Ltd.,
Suíça) na digestibilidade da MS da dieta em comparação com
monensina. Chagas et
al. (2012a) não observaram efeito negativo de MOE (ácido
ricinoleico + ácido
anacárdico; ESSENTIAL®) assim como Khorrami et al. (2015) não
observaram
efeito negativo de timol e de cinamaldeído na digestibilidade
dos nutrientes no trato
digestivo total. Yang et al. (2010b) não reportaram efeito
negativo de Eugenol na
degradação ruminal e digestibilidade aparente no trato digestivo
total da MO e do
amido. Entretanto, a digestibilidade da FDN foi reduzida
linearmente por níveis
crescentes de Eugenol. Beauchemin & McGinn (2006) relataram
efeito negativo de
MOE (CRINA® Ruminants, DSM Nutritional Products Ltd., Suíça) na
digestibilidade
de nutrientes no trato digestivo total de bovinos. Yang et al.
(2010a) relataram efeito
negativo de níveis altos (>400mg/d) de cinamaldeído na
digestibilidade da MO, FDN
e N tanto no rúmen quanto no trato digestivo total de
bovinos.
No presente estudo a suplementação com MOE indicou ausência de
efeito na
degradação de proteínas e deaminação de aminoácidos. Estes
resultados diferem
-
24
da maioria dos estudos revisados. Em estudos “in vitro” foi
reportado efeito positivo
da MOE (CRINA® Ruminants, DSM Nutritional Products Ltd., Suíça)
(MCINTOSH et
al., 2003; CASTILLEJOS et al., 2006) e de Vanilina (PRATA &
YU, 2014) na redução
da degradação ruminal da proteína, especialmente na deaminação
de aminoácidos.
Em estudos “in vivo” também foi reportado efeito positivo da MOE
(CRINA®
Ruminants, DSM Nutritional Products Ltd., Suíça) (MOLERO et al.,
2004;
NEWBOLD, et al. 2004), da MOE contendo Cinamaldeído, Eugenol e
Capsicum
(GERACI et al., 2012) e de OE como Eugenol (YANG et al., 2010b)
na redução da
degradação ruminal da proteína, especialmente na deaminação de
aminoácidos.
Meschiatti et al (2016) reportaram redução na concentração
ruminal de N-NH3 com
suplementação de MOE (CRINA® Ruminants, DSM Nutritional Products
Ltd., Suíça)
em combinação com amilase em comparação com monensina.
O efeito positivo da MOE no pH ruminal médio, que variou de 6,60
a 6,72, difere
da maioria dos estudos revisados com bovinos confinados, nos
quais o pH ruminal
médio não foi alterado pela suplementação com OE ou MOE (MEYER
et al., 2009;
YANG et al., 2010a; YANG et al., 2010b; GERACY et al., 2012;
VALKILI et al., 2013;
KHORRAMI et al., 2015; TOMKINS et al. 2015; CHAGAS et al., 2014;
MESCHIATTI
et al., 2016). Não há explicação razoável para o efeito positivo
da MOE no pH
ruminal de bovinos em pastagens, especialmente quando se analisa
a não alteração
nas concentrações de AGCC totais e de N-NH3 no fluido ruminal.
Apesar da variação
entre tratamentos, os valores de pH ruminal estiveram sempre
acima de 6,30 (Figura
1) e a curva de pH ruminal acompanhou a curva de N-NH3, ambas
com maior valor
ao redor de 2 horas após o fornecimento do suplemento
proteico-energético.
Assim como no presente estudo, na literatura revisada de modo
geral a
suplementação com OE não afetou a concentração de AGCC totais. A
concentração
molar de AGCC totais não foi alterada em 10 dos 12 estudos
revisados “in vivo” e “in
vitro” (NEWBOLD et al., 2004; BEAUCHEMIN & McGINN, 2006;
YANG et al., 2010a,
2010b; GERACI et al., 2012; LI et al., 2013; VAKILI et at.,
2013; KHORRAMI et al.,
2015; TOMKINS et al., 2015; CHAGAS et al. 2012b). Apenas
Castillejos et al. (2007)
e Meyer et al. (2009) observaram efeito positivo de MOE na
concentração de AGCC
totais.
Com relação às proporções molares de acetato, propionatoo e
butirato, há certa
inconsistência dos resultados. A proporção molar de acetato foi
aumentada por MOE
ou OE em 2 estudos (CASTILLEJOS et al., 2007; MEYER et al.,
2009), reduzida em
-
25
3 estudos (VAKILI et at., 2013; YANG et al., 2010b; LI et al.,
2013) e não afetada nos
demais 7 estudos (NEWBOLD et al., 2004; BEAUCHEMIN & McGINN,
2006; YANG
et al., 2010a; GERACI et al., 2012; KHORRAMI et al., 2015;
TOMKINS et al., 2015;
CHAGAS et al. 2012b). A proporção molar de propionato foi
aumentada por MOE ou
OE em 3 estudos (VAKILI et at., 2013; Li et al., 2013; KHORRAMI
et al., 2015),
reduzida em 1 (CASTILLEJOS et al., 2007) e não afetada em 8
estudos (MEYER et
al., 2009; NEWBOLD et al., 2004; BEAUCHEMIN & McGINN, 2006;
YANG et al.,
2010a; 2010b; GERACI et al., 2012;; TOMKINS et al., 2015; CHAGAS
et al. 2012b).
A proporção molar de butirato foi aumentada em 2 estudos (VAKILI
et at., 2013;
TOMKINS et al., 2015) e reduzida em 1 (LI et al., 2013). Como
pode ser observado
com base nos 12 estudos acima revisados, de modo geral as MOE e
os OE
estudados não apresentaram efeito consistente na fermentação
ruminal de bovinos
alimentados tanto com dietas altas em concentrado quanto em
forragem.
Em virtude da ausência de efeito da MOE no consumo de nutrientes
(Tabela
3), nos parâmetros de fermentação ruminal (Tabela 4) e na
digestibilidade dos
nutrientes (Tabela 3), não seria de se esperar efeito
significativo no metabolismo de
N (Tabela 5). A suplementação com MOE não afetou o consumo, a
excreção fecal e
a absorção de N, assim como a eficiência de síntese e a produção
microbiana.
Benchaar et al. (2006) também não observaram efeito de MOE no
metabolismo de N
de bovinos confinados.
2.5 CONCLUSÃO
O fornecimento de MOE (CRINA® Ruminants, DSM Nutritional
Products Ltd)
para animais em pastagens tropicais de boa qualidade, recebendo
0,3% PC de
suplemento proteico-energético não melhora o metabolismo de
nutrientes no trato
digestivo.
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-
32
ANEXOS
Tabela 1. Caracterização estrutural e composição morfológica da
Brachiaria
Brizantha cv. Xaraés durante o período experimental.
Períodos Média
27/03 17/04 08/05 29/05
Altura, cm 21,5 18,9 19 19 19,6
Massa de forragem, kg.ha-1 4972 4365 4877 3003 4304
Folha, kg.ha-1 1973 1565 1681 1161 1595
Haste, kg.ha-1 1547 1587 1585 868 1397
Material Morto, kg.ha-1 1452 1213 1611 974 1312
Folha, %MS 39,68 35,86 34,46 38,66 37,16
Haste, %MS 31,11 36,36 32,51 28,89 32,22
Material Morto, %MS 29,21 27,78 33,03 32,45 30,62
Folha: Haste 1,28 0,99 1,06 1,34 1,16
-
33
Tabela 2. Composição bromatológica e fracionamento da proteína e
dos
carboidratos do Brachiaria Brizantha cv. Xaraés durante o
período de abril a junho
de 2015.
27/03 17/04 08/05 29/06 Média Suplemento
MO¹ 91,45 90,93 90,27 90,15 90,70 86,77
MM1 8,55 9,07 9,73 9,85 9,30 13,23
PB1 14,74 11,76 15,53 14,07 14,03 26,14
FDN1 55,64 63,94 65,76 63,32 62,17 10,65
FDA1 26,52 30,42 33,72 31,09 30,44 3,07
LIG1 1,57 2,29 2,39 2,34 2,15 0,81
EE1 2,58 2,19 2,60 2,66 2,51 1,92
Fração proteica
A, %PB 5,72 7,36 5,47 6,01 6,14
B1, %PB 34,62 32,35 13,22 8,11 22,08
B2, %PB 45,72 37,08 52,24 56,15 47,80
B3, %PB 6,72 14,28 20,17 23,13 16,08
C,%PB 7,21 8,93 8,89 6,60 7,91
Fração dos carboidratos
CHOT, %MS 73,91 76,85 72,15 73,34 74,06
A+B1, %CHOt 22,51 13,33 7,27 11,84 13,74
B2, %CHOt 72,39 79,52 84,78 80,50 79,30
C, %CHOt 5,10 7,15 7,95 7,66 6,96
¹=% da matéria seca; MM= matéria mineral; PB= proteína bruta;
FDN= fibra em
detergente neutro; FDA= fibra em detergente ácido; LIG= lignina;
EE= extrato
etéreo.
-
34
Tabela 3. Valores médios dos consumos de MS total (CMSt),
forragem (CMSf), matéria organica (CMO), matéria seca digestível
(CMSD), fibra em detergente neutro (CFDN), matéria organica
digestível (CMOD), proteína (CPB) e a digestibilidade aparente da
matéria seca (DMS), matéria orgânica (DMO), fibra em detergente
neutro (DFDN) e da proteína (DPB) da dieta.
Item Nível de MOE
2, mg/100 kg PC Contrastes
0 100 200 400 EPM L Q C
Kg/animal/dia
CMSt 9,91 9,86 9,46 9,48 0,466 0,448 0,789 0,708 CMSf 8,67 8,60
8,22 8,21 0,452 0,417 0,789 0,732 CMO 8,94 8,90 8,54 8,56 0,423
0,450 0,792 0,708 CMSD 6,37 6,56 6,23 6,18 0,358 0,559 0,895 0,576
CFDN 5,49 5,48 5,20 5,23 0,290 0,435 0,779 0,668 CPB 1,54 1,55 1,48
1,47 0,092 0,498 0,945 0,671 CMOD 5,82 5,98 5,68 5,61 0,326 0,515
0,883 0,592
% Peso Corporal
CMSt 2,16 2,13 2,03 2,01 0,105 0,269 0,754 0,767 CMSf 1,89 1,85
1,76 1,76 0,105 0,297 0,764 0,761 CMO 1,95 1,92 1,83 1,81 0,096
0,269 0,755 0,747 CMSD 1,39 1,41 1,34 1,31 0,084 0,384 0,959 0,655
CFDN 1,23 1,21 1,15 1,13 0,057 0,200 0,779 0,769 CPB 0,34 0,34 0,32
0,32 0,020 0,337 0,958 0,770 CMOD 1,27 1,29 1,21 1,19 0,077 0,362
0,960 0,647
Digestibilidade da dieta DMS, % 62,97 65,18 64,27 63,53 1,340
0,983 0,342 0,478 DMO, % 65,69 67,89 67,13 66,09 1,255 0,917 0,258
0,498 DFDN, % 59,10 61,57 60,60 59,45 1,770 0,894 0,375 0,565 DPB,
% 70,01 72,63 70,01 70,46 2,161 0,880 0,767 0,370
¹EPM=Erro padrão da média; 2MOE= Mistura de óleos essenciais;
³Valores de P para efeito Níveis (N), aditivos (A), interação
(N*A).
Figura 1. Variação do pH ruminal ao longo do dia em função das
doses de MOE.
6,3
6,5
6,7
6,9
0 2 4 6 8
PH
RU
MIN
AL
HORAS APÓS A SUPLEMENTAÇÃO
Controle 100 mg 200 mg 400 mg
-
35
Tabela 4. Valores médios do pH, N-NH3 ruminal, e perfil dos
ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) em função dos níveis de MOE na
suplementação.
Item Nível de MOE
4, mg/100 kg PC Contrastes
5
EPM 0 100 200 400 L Q C
pH ruminal 6,60 6,65 6,70 6,72 0,005 0,947 0,238 0,055
N-NH3¹ 14,84 13,84 14,32 14,21 0,680 0,531 0,425 1,519
AGCC total² 56,76 63,32 60,60 59.62 0,758 0,209 0,266 5,291
Ác. Acético³ 69,35 70,13 69,99 69,54 0,998 0,056 0,410 0,831
Ac. Propiônico³ 17,60 17,25 17,09 17,39 0,650 0,155 0,976
0,481
Ac. Isobutírico³ 0,84 0,81 0,87 0,86 0,203 0,829 0,038 0,032
Ac. Butírico³ 10,10 9,79 10,08 10,06 0,830 0,667 0,314 0,341
Ac. Isovalérico³ 1,13 1,09 1,18 1,18 0,124 0,887 0,152 0,077
Ac. Valérico³ 0,79 0,76 0,79 0,82 0,022 0,0860 0,177 0,042
C2:C3³ 3,96 4,10 4,11 4,01 0,761 0,069 0,717 0,150
¹: mg dL; ²:mM; ³:mol/100 mol; 4MOE= Mistura de óleos
essenciais; 5=Valores de P dos contrastes (L= Linear, Q=
Quadrático, C= Cúbico).
-
36
Figura 2. Variação da concentração de N-NH3 ruminal ao longo do
dia em função
das doses de MOE.
3
7
11
15
19
23
27
0 2 4 6 8
[N-N
H3
RU
MIN
AL]
, MG
/DL
HORAS APÓS A SUPLEMENTAÇÃO
Controle 100 mg 200 mg 400 mg
-
37
Tabela 5. Efeito do nível de suplementação de MOE no N ingerido,
N excretado (urina), N excretado (fezes), N absorvido, síntese
microbiana, e eficiência microbiana.
Item Nível de MOE², mg/100 kg PC Contrastes³ EPM
0 100 200 400 L Q C
N fezes, g/dia 71,43 67,01 67,33 66,95 0,405 0,492 0,661
3,20
N ingerido, g/dia 250,72 253,42 240,63 239,83 0,508 0,936 0,665
15,17
N absorvido, g/dia 179,12 186,65 172,95 172,67 0,582 0,940 0,541
13,58
Síntese microbiana, g/dia 525,82 405,84 510,2 483,32 0,968 0,691
0,266 77,91
Eficiência microbiana¹ 93,45 117,50 114,05 116,58 0,634 0,674
0,755 28,01
¹= g Proteína microbiana/kg MOD; EPM=Erro padrão da média, ²MOE=
Mistura de óleos essenciais; ³=Valores de P dos contrastes
(L= Linear, Q= Quadrático, C= Cúbico).
-
38
-
39
3 INTERAÇÕES ENTRE ADITIVOS (MONENSINA SÓDICA X MISTURA DE
ÓLEOS ESSENCIAIS E α-AMILASE EXÓGENA) E DOSES DE SUPLEMENTO
(1,0 X 1,5% DO PV) PARA BOVINOS TERMINADOS EM PASTAGENS
Resumo
Objetivou-se avaliar a inclusão de uma mistura de óleos
essenciais (MOE+AM) composta por Timol, Eugenol, Vanilina e
Limoneno (Crina®) combinado com α-amilase exógena sobre o consumo
de forragem e total, digestibilidade aparente dos nutrientes,
parâmetros ruminais e o crescimento microbiano. Foram utilizados
oito bovinos, machos não castrados da raça Nelore com 481,8 ± 28,2
kg de peso corporal inicial médio (PCI), dispostos em 2 Quadrados
Latinos 4 X 4. Foram avaliados 2 aditivos, monensina sódica
(Rumensin®) e MOE+AM (Crina®) combinado com α-amilase exógena para
bovinos na fase de terminação em pasto com dois níveis de
suplementação (1% x 1,5% do PC). Os tratamentos testados foram: T1)
monensina + 1% do PC; T2) monensina + 1,5% do PC; T3) MOE+AM + 1,0%
do PC; T4) MOE+AM + 1,5% do PC de suplemento proteico energético.
Os animais foram alocados em um piquete de 2.2 ha de Brachiaria
brizantha cv. Xaraés, sob lotação contínua. As análises
estatísticas foram conduzidas com a utilização do programa
estatístico SAS. Houve interação entre aditivo e nível de
suplemento para todas as variaveis de consumo (kg e %PC) avaliadas
(P
-
40
monensina e com concentrações de AGCC, de acetato, eficiência e
síntese microbiana mais altos com MOE+AM. Palavra-chave: Forragem
tropical; Terminação; Fermentação ruminal; crescimento
microbiano
Abstract
The objective of this study was to investigate the effects of
the inclusion of a mixture of essential oils composed of Timol,
Eugenol, Vanillin and Limonene (EOM; Crina®) combined with
exogenous α-amylase in supplements for grazing beef cattle on
forage intake, total dry matter intake, apparent digestibility of
nutrients, ruminal parameters and microbial growth. Eight Nellore
bulls with IBW of 481.8 ± 28.2 kg, were allotted to two 4 x 4 Latin
Squares. Two feed additives, monensin (Rumensin®) and EOM (Crina®)
combined with exogenous α-amylase, were compared for grazing cattle
fed an energy-protein supplement at 1.0 or 1.5% of BW (AF).
Treatments were: M+1%, M+1.5%, OEM+AM +1.0% and OEM+AM +1.5%. The
animals grazed a 2.2 ha paddock of Brachiaria brizantha cv. Xaraés,
under continuous stocking. Statistical analyzes were performed
using the SAS statistical program. There was interaction between
feed additive and supplement level for all consumption variables
(kg and% BW) evaluated (P
-
41
Keywords: Tropical forage; Finishing; Ruminal fermentation;
Microbial growth
3.1 INTRODUÇÃO
Mais de 90% dos bovinos abatidos no Brasil são terminados em
pastagens
(ANUALPEC, 2016). No intuito de aumentar a produtividade desse
sistema de
terminação, de abater animais jovens, com maior peso e
acabamento de carcaça,
nutricionistas têm recomendado e produtores têm adotado cada vez
mais a
suplementação com alimentos concentrados em níveis que variam
normalmente de
0,8 a 2,0% do PC (base seca) (PAULINO, et a., 2006, BOMFIM et
al., 2001; REIS et
al., 2011; RESENDE et al., 2014).
Sistemas exclusivos de pastagens impõem limitações no desempenho
animal,
quanto ao ganho de peso diário, peso final de carcaça à idade
jovem e quanto ao
grau de acabamento da carcaça (PAULINO et al., 2006). A
suplementação com
concentrado proteico-energético nas doses entre 0,8 a 1,5% do PC
tem permitido
GPD da ordem de 1,137 a 1,409 kg/cabeça para bovinos terminados
em pastagens
(RESTLE et al., 1999; BOMFIM et al., 2001; RESENDE et al., 2014;
PAULINO, et a.,
2006, 2002; BARONI, 2007; MENDEIROS et al., 2009; SILVA, 2009;
SOUZA, 2011;
REIS et al., 2011; BERTI, 2013; MENDES, 2013; LIMA, 2014;
SIMÕES, 2016;
FERRARI, 2016) em sistemas convencionalmente denominados de
semi-
confinamento. Sistemas com suplementação de até 2,0% do PC
também têm sido
estudados (RESENDE et al., 2014).
Com o intuito de aumentar a eficiência de uso tanto da forragem
quanto do
suplemento fornecido, aditivos são normalmente incluídos nos
suplementos para
animais em terminação em pastagens (SANTOS et al., 2014). Os
aditivos mais
estudados para animais em pastagens têm sido os antibióticos,
ionóforos e não
ionóforos, com capacidade comprovada para melhorar o desempenho
desses
animais (PAGE, 2003). O efeito positivo desses antibióticos é
resultado da
combinação de vários fatores promovidos por esses aditivos: a)
maior eficiência
fermentativa do rúmen, com aumento na proporção molar de
propionato e redução
das perdas energéticas via metano, b) redução na produção de
lactato ruminal,
contribuindo para redução da incidência de acidose, c) redução
na deaminação de
aminoácidos e maior aporte destes nutrientes para o intestino
delgado, d) redução
da ocorrência de timpanismo, e) efeito coccidicida.
-
42
Em virtude da política que foi adotada por países desenvolvidos,
principalmente
da União Europeia, de banir o uso de antibióticos como
promotores de crescimento
na produção animal, tem crescido o interesse por aditivos
alternativos, dentre eles os
óleos essenciais (OE) ou mistura de OE (MOE) (CALSAMIGLIA et
al., 2007). Os
primeiros dados com OE como moduladores da fermentação ruminal
datam da
década de 50 (CRANE et al., 1957) quando foram demonstrados os
efeitos dos OE
sobre a fermentação ruminal, verificando que alguns desses óleos
eram capazes de
reduzir a formação de metano. Em diversos estudos “in vitro” foi
reportado efeito
positivo da MOE (MCINTOSH et al., 2003; CASTILLEJOS et al.,
2007) e de Vanilina
(PRATA & YU, 2014) na redução da degradação ruminal da
proteína, especialmente
na deaminação de aminoácidos. O mesmo também foi observado em
estudos “in
vivo” (MOLERO et al., 2004; NEWBOLD, et al. 2004; YANG et al.,
2010; GERACI et
al., 2012). Como observado por Meschiatti et al., (2019) houve a
redução na
concentração ruminal de N-NH3 com suplementação de MOE em
combinação com
amilase em comparação com a monensina.
Animais recebendo suplementos ricos em amido, nos níveis entre 1
e 1,5% do
PC consomem quantidades razoáveis de amido. A inclusão de
amilase na dieta
pode ter efeito positivo no uso desses suplementos (ACEDO et
al., 2015).
Entretanto, não foram encontrados trabalhos na literatura que
avaliaram as
interações entre nível de suplementação e fontes de aditivos
para bovinos mantidos
em pastagens durante a terminação.
A hipótese deste trabalho é que a MOE+AM para bovinos em
pastejo
recebendo suplemento proteico-energético em doses diárias entre
1,0 a 1,5% do PC
constitui-se em alternativa à monensina como aditivo alimentar.
Desta forma,
estudou-se a interação entre fonte de aditivo (monensina x
MOE+AM) e nível de
suplementação proteico energética (1,0 x 1,5% do PC) para
bovinos em pastagens
na fase de terminação com relação ao consumo e a digestibilidade
aparente dos
nutrientes, os parâmetros ruminais, o metabolismo de N, e a
eficiência o crescimento
microbiano.
-
43
3.2 MATERIAIS E MÉTODOS
O projeto obteve parecer favorável da comissão de Ética no Uso
de Animais
(CEUA), da Universidade de São Paulo/Escola Superior de
Agricultura Luiz de
Queiroz, protocolo 201751097119 ESALQ/USP.
O experimento foi conduzido nas instalações do Centro de
Pesquisa da Dsm
Produtos Nutricionais Brasil S.A. na fazenda Caçadinha,
localizada no município de
Rio Brilhante/MS, durante 80 dias, de junho a setembro de 2015.
A área
experimental era constituída por um piquete de 2,2 ha, formado
com Brachiaria
brizantha cv. Xaraés, manejado sob lotação contínua.
Foram utilizados 8 machos não castrados da raça Nelore, com 21
meses de
idade e peso corporal inicial médio de 481,75 ± 28,15 kg, com
cânulas no rúmen. Os
animais foram submetidos aos protocolos sanitários de rotina do
Centro de Pesquisa
da DSM como vacinações e controle de ectoparasitas e
endoparasitas. Os animais
foram suplementados durante o período da seca e das águas que
antecederam este
experimento.
Os tratamentos testados foram: Suplemento proteico-energético
fornecido na
dose de 1% ou 1,5% do PC (base de MN) contendo monensina sódica
(MON) (867
mg/kg núcleo mineral) ou MOE com α-amilase (3000 mg CRINA®/kg
núcleo mineral
e 18.670 mg Ronozyme Rumistar®/kg núcleo mineral,
respectivamente) conforme
descrito na Tabela 1. A monensina sódica utilizada foi o produto
comercial
(Rumensin®, Elanco Animal Health, Indianapolis, IN) e a MOE
testada continha os
OE Timol, Eugenol, Vanilina e Limoneno (CRINA® Ruminants, DSM
Nutritional
Products Ltd) em combinação com α-amilase (Ronozyme Rumistar®,
DSM
Nutritional Products Ltd).
Os suplementos previamente pesados foram fornecidos
diariamente,
diretamente no rúmen do animal, via fístula ruminal, metade da
dose foi fornecida às
10h00min da manhã e a outra metade às 17h00min.
O experimento teve quatro períodos de 20 dias, totalizando 80
dias. Cada
período teve 12 dias de adaptação e 8 dias de coletas. Os
animais foram pesados
no início de cada período para ajuste da quantidade de
concentrado fornecido
diariamente.
A área de pastagem recebeu uma única aplicação de 60 kg N/ha
(via ureia)
em 12 de março de 2015. As alturas do dossel pastejado foram
tomadas em 20
-
44
pontos distintos ao longo da maior diagonal do piquete, com o
uso de transparência
e régua graduada em centímetros no 1° dia de cada período
(FAGUNDES, 1999).
A massa de forragem foi estimada no 1° dia de cada período, pelo
método
destrutivo, através do corte da planta a 3 cm do nível do solo,
em 4 pontos do
piquete, com utilização de moldura de 0,25 m x 0,25 m. As quatro
amostras foram
tomadas em pontos onde a altura de cada uma correspondia à
altura média do
dossel. As quatro amostras colhidas foram compostas, pesadas in
natura e duas sub
amostras de aproximadamente 300 g foram retiradas, uma para a
determinação da
matéria seca (MS) da massa de forragem total e a outra para a
determinação da
composição morfológica, sendo estas últimas separadas em lâmina
foliar, colmo
(inclui bainha) e material senescente. As amostras foram
armazenas em freezer a -
20°C e posteriormente foram descongeladas e secas em estufa a
55ºC por 72 horas.
As sub amostras para determinação da MS da massa de forragem
total foram
posteriormente secas segundo a AOAC (1990).
Para fins de análises bromatológicas, amostras do suplemento
coletadas
durante cada batida e compostas em uma única amostra e amostras
do pastejo
simulado, coletadas nos dias 1°, 7° e 14° de cada período também
compostas em
uma única amostra por período, foram secas em estufa a 55ºC por
72 horas, moídas
com peneira de malha de 1 mm (moinho tipo Willey) e analisadas
para Matéria seca
(MS), matéria mineral (MM) e estrato etéreo (EE) segundo a
AOAC(1990). O teor de
proteína bruta (PB) foi obtido mediante combustão das amostras
segundo o método
Dumas, utilizando-se uma auto-analizador de nitrogênio (LECO)
(WILES et al.,
1998). A fibra em detergente neutro (FDN), fibra em detergente
ácido (FDA) e lignina
foram determinadas segundo Van Soest (1991), utilizando amilase
termoestável e
sulfito de sódio. O N-FDN e o N-FDA foram determinadas por macro
Kjeldahl
(AOAC, 1990) após digestão das amostras em solução detergente
neutro e ácido
respectivamente (VAN SOEST et al., 1991). As amostras de
forragens foram
analisadas para nitrogênio solúvel (KRISHNAMOORTHY et al., 1982)
e para
nitrogênio não proteico (NNP) (LICITRA et al., 1996) para o
fracionamento de
proteínas de acordo com o CNCPS (SNIFFEN et al., 1992). Nas
Tabelas 2, 3 e 4 são
apresentados os dados descritivos da pastagem e dos suplementos
utilizados.
A ingestão de forragem foi calculada a partir da excreção fecal
total e da
digestibilidade dos alimentos. Durante os 17 primeiros dias de
cada período, dióxido
de titânio (TiO2) previamente pesado em cápsulas de papel (5g
cada cápsula) foi
-
45
inserido no rúmen dos animais logo após o fornecimento do
suplemento pela manhã
(10h00min) e novamente à tarde (17h00min). As amostras fecais
foram coletadas
entre o 13º e o 17º dia de cada período, duas vezes por dia
(10h00min e 17h00min)
diretamente do reto dos animais (150g por coleta) e congeladas à
-20ºC.
Posteriormente, as amostras foram descongeladas, compostas por
animal e período,
secas em estufa a 55ºC por 72 horas, e moídas com peneira de
malha de 1 mm
(moinho tipo Willey).
As amostras foram analisadas para matéria seca (MS) segundo a
AOAC
(1990). O teor de proteína bruta (PB) foi obtido mediante
combustão das amostras
segundo o método Dumas, utilizando-se um auto-analizador de
nitrogênio (LECO)
(WILES et al., 1998). A fibra em detergente neutro (FDN) foi
determinada segundo
Van Soest et al. (1991), em equipamento analisador de fibra
Ankom200 utilizando
amilase termoestável e sulfito de sódio.
As digestibilidades aparentes da MS, MO, PB e FDN presentes na
dieta foram
estimadas utilizando os valores individuais de consumo, excreção
fecal total e da
concentração dos nutrientes nos alimentos e fezes.
As análises de titânio foram realizadas no laboratório
multiusuário em
produção vegetal do Departamento de Produção Vegetal da
ESALQ/USP. As
amostras foram irradiadas usando o espectrômetro de
fluorescência de raios X por
dispersão de energia (modelo EDX-720 Shimadzu) de acordo com
Wastowski et al.
(2010).
A excreção fecal total com o marcador externo foi calculada
dividindo a
quantidade do marcador administrado pela a concentração do
marcador nas fezes.
Para a determinação de consumo de forragem foi utilizado o
marcador interno FDNi.
A contribuição fecal proveniente do concentrado foi determinada
como sendo a
quantidade de concentrado oferecida no período da avaliação,
multiplicada por sua
indigestibilidade. Do valor obtido da excreção fecal total foi
descontada a
contribuição do concentrado e o valor obtido foi dividido pelo
resíduo indigestível das
fezes (FDNi). O FDNi foi determinado de acordo com Krizsan &
Huhtanen (2013).
No 18° dia foram realizadas as coletas de urina, obtendo-se
amostras “spot”
durante micção espontânea dos animais, aproximadamente quatro
horas após o
fornecimento dos suplementos, para determinação dos derivados de
purina e cálculo
da síntese microbiana. As sub-amostras de urina (10 mL) foram
acidificadas (pH
-
46
-
47
O delineamento experimental utilizado foi o quadrado latino
duplo 4 X 4, com
2 animais por tratamento por período. Todas as variáveis foram
analisadas pelo
PROC MIXED do pacote estatístico STATISCAL ANALYSIS SYSTEM – SAS
(2003).
A análise de variância e as médias obtidas pelo método dos
quadrados mínimos
(LSMEANS) foram comparados pelo teste de Tukey a 10% de
significância pelo
procedimento proc MIXED do SAS. Obrigatoriamente, todos os
conjuntos de dados
foram testados antes da análise geral final, na intenção de
assegurar que todas as
premissas da análise de variância (aditividades do modelo,
independência dos erros,
normalidade dos dados e homocedasticidade) estivessem sendo
respeitadas.
3.3 RESULTADOS
Na Tabela 5 são apresentados os dados de consumo e
digestibilidade dos
nutrientes.
Houve interação entre aditivo e nível de suplemento para todas
as variáveis
de consumo (kg e %PC) avaliadas (P
-
48
de AGCC e a proporção molar de valerato (P
-
49
suplementados no nível de 1.5% do PC em comparação com 1.0% do
PC.
Entretanto, este efeito só ocorreu na presença de monensina, mas
não quando os
animais foram suplementados com MOE+AM. Na presença de
monensina, aumentar
o nível de suplemento de 1,0 para 1,5% do PC não afetou o
consumo de forragem,
ou seja, não houve efeito substitutivo adicional, ao passo que
na presença de
MOE+AM, houve redução significativa no consumo de forragem,
indicando efeito
substitutivo. Em um copilado realizado por Silva et al. (2009),
foi observado que o
consumo de MS de forragem foi reduzido à medida que se aumentou
o nível de
suplementação. Esse resultado foi semelhante ao encontrado por
Oliveira (2017) ao
suplementar novilhas nos níveis de 1,0% ou 1,5% do PC.
Observou-se redução no
tempo de pastejo de 100 min entre os tratamentos, mostrando
nítida redução do
consumo de forragem. Oliveira e Bonfim (2001) também observaram
redução no
tempo de pastejo quando novilhos foram suplementados com 0,9%,
1,2% e 1,5% do
PC na terminação, sugerindo redução no consumo de forragem.
A redução no CMSf com suplementação de níveis altos de
concentrado pode
ocorrer em virtude de efeitos negativos no pH ruminal e
consequente redução na
digestão de FDN (CAREY et al., 1993). No presente estudo, a
monensina sódica
manteve valores de pH ruminal mais elevados que a MOE+AM, sempre
acima de
6,0, assim como valores mais elevados de DFDN, DMS e DMO no
trato digestivo
total que a MOE+AM. A combinação de MOE+AM com suplementação de
1,5% do
PC resultou em pH ruminal de 5,86, tratamento este que
apresentou efeito
substitutivo marcante. Apesar de reduzir o pH ruminal, a
suplementação com 1,5%
do PC não causou redução na DFDN e aumentou da DMS e a DP. Caton
e
Dhuyvetter (1997) afirmaram que alterações no pH ruminal,
normalmente citadas
como a principal causa da redução de consumo de forragem e da
digestão da fibra,
podem não estar envolvidas no processo. Nos trabalhos de Martin
& Hibberd (1990),
Chase & Hibberd (1987), Pordomingo et al. (1991), Carey et
al. (1993), Faulkner et
al. (1994), Hess et al. (1996), Elizalde et al. (1998), Bodine
et al. (2003) e de Sales et
al. (2008), a suplementação energética reduziu o consumo de
forragem, mas em
apenas 3 deles (CAREY et al., 1993; FAULKNER et al., 1994; SALES
et al., 2008)
houve redução no pH ruminal significativamente. Em todos os
trabalhos o pH ruminal
foi maior que 6,0. De acordo com Orskov (1982) e Mertens (1977),
o crescimento
microbiano começa a ser prejudicado apenas quando o pH ruminal
cai abaixo de
-
50
6,2. As digestibilidades da forragem ou da FDN foram avaliadas
em 9 dos 10
trabalhos onde houve redução no consumo de forragem com a
suplementação
energética e em 5 desses trabalhos houve efeito negativo nas
digestibilidades. Em
apenas 1 desses 5 trabalhos (CAREY et al., 1993) a suplementação
energética
reduziu significativamente o pH ruminal. Portanto, assim como
relatado por Caton e
Dhuyvetter (1997) é difícil estabelecer relação consistente
entre queda de pH
ruminal, redução na digestão da MS ou da FDN e redução no
consumo de forragem
de animais suplementados com fontes energéticas. Contudo, nesses
estudos a
suplementação energética não chegou a patamares de 1,5% do PC
como no
presente estudo.
O aumento no CMS e no CMO concomitante ao aumento na
digestibilidade da
MS resultou em aumento no CMSD de 27% e no CMOD de 28,5% quando
os
animais foram suplementados com 1,5% do PC em comparação com
1,0% do PC
em presença de monensina. Quando os animais foram suplementados
com
MOE+AM, aumentar em 50% a dose de concentrado (1,5 x 1,0% do PC)
não
aumentou o CMSD e o CMOD, em virtude do efeito substitutivo
marcante, que
causou redução de 30,38% no CMSf e manteve os CMS e CMO
inalterados.
Quando os animais foram suplementados com 1.0% do PC, os animais
que
consumiram dietas com MOE+AM apresentaram maior CMSt que os
suplementados
com monensina sódica em virtude do maior CMSf, apesar do valor
mais baixo de pH
ruminal com MOE+AM (6,18 x 6,07), porém ambos os valores acima
de 6,0.
Entretanto, os CMSD e CMOD não foram diferentes entre os
aditivos testados, em
virtude da menor digestibilidade dessas frações quando MOE+AM
foi fornecida em
comparação com a monensina sódica.
O efeito positivo da monensina sódica na digestibilidades da MS,
MO, FDN e PB
das dietas em comparação com a MOE+AM pode estar relacionado aos
valores
mais elevados de pH ruminal com esse aditivo, entretanto, essa
maior digestibilidade
dos nutrientes nas dietas com monensina sódica não resultou em
maior
concentração de AGCC em comparação com as dietas contendo
MOE+AM, assim
como a maior digestibilidade da PB nas dietas com monensina não
afetou a
concentração ruminal de N-NH3.
A suplementação com 1,5% do PC aumentou as digestibilidades da
MS e da PB
em comparação com 1% do PC. O aumento na digestibilidade da MS
da dieta de
-
51
animais suplementados com 1,5% do PC é consequência da maior
participação de
concentrado na dieta total e da maior digestibilidade de
alimentos concentrados em
comparação com forragens (NASEM, 2016)). Essa maior
digestibilidade da MS das
dietas dos animais suplementados com 1,5% do PC é corroborada
pelas maiores
concentrações ruminais de AGCC, maiores proporções molares de
ácido propiônico,
menores relações C2:C3 e valores menores de pH ruminal. As
concentrações mais
altas de N-NH3 no fluido ruminal de bovinos suplementados com
1,5% do PC, deve-
se primeiramente à maior ingestão de N, e em segundo lugar,
provavelmente à
maior digestibilidade da PB dessas dietas.
Apesar da ausência de efeito de aditivos na concentração ruminal
de N-NH3, a
suplementação com MOE+AM reduziu as proporções molares de ácido
isobutirico e
isovalérico no rúmen, sugerindo menor deaminação de AA de cadeia
ramificada com
o uso desse aditivo ou maior utilização desses compostos para o
crescimento
microbiano. Tanto a eficiência quanto a produção de proteína
microbiana foram mais
altas nos animais suplementados com MOE+AM que com monensina. É
difícil
explicar o aumento de 29,8% em síntese microbiana com a
suplementação de
MOE+AM sem redução concomitante dos níveis de N-NH3 no fluido
ruminal, assim
como não é possível relacionar a variação na síntese microbiana
com os CMOD no
presente estudo. Entretanto, nos animais suplementados com
MOE+AM as
concentrações molares de AGCC no rúmen foram mais elevadas e os
valores de pH
ruminal foram mais baixos, indicativos de processo fermentativo
mais intenso no
rúmen desses animais em comparação com os animais suplementados
com
monensina sódica.
De acordo com Orskov (1982) e Mertens (1977), o crescimento
microbiano
começa a ser prejudicado apenas quando o pH ruminal cai abaixo
de 6,2. No
presente estudo, a redução no pH ruminal de 6,18, nos animais
suplementados com
monensina e 1% do PC para 5,86 nos animais suplementados com
MOE+AM e
1,5% do PC não foi deletéria para a eficiência de síntese
microbiana, pelo contrário,
houve aumento na eficiência e na produção microbiana.
Considerando os valores médios de N absorvido e de proteína
microbiana
produzida pelos animais nos tratamentos com monensina e com
MOE+AM, e o valor
de 64% de proteína metabolizável para a proteína microbiana
(NRC, 1996), a
-
52
suplementação com MOE+AM aumentou a proporção de proteína
microbiana na
proteína metabolizável de 55,94% para 83,47% em comparação com a
monensina.
3.5 CONCLUSÃO
Em conclusão, para animais em pastagens tropicais de boa
qualidade, o nível de
suplementação entre 1 e 1,5% PC interage com a fonte de aditivo
e o aumento na
ingestão de energia com nível alto de suplementação ocorre em
presença de
monensina mas não de MOE+AM. A Monensina e MOE+AM estabelecem
padrões
de fermentação ruminal distintos, com valores de pH ruminal e
proporções molares
de propionato mais altos com monensina e com concentrações de
AGCC, de
acetato, eficiência e síntese microbiana mais altos com
MOE+AM.
REFERÊNCIAS
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2016. Disponível em: < http://
http://www.anualpec.com.br/InformaEconomicsFNP,2016 > Acesso
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2018.
ACEDO, T. S., DOREA, J. R. R., CORTINHAS, C. S. 2015. O uso de
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