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SUPLEMENTO XV Encontro da Sociedade Portuguesa de Patologia Animal REVISTA PORTUGUESA CIÊNCIAS VETERINÁRIAS DE 79 A SPPA organizou o seu XV Encontro, a 12 de Março de 2010 na cidade de Viseu, onde foi acolhido na Escola Superior Agrária, Instituto Politécnico de Viseu. O tema deste encontro foi o "Diagnóstico Diferencial das Doenças Metabólicas, Endócrinas e do SNC de Pequenos Ruminantes". Como orador principal contou com o Prof. Doutor Valentin Perez, professor Catedrático da Universidade de Leon desde 2006, com um curriculum relevante na área temática deste encontro. O Prof. Doutor Valentin Perez desde 1990 participa activamente em cerca de duas dezenas de projectos de investigação financiados na área da Sanidade dos Pequenos Ruminantes, tendo publicado nesta área dezenas de publicações em revis- tas científicas de elevado impacto. Ao longo dos últi- mos anos tem vindo a integrar vários centros de Investigação de renome, de onde se destaca o College of Veterinary Medicine da Cornell University, Estados Unidos e o National Veterinary Laboratory, Dinamarca, em 1993, o Moredun Research Institute, em Edimburgo, Reino Unido em 1994, 1995 e 1996, e o California Veterinary Diagnostic Laboratory da Universidade de Califórnia, Estados Unidos, em 2000. No seu currículo consta ainda a gestão do Serviço de Diagnóstico Anatomopatológico da Faculdade de Veterinária da Universidade de Leon desde 1994, e vários prémios e bolsas de mérito científico, entre os quais o Premio Extraordinário de Licenciatura da Faculdade de Veterinária da Universidad de Zaragoza e o Prémio Nacional de Terminação de Estudios do Ministério de Educação e Ciência, em 1988, e o Prémio Extraordinário do Doutorado em Áreas Biomédicas, da Universidade de Zaragoza, em1993. Este evento, além do orador principal, contou com 55 congressistas, 6 oradores convidados, 12 oradores de comunicações livres e 3 patrocinadores. A comissão científica foi constituída pela mesa da SPPA e a Comissão Organizadora pela mesa da SPPA, docentes da área científica das Ciências Veterinárias da ESAV e a técnica do laboratório de anatomia Patológica da ESAV. O secretariado foi assegurado pelos alunos do Curso de Enfermagem Veterinária da ESAV. Comunicações orais plenárias A imunocitoquímica em citologia Lopes P. Serviço de Anatomia Patológica - IPO PORTO Introdução: A imunocitoquímica é uma técnica de estudo e de análise de células e tecidos, hoje muito usada em biologia e em patologia para estudo dos diferentes processos biopatológicos envolvidos na génese das doenças, sobretudo das neoplasias. Nestas, a imunocitoquímica é usada no diagnóstico, na avaliação do prognóstico e também com indicador preditivo da terapêutica. Objectivo: É objectivo desta comunicação relatar a experiência adquirida no trabalho de rotina do IPO-Porto na área da citologia, nomeadamente: a) No tipo de amostras recebidas b) Nos anticorpos mais comummente utilizados c) Na metodologia usada d) Na apreciação dos resultados Material, métodos e resultados: As amostras mais frequentemente recebidas para estudo imunocito- químico são: a) Esfregaços convencionais de citologia aspirativa fixados em álcool a 95% b) Esfregaços em monocamada de citologia de líqui- dos orgânicos (urina, lavados, derrames, lavados de agulha) c) "Cell block" Os anticorpos mais frequentemente requisitados são: receptores hormonais; citoqueratinas de diferentes pesos moleculares, com ênfase para as citoqueratinas 7 e 20; marcadores neuroendócrinos, sobretudo sinaptofisina e cromogranina; marcadores de diferen- ciação tumoral do tipo da calretinina, TTF1, HMB45 e MelA; marcadores linfoides como o CD45; e mais raramente, marcadores mesenquimatosos. A tecnolologia usada obedece ao mesmo protocolo que é utilizado para cortes de parafina. Na recupera- ção antigénica é usado o banho-maria a 95 graus em tempos variáveis; o tempo de incubação com o anticorpo primário é variável (30 minutos, 60 minutos ou a noite). O processamento pode ser manual ou automático, de acordo com as circunstâncias. O sistema de revelação usado é o DAB. Muito frequentemente, na mesma lâmina são reali- zados testes para dois anticorpos. Na apreciação dos resultados, são de salientar os

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SUPLEMENTO

XV Encontro da Sociedade Portuguesa de Patologia Animal

R E V I S T A P O R T U G U E S A

CIÊNCIAS VETERINÁRIASDE

79

A SPPA organizou o seu XV Encontro, a 12 deMarço de 2010 na cidade de Viseu, onde foi acolhidona Escola Superior Agrária, Instituto Politécnico deViseu. O tema deste encontro foi o "DiagnósticoDiferencial das Doenças Metabólicas, Endócrinas e doSNC de Pequenos Ruminantes".

Como orador principal contou com o Prof. DoutorValentin Perez, professor Catedrático da Universidadede Leon desde 2006, com um curriculum relevante naárea temática deste encontro. O Prof. Doutor ValentinPerez desde 1990 participa activamente em cerca deduas dezenas de projectos de investigação financiadosna área da Sanidade dos Pequenos Ruminantes, tendopublicado nesta área dezenas de publicações em revis-tas científicas de elevado impacto. Ao longo dos últi-mos anos tem vindo a integrar vários centros deInvestigação de renome, de onde se destaca o Collegeof Veterinary Medicine da Cornell University, EstadosUnidos e o National Veterinary Laboratory,Dinamarca, em 1993, o Moredun Research Institute,em Edimburgo, Reino Unido em 1994, 1995 e 1996, eo California Veterinary Diagnostic Laboratory daUniversidade de Califórnia, Estados Unidos, em 2000.No seu currículo consta ainda a gestão do Serviço deDiagnóstico Anatomopatológico da Faculdade deVeterinária da Universidade de Leon desde 1994, evários prémios e bolsas de mérito científico, entre osquais o Premio Extraordinário de Licenciatura daFaculdade de Veterinária da Universidad de Zaragozae o Prémio Nacional de Terminação de Estudios doMinistério de Educação e Ciência, em 1988, e oPrémio Extraordinário do Doutorado em ÁreasBiomédicas, da Universidade de Zaragoza, em1993.

Este evento, além do orador principal, contou com55 congressistas, 6 oradores convidados, 12 oradoresde comunicações livres e 3 patrocinadores.

A comissão científica foi constituída pela mesa daSPPA e a Comissão Organizadora pela mesa da SPPA,docentes da área científica das Ciências Veterináriasda ESAV e a técnica do laboratório de anatomiaPatológica da ESAV. O secretariado foi asseguradopelos alunos do Curso de Enfermagem Veterinária daESAV.

Comunicações orais plenárias

A imunocitoquímica em citologia

Lopes P.Serviço de Anatomia Patológica - IPO PORTO

Introdução: A imunocitoquímica é uma técnica deestudo e de análise de células e tecidos, hoje muitousada em biologia e em patologia para estudo dosdiferentes processos biopatológicos envolvidos nagénese das doenças, sobretudo das neoplasias. Nestas,a imunocitoquímica é usada no diagnóstico, na avaliação do prognóstico e também com indicadorpreditivo da terapêutica.Objectivo: É objectivo desta comunicação relatar a experiência adquirida no trabalho de rotina do IPO-Porto na área da citologia, nomeadamente:

a) No tipo de amostras recebidasb) Nos anticorpos mais comummente utilizadosc) Na metodologia usadad) Na apreciação dos resultados

Material, métodos e resultados: As amostras maisfrequentemente recebidas para estudo imunocito-químico são:

a) Esfregaços convencionais de citologia aspirativafixados em álcool a 95%

b) Esfregaços em monocamada de citologia de líqui-dos orgânicos (urina, lavados, derrames, lavados deagulha)

c) "Cell block" Os anticorpos mais frequentemente requisitados

são: receptores hormonais; citoqueratinas de diferentespesos moleculares, com ênfase para as citoqueratinas7 e 20; marcadores neuroendócrinos, sobretudosinaptofisina e cromogranina; marcadores de diferen-ciação tumoral do tipo da calretinina, TTF1, HMB45e MelA; marcadores linfoides como o CD45; e maisraramente, marcadores mesenquimatosos.

A tecnolologia usada obedece ao mesmo protocoloque é utilizado para cortes de parafina. Na recupera-ção antigénica é usado o banho-maria a 95 graus emtempos variáveis; o tempo de incubação com o anticorpo primário é variável (30 minutos, 60 minutosou a noite). O processamento pode ser manual ouautomático, de acordo com as circunstâncias. O sistema de revelação usado é o DAB.

Muito frequentemente, na mesma lâmina são reali-zados testes para dois anticorpos.

Na apreciação dos resultados, são de salientar os

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seguintes aspectos:a) Boa fixação em álcool. Com esfregaços secos não

se obtêm bons resultadosb) Os esfregaços finos e com pouco sangue são os

que permitem melhores resultadosc) É essencial a utilização de controlos positivos e

negativosd) Em lâminas previamente coradas pelo método de

Papanicolaou obtêm-se bons resultados na imunocito-química. O mesmo não acontece em lâminas coradaspelo Diff-Quick ou Giemsa.

O desafio da acreditação nos laboratóriosde diagnóstico de Anatomia PatológicaVeterinária

Pinto M.L.*, Coelho A.C.Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de Trás-os-Montes e

Alto Douro (UTAD), Centro de Ciência Animal e Veterinária (CECAV),

Apartado 202, 5001-801 Vila Real Codex, Portugal

* [email protected]

A acreditação é a evidência da competência técnicados laboratórios para efectuar testes de diagnóstico,ensaios e calibrações. Esta acreditação constitui umdesafio que é necessário aceitar e aproveitar perante asinúmeras vantagens que confere aos laboratórios queefectuam diagnóstico, e em particular aos laboratóriosque efectuam diagnóstico de Anatomia Patológica.Um laboratório com ensaios acreditados significa quecomprovadamente possui os recursos humanos,equipamentos, métodos, instalações e procedimentoslaboratoriais necessários para produzir resultados deacordo com os requisitos de boas práticas. A acredi-tação confere reconhecimento internacional. Emborade carácter voluntário, o seu principal objectivo con-siste em estimular os laboratórios realçando o sistemade gestão pela qualidade, a capacidade técnica e acompetitividade.

As vantagens apresentam-se tanto para o laboratóriode Anatomia Patológica Veterinária como para osclientes dos seus serviços. O laboratório beneficiarecebendo o reconhecimento formal nacional e inter-nacional da sua competência e qualificação, o que setraduz numa poupança de tempo e dinheiro para osseus clientes que assim beneficiam de um serviço comqualidade comprovada.

The challenge of laboratory accreditation in

Veterinary Anatomical Pathology

Laboratory accreditation is a means of determiningthe technical competence of laboratories to performspecific types of testing, measurement and calibration.It also provides formal recognition to competent labo-ratories, thus providing a ready means for customersto identify and select reliable testing, measurementand calibration services able to meet their needs.

Accreditation attests technical competence of staff,validity and appropriateness of test methods, trace-ability of measurements and calibrations to nationalstandards, suitability, calibration and maintenance oftest equipment, as well as quality assurance of test andcalibration data.

Accreditation constitutes a challenge that we mustaccept and take to the numerous advantages it bringsto the laboratories that effectuate diagnosis of Veteri-nary Pathology. Accreditation gives internationalrecognition. Albeit voluntary, the objective is toencourage the laboratories to enhance managementsystem, technical capability and competitiveness.

Laboratory accreditation provides advantages bothto laboratories and users or potential users of labora-tory services. They benefit by receiving national andinternational recognition of their competence andqualifications, by using the evaluation process as aquality assurance feature and by saving both time andmoney through the possible elimination of multipleaudits from many potential clients. Users of laboratoryservices benefit by having an independent objectivemeans to select a laboratory for the required services,an easy way to provide specifications for laboratoryservices, and a savings in both time and money. Theseadvantages are realized only when a highly crediblelaboratory accreditation system is providing the service.

Comunicações orais livres

Morfometria do intestino em suínos

Oliveira A.L.1, Ferreira D.A.3, Venâncio C.3,Silva A.3, Sousa A.4, Amorim P.5, Antunes L.M.3,Vala H.1,2

1Escola Superior Agrária de Viseu, IPV. Quinta da Alagoa. Estrada de

Nelas. 3500-606 Viseu2Centro de Estudos em Educação, Tecnologias e Saúde.

Escola Superior Agrária de Viseu, IPV. Quinta da Alagoa. Estrada de

Nelas. 3500-606 Viseu 3CECAV – UTAD, Vila Real4Universidade Federal de Campina Grande, Patos, Paraíba, Brasil5Serviço de Anestesiologia - Hospital Geral de Santo António, Porto

Os autores propõem uma classificação morfológicasemiquantitativa para avaliar edema, congestão,hiperémia, hemorragia, infiltrado inflamatório,degenerescência celular, necrose e descamação doepitélio, bem como um método quantitativo de avalia-ção da percentagem de perda de mucosa (PM) e darazão criptas:interstício (C:I), em suínos submetidos ahipotensão severa.

Os parâmetros semiquantitativos de edema, congestão, hiperémia, hemorragia, infiltrado inflama-tório, degenerescência celular e necrose foram avaliadospor dois observadores independentes e classificados

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com base numa escala específica de 0 a 3, de acordocom Çetin et al., (1995). A descamação do epitélio foiavaliada por dois observadores independentes e classi-ficada com base numa escala específica de 0 a 5, deacordo com Chiu et al., (1970) and Kaplan et al.,(2007).

A avaliação morfológica quantitativa para obtençãoda percentagem de PM e da razão C:I foi efectuadarecorrendo a uma ocular micrométrica com retículo de1000 µm, em 10 campos microscópicos seleccionadosaleatoriamente em cada secção, com uma objectiva de10x, adaptado de Faleiros et al., (2001).

Intestinal morphometry in the pig

The authors propose a development of a semiquan-titative morphological assessment to intestinal mucosaedema, congestion, hyperemia, hemorrhage, inflam-matory infiltration, cellular degeneration, necrosis,epithelial detachment and also a quantitative morpho-logical assessment to evaluate mucosal loss (ML) percentage and mucosal crypt:interstitium ratio (C:I)in pigs submitted to severe hypotension.

The semiquantitative parameters edema, congestion,hyperemia, hemorrhage, inflammatory infiltration, cellular degeneration and necrosis were evaluated bytwo independent examiners and classified in a specificscale from 0 to 3, according to Çetin et al., (1995). The epithelial detachment was evaluated by two inde-pendent examiners and registered in a specific scalefrom 0 to 5, according to Chiu et al., (1970) and Kaplanet al., (2007).

The quantitative morphological assessment to MLpercentage and mucosal C:I was achieved using anocular 1000 micrometric reticule divisions across 10randomly selected microscopic fields in each section,using a10x objective, adapted from Faleiros et al.,(2001).

Adenocarcinoma das glândulas apócrinasdos sacos anais do gato (Felis catusdomesticus): estudo de dois casos

Silva J.F.1*, Rodrigues M.D.2, Costa A.3,Martins J.3 e Correia J.J.1

1Centro de Investigação Interdisciplinar em Sanidade Animal,

Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade Técnica de Lisboa

(FMV-UTL), Av. da Universidade Técnica, 1300-477 Lisboa2Vet-América-Clínica Veterinária Lda., Av. dos Estados Unidos da

América, 7-A, 1700-163 Lisboa 3Clínica Veterinária João XXI, Av. dos Bombeiros Voluntários, 76-B,

1495-023 *[email protected]; Tel: 213 652 888

No gato, o adenocarcinoma das glândulas apócrinasdos sacos anais é raro, correspondendo a cerca de0,5% dos tumores cutâneos nesta espécie (1, 2). O presente estudo refere-se a dois casos deste tipo de

neoplasia: Caso 1 - "Kiko", Europeu Comum, machocastrado, 11 anos. Caso 2 - "Jonas", Europeu Comum,macho castrado, mais de 8 anos. No Caso 2, fez-seexame citológico pré-operatório. Enviaram-se paraanálise histopatológica peças de exérese cirúrgica fixadas em formol a 10%. No Caso 1, o fragmentomedia 8x8x5 mm e provinha do saco anal direito e, noCaso 2, o material, do saco anal esquerdo, tinha volume aproximado de 1 cm3. Os respectivos corteshistológicos foram corados pela hematoxilina-eritrosi-na. Fez-se a contagem de mitoses por 10 "high-powerfields" (HPF) com objectiva de x40. O exame histológico no Caso 1 revelou a presença de um adenocarcinoma tubulo-papilífero com 34 mitoses por10 HPF. No Caso 2, o exame citológico mostrou célu-las com anisocitose e anisocariose marcadas.Ao exame histológico, o tumor deste caso era um adenocarcinoma pouco diferenciado (formação deestruturas tubulares e de ninhos de células), associadoa desmoplasia. A contagem de mitoses foi de 15 por10 HPF. No Caso 2, observou-se, cerca de 40 diasdepois da operação, invasão local, pelo que se optoupela eutanásia. 1) Shoieb A.M. & Hanshaw D.M.(2009). Veterinary Pathology, 46: 677-683. 2)Mellanby, R.J., Foale R., Friend E., Woodger N.,Herrtage M. E. & Dobson J.D. (2002). Journal ofFeline Medicine and Surgery, 4:205-207. SUMMARYFeline apocrine gland adenocarcinoma of the anal sacis rare, accounting for near 0,5% of all feline skintumours (1, 2).

Adenocarcinoma of the anal sac apocrine glandsin the cat (Felis catus domesticus): study of twocases

The present report refers to two cases: Case 1 -"Kiko", a 11 year-old castrated male EuropeanShorthair. Case 2 - "Jonas", an 8 year-old castratedmale European Shorthair. In Case 2, a preoperativecytological exam was performed. In the two cases, thesurgically extracted tissues were sent to FMV-UTLlaboratory of histopathology fixed in 10% formalin toperform histopathological examination. In Case 1, thetissue fragment was extracted from the right anal sacand measured 8x8x5 mm and, in Case 2, it hadapproximately 1 cm3 and it corresponded to the leftanal sac. The histological sections were stained byhaematoxylin-erythrosin. Mitosis counting was madeobserving in each case 10 high-power fields (HPF)through a x40 objective. Histopathological exam ofCase 1 material revealed a tubulopapillary adenocarci-noma with 34 mitoses per 10 HPF. Cytological examof Case 2 showed cells with marked anisocytosis and anisokaryosis and subsequent histological examdisclosed a poorly differentiated adenocarcinoma(with areas of tubule formation and presence of solidcell nests), associated to desmoplasia. There were 15 mitoses per 10 HPF. In Case 2, there was local

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invasion 40 days post-operatively, and euthanasia waselected. 1) Shoieb A.M. & Hanshaw D.M. (2009).Veterinary Pathology, 46: 677-683. 2) Mellanby, R.J.,Foale R., Friend E., Woodger N., Herrtage M. E. &Dobson J.D. (2002). Journal of Feline Medicine andSurgery, 4:205-207.

Utilização de parâmetros quantitativos esemi-quantitativos para avaliação dosIlhéus de Langerhans num modelo animal de Diabetes Mellitus tipo 2

Mega C.1*, Vala H.1,2, Teixeira de Lemos E.1,3,Fernandes R.3, Garrido P.3, Sereno J.3, Parada B.3,Melo F.3, Teixeira F.3, Reis F.3

1Escola Superior Agrária de Viseu, Instituto Politécnico de Viseu.

Viseu, Portugal.2Centro de Estudos em Educação, Tecnologias e Saúde. Escola

Superior Agrária de Viseu, IPV.3*Instituto de Farmacologia e Terapêutica Experimental, IBILI,

Faculdade de Medicina de Coimbra *[email protected]

Introdução: A deficiência da secreção de insulina nadiabetes mellitus tipo 2 (DMT2) deve-se á menormassa das células ß e sua disfunção.Objectivo: Caracterizar a morfologia do pâncreasendócrino em diferentes estadios de desenvolvimentoda síndrome diabética num modelo animal de DMT2obeso: ratos Zucker Diabetic Fatty (ZDF).Material e métodos: Efectuou-se o estudo histomor-fológico do pâncreas endócrino de ratos controlos nãodiabéticos e não obesos (ZDF Gmi +/+) e os seushomólogos diabéticos obesos (ZDF Gmi fa/fa) às 8,20 e 26 semanas de idade. Após coloração de rotinahematoxilina-eosina, procedeu-se à observaçãomicroscópica, definindo-se parâmetros quantitativos esemi-quantitativos de avaliação.

Os parâmetros quantitativos incluíram a contagemdo número de ilhéus e sua medição. Na análise semi-quantitativa procedeu-se à avaliação dos ilhéus quantoà forma e regularidade dos contornos dos ilhéus, àclassificação das lesões inflamatórias, da congestãovascular e da vacuolização das células-_ numa escalade 0 a III.Resultados: Os animais diabéticos obesos ZDF(fa/fa) apresentaram, com o avançar da idade,diminuição do número de ilhéus, progressiva alteraçãoda arquitectura insular normal, fibrose e congestãovascular, relacionadas com alterações inflamatórias,com redução da massa celular insular. Conclusão: A coincidência da progressão das alterações histopatológicas com o perfil metabólicoestudado, anteriormente, demonstra a diminuição dacapacidade do pâncreas endócrino em compensar ainsulino-resistência e a disfunção celular ß caracterís-ticas da DMT2. A conjugação destes dois factores faz

do rato ZDF Gmi fa/fa, um modelo animal apropriadopara os diversos estudos no âmbito da patologia diabética.

The use of quantitative and semi-quantitativeparameters in the study of the islets ofLangerhans in an animal model of Type 2Diabetes Mellitus

Introduction: Type 2 diabetes mellitus 2 (T2DM)results, amongst others, from insulin resistance andreduction of ß-cell secretion, produced by functionalchanges and cellular mass reduction.Aim: Chronological morphologic characterization ofthe endocrine pancreas in an animal model of T2DM,the Zucker Diabetic Fatty (ZDF) rats to elucidate theunderlying mechanisms of disease evolution. Material and methods: The pancreas of diabetic,obese rats (ZDF Gmi fa/fa) and their littermates (ZDFGmi +/+) were compared at 8, 20, 26 weeks of age.After routine stain haematoxylin-eosin. Quantitativeand semi-quantitative parameters were applied forevaluation of morphological changes in the islets ofLangerhans. Quantitative parameters included countingislet numbers and islet size measurement. Semi--quantitive parameters consisted in the evaluation ofislet conformation and perimeter regularity. Theinflammatory lesions, vascular congestion and _-cellvacuolization were also classified in a scale from 0 to III. Results: Obese, diabetic ZDF (fa/fa) rats presented,with increasing age, a reduction in islet numbers, progressive deformation of insular architecture, fibrosis and vascular congestion, connected withinflammatory changes and joined by a decrease ininsular cellular mass.Conclusion: The coincidence of the progressivehistopathologic changes with the metabolic profileobtained in our previous studies shows a decrease inthe capacity of the endocrine pancreas to compensateinsulin resistance and ß-cell dysfunction. These twoconjunct facts make the ZDF fa/fa, rat an appropriatemodel for a variety of T2DM studies.

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A N-Butil-N-(4-Hidroxibutil)Nitrosaminacomo agente carcinogénico da bexiga

Vasconcelos-Nóbrega C.1*, Vala H.1,2, Colaço A.3,Oliveira P.A.3

1Agrarian School of Viseu, Polythecnic Institute of Viseu,

3500-606 Viseu, Portugal 2Center for Studies in Education, and Health Technologies. Agrarian

School of Viseu, IPV. Estrada de Nelas, Quinta da Alagoa, Ranhados,

3500-606 Viseu, Portugal 3Department of Veterinary Sciences, CECAV, University of Trás-os-Montes

and Alto Douro, 5001-911, Vila Real, Portugal

*[email protected]

A N-butil-N-(4-hidroxibutil)nitrosamina, tambémconhecida como BBN, é um agente carcinogénicomuito utilizado em investigação oncológica para promover o desenvolvimento de neoplasias de bexigaem animais de laboratório. A BBN é metabolicamenteactivada em N-butil-N-(3-carboxipropil)nitrosamina(BCPN), metabolito que é conduzido até à bexigaatravés da urina. Quando atinge o órgão alvo, liga-seao DNA urotelial, promovendo a carcinogénese.

A forma mais comum de administrar a BBN éatravés da água de bebida, em concentrações que variam entre 0,01-0,05%. A incidência de tumoresinduzidos pela BBN, em roedores, é de cerca de100%, com um tempo de desenvolvimento consistentee previsível, exibindo características morfológicashomogéneas.

Os tumores quimicamente induzidos em roedorespela BBN assemelham-se grandemente aos tumoresvesicais observados em humanos, fazendo com quesejam considerados bons modelos para o estudo dasneoplasias da bexiga, bem como para a descoberta edesenvolvimento de novos fármacos terapêuticos epreventivos.

Bladder carcinogenicity of N-Butyl-(4-Hydroxybutyl)Nitrosamine

N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine, also knownas BBN, is a well established carcinogenic agent, thatas been widely used in oncological research to promote bladder cancer in laboratory animals. BBN isa DNA reactive carcinogen that is metabolic activatedto N-butyl-N-(3-carboxypropyl)nitrosamine (BCPN).This intermediate metabolite will reach urinary bladdertrough urine and will adduct to DNA promotingurothelial carcinogenesis.

Typically, BBN is delivered in the drinking water, atconcentrations of 0.01-0.05%, and tumours arise innearly 100% of animals, with consistent timing, anddisplay fairly homogeneous morphologies.

BBN-induced bladder cancer in rodents, resembletheir human counterparts, making these, good modelsfor the study of bladder carcinogenesis and for the discovery of new therapeutic and preventive drugs.

Posters

Apoptosis in bovine cumulus cells duringproestrous

Ana Margarida Calado1, Lúcia Gouveia,Pedro Alberto Santos2, Aura Colaço1,Mário Sousa2

1ICETA-CECAV Department of Veterinary Sciences, University of

Trás-os-Montes and Alto-Douro, Apartado 202, 5001 Vila Real Codex,

Portugal,2Laboratory of Cell Biology, Institute of Biomedical Sciences Abel

Salazar, University of Porto, 4099-003 Porto, Portugal

Bovine cumulus oocyte complexes (COCs) wereaspirated from small (1 to 4 mm of diameter on theovarian surface) antral follicles after collection ofproestrous stage ovaries on the slougterhouse. COCsshowing an homogeneous ooplasm and a compact andcomplete cumulus mass were selected under the stereomicroscope, and immediately fixed in glutaral-dehyde, randomly embedded in glycol-methacrylate,and sectioned (4 mm thickness). In some previousstudies we found three distinct follicular cells in thecumulus mass. In the present work we studied apoptosisin these follicular cells. For this propose, the TUNELreaction was performed, followed by a stereologicalevaluation using counting grids. Stereological methodswere used to estimate the volumetric density of eachfollicular cell type. The results revealed that cell typeC1 do not present apoptosis. However, the volumetricdensity of cell types C2 (Vv(C2)) was 0,29% and C3(Vv(C3)) was 7,07%. These results demonstrate that atthe end of the estrous cycle, before ovulation (duringproestrous), the cumulus cell populations presentexcellent morpho-functional conditions, and can beused for in vitro maturation and fertilization. This work was parcially supported by FCT((POCI/CVT/60217/2004), Operacional Program forScience and Innovation 2010 (POCI 2010) fromCommunity Program III , and parcially supported byCommunity European Found FEDER.

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Asternia num caso de Schistosomusreflexus em bovinos

Colaço B.1, Venâncio C.1, Payan-Carreira R.1,Pires M.A.2

1Departamento de Zootecnia, Universidade de Trás-os-Montes e

Alto Douro, Vila Real, Portugal 2Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de Trás-os-

Montes e Alto Douro, Vila Real, Portugal

O Schistosomus reflexus é uma anomalia rara efatal, e primariamente observada em ruminantes. Éuma alteração teratológica em que o animal apresentasimultaneamente inversão da coluna e exposição dasvísceras abdominais devido a celosomia e anquilosedos membros. Outras alterações graves sãoobserváveis em graus diversos conforme os casos.Neste trabalho descrevemos a análise anatómica feitaa um feto de bovino (cruzado de maronês), nadomorto, que apresentava exposição das vísceras toráci-cas e abdominais, uma marcada inversão espinal aonível da terceira e quarta vértebra cervical, com consequente posicionamento da cauda e membrosjunto à cabeça. Os membros mostravam-se anquilosa-dos, curvados e torcidos, provavelmente devido àpressão da pele. A pélvis tinha um desenvolvimentonormal, possuindo uma sínfise púbica intacta.Apresentava ausência de encerramento de toda aparede ventral desde o meio do pescoço até à púbis,com toracosquise, asternia e celosomia. A coluna vertebral apresentava lordose e escoliose. As costelase suas cartilagens estavam presentes mas posicionadasem forma de V invertido, com a parte interior direc-cionada para o exterior. O coração encontrava-seenvolvido pelo pericárdio, com uma rotação de 180 ºno seu eixo longitudinal, apresentando o ventrículodireito mais desenvolvido que o esquerdo. Observou--se uma malformação vascular com subclávia direita eesquerda a saírem directamente da aorta. Ao nível daterceira vértebra cervical, o animal apresentava umatorção traqueal e esofágica. Os pulmões tinham umalobulação normal, mas extremamente hipoplásticos. Odiafragma evidenciava um desenvolvimento rudimen-tar, permitindo a comunicação entre a cavidadeabdominal e torácica. Todos os órgãos estavam dispos-tos do lado direito do animal, com excepção do rimesquerdo. Foram observados testículos rudimentares;não foram identificados conductos excretores nemgenitália externa.

Este caso exibia características únicas, nomeada-mente a ausência de esterno, elevado grau de torção dacoluna com a presença dos membros junto à cabeça.

Schistosomus reflexus asternie in a bovine

Schistosomus reflexus is rare and fatal anomaly, pri-marily observed in ruminants. This teratological disor-der is characterized by simultaneous presentation of

spine inversion, abdominal viscera exposition due tocelosomy and limb ankylosis. Other severe disorderscan be observed in distinct degrees depending on thecases. In this work we report an anatomical analysisdone in bovine fetus (Maronesa crossbreeding), dead-born, that presented exposure of thoracic andabdominal viscera, with a marked spinal inversion(starting at the level of third and fourth cervical verte-bra), with the consequent positioning of the tail and limbs near the head. The limbs showed to be ankylosed, curved and rotated, probably due to skinpressure. The pelvis had a normal development, andan intact pubic symphysis was observed. This animalpresented an incomplete ventral closure from the neckto the pubis, with thoracoschisis, asternie and celo-somy. The vertebral column presented lordosis andscoliosis. The ribs and costal cartilages were presentbut positioned in an inverted V-shape, with the innerpart turned towards the exterior. The heart wasinvolved by the pericardium and presented a 180 ºrotation in its longitudinal axis, with the right ventri-cle more developed then the left. It was observed a vascular malformation with the left and right sub-clavian arteries arising directly from the aorta. At thelevel of third cervical vertebra, tracheal andesophageal torsion was observed. The lungs presenteda normal lobation but were extremely hypoplastic. Arudimentary diaphragm was present, allowing thecommunication between the thoracic and abdominalcavity. All the organs were disposed in the right side ofthe animal, with exception of the left kidney.Rudimentary testicles were observed, but excretoryducts or external genitalia were not identified.

This case exhibit unique characteristics, such as thesternum absence or the high degree of spine torsionwith the limbs positioning near the skull.

Linfadenite granulomatosa em gânglioslinfáticos submaxilares em suínos

Miranda C.1, Coelho A.C.1, Pires I.1*, Matos M.2,Ribeiro P.3, Vieira-Pinto M.1

1Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro (UTAD), Centro de Ciência Animal

e Veterinária (CECAV), Apartado 202, 5001-801 Vila Real Codex,

Portugal2Departamento de Genética e Biotecnologia, UTAD, Apartado 202,

5001-801 Vila Real Codex, Portugal 3Direcção de Serviços Veterinários da Região Norte, Divisão de

Intervenção Veterinária de Vila Real - Núcleo do Corgo, Lugar de

Codeçais, 5000-421 Vila Real, Portugal*[email protected]; Tel: 259350637; Fax: 259350480

As micobacterioses dos suínos são infecções crónicasprovocadas por bactérias do género Mycobacterium,caracterizadas por lesões de linfadenite granulomatosa(LG). Nos últimos anos observou-se um aumento da

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incidência desta infecção, detectada ao exame postmortem em matadouros. Este estudo teve como objec-tivo caracterizar as lesões granulomatosas de suínosabatidos para consumo. No decurso da inspecção postmortem de suínos em 4 matadouros da região norte,foram recolhidos 39 gânglios submaxilares comlesões de LG, os quais foram avaliados quanto às características morfológicas macroscópicas e histoló-gicas (incluindo a coloração de rotina (H&E) e ométodo de Ziehl-Neelsen para pesquisa de bactériasálcool-ácido resistentes (BAAR)). No examemacroscópico, 71,8% apresentaram duas ou maislesões evidentes. Em 76,9% dos casos, o tamanho das lesões era superior a 0,25cm de diâmetro. As linfadenites foram ainda classificadas em caseosas(69,2%), caseocalcáreas (7,7%) e purulentas (23,1%).No exame histológico, verificou-se a presença degranulomas em 94,9% das amostras que na sua maioria eram constituídas por necrose central decaseificação/liquefacção (n=30), com mineralizaçãocentral e/ou periférica (n=20), associada a infiltradoinflamatório por células epitelióides, linfócitos, neu-trófilos, eosinófilos e células gigantes multinucledasde tipo Langhans (n=27). Em 20 lesões era evidenteuma cápsula de tecido conjuntivo. No método deZiehl-Neelsen observaram-se BAAR em todos oscasos. Os resultados deste estudo demonstram existiruma associação evidente entre as lesões granulo-matosas observadas no exame macroscópico emicroscópico dos gânglios linfáticos, o que realça aimportância de uma observação criteriosa e sistemáti-ca dos gânglios submaxilares no matadouro.

Swine granulomatous lymphadenitis in submaxillary lymph nodes

Swine mycobacteriosis are chronic infection causedby bacteria of the Mycobacterium gender characterizedby granulomatous lymphadenitis (GL). In recent yearsthe incidence of this infection, detected by postmortem examination at slaughterhouses, hasincreased. The aim of this study was to characterizethe granulomatous lesions of swine slaughtered forconsumption. During the post-mortem inspection ofpigs slaughtered in 4 slaughterhouses in northernPortugal, were collected 39 submaxillary lymph nodeswith lesions of GL. Macroscopic and microscopicexamination of the samples were performed(including routine staining (H&E) and the method ofZiehl-Neelsen for detection of bacterial acid-fastbacilli (AFB)). Macroscopically, 71.8% had two ormore lesions. In 76.9% of cases, the size of lesionswas greater than 0.25cm. Lymphadenitis were alsoclassified in caseous (69.2%), caseocalcareous (7.7%)and purulent (23.1%). Microscopically, the presenceof granulomatous lesions were detected in 94.9% ofthe samples mostly consisted of central caseous/lique-faction necrosis (n=30), with central and/or peripheral

mineralization (n=20), associated with inflammatoryinfiltration by epithelioid cells, lymphocytes, neu-trophils, eosinophils and Langhans multinucleatedgiant (n=27). In 20 lesions a capsule of connective tissue was present. By the method of Ziehl-Neelsenwas observed AFB in all cases. The results of thisstudy show an association between granulomatouslesions observed in the macroscopic and microscopicexamination of lymph nodes, which reinforce theimportance of a systematic observation of the sub-maxillary lymph nodes at the slaughterhouse.

Características macroscópicas emicroscópicas da tuberculose caprina

Quintas H.1,2*, Reis J. 1, Pires I.3, Alegria N.3

1ACRIGA - Associação de Criadores de Gado e Agricultores,

Macedo de Cavaleiros, Portugal2Escola Superior Agrária - Instituto Politécnico de Bragança, Portugal3Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade

de Trás-os-Montes e Alto Douro, Vila Real, Portugal*[email protected]

Neste trabalho os autores apresentam um estudo acer-ca das características macroscópicas e microscópicasobservadas durante um surto de tuberculose caprinaocorrida entre Abril de 2007 e Maio de 2008, numaexploração em Bragança. No exame pós morte, foramobservadas em muitos animais lesões granulomatosascompatíveis com tuberculose, tendo-se isoladoMycobacterium bovis em amostra de pulmão, noLNIV-Lisboa. A monitorização dos animais abatidospermitiu identificar diferentes quadros lesionais como complexo primário (completo ou incompleto)respiratório e/ou digestivo e generalização. No examehistológico observaram-se granulomas com diferentescaracterísticas, uns com necrose de caseificação e calcificação central, rodedos por células inflamatóriase células gigantes de Langhans e outros com necrosede caseificação escassa ou ausente com predomínio dereacção celular. Em todos os casos visualizavam-sebacilos álcool-acido resistentes, em maior número noscasos com predomínio de necrose de caseificação.

Macroscopic and microscopic features of caprinetuberculosis

In this work we present a case study on macroscopicand microscopic findings on an outbreak of caprinetuberculosis occurred from April 2007 to May 2008on a farm in the municipality of Bragança. Granulo-matous lesions characteristic of tuberculosis werefound in several animals at post-mortem examination.Mycobacterium bovis was found in a lung sample sentto the LNIV-Lisbon. The monitoring of slaughteredanimals allowed us to identify different pathologicallesions: primary complex lesions (complete and

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incomplete) in lungs and/or intestines, as well as casesof generalized tuberculosis. Histopathological exami-nation showed different types of tuberculosis granulo-mas ranging from granulomas with caseous necrosisand dystrophic calcification center, surrounded by cellular infiltration to granulomas with little caseousnecrosis or lack thereof, with a predominance of cellular infiltration. When the caseous necrosis wasmore evident the number of acid-fast bacillusobserved by Ziehl-Nielsen stain was substantiallygreater.

Lesões múltiplas de Sarcóide num burromirandês

Seixas F.1, Quaresma M.2, Gama A.1, Alves R.3,Mora M.3, Pires M.A.1

1Laboratório de Histologia e Anatomia Patológica, CECAV-UTAD2Hospital Veterinário da UTAD 3AGEPA – Atenor, Mirando do Douro

O sarcóide é uma lesão neoplásica de origemfibroblástica, localmente agressiva e não metastática,que afecta cavalos, mulas e burros. É a neoplasiacutânea mais comum dos cavalos, constituindo maisde 30% dos tumores desta espécie e afectam especial-mente jovens adultos com idades compreendidas entreos 3 e os 6 anos. São lesões solitárias ou múltiplas quepodem surgir em qualquer ponto, em especial acabeça, membros inferiores e região ventral. De acordo com o seu aspecto esta lesão bifásica pode serclassificada como verrucosa, de tipo fibroblástico oumisto.

Os autores descrevem o caso de um burro de raçamirandesa de 4 anos de idade que apresentava múlti-plas massas cutâneas de grandes dimensões na regiãoventral, afectando em especial a região prepucial. Aslesões surgiram após a cobrição com uma fêmea quemorreu por causas desconhecidas, não tendo sido submetida a exame de necrópsia. As lesões cutâneasforma removidas cirurgicamente e submetidas aexame anatomopatológico no Laboratório deHistologia e Anatomia Patológica da UTAD. O examemicroscópico revelou uma lesão proliferativa deorigem fibroblástica na derme com extensas áreasmixóides, com um componente epitelial mínimo ouausente. Com base nas suas características foi efectua-do o diagnóstico de sarcóide, variante fibroblástica.

Multiple sarcoid lesions in a Miranda donkey

Sarcoides are locally aggressive, non-metastaticfibroblastic skin tumours of horses, mules and donkeys. They are the most common skin tumour ofthe horse, accounting for up to 30% of tumours. Itaffects especially young adult horses 3-6 years.Sarcoids develop anywhere but they are more com-mon on the head, legs, and ventral trunk, and may be

single or multiple. According to their appearance thisbiphasic tumour can be classified as verrucous,fibroblastic and mixed.

The authors describe a case of a 4-year old donkeyfrom Miranda do Douro, presenting multiple largecutaneous masses in the ventral trunk, especially inthe preputial area, that appeared shortly after mating.The female donkey died for unknown causes and nonecropsy examination was performed. The cutaneouslesions were surgically removed and send to theSurgical Pathology laboratory of UTAD. Microscopi-cally lesions were characterized by an extensive dermal fibroblastic proliferation with mixoid areas.The epithelial component was minimal or absent. A diagnosis of fibroblastic type of sarcoid was performed.

Lesões melanocíticas em Suínos

Teixeira C.1, Pires I. 1*, Ferreira S.1, Moura D.2,Vieira-Pinto M.1

1Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro (UTAD), Centro de Ciência Animal e

Veterinária (CECAV), Apartado 202, 5001-801 Vila Real Codex,

Portugal2Direcção de Serviços Veterinários da Região Norte, Divisão de

Intervenção Veterinária de Vila Real – Núcleo do Corgo,

Lugar de Codeçais, 5000-421 Vila Real, Portugal

Tel: 259350637; Fax: 259350480*[email protected]

No decurso da Inspecção Sanitária pós morte desuínos, podem ser encontradas lesões melanocíticas(melanomas, melanocitomas e melanoses), quepoderão ser alvo de diferentes critérios de decisão sanitária, dependendo da sua etiologia, número,dimensão, distribuição e agressividade. A melanoseresulta de um excesso de pigmentação. Os melanomase melanocitomas, por sua vez, são lesões tumorais, osprimeiros malignos e os últimos benignos. Neste estu-do, procedeu-se a uma recolha de lesões melanocíticasem suínos, em vários matadouros da Região Norte,durante o período de 4 meses. As lesões foram fixadase processadas para observação e caracterização his-tológica pela coloração de rotina (H&E) com e sembranqueamento da melanina. As lesões de melanoseforam as mais frequentemente encontradas (n=25). Amelanose mostrou-se com uma pigmentação negra, deaspecto arboriforme, frequente na glândula mamária etimo. As lesões tumorais (n=6), mostraram-se comoáreas enegrecidas, por vezes ulceradas e que espolia-vam pigmento, de contornos irregulares, planas ouelevadas. O órgão mais afectado por estas lesõestumorais foi a pele e os gânglios linfáticos regionais,que se encontravam metastizados em 3 casos.Microscopicamente, só os melanomas apresentaramcaracterísticas histológicas de agressividade, obser-

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vando-se proliferação não circunscrita de célulaspleomórficas, em geral fusiformes ou com caracterís-ticas epitelióides, com acentuada atipia citonuclear equantidade variável de melanina intracitoplasmática.A caracterização macroscópica e histológica daslesões melanocíticas dos suínos é de extremaimportância para estabelecer um diagnóstico conclusi-vo e apurar a real prevalência destes problemas.

Melanocytic lesions in pigs

During the swine post mortem Sanitary Inspection,some melanocytic lesions could be observed(melanoma, melanocytoma and melanosis), which canbe subject to different decision criteria, depending on itsetiology, number, size, distribution and aggressiveness.Melanosis is the result of an excess of pigmentation.The melanoma and melanocytoma are tumorallesions, the first malignant and the last benign. In thisstudy, we collected samples of melanocytic lesions ofpigs, in several slaughterhouses in the NorthernRegion, during a 4 month period. The lesions werefixed and processed for histological observation andcharacterization by routine staining (H&E) with andwithout bleaching. Melanosis was most frequentlyfound (n=25) as a black pigmentation, with an arbori-form aspect, often in the mammary gland and thymus.The tumoral lesions (n=6) were showed as black areas,sometimes ulcerated and with pillaged pigment, withirregular contours, flat or raised. The most affectedorgans for lesions were the skin and the regionallymph nodes, which were metastasized in 3 cases.Microscopically, only melanomas showed histologicalfeatures of aggressiveness, with a non circumscribedproliferation of pleomorphic cells, usually fusiform orwith epithelioid features, with marked cytonuclearatypia and a variable amount of intracytoplasmicmelanin pigment. The macroscopic and histologicalevaluation of melanocytic lesions of the pigs is ofgreatest importance to establish a conclusive diagnosis and determine the real prevalence of theseproblems.

Causas de morte em caprinos jovens naregião de Trás-os-Montes

Silva F.1, Pires I.1*, Oliveira J.1, Gutierrez G.2

1Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro (UTAD), Centro de Ciência Animal e

Veterinária (CECAV), Apartado 202, 5001-801 Vila Real, Portugal2Departmento de Medicina Animal e Cirurgia, Faculdade de

Veterinária, Universidade de Las Palmas de Gran Canaria, 35416,

Arucas, Las Palmas, Espanha.

Tel: 259350637; Fax: 259350480.*[email protected]

A mortalidade em caprinos jovens tem implicaçõeseconómicas marcadas. Porém, uma correcta intervenção,quer de forma preventiva, quer de forma terapêutica, só épossível, com a identificação de possíveis causas demorte.

A Doença do Músculo Branco (Distrofia MuscularNutricional) é um das manifestações mais frequentesda deficiência em selénio e vitamina E em caprinos.No entanto, esta deficiência associa-se também a outras doenças nos caprinos, como a diminuição docrescimento, a perda de peso, o imunocomprometi-mento e o de aumento da susceptibilidade à doença.Neste estudo foram efectuadas necrópsias a 111 caprinos jovens, complementadas por análiseshistopatológicas, microbiológicas e parasitológicas.As principais lesões observadas foram enterites,inespecíficas e parasitarias e, dentre destas as maisfrequentes foram as causadas por Eimeria sp.; pneumonias, degenerescência e necrose dos músculoscardíaco e esquelético, ulceração do abomaso,hepatites e artrites.As principais causas de morteidentificadas foram infecções digestivas e respira-tórias. As lesões próprias da "Doença do MúsculoBranco", observadas no exame macroscópico emicroscópico, ocorreram em 25 animais (22,5%),sendo discutidas possíveis implicações da deficiênciade selénio na etiologia ou predisposição de causas demorte.

Death causes in young goats in Trás-os-Montesregion, Portugal

Mortality in young goats has marked economicimplications. However, proper intervention, either pre-ventively or therapeutically, is only possible with theidentification of causes of death. The White MuscleDisease (Muscular Dystrophy Nutrition) is one of themost common manifestations of deficiency in seleni-um and vitamin E in goats. However, this deficiency isalso associated with other diseases in animals, such asreduced growth, weight loss, the immunocompro-mised status and increase susceptibility to disease.This study carried out autopsies on 111 young goats.Histopathologic, microbiological and parasitologicalexams were performed. The main lesions were enteritis,

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non-specific and parasitic, (most frequently caused byby Eimeria sp.); pneumonia, degeneration and necrosisof cardiac and skeletal muscles, abomasum ulceration,hepatitis and arthritis.

The main causes of death were digestive and respi-ratory infections. Macroscopic and microscopic proper lesions of "White Muscle Disease"occurred in25 animals (22.5%), implicating selenium deficiencyin the aetiology of death or as a predisposing cause.

Polioencefalomalácia em ovinos Serra daEstrela – 1 caso clínico

Cruz R.2, Esteves F.2, Mesquita J.2, Oliveira A.L.2,Mega A.C.2, Nóbrega C.2, Santos C.2, Vala H.1,2

1Centro de Estudos em Educação, Tecnologias e Saúde.

Escola Superior Agrária de Viseu, IPV. Estrada de Nelas,

Quinta da Alagoa, Ranhados, 3500-606 Viseu, Portugal2Escola Superior Agrária de Viseu, IPV. Quinta da Alagoa.

Estrada de Nelas. 3500-606 Viseu

A Polioencefalomalácia (PEM) ou NecroseCérebrocortical (NCC) é descrita como uma desordemmetabólica aguda de causa não infecciosa e com manifestações neurológicas. A PEM pode afectarpequenos ruminantes de todas as idades, sendo queem ovinos Serra da Estrela atinge mais frequente-mente borregas de substituição, após o desmame e em regime semi-extenso. Pode, contudo afectar esporadicamente animais adultos, surgindo em épocasde maior escassez alimentar ou, secundariamente, aalterações no regime alimentar. Neste trabalho osautores descrevem um caso clínico de PEM em borregas de substituição, decorrido num efectivo deaproximadamente 100 animais na zona de Gouveia emOutubro de 2007, complementando com uma pequenarevisão bibliográfica sobre esta hipovitaminose.

Eosinofilia tissular e periférica associadaa carcinoma hepatocelular

Manuela Araújo1, Paula Brilhante Simões1,Mariana Novo2, Luís Lobo3, Justina Oliveira4

1Inno, Serviços Especializados em Veterinária, Rua Cândido de Sousa,

nº15, 4710-503 Braga2Clínica Veterinária Felis Canis, Rua D. Nuno Álvares Pereira, nº 252,

4450 - 213 Matosinhos3Hospital Veterinário do Porto, Travessa Silva Porto, nº 174, 4200 Porto 4Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro (UTAD), Centro de Ciência Animal e

Veterinária (CECAV), Apartado 202, 5001-801 Vila Real, Portugal

Um labrador fêmea, com 5 anos, apresentou-se àclínica com história de apatia e anorexia, e distensãoabdominal marcada. Os achados do exame físico

foram inconclusivos e o hemograma revelou leucoci-tose grave com neutrofilia moderada e eosinofiliamuito marcada. A bioquímica mostrou ALT aumentada,aumento da PT e aPTT e diminuição do fibrinogénio.O liquido ascítico foi classificado como um transudadomodificado, com predomínio de eosinófilos (39%).Foi realizada uma citologia hepática, onde se observouum infiltrado inflamatório abundante, maioritaria-mente eosinofílico, e hepatócitos com alterações morfológicas moderadas, mas não conclusivas. Foientão conduzida uma biópsia de fígado, que revelouuma imagem histopatológica compatível com a presença de um carcinoma hepatocelular, com forteinfiltrado eosinofílico. Apesar de a eosinofilia tissularassociada a mastocitomas e, mais raramente, a linfo-mas, estarem descritos na literatura este é o primeirocaso por nós conhecido de eosinofilia tissular e periférica associada a um carcinoma hepatocelular emcães.

Tissue and peripheral eosinophilia associated withhepatocellular carcinoma

A 5 years old female Labrador, was presented to theclinic with a history of apathy and anorexia, andmarked abdominal distension. The findings of physi-cal examination were inconclusive and blood countrevealed severe leukocytosis with mild neutrophiliaand eosinophilia very marked. Biochemistry showedincreased ALT, increased PT and aPTT and a decreasein fibrinogen. The ascitic fluid was classified as amodified transudate, with a predominance ofeosinophils (39%). Liver cytology was performed,showing an abundant inflammatory infiltrate, mainlyeosinophilic, and hepatocytes with moderate morpho-logical changes, but not conclusive. A liver biopsy wasthen conducted, which revealed a histopathologicalpicture compatible with the presence of a hepatocellularcarcinoma, with strong eosinophilic infiltrate.Although tissue eosinophilia associated with mast celltumors and, more rarely, lymphomas, are described inthe literature, at the best of our knowledge this is the first case of tissue and peripheral eosinophiliaassociated with hepatocellular carcinoma in dogs.

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Um caso de angioleiomiossarcoma nocotovelo de um Labrador Retriever

Faísca P.1,3*, Pereira H.2

1CICV/FMV-ULHT2Centro Veterinário de Tavira3DNAtech, Lda*Centro de Investigação em Ciências Veterinárias (CICV)

Faculdade de Medicina Veterinária –ULHT, Universidade Lusófona de

Humanidades e Tecnologias

Campo Grande, 376 1749 - 024 Lisboa

[email protected]

Um Labrador retriever macho com 6 anos de idadefoi submetido a uma cirurgia para extirpação de umnódulo localizado na face anterior do cotovelo, quemimetizava clinicamente um higroma.

Macroscopicamente a peça cirúrgica consistia numretalho cutâneo com 5,5 cm de diâmetro, que emsecção apresentava 3 nódulos, o maior com 5,5 x 3,5x 2,5 cm, com múltiplos focos hemorrágicos, e os 2nódulos menores com 1,5 e 0,8 cm de maiores eixos.

Microscopicamente observam-se vários nódulosirregulares e não capsulados que apresentam uma pro-liferação de células fusiformes orientadas em feixescurtos. Esta proliferação celular está intimamente ligada aos vasos sanguíneos e dá a percepção de terorigem na camada muscular da túnica média. Emalguns vasos observa-se a proliferação das célulastumorais para o seu lúmen sem no entanto haverinvasão da túnica íntima, que se mantêm intacta. Ascélulas possuem um citoplasma extenso acidófilo epor vezes vacuolizado. O núcleo é de tamanho médio,semelhante a um charuto com a cromatina ponteada enucléolo pequeno. O índice mitótico é de 3 mitosespor campo de ampliação (400x) nas zonas mais den-samente celulares. Observam-se vários trombos efocos hemorrágicos. Foi feita a caracterização imuno-histoquímica e houve imunomarcação positiva dascélulas neoplásicas para a vimentina e _-actina e negativas para S100.

A imagem microscópica e a imunohistoquímica sãocompatíveis com o diagnóstico de angioleiomiossar-coma.

A case of angioleiomyosarcoma in the elbow of aLabrador Retriever

A 6 year old, male Labrador Retriever was submittedto surgery to remove a nodule in the posterior face ofthe elbow that looked like a Higroma.

Macroscopically, it consisted of a tumor with 5,5 cmin diameter covered with skin. In section there were 3nodules with multiple hemorrhagic foci, the largestone with 5,5 x 3,5 x 2,5 cm, ant the two smaller oneswith 1,5 and 0,8 cm in the longer axis.

Microscopically there were several non capsulatedirregular nodules that presented a proliferation of

spindle cells arranged in bundles. The tumor cells areclosely connected with vascular structures and seem tobe originated from the muscular media of the bloodvessels. In some of the vessels the tumor cells growinto the vascular lumen without disrupting theendothelium. The cells have abundant eosinophyliccytoplasm that is sometimes vacuolated. Nuclei are of medium size, elongated and blunt-ended. The chromatin is stippled and the nucleoli are small. Themitotic index is higher than 3 mitosis per high powerfields (40x). Several foci of hemorrhage and thrombo-sis are observed. For further characterization,immunohistochemistry was performed and there wasimunolabeling of neoplastic cells for vimentin and _-smooth-muscle actin and negative for S100.

The microscopic image and the immunohisto-chemistry staining are consistent with a diagnosis ofangioleyomiosarcoma.

Expressão imunohistoquímica da catenina p120 em tumores mamárioscaninos

Pereira D.1, Alves A.1, Paredes J.2, Schmitt F.2,Gama A.1

1Laboratório de Histologia e Anatomia Patológica, CECAV-UTAD2IPATIMUP, Universidade do Porto

Os complexos de adesão caderina E-cateninas promovem adesão célula-a-célula, sendo consideradosfundamentais na manutenção de um fenótipo epitelialdiferenciado, pelo que a ocorrência de alterações aonível da sua expressão e/ou função tem sido associadaà perda de coesão intercelular, invasão e metastização.Nos tumores de mama de cadela, são escassos os estu-dos efectuados acerca de moléculas de adesão, e nestetrabalho foi nosso objectivo o estudo da expressãoimunohistoquímica da catenina p120, ainda não estudada até ao momento em neoplasias de cadela. Aexpressão desta molécula foi investigada em quarentae nove tumores mamários de cadela, recorrendo-se àtécnica de imunohistoquímica. A imunorreactividadepara a catenina p120 foi avaliada de acordo com a sualocalização subcelular em expressão membranar (normal ou reduzida), citoplasmática ou ausente. Naglândula mamária normal ou hiperplásica adjacente,foi observada uma expressão membranar forte e constante ao nível das células epiteliais, enquanto amaioria das neoplasias estudadas revelou redução31/49 (63,2%) ou ausência completa 8/49 (16,3%) deexpressão. Apenas seis casos mantiveram expressãomembranar desta molécula de adesão. O nosso estudorevela que a alteração da expressão da catenina p120 éum evento frequente nas neoplasias de cadela e sugereo seu envolvimento na progressão destas neoplasias.

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Immunohistochemical expression of p120-cateninin canine mammary tumours

The E-cadherin/catenin complex promotes cell tocell adhesion and plays a crucial role in the mainte-nance of a differentiated epithelial phenotype.Perturbation in the expression or function of this complex results in loss of intercellular adhesion, invasion and metastasis. In canine mammary tumours,there are few studies available on adhesion molecules,mostly regarding E-cadherin expression. The presentstudy aimed to investigate the immunohistochemicalexpression of p120 catenin in canine mammarytumours. Its expression was evaluated in fourty ninecanine mammary tumours, by using an immunohisto-chemical approach. Immunoreactivity was scoredaccording to the subcellular localisation of p120ctn innormal or reduced membrane, cytoplasm and negativeexpression. Adjacent normal or hyperplastic caninemammary gland showed a strong epithelial p120catenin expression, located at the cell membrane. Incontrast, most neoplastic tissues showed a reduction31/49 (63,2%) or complete absence 8/49 (16,3%) ofmembrane p120 catenin expression. A normal mem-brane expression was only observed in six cases. Inthe present investigation, we observed that an abnormalexpression of p120 catenin is a common phenomenonin canine mammary tumours, suggesting that thiscatenin may play a role in tumour progression.

Paraqueratose nasal do Golden Retriever:um caso

Seixas F.1, Gama A.1, Luis M.2, Pereira M.2,Pires M.A.1

1Laboratório de Histologia e Anatomia Patológica, ECAV-UTAD2Hospital Veterinário da UTAD (HVUTAD), ECAV-UTAD

A paraqueratose nasal do Labrador Retriever é umasíndrome rara caracterizada por alterações proliferati-vas do plano nasal. Esta síndrome afecta exclusiva-mente Labrador Retriever e animais cruzados deLabrador, afectando animais de pelagem preta,amarela e chocolate. Aparentemente esta síndrometem uma base hereditária, tendo sido proposta umatransmissão autossómica recessiva.

Os cães afectados desenvolvem lesões proliferativasno plano nasal, entre os 6 e os 12 meses, não apresen-tando quaisquer outras alterações de saúde.

Os autores descrevem o caso de uma cadela de umano, cruzada de Labrador, que apresentava lesões proliferativas exclusivamente na região nasal. A biópsia revelou hiperqueratose, paraqueratose e acantose, com presença de lagos serosos e vacúolos noestracto córneo. Com base na raça, idade, localizaçãoe biopsia, foi efectuado o diagnóstico de Paraquera-tose do Golden Retriever.

Nasal Parakeratosis of Golden Retriever: a casereport

Nasal parakeratosis of Labrador Retrievers is a raresyndrome characterized by proliferative change of theplanum nasale. This syndrome has been reportedexclusively in Labrador Retrievers or their cross-breeds. Black, yellow, and chocolate LabradorRetrievers are affected. Apparently it has a hereditarybasis, and an autossomal recessive mode of inheri-tance has been proposed.

Affected dogs develop dry, rough lesions especiallyin the dorsal surface of the planum nasale, but are otherwise healthy. Lesions develop between 6 monthsand 1 year of age.

The authors describe a case of a female, one yearold Labrador crossbreed dog presenting a dry, scalynasale lesion. The cutaneous lesions affected exclu-sively the nasale planum. Skin biopsy showed a mildhyperkeratosis, parakeratosis, and acantosis. The keratin layer, presented small serum lakes and smallvacuoles. Based in the breed, age, location and cuta-neous lesions, a diagnosis of nasale parakeratosis ofthe Golden Retriever was preformed.

Lesões metastásicas não usuais detumores de mama de gata

Seixas F.1, Machado J.2, Sargo T.2, Rocha C.2,Pires M. A.1, Lopes C.3

1Laboratório de Histologia e Anatomia Patológica, ECAV-UTAD2HVUTAD - ECAV-UTAD3ICBAS- UP

As neoplasias malignas da mama da gata são lesõesmuito infiltrativas com alta tendência à recorrêncialocal e metastização. As metástases são mais frequente-mente observadas nos gânglios linfáticos regionais epulmão, ocorrendo por vezes envolvimento do baço edo fígado. Neste trabalho apresentamos metástases emórgãos menos comummente envolvidos como o rim, ocoração, o ovário, a adrenal, entre outros, observadas noexame post mortem de gatas nos últimos anos.

Unusual cases of feline metastatic mammarytumours

Malignant mammary tumours of the queen are high-ly infiltrative tumours which show a strong tendency forlocal recurrence and metastasis. Metastasis usuallyaffects regional Lymph nodes and lung. Spleen andliver involvement are also common. In this work weshow unusual metastatic lesions of feline mammarytumours, affecting the kidney, the heart, the ovary, theadrenal and other organs that we have observed in thepost mortem examinations of queens in the last years.

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Um caso de carcinoma gástrico neuroendócrino num Dragão Barbudo(Pogona vitticeps)

Faísca P.*, Neves L.Centro de Investigação em Ciências Veterinárias (CICV)

Faculdade de Medicina Veterinária -ULHT Universidade Lusófona de

Humanidades e Tecnologias Campo Grande, 376 1749 - 024 Lisboa *[email protected]

Um dragão barbudo macho com um ano e meio deidade foi eutanasiado por apresentar há várias semanas,uma história de anorexia, icterícia, e melena, associadaa uma anemia não regenerativa e hiperglicemia severa.No exame pós-mortem o animal estava ictérico, ecaquético. À abertura da cavidade celómica o fígadoestava aumentado de tamanho, amarelado e commúltiplos nódulos amarelo-acastanhados de tamanhosvariáveis numa distribuição multifocal. O estômagoapresentava uma neoformação elevada com protusãopara o lúmen gástrico e ulceração central, com 0,5 cmde diâmetro. Histologicamente, a neoplasia gástricaestá localizada na submucosa com invasão da mucosae da camada muscular. Observa-se uma proliferaçãocelular organizada em ninhos e cordões separadosentre si por finos septos fibrovasculares, As célulasmais periféricas dos ninhos dispõem-se em paliçada eobserva-se multifocalmente a formação de rosetas epseudo-rosetas. As células são colunares com cito-plasma eosinofílico finamente granular com umnúcleo redondo eucromático e nucléolo indistinto. Oíndice mitótico é inferior a 1 mitose por 10 campos deobservação (400x), e observam-se êmbolos neoplási-cos nos vasos linfáticos e veias da subserosa. O fígadoapresenta uma degenerescência gorda panlobular emúltiplos nódulos histologicamente semelhantes àneoformação observada no estômago. Foi feita a caracterização imunohistoquímica e houve marcaçãopositiva das células neoplásicas para a enolase neuro-específica, sinaptofisina e somatostatina. A imagemmicroscópica e a imunohistoquímica são compatíveiscom o diagnóstico de carcinoma gástrico neuro-endócrino bem diferenciado com metastização hepática.

A case of gastric neuroendocrine carcinoma in abearded dragon (Pogona vitticeps)

A one year and a half old male bearded dragon, waseuthanized due to a several-week history of weakness,icterus, anorexia, and melena associated with a nonregenerative anemia and severe hyperglycemia. At thepostmortem examination the dragon was icteric andseverely emaciated. The liver was yellow and diffuselyenlarged, with multiple yellow to tan nodules with variable sizes in a multifocal distribution. The stomachpresented a 0,5 cm diameter mass, well demarcated andcentrally ulcerated, that protruded into the gastriclumen. On histopathology, the stomach neoplasia was

primarily located in the gastric submucosa with infiltration of the mucosa and muscle tunics. The neo-plasm consisted of nests and cords of small, uniformcolumnar cells separated by thin fibrovascular septa.Tumor cells had eosinophilic granular cytoplasm, around euchromatic nuclei and indistinct nucleoli.Palisading of peripherally located cells as well asrosettes and pseudorosettes were frequently observed.The mitotic index was lower than 1 mitose per high powerfiled, but neoplastic emboli were present in dilated subserosal veins and lymphatics. The liver presented apanlobular vacuolar degeneration consistent with fattydegeneration and multifocal nodular masses histologi-cally similar to the one observed in the stomach. Forfurther characterization, immunohistochemistry wasperformed and there was imunolabeling of neoplasticcells for neuron-specific enolase, synaptophysin andsomatostatin. The microscopic image and the immuno-histochemistry staining are consistent with a diagnosisof well differentiated gastric neuroendocrine carcinomawith liver metastasis.

Invasive infection by Trichosporonmucoides following circovirus infection ina parrot

Martins H., Carvalho P., Mendonça P., Fagulha T.,Henriques A.M., Monteiro M.INRB, I.P. Laboratório Nacional de Investigação Veterinária,

Estrada de Benfica, 701-1549-011, Lisboa, Portugal

Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsula-tum, Coccidioides immitis, Blastomyces dermatiditis,Pneumocystis carinii, Aspergillus spp , Candida spp,and other less common fungi have been identified ascausative agents of mycotic pneumonia in animals.These agents are often found in immunocompromisedhosts, but can cause disease in healthy individuals aswell. Pulmonary tissues and secretions constitute anexcellent environment for the growth and develop-ment of these organisms. The soil is their primarysource, being the main reservoir of those agents,which can be acquired by inhalation or skin abrasion.Trichosporon is a natural inhabitant of the soil but can,occasionally, be found as a component of the normalskin mycobiota of animals. It is also found as a sapro-phytic coloniser of some mucosae like the throat andlower gastrointestinal tract. Although uncommon,Trichosporon has been recently recognised as anopportunistic pathogen that can elicit a potentiallyfatal systemic infection in immunocompromisedhosts. Several cases of disseminated T. mucoidesinfection have been reported recently but in Portugalno necropsy data or report are available. As far as weknow, this report describes the first fatal case of dis-seminated trichosporosis caused by T. mucoides in a 6 months old immunonocompromised parrot. The

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animal also revealed to hold an infection due toCircovirus. Avian circovirus infections can cause different clinical manifestations but in all cases a lymphoid depletion is observed, associated to animmunosuppression that favours the appearance ofopportunistic secondary infections. Histopathologicallesions were suggestive of severe pulmonary infectionwith intense hyphae proliferation which accumulatedin the parabronchi with simultaneous invasion of theblood vessels. T. mucoides was grown on Sabouraudagar with chloramphenicol (BD Diagnostics-254091)and the identification of this fungal species was doneboth by morphological characterization and biochemi-cal tests (ID 32 C - Biomeriux 32 200).

Circovirus was detected by PCR and the amplifiedfragment was confirmed by sequencing. The parrottested negative for avian influenza by RT-PCR and forPacheco's disease virus by PCR. ** Trabalho apresentado na \"III International Conference onEnvironmental, Industrial and Applied Microbiology(BioMicroWorld2009) Lisbon,December 2009

Aspectos histopatológicos observados nacadeia ganglionar mesentérica decervídeos (Cervus elaphus)

Matos A.C. 1, 2, Coelho A.C. 2, Figueira L. 1,Matos M. 3, Pires M.A. 2*, Pinto M.L. 1

1Instituto Politécnico de Castelo Branco (IPCB), Castelo Branco,

Portugal 2Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro (UTAD), Centro de Ciência Animal e

Veterinária (CECAV), Apartado 202, 5001-801 Vila Real Codex,

Portugal3Departamento de Genética e Biotecnologia, UTAD, Apartado 202,

5001-801 Vila Real Codex, Portugal*[email protected]

Este estudo teve como principal objectivo adescrição de aspectos histopatológicos obeservadosem gânglios linfáticos mesentéricos de 60 cervídeos(Cervus elaphus) abatidos durante a época de caça2009-2010. Cada amostra foi fixada em formol a 10%e processada de acordo com técnicas de rotina.Efectuaram-se dois cortes de cada gânglio com aespessura de 3 µm posteriormente corados com hema-toxilina-eosina (HE) e pela técnica de Ziehl-Neelsen(ZN). Não se observaram lesões em 48 (80,0%) animais. Dos 12 (20,0%) que apresentaram lesõeshistopatológicas, observou-se necrose de liquefacçãoem 6 (50.0%). Encontraram-formações granulo-matosas em dois gânglios (16,7%), sendo estas consti-tuídas por macrófagos, células epitelióides e célulasgigantes. Nove (75%) gânglios apresentaram um infiltrado linfo-plasmocitário. Foram também obser-vadas células gigantes de Langhans em 9 (75%)amostras. Dois gânglios (16,7%) apresentaram

linfadenite eosinofílica. Todos os gânglios linfáticostiveram resultado negativo na técnica de Ziehl-Neelsen.

Histopathological aspects observed in deer(Cervus elaphus) mesenteric lymph nodes

The aim of this study was to describe histopatho-logical aspects observed in mesenteric lymph nodescollected from 60 hunter-killed deer (Cervus elaphus)during the 2009-2010 hunting seasons. Each samplewas fixed in 10% buffered formalin and processed bythe standard methods. Two sections of 3µm thicknesswere obtained from each tissue and were mounted onglass slides. One section was stained with haema-toxylin and eosin (HE) and the other one by the Ziehl--Neelsen (ZN) technique. Lesions were not evident in48 of the 60 deer examined (80.0%) and 12 (20.0%)had histopathological lesions. The lesions were associated with liquefaction necrosis in 6 (50.0%)cases. Two granulomas (16.7%) were observed withepithelioid cells, macrophages, and giant cells. Aninfiltrate of lymphocytes and plasma cells wasobserved in 9 (75.0%), and multinucleated giant cellswere seen in also 9 (75.0%) animals. An eosinophiliclymphadenitis was observed in 2 (16.7%) cases. Alllymph nodes were negative to the Ziehl-Neelsen technique.

Prevalência de lesões macroscópicas emgânglios mesentéricos de javalis (Sus scrofa) e veados (Cervus elaphus)

Matos A.C. 1, Coelho A.C. 2, Figueira L. 1,Matos M. 3, Pires M.A. 2, Pinto M.L. 1*

1Instituto Politécnico de Castelo Branco (IPCB), Castelo Branco,

Portugal2Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro (UTAD), Centro de Ciência Animal e

Veterinária (CECAV), Apartado 202, 5001-801 Vila Real Codex,

Portugal 3Departamento de Genética e Biotecnologia, UTAD, Apartado 202,

5001-801 Vila Real Codex, Portugal *[email protected]

Neste trabalho estudou-se a prevalência de nóduloscaseo-calcários em gânglios linfáticos mesentéricosde 126 javalis (Sus scrofa) e 102 veados (Cervus elaphus), no total de 228 animais caçados na região deCastelo Branco entre Outubro de 2009 e Janeiro de2010. A necrópsia foi efectuada no campo tendo sidodeterminada a idade e o sexo de cada animal. Baseadana erupção dentária os animais com menos de 24meses foram classificados como juvenis e aquelescom mais de 2 anos como adultos. A necrópsia incluiuinspecção macroscópica detalhada dos gânglios e dasvísceras abdominais. Os gânglios foram dissecados e

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seccionados. Efectuou-se o tratamento estatísticoatravés de análise descritiva tendo-se efecutado o cálculo da prevalência das lesões com um intervalo deconfiança de 95%. Em ambas as espécies as lesõesmacroscópicas foram quase sempre maiores de 1 cm.As lesões variaram desde nódulos caseosos com cercade 0,1 cm até nódulos caseocalcários com 0,5 cm dediâmetro. A prevalência de lesões caseocalcárias foide 7,0% (CI 95%: 5,3-8,9%). Em javalis a prevalênciadestas lesões foi de 4,8% (CI 95%: 2,9-6,7%) e emveados de 9,8% (CI 95%: 6,7-12,7%). Relativamenteà distribuição de acordo com o sexo, as lesões foramencontradas em igual número de javalis machos efêmeas (3 casos cada; 50,0%) e em 4 (40,0%) veadosfêmeas e em 6 (60,0%) veados machos. Relativamentedistribuição de acordo com a idade, 2 (33,3%) javaliseram juvenis e 4 (66,7%) eram adultos. Apenas umveado era juvenil (10,0%), sendo os outros 9 (90,0%)adultos.

Prevalence of gross changes in wild boar (Sus scrofa) and deer (Cervus elaphus) mesentericlymph nodes

The prevalence of caseous-calcareous nodules inmesenteric lymph nodes of wild boar (Sus scrofa) anddeer (Cervus elaphus) was studied from October 2009to January 2010 in 228 animals (126 wild boars and102 deer) hunted in Castelo Branco region. A necropsyexamination was performed in the field, includingdetailed determination of age and sex. Based on tootheruption patterns, animals less than 24 month wereclassified as juveniles and those more than 2 years asadults. The necropsy examination included detailedmacroscopic inspection of lymph nodes and abdominalviscera. Lymph nodes were dissected and sectioned.The statistical treatment included the descriptiveanalysis and the calculation of lesions prevalence ratewith a confidence interval of 95%. In both species,gross lesions were almost larger than 1 cm. The grosslesions ranged from 0.1 cm caseous nodules to 0,5com caseo-calcareous nodules. A 7.0% (CI 95%: 5.3-8.9%) prevalence of caseous-calcareous nodules wasfound. In wild boar the prevalence was 4.8% (CI 95%:2.9-6.7%), while in deer a prevalence of 9.8% (CI95%: 6.7-12.7%) was found. Lesions were present in3 (50.0%) wild boar females and in 3 (50.0%) malesand in 4 (40.0%) deer females and 6 (60.0%) males.Regarding the age, 2 (33.3%) wild boars were juve-nile, and 4 (66.7%) were adult, whereas 1 (10.0%)deer was juvenile and 9 (90.0%) were adult.

Dermatite por Malassezia num Gavião(Accipiter nisus)

Seixas F.1, Gama A.1, Travassos P.J.2, Valente J.3,Sargo R.3, Pires M.A.1

1Laboratório de Histologia e Anatomia Patológica, ECAV-UTAD2Laboratório de Ecologia Aplicada, ECVA-UTAD3CHRFS- HVUTAD (Centro Hospitalar de Recuperação de Fauna

Silvestre - Hospital Veterinário da UTAD), ECAV-UTAD

Os autores descrevem o caso de uma fêmea adultade gavião (Accipiter nisus) submetida a necrópsia noLaboratório de Histologia e Anatomia Patológica daUTAD após longa estadia no CHRFS-UTAD paratratamento de uma fractura. Apresentava lesões desca-mativas discretas na cabeça, rinite e placas difteróidesna cavidade oral. O exame anatomopatológico reveloulesões de metaplasia epidermóide sugestivas dehipovitaminose A e pneumonia aguda de origemmicótica. A pele da cabeça apresentava inúmeras formas de Malassezia spp.

A dermatite por Malassezia é uma dermatite comumno cão causada pela levedura oportunista Malasseziapachydermatis. É uma dermatite rara no gato e, nabibliografia consultada, os autores não encontraramnenhuma referência de infecção por Malassezia spp.em aves, silvestre ou exóticas.

Malassezia dermatitis in a Hawk (Accipiter nisus)

The authors describe a case of a female hawk(Accipiter nisus) submitted to post mortem examina-tion in the Laboratório de Histologia e AnatomiaPatológica of UTAD after a long treatment period inthe CHRFS-HVUTAD. The hawk presented occasionalscales in the skin, rhinitis and difteroid masses in theoral cavity. The pathological exam detected squamousmetaplasia associated to hipovitamine A and acutemicotic pneumonia. The skin of the hawk´s headshowed multiples budding oval yeasts of Malasseziaspp.

The Malassezia dermatitis is a very common canineskin disease caused by the opportunistic yeastMalassezia pachydermatis. It is a rare condition in thecat and, the authors did not found any reference ofMalassezia spp. infection in exotic and or wild birds inthe literature.

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Nematoidíase pulmonar compatível cominfecção por Aelurostrongylus abstrususem gato bravo (Felis silvestris)

Seixas F.1, Travassos P.J.2, Santos N.3, Pires M.A.1

1Laboratório de Histologia e Anatomia Patológica, ECAV-UTAD2Laboratório de Ecologia Aplicada, [email protected]

Os autores descrevem o caso de um gato bravo adulto (Felis silvestris) morto por cães de caça e transportado para o Parque Nacional de Peneda-Gerêsonde foi submetido a exame de necrópsia. Fragmentosde órgãos foram fixados em formol e enviados aoLaboratório de Histologia e Anatomia Patológica daUTAD onde forma processados segundo a técnica histológica de rotina. À observação microscópica opulmão apresentava vários nódulos de incubação compresença de grande quantidade de ovos e larvas nosalvéolos e infiltrado inflamatório. Observou-se aindahipertrofia da média das artérias pulmonares. A pneumonia parasitária observada é compatível cominfecção por Aelurostrongylus abstrusus um vermepulmonar comum nos felídeos. Na bibliografia consultada os autores não encontraram nenhumareferência de infecção pulmonar compatível comaelurostrongilose em gato bravo em Portugal, sendoesta a primeira descrição.

Pulmonary nematodiasis compatible withAelurostrongylus abstrusus infection in a wild cat(Felis silvestris)

The authors report a case of an adult wild cat (Felissilvestris) hunted by dogs and submitted to necropsyexamination at the Peneda-Gerês Natural Park. Tissuesamples were fixed in formalin and sent to theLaboratório de Histologia e Anatomia Patológica ofUTAD where it was processed for light microscopyaccording to standard procedures.

The lung showed multiple incubation nodules withalveoli packed with eggs and larvae and inflammatoryinfiltration. Lung arteries showed medial hypertrophy.This parasitary pneumonia is compatible with pulmonary infection by Aelurostrongylus abstrusus, acommon lungworm of cats. To the best of our knowledge this is the first report of a pulmonarynematodiasis, compatible with Aelurostrongylusabstrusus, in a wild cat in Portugal.

Micobacteriose em canário com envolvimento da medula óssea

Seixas F.1, Travassos P.J.2, Sousa L.3, Sargo R.3,Pires M.A.1

1Laboratório de Histologia e Anatomia Patológica, ECAV-UTAD2Laboratório de Ecologia Aplicada, ECVA-UTAD3CHRFS- HVUTAD (Centro Hospitalar de Recuperação de Fauna

Silvestre - Hospital Veterinário da UTAD), ECAV-UTAD

A tuberculose aviária é uma doença contagiosacrónica causada pelo complexo Mycobecteriumavium. Todas as espécies de aves são susceptíveis mas, as aves em cativeiro são mais frequentemente infectadas que as de vida livre. As lesões são mais frequentemente observadas no fígado, no baço e nointestino. O envolvimento multi-orgânico sugere que abacteriemia é comum.

Nos últimos anos o Laboratório de Histologia eAnatomia Patológica da UTAD tem recebido um crescente número de aves exóticas infectadas comtuberculose aviaria. Os autores descrevem um caso deum canário (Serinus canaria) macho, adulto, cominfecção disseminada e com envolvimento da medulaóssea.

Mycobacteriosis in a canary finch with bloodmarrow involvement

Avian tuberculosis is a contagious disease caused byMycobacterium avium complex. It is characterized byits chronicity. All species of birds can be infected butcaptive birds are affected more frequently than thoseliving in a wild state. Lesions are most frequentlyobserved in liver, spleen, and intestine. The tendencyof the disease to disseminate to several organs indi-cates that tuberculous bacteriemia is common.

In the last 10 years the Histopathological Lab ofUTAD has received an increasing number of exoticavian species infected with tuberculosis. The authorsreport a case of an adult, male, canary finch (Serinuscanaria) with disseminated Mycobacterium infectionwith bone marrow involvement.

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Organização celular do fígado de rato:uma análise histológica e ultraestrutural

Colaço B.1,2*, Franco E.2, Pinto A. 2, Villar V. 3,Calado A.2,4, Colaço A.2,4, Pires M.J.2,4

1Departamento de Zootecnia, Universidade de Trás-os-Montes e

Alto Douro, Vila Real, Portugal2CECAV, Centro de Estudos de Ciência Animal e Veterinária,

Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro, Vila Real, Portugal3Instituto de Biomedicina, Facultad de Veterinaria. Campus Vegazana.

Universidad de León, España4Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro, Vila Real, Portugal*[email protected]

Telf: 259350403; Fax: 259 350 480

A relevância da existência dum modelo experimentalhepático tem conduzido a diversas investigações sobrea organização do fígado em animais de laboratório. Orato é frequentemente utilizado como um modelo depatologia hepática e respectivos estudos pré-clinicos.Analisámos a estrutura histológica normal e a ultra-estrutura do fígado de rato, para servir como referêncianesta espécie a animais com patologia hepática induzi-da experimentalmente.

Os ratos Wistar adquiridos à Harlan Ibérica S.A.(Barcelona, Spain) foram eutanasiados com injecçãointraperitonial de pentobarbital sódico. Os lóbulos hepáticos foram cortados em blocos de 2–3 mm epreparados para microscopia óptica e electrónica, eefectuaram-se as colorações de hematoxilina/eosina eazul de toluidina.

Constatou-se que a organização histológica geral dofígado do rato era muito similar à de outras espécies.Nas preparações de azul de toluidina, identificaram-seas células estreladas hepáticas (CEH) pela presença devesículas lipídicas coradas de azul. Observaram-se pormicroscopia electrónica de transmissão hepatócitoscom núcleos esféricos e largos, nucléolos proemi-nentes com organelos citoplasmáticos incluindoretículo endoplasmático liso e rugoso e muitasmitocôndrias, lisossomas, peroxissomas e grânulosdensos de glicogénio. A superfície basal do hepatócito,próxima do espaço capilar sinusoidal, apresenta umaprofusa rede de microvilosidades no espaço de Disse.As CEH foram identificadas pela presença de proemi-nentes vesículas intracelulares de lípidos e finosprocessos citoplasmáticos envolvendo os processosdas células endoteliais.

A análise histológica e ultraestrutural é bastantesimilar à realizada em outros mamíferos, confirmandoque o rato é um modelo útil para estudos da função eestrutura hepática.

Rat liver cellular organization: a histological andfine structural analysis

The importance of having an experimental livermodel system has prompted several investigations ofliver organization in laboratory mammals. The rat iscommonly used as a model for liver pathology andrespective preclinical studies. We analyzed the normalhistology and ultrastructure of rat liver to serve as reference for animals with experimental induced liverpathology.

Wistar rats were obtained from Harlan Ibérica S.A.(Barcelona, Spain). These animals were euthanizedwith intraperitoneal injection of pentobarbital sodium.The liver lobes were cutted into 2–3 mm blocks andprepared for light and transmission electronmicroscopy. Hematoxilin and Eosin (H&E) and tolui-dine blue staining were performed.

We observed that the general histological organiza-tion of the rat liver is similar to other mammalianspecies. In toluidine blue preparations, HepaticStellate Cells (HSCs) were identified by the bluestained lipid droplets. We observed on transmissionelectron microscopy, hepatocytes with typical largespherical nuclei, prominent nucleoli along with cyto-plasmic organelles including both smooth and roughendoplasmic reticulum and many mitochondria, lyso-somes, peroxisomes, and dense granules of glycogen.The basal surface of the hepatocyte, neighboring thesinusoidal capillary space, displayed a profuse elabo-ration of microvilli in the space of Disse. The HSCwere identified by the presence of prominent intracel-lular lipid droplets and thin cytoplasmic processes surrounding endothelial cell processes.

The histological and fine structural analyses of therat liver is quite similar to that of other mammalianspecies, confirming that the rat presents a useful animal model for studies of liver structure and function.

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Variação de parâmetros fisiológicos domurganho durante um ensaio de carcinogénese hepática

Paula-Santos N.M.1*, Conceição-Pereira I.1*,Pereira F.O.1, Henriques A.1, Pires M.J.1,Palomino L.F.2, Colaço A.1, Oliveira P.A.1

1CECAV, Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro, 5001-911 Vila Real, Portugal2Departamento de Fisiologia, Faculdade de Veterinária,

Universidade de Santiago de Compostela, Lugo, Espanha*Ambos os autores contribuíram da mesma forma para a realização

deste trabalho

O cancro é uma das doenças que mais impacto temsobre a população humana e é sem dúvida, a seguir àsdoenças cardiovasculares, uma das mais mortíferas.Os carcinomas hepáticos constituem a terceira neoplasiamais comum em termos mundiais, sendo anualmenteresponsável pela morte de 600 000 doentes. A utiliza-ção de modelos animais para o estudo das doençashumanas constitui uma ferramenta imprescindívelpara a compreensão dos mecanismos biopatológicosassociados ao seu desenvolvimento. O agente carcinogénico N-dietilnitrosamina (DEN), quandoadministrado por via intraperitoneal (IP) ao murganhoinduz o desenvolvimento de carcinomas hepatocelu-lares, semelhantes aos identificados no Homem. Oobjectivo deste trabalho consistiu na avaliação doefeito da administração da DEN em parâmetros fisio-lógicos do murganho. Foram utilizados murganhosmachos, da estirpe ICR, com 5 semanas de idade.Durante o ensaio foram recolhidos dados relativos àvariação individual do peso corporal, consumo deágua e de alimento. Os animais foram eutanasiadospela administração IP de pentobarbital de sódio, 8semanas após a última administração da DEN. Foifeita uma necrópsia minuciosa a cada um dos animaise recolhidos dados relativos ao aspecto macroscópicodos órgãos, respectivo peso e amostras de sangue parahematologia. Em termos macroscópicos não foi iden-tificada qualquer alteração. O valor do hematócritonão apresentou diferenças estatisticamente significati-vas entre o grupo tratado com a DEN e o respectivocontrolo. O peso corporal no final do ensaio foiligeiramente inferior no grupo de animais tratadoscom DEN (41.88±2.82), em relação ao seu controlo(45.40±4.40), (p=0.055). O consumo de comida e deágua foi superior nos animais do grupo de controlo. Opeso médio do fígado dos animais expostos à DEN foisuperior ao do grupo de controlo.

No estudo da relação entre o peso do órgão e o pesocorporal destacaram-se a existência de diferenças estatisticamente significativas no grupo exposto à DENpara o peso rim direito/peso corporal (p=0.16) e rimesquerdo/peso corporal (p=0.45) Este estudo demonstraque a administração da DEN por via IP influencioualguns dos parâmetros fisiológicos avaliados.

Efeito do nebivolol na pressão portalinduzida pela ligadura do conducto biliarcomum - estudos preliminares em ratos

Maria João Pires1,2*, Bruno Colaço2,3,Elisabete Franco2, Ana Pinto2, Catarina Teixeira1

Aura Colaço1,2

1Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro, Vila Real, Portugal2CECAV, Centro de Estudos de Ciência Animal e Veterinária,

Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro, Vila Real, Portugal3Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro, Vila Real, Portugal

A hipertensão portal, resultante do aumento dofluxo sanguíneo portal, é uma complicação comumdas doenças hepáticas crónicas e uma causa de morteem doentes com cirrose hepática. A diminuição daprodução óxido nítrico (NO), observada nas doençashepáticas crónicas, pode contribuir directamente parao aumento da resistência intrahepática típica dahipertensão portal. Portanto, a modificação dabiodisponibilidade sistémica e/ou intrahepática de NOpode ser uma aproximação lógica no tratamento dahipertensão portal. O nebivolol é um antagonista dosadrenoreceptores ?1 altamente selectivo, com pro-priedades vasodilatadoras atribuídas à sua capacidadepara aumentar a biodisponibilidade de NO. Estasevidências levaram-nos a estudar o efeito do nebivololna hipertensão portal induzida pela ligadura do conducto biliar comum em ratos. Neste estudo foramutilizados 24 ratos machos, da estirpe Wistar, dosquais 16 foram submetidos a uma ligadura do conductobiliar comum (LCB), e nos restantes 8 a cirurgia foisimulada (SO). Três dias após a cirurgia, os animaisforam divididos em 3 grupos experimentais: SO: ratosem que a cirurgia foi simulada (n=8); LBC: ratos comLBC e sem tratamento (n=8); e LBC+N: ratos comLBC tratados com o nebivolol na dose de 8 mg/kg depeso vivo, administrado na água de bebida (n=8). Osanimais foram anestesiados com pentobarbital sódicoe a pressão intra-esplénica, uma medida indirecta dapressão portal, foi determinada após 4 semanas detratamento. Nos ratos pertencentes aos grupos LCB eLBC+N observou-se um aumento da pressão portal,quando comparados com os ratos do grupo SO. Noentanto, os animais tratados com o nebivolol apresen-taram valores de pressão portal mais baixos do que osratos com LBC e não tratados. Os nossos resultadossugerem que o nebivolol pode ter efeitos benéficos nahipertensão portal.

Effect of the nebivolol on portal pressure inducedby bile duct ligation - Preliminary studies in rats

Portal hypertension resulting from increasing resist-ance to portal blood flow is a common complication ofchronic liver diseases and a leading cause of death in

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patients with liver cirrhosis. An endothelial dysfunc-tion, associated with decreased production of nitricoxide (NO) in the intrahepatic microcirculation, hasbeen extensively documented in cirrhotic liver, andthese defects could directly contribute to the increasedintrahepatic resistance typical of portal hypertension.Therefore, the modification of the systemic and/orintrahepatic NO bioavailability may be a logicalapproach for the treatment of portal hypertension.Nebivolol is a new [beta]1-selective adrenergic receptorantagonist that has vasodilating properties attributableto its ability to increase NO bioavailability. Thus weexplored the potential of nebivolol as a therapy forportal hypertension by testing the effects of the drugon portal hypertension in a rat model of secondary biliary cirrhosis. Twenty-four adult male Wistar ratswere subjected to either BDL or sham operation (SO)using aseptic techniques. Three days after surgery, ratswere divided into three experimental groups: SO:Sham-operated (n=8); BDL: Bile duct ligated withouttreatment (n=8); BDL+N: BDL receiving nebivolol indrinking water (8mg/Kg of body weight) (n=8). After4 weeks of treatment, animals were anaesthetized withsodium pentobarbital and intrasplenic pressure, anindirect measure of portal pressure, was determined.As expected, portal pressure was increased in thegroups with BDL, when compared with SO group.The portal pressure of the nebivolol treated group waslower than that of the untreated group. The results ofthis preliminary study suggest that nebivolol may havebeneficial effects on portal hypertension.

Ligadura do conducto biliar comum emratos: alterações funcionais e morfológicas 5 semanas após a cirurgia

Maria João Pires1,2*, Catarina Teixeira1,Bruno Colaço2,3, Elisabete Franco2, Ana Pinto 2,Paula Oliveira1,2, Aura Colaço1,2

1Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro, Vila Real, Portugal2CECAV, Centro de Estudos de Ciência Animal e Veterinária,

Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro, Vila Real, Portugal3Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro, Vila Real, Portugal

A utilização de modelos animais é extremamenteimportante para o estudo das doenças hepáticas. Umdos modelos experimentais mais utilizados é a ligadu-ra do conducto biliar comum (LCB). A LCB é acom-panhada de colestase, fibrose portal progressiva, cir-rose biliar secundária e insuficiência hepática. No pre-sente trabalho foram utilizados 34 ratos machos, daestirpe Wistar. Os animais foram anestesiados comMeditomidina (Dormitor®) (0,5 mg/Kg) e Ketaminacloridratada (Imalgine®) (75 mg/Kg) por viaintraperitoneal. Em seguida procedeu-se à preparação

do campo cirúrgico mediante tricotomia e anti-sepsiacom uma solução de povidona iodada. Após a realiza-ção de uma laparotomia na linha média, realizou-seuma dupla ligadura do ducto biliar comum com umfio de seda 3/0. A primeira ligadura foi efectuadaabaixo da junção do ducto hepático e a segunda acimada entrada do ducto pancreático. A porção de ductobiliar entre as duas ligaduras foi cortada para evitaruma repermeabilização. Um dia após a cirurgia, acondição clínica dos animais piorou, com diminuiçãoda actividade, perda de peso, mucosas e pele ictéricas,escurecimento da urina e fezes pálidas. Cinco semanasapós a cirurgia, os animais foram eutanasiados compentobarbital, observou-se a presença de hepatome-galia e de dilatação do ducto biliar comum. Umaamostra de sangue da veia cava e uma peça de fígadoforam recolhidas. A actividade sérica da alaninaaminotransferase, da aspartato aminotransferase e dagama glutamil transferase, e a concentração sérica dabilirrubina total, indicadores bioquímicos de lesãohepatocelular e colestática, encontravam-se aumen-tadas. Os estudos histopatológicos revelaram alteraçõescaracterísticas de colestase, como necrose focal, inflamação portal, proliferação dos ductos biliares efibrose portal.

Common bile duct ligation in rats: morphologicand functional alterations 5 weeks after surgery

The use of animal models is of enormous impor-tance for the study of liver diseases. One of the mostwidely used experimental models is the common bileduct ligation (BDL). BDL produces cholestasis,induces progressive portal fibrosis, causes secondarybiliary cirrhosis, and finally leads to liver failure. Inthis work, BDL was performed in 34 male Wistar rats.Each rat was weighed and anesthetized by intraperi-toneal administration of ketamine (75 mg/kg) andmedetomidine (0,5 mg/kg). The abdomen was shavedand disinfected with 10% povidone iodine. Followinga midline incision, the common bile duct was exposedand ligated by double ligatures with 3-0 silk. The firstligature was made below the junction of the hepaticducts and the second ligature was made above theentrance of the pancreatic ducts. The common bileduct was then cut between the double ligatures toavoid repermeabilization. Twenty-four hours after surgery, clinical condition of the animals worsened,with decreasing activity, weight loss, yellowed earsand tails, darkened urine and pale feces. Animals weresacrificed 5 weeks after surgery under pentobarbitalanaesthesia. Jaundice was observed in the visceral andparietal peritoneum of all animals. The livers wereenlarged and the bile ducts above the obstruction pointwere dilated. Blood and liver samples were collected.Serum levels of alanine aminotransferase, aspartateaminotransferase, gamma-glutamyl transferase andtotal bilirubin, common biochemical indexes of hepa-

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tocellular and cholestatic injury were elevated. Wehave observed many histopathological features ofcholestasis such as focal necrosis, focal and portalinflammation, bile duct proliferation and fibrosis inour experimental model.

Melanomas: a histoquímica no diagnóstico diferencial

Lígia Maria Lourenço1, Maria dos Anjos Pires1,2*

1Laboratório de Histologia e Anatomia Patológica, Departamento de

Ciências Veterinárias. Escola de Ciências Agrárias e Veterinárias,

Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro. 5001-801 Vila Real,

Portugal 2CECAV*[email protected]

Os melanomas são tumores malignos dos melanóci-tos, podendo ser localizados na pele ou (na sua maiorparte) na cavidade oral ou junção mucocutânea. O cãoé o animal que mais apresenta estes tumores, sendo noporco também comum. Estes tumores têm diferentesgraus de pigmentação que não está de forma algumarelacionada com a sua agressividade. Assim podemosencontrar melanomas intensamente pigmentados,como sem pigmento algum (ou amelânicos). Dentre asmetodologias para auxilio do diagnóstico diferencialreferimos as técnicas de histoquimica e de Imuno-his-toquimica, esta última com recurso a anticorpos produzidos para moléculas humanas e que por teremreactividade cruzada com os animais podem serutlilzados. A histoquimica é um recurso mais básico ebarato disponivel nos nossos laboratórios que poderácontribuir para o diagnóstico destes tumores, semnecessidade de se recorrer à imunohistoquimica, oucomo complemento desta. Nos tecidos parafinados, amelanina pode ser identificada pelas suas característi-cas gerais de insolubilidade em solventes orgânicos,dissolução em soluções alcalinas fortes e pelo bran-queamento com agentes oxidantes. Para se demonstrara melanina nos tecidos fixados podem usar-se métodos baseados nas suas características físicascomo a solubilidade e o branqueamento, ou métodosbaseados no seu carácter redutor, como a técnica deMasson Fontana. Assim, propomo-nos neste trabalhoexplicar estas duas técnicas e mostrar exemplos dautlilidade da sua aplicação no diagnóstico demelanomas.

Melanoma: the histochemistry in the diferentialdiagnostic

Melanoma is a malignant tumor of melanocytes, andcan be found in the skin or mostly in the oral cavity ormucocutaneous junction. Malignant melanoma iscommon in the dog, and also in the pig. These tumorshave different degrees of pigmentation could be highly

pigmented or lack pigment, that is not in any wayrelated to their aggressiveness. Among the methods beuseful to the differential diagnosis, we refer the tech-niques in histochemistry and immunohistochemistry,the latter one using the antibodies produced to humanmolecules and who have cross-reactivity with animal.Histochemistry is a more basic and cheaply techniqueavailable in our laboratories that could assist in thediagnosis of these tumors without use immunohisto-chemistry, or to complement this technique. In paraffined tissues, melanin can be identified by theirgeneral insolubility in organic solvents, to be dissol-ved in strong alkaline solutions and be positive to thebleaching agents. To demonstrate the melanin in fixedtissues we can use methods based on their physicalcharacteristics such as solubility and bleaching, ormethods based on their reducer character, as the techni-que of Masson Fontana. Thus, we propose in this paperto explain these two techniques and show examples ofits application in the diagnosis of melanoma.

Técnicas de branqueamento em imunohistoquímica. Um estudo em lesõesmelanocíticas de canídeos

Pires I., Pereira D., Bento L., Coelho L.,Queiroga F.L., Araújo M., Oliveira J.*

Departamento de Ciências Veterinárias, Universidade de

Trás-os-Montes e Alto Douro (UTAD), Centro de Ciência Animal e

Veterinária (CECAV), Apartado 202, 5001-801 Vila Real Codex,

Portugal* [email protected]

Telf: 259350638; Fax: 259350480

A imunohistoquímica é um método de rotina utilizada nos Laboratórios de Patologia Veterináriaquer no diagnóstico quer na investigação. Para seobter uma boa relação sinal/ruído, a maioria dos anti-corpos utilizados necessitam de um pré-tratamento derecuperação antigénica, o que pode causar, muitasvezes a destruição dos tecidos. Este problema é aindamais evidente nas lesões pigmentadas. A melanina édifícil de ser diferenciada da reacção castanha obtidapelo cromogéneo diaminobenzidina, um dos mais usados no método avidina-biotina-peroxidase. A utilização de um cromogéneo de outra cor, como vermelho, não resolve este problema já que a melani-na continuaria a comprometer a interpretação da marcação. Assim, as lesões pigmentadas necessitamde um tratamento de branqueamento que pode ser corrosivo e danificar o tecido. Neste trabalho testamosdiferentes métodos de branqueamento e diferentesreagentes como o permanganato de potássio(KMnO4) e o peróxido de hidrogénio (H2O2) nadetecção imunohistoquímica de diferentes proteínasem lesões melanocíticas caninas. Discute-se ainda o

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método que permite uma melhor interpretação damarcação e uma menor destruição do tecido.

Method of melanin bleaching in immunohistochemistry. A study in caninemelanocytic lesions

In veterinary medicine, immunohistochemistrymethods are routinely used in a Veterinary PathologyLaboratory, both for diagnosis and investigation.Almost every antibodies used require an antigenretrieval procedure, which can be destructive to tissuesections. This problem is more evident in pigmentedlesions. Melanin present in melanocytic tumours isdifficult to differentiate from the brown immunoproductof diaminobenzidine reaction, the commonly chro-mogen used in avidine–biotin immunoperoxidase-complex immunodetection system. Even if we use ared chromogen, the problem is not solved because theimmunoproduct is still covered by melanin that com-promises the interpretation of the immunoreactivityresults. The pigmented melanocytic lesions require a procedure of melanin bleaching, which could be corrosive and compromise tissue preservation. In thiswork we tested different bleaching methods andreagents, such as potassium permanganate (KMnO4)and hydrogen peroxide (H2O2) in immunohisto-chemistry detection of different proteins in caninemelanocytic lesions. A discussion of the method thatallow the best tissue preservation and the interpreta-tion of the reaction are also performed.

Casos clínicos

Qual é o seu diagnóstico?

Maria dos Anjos Pires1, Fernanda Seixas1,Adelina Gama1, João Machado2

1CECAV, Departamento de Ciências Veterinárias, ECAV, UTAD,

5001-801 Vila Real, [email protected] 2Hospital Veterinário - ECAV, UTAD, 5001-801 Vila Real

Foi solicitada a necrópsia de um canídeo machoadulto, labrador, com história de doença crónica earrastada.

A história desse animal era complexa e na primeiraconsulta apresentou tosse, regurgitação e prostração,além de hipoglicemia e uma rânula. Após tratamentocom antibiótico e anti-inflamatórios, o animal tevealta. Voltou 3 semanas depois com adenomegalia generalizada mais evidente nos gânglios submandibu-lares e poplíteos. Apresentava, leucocitose intensa(37000, de linfocitose e monocitose) e anemia ligeira(hematocrito de 32). A analítica bioquímica estavanormal, assim como o Rx torácico. Foi submetido aexame PCR para leishmaniose e erlichiose, que foramnegativos.

À necrópsia observou-se adenomegalia dos gângliosdo pescoço e pré-escapulares. A língua apresentava-seedemaciada e fibrosada, com aumento dos canaisglandulares. Hipertrofia da amígdala direita.

Tiróide direita com zona de hemorragia e limitespouco definidos e pequenos nódulos com cerca de 0,5 cm de diâmetro.

Os pulmões apresentavam vascularização evidente eduas zonas com nódulos vermelhos escuros de cercade 1,5 cm de diâmetro.

Os rins apresentavam descapsulação renitente.Baço com enfartes marginais. Endocardiose

bilateral. Testículo esquerdo comlesão nodular decerca de 3cm de diâmetro, constituído por tecidosbrancos e rosados de disposição nodular. Próstata deconsistência aumentada.

What is your diagnosis?

It was requested the necropsy of an adult male dog,labrador with a history of chronic disease.

The history of this animal was complex: at the firstvisit he had cough, regurgitation, depletion, hypo-glycemia and a ranula. After treatment with antibioticsand anti-inflammatory, the animal was sent home. Hereturned 3 weeks later with generalized adenomegalia,more evident in the submandibular and popliteallymph nodes. He had severe leukocytosis (37000,lymphocytosis and monocytosis) and mild anemia(hematocrit of 32). The analytical biochemistry wasnormal, as well as the thoracic X-ray. It was made aPCR for leishmaniasis and ehrlichiosis, which werenegative.

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At necropsy there was marked increased of thelymph nodes of the neck and pre-scapular. The tonguewas swollen and fibrotic with increased glandularchannels, and have hypertrophy of the right amygdala.

The right thyroid was ill-defined an presented anhemorrhagic zone and small nodules (with approxi-mately 0.5 cm in diameter).

The lungs showed obvious vascularization and twoareas with dark red nodules of approximately 1.5 cmin diameter.

The kidneys had difficult descapsulation.

Lesão no útero de um Porquinho da Índia

Maria dos Anjos Pires1*, Ana Laura Saraiva2

1CECAV, Departamento de Ciências Veterinárias, ECAV, UTAD,

5001-801 Vila Real2Escola Universitária de Vasco da Gama, Coimbra,

Mosteiro S. Jorge de Milréu, Estrada da Conraria,

3040-714 Castelo Viegas, Coimbra *[email protected]

Recebemos no laboratório material de exérese cirúrgica de um Porquinho da Índia, fêmea, tricolor,não vacinada, desparasitada, de 3 anos de idade. Omaterial era constituído por segmento de útero com 4 cm de extensão e com representação de um ovário.Este apresentava múltiplas cavidades quisticas. Noútero observou-se neoformação seccionada transver-salmente com 1 cm de diâmetro e constituída por tecidos brancos de disposição fasciculada. Foi feitoprocessamento de rotina e coloração com HE, paraemissão de diagnóstico morfológico e imunohisto-quimica.

Lesion in the uterus of a Guinea pig

We received in the laboratory, a surgical excision ofa Guinea pig, female, tricolor, not vaccinated,wormed, with 3 years of age. The material consisted ina uterine segment with 4 cm long with representationof an ovary. The ovary presented multiple cystic cavi-ties. In the uterus we observed a neoformation, trans-versally sectioned with 1 cm in diameter, consisting ina white fasciculated tissues. Was made routine processing and staining with HE, for morphologicaland immunohistochemical diagnosis.

Patologia digestiva em ovinos associada àingestão de substância não determinada

Madalena Monteiro, Ana Paula Mendonça e Paulo CarvalhoINRB, I.P. Laboratório Nacional de Investigação Veterinária,

Estrada de Benfica, 701-1549-011, Lisboa, Portugal

Os autores descrevem as lesões macro e microscópi-cas observadas em dois cadáveres de ovino pertencentesa um rebanho onde se verificou alguma mortalidade. Aslesões de tipo ulcerativo localizavam-se sobretudo aonível da cavidade oral, esófago e rumen; os exames realizados não permitiram identificar a sua etiologia.

Qual é o seu diagnóstico?

Vala H.1,2, Cruz Paiva R.2, Mesquita J.2,Oliveira A.L.2, Mega A.C.2, Nóbrega C.2,Santos C.2, Esteves F.2

1Centro de Estudos em Educação, Tecnologias e Saúde.

Escola Superior Agrária de Viseu, IPV. Estrada de Nelas,

Quinta da Alagoa, Ranhados, 3500-606 Viseu, Portugal2Escola Superior Agrária de Viseu, IPV. Quinta da Alagoa.

Estrada de Nelas. 3500-606 Viseu

Felídeo, sexo masculino, 17 meses de idade, raçaPersa, com historial de lesões alopécicas periocularese prurido recorrentes, desde os 3 meses.

Recentemente, acorreu à consulta com lesão ulcera-tiva na face direita, aumento do gânglio respectivo emanchas púrpuras disseminadas por toda a superficíecorporal. O exame físico, revelou alterações respira-tórias e hematológicas (anemia: hematócrito 22,2%;trombocitose: plaquetas 4056x103).

O exame macroscópico confirmou a lesão cutâneaulcerativa da face e que as manchas púrpuras se aprofundavam até ao tecido subcutâneo. Foram aindaobservadas manchas avermelhadas no pulmão, nosgânglios linfáticos mesentéricos e congestão acentua-da da região perifaríngea.

O exame microscópico da pele da face revelouhiperplasia da epiderme, com hemorragia subepidér-mica, área de necrose com presença de bactérias e presença de infiltrado mononucleado, muito rico emcélulas da linha plasmocitária. A pele das regiões docorpo com manchas revelou hemorragia da dermesuperficial, hemorragia extensa em toalha, da dermemédia, profunda e do tecido subcutâneo. A pele dasregiões não hemorrágicas revelou mixedema, fibrosedérmica, atrofia dos anexos cutâneos e displasia folicular. Ao nível dos restantes órgãos predominouum quadro congestivo-hemorrágico, infiltradomononucleado, rico em células da linha plasmocitária,destacando-se a presença de células gigantes multinu-cleadas no pulmão e a presença de detritos nucleares

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de células tumorais apoptóticas, compatíveis com aimagem conhecida como céu estrelado nos folículoscorticais dos gânglios linfáticos. O exame microscópicodos tecidos perifaríngeos e amígdalas permitiu efectuaro diagnóstico de linfoma multicêntrico.

Os autores apresentam imagens macroscópicas emicroscópicas detalhadas, em várias perspectivas e ampliações das principais lesões, colocando à dis-cussão várias particularidades que não se enquadramno quadro característico de linfoma, designadamente aexpressão de leucemia concomitante, a presença devírus respiratório sincicial, a trombocitose e as hemorragias generalizadas.

What’s your diagnosis?

A 17-month-old Persian cat, male, with a history ofskin lesions with continuous periocular alopecia anditching, since 3 months-old with recurrence after treatment.

Recently, was referred for clinical examination withan ulcerative lesion on the right cheek and increasedlymph node at the same side, scattered purple spotswere found all over the body. The physical examina-tion revealed respiratory and hematologic disorders(anemia: hematocrit 22.2%; thrombocytosis: platelets4056x103).

Macroscopic examination confirmed the ulcerativeskin lesion of the face and the purple patches in theother body regions, which deepened to the subcuta-neous tissue. Red patches were also observed in thelung and lymph nodes, as well as marked congestionof the peripharyngeal region.

Microscopic examination of the facial skin revealedepidermal hyperplasia with subepidermal haemor-rhage, an area of necrosis presenting bacteria andpresence of mononuclear infiltrate, rich in cells of theplasma cell line. The skin of the body with patchesrevealed bleeding from the superficial dermis, exten-sive towel bleeding in the mid, deep-dermal and subcutaneous tissue. The skin of the other regionsrevealed myxedema, dermal fibrosis, skin appendagesatrophy and follicular dysplasia. The other organsshowed a congestive-hemorrhagic condition, mononu-clear infiltrate, rich in plasma cell line, emphasizingthe presence of multinucleated giant cells in the lungand the presence of nuclear debris of apoptotic tumourcells, consistent with the characteristic image, knownas starry sky, in the lymph nodes cortical follicles. The microscopic examination, in particular of theperipharyngeal tissues and tonsils, contributed to the diagnosis of multicentric lymphoma.

The authors present macroscopic and microscopicdetailed images from various perspectives and objectives of the main lesions described, proposing tothe discussion features that do not fit directly in lymphoma’s characteristics, including the expression

of concomitant leukemia, the presence of respiratorysyncytial virus, the thrombocytosis and the generali-zed bleeding.