USO DE BIOLOGIA MOLECULAR NA USO DE BIOLOGIA MOLECULAR NA IDENTIFICAÇÃO DE VÍRUS NA IDENTIFICAÇÃO DE VÍRUS NA CULTURA DO FEIJÃOCULTURA DO FEIJÃO--CAUPICAUPI

PAULO SERGIO TORRES BRIOSOPAULO SERGIO TORRES BRIOSO

Professor Associado Professor Associado -- UFRRJ, DoutorUFRRJ, Doutor

20092009

AGRADECIMENTOSAGRADECIMENTOS

II CONACII CONAC

EMBRAPA AMAZÔNIA ORIENTAL EMBRAPA AMAZÔNIA ORIENTAL -- Belém (PA)Belém (PA)EMBRAPA AMAZÔNIA ORIENTAL EMBRAPA AMAZÔNIA ORIENTAL -- Belém (PA)Belém (PA)

Dr. Altevir de Matos LopesDr. Altevir de Matos Lopes

PRODUÇÃOPRODUÇÃO

•• RegiãoRegião nordestenordeste:: 8585 %% dada áreaárea colhidacolhida•• RegiãoRegião sudestesudeste:: 88 %% dada áreaárea colhidacolhida

(mais(mais dada metade,metade, nono EstadoEstado dodo RioRio dede(mais(mais dada metade,metade, nono EstadoEstado dodo RioRio dedeJaneiro)Janeiro)

•• RegiãoRegião nortenorte•• RegiãoRegião centrocentro--oesteoeste

PRINCIPAIS FITOPATÓGENOS EM PRINCIPAIS FITOPATÓGENOS EM FEIJÃOFEIJÃO--CAUPICAUPI

•• BACTÉRIASBACTÉRIAS

•• FUNGOSFUNGOS•• FUNGOSFUNGOS

•• NEMATÓIDESNEMATÓIDES

•• VÍRUSVÍRUS

•• AssociaçõesAssociações (vírus(vírus XX vírusvírus;; fungosfungos XX nematóides?)nematóides?)

COMPLEXO CAUSALCOMPLEXO CAUSAL

Virulência do patógenoVirulência do patógenoEfeito sinérgico entre patógenosEfeito sinérgico entre patógenos

VetorVetorSuscetibilidade da cultivarSuscetibilidade da cultivar

Idade da planta na época da infecçãoIdade da planta na época da infecçãoIdade da planta na época da infecçãoIdade da planta na época da infecçãoCondições AmbientaisCondições Ambientais

Grau de Severidade da DoençaGrau de Severidade da Doença

PERDAS EM FEIJÃOPERDAS EM FEIJÃO--CAUPI CAUPI OCASIONADAS POR VÍRUSOCASIONADAS POR VÍRUS

•• 80% de perda 80% de perda -- Gonçalves & Lima, 1988Gonçalves & Lima, 1988•• 80% de perda 80% de perda -- Gonçalves & Lima, 1988Gonçalves & Lima, 1988

DIAGNOSE VIRALDIAGNOSE VIRAL

•• TestesTestes BiológicosBiológicos:: InoculaçãoInoculação mecânica,mecânica,

enxertia,enxertia, CuscutaCuscuta spsp..,, vetoresvetores

INOCULACÃO MECÂNICA

ENXERTIA

CUSCUTACUSCUTA

AFÍDEOS

MOSCA BRANCA

COLEÓPTEROS

DIAGNOSE VIRALDIAGNOSE VIRAL

•• MicroscopiaMicroscopia:: Ótica,Ótica, dede Fluorescência,Fluorescência,

EletrônicaEletrônica

Cucumber mosaic virusCucumber mosaic virusCucumber mosaic virusCucumber mosaic virus –––– Inclusão (Microscopia Inclusão (Microscopia Inclusão (Microscopia Inclusão (Microscopia Ótica)Ótica)Ótica)Ótica)

Cucumber mosaic virus (Microscopia Eletrônica de

Transmissão)

DIAGNOSE VIRALDIAGNOSE VIRAL

TestesTestes SorológicosSorológicos::

•• ELISAELISA,, DotDot--ELISAELISA,, ImunomicroscopiaImunomicroscopia

Eletrônica,Eletrônica, MicroscopiaMicroscopia dedeEletrônica,Eletrônica, MicroscopiaMicroscopia dede

ImunofluorescênciaImunofluorescência

TESTE SOROLÓGICOTESTE SOROLÓGICO

DOTDOT--ELISA EELISA E ELISAELISA

DIAGNOSE VIRALDIAGNOSE VIRAL

•• TestesTestes MolecularesMoleculares

BIOLOGIA MOLECULARBIOLOGIA MOLECULAR

•• 19441944 -- Avery,Avery, MacLeodMacLeod && McCartyMcCarty -- DNADNAgenômicogenômico dede bactériabactéria -- transmissãotransmissão dedecaracterescaracteres hereditárioshereditários

•• 19521952 -- HersheyHershey && ChaseChase -- DNADNA comocomo•• 19521952 -- HersheyHershey && ChaseChase -- DNADNA comocomomaterialmaterial genéticogenético

•• 19531953 -- WatsonWatson && CrickCrick -- ModeloModelo estruturalestruturaldede dupladupla hélicehélice dada moléculamolécula dede DNADNA

FITOPATOLOGIA MOLECULARFITOPATOLOGIA MOLECULAR

•• 19561956:: GierrerGierrer && SchrammSchramm -- TobaccoTobacco mosaicmosaic virusvirus(TMV)(TMV) ee plantasplantas dede FumoFumo -- RNARNA comocomo materialmaterialgenéticogenético

•• 19601960:: AndererAnderer etet alal..,, FraenkelFraenkel--ConratConrat etet alal.. --SeqüenciamentoSeqüenciamento dede aminoácidosaminoácidos dodo capsídeocapsídeododo TMVTMVdodo TMVTMV

•• IsolamentoIsolamento ee usouso dede enzimasenzimas dede restriçãorestrição•• LigaçãoLigação dede fragmentosfragmentos dede DNADNA atravésatravés dada DNADNA

ligaseligase

•• ConstruçãoConstrução dede umauma moléculamolécula dede DNADNA circularcircularrecombinanterecombinante

•• DesenvolvimentoDesenvolvimento emem paraleloparalelo dede inúmerasinúmerastécnicastécnicas molecularesmoleculares

TÉCNICAS MOLECULARES NA TÉCNICAS MOLECULARES NA IDENTIFICAÇÃO DE VÍRUS EM FEIJÃOIDENTIFICAÇÃO DE VÍRUS EM FEIJÃO--CAUPICAUPI

•• ExtraçãoExtração ee EletroforeseEletroforese dodo ácidoácido nucléiconucléico•• ClonagemClonagem ee SeqüenciamentoSeqüenciamento dodo ácidoácido

nucléiconucléico•• RFLPRFLP (“Restriction(“Restriction FragmentFragment LengthLength•• RFLPRFLP (“Restriction(“Restriction FragmentFragment LengthLength

Polymorphism”)Polymorphism”)•• HibridizaçãoHibridização dede ácidosácidos nucléicosnucléicos -- TesteTeste dede

NorthernNorthern BlotBlot,, TesteTeste dede SouthernSouthern BlotBlot eeTesteTeste dede DotDot BlotBlot))

•• PolymerasePolymerase ChainChain ReactionReaction (PCR)(PCR) eemodalidadesmodalidades (RT(RT--PCR,PCR, ICIC--PCR,PCR, RealReal TimeTime--PCRPCR,, etc)etc)

AçúcarFosfato

Base

SEQÜENCIAMENTOSEQÜENCIAMENTO

SEQÜÊNCIAS DISPONÍVEIS DE FITOVÍRUSSEQÜÊNCIAS DISPONÍVEIS DE FITOVÍRUS

“National Center for Biotechnology Information” “National Center for Biotechnology Information”

(NCBI)(NCBI)(NCBI)(NCBI)

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Entrez/index.htmlhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/Entrez/index.html

FAMÍLIAS VIRAIS FAMÍLIAS VIRAIS X X

SUSCETIBILIDADE DO FEIJÃOSUSCETIBILIDADE DO FEIJÃO--CAUPICAUPI

1.1. BromoviridaeBromoviridae2.2. Bunyaviridae Bunyaviridae 3.3. CaulimoviridaeCaulimoviridae4.4. ComoviridaeComoviridae5.5. GeminiviridaeGeminiviridae6.6.6.6. Luteoviridae Luteoviridae 7.7. PartitiviridaePartitiviridae8.8. PotyviridaePotyviridae9.9. Rhabdoviridae Rhabdoviridae 10.10.Tombusviridae Tombusviridae 11.11. IndeterminadasIndeterminadas

AçúcarFosfato

Base

TESTE DE DOT BLOTTESTE DE DOT BLOT

32P32

P

amostrasSonda marcada com 32P

Sonda marcada com Fluoresceina

amostras

F F

Fluorescência

Conjugado-AP Anti-Fluoresceina

Substrato

SONDA NÃO RADIOATIVASONDA NÃO RADIOATIVA SONDA RADIOATIVASONDA RADIOATIVA

NEGATIVO POSITIVO

SondasSondas dispondisponííveisveis parapara vvíírusrus dedeFeijãoFeijão--caupicaupi::

4 v4 víírusrus

2 sorotipos2 sorotipos

Membrana de Nylon

NEGATIVO POSITIVO

TESTE DE PCRTESTE DE PCR

0) Ciclo inicial - 55ºC

1) Desnaturação do DNA - 90ºC1) Desnaturação do DNA - 90ºC

2) Anelamento dos Primers - 55ºC

3) Polimerização - 72ºC

TESTE DE PCR

TESTE DE RTTESTE DE RT--PCRPCR

DNADNA

RNARNARNARNA

TESTE DE IMUNOCAPTURE-PCR

FAMÍLIAS VIRAIS FAMÍLIAS VIRAIS X X

SUSCETIBILIDADE DO FEIJÃOSUSCETIBILIDADE DO FEIJÃO--CAUPICAUPI

1.1. BromoviridaeBromoviridae2.2. Bunyaviridae Bunyaviridae 3.3. CaulimoviridaeCaulimoviridae4.4. ComoviridaeComoviridae5.5. GeminiviridaeGeminiviridae6.6.6.6. Luteoviridae Luteoviridae 7.7. PartitiviridaePartitiviridae8.8. PotyviridaePotyviridae9.9. Rhabdoviridae Rhabdoviridae 10.10.Tombusviridae Tombusviridae 11.11. IndeterminadasIndeterminadas

GÊNEROS VIRAIS GÊNEROS VIRAIS X X

SUSCETIBILIDADE DO FEIJÃOSUSCETIBILIDADE DO FEIJÃO--CAUPICAUPI

1.1. Alphacryptovirus Alphacryptovirus

2.2. AlfamovirusAlfamovirus

3.3. BegomovirusBegomovirus

4.4. Bromovirus Bromovirus

5.5. CapillovirusCapillovirus

6.6. CarlavirusCarlavirus

7.7. CarmovirusCarmovirus

1.1. Nepovirus Nepovirus

2.2. Nucleorhabdovirus Nucleorhabdovirus

3.3. Oleavirus Oleavirus

4.4. Ourmiavirus Ourmiavirus

5.5. PecluvirusPecluvirus

6.6. Polerovirus Polerovirus

7.7. PotexvirusPotexvirus7.7. CarmovirusCarmovirus

8.8. Comovirus Comovirus

9.9. Cucumovirus Cucumovirus

10.10.Curtovirus Curtovirus

11.11.Dianthovirus Dianthovirus

12.12.Enamovirus Enamovirus

13.13.Fabavirus Fabavirus

14.14.Ilarvirus Ilarvirus

15.15.Macluravirus Macluravirus

16.16.NanovirusNanovirus

17.17.NecrovirusNecrovirus

7.7. PotexvirusPotexvirus

8.8. PotyvirusPotyvirus

9.9. SobemovirusSobemovirus

10.10.Soybean chlorotic mottleSoybean chlorotic mottle--like like virusesviruses

11.11.Tobamovirus Tobamovirus

12.12.Tobravirus Tobravirus

13.13.Tombusvirus Tombusvirus

14.14.Tospovirus Tospovirus

15.15.TrichovirusTrichovirus

16.16.Tymovirus Tymovirus

17.17.VitivirusVitivirus

SEQÜENCIAMENTO E DIAGNOSE SEQÜENCIAMENTO E DIAGNOSE MOLECULAR DE FITOVÍRUS (RNA) MOLECULAR DE FITOVÍRUS (RNA)

NO BRASILNO BRASIL

HistóricoHistórico::•• 19921992 -- AndeanAndean potatopotato mottlemottle virusvirus (APMoV)(APMoV) -- PrimeiroPrimeiro fitopatógenofitopatógeno

completamentecompletamente seqüenciadoseqüenciado nono BrasilBrasil

IsoladosIsolados viraisvirais oriundosoriundos dede feijãofeijão--caupicaupi::IsoladosIsolados viraisvirais oriundosoriundos dede feijãofeijão--caupicaupi::•• 19961996 -- CowpeaCowpea severesevere mosaicmosaic virusvirus (CPSMV)(CPSMV)•• 20002000 -- CowpeaCowpea aphidaphid--borneborne mosaicmosaic virusvirus (CABMV)(CABMV)

IsoladosIsolados viraisvirais (que(que infectaminfectam oo feijãofeijão--caupi)caupi) masmas oriundosoriundos dedeoutrasoutras culturasculturas::

•• 20002000 -- CucumberCucumber mosaicmosaic virusvirus (CMV)(CMV)•• 20002000 -- CowpeaCowpea rugoserugose mosaicmosaic virusvirus (CPRMV)(CPRMV)

PRINCIPAIS VÍRUS QUE INFECTAM O FEIJÃOPRINCIPAIS VÍRUS QUE INFECTAM O FEIJÃO--CAUPI NO BRASILCAUPI NO BRASIL

1.1. CucumberCucumber mosaicmosaic virusvirus (CMV)(CMV) -- BromoviridaeBromoviridae

2.2. CowpeaCowpea severesevere mosaicmosaic virusvirus (CPSMV)(CPSMV) -- ComoviridaeComoviridae

3.3. CowpeaCowpea goldengolden mosaicmosaic virusvirus (CpGMV)(CpGMV) -- GeminiviridaeGeminiviridae3.3. CowpeaCowpea goldengolden mosaicmosaic virusvirus (CpGMV)(CpGMV) -- GeminiviridaeGeminiviridae

4.4. BeanBean commoncommon mosaicmosaic virusvirus (BCMV)(BCMV) -- PotyviridaePotyviridae

5.5. CowpeaCowpea aphidaphid--borneborne mosaicmosaic virusvirus (CABMV)(CABMV) -- PotyviridaePotyviridae

6.6. CowpeaCowpea greengreen veinvein bandingbanding virusvirus (CGVBV)(CGVBV) -- PotyviridaePotyviridae

7.7. CowpeaCowpea rugoserugose mosaicmosaic virusvirus (CPRMV)(CPRMV) -- PotyviridaePotyviridae

8.8. CowpeaCowpea severesevere mottlemottle virusvirus (CPSMoV)(CPSMoV) -- PotyviridaePotyviridae

Brioso et al. (1996), Passos (1999), Figueiredo et al.(2000) e Passos et al. (2000) - CPSMV e oCABMV:

TESTE DE RTTESTE DE RT--PCR, DOTPCR, DOT--BLOTBLOT

• Seleção inicial de plantas de feijão-caupiresistentes a vírus

• Diagnose precoce das espécies virais na cultura• Detecção de vetores virulíferos (no caso, de

besouro, pulgão)

Tamanho esperado do fragmento amplificado e posição correspondente dosoligonucleotídeos degenerados na seqüência do RNA 2 viral, elaborados a partir deregiões de aminoácidos conservados na subunidade maior e subunidade menor docapsídeo viral das espécies do gênero Comovirus.__________________________________________________________________________VÍRUS FRAGMENTO

(pb) SEQÜÊNCIA DE AMINOÁCIDOSAWSTQV GPN*GFE

__________________________________________________________________________APMoV 641 973-990 1594-1614** BPMV 602 2711-2728 3293-3313BPMV 602 2711-2728 3293-3313CPMV 599 2456-2473 3035-3055CPSMV 593 2472-2489 3045-3065RCMV 605 2424-2441 3009-3029SqMV 602 1615-1632 2197-2217________________________________________________________APMoV - Andean potato mottle virus; BPMV - Bean pod mottle virus; CPMV -Cowpea mosaic virus; CPSMV - Cowpea severe mosaic virus; RCMV - Red clovermottle virus; SqMV - Squash mosaic virus; pb - Pares de bases nucleotídicas; * - Nou R; ** - Posição correspondente na seqüência nucleotídica do RNA 2 viral.

Teste de RT-PCR - Par deoligonucleotídeos degeneradoscorrespondentes às seqüênciasde aminoácidos conservados,AWSTQV e GPN*GFE (* = N ouR), nas subunidades do capsídeodas espécies do gênero

COMOVIRUSCOMOVIRUS -- ESPÉCIES VIRAISESPÉCIES VIRAIS

das espécies do gêneroComovirus: L – 1 kb DNA Ladder,A – APMoV estirpe B, B – APMoVestirpe C, C – CPSMV sorotipo I,D – N. rustica sadia, E – Feijão-caupi sadio, F - CPSMV sorotipoII, G - BPMV (Brioso et al., 1996)

NORTHERN BLOT NORTHERN BLOT -- CPSMVCPSMV

A)A) RNARNA middlemiddle APMoVAPMoV estirpeestirpe CCL)L) 11 kbkb DNADNA ladderladderL)L) 11 kbkb DNADNA ladderladderB)B) RNARNA middlemiddle CPSMVCPSMV sorotiposorotipo IIC)C) RNARNA bottombottom CPSMVCPSMV sorotiposorotipo II

Brioso et al., 1996

Passos (1999) - Técnica de RT-PCR, a partir de um par deoligonucleotídeos degenerados correspondentes às seqüências deaminoácidos conservados (CPSMV).

Resistente ao Sorotipo I e Sorotipo II: BR 14 - Mulato, BR 17 -Gurguéia, TE 93-244-23F

SELEÇÃO INICIAL DE PLANTAS DE FEIJÃOSELEÇÃO INICIAL DE PLANTAS DE FEIJÃO--CAUPI RESISTENTESCAUPI RESISTENTES

Gurguéia, TE 93-244-23F

Resistente ao Sorotipo I e suscetível ao Sorotipo II: IT 89KD-260, TE94-256-2E

Resistente ao Sorotipo II e suscetível ao Sorotipo I: TE 93-200-40F,TE 93-200-49F, TE 93-212-10F, TE 93-213-12F.1, TE 93-213-12F.2,TE 93-214-4F.2, TE 94-277-3F

Cowpea severe mosaic virusCowpea severe mosaic virus (CPSMV) (CPSMV) sorotipo Isorotipo I

L 1 2 3

575 pb

Eletroforese em gel de agarose a 1%, do fragmento amplificado por RT-PCR comprimers específicos para o CPSMV: (L) Padrão de massa molecular 1kb DNALadder, (1) cv. Costelão sadio, (2) TE 93-200-49F infectada com o CPSMVsorotipo I, (3) Controle sem RNA

L 1 2 3 4

575495316

Eletroforese em gel de agarose a 1% corado com brometo de etídio, dofragmento amplificado com primers específicos para o CPSMV, a partir deamostras de linhagens de feijão-caupi TE 93-200-49F e IT 89D-260infectadas com o CPSMV sorotipo I (2) e CPSMV sorotipo II (3),respectivamente. Padrão de massa molecular, 1kb DNA Ladder (L). Feijão-caupi ‘Costelão’ sadio (1). Controle sem RNA (4). (Nogueira et al., 2003)

Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV)

Resistente: ‘Capela’, IT 851-2687, IT 860-716-2, IT 870-716-1, TE 96-282-22G, TE 96-290-

Figueiredo et al. (2000) - RT-PCR, a partir de um par deoligonucleotídeos específicos ao CABMV - fragmentoespecífico de 759 pb

SELEÇÃO INICIAL DE PLANTAS DE FEIJÃOSELEÇÃO INICIAL DE PLANTAS DE FEIJÃO--CAUPI RESISTENTESCAUPI RESISTENTES

Resistente: ‘Capela’, IT 851-2687, IT 860-716-2, IT 870-716-1, TE 96-282-22G, TE 96-290-5G

Suscetível: BR-14-Mulato, BR-17-Gurguéia, CNC 0434, Costelão, Monteiro, Pitiúba, Seridó,TE 93-43-12F, TE 93-200-49F, TE 93-204-13F, TE 93-204-21F, TE 93-212-10F, TE 94-269-1E, TE 94-273-9E, TE 94-277-3F, TE 96-280-1F, TE 96-280-2F, TE 96-280-3F, TE 96-280-4F,TE 96-280-5F, TE 96-280-6F, TE 96-282-7F, TE 96-282-8F, TE 96-282-9F, TE 96-282-10F, TE96-282-11F, TE 96-282-13F, TE 96-282-14F, TE 96-282-15F, TE 96-282-16F, TE 96-282-17F,TE 96-282-18F, TE 96-282-19F, TE 96-282-20F, TE 96-282-21F, TE 96-282-22F, TE 96-282-23F, TE 96-282-25F, TE 96-282-26F, TE 96-282-27F, TE 96-282-30F, TE 96-282-31F, TE 96-282-32F, TE 96-282-34F, TE 96-290-1F, TE 96-290-2F, TE 96-290-3F, TE 96-290-4F, TE 96-290-5F, TE 96-290-6F, TE 96-290-7F, TE 96-290-8F, TE 96-290-9F, TE 96-290-10F, TE 96-290-11F, TE 96-290-12F, TE 96-290-13F

TESTE DE DOT TESTE DE DOT –– BLOT/ CPSMVBLOT/ CPSMV

•• Cerotoma arcuataCerotoma arcuata

http://sistemasdeproducao.cnptia.embrapa.br/FontesHTML/Feijao/FeijaoCaupi/pragas_aereas.htm

Cowpea golden mosaic virus (CpGMV)

Cowpea golden mosaic virus (CpGMV)

L 1 2 3L 1 2 3

1,2 kb1,5 kb

Amostras foliares amplificadas comPrimers específicos: (L) 1 kb; (1) Feijão-caupi com CpGMV; (2) Feijão-caupisadio; (3) amostra sem DNA

Amostras foliares amplificadas com Primersespecíficos: (L) 1 kb; (1) Feijão-caupi comCpGMV; (2) Feijão-caupi sadio; (3) amostrasem DNA

Nogueira (2003) e Nogueira et al. (2005):• seqüenciamento produto amplificado;• confecção de sonda molecular específica ao CPSMV e aoCABMV;• identificar e selecionar plantas imunes a estes vírus;• linhagens de feijão-caupi adaptadas para o Estado do Rio de

CULTIVAR DE FEIJÃOCULTIVAR DE FEIJÃO--CAUPICAUPI

• linhagens de feijão-caupi adaptadas para o Estado do Rio deJaneiro

2006 - Primeira cultivar de feijão-caupi produtiva, imune aoCPSMV (sorotipo I e sorotipo II), CABMV e adaptada ao Estadodo Rio de Janeiro

QUEBRA DE RESISTÊNCIAQUEBRA DE RESISTÊNCIA

Nogueira Nogueira et alet al., 2009., 2009

•• ‘Capela’ ‘Capela’ –– Mosaico severoMosaico severo

•• Infecção mista CMV + CABMVInfecção mista CMV + CABMV•• Infecção mista CMV + CABMVInfecção mista CMV + CABMV

•• CMVCMV (oriundo(oriundo dodo feijãofeijão--caupicaupi dodo Piauí/Piauí/19821982)) –– 5353%% transmissãotransmissão pelapela sementesementedede feijãofeijão ‘Rico‘Rico 2323’’

FITOPATOLOGISTA + MELHORISTA X

FITOPATÓGENOS

Prêmio Frederico de Menezes Veiga 2009, Empresa Brasileira de Pesquisa

Agropecuária

+

2006

2006 2006 -- 800 kg/ha

TÉCNICAS MOLECULARESTÉCNICAS MOLECULARES

PerguntasPerguntas freqüentesfreqüentes::

•• TemTem custocusto elevado?elevado?•• ÉÉ obrigatóriaobrigatória aa suasua utilização?utilização?•• VouVou terter queque remodelarremodelar ee rere--aparelharaparelhar oo

Laboratório?Laboratório?

ESCOLHA DA TÉCNICAESCOLHA DA TÉCNICA

• Custos e materiais necessários• Finalidade• Nº de amostras a serem processadas• Precisão• Precisão• Sensibilidade• Treinamento do operador

CONCLUSÃOCONCLUSÃO

TécnicasTécnicas MolecularesMoleculares -- AmplaAmpla versatilidade,versatilidade, eficiência,eficiência,precisãoprecisão ee sensibilidadesensibilidade

DiferentesDiferentes linhaslinhas dede trabalho,trabalho, independentementeindependentemente dodopatógeno,patógeno, dodo vetorvetor ee dada culturacultura enfocadaenfocadapatógeno,patógeno, dodo vetorvetor ee dada culturacultura enfocadaenfocada

LinguagemLinguagem comumcomum entreentre FitopatologistasFitopatologistas ee outrosoutrosprofissionaisprofissionais

TécnicaTécnica adotadaadotada emem grandegrande parteparte dosdos laboratórioslaboratórios dedeuniversidadesuniversidades ee dede empresas,empresas, públicaspúblicas ouou privadasprivadasnana diagnosediagnose molecularmolecular dede vírusvírus (patógenos)(patógenos) dedefeijãofeijão--caupicaupi

LABORATÓRIO OFICIAL DE DIAGNÓSTICO LABORATÓRIO OFICIAL DE DIAGNÓSTICO FITOSSANITÁRIO DA UFRRJ FITOSSANITÁRIO DA UFRRJ -- EQUIPEEQUIPE

•• LaboratórioLaboratório credenciadocredenciado juntojunto aoao MinistérioMinistério dada Agricultura,Agricultura, PecuáriaPecuária eeAbastecimentoAbastecimento parapara análiseanálise dede fungos,fungos, procariotos,procariotos, nematóides,nematóides, vírusvírusee viróidesviróides emem produtosprodutos dede origemorigem vegetalvegetal ee expedirexpedir laudolaudo oficialoficial dedeee viróidesviróides emem produtosprodutos dede origemorigem vegetalvegetal ee expedirexpedir laudolaudo oficialoficial dedediagnósticodiagnóstico fitossanitáriofitossanitário..

•• Atualmente,Atualmente, aa equipeequipe éé formadaformada porpor 22 DocentesDocentes--doutores,doutores, 11Doutorando,Doutorando, 22 Mestrandos,Mestrandos, 11 Estagiário,Estagiário, 55 ServidoresServidores

CONTATOCONTATO

Laboratório Oficial de Diagnóstico Fitossanitário

Instituto de BiologiaUniversidade Federal Rural do Rio de Janeiro

Caixa Postal 74.585Seropédica, RJCEP: 23851-970

E-mail: brioso@bighost.com.brpaulobri@ufrrj.br

http://www.fito2009.com/fitop/fitop.htm