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CURSO DE FORMACIÓN EN PROPÓLEOS Y PRODUCTOS AFINES
Sala de Conferencias MAT-CINAT, Campus Pbo. Benjamín Núñez
Prof. Dr. Niraldo Paulino – Pasante Académico Coordinador del Curso El Dr. Niraldo Paulino es profesor en la Universidad Bandeirante de São Paulo y Jefe de Investigación y Desarrollo del Grupo BIOMED en el Programa de Farmacia. Recibió su título de farmacéutico de la Universidad Federal de Santa Catarina, Florianópolis, SC Brasil y completó su doctorado en la misma universidad en colaboración con la Universidad Ludwig Maximilian de Alemania. Tiene experiencia en Farmacología, centrándose en las plantas medicinales farmacología, farmacología molecular y la señalización celular. El área especial de interés es: plantas medicinales (especies brasileñas), propóleos, la inflamación, y los mecanismos moleculares de acción de los productos naturales y sintéticos bioactivos. Cuenta con varias publicaciones y patentes, es uno de los expertos líderes en investigación en los propóleos brasileños y sus acciones y aplicaciones. Es miembro de varios comités de revisión incluyendo Chef-Editor de la Revista de Pesquisa e Inovação Farmacêutica en Brasil.
Impartido por:Universidade Anhanguera de São Paulo
Programa de Mestrado Profissional em FarmáciaGrupo de Pesquisa e Desenvolvimento de BiomedicamentosRua Maria Cândida, 1813, Vila Guilherme - São Paulo, SP
Prof. Niraldo PaulinoE-mail: [email protected](11) 2967-9147 (48) 9986-6003
Medical Lex Gestão de Informações e Cursos Ltda. Av. Desemb. Vitor Lima, 260 sala 908, Ed. Madson Center Trindade - Florianópolis/SC - CEP 88040-400. Fone 48 32261616 [email protected]
BRASIL – Santa Catarina
Programa:
Aspectos históricos y comerciales de la utilización de los productos
de las colmenas
Parte 1:
Talk during the RLHH Journal Club Schedule 60 Great Ormond Street - London WC1N 3HR
Tel: 0845 1555 000 - Website: http://www.rlhh.org.uk
Clase del autor en InglaterraRoyal London Homeopathic Hospital, e no
Imperial College London, ambas em Londres na Inglaterra.
Historia del propóleo
Dibujos prehistóricos sugieren la presencia de las abejas y la interacción con los seres humanos.
En el antiguo Egipto los propóleos fueron utilizados como un bálsamo para momificar a los seres humanos y animales muertos.
También fueron utilizados por los sacerdotes para el tratamiento de enfermedades inflamatorias y de la piel.
Historia del propóleoLa civilización judeo-cristiana heredada de los egipcios la costumbre de utilizar resina para purificar ambientes (tales como resina balsámica) y para el tratamiento de lesiones de la piel.
Historia del propóleo
Los sirios usaban los propóleos en el tratamiento de infecciones y lesiones de la piel.
La proximidad geográfica y las guerras con civilizaciones mesopotámicas hicieron que el enfoque y los griegos conocían las propiedades de la resina de propóleos, transmitirla al mundo occidental por la antigua Roma.
Historia del propóleo
En Roma los propóleos fueron popularmente utilizados para el tratamiento de numerosas enfermedades.
Avicena en el siglo XI sistematizó el uso del propóleos asignándole la propiedad de limpiar el tejido infectado y regenerar heridas expuestas, incluyendo forúnculos, inflamaciones de la boca y los tumores.
Própolis é coletado, limpo, triturado e percolado em condições padronizadas (em geral em alcool) para produzir extrato.
Essas substâncias são transformadas na colméia e usada para fechar a abertura e protege-la da proliferação de micro-organismos: bactérias,fungos e virus.
Esta substância resinosa é chamada de própolis.
O extrato de própolis é usado para preparar várias formulações farmacêuticas: capsulas, cremes, spray oral, shampoos...
Abelhas coletam substâncias resinosas de determinadas plantas
Propóleo
A Própolis é coletada, limpa, triturada e percolada em condições padronizadas
(em geral em alcool) para produzir extrato.
Essas substâncias são transformadas na colméia e
usada para fechar a abertura e protege-la da proliferação de micro-organismos: bactérias,
fungos e virus.
Esta substância resinosa é chamada de própolis.
O extrato de própolis é usado para preparar várias formulações farmacêuticas: capsulas,
cremes, spray oral, shampoos...
Abelhas coletam substâncias resinosas de
determinadas plantas
Propóleo
Propóleo Europeo
No Europa Central e Leste a principal fonte botânica para produzir própolis é o Populos nigra.
Populos nigra
Os principais componentes são Flavonóides e ésteres do Ácido Cafeico (CAPE) e derivados allyl (ALERGENICOS).
Propóleo brasileño
Brasilia(DF)
Amazonas
Roraima
En Brasil tenemos muchas regiones fitogeográficas y muchos tipos de propóleos (al menos 20) con diferentes constituciones químicas.
Marrón
Verde
Amazonia
Pantanal Rojo
Bosque de las Araucarias Mata Atlántica
Cerrado
Bosques del mangle
Propóleo brasileño
Brasilia(DF)
Amazonas
Roraima
MG
SP
PR
SC
RS
Los productores de propóleos más grandes en el Brasil están en el sur y sureste. La mayor parte de la producción se exporta al mercado asiático (Japón) y Europa (Alemania)! Marrom
Verde
Pro
ducc
ión
Propóleo brasileñoMG
SP
PR
SC
RSMarrón
VerdeBaccharis dracunculifolia
Araucaria angustifolia Eucalipto citriodora
Pro d
u cc i
ó n
Roja Dalbergia ecastophyllum
AL
BABA
https://youtu.be/P4-eCWYlXfM
Propóleo brasileño
https://youtu.be/7_zAEPMTLS0
VERDEROJA
Nuestro estudio
Estudio sistemático para agregar valor comercial al propóleo brasileiro
Este estudio tiene como objetivo demostrar el camino tomado por un producto natural, su prospección,
fabricación y comercialización
Nuestro estudio
Dos grandes socios de la industria para el estudio sistemático de los propóleos brasileños (marrón y verde)
Los objetivos fueron evaluar la toxicidad, validar acciones farmacológicas y desarrollar productos a base de propóleos
1998
1999
Estudio del propóleo brasileñoEl propóleo del Brasil
Univ. Brasil Univ. Exterior Promoción
James FearnleyNature’s Laboratory LtdEngland - UK
Industrias
Néctar Farmácia LtdaBelo Horizonte MG
Apis-Nativa Produtos Naturais LtdaRua Caetano Lumertz, 49 Araranguá, SC
Prospección, calificación y validación de los extractos
Recogida y estandarización de los extractos
Fraccionamiento químico Aislamiento y caracterización química de los compuestos
Ensayos biológicos
Farmacotécnicos Farmacológicos
investigación Desarrollo de la Formulación
Control de calidad
Farmacologia Toxicologia
Compatibilidad
Viabilidad
Forma farmacéutica
Embalaje
Bula
Farmacotécnico
Fisicoquimico
Quimico
In vivo
In vitro
Ex vivo
DL50
Hematológia y bioquímica
La toxicidad sistémica y de
comportamiento
HPLC
Espectroscopia de masas
Necessidad
Registro de PATENTES
Aditivo para PATENTES
Estudio farmacocinético preliminar de la formulaciónCápsulas2008
1998
Estudio del propóleo brasileño
La investigación científica con propóleos brasileños
Procedencia geográficaFuente Botánica
Toxicologia AntibacterianoInflamaciónDolor Sinais Transducionais
Biologia Molecular
In vivo
Bioquimica
Celular
Função:Hepática
Renal
LD50
Histologia:FígadoRins
Edema de pata
Peritonite
Pleurisia
Induzida:CarrageninaBradicininaHistamina
PGF2
PGE2 ou Capsaicina
induzida:Carragen. BradicininaHistamina
CIM
Inibição do crescimento
Efeito citotóxico
Cultura celular
Patch clampKv1.3, BKCa
Antioxidante
In vitroIn vivo
Fígado
Edema de orelha
RAW 264.7
Jurkat
Desoxyribos
Xanthina-oxidase
Migração neutrófilos
Rins
Células Kupfer
Traquéia isolada de
cobaia
CHO e GH3
MTT
NFBNOMPO
Formulaciones con propóleos
Cápsulas con extracto seco estandarizado
Formulaciones para uso vaginal
Formulaciones para uso dental
Empezando en abril de 1998
Fin en abril de 2008
Inflamatoia
Térmica
COX2
Aorta
Íleo
Hemograma
Leucócitos
Dados Hematológicos
PGE2
Línea de Cosméticos y cosmecéuticos
Órgãos isolados
Traquéia
Estudio del propóleo brasileño
Ensayos biológicos
Farmacológicos
Los primeros estudios con muestras de propóleos estandarizados desde el sur de Brasil (P1) mostraron actividad antinociceptiva en varios modelos de dolor en ratones y ratas, incluyendo nocicepción causado por el ácido acético, caolín y zymozan así como la inhibición de ambas fases, neurogénica y formalina persistente inducida dolor o dolor inducido por la capsaicina (Campos et al., 1998).
CAMPOS, R. O. P. ; PAULINO, N. ; SILVA, C. H. M. ; SCREMIN, A. ; CALIXTO, J. B. . Anti-hyperalgesic effect of the ethanolic extract of propolis. Journal of
Pharmacy and Pharmacology, Inglaterra, v. 50, p. 1187-1193, 1998
JOURNAL OF PHARMACY AND PHARMACOLOGYAn international journal of pharmaceutical science ISSN: 0022-3573 Copyright 2002 Pharmaceutical Press
Otras publicaciones
Trabajando representa a cuatro compuestos de propóleos brasileños encontrado en: (1) 3-prenil-4-hidroxicinámico (PHCA), (2) 2,2-dimetil-6-carboxyethenyl-2H-1-benzopirano (DCBEN), (3) ácido 3,5-diprenyl-4-hidroxicinámico (DHCA) y (4) 2,2-dimetil-6-carboxyethenyl-8-prenil-2H-1-benzopirano (DPB) y sus actividades biológicas.
MARCUCCI, M. C. ; FERRERES, F. ; GARCÍAVIGUERA, C. ; BANKOVA, V. S. ; CASTRO, S. L. ; DANTAS, A. P. ; VALENTE, P. H. M. ; PAULINO, N. . Phenolic compounds from Brazilian propolis with pharmacological activities.. Journal of Ethnopharmacology, Estados Unidos, v. 74, p. 105-112, 2001
JOURNAL OF ETHNOPHARMACOLOGYAn Interdisciplinary Journal Devoted to Indigenous DrugsThe Official Journal of the International Society for Ethnopharmacology
Otras publicaciones
También demuestran que los propóleos brasileños producen efecto relajante en la tráquea aislado de cobaya in vitro. Este efecto fue mediado por la producción y liberación de óxido nítrico en las neuronas nitrérgicas, e fue indirectamente dependiente de la modulación de los canales de potasio modulado por calcio de alta (BKCa) e intermedio (IKCA) conductancia (Paulino et al., 2.002).
PAULINO, N. ; SCREMIN, F. M. ; RAICHASKI, L. B. ; MARCUCCI, M. C. ; SCREMIN, A. ; CALIXTO, J. B. Mechanisms involved in the relaxant action of the ethanolic extract of propolis in the guinea pig trachea in vitro. Journal of Pharmacy
and Pharmacology, Northern Ireland, v. 54, n. 6, p. 845-852, 2002.
JOURNAL OF PHARMACY AND PHARMACOLOGYAn international journal of pharmaceutical science ISSN: 0022-3573 Copyright 2002 Pharmaceutical Press
Otras publicaciones
Hemos publicado un artículo sobre la actividad analgésica y antiinflamatoria de propóleo de Baccharis dracunculifolia. Se demuestra que este propóleo produjo efecto antiedematogenico, anti-inflamatorio y analgésico según la evaluación de diversos modelos animales, y los métodos de biología molecular. Los propóleos de Baccharis dracunculifolia inhibieron la producción de prostaglandina E2 durante la fase de inflamación aguda, reducen la producción de óxido nítrico en los macrófagos e inhiben la activación del factor de transcripción nuclear (NFB).
PAULINO, N. ; TEIXEIRA, C. ; MARTINS, R. ; SCREMIN, A. ; DIRSCH, V. ; VOLLMAR, A. ; ABREU, S. R. L. ; CASTRO, S. L. ; MARCUCCI, M. C. . Evaluation of the analgesic and anti-inflammatory effects of a Brazilian green propolis.. Planta Medica, v. 72, p. 899-906, 2006
PLANTA MEDICAAn International Journal of Natural Products and Medicinal Plant ResearchOfficial Organ of the Society for Medicinal Plant Research (GA), www.ga-online.org
Otras publicaciones
Demostró el efecto inmunomodulador de propóleo verde tipificada en la respuesta inmune humoral y celular. El propóleo como un adyuvante de vacunas veterinarias.
Otras publicaciones
Demostró el efecto inmunomodulador de propóleo verde tipificada en la respuesta inmune humoral y celular. El propóleo como un adyuvante de vacunas veterinarias.
Otras publicaciones
Revisión de las indicaciones para el uso del propóleos como una terapia nutricional adyuvante para tratar el cáncer, que se refiere al efecto sobre la base de numerosos estudios publicados.
J. Galvao, J.A. Abreu, T. Cruz, G.A.S. Machado, P. Niraldo, A. Daugsch, C.S. Moraes, P. Fort and Y.K. Park F. Biological Therapy Using Propolis as Nutritional Supplement in Cancer Treatment. International Journal of Cancer Research 3 (1): 43-53, 2007
INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER RESEARCH
Otras publicaciones
Evaluación de la actividad anti-inflamatoria y la biodisponibilidad del compuesto presente en propolis verdes tipificado, como el ARTEPILLIN C.
Otras publicaciones
Evaluación de la actividad anti-úlcera de una formulación que contiene propóleos brasileños.
Otras publicaciones
Evaluación del Gel anti-inflamatorio que contiene extracto de propóleos en cervicite.
Otras publicaciones
Título – TYPING NATURAL PRODUCTSPaís – Japão (PCT)Descrição – Número do pedido: 2002-552654. Data de depósito: 20/06/2003. PCT/BR01/00159. Prioridade: 22/12/00. Nome do depositante: Maria Cristina Marcucci Ribeiro. Nome dos inventores: Maria Cristina Marcucci Ribeiro. Nome do procurador: Beerre Assessoria Empresarial Ltda
Título – TYPING NATURAL PRODUCTSPaís – Comunidade Européia (PCT)Descrição – Número do depósito: EP 012719175. Data de depósito: 20/06/2003. PCT/BR01/00159 Prioridade: 22/12/00. Nome do depositante: Maria Cristina Marcucci Ribeiro. Nome dos inventores: Maria Cristina Marcucci Ribeiro. Nome do procurador: Beerre Assessoria Empresarial Ltda
Título – PROCESSO DE IDENTIFICAÇÃO DE TIPAGENS DA PRÓPOLIS BRASILEIRAPaís – Brasil (INPI-Rio de Janeiro)Descrição – Número do pedido: PI 0006272-3 Data de depósito: 22/12/2000, publicada em 16/08/2002. Nome do depositante: Maria Cristina Marcucci Ribeiro (transferido para Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo – Fapesp). Nome dos inventores: Maria Cristina Marcucci Ribeiro. Nome do procurador: Beerre Assessoria Empresarial Ltda
Patentes adicionales
Bases legales y regulatorios
Legislación Federal Agropecuaria (Ministerio de Agricultura, 2001) regula la identidad y calidad de propóleos, que se fijan los requisitos mínimos de calidad para su comercialización
A finales de 2005 ANVISA publica el registro de medicamentos como Nota de regulación técnica a partir del propóleo si tienen indicaciones terapéuticas comprobadas por experimentos científicos.
(www.anvisa.gov.br/medicamentos/catef/propolis.htm).
Existe una demanda para el registro de productos con indicación terapéutica, que contienen como principio activo, propóleo, solos o en combinación.
El propóleo es un producto natural, las características físicas de madera blanda y composición variable, recogidos de varias especies de plantas que se somete a adición de secreciones de abejas, clasificados como opoterápico. Los requisitos de registro se definen en la RDC No 132/2003 y prueba de seguridad y eficacia se detalla en esta nota técnica.
Cámara Técnica de Medicamentos Fitoterápicos - CATEF
Investigación científica con propóleos brasileños
Nuevos proyectosEmpezando en abril de 2006
Formulaciones con propóleos
Cápsulas con extracto seco estandarizado
Formulaciones para uso vaginal
Formulaciones para uso dental
Fin en abril de 2008
Línea de Cosméticos y cosmecéuticos
Formulaciones con propóleos
Formulaciones para uso vaginal
Propóleo enjuague bucal
Solucion irrigatória en biobulbopulpectomia
Cemento de Recuperación
Gel vaginal con propoleoEnsayo clínico
multicentro
Registro de patente
Ensayo clínico preliminar
Producion industrial
Farmacovigiância
Gel crema para la mastitis bovina
Nuevos proyectosInvestigación científica con
propóleos brasileños
Cápsulas con extracto seco estandarizado
Formulaciones para uso dental
Cápsulas con extracto seco estandarizado
Produção industrial
Farmacovigiância
Extractos especiales de propóleos
Nuevos proyectosInvestigación científica con
propóleos brasileños
Las formulaciones para uso dental
Nuevos proyectosInvestigación científica con
propóleos brasileños
Prospección, calificación y validación de proveedores
Recogida y estandarización de los propóleos y sus fracciones (tipificación)
Caracterización química de los propóleos
Ensayos Farmacéuticos y Biológicos
Farmacotécnicos Farmacológicos
Plan de negocio
Desarrollo de Formulación
Controle de qualidade
Farmacologia y eficácia
Ensaio clínico
Competitividad
Viabilidad
Forma farmacéutica
Embalagem
Bula
Farmacotécnico
Fisico-quimico
Quimico
In vivo
In vitro
Ex vivo
Em SC
Em SP
HPLC/FIT-CG/Fluido
supercrítico
Necessidad
Registro de PATENTESEnjuague bucal a base
del propóleo
Validación de los procesos químicos
Lote de producción piloto
Validación de los procesos
POPs de producción
Dossier del producto al informe final
Nos USA
Nuevos proyectos
Ensayos Biológicos
Los ensayos biológicos permiten la definición de la calidad de la formulación de control, el producto, para ensayos de eficacia y validación del producto clínico.
Farmacotecnico
Responsabilidad
1. Equipe Assessora Administrativa (3 meses)2. Equipe do Laboratório da UFSC: Prof. Amarilis Scremin (2 meses)3. Equipe de produção da TDV e Prof. Amarilis Scremin (2 meses)4. Equipe da Garantia da qualidade, Prof. Amarilis Scremin e Equipe assessora
da UNIAN: Maria Cristina Marcucci. (1 mes)
Tiempo de ejecución 8 meses
1. Plan de negocios
Competitividad
Viabilidad
Necessidad
2. Adecuacion de la formulación
Forma farmacêutica
Embalagem
Bula
3. Lote de producción piloto
Validación de los procesos
POPs de Producción
4. Control de calidad
Farmacotecnico
Fisicoquimico
Quimico
Patentes Enjuague bucal
de la base de propóleo
Fase 1 Fase 3Fase 2Licencias
Nuevos proyectos
Propolis Natural Solution
Bioseguridad La higiene bucal línea profesional
Alcohol Gel-propóleos
Alcohol 70GL-propóleos
jabón antiséptico
Adultos y Niños
Enjuague bucal
Pasta de dientes
Hilo dental
Enjuague bucal
Reveladora de placa
Carpeta para rellenosZn-propóleos
Solución para riego el canal
muy corto plazo A corto plazo A medio plazo
Pro-up –saneante de superficie
Nuevos proyectos
Productos
Enjuague bucal propóleos, pasta de dientes y solución oral para la halitosis
Composición química de los propóleos
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 130
4
8
12
6080
100 1 Ácido cumárico2 Rutina3 Pinobanksina4 Quercetina5 Kaempferol6 Apigenina7 Pinocembrina8 Pinobanksina-3-acetate9 Crisina10 Galangina11 Kaempferideo12 Tectocrisina13 Artepillin C
Con
teúd
o (m
g/g)
Figura 1: La composición química del extracto estandarizado de propóleos utilizados en el enjuague bucal se determinó por cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) utilizando un dispositivo de Merck-Hitachi (Alemania) provisto de una bomba (L-7100 modelo Merck-Hitachi) y un detector de diodos (Modelo L-7455 Merck-Hitachi). La separación se consiguió con una columna Lichrochart 125-4 (Merck, Darmstadt, Alemania) como se describe previamente (Marcucci et al.). La detección de los componentes se monitorizó a 280 nm y los patrones cromatográficos fueron co-cromatografía con el extracto. Los análisis se realizaron en un Merck-Hitachi D-7000 (Data Station Cromatografía - DAD Manager).
Índice de placa
0
50
100
150 ClorexidinaPrópolis
0 5 10 0 5 10
Tempo (dias)
1515
** *
**
*#
Índi
ce d
e pl
aca
(%)
Figura 2: Evaluación del efecto de los enjuagues bucales que contienen clorhexidina (columna hueca) o propolis (columna negro) sobre la relación de las placas de más de 15 días de tratamiento evaluó cada 5 días. Los puntos representan la media de tres lecturas consecutivas para cada individuo con un n = 10 pacientes por grupo, evaluados en cada intervalo de tiempo al principio, y cada cinco días. * Representa un valor estadísticamente significativo de p <0,05 (ANOVA seguido de la prueba t de Student, analizados mediante el programa Graph Pad Instat) en comparación con el inicio del tratamiento y # es una diferencia estadística entre los tratamientos con enjuagues bucales que contengan clorhexidina y propóleo en 15 días.
50%
82%
30%46% 40%
62%
Índice de Sangrado
0
50
100
150 ClorexidinaPrópolis
0 5 10 0 5 10
Tempo (dias)
1515
**
**
* *
#
Índi
ce d
e sa
ngra
men
to (%
)
Figura 3: Evaluación del efecto de los enjuagues bucales que contengan clorhexidina (columna hueca) o el propóleo (columna negro) del índice de sangrado gingival más de 15 días de tratamiento evaluado cada 5 días. Los puntos representan la media de tres lecturas consecutivas para cada individuo con un n = 10 pacientes por grupo, evaluados en cada intervalo de tiempo al principio, y cada cinco días. * Representa un valor estadísticamente significativo de p <0,05 (ANOVA seguido de la prueba t de Student, analizados mediante el programa Graph Pad Instat) en comparación con el inicio del tratamiento y # es una diferencia estadística entre los tratamientos con enjuagues bucales que contengan clorhexidina y propóleo en 15 días.
18%
36%40%
56% 58%64%
Propolis Natural Solution
Bioseguridad La higiene bucal línea profesional
Alcohol Gel-propóleos
Alcohol 70GL-propóleos
jabón antiséptico
Adultos y Niños
Enjuague bucal
Pasta de dientes
Hilo dental
Enjuague bucal
Reveladora de placa
Carpeta para rellenosZn-propóleos
Solución para riego el canal
muy corto plazo A corto plazo A medio plazo
Pro-up –saneante de superficie
Nuevos proyectos
Pasta de dientes que contiene extracto de propóleo marrón (P1) o extracto de propóleo
verde (G1)
Preparación de extractos
Brasilia(DF)
Am azonas
Roraima
Região NorteRegião NordesteRegião Centro-OesteRegião SudesteRegião Sul
BRP
BRG
---------------------------------------------
------------------------------------------------ BRP/BRPG
Minas GeraisPharma Nectar Apitherapy Pharmacy Beekeeping Ltda – Belo Horizonte
Santa CatarinaEmpresa Apis Nativa Produtos Naturais - Araranguá
Pasta de dientes que contiene extracto de propóleo marrón (P1) o extracto de propóleo
verde (G1)
Las estructuras químicas y la concentración (en mg / ml de extracto crudo) de los principales compuestos identificados en la muestra analizada de los
propóleos marrones (P1) de Brasil.
OH
O
OH OH
O
OH
O
OHO
O
OHOOH
OH
CH
CH OH
O
OH
OHO
H
OMe
H
Ácido 3-prenil-4-hidroxicinâmico (17,90)
Ácido 2,2-dimetil-6-carboxietenil-2H-1-benzopirano (18,26)
Ácido 3,5-diprenil-4-Hidroxicinâmico (26,21)
Ácido 2,2-dimetil-6-carboxietenil-8-prenil-2H-1-benzopirano (11,01)
Ácido gentísico (1,94) Ácido caféico (2,06)
Pasta de dientes que contiene extracto de propóleo marrón (P1) o extracto de propóleo
verde (G1)
Las estructuras químicas y la concentración (en mg / g de extracto crudo) de los principales compuestos identificados en la muestra analizada de propolis
(G1) de Brasil.
OH
O
OH OH
O
OHOH
OH
COOH
O
O
OH
OH
OH
H
OH
COOH
OH
COOH
MeO
Ácido 3-Prenil-4-hidroxicinâmico (6,23)
Ácido 3,5-Diprenil-4-hidroxicinâmico (28,69)
Ácido caféico (1,97)
Pinobanksin (35,63) Ácido p-cumárico (15,30) Ácido ferúlico (6,51)
Pasta de dientes que contiene extracto de propóleo marrón (P1) o extracto de propóleo
verde (G1)
La investigación científica con propóleos brasileños
Formulacion para uso vaginal
Farmacovigiância
Nuevos proyectos
ProductoGEL VAGINAL CON PROPOLEO BRGContiene extracto de propóleos brasileños tipificado BRG de Baccharis dracunculifolia L. para usar con los adultos.
Propóleo de Baccharis se produce en sólo el 3% del territorio brasileño y es la forma más activa de la presentación de propóleos en el mundo. La muestra ha sido estandarizada con 13 marcadores identificados y cuantificados.
Figura 1: La composición química del propóleo ha sido determinada por cromatografía líquida de alta resolución utilizando equipos Merck-Hitachi (Alemania), equipado con una (L-7100 modelo, Merck-Hitachi) bomba y un detector de diodos (modelo L-7455 Merck-Hitachi). La separación se logró en la columna de la Lichrochart 125-4 (Merck, Darmstadt, Alemania) se ha descrito previamente (Kun Prof. Yong Park, PhD). La detección de los componentes se monitorizó a 280 nm y compuestos estándar co cromatografió-Were con el extracto. Fecha. El análisis se realizó en un Merck-Hitachi D-7000 (Data Station Cromatografía - DAD Manager)
ProductoCOMPOSICIÓNCada 4 g Gel Vaginal BRG (Própolis Extracto tipificado) gel contiene concentración equivalente a 20 mg de resina de propóleos tipificadas BRG, obtenido de Baccharis dracunculifolia L.
PRESENTACIÓNGel Vaginal BRG se presenta en tubos de 60 g (aplicador acompañados).
PROPOCLEAN: Eficaz, seguro y natural!!!
Resultados
Initial 1a. col. 2a. col0
200
400
600
After propolis gel (5%)
**
Neut
roph
ils (n
./fie
ld)
Initial 1a. col. 2a. col0
40
80
120
160
200
After propolis gel (5%)
*****
Neut
roph
ils (n
./fie
ld)
Cul-de-sac Endocervix
Características físico-químicas y químicas de los productos de las
colmenas
Parte 2:
Preparación de los extractos1. 30 g de la resina crudo molido se extrajo con 100 ml de metanol PA. 2. En mesa de agitación (agitador) durante 24 horas3. Filtró y se concentró en rotaevaporator para completar la eliminación de metanol (MeOH).4. Resultando en el extracto de metanol seco (EMP). 5. Una parte alícuota de 5 ml es secado en horno para realizar el cálculo del porcentaje del extracto en solución. 6. Por lo tanto, el extracto de etanol de propóleos (EEP) obtenido será evaluado por su concentración en porcentaje (peso / volumen).
30g
100 mL de metanol - etanol
En mesa de agitación (Shaker) por 24 horas
se concentró en rotaevaporador
5ml secó en un horno
para realizar el cálculo del porcentaje
del extracto en solución
+
Análisis de propóleos y fracciones por HPLC La composición química de las muestras de propóleos se evalúa por HPLC
(cromatógrafo de LaChrom, D-7000 modelo) empleando una columna de fase inversa C18 y un gradiente lineal (caudal 1 ml / min) compuesto de metanol y agua acidificada
con 5 ácido fórmico%. Se utilizará una red de diodos detectores en la detección de picos. El programa TIP fue utilizado en la cuantificación y clasificación de los resultados.
Cada una de las fracciones y compuestos aislados serán supervisados por HPLC en las mismas condiciones.
Profa. Maria Cristina Marcucci
Propóleo de Baccharis dracunculifolia
Las abejas recogen de Baccharis dracunculifolia una resina verde.
Los apicultores en la operación para recoger propóleos de Baccharis
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Tipos de propóleos brasileño
Muestras de propóleos recolectados en RS (A), SC (B), PR (C) y MG (D).
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50Retention Time (min)
0.0
0.5
1.0
1.5
Absorb
ance (
AU)
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50Retention Time (min)
0.00.20.40.60.81.01.2
Absorb
ance (
AU)
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50Retention Time (min)
0.00.20.40.60.81.01.2
Absorb
ance (
AU)
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50Retention Time (min)
0.00.51.01.52.02.5
Abso
rban
ce (AU
)
A
DC
B
MG
RS SC
PR
La composición química del propóleo varía de región a región.
55% de resinas y bálsamos30% de ceras,10% de póleny metabolitos secundarios incluyendo: Los ácidos grasos, ácidos fenólicos y sus ésteres, flavonoides (flavonas, flavononas, chalconas, etc.), terpenos, esteroides, b-aldehídos aromáticos y alcoholes, sesquiterpeno, naftaleno y derivados de estilbeno.
Química de los propóleos
La composición química de Baccharis dracunculifolia de Premium brasileña Propolis se determinó por alto rendimiento cromatografía líquida utilizando un aparato Merck-Hitachi (Alemania), equipado con una bomba (L-7100 modelo, Merck-Hitachi) y un detector de matriz de diodos (modelo L-7455 Merck-Hitachi). compuestos fenólicos (mg / g) (1) de ácido cumárico (3.81), (2) la rutina (9.87), (3) pinobanksina (3.48), (4) la quercetina (2.15), (5) kaempferol (0.78), (6 ) apigenina (1.86), (7) pinocembrina (22:55), (8) pinobanksina-3-acetato (4.10), (9) crisina (02:49), (10) galangin (04:14), (11) kaempferide (05:59) (12) tectochrysin (2.90), (13) ARTEPILLIN C (87,97).
Propóleo de Baccharis
Peak Name Retention time Content (mg/g)1 Coumaric acid 8.176 3.812 Rutin 14.058 9.873 Pinobanksin 21.209 3.484 Quercetin 25.598 2.155 Kaempferol 31.946 0.786 Apigenin 32.611 1.867 Pinocembrin 38.083 22.558 Pinobanksin-3-
acetate40.200 4.10
9 Chrysin 41.792 2.4910 Galangin 46.789 4.1411 Kaempferide 52.137 5.5912 Tectochrysin 67.054 2.9013 Artepillin C 72.599 87.97Chemical markers in Propolis from Baccharis dracunculifolia
Propóleo de Baccharis
Algunos compuestos
coumaric acid apigenine chrysin
galangin kaempferol quercetin
rutin
O
O HHO 3-Prenyl 4-hydroxycinnamic acid
O
O
OH
2,2-Dimethy-6-carboxyetenil-2H-1-benzopiran
Prenilados y Artepillin C
OH
O
O
2,2-Dimethyl-6-carboxyetenil-8-prenyl-2H-1-benzopiran
Artepillin C®
3,5-Diprenyl-4-hydroxycinnamic acid
HO OH
O
Prenilados y Artepillin C
Actividades farmacológicas de propóleos y potencial terapéutico
Parte 3:
Las actividades biológicas
Propóleo
Antiviral Antimicrobiano
Fungicida Anti protozoário
AnticárieIkeno et al., 1991Steinberg et al., 1996Botushanov et al., 2004Bueno-Silva et al., 2013
Hayacibara et al., 2005
Leitão et al., 2004
Imunomodulatório
AntiinflamatóriaAntioxidante
HepatoprotetorMerino et al., 1996Basnet et al., 1996Lin et al., 1997Banskota et al., 2001El-Khatib et al., 2002Seo et al., 2003Shukla et al., 2004Liu et al., 2004
Antihiperalgésico
Las actividades biológicas
Propóleo
Própolis
ANTITUMORAL
Las actividades biológicas
Biological Therapy using Propolis as Nutritional Supplement in Cancer
Treatment
Galvao, J.; Lemos, S.R.; Abreu, J.A.; Cruz, T.; Machado, G.A.S.; Daugsch, A.; Moraes, C.S.;
Fort, P.; Park, Y.K. Paulino, N.
International Journal of Cancer Research
Publicaciones del grupo sobre el propóleo
Mecanismos farmacológicos de acción antitumoral de propóleos y sus
constituyentes
APAF1Cyt C
Caspase 9
Smac
AIF
Cell cycleG1 - S
Caspase 3
Mit
External stimulus
Nucleusfragmentation
DNA
La inducción de la apoptosis en células tumorales
BAX/BAK
Estímulos repetitivos, persistentes, inducen la respuesta celular.
Después de la estimulación de la célula produce proteínas pro-apoptóticas: BAX / BAK, que actúan en la mitocondria
La mitocondria, fuente de energía en la célula, libera tres proteínas principales
Smac proteína Diablo modula la respuesta apoptótica
El citocromo C se une rápidamente a las proteínas APAF1 formando un complejo que activa la caspasa 9
Proteína AIF que actúa como un factor de transcripción nuclear pro-apoptótica
La caspasa 9 proteína función proteasa apoptótica que activa la caspasa 3
Ciclo de crecimiento y diferenciación celular. Definido por la etapa de la evolución de la célula.
Caspasa 3, una proteasa extremadamente potente, inhibe la diferenciación de las células G1-S
La caspasa inducida por la fragmentación del ADN 3 promueve desmontar celular programada
Por otra parte, la caspasa 3 se transloca al núcleo y promueve el daño del ADN.
Cyt C Redutase
Citocromo C reductasa inhibe la formación de complejos Cyt C + APAF1
APAF1Cyt C
Caspase 9
Smac
AIF
Caspase 3
Mit
External stimulus
Nucleusfragmentation
DNA
BAX/BAK
Cyt C Redutase
Green Propolis Artepillin C
Kimoto T, Arai S, Aga M, Hanaya T, Kohguchi M, Nomura Y, Kurimoto M. Cell cycle and apoptosis in cancer induced by the artepillin C extracted from Brazilian propolis. Gan To Kagaku Ryoho. 1996 Nov;23(13):1855-9
Kimoto T, Arai S, Kohguchi M, Aga M, Nomura Y, Micallef MJ, Kurimoto M, Mito K. Apoptosis and suppression of tumor growth by artepillin C extracted from Brazilian propolis. Cancer Detect Prev. 1998;22(6):506-15
Lee YJ, Kuo HC, Chu CY, Wang CJ, Lin WC, Tseng TH. Involvement of tumor suppressor protein p53 and p38 MAPK in caffeic acid phenethyl ester-induced apoptosis of C6 glioma cells. BiochBiochem Pharmacol. 2003 Dec 15;66(12):2281-9
CAPE
Akao Y, Maruyama H, Matsumoto K, Ohguchi K, Nishizawa K, Sakamoto T, Araki Y, Mishima S, Nozawa Y. Cell growth inhibitory effect of cinnamic acid derivatives from propolis on human tumor cell lines. Biol Pharm Bull. 2003 Jul;26(7):1057-9
Chen CN, Wu CL, Lin JK. Propolin C from propolis induces apoptosis through activating caspases, Bid and cytochrome c release in human melanoma cells. Biochem Pharmacol. 2004 Jan 1;67(1):53-66
Propolin C
Woo KJ, Jeong YJ, Park JW, Kwon TK. Chrysin-induced apoptosis is mediated through caspase activation and Akt inactivation in U937 leukemia cells. Biochem Biophys Res Commun. 2004 Dec 24;325(4):1215-22
CrisinaBacharin, Drupanin eArtepillin C
Scheller S, Krol W, Swiacik J, Owczarek S, Gabrys J, Shani J. Antitumoral property of ethanolic extract of propolis in mice-bearing Ehrlich carcinoma, as compared to bleomycin. Z Naturforsch [C]. 1989 Nov-Dec;44(11-12):1063-5.
Green Propolis
Kimoto T, Koya S, Hino K, Yamamoto Y, Nomura Y, Micallef MJ, Hanaya T, Arai S, Ikeda M, Kurimoto M. Renal carcinogenesis induced by ferric nitrilotriacetate in mice, and protection from it by Brazilian propolis and artepillin C. Pathol Int. 2000 Sep;50(9):679-89
Kimoto T, Koya-Miyata S, Hino K, Micallef MJ, Hanaya T, Arai S, Ikeda M, Kurimoto M. Pulmonary carcinogenesis induced by ferric nitrilotriacetate in mice and protection from it by Brazilian propolis and artepillin C. Virchows Arch. 2001 Mar;438(3):259-70
El propóleos induce apoptosis en células tumorales
A fragmentação do DNA induzido pela caspase 3 promove o desmonte programado da célula
Cell cycleG1 - S
NucleusDAMAGE
DNA
La radiación ionizante, ultravioleta, quimioterapia, Hiperoxia
External stimulus
p53Antiapoptoticp21
Ciclyn B1
Cdk1, 2, 4 e 6
Inhibit topoisomerase II
Inhibit DNA-Polymerase
Proto-oncogene CAAT
Proto-oncogene Myc
Proto-oncogene STAT3
Inhibit NFB
En respuesta a las células que expresan p53.
Esto promueve la transcripción de p21
P21 reprime a expressão e/ou a atividade de proteinas que atuam sobre o ciclo celular
El retraso en la maduración de las células tumorales
Regulación de la diferenciación celular en células tumorales
Crisin
CAPE
Artepillin C
Compostos promovem a expressão da p21
p38
Cell cycleG1 - S
NucleusDAMAGE
DNA
External stimulus
p53Antiapoptoticp21
Ciclyn B1
Cdk1, 2, 4 e 6
Inhibit topoisomerase II
Inhibit DNA-Polymerase
Proto-oncogene CAAT
Proto-oncogene Myc
Proto-oncogene STAT3
Inhibit NFB
Crisin
CAPE
Artepillin C
p38
Weng MS, Ho YS, Lin JK. Chrysin induces G1 phase cell cycle arrest in C6 glioma cells through inducing p21Waf1/Cip1 expression: involvement of p38 mitogen-activated protein kinase. Biochem Pharmacol. 2005 Jun 15;69(12):1815-27
Kuo HC, Kuo WH, Lee YJ, Lin WL, Chou FP, Tseng TH. Inhibitory effect of caffeic acid phenethyl ester on the growth of C6 glioma cells in vitro and in vivo. Cancer Lett. 2006 Mar 28;234(2):199-208
Shimizu K, Das SK, Hashimoto T, Sowa Y, Yoshida T, Sakai T, Matsuura Y, Kanazawa K. Artepillin C in Brazilian propolis induces G(0)/G(1) arrest via stimulation of Cip1/p21 expression in human colon cancer cells. Mol Carcinog. 2005 Dec;44(4):293-9
Regulación de la diferenciación celular en células tumorales
Reducción de la inflamación y la angiogénesis
EstímulosTLR
Myd-88 IRAK
TRAF6
NIK
p50 p65
p50 p65
IKKIKK
IB
TNF-
iNOS
COX-2
IL-12 Inflammation
NO
PG
IL1
Vasorelaxation Nutrition to cancer
Induction of VGEF Neoangiogenese
TumorInduction of MMP
Metastasis
Reducción de la inflamación y la angiogénesis asociada a tumoresQuimioterápicos, LPS
Activación de los receptores tipo TLR
Esto inicia una cascada de fosforilación
Activación de la quinasa IkappaB
Fosforilación de lo inhibidor del NFkB
Liberación del Factor de Transcripción Nuclear NFkB
Translocación nuclear a la activación de la expresión génica
La expresión de numerosos genes proinflamatorios
Expresión de genes de citoquinas IL1, 12 y TNF-
La ciclooxigenasa 2 expresión génica
Aumento de la producción de PGE2, PGF2...
Inflamación: aumento de la permeabilidad vascular, vasodilatación, la migración celular, etc ...
Las condiciones ideales para el crecimiento y metástasis del tumor
EstímulosTLR
Myd-88 IRAK
TRAF6
NIKIKK
IKK
IBp50 p65
p50 p65 TNF-
iNOS
COX-2
IL-12 Inflammation
NO
PG
IL1
Vasorelaxation Nutrition to cancer
Induction of VGEF Neoangiogenese
TumorInduction of MMP
Metastasis
El propóleos reduce la inflamación y la angiogénesis
Liao HF, Chen YY, Liu JJ, Hsu ML, Shieh HJ, Liao HJ, Shieh CJ, Shiao MS, Chen YJ. Inhibitory effect of caffeic acid phenethyl ester on angiogenesis, tumor invasion, and metastasis. J Agric Food Chem. 2003 Dec 31;51(27):7907-12
Hwang HJ, Park HJ, Chung HJ, Min HY, Park EJ, Hong JY, Lee SK. Inhibitory effects of caffeic acid phenethyl ester on cancer cell metastasis mediated by the down-regulation of matrix metalloproteinase expression in human HT1080 fibrosarcoma cells. J Nutr Biochem. 2006 May;17(5):356-62.
Abdel-Latif MM, Windle HJ, Homasany BS, Sabra K, Kelleher D. Caffeic acid phenethyl ester modulates Helicobacter pylori-induced nuclear factor-kappa B and activator protein-1 expression in gastric epithelial cells. Br J Pharmacol. 2005 Dec;146(8):1139-47
Paulino N, Teixeira C, Martins R, Scremin A, Dirsch VM, Vollmar AM, Abreu SR, de Castro SL, Marcucci MC. Evaluation of the Analgesic and Anti-Inflammatory Effects of a Brazilian Green Propolis. Planta Med. 2006 Aug 10;
Paulino N, Teixeira C, Martins R, Scremin A, Dirsch VM, Vollmar AM, Abreu SR, de Castro SL, Marcucci MC. Evaluation of the Analgesic and Anti-Inflammatory Effects of a Brazilian Green Propolis. Planta Med. 2006 Aug 10;
Conclusión: el propóleo es antiinflamatorio, reduce la producción de óxido nítrico y reduce la actividad de NF-kappa B (NFB: p50-p65).
Epiderm EpidermOERITEMA
Inflammatory mediator
PGE2
O2-
MigraçãoVaso
Macrophage PMN
ROS
Apoptose or Necrose
PGsAACOX
OEDEMA
NOCytokines PGE2
G1
Linfocyte
Carrageina
Inflammation
G1
G1
G1
G1 G1
Paulino N, Teixeira C, Martins R, Scremin A, Dirsch VM, Vollmar AM, Abreu SR, de Castro SL, Marcucci MC. Evaluation of the Analgesic and Anti-Inflammatory Effects of a Brazilian Green Propolis. Planta Med. 2006 Aug 10.
Este efecto fue mediado por la inhibición de NFB
Mecanismos farmacológicos inmunomoduladores de acción del
propóleo o sus constituyentes
Carcinogenicstimulus
Rac2 Cdc42GTP
Rac2 Cdc42GDP
P
+
MKK3MKK6p38
ELK-1MEF2C ATF2
TLR
Myd-88 IRAK
TRAF6
NIKIKK
IKK
IBp50 p65
p50 p65 TNF-
IL-1
iNOS
COX-2
IL-12 Th1
CD8+ CD4+
B cell
Cellular immunity
Inflammation
NO
PG
Carcinogenicstimulus
External mitogenic stimulus
Activation of proteins: Ras (GTPase)
Prenylation pos-translational
Activation of proteins kinase activated by mitogen
Activation of p38-MAPK
Green Propolis
Activation of immunological modulating factor
Increase the cell immunity
Green Propolis
Green Propolis
La regulación del sistema inmune en los linfocitos T
Carcinogenicstimulus
Rac2 Cdc42GTP
Rac2 Cdc42GDP
P
+
MKK3MKK6p38
ELK-1MEF2C ATF2
TLR
Myd-88 IRAK
TRAF6
NIKIKK
IKK
IBp50 p65
p50 p65 TNF-
IL-1
iNOS
COX-2
IL-12 Th1
CD8+ CD4+
B cell
Cellular immunity
Inflammation
NO
PG
Carcinogenicstimulus
Green Propolis
Green Propolis
Green Propolis
Kimoto T, Arai S, Kohguchi M, Aga M, Nomura Y, Micallef MJ, Kurimoto M, Mito K. Apoptosis and suppression of tumor growth by artepillin C extracted from Brazilian propolis. Cancer Detect Prev. 1998;22(6):506-15
Paulino N, Teixeira C, Martins R, Scremin A, Dirsch VM, Vollmar AM, Abreu SR, de Castro SL, Marcucci MC. Evaluation of the Analgesic and Anti-Inflammatory Effects of a Brazilian Green Propolis. Planta Med. 2006 Aug 10;
Paulino N, Teixeira C, Martins R, Scremin A, Dirsch VM, Vollmar AM, Abreu SR, de Castro SL, Marcucci MC. Evaluation of the Analgesic and Anti-Inflammatory Effects of a Brazilian Green Propolis. Planta Med. 2006 Aug 10;
Paulino N, et al., umpublished results
La regulación del sistema inmune en los linfocitos T
El propóleo contra el estrés oxidativo
Green Propolis
Green Propolis
Green Propolis
Los propóleos regulan la respuesta antioxidante
La actividad antioxidante de propóleosInhibición de la oxidación directa inducida por los radicales libres:
Reducción de la peroxidación lipídica
El aumento de expresión de SOD, CAT y GSHpx
Aumento oxidorreductasa NAPHquinona
La inhibición de la xantina oxidasa y secuestro de O2- y alcoxilo.
Actividades farmacológicas de veneno de abeja y el potencial
terapéutico
Parte 4:
Proyecto de investigación aplicada
PROYECTO PARA EL DESARROLLO DE LOS PRODUCTOS QUE CONTIENEN APITOXINA NORMALIZADO
Tema: Desarrollo de las innovaciones en los productos biológicos para la aplicación anti-inflamatoria que utilizan el veneno de abeja y
fracciones
Coordenadores: Prof. Dr. Niraldo Paulino; Prof. Dr. Geferson Fischer Área de Concentração: Farmacologia/Imunologia
São Paulo (Brasil), Janeiro de 2013
Patente internacional para la apitoxina
Composición química del veneno de abeja y sus Actividades
El veneno de las abejas, o el veneno de abeja, es la forma química en la defensa contra los depredadores de las abejas o la invasión de su territorio.
Cuatro componentes se destacan en la composición del veneno de abeja:
Dos péptidos de bajo peso molecular, melitina, aproximadamente 50% en peso seco; apamina a aproximadamente 3% en peso seco.
La melitina es una sustancia de acción anti-inflamatoria y es considerado el principal agente de veneno de abeja.
Junto con Apamina, melitina estimula el sistema adrenal y pituitaria para producir cortisol natural y otros esteroides, que desempeñan un papel importante en la terapia y no producen complicaciones médicas asociadas con esteroides sintéticos.
UNIAN – UFPel - MEDLEXProyecto de desarrollo de productos estandarizados que contienen veneno de abejaTema: desarrollo de la innovación en productos biológicos para la aplicación anti-inflamatorio, con
veneno de abeja y fracciones
FARMACOLOGIA Y MECANISMO DE ACCIÓN APAMINA
APAMINA
El bloqueo de los canales de potasio
Estimula la corteza del
adrenal
Aumenta la secreción de
CRH
La liberación de ACTH
La despolarización y la activación del
hipotálamo
Liberación corticosteroide
Estimulación del SNC
aumento de la gluconeogénesis
Lipolise Catabolismo muscular
Efectos Pressorios
Liberación catecolaminas
UNIAN – UFPel - MEDLEXProyecto de desarrollo de productos estandarizados que contienen veneno de abejaTema: desarrollo de la innovación en productos biológicos para la aplicación anti-inflamatorio, con
veneno de abeja y fracciones
Efectos Antiinflamatorios
COMPONENTES Massa molecular %(veneno seco) Referências
PEPTÍDEOS Melitina 2,840 40-50 Neumann et al., 1952Apamina 2,036 2-3 Habermann et al., 1965
Peptídeo MCD 401 2,588 2-3 Fredholm, 1966Adolapina 11,500 1.0 Shkenderov, 1982
Inibidor de protease 9,000 < 0.8 Shkenderov, 1973Secarpina 0.5 Gauldie et al, 1976Tertiapina 0.1 Gauldie et al, 1976Melitina F 0.01 Gauldie et al, 1976
Procamina A, B 1.4 Nelson and O’Connor, 1968
Minimine 6,000 2-3 Lowy et al, 1971Cardiopep < 0.7 Vick et al, 1974ENZIMAS
Hialuronidase 38,000 1.5-2.0 Neumann & HabermannFosfolipase A2 19,000 10-12 Habermann & Neumann,
1957Glucosidase 170,000 0.6 Shkenderov et al, 1979
ácido fosfomono-esterase
55,000 1.0 Shkenderov et al, 1979
Lisofosfolipase 22,000 1.0 Ivanova et al, 1982AMINAS ATIVAS
Histamina Dopamina 0.13-1.0 Owen, 1971
Norepinefrina 0.1-0.7 Owen, 1982COMPONENTES NÃO
PEPTÍDEOS
Fosfolipídeo 6 < 2.0 O ’Connor et al, 1967LIPÍDEOS
Carboidratos: Glicose & Frutose
4.5 O ’Connor et al, 1967
AMINOÁCIDOS Ácido r-aminobutírico < 0.5 Nelson & O’Connor,
1968Ácido B-aminoisobutírico < 0.01 Nelson & O’Connor,
1968
Fosfolipasa A (enzima)
Actividad radioprotectora; mastocitolítico; La liberación de histamina; Presionando la presión arterial; Propiedades antigénicas; Este es el más alergénico de veneno
de abeja; Efecto antagonista en staphylococos
alfa-toxina y la toxina del tétanos; Efecto antitumoral; Está presente en la membrana
biológica
Hialuronidasa
Ataque Polímeros selectivamente de ácido hialurónico a los tejidos;
Aumento de la permeabilidad capilar (Neumann y Habermann);
De respuesta y de propagación propiedades inmunes de la tela;
antigénica anafilatogene
Apamina (polipéptido con 18
aminoácidos)
antigénica; propiedades anti-inflamatorias
UNIAN – UFPel - MEDLEXProyecto de desarrollo de productos estandarizados que contienen veneno de abejaTema: desarrollo de la innovación en productos biológicos para la aplicación anti-inflamatorio, con
veneno de abeja y fracciones
Melitina (polipéptido que también se
compone de ácidos 26 aminoácidos que representan el
40-60% de veneno de abeja)
antibacteriano; antifúngico; enfermedad de Lyme contra (en el experimento in
vitro) antitumoral; inhibidor del sistema nervioso central; sinapsis musculares y nerviosas bloqueador
gangliais; contracción del músculo estriado y el músculo liso; La liberación de histamina; mastocitololísico; Radioprotección (irradiaçãoX; estudió en ratones,
Shipman y Cole, 1967); aumento de la permeabilidad vascular; hemólisis; bajar la presión arterial; antiinflamatorio; melitina (que representa el 40-60% de las
sustancias del veneno de abeja) no tiene propiedades antigénicas (Orlov); ? Sin embargo, según Artemov, los enemigos de las abejas adqueriam inmunidad específica;
estimulación de la hipófisis - axi suprarrenal aumenta tanto las catecolaminas y cortisol (Brooks et al.);
aumenta el nivel de cortisol en plasma; Se opera en las membranas biológicas. En la actualidad, este es uno de los más potentes
agentes anti-inflamatorios conocidos, y se puede utilizar para tratar la artritis y el reumatismo.
Péptido desgranulador del mastócitos
En algunos estudios con animales, en estudios comparativos con hidrocortisona, este péptido era 100 veces más potente, mientras que un agente anti-inflamatorio; la artritis inducida por adyuvante. (Simics p 13)
Cardiopep
aumento tanto en la fuerza contráctil (beta-adrenérgico) y la frecuencia cardíaca con poco o ningún efecto sobre la circulación coronaria (Brooks et al.); propiedades anti-arrítimicas (Brooks et al.); estimulación pituitaria - la axi suprarrenal aumenta tanto las catecolaminas y cortisol (Brooks et al.)
Adolapina analgésico (Shkenderov, 1982); antiinflamatório (Shkenderov,
1982)
UNIAN – UFPel - MEDLEXProyecto de desarrollo de productos estandarizados que contienen veneno de abejaTema: desarrollo de la innovación en productos biológicos para la aplicación anti-inflamatorio, con
veneno de abeja y fracciones
Prospección, calificación y validación de proveedores
Recogida y estandarización de veneno de abeja y sus fracciones (tipificación)
Caracterización química del veneno de abeja
Las pruebas químicas para la identificación, purificación y cristalización de proteínas en el veneno de abeja
Normalización
Separación y purificación de proteínas
Registro de PATENTES
UNIAN – UFPel - MEDLEXProyecto de desarrollo de productos estandarizados que contienen veneno de abejaTema: desarrollo de la innovación en productos biológicos para la aplicación anti-inflamatorio, con
veneno de abeja y fracciones
La validación de los procesos químicos
Cristalización
Recogida y estandarización de veneno de abeja y sus fracciones
Se obtiene de proveedores y socios auditados en este
proyectoInspección de la información técnica sobre el producto:1. Nombre del producto:2. Aplicación3. Empleo4. Almacenamiento5. Nombre químico6. uso de Concentración7. Características físicas y químicas8. Información adicionalObservación9. Lote
El proceso de obtención, purificación, la normalización de las fracciones del veneno de abejas y cristalización de proteínas proporciona una evaluación de la calidad de activos y garantiza la
reproducibilidad de los procesos de producción y producto terapéutico.
Obtención de la Apitoxina Normalización del veneno de abeja y fracciones
LEC - IACT
Certificación de informes analíticos
Responsabilidad 1. Equipe de gestão de processos e de fornecedores da MEDLEX2. Equipe técnica assessora do LEC - IACT
Tiempo de ejecución 6 meses
Obtención de fracciones del veneno de abeja
Las fracciones activas obtenidas por socio
tecnológico de la LEC (España)
UNIAN – UFPel - MEDLEXProyecto de desarrollo de productos estandarizados que contienen veneno de abejaTema: desarrollo de la innovación en productos biológicos para la aplicación anti-inflamatorio, con
veneno de abeja y fracciones
Recogida y estandarización de veneno de abeja y sus fracciones
El proceso de obtención, purificación, la normalización de las fracciones del veneno de abejas y cristalización de proteínas proporciona una evaluación de la calidad de activos y garantiza la
reproducibilidad de los procesos de producción y producto terapéutico.
Obtención de la Apitoxina
UNIAN – UFPel - MEDLEXProyecto de desarrollo de productos estandarizados que contienen veneno de abejaTema: desarrollo de la innovación en productos biológicos para la aplicación anti-inflamatorio, con
veneno de abeja y fracciones
UNIAN – UFPel - MEDLEXProyecto de desarrollo de productos estandarizados que contienen veneno de abejaTema: desarrollo de la innovación en productos biológicos para la aplicación anti-inflamatorio, con
veneno de abeja y fracciones
1. Aumento de la productividad de 1.000% en comparación con los equipos y las prácticas en Brasil y en el mundo.2. Aumentar la calidad de veneno de abeja.3. Menos desgaste durante el proceso de recolección, tanto para el apicultor, así como las abejas.
INFORMACIÓN SOBRE EL EQUIPO:- 10 grandes placas colectoras equivalentes a 40 placas de conocidos en el mercado.- 20 porta objetos de vidrio.- 01 balanza de precisión digital.- 01 raspador apitoxina de porta objetos de vidrio.- 01 tamiz.- 01 caja de envío para el kit de recogida + 01 caja interior que mantiene la mayoría de las 40 hojas adicionales- 01 sistema de impulsos (instalado dentro de la caja de envío).- Sistema de 01 que detecta y pitidos cortos.- Sistema de secado 01 para más apitoxina las cuchillas.
Colector inteligente del veneno
Recogida y estandarización de veneno de abeja y sus fracciones
El proceso de obtención, purificación, la normalización de las fracciones del veneno de abejas y cristalización de proteínas proporciona una evaluación de la calidad de activos y garantiza la
reproducibilidad de los procesos de producción y producto terapéutico.
Obtención de la Apitoxina
Laboratorio de Estudios Cristalográficos LEC Iact, Csic,ugr, Av. de las Palmeras 4, 18100 Armilla, Granada, Espanha Telefone:+34 958 18 16 43
UNIAN – UFPel - MEDLEXProyecto de desarrollo de productos estandarizados que contienen veneno de abejaTema: desarrollo de la innovación en productos biológicos para la aplicación anti-inflamatorio, con
veneno de abeja y fracciones
Recogida y estandarización de veneno de abeja y sus fracciones
El proceso de obtención, purificación, la normalización de las fracciones del veneno de abejas y cristalización de proteínas proporciona una evaluación de la calidad de activos y garantiza la
reproducibilidad de los procesos de producción y producto terapéutico.
Ensayos Biológicos
Los ensayos biológicos permiten la definición de la calidad de la formulación de control, el producto, para ensayos de eficacia y validación de producto clínico.
Farmacoténico
Responsabilidad1. Equipe Administrativa e de marketing da Industria Parceira2. Equipe do Laboratório da MEDLEX3. Equipe de produção da Industria Parceira e Assessoria MEDLEX4. Equipe da Garantia da qualidade MEDLEX - UNIBAN
Tiempo de ejecución 8 meses
1. Estudio de mercado
Competitividad
Viabilidad
Necessidad
2. Desarrollo de la Formulación
Forma farmacêutica
Embalaje
Bula
3. Lote de producción piloto
Validación de los procesos
POPs de la productón
4. Control de calidad
Farmacotécnico
Fisico-quimico
Quimico
Nano-emulsión del veneno de
abeja y / o fracciones
UNIAN – UFPel - MEDLEXProyecto de desarrollo de productos estandarizados que contienen veneno de abejaTema: desarrollo de la innovación en productos biológicos para la aplicación anti-inflamatorio, con
veneno de abeja y fracciones
Ensayos Farmacológicos y Imunológicos
Los ensayos biológicos permiten la validación de la eficacia terapéutica del producto e investiga mecanismos de acción. Todas las pruebas deben seguir las Buenas Prácticas de Investigación Científica (BPPC)
Farmacológico
Responsabilidad Equipe técnica da UFPel e pesquisadores associados
2013. 4 meses/ 2014. 8 meses
Ìmunológico
Edema de pata Edema de Orelha
ArtriteDosagens Cultura RAW 264.7
Carragenina
Bradicinina
óleo de cróton
capsaicina
ácido araquidônico
Adjuvante de Freund
Citocinas
Griess p/ NO
MTT p/ viabilidade
Prostagl. E2
Pleurisia
IL 1
Substância P
Dextrana
Carragenina
Substancia P
Bradicinina
Histamina
Rota rod
Análise Macrosc.
PGE2
PGE2
Ativ. COX-2 Ativ.NFkBCOX-2 e iNOS
W.B e RT-PCR
Registro de PATENTESEl análisis estadístico Dossiê do proyeto para relatório final
UNIAN – UFPel - MEDLEXProyecto de desarrollo de productos estandarizados que contienen veneno de abejaTema: desarrollo de la innovación en productos biológicos para la aplicación anti-inflamatorio, con
veneno de abeja y fracciones
Tiempo de ejecución
Ensayos Farmacêuticos e Imunológicos
Farmacológico
Edema de pata
Carragenina
Bradicinina
Prostagl. E2
Substância P
Dextrana
Ratones machos suizos serán utilizados con un peso entre 25 y 30 g proporcionada por las instalaciones de los animales de la Universidad Federal de Santa Catarina. Los animales se mantendrán en la habitación con temperatura controlada (23-25 ° C) en un ciclo de luz-oscuridad de 12 horas con acceso libre al agua y piensos. Todos los experimentos se llevarán a cabo de acuerdo con las normas de manipulación experimental de animales de laboratorio y las reglas para la investigación en animales conscientes (Zimmermman, 1983), aprobado por el Comité de Ética de la UFSC.Apitox - gel (3 dosis de actualidad)La indometacina (10 mg / kg, V.O.) La pata derecha: agente flogisto; Lecturas de el volumen de las patas en los días 15, 30, 60, 120, 240 y 360 min. Grabado de la diferencia entre las patas como el índice de efecto antiedematogenico.
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Ensayos Farmacéuticos e Imunológicos
Farmacológico
Edema de Orelha
óleo de cróton
capsaicina
ácido araquidônico
Ratones machos suizos utilizados se mantendrán bajo las condiciones experimentales descritas anteriormente Apitox - gel (3 dosis de actualidad) La indometacina (10 mg / kg, V.O.) La aplicación tópica de agentes flogísticos en la oreja derecha; Lecturas de el volumen de las orejas en el momento respectivo de 6 horas en animales tratados con aceite de crotón, 30 minutos en los animales tratados con capsaicina y 60 minutos para los animales tratados con ácido araquidónico. Grabada la diferencia entre las orejas como el índice de efecto antiedematogenico.
Modelo Experimental descrito em Prostaglandins,1991;41(5):515-26.Extract and compounds obtained from Mandevilla velutina inhibit arachidonic acid-induced ear oedema in mice, but not rat stomach contraction. Calixto JB, Zanini Júnior JC, Cruz AB, Yunes RA, Medeiros YS.Departmento de Farmacologia (CCB) Universidade Federal de Santa Catarina, Brasil.
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Ensayos Farmacéuticos e Imunológicos
Farmacológico Ìmunológico
Pleurisia
Carragenina
Substancia P
Bradicinina
Histamina
Dosagens
Citocinas
PGE2
COX-2 e iNOS
W.B e RT-PCR
Ratones machos suizos utilizados se mantendrán bajo las condiciones experimentales descritas anteriormente Azul de Evans (i.v.)Apitox - gel (3 dosis de actualidad)La dexametasona (0,5 mg / kg, s.c.) Aplicación intrapleural de agentes flogısticas; Recoger el fluido derramado en la cavidad pleural para evaluar el número total de células para la evaluación de las tasas de extravamento y de separación de plasma para las mediciones bioquímicas: MPO; IL-4, IL-5, CCL11, IFN-γ y LTB4; IL-1β y TNF-α; Ensayo de PGE2 (ELISA) La extirpación quirúrgica de los pulmones para análisis de transferencia Western que evalúa y cuantificación de la expresión de COX-2 y iNOS. “reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR)" en el homogeneizado de pulmón y el lavado pleural para evaluar la expresión de la COX-2 y iNOS mRNA.
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Ensayos Farmacéuticos e Imunológicos
Farmacológico
Artrite
Adjuvante de Freund
Rota rod
Análise Macrosc.
Se utilizará ratas Wistar machos, mantenido bajo las condiciones experimentales recomendados por COBEA. Inyección subcutánea única de adyuvante completo de Freund (50 uL) en conjunto tibiotarsal del pie derecho; Gel Apitox (3 dosis tópicas) 21 días consecutivos una vez al día. Diclofenac sódico (10 mg / kg, po) 21 días consecutivos una vez al día. Lecturas en volumen pies diariamente a las 8 am durante los 21 días consecutivos de tratamiento. Grabado de la diferencia entre las patas como el índice de efecto antiedematogenico. Registro fotográfico de principio macroscópica y al final del experimento.
Pletismômetro LE 7500, serie 6063/02, Letica Scientific Instruments)Rota Rod/RS, LE-8500, serie 1218/06, Letica Scientific Instruments)
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Ensayos Farmacéuticos e Imunológicos
ÌmunológicoCultura RAW
264.7
Griess p/ NO
MTT p/ viabilidade
IL 1
PGE2
Ativ. COX-2
Ativ.NFkB
Se utilizarán Células RAW 264.7 (ATCC, Maryland, EE.UU.), cultivadas en Dulbecco modificado esencial medio con 4 mM de L-glutamina y 4,5 g / l de glucosa (DMEM, Biobras, Campinas, SP, Brasil) suplementado con 10% suero bovino fetal inactivado (Gibco / BRL Life Technologies, Eggenstein, Alemania). Las células se mantuvieron a 37 ° C, 5% de CO2 y se utiliza para experimentos de entre 5 y 20 pasajes en crecimiento confluente y se estimularon con 1μg / ml de LPS (E. coli, serotipo 055: B5 Sigma-Aldrich, São Paulo, Brasil). Apitoxina estandarizado disuelto en DMEM se incubaron durante 20 h con LPS. Sobrenadante de los cultivos será utilizado para la determinación de NO; interleucinas 1 y prostaglandina E2 por ELISA en el sobrenadante directamente o después de tratamiento de las células con ácido acetilsalicílico para la evaluación de la actividad COX-2. Las células utilizadas para la evaluación de la COX-2 de expresión por Western blot; para evaluar la actividad de unión de NF kappa B (ensayo de movilidad electroforética); y la evaluación de la viabilidad celular por MTT.
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veneno de abeja y fracciones
Ensayos Biológicos
Los ensayos biológicos permiten la validación terapéutica, la eficiencia y el producto investiga mecanismos de acción.
Farmacológico
8 meses
Ensayo clínico de acción antirreumática
Ensayo clínico para otros procesos inflamatorios
Hospitales socios de la MEDLEX o consultas externas acreditadas
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veneno de abeja y fracciones
Hospitales socios de la MEDLEX o consultas externas acreditadas
Tiempo de ejecución
Los productos farmacéuticos a base de propóleos y veneno de
abeja
Parte 5:
Cosméticos que contienen propóleoCondicionador Própolis e Jaborandi 350mlUS$ 5.71
Shampoo Própolis e Jaborandi 350mlUS$ 5.80
Gel de Própolis 70gUS$ 3.86
Jabón Glicerinado de Própolis 90gUS$ 1.97
Gel de Própolis 70gUS$ 3.71
Productos Especiales contienen propóleos / apitoxina
Crema de Própolis Plus 65gUS$ 3,81
Spray de Própolis Sem Álcool e Sem Açúcar 33mlUS$ 2.71
Extracto de Própolis 30mlUS$ 2.86
Doctor Bee Creme sem Cânfora 40gUS$ 5.71
Cytopropolis Bio Chance 360 capsulasUS$ 192.00
Propocaps 90 Cápsulas US$ 12.71
Ox Free 90 CápsulasUS$ 17.71
Propoglicontrol 90 CápsulasUS$ 26.85
Productos Especiales contienen propóleos / apitoxina
Aromatizante bucal 30 ml US$ 12.50
Línea Dental – Gel Dental 90g, Enguague Bucal 250ml e Spray Bucal 30mlUS$ 6.28, US$ 7.00, US$ 3,33
Propoglicontrol 90 CápsulasUS$ 26.85
Productos Especiales contienen propóleos / apitoxina
Melitinase Plus 50 g US$ 10.50
Xarope Propokids 200mlUS$ 7.58
Productos Especiales contienen propóleos / apitoxina
Parte 6: Clase práctica para preparación de los extractos de propóleos y su normalización:Padronização extrativa:300g de resina propolis em 700ml de etanol 96GL para preparar 1L da mistura que fica em percolação por 30 dias. Após filtração se consegue em média 500ml de extrato a 15% de resíduo seco e 150g de borra.Se o preço da resina bruta é US$ 30,00/kgPara produzir 500ml de extrato a 15% custa US$1.00Para produzir um frasco de 30ml = 6 centsSe pode vender este produto à 3.00 US$500ml rendem 16 francos = US$ 50.00 Lucro por quilo de própolis US$ 20.00
Clases prácticas
Parte 7: Clase Práctica para la preparación de productos farmacéuticos de base formulaciones propóleo: Padronização extrativa:Para a solução padronizada o custo por mL de própolis é 0.002Para xarope de própolis o custo é 13 cents propolis e 10 cents outros companentes (85g de açucar para 100ml água), com custo final de 23 cents.Se pode vendar um frasco de xarope por US$ 7.00com 500 ml de extrato se pode produzir 75 frascos + US$ 530.00Lucro por quilo de própolis US$ 500.00 para o preparo do xarope.
Clases prácticas
Parte 7: Clase Práctica para la preparación de productos farmacéuticos de base formulaciones propóleo:
Lucro por quilo de própolis US$ 2.500 para o preparo do Cytopropolis.
Clases prácticas
Cytopropolis Bio Chance 360 capsulasUS$ 192.00
Que te parece?
Dudas y contactos:Universidade Anhanguera de São Paulo
Programa de Mestrado Profissional em FarmáciaGrupo de Pesquisa e Desenvolvimento de BiomedicamentosRua Maria Cândida, 1813, Vila Guilherme - São Paulo, SP
Prof. Niraldo PaulinoE-mail: [email protected](11) 2967-9147 (48) 9986-6003
Medical Lex Gestão de Informações e Cursos Ltda. Av. Desemb. Vitor Lima, 260 sala 908, Ed. Madson Center Trindade - Florianópolis/SC - CEP 88040-400. Fone 48 32261616 [email protected]
MUCHAS GRACIAS...
Una selección de campeones ... Como las abejas !!!
