A INFLUÊNCIA DO ORGANOFOSFORADO CLORPIRIFÓS NO …

1

UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA MARIA

CENTRO DE CIEcircNCIAS DA SAUacuteDE

PROGRAMA DE POacuteS- GRADUACcedilAtildeO EM DISTUacuteRBIOS DA

COMUNICACcedilAtildeO HUMANA

A INFLUEcircNCIA DO ORGANOFOSFORADO

CLORPIRIFOacuteS NO SISTEMA VESTIBULAR DE

COBAIAS

DISSERTACcedilAtildeO DE MESTRADO

Liacutecia Assunccedilatildeo Cogo

Santa Maria RS Brasil

2013

2

A INFLUEcircNCIA DO ORGANOFOSFORADO CLORPIRIFOacuteS NO SISTEMA

VESTIBULAR DE COBAIAS

por


Dissertaccedilatildeo apresentada ao Curso de Mestrado do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana Aacuterea de

Concentraccedilatildeo em Audiccedilatildeo e Equiliacutebrio da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM RS) como requisito parcial para a obtenccedilatildeo do

grau de Mestre em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana

Orientador Prof Dr Aron Ferreira da Silveira (UFSM)

Co-orientador Prof Dr Miguel Acircngelo Hyppolito (USP- Ribeiratildeo Preto)

Santa Maria RS Brasil 2013

3

Ficha catalograacutefica elaborada atraveacutes do Programa de Geraccedilatildeo Automaacutetica da Biblioteca Central da UFSM com os dados fornecidos pelo(a) autor(a)

_______________________________________________________________ copy 2013 Todos os direitos autorais reservados a Liacutecia Assunccedilatildeo Cogo A reproduccedilatildeo de partes ou do todo deste trabalho soacute poderaacute ser feita com autorizaccedilatildeo por escrito do autor Endereccedilo Av Monsenhor Pascoal Gomes Libreloto n 199 Bairro Parque Dom Antocircnio Reis Santa Maria RS 97065-290 Fone (55) 32119183 Cel (055) 99484920 End Eletr liciacogohotmailcom _______________________________________________________________

Assunccedilatildeo Cogo Liacutecia

A INFLUEcircNCIA DO ORGANOFOSFORADO CLORPIRIFOacuteS NO SISTEMA VESTIBULAR DE COBAIAS Liacutecia Assunccedilatildeo Cogo-2013

71 p 30cm

Orientador Aron Ferreira da Silveira

Coorientador Miguel Acircngelo Hyppolito

Dissertaccedilatildeo (mestrado) - Universidade Federal de Santa

Maria Centro de Ciecircncias da Sauacutede Programa de Poacutes-

Graduaccedilatildeo em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana RS 2013

1 Equiliacutebrio Postural 2 Sistema Vestibular 3

Inseticida Organofosforado 4 Praguicida 5 Toxicidade

I Ferreira da Silveira Aron II Acircngelo Hyppolito

Miguel III Tiacutetulo

4

Universidade Federal de Santa Maria Centro de Ciecircncias da Sauacutede

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana

A Comissatildeo Examinadora abaixo assinada aprova a Dissertaccedilatildeo de Mestrado

A INFLUEcircNCIA DO ORGANOFOSFORADO CLORPIRIFOacuteS NO SISTEMA VESTIBULAR DE COBAIAS

elaborada por


como requisito parcial para obtenccedilatildeo do grau de Mestre em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana

Comissatildeo Examinadora

Prof Dra Maristela Julio Costa (UFSM)

(Presidente)

Prof Dra Valdete Alves Valentis dos Santos Filha (UFSM)

Prof Dra Pricila Sleifer (UFRGS)

Santa Maria 01 de marccedilo de 2013

5

Dedico este trabalho aacute minha famiacutelia que sempre me apoiou

para que eu realizasse os meus sonhos

6

AGRADECIMENTOS

A Deus

Aos meus pais Clauacutedio e Mara pela oportunidade de continuar me aperfeiccediloando apoio amor e dedicaccedilatildeo de sempre

Ao meu irmatildeo Joatildeo Vitor pela paciecircncia

Ao meu namorado Guilherme e sua famiacutelia pelo apoio e por estar sempre ao meu

lado nas horas difiacuteceis

Ao meu orientador Prof Aron pelos ensinamentos e pelo incentivo de sempre continuar buscando aprimoramento

Ao co-orientador Prof Miguel pela acolhida em Ribeiratildeo Preto e a oportunidade de

realizar a coleta de dados em um centro de excelecircncia em pesquisa

Aos teacutecnicos que me auxiliaram na coleta Maria Adriana Dani Chico

Agraves equipes do Laboratoacuterio de Teacutecnica Ciruacutergica e Cirurgia Experimental do Departamento de Cirurgia e Anatomia do Laboratoacuterio de Microscopia Eletrocircnica do

Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogecircnicos da Faculdade de Medicina de Ribeiratildeo Preto Universidade de Satildeo Paulo pela

colaboraccedilatildeo nesta pesquisa

Agrave Universidade Federal de Santa Maria

Agraves minhas colegas de poacutes-graduaccedilatildeo Carolina Veloso Letiacutecia Kunst Samantha Marques Maiara Gonccedilalves Enma Ortiz e Dayane Didonet pelo apoio e acolhida na

aacuterea da audiccedilatildeo e equiliacutebrio

Aos alunos que por mim passaram nas disciplinas de docecircncia

Aos professores do Programa de Poacutes-graduaccedilatildeo em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana pela acolhida

7

ldquoA gente sempre deve sair agrave rua como quem foge de casa Como se estivessem abertos diante de noacutes todos os caminhos do mundo

Natildeo importa que os compromissos as obrigaccedilotildees estejam ali Chegamos de longe de alma aberta e coraccedilatildeo cantandordquo

8

Maacuterio Quintana RESUMO

Dissertaccedilatildeo de Mestrado

Curso de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana Universidade Federal de Santa Maria RS Brasil



AUTORA LIacuteCIA ASSUNCcedilAtildeO COGO ORIENTADOR ARON FERREIRA DA SILVEIRA

CO-ORIENTADOR MIGUEL AcircNGELO HYPPOLITO

Algumas substacircncias quiacutemicas tecircm causado muitos danos ao ser humano e

ao meio ambiente Dentre estas substacircncias encontram-se os compostos quiacutemicos

do tipo agrotoacutexicos frequentemente considerados como responsaacuteveis por

intoxicaccedilotildees a trabalhadores tornando isto um problema de sauacutede puacuteblica O

objetivo geral deste estudo consistiu em verificar se o organofosforado clorpirifoacutes

teve influecircncia no sistema vestibular de cobaias em exposiccedilatildeo aguda Tratou-se de

uma pesquisa experimental A pesquisa utilizou 18 cobaias albinas da espeacutecie Cavia

porcellus divididas em trecircs grupos sendo o grupo I o controle dos demais utilizando

aacutegua destilada e contendo cinco animais No grupo II com seis animais foi

administrada a dose de 05mgkgdia de agrotoacutexico clorpirifoacutes e no grupo III com

sete animais a dose de 1mgkgdia do mesmo agrotoacutexico Os trecircs grupos estiveram

sob experimento durante 10 dias Para anaacutelise dos resultados foi realizada a anaacutelise

funcional do sistema vestibular atraveacutes da eletronistagmografia (prova caloacuterica ndash

com aacutegua gelada) e a anaacutelise histopatoloacutegica atraveacutes da microscopia eletrocircnica de

varredura Os resultados natildeo demonstraram diferenccedila estatiacutestica significante para as

variaacuteveis frequecircncia de aparecimento de nistagmo e velocidade angular da

componente lenta na eletronistagmografia e no nuacutemero de tufos ciliares na anaacutelise

histopatoloacutegica por microscopia eletrocircnica de varredura Concluiu-se que o

organofosforado clorpirifoacutes natildeo ocasionou dano ao sistema vestibular das cobaias

nas doses testadas em exposiccedilatildeo aguda

Palavras-chave Equiliacutebrio Postural Sistema Vestibular Inseticida Organofosforado

Praguicida Toxicidade

9

ABSTRACT

MasterrsquosThesis Post Graduation Program in Human Communication Disturbance

Universidade Federal de Santa Maria RS Brazil

THE INFLUENCE OF ORGANOPHOSPHATE CHLORPYRIFOS VESTIBULAR SYSTEM OF GUINEA PIGS

AUTHOR LIacuteCIA ASSUNCcedilAtildeO COGO

ADVISOR ARON FERREIRA DA SILVEIRA CO-ADVISOR MIGUEL ANGELO HYPPOLITO

Some chemicals have caused much damage to humans and the environment

Among these substances are chemical compounds like pesticides often considered

responsible for poisoning the workers making it a public health problem The aim of

this study was to verify whether the organophosphate chlorpyrifos was influential in

the vestibular system of guinea pigs in acute exposure This was an experimental

research The research used 18 albino guinea pigs of the species Cavia porcellus

divided into three groups with group I control the other using distilled water and

containing five animals In Group II six animals were administered 05 mg kg day

of pesticide chlorpyrifos and group III with seven animals at a dose of 1mgkgday of

the same pesticide The three groups were under experiment for 10 days For

analysis of the results was performed functional analysis of the vestibular system by

electronystagmography (caloric test - with ice water) and histopathological analysis

by scanning electron microscopy The results showed no statistically significant

difference for the variable frequency of appearance of nystagmus and angular

velocity of the slow component in electronystagmography and the number of ciliary

tufts histologically by scanning electron microscopy It was concluded that the

organophosphate chlorpyrifos did not cause damage to the vestibular system of the

guinea pigs at the doses tested in acute exposure

Key-words Postural Balance Vestibular System Insecticide Organophosphate

Pesticides Toxicity

10

LISTA DE FIGURAS

ARTIGO 1

Figura 1 ndash Fotografia dos equipamentos e registro da Eletronistagmografia 37

Figura 2 ndash Fotografia do registro dos nistagmos de cobaia do grupo controle 37

11

LISTA DE TABELAS

ARTIGO 1

Tabela 1 ndash Comparaccedilatildeo dos valores meacutedios das frequecircncias do aparecimento de

nistagmos (us) entre o preacute e poacutes- experimento nos Grupos I II III

39

Tabela 2 - Comparaccedilatildeo dos valores meacutedios das velocidades angulares da componente

lenta (degs) de nistagmos (us) entre o preacute e poacutes- experimento nos Grupos I II

III

39

ARTIGO 2

Tabela 1 ndash Comparaccedilatildeo dos valores meacutedios do nuacutemero de tufos ciliares do saacuteculo e

utriacuteculo entre os Grupos I II III

51

12

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS

Ache Acetilcolinesterase

ANVISA Agecircncia Nacional de Vigilacircncia Sanitaacuteria

CAPES Coordenaccedilatildeo de Aperfeiccediloamento do Ensino Superior

CETEA Comissatildeo de Eacutetica em Experimentaccedilatildeo Animal

COBEA Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal

CONCEA Conselho Nacional de Controle de Experimentaccedilatildeo Animal

EMBRAPA Empresa Brasileira de Pesquisas Agropecuaacuterias

ENG Eletronistagmografia

et al E colaboradores

FMRP Faculdade de Medicina de Ribeiratildeo Preto

Ltda Limitada

MAPA Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento

MEV Microscopia Eletrocircnica de Varredura

OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado

PVC Policloreto de Vinila

RVE Reflexo vestiacutebulo-espinhal

RVO Reflexo vestiacutebulo-ocular

SA Sociedade Anocircnima

SBCAL Sociedade Brasileira de Ciecircncia em Animais de Laboratoacuterio

SINITOX Sistema Nacional de Informaccedilotildees Toacutexico-farmacoloacutegicas

SNC Sistema Nervoso Central

UFSM Universidade Federal de Santa Maria

USP Universidade de Satildeo Paulo

VACL Velocidade Angular da Componente Lenta

VENG Vectoeletronistagmografia

13

LISTA DE SIacuteMBOLOS ordmC Graus Celsius

cm Centiacutemetro

CO2 Dioacutexido de Carbono

DL 50 Dose Letal 50

Fn Frequecircncia de nistagmos

g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros

reg Marca Registrada

Por cento

pH Potencial de Hidrogecircnio

us Unidade por segundo

ordms Graus por segundo

ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

LISTA DE ANEXOS

Anexo A ndash Comprovante de aprovaccedilatildeo da Comissatildeo de Eacutetica em Experimentaccedilatildeo

Animal

66

15

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 Sistema vestibular e equiliacutebrio 19

22 Agrotoacutexicos organofosforados 22

23 Eletronistagmografia 24

3 ARTIGO 1 ndash AVALIACcedilAtildeO FUNCIONAL DO SISTEMA VESTIBULAR

DE COBAIAS INTOXICADAS POR ORGANOFOSFORADO POR MEIO

DA PROVA CALOacuteRICA

27

Resumo 29

Abstract 30

Introduccedilatildeo 31

Materiais e meacutetodos 33

Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41

Referecircncias bibliograacuteficas 42

4 ARTIGO 2 ndash ANAgraveLISE MORFOLOacuteGICA DO SISTEMA VESTIBULAR

DE COBAIAS INTOXICADAS POR ORGANOFOSFORADO

46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57


5 DISCUSSAtildeO GERAL 60

6 CONCLUSAtildeO 63

REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 64

ANEXOS 70

16

Anexo A ndash Comprovante de aprovaccedilatildeo da Comissatildeo de Eacutetica em

Experimentaccedilatildeo Animal

71

17

1 INTRODUCcedilAtildeO

Existem substacircncias quiacutemicas que causam danos aos seres humanos e ao

meio ambiente A degradaccedilatildeo do meio ambiente e o impacto na sauacutede humana tecircm

se dado devido ao contato excessivo de forma aguda ou gradativa com tais

substacircncias (HOSHINO et al 2008)

Dentre estas substacircncias encontram-se os compostos quiacutemicos do tipo

agrotoacutexicos Alguns por suas propriedades neurotoacutexicas satildeo frequentemente

considerados como responsaacuteveis por intoxicaccedilotildees agrave trabalhadores que entram em

contato com estes compostos principalmente nos paiacuteses em desenvolvimento

(TEIXEIRAAUGUSTO MORATA 2003 HOSHINO et al 2008)

De acordo com Silva et al (2005) os agrotoacutexicos representam um dos mais

importantes fatores de risco para a sauacutede humana Estes produtos satildeo utilizados em

grande escala por vaacuterios setores produtivos e mais intensamente pelo setor

agropecuaacuterio

No Brasil foram registrados 101086 casos de intoxicaccedilatildeo humana em 2009

Dentre estes as intoxicaccedilotildees por agrotoacutexicos de uso agriacutecola totalizaram 5253

casos 1058 soacute no Sul do paiacutes regiatildeo de forte produccedilatildeo agriacutecola (Sistema Nacional

de Informaccedilotildees Toacutexico-Farmacoloacutegicas ndash SINITOX 2009)

O difiacutecil acesso agraves informaccedilotildees e agrave educaccedilatildeo por parte dos usuaacuterios desses

produtos bem como o baixo controle sobre sua produccedilatildeo distribuiccedilatildeo e utilizaccedilatildeo

satildeo alguns dos principais determinantes na constituiccedilatildeo dessa situaccedilatildeo como um

desafio de sauacutede puacuteblica

No ano de 2008 o Brasil tornou-se o maior consumidor mundial de venenos

agriacutecolas superando os 700 milhotildees de toneladas ultrapassando os Estados

Unidos (646 milhotildees de toneladas) Nesse ano as vendas com agrotoacutexicos no Brasil

significaram 7125 bilhotildees de doacutelares Deste montante os inseticidas representaram

29 do consumo (GUAZZELLI 2009)

No grupo dos inseticidas encontramos os agrotoacutexicos organofosforados (OF)

amplamente utilizados Os OF satildeo compostos anticolinesteraacutesicos que causam

variado grau de toxicidade para o ser humano Em razatildeo do benefiacutecio do agrotoacutexico

para o sucesso do plantio o trabalhador tem a tendecircncia de subestimar seus efeitos

na sauacutede para quem entra em contato com o produto (KOumlRBES 2009)

18

Diversas vezes essa exposiccedilatildeo causa alteraccedilotildees cliacutenicas que natildeo satildeo

detectadas pelos marcadores bioloacutegicos e que silenciosamente alteram a vida do

trabalhador Sabe-se que a exposiccedilatildeo em grandes doses por um curto periacuteodo

causa os chamados efeitos agudos Este quadro agudo varia de intensidade

podendo ser caracterizado por naacuteusea vocircmito cefaleia tontura desorientaccedilatildeo

hiperexcitabilidade parestesias irritaccedilatildeo de pele e mucosas fasciculaccedilatildeo muscular

dificuldade respiratoacuteria hemorragia convulsotildees coma e morte (SILVA et al 2005

HOSHINO et al 2008)

Em estudo realizado por Hoshino et al(2008) a tontura foi o sintoma de maior

destaque considerada uma das expressotildees cliacutenicas da exposiccedilatildeo aos agrotoacutexicos

Os pesquisadores sugerem que a mesma deve ser avaliada e detectada durante a

anamnese especiacutefica do trabalhador rural bem como devidamente investigada pelas

equipes de sauacutede e responsaacuteveis pelo atendimento meacutedico nas localidades

O sistema vestibular eacute responsaacutevel por informar sobre a posiccedilatildeo e o

movimento da cabeccedila provendo-nos do sentido de equiliacutebrio auxiliando na

coordenaccedilatildeo dos movimentos da cabeccedila e dos olhos e nos ajustes da postura

corporal Quando sua funccedilatildeo eacute perturbada surgem sensaccedilotildees desagradaacuteveis como

vertigem naacuteusea e uma sensaccedilatildeo de desequiliacutebrio acompanhada de movimentos

incontrolaacuteveis dos olhos (BEAR CONNORS e PARADISO 2002 AFIFI e

BERGMAN 2008)

Faz-se importante ressaltar que a populaccedilatildeo exposta ao agrotoacutexico natildeo se

limita somente ao trabalhador mas tambeacutem a sua famiacutelia que convive proacutexima a

plantaccedilatildeo Este fato evidencia a necessidade de pesquisas que aprofundem

metodologias para avaliaccedilatildeo da exposiccedilatildeo aos agentes toacutexicos e os riscos

associados a estes produtos tanto nos casos de intoxicaccedilatildeo aguda como na

exposiccedilatildeo em longo prazo ao agrotoacutexico (KOumlRBES 2009)

Um aspecto relevante no trabalho rural brasileiro eacute a participaccedilatildeo de crianccedilas

e adolescentes nas atividades de trabalho agropecuaacuterio principalmente na faixa

etaacuteria abaixo de 14 anos Essa faixa da populaccedilatildeo eacute especialmente afetada tanto

pelos aspectos teacutecnicos dos processos de trabalho (exposiccedilatildeo aos agrotoacutexicos agraves

radiaccedilotildees solares ao ruiacutedo agrave vibraccedilatildeo etc) como tambeacutem aqueles ligados agrave

organizaccedilatildeo do trabalho (jornada ritmo conteuacutedo das tarefas etc) Aleacutem disso eacute

preciso considerar o comprometimento do processo de socializaccedilatildeo infantil e da

escolarizaccedilatildeo (SILVA et al 2005)

19

No que diz respeito agraves crianccedilas uma variaacutevel importante a ser considerada

satildeo os distuacuterbios de aprendizagem que podem estar relacionados aos distuacuterbios do

sistema aacuteudio-vestibular Zeiglboim e colaboradores (2006) avaliaram crianccedilas com

distuacuterbios de aprendizagem e distuacuterbios vestibulares e sugeriam existir relaccedilatildeo

entre estas duas condiccedilotildees Este fato reforccedila a relevacircncia de pesquisas com

substacircncias que causam sintomas aacuteudio-vestibulares jaacute que no Brasil o trabalho

infantil ainda estaacute fortemente relacionado agrave agricultura familiar

Koumlrbes et al (2010) afirma ser necessaacuterio outras pesquisas para que se

possa melhor entender a associaccedilatildeo entre a exposiccedilatildeo a agrotoacutexicos e a ocorrecircncia

de alteraccedilotildees em vias auditivas e vestibulares Moraes (1999) ressalta a importacircncia

das pesquisas para que se possam sensibilizar as autoridades de sauacutede com

relaccedilatildeo aos riscos causados por estes produtos Silva et al (2005) tambeacutem fomenta

a importacircncia de pesquisar os efeitos agudos relacionados aos piretroacuteides

fungicidas e herbicidas

O agrotoacutexico pode trazer prejuiacutezos natildeo soacute ao agricultor que aplica o produto

mas a populaccedilatildeo vizinha em torno agrave lavoura e agraves pessoas que mantecircm um contato

direto com ele ou com seus pertences contaminados tornando assim a intoxicaccedilatildeo

por agrotoacutexico um tema mais abrangente que envolve uma questatildeo de sauacutede

puacuteblica Os estudos sugerem a relaccedilatildeo entre a intoxicaccedilatildeo por agrotoacutexico e sintomas

vestibulares poreacutem natildeo esclarecem onde ocorre o dano

Diante do exposto justifica-se a realizaccedilatildeo de pesquisas que venham a

esclarecer a relaccedilatildeo entre os distuacuterbios ocasionados no sistema vestibular e a

intoxicaccedilatildeo por agrotoacutexicos principalmente os organofosforados

Focando o tema como uma questatildeo de sauacutede puacuteblica cabe a atuaccedilatildeo de

uma equipe multiprofissional para assistir o sujeito intoxicado ou que mantecircm

contato com o agrotoacutexico Dentro da equipe encontra-se dentre outros profissionais

o profissional de fisioterapia trabalhando desde a prevenccedilatildeo dos problemas de

sauacutede a utilizaccedilatildeo dos equipamentos de proteccedilatildeo individual bem como a

reabilitaccedilatildeo deste indiviacuteduo poacutes-intoxicaccedilatildeo caso necessaacuterio

O objetivo do presente estudo foi identificar se o organofosforado clorpirifoacutes

tem influecircncia no sistema vestibular de cobaias em exposiccedilatildeo aguda analisando sua

accedilatildeo de forma funcional e morfoloacutegica

20

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

21 Sistema vestibular e equiliacutebrio

A orelha compreende trecircs compartimentos orelha externa meacutedia e interna

Na porccedilatildeo petrosa do osso temporal aloja-se a orelha interna formada por espaccedilos

denominados vestiacutebulo (saacuteculo e utriacuteculo) e canais semicirculares tambeacutem

denominados aparelho vestibular (ENDERLE 2004)

O sistema vestibular nos seres humanos eacute composto por trecircs componentes

fundamentais um sistema sensorial perifeacuterico um processador central e um

mecanismo de resposta motora O sistema perifeacuterico eacute constituiacutedo de um conjunto

de sensores do movimento os quais enviam informaccedilotildees ao sistema nervoso central

(SNC) especificamente ao complexo nuclear vestibular e ao cerebelo sobre a

velocidade angular da cabeccedila a aceleraccedilatildeo linear e a orientaccedilatildeo cefaacutelica em

relaccedilatildeo ao eixo gravitacional (HERDMAN 2002)

Este sistema detecta as sensaccedilotildees de equiliacutebrio Contecircm uma rede de tubos

ossos e cacircmaras chamado labirinto oacutesseo e dentro dele uma rede de tubos

membranosos chamado labirinto membranoso a parte funcional do sistema

vestibular (GUYTON 1992)

O labirinto membranoso eacute uma estrutura complexa localizada no interior do

labirinto oacutesseo Esta estrutura consiste do ducto coclear que eacute o oacutergatildeo sensorial

auditivo bem como de trecircs canais semicirculares saacuteculo e utriacuteculo constituindo os

oacutergatildeos sensoriais vestibulares A maior parte do labirinto membranoso eacute preenchida

com endolinfa um fluido extracelular que em sua constituiccedilatildeo iocircnica eacute semelhante

ao fluido intracelular A perilinfa eacute um fluido semelhante ao fluido extracelular e ao

liacutequor e preenche o espaccedilo existente entre o labirinto membranoso e o labirinto

oacutesseo (MARTIN 1998)

As doenccedilas que acometem o utriacuteculo e o saacuteculo produzem uma sensaccedilatildeo de

inclinaccedilatildeo e levitaccedilatildeo (AFIFI e BERGMAN 2008) Segundo Bear Connors e

Paradiso (2002) a maacutecula do saacuteculo estaacute orientada verticalmente e a do utriacuteculo

horizontalmente

As ceacutelulas receptoras vestibulares estatildeo localizadas em regiotildees dos canais

semicirculares (denominadas ampolas) no saacuteculo e no utriacuteculo (denominadas

21

maacuteculas) estas ceacutelulas satildeo sensores bioloacutegicos que convertem o deslocamento

provocado pelo movimento cefaacutelico em uma descarga neural (HERDMAN 2002) Os

receptores vestibulares (ceacutelulas sensoriais) satildeo ativados pelo deslocamento dos

estereociacutelios localizados nas suas superfiacutecies apicais Contudo estas propriedades

mecacircnicas do labirinto vestibular conferem aos receptores a sensaccedilatildeo de

movimento As ceacutelulas ciliadas dos canais semicirculares registram o movimento

angular da cabeccedila ao passo que aquelas do utriacuteculo e do saacuteculo registram o

movimento linear (MARTIN 1998)

O mecanismo que ativa os receptores vestibulares eacute diferente daquele dos

receptores auditivos As ceacutelulas ciliadas dos canais semicirculares satildeo cobertas por

uma massa gelatinosa (denominada cuacutepula) na qual os estereociacutelios estatildeo

embebidos Movimentos angulares da cabeccedila induzem a endolinfa do interior dos

canais a fluir deslocando a massa gelatinosa que por sua vez desvia os

estereociacutelios das ceacutelulas sensoriais O utriacuteculo e o saacuteculo tambeacutem possuem um

revestimento gelatinoso sobre as ceacutelulas sensoriais nas suas maacuteculas Cristais de

carbonato de caacutelcio embebidos num material gelatinoso repousam sobre os

estereociacutelios das ceacutelulas sensoriais Esta gelatina sofre uma deformaccedilatildeo causada

pelos movimentos da cabeccedila que acabam desviando os estereociacutelios O saacuteculo e o

utriacuteculo satildeo chamados de oacutergatildeos de otoacutelitos porque o termo otoacutelito eacute usado para

denominar os cristais de carbonato de caacutelcio Os canais semicirculares utriacuteculo e

saacuteculo possuem cada um deles uma orientaccedilatildeo espacial diferente em relaccedilatildeo agrave

cabeccedila conferindo assim uma sensibilidade seletiva a movimentaccedilatildeo nas diferentes

direccedilotildees (MARTIN 1998)

As terminaccedilotildees nervosas que chegam as ceacutelulas ciliadas das maacuteculas e das

cristas satildeo aferecircncias dos neurocircnios sensoriais bipolares que se situam no gacircnglio

de Scarpa os axocircnios destes neurocircnios formam o ramo vestibular do VIII par

craniano (BEAR CONNORS PARADISO 2002 NISHIDA 2012) A partir deste

local seguem pelo conduto auditivo interno junto com o ramo coclear e o nervo

facial Ao sair do conduto o ramo vestibular atravessa a aacuterea do acircngulo ponto-

cerebelar e chega ao bulbo terminando nos nuacutecleos vestibulares localizados no

assoalho do IV ventriacuteculo Os nuacutecleos vestibulares jaacute fazem parte do sistema

vestibular central (MARTIN 1998)

Bear Connors e Paradiso (2002) explicam que pelo fato dos canais de

ambos os lados da cabeccedila serem aproximadamente paralelos uns aos outros eles

22

funcionam juntos de forma reciacuteproca Os dois canais horizontais trabalham juntos

enquanto cada um dos anteriores eacute emparelhado Quando o movimento cefaacutelico

ocorre em um plano especiacutefico para um par de canais um canal eacute excitado e o canal

emparelhado oposto eacute hiperpolarizado

A vascularizaccedilatildeo do sistema vestibular se daacute pela arteacuteria cerebelar acircntero-

inferior ramo da arteacuteria basilar que supre o sistema vestibular perifeacuterico atraveacutes da

arteacuteria labiriacutentica (LOPES et al 2008)

Os sensores de movimento do sistema vestibular perifeacuterico enviam

informaccedilotildees ao SNC Este processa os sinais e combina-os com outras informaccedilotildees

sensoriais para estimar a orientaccedilatildeo cefaacutelica O sistema vestibular central produz

uma resposta agrave movimentaccedilatildeo cefaacutelica que eacute transmitida aos muacutesculos

extraoculares e a medula espinhal para preparar os reflexos vestiacutebulo-ocular (RVO)

e vestiacutebulo-espinhal (RVE) O RVO gera os movimentos dos olhos que manteacutem a

visatildeo estaacutevel durante o movimento cefaacutelico O RVE gera um movimento corpoacutereo de

compensaccedilatildeo com o objetivo de manter a estabilidade cefaacutelica e postural ele

consiste em uma montagem de vaacuterios reflexos O desempenho do RVO e do RVE eacute

monitorizado pelo SNC e quando necessaacuterio eacute reajustado (HERDMAN 2002)

Os neurocircnios de resposta motora para o RVO satildeo os neurocircnios dos nuacutecleos

motores oculares que orientam os muacutesculos extraoculares Estes muacutesculos satildeo

dispostos em pares e orientados em planos proacuteximos aos dos canais semicirculares

Esta disposiccedilatildeo permite que um uacutenico par de canais seja ligado principalmente a um

uacutenico par de muacutesculos extraoculares O resultado eacute um movimento conjugado dos

olhos no mesmo plano que o movimento da cabeccedila Os neurocircnios de resposta

motora para o RVE satildeo as ceacutelulas do corno anterior da substacircncia cinzenta da

medula espinhal que comandam os muacutesculos esqueleacuteticos (HERDMAN 2002)

O equiliacutebrio corporal pelo qual o sistema vestibular eacute um dos responsaacuteveis eacute

uma complexa interaccedilatildeo entre o sensorial e o motor que nos previne de quedas por

exemplo Quando ocorre uma alteraccedilatildeo visual proprioceptiva ou vestibular surgem

alteraccedilotildees que caracterizam o desequiliacutebrio Se a alteraccedilatildeo eacute de origem vestibular

ocorrem sintomas que entre outros a tontura eacute o mais comum e o que mais afeta a

qualidade de vida do indiviacuteduo (POPPER 2001)

O mesmo autor afirma que em decorrecircncia das alteraccedilotildees que a afecccedilatildeo

labiriacutentica provoca os pacientes podem se sentir inseguros e depressivos levando-

os ao isolamento e limitaccedilotildees nas atividades diaacuterias e sociais

23

Aleacutem de tontura as lesotildees vestibulares centrais ou perifeacutericas provocam

tambeacutem o nistagmo um movimento involuntaacuterio oscilante dos olhos seguindo um

padratildeo horizontal vertical ou rotatoacuterio Os nistagmos perifeacuterico e central satildeo

diferentes um do outro as seguintes caracteriacutesticas podem diferenciaacute-los fixaccedilatildeo

dos olhos suprime o nistagmo perifeacuterico mas natildeo o central o nistagmo vertical puro

eacute geralmente central (AFIFI e BERGMAN 2008)

A posiccedilatildeo do corpo o movimento dos olhos e a percepccedilatildeo espacial satildeo

controlados pelo sistema vestibular com o objetivo de manter o equiliacutebrio corporal

O sistema proprioceptivo-vestibular constitui o ponto inicial de contato do ser

humano com o ambiente (GANANCcedilA et al 1998)

Gananccedila et al (2000) concluem que o equiliacutebrio corporal eacute fundamental para

que os seres humanos possam adotar posturas e realizar movimentos com

harmonia e conforto fiacutesico e mental

22 Agrotoacutexicos organofosforados

Segundo a Lei Federal nordm 7802 de 11 de julho de 1989 regulamentada pelo

Decreto 4074 de 04 de janeiro de 2002 os agrotoacutexicos satildeo substacircncias ou

misturas de natureza quiacutemica destinadas a prevenir destruir ou repelir direta ou

indiretamente qualquer forma de agente patogecircnico ou de vida animal ou vegetal

que seja nociva agraves plantas e animais seus produtos e subprodutos e ao homem

A utilizaccedilatildeo de agrotoacutexicos na agricultura teve seu iniacutecio na deacutecada de 1920

tendo sua aplicaccedilatildeo se expandido por ocasiatildeo da 2ordf Guerra Mundial quando foram

utilizados como arma quiacutemica

Os inseticidas do grupo quiacutemico dos OF satildeo compostos orgacircnicos derivados

do aacutecido fosfoacuterico e apresentam uma meia-vida curta variando entre minutos a 72

horas (GONCcedilALVES 2008) Satildeo inseticidas amplamente utilizados na agricultura

pecuaacuteria e no controle de vetores sendo comercializados em formulaccedilotildees com

diferentes apresentaccedilotildees como poacute liacutequido gracircnulo e soluccedilotildees concentradas etc

(MANUAL DE DIAGNOacuteSTICO E TRATAMENTO EM ACIDENTES COM

AGROTOacuteXICOS 2000)

A forma de absorccedilatildeo dos OF pode ser pela pele ingestatildeo e inalaccedilatildeo Estes

satildeo substacircncias lipossoluacuteveis distribuem-se e armazenam-se principalmente no

tecido adiposo atravessam a barreira hematoencefaacutelica e placentaacuteria A elevaccedilatildeo da

24

temperatura atmosfeacuterica eacute um fator de influecircncia na absorccedilatildeo desses produtos ou

seja esses se tornam mais volaacuteteis determinando uma elevaccedilatildeo da pressatildeo de

vapor Com isso se elevam a capacidade de inalaccedilatildeo e a velocidade de circulaccedilatildeo

sanguiacutenea (GONCcedilALVES 2008)

O mesmo autor afirma que os OF satildeo inibidores irreversiacuteveis da

acetilcolinesterase (AchE) no SNC nos gloacutebulos vermelhos no plasma e em outros

oacutergatildeos e provocam um acuacutemulo de acetilcolina nas sinapses nervosas e

consequentes efeitos parassimpaticomimeacuteticos Natildeo se acumulam no organismo

mas satildeo responsaacuteveis por efeitos retardados

A AchE eacute a enzima responsaacutevel pela degradaccedilatildeo da acetilcolina em aacutecido

aceacutetico e colina substacircncias inertes A acetilcolina eacute o mais importante

neurotransmissor do impulso nervoso nas junccedilotildees sinaacutepticas Os OF ao inibirem a

accedilatildeo da AchE provocam um excesso de acetilcolina nas terminaccedilotildees nervosas o

que inicialmente excitaraacute e depois paralisaraacute a transmissatildeo nas sinapses

colineacutergicas que incluem o SNC terminaccedilotildees nervosas parassimpaacuteticas e umas

poucas terminaccedilotildees simpaacuteticas como glacircndulas sudoriacuteparas (efeitos muscariacutenicos)

nervos somaacuteticos e sinapses ganglionares (efeitos nicotiacutenicos) A reaccedilatildeo entre o OF

e o siacutetio ativo da AchE resulta na formaccedilatildeo de uma enzima estaacutevel fosforilada e natildeo

reativa o que a torna ldquoirreversivelmente inibidardquo (MANUAL DE DIAG E TRAT EM

ACIDENTES COM AGROT 2000)

Aleacutem do efeito de neurotoxicidade em animais expostos a OF o mesmo pode

provocar geraccedilatildeo de espeacutecies reativas de oxigecircnio levando ao estresse oxidativo e

consequente dano celular (QIAO et al 2002 AZEVEDO 2009)

A principal via de eliminaccedilatildeo deste composto do organismo eacute a urinaacuteria A

vida meacutedia do OF e de seus produtos eacute relativamente curta poreacutem seu efeito toacutexico

eacute prolongado (MANUAL DE DIAG E TRAT EM ACIDENTES COM AGROT 2000)

De acordo com a classificaccedilatildeo da EMBRAPA (2006) estes produtos satildeo

classificados toxicologicamente em quatro classes

-Classe I Extremamente toacutexicos

-Classe II Altamente toacutexicos

-Classe III Medianamente toacutexicos

-Classe IV Pouco ou muito pouco toacutexicos

Incluso na classificaccedilatildeo toxicoloacutegica I encontra-se o agrotoacutexico inseticida

organofosforado Clorpirifoacutes Sua composiccedilatildeo quiacutemica eacute O O ndash diethyl O-3 56 ndash

25

trichloro -2- pyridylphosphorothioate com foacutermula bruta C9H11Cl3NO3PS Eacute

utilizado como inseticida nas lavouras de algodatildeo batata cafeacute citros feijatildeo maccedila

milho soja tomate O produto pode ser absorvido pelo trato gastrointestinal e em

menor extensatildeo por via deacutermica e inalatoacuteria eacute rapidamente metabolizado e

excretado pela urina e fezes Este OF causa efeitos agudos como sintomas de

sonolecircncia cefaleia tontura tremores naacuteuseas sudorese visatildeo turva dificuldade

respiratoacuteria incontinecircncia e convulsotildees bem como efeitos crocircnicos que atraveacutes de

exposiccedilotildees repetidas ou prolongadas podem resultar em prejuiacutezo de memoacuteria e

concentraccedilatildeo depressatildeo severa irritabilidade cefaleia sonambulismo ou insocircnia

(MINISTEacuteRIO DA AGRICULTURA PECUAacuteRIA E ABASTECIMENTO 2010)

Os equipamentos de proteccedilatildeo individual recomendados para uso do produto

em aplicaccedilatildeo na lavoura satildeo maacutescaras com filtro de carvatildeo ativado cobrindo nariz e

boca luvas de borracha ou material impermeaacutevel cobrindo as matildeos oacuteculos de

seguranccedila para produtos quiacutemicos macacatildeo de mangas compridas impermeaacuteveis

botas de PVC e chapeacuteu de aba larga (VIDE BULA PYRINEX 480 EC)

Tambeacutem de acordo com a bula do produto o intervalo de reentrada na

lavoura onde foi aplicado o produto eacute de no miacutenimo 24 horas apoacutes a aplicaccedilatildeo

23 Eletronistagmografia

A avaliaccedilatildeo funcional selecionada para este estudo foi a prova caloacuterica dentro

do espectro do exame de eletronistagmografia (ENG) A ENG em suas diferentes

modalidades eacute a maneira mais adequada de avaliar os achados oculares eou

vestibulares Esta consiste no registro da movimentaccedilatildeo ocular estes movimentos

fisioloacutegicos ou induzidos por estimulaccedilotildees visuais representam o elemento principal

na investigaccedilatildeo e na avaliaccedilatildeo dos distuacuterbios vestibulares (GANANCcedilA et al 1998

MUNARO SLEIFER PEDROSO 2009)

A ENG eacute um meacutetodo de inscriccedilatildeo dos movimentos oculares baseados na

captaccedilatildeo por meio de eletrodos de superfiacutecie da variaccedilatildeo do potencial eleacutetrico entre

a coacuternea (+) e a retina (-) que ocorre quando os olhos se movimentam Destina-se

ao registro do nistagmo (GANANCcedilA et al 1998)

A resposta padratildeo para o exame eacute o nistagmo pois toda vez que se estimula

o sistema vestibular ele aparece como resposta Isso se deve a um desequiliacutebrio

entre as forccedilas antagocircnicas vestibulares o que contribui para manter a orientaccedilatildeo

26

dos globos oculares Da mesma maneira uma patologia no sistema perifeacuterico ou em

suas conexotildees centrais pode determinar o aparecimento do nistagmo (PESSOcircA

1999)

O nistagmo constitui-se no elemento fundamental de anaacutelise do RVO na ENG

As anormalidades do RVO podem ser encontradas na pesquisa da prova caloacuterica

(em que a estimulaccedilatildeo labiriacutentica dos canais semicirculares laterais eacute efetuada em

cada ouvido independentemente) Esta prova permite classificar as disfunccedilotildees em

perifeacutericas e centrais Aleacutem disso as disfunccedilotildees vestibulares podem ainda ser

classificadas como irritativas (quando a prova caloacuterica mostrar preponderacircncia

direcional do nistagmo ou hiperreflexia) ou deficitaacuterias (quando a prova caloacuterica

revelar hiporreflexia ou arreflexia) (GANANCcedilA et al 1998)

A exploraccedilatildeo semioloacutegica do RVO exige uma calibraccedilatildeo preacutevia dos

movimentos oculares (GANANCcedilA et al 1998)

O mecanismo de accedilatildeo do labirinto a estimulaccedilatildeo eacute complexo mas se admite

que a teoria hidrodinacircmica desenvolvida por Barany ainda eacute correta De acordo com

o autor a irrigaccedilatildeo fria do conduto auditivo externo iraacute produzir um resfriamento da

parede do canal semicircular lateral que na posiccedilatildeo vertical (paciente deitado em

decuacutebito dorsal com a cabeccedila fletida para frente de 25 a 30ordm) determinaraacute um

movimento dos liacutequidos labiriacutenticos e consequentemente um desvio da cuacutepula e

portanto nistagmos desvios segmentares e tonturas A irrigaccedilatildeo com aacutegua quente

provoca nistagmo na direccedilatildeo da orelha irrigada enquanto que a aacutegua fria provoca o

nistagmo na direccedilatildeo oposta da orelha irrigada (PESSOcircA 1999 MOR FRAGOSO

2012)

A estimulaccedilatildeo da prova caloacuterica da ENG pode ser realizada por aacutegua ou por

ar em diferentes temperaturas O uso do ar eacute indicado em casos de perfuraccedilatildeo

timpacircnica ou para minimizar os sintomas neurovegetativos Este meacutetodo exige o uso

de equipamentos especiais e natildeo possui uma rotina cliacutenica bem descrita como a da

aacutegua Jaacute a aacutegua eacute um procedimento jaacute padronizado Esta provoca mais sintomas

neurovegetativos todavia produz uma resposta mais robusta ao exame (PESSOcircA

1999 MOR FRAGOSO 2012)

O exame com aacutegua eacute realizado nas temperaturas quente fria e gelada

Segundo o protocolo de Fitzgerald amp Hallpike (1942) as temperaturas utilizadas

seriam de 44ordm C e 30ordmC com 240 ml de aacutegua irrigaccedilatildeo durante 40 segundos e

intervalo de cinco minutos entre as irrigaccedilotildees na seguinte sequecircncia 30ordmC-OD

27

30ordmC-OE 44ordmC-OE e 44ordmC-OD Este protocolo sofreu algumas alteraccedilotildees com o

passar dos anos O protocolo usual atualmente eacute a estimulaccedilatildeo a aacutegua com canais

semicirculares laterais verticalizados utilizando-se 240 ml de aacutegua durante 40

segundos de irrigaccedilatildeo e na seguinte sequecircncia 44ordmC-OD 44ordmC-OE 30ordmC-OE e

30ordmC-OD com intervalo de trecircs minutos entre as provas (MOR FRAGOSO 2012)

Quando tais temperaturas natildeo produzem respostas adequadas podemos

realizar a prova a 18ordmC ou ateacute mesmo a 0ordmC (PESSOcircA 1999) Estes protocolos satildeo

utilizados em humanos o valor de temperatura estabelecido neste trabalho foi de

10ordmC segundo o protocolo de Marsellian Grellet e Colafecircmina de 1969 (OLIVEIRA

CICILINI SOUZA ANDRADE 1979)

A prova fria assim como a prova gelada produzem estiacutemulos ampuliacutepedos

por isto o nistagmo neste caso bate para o lado oposto ao estiacutemulo jaacute na prova

quente o estiacutemulo eacute ampuliacutefugo e o nistagmo iraacute bater para o mesmo lado

(PESSOcircA 1999)

28

3 ARTIGO 1

AVALIACcedilAtildeO FUNCIONAL DO SISTEMA VESTIBULAR DE COBAIAS

INTOXICADAS POR ORGANOFOSFORADO POR MEIO DA PROVA CALOacuteRICA

Functional evaluation system of guinea pigs vestibular poisoned by organophosphate

through caloric

Liacutecia Assunccedilatildeo Cogo1Adriana de Andrade Batista Murashima2 Valdete Alves

Valentins dos Santos Filha 3 Miguel Angelo Hyppolito4 e Aron Ferreira da Silveira5

1 Fisioterapeuta Mestranda do Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Distuacuterbios da

Comunicaccedilatildeo Humana da Universidade Federal de Santa Maria Santa Maria ndash RS

Brasil liciacogohotmailcom

2 Bioacuteloga Mestranda do Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo em Oftalmologia

Otorrinolaringologia e Cirurgia de Cabeccedila e Pescoccedilo da Faculdade de Medicina de

Ribeiratildeo Preto Universidade de Satildeo Paulo Ribeiratildeo Preto ndash SP Brasil

adrimurashimafmarpuspbr

3Fonoaudioacuteloga Professora ndash Doutora Adjunta do Departamento de Fonoaudiologia

da Universidade Federal de Santa Maria Santa Maria - RS Brasil

valdetevhotmailcom

4 Meacutedico Otorrinolaringologista Professor-Doutor Docente do Departamento de

Oftalmologia Otorrinolaringologia e Cirurgia de Cabeccedila e Pescoccedilo da Faculdade de

Medicina de Ribeiratildeo Preto Universidade de Satildeo Paulo Ribeiratildeo Preto ndash SP Brasil

mhyppolitouolcombr

5 Meacutedico Veterinaacuterio Professor-Doutor Titular do Departamento de Morfologia da

Universidade Federal de Santa Maria e orientador do Programa de Poacutes Graduaccedilatildeo

em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana da UFSM Santa Maria ndash RS Brasil

aronfergmailcom

29

Dados do Responsaacutevel


Endereccedilo Av Mons Pascoal Gomes Libreloto 199 Parque Dom Antocircnio Reis

Santa Maria ndash RS CEP 97065-290

Telefone 55- 99484920

E-mail liciacogohotmailcom

Fonte de auxiacutelio CAPES

Declaro natildeo existir conflito de interesse neste manuscrito

30

Resumo

A manutenccedilatildeo do equiliacutebrio corporal eacute realizada pelo funcionamento conjunto

do sistema vestibular da visatildeo e do sistema proprioceptivo O sistema vestibular

produz uma resposta agrave movimentaccedilatildeo cefaacutelica que eacute transmitida aos muacutesculos

extraoculares e produz o reflexo vestiacutebulo-ocular A eletronistagmografia avalia de

maneira adequada a integraccedilatildeo viacutesuo-vestibular Os compostos organofosforados

causam danos agrave sauacutede sendo a tontura um dos sintomas referidos por pessoas

expostas a estes agentes Objetivo deste estudo foi avaliar o funcionamento do

sistema vestibular de cobaias expostas ao organofosforado clorpirifoacutes de forma

aguda por meio da prova caloacuterica da eletronistagmografia A pesquisa do tipo

experimental realizou a eletronistagmografia de cobaias expostas a organofosforado

durante 10 dias consecutivos nas doses 05mgkgdia e 10mgkgdia por via

intraperitoneal e comparadas com grupo controle que recebeu administraccedilatildeo de

aacutegua destilada Foi realizada prova caloacuterica gelada (10ordmC) e comparadas as

variaacuteveis frequecircncia de aparecimento de nistagmos em 10 segundos (us) e

velocidade angular da componente lenta (ordms) Os resultados natildeo demonstraram

diferenccedila estatisticamente significativa na comparaccedilatildeo das variaacuteveis entre os

grupos Conclui-se que nas doses testadas o agrotoacutexico organofosforado clorpirifoacutes

natildeo causou danos funcionais detectaacuteveis na prova caloacuterica



31

Abstract

Maintaining body balance is held by the joint operation of the vestibular

system vision and proprioceptive system The vestibular system produces a

response to head movement is transmitted to the extraocular muscles and produces

the vestibular-ocular reflex Electronystagmography adequately assesses visual-

vestibular integration Organophosphate compounds cause health damage being one

of the dizziness symptoms reported by people exposed to these agents This study

aimed to assess the functioning of the vestibular system of guinea pigs exposed to

the organophosphate chlorpyrifos acutely through caloric electronystagmography

The research conducted an experimental electronystagmography of guinea pigs

exposed to organophosphate for 10 consecutive days at doses 05 mg kg day and

10 mg kg day intraperitoneally and compared with a control group that received

distilled water administration We performed caloric ice (10 ordm C) and compared the

variables frequency of appearance of nystagmus in 10 seconds (u s) and angular

velocity of the slow component (ordm s) The results showed no statistically significant

difference in the comparison of variables between groups We conclude that the

tested doses of the pesticide organophosphate chlorpyrifos caused no detectable

functional damage in the caloric test


Pesticides Toxicity

32

Introduccedilatildeo

O equiliacutebrio corporal eacute mantido pelo funcionamento conjunto de trecircs

estruturas o sistema vestibular o sistema visual e o sistema proprioceptivo A

manutenccedilatildeo do equiliacutebrio geral eacute realizada pelo sistema vestibular esse sistema

detecta as sensaccedilotildees de equiliacutebrio auxiliando na coordenaccedilatildeo dos movimentos da

cabeccedila e dos olhos e nos ajustes da postura corporal Disfunccedilotildees neste sistema

podem resultar sensaccedilotildees desagradaacuteveis como vertigem naacuteusea e uma sensaccedilatildeo

de desequiliacutebrio acompanhada de movimentos incontrolaacuteveis dos olhos o nistagmo

(GUYTON 1992 BEAR CONNORS PARADISO 2002 AFIFI amp BERGMAN 2008)




de sensores de movimento os quais enviam informaccedilotildees ao sistema nervoso central

(SNC) O SNC processa esses sinais e os combina com outras informaccedilotildees

sensoriais para estimar a orientaccedilatildeo cefaacutelica (HERDMAN 2002) Sua estrutura

anatocircmica eacute composta de uma rede de tubos ossos e cacircmaras chamados labirinto

oacutesseo e dentro dele uma rede de tubos membranosos chamados labirinto

membranoso a parte funcional do sistema vestibular (GUYTON 1992)

O sistema vestibular central produz uma resposta agrave movimentaccedilatildeo cefaacutelica

que eacute transmitida aos muacutesculos extraoculares e a medula espinhal desencadeando

os reflexos vestiacutebulo-ocular (RVO) e vestiacutebulo-espinhal (RVE) O RVO gera os

movimentos dos olhos que manteacutem a visatildeo estaacutevel durante o movimento cefaacutelico O

desempenho dos reflexos eacute monitorizado pelo SNC e quando necessaacuterio eacute

reajustado (HERDMAN 2002)

A eletronistagmografia (ENG) em suas diferentes modalidades eacute a maneira

mais adequada de avaliar os achados oculares eou vestibulares Esta consiste no

registro da movimentaccedilatildeo ocular que representa o elemento principal na

investigaccedilatildeo e na avaliaccedilatildeo dos distuacuterbios vestibulares (GANANCcedilA VIEIRA

CAOVILLA 1998 MUNARO SLEIFER PEDROSO 2009)



entre as forccedilas antagocircnicas vestibulares que contribui para manter a orientaccedilatildeo dos

33

globos oculares Da mesma maneira uma patologia no sistema perifeacuterico ou em


1999) O nistagmo constitui-se no elemento fundamental de anaacutelise do RVO na

ENG As anormalidades do RVO podem ser encontradas na pesquisa da prova

caloacuterica (GANANCcedilA VIEIRA CAOVILLA 1998)

Algumas substacircncias quiacutemicas tecircm causado danos ao ser humano e ao meio

ambiente Dentre estas substacircncias encontram-se os agrotoacutexicos alguns

conhecidos por suas propriedades neurotoacutexicas satildeo frequentemente considerados

como responsaacuteveis por intoxicaccedilotildees a trabalhadores que entram em contato com

esses compostos principalmente nos paiacuteses em desenvolvimento (TEIXEIRA

AUGUSTO MORATA 2003 HOSHINO PACHECO-FERREIRA TAGUCHI

TOMITA 2008) Os agrotoacutexicos satildeo um importante fator de risco para a sauacutede

humana Estes produtos satildeo utilizados em grande escala por vaacuterios setores

produtivos e mais intensamente pelo setor agropecuaacuterio (SILVA SILVA FARIA

2005)


Dentre esses as intoxicaccedilotildees por agrotoacutexicos de uso agriacutecola totalizaram 5253

casos 1058 soacute no Sul do paiacutes regiatildeo de forte produccedilatildeo agriacutecola (SINITOX 2009)

Em 2008 os dados mostravam 806 casos na regiatildeo o que revela que os casos de

intoxicaccedilatildeo vecircm crescendo O difiacutecil acesso agraves informaccedilotildees e agrave educaccedilatildeo por parte

dos usuaacuterios desses produtos bem como o baixo controle sobre sua produccedilatildeo

distribuiccedilatildeo e utilizaccedilatildeo satildeo alguns dos principais determinantes na constituiccedilatildeo

dessa situaccedilatildeo como um dos principais desafios de sauacutede puacuteblica

Em 2008 o Brasil tornou-se o maior consumidor mundial de venenos

agriacutecolas neste ano as vendas com agrotoacutexicos no paiacutes significaram 7125 bilhotildees

de doacutelares No total os herbicidas representaram cerca de 45 das vendas os

inseticidas 29 e os fungicidas 21(GUAZZELLI 2009 IBAMA 2010)

Entre os inseticidas encontramos os organofosforados (OF) que satildeo

compostos anticolinesteraacutesicos que causam variado grau de toxicidade para o ser

humano Em razatildeo do benefiacutecio do agrotoacutexico para o sucesso do plantio o

trabalhador tem a tendecircncia de subestimar seus efeitos na sauacutede de quem entra em

contato com o produto (KOumlRBES 2009)

Diversas vezes essa exposiccedilatildeo causa alteraccedilotildees cliacutenicas que

silenciosamente alteram a vida do trabalhador Sabe-se que a exposiccedilatildeo por um

34

curto periacuteodo causa os chamados efeitos agudos Este quadro varia de intensidade



dificuldade respiratoacuteria hemorragia convulsotildees coma e morte A tontura eacute um

sintoma de destaque considerada uma das expressotildees cliacutenicas da exposiccedilatildeo aos

agrotoacutexicos (SILVA SILVA FARIA 2005 HOSHINO PACHECO-FERREIRA

TAGUCHI TOMITA 2008)







O objetivo da pesquisa foi avaliar o funcionamento do sistema vestibular de

cobaias expostas ao organofosforado clorpirifoacutes de forma aguda por meio da

eletronistagmografia

Materiais e meacutetodos

A pesquisa caracterizou-se como do tipo experimental de corte prospectivo

(SEVERINO 2008) A mesma foi realizada de acordo com os Princiacutepios Eacuteticos na

Experimental Animal adotados pela Sociedade Brasileira de Ciecircncia em Animais de

Laboratoacuterio (SBCAL) e com a Lei nordm 11794 de 8 de outubro de 2008 do Conselho

Nacional de Controle de Experimentaccedilatildeo Animal (CONCEA) que estabelece os

procedimentos para o uso cientiacutefico de animais e foi aprovada pela Comissatildeo de

Eacutetica em Experimentaccedilatildeo Animal da Faculdade de Medicina de Ribeiratildeo Preto da

Universidade de Satildeo Paulo sob o nordm 1352011 em 08 de novembro de 2011

Para este estudo foram utilizadas 18 cobaias albinas machos espeacutecie Cavia

porcellus linhagem inglesa com peso entre 300 e 500g com Reflexo de Preyer

presente e que natildeo apresentavam sinais de otite externa eou meacutedia ausecircncia de

perfuraccedilatildeo timpacircnica agrave otoscopia O Reflexo de Preyer eacute avaliado por observaccedilatildeo de

pequenos movimentos de contratura do pavilhatildeo auricular da cobaia quando a

mesma eacute estimulada com sons de pequena e meacutedia intensidade Tal reflexo eacute

35

utilizado para avaliar a funccedilatildeo auditiva em roedores (JERO COLING LALWANI

2001)

Os animais ficaram alojados no Bioteacuterio do Laboratoacuterio de Cirurgia

Experimental do Departamento de Cirurgia da Faculdade de Medicina-USP em

gaiolas coletivas de acordo com o grupo com maravalha em regime claroescuro de

12 horas temperatura e umidade controladas raccedilatildeo proacutepria e aacutegua ad libitum

Para a intoxicaccedilatildeo as cobaias receberam pela via intraperitoneal o agrotoacutexico

OF Pyrinex 480 CEreg comercializado pela Milenia Agrociecircncias SA que tem como

princiacutepio ativo o clorpirifoacutes O Pyrinex 480 CEreg eacute um inseticida OF com accedilatildeo de

contato e ingestatildeo recomendado para o controle de pragas nas culturas de algodatildeo

batata cafeacute citros feijatildeo maccedilatilde milho soja tomate rasteiro para fins industriais e

trigo O produto estaacute registrado no Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e

Abastecimento ndash MAPA sob nordm 09298

A via intraperitoneal foi a via escolhida por garantir a absorccedilatildeo da dose jaacute

que por outras via corria-se o risco de natildeo sabermos a exata dose absorvida

As cobaias foram divididas em trecircs grupos no grupo I (controle) foi realizada

a administraccedilatildeo de aacutegua destilada intraperitoneal em dose uacutenica diaacuteria no mesmo

volume correspondente aacute dose de agrotoacutexico para o peso da cobaia no grupo II foi

administrado o agrotoacutexico por via intraperitoneal na dose uacutenica diaacuteria de 05

mgkgdia e no grupo III foi administrado o agrotoacutexico por via intraperitoneal na dose

uacutenica diaacuteria de 10 mgkgdia todos durante dez dias consecutivos As cobaias

tiveram seu peso controlado diariamente para o caacutelculo adequado da dose do

agrotoacutexico a ser utilizada O controle era composto por cinco cobaias e os grupos

tratados II e III por seis e sete cobaias respectivamente

Para o manejo dos animais e administraccedilatildeo do agrotoacutexico foram utilizados os

equipamentos de proteccedilatildeo individual recomendados na bula do produto

O nuacutemero de cobaias por grupo foi definido de acordo com as normas da

Agecircncia Nacional de Vigilacircncia Sanitaacuteria (ANVISA 2009) para realizaccedilatildeo de estudos

toxicoloacutegicos sendo o miacutenimo de cinco animais para cada dose testada no

experimento

A dose do agrotoacutexico escolhido foi baseada na DL 50 oral para ratos do

Pyrinex 480 CEreg encontrada na bula do produto que eacute de 300 mgKg e considerou

as normas da ANVISA de natildeo exceder 80 da DL 50

36

A avaliaccedilatildeo funcional selecionada para ser realizada neste estudo foi a prova

caloacuterica gelada (aacutegua agrave 10ordmC) conforme o protocolo de Marseillan Grellet e

Colafeacutemina (1969) dentro do espectro do exame de ENG As variaacuteveis selecionadas

foram frequecircncia de aparecimento de nistagmos (Fn) em 10 segundos de registro

mensurada em unidades por segundo (us) e velocidade angular da componente

lenta (VACL) medida em graus por segundo (ordms)

A ENG foi realizada 24 horas antes de se iniciar o experimento e 24 horas

apoacutes a uacuteltima administraccedilatildeo do agrotoacutexico e de aacutegua destilada no grupo controle O

primeiro exame foi realizado para que pudesse ser usado como paracircmetro de

comparaccedilatildeo da situaccedilatildeo do sistema vestibular das cobaias previamente a

intoxicaccedilatildeo e poacutes-intoxicaccedilatildeo O segundo procedimento foi realizado para avaliaccedilatildeo

do efeito do agrotoacutexico no sistema vestibular destas cobaias atraveacutes de uma prova

funcional analisando assim o reflexo vestiacutebulo-ocular das mesmas

A teacutecnica a ser utilizada para o estudo das respostas vestibulares ao estiacutemulo

teacutermico foi a desenvolvida por Marseillan Grellet e Colafeacutemina em 1969 Essa

teacutecnica baseia-se no registro eletronistagmograacutefico das reaccedilotildees oculares ao

estiacutemulo teacutermico em cobaias preparadas para experimentos crocircnicos com eletrodos

permanentes (OLIVEIRA CICILINI SOUZA ANDRADE 1979) Todas as cobaias

selecionadas foram submetidas a um procedimento ciruacutergico asseacuteptico para a

implantaccedilatildeo de um eletrodo subcutacircneo na regiatildeo frontal e dois eletrodos

subcutacircneos nas regiotildees periorbiculares (esquerda e direita) sob anestesia com

cloridrato de Xilazina 2 (05 mlKg ndash Dopaserreg Laboratoacuterios Calier do Brasil Ltda)

e cloridrato de Quetamina 10 (09mlKg - Ketaminreg 50mgml Laboratoacuterio

Cristaacutelia) via intramuscular

Apoacutes a cicatrizaccedilatildeo do ferimento ciruacutergico as cobaias foram contidas em

caixas adequadas para o registro do nistagmo provocado pela irrigaccedilatildeo com 20 ml

de aacutegua gelada a 10ordmC no conduto auditivo externo

Concluiacutedos os dez dias de administraccedilatildeo do agrotoacutexico as cobaias foram

submetidas a um novo registro do nistagmo (Figura 1) provocado novamente pela

irrigaccedilatildeo do conduto auditivo externo com 20 ml de aacutegua agrave 10ordmC

Para o registro do exame foi utilizado o equipamento Nistagmocilreg

monocanal que eacute um eletronistagmoacutegrafo para registro de nistagmos provocados

pelo meacutetodo de RALPAC (estimulaccedilatildeo teacutermica a ar ou aacutegua) eacute portaacutetil e de simples

manejo constituiacutedo por um sistema de registro acrescido de preacute-amplificadores

37

especiais acoplados por meio de capacitores que registram variaccedilotildees dos potenciais

coacuterneo-retinianos mas que natildeo registram os valores absolutos desses potenciais

Foram utilizados dois eleacutetrodos ativos um em cada canto externo das

cavidades orbitaacuterias para registro dos movimentos horizontais e um eletrodo

indiferente na linha meacutedia nasal a 2 cm da ponta nasal

Os preacute-amplificadores foram regulados para uma excursatildeo de 2 cm da pena

inscritora no papel de registro Os eleacutetrodos satildeo polarizados de maneira que o olhar

para a direita ocasione o desvio da pena para cima e o olhar para a esquerda cause

um desvio da pena inscritora para baixo

A calibraccedilatildeo dos movimentos deu-se a partir da estabilizaccedilatildeo da pena e

permanecircncia da cobaia com a cabeccedila em posiccedilatildeo estaacutevel

Figura 1 ndash Fotografia dos equipamentos e registro da Eletronistagmografia

38

Figura 2 ndash Fotografia do registro dos nistagmos para a direita de cobaia do Grupo Controle estimulo

oferecido na orelha esquerda

Os valores da frequecircncia de aparecimento de nistagmo (Fn) foram obtidos a

partir da contagem do nuacutemero de nistagmos presentes em 10 segundos de registro

do exame com base na velocidade do papel no equipamento utilizado de 25 mms

Para a obtenccedilatildeo dos valores da velocidade angular da componente lenta

(VACL) foram realizadas trecircs medidas de nistagmos com bases iguais em trecircs

locais diferentes no iniacutecio meio e fim do registro O valor considerado para VACL

para cada orelha de cobaia foi a meacutedia entre os nove valores mensurados

Os dados encontrados foram tratados estatisticamente atraveacutes do programa

Statiacutestica versatildeo 90 Os dados coletados foram submetidos ao teste de

normalidade de Lilliefors Para os dados normais intragrupos foi utilizado o teste t de

Student para variaacuteveis dependentes Jaacute para os dados intergrupos foi realizado o

teste ANOVA Foi considerado o niacutevel de significacircncia de 5

Resultados

Os resultados da ENG quando comparados intragrupos demonstraram que

natildeo existe diferenccedila significante entre as orelhas em nenhum dos grupos o que nos

mostra que existe semelhanccedila entre as orelhas tanto na variaacutevel Fn como na

variaacutevel VACL O teste de comparaccedilatildeo no momento preacute-experimento entre os grupo

39

I II e III demonstrou que natildeo existia diferenccedila significativa entre eles portanto os

grupos eram homogecircneos

Tais testes foram realizados para garantir a homogeneidade entre as orelhas

e entre os grupos Este fato permite-nos comparar os resultados no momento poacutes-

experimento considerando que antes eles eram estatisticamente semelhantes

As meacutedias das Fn e da VACL para as orelhas dos animais em cada grupo

estatildeo explicitadas nas Tabelas 1 e 2

Tabela 1- Comparaccedilatildeo dos valores meacutedios das frequecircncias do aparecimento de nistagmos (us)

entre o preacute e poacutes-experimento dos Grupos I II e III ()

Grupo Preacute Experimento

Poacutes Experimento

p-valor

G I (n= 5)

OD 518plusmn112 408plusmn129 028

OE 478plusmn070 428plusmn139 037

G II (n= 6)


OE

463plusmn098 408plusmn130 020

G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037

() Os dados foram apresentados como a meacutedia plusmn desvio padratildeo

OD - orelha direita OE - orelha esquerda n - nuacutemero de cobaias us - unidadesegundo

Teste intragrupo ndash Teste t de Student Teste intergrupos - ANOVA

40

Tabela 2 - Comparaccedilatildeo dos valores meacutedios das velocidades angulares da componente lenta (degs)

entre o preacute e poacutes-experimento dos Grupos I II e III()



p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054


OD - orelha direita OE - orelha esquerda n - nuacutemero de cobaias ordm s - grau por segundo

Teste intragrupo ndash Teste t de Student Teste intergrupos ndash ANOVA

A comparaccedilatildeo entre os grupos no poacutes-experimento natildeo demonstrou diferenccedila

estatisticamente significante nas variaacuteveis Fn e VACL

Discussatildeo

Pesquisadores advertem que a grande maioria dos acidentes graves e fatais

causados por agrotoacutexicos incluindo a exposiccedilatildeo acidental profissional e a ingestatildeo

em caso de suiciacutedio eacute devida aos inseticidas OF e carbamatos altamente toacutexicos

(MENDES 1995 MORAES 1999)

Este fato revela que o agrotoacutexico OF clorpirifoacutes nas doses administradas de

05mgkgdia e 1mgkgdia durante 10 dias natildeo ocasionou dano que fosse detectado

em exame funcional do sistema vestibular das cobaias

Diversos estudos foram realizados com o objetivo de avaliar o impacto do uso

de agrotoacutexicos OF na sauacutede humana Tais estudos utilizaram como metodologia a

entrevista com trabalhadores rurais expostos a estes compostos (MANJABOSCO

MORATA MARQUES 2004 ARAUacuteJO et al 2007 LISBOA SENA DUTRA 2007

FARIA ROSA FACCHINI 2009 HOSHINO et al 2009 MAGALHAtildeES 2010

41

AZEVEDO 2010 SOUZA 2011) Os resultados mostraram a tontura como sendo

um sintoma recorrente referido por esses trabalhadores O que sugere um

comprometimento funcional poreacutem neste estudo natildeo se encontrou diferenccedila

significante entre as cobaias intoxicadas e as natildeo intoxicadas atraveacutes da prova

caloacuterica

Ainda com a ressalva de que a entrevista com trabalhadores eacute uma avaliaccedilatildeo

subjetiva e portanto natildeo possui a mesma confiabilidade do exame funcional

realizado neste estudo Exame este que confere um resultado mensuraacutevel do efeito

causado pela exposiccedilatildeo agrave substacircncia em questatildeo Em contraponto com esta

pesquisa os estudos referidos avaliam os sintomas crocircnicos enquanto a amostra

dessa pesquisa foi exposta por um periacuteodo breve onde se avaliou o efeito agudo e

em animais

O estudo que avaliou as alteraccedilotildees morfoloacutegicas do aparelho vestiacutebulo-

coclear de cobaias expostas a OF encontrou evidecircncias de alteraccedilotildees atraveacutes da

microscopia eletrocircnica de varredura nas coacutecleas saacuteculos e utriacuteculos Este resultado

que evidencia uma alteraccedilatildeo morfoloacutegica pode sugerir um distuacuterbio funcional

(KOumlRBES 2010) No entanto na presente pesquisa ainda natildeo houve manifestaccedilatildeo

de sintomas funcionais isto pode ter ocorrido em virtude da diferenccedila do princiacutepio

ativo testado apesar de pertencer agrave classe dos compostos organofosforados

Os resultados da presente pesquisa natildeo mostraram diferenccedila estatiacutestica

significativa entre as variaacuteveis pesquisadas Isto estaacute em desacordo com outros

pesquisadores que encontraram alteraccedilotildees funcionais em testes sensoacuterio-motores

em seres humanos como mudanccedila na medida de oscilaccedilatildeo postural com olhos

fechados e em superfiacutecie macia sugerindo efeito subcliacutenico do agrotoacutexico sob os

sistemas vestibular e proprioceptivo (HOSHINO et al 2008) Tambeacutem discorda da

pesquisa que analisou a Vectoeletronistagmografia de trabalhadores expostos a OF

cronicamente que encontraram alteraccedilotildees em 50 dos casos analisados estas

alteraccedilotildees traduziram-se em hiperreflexia na prova caloacuterica da VENG entretanto

aqui avaliamos os efeitos agudos deste organofosforado (DICK STEENLAND

KRIEG HINES 2001)

O estudo com trabalhadores rurais expostos de forma aguda torna-se difiacutecil jaacute

que a grande maioria destes sujeitos esteve anteriormente exposta a estas

substacircncias por longos periacuteodos Outra limitante do estudo com seres humanos eacute

que raramente os mesmos estatildeo expostos a um soacute agente o que dificulta a

42

avaliaccedilatildeo dos efeitos especiacuteficos de um uacutenico princiacutepio ativo Por tal motivo o

estudo experimental torna-se uma alternativa de se pesquisar o efeito isolado de um

princiacutepio ativo

Os achados dessa pesquisa satildeo similares agravequeles encontrados em pesquisa

realizada na China paiacutes de forte produccedilatildeo agriacutecola que utilizou como amostra 301

crianccedilas com idade entre 23-25 meses expostas a OF Neste estudo evidenciou-se a

presenccedila de altos niacuteveis de metaboacutelitos OF nos testes de urina poreacutem natildeo

encontrou relaccedilatildeo entre este dado e os niacuteveis de desenvolvimento infantil

(GUODONG et al 2012) Este fato reforccedila a ideia de que mesmo na presenccedila do

composto no organismo muitas vezes natildeo encontramos correlaccedilatildeo funcional com

este achado

Exposiccedilotildees agudas a organofosforados podem natildeo ser capazes de

representar alteraccedilotildees em exames funcionais como mostra o estudo que avaliou os

efeitos destes compostos no sistema auditivo de cobaias A pesquisa encontrou

alteraccedilotildees nas ceacutelulas ciliadas externas da coacuteclea poacutes-intoxicaccedilatildeo aguda por OF

poreacutem esta lesatildeo morfoloacutegica natildeo se traduziu em alteraccedilatildeo funcional no sistema

auditivo perifeacuterico das cobaias avaliadas pelos testes de Emissotildees Otoacuacutesticas

Produto de Distorccedilatildeo e potencial Evocado Auditivo de Tronco Encefaacutelico (KOumlRBES

2009)

O periacuteodo agudo de exposiccedilatildeo e avaliaccedilatildeo pode ter sido o fator determinante

dos resultados natildeo significativos neste estudo apontando para a necessidade de se

realizar estudos com diferentes doses e por um periacuteodo de tempo mais prolongado

para que se possa determinar com maior seguranccedila a utilizaccedilatildeo desta substacircncia

Conclusatildeo

O agrotoacutexico organofosforado clorpirifoacutes nas doses testadas natildeo demonstrou

dano funcional ao sistema vestibular das cobaias intoxicadas de forma aguda

Agradecimentos

Agradecemos agraves equipes do Laboratoacuterio de Teacutecnica Ciruacutergica e Cirurgia

Experimental do Departamento de Cirurgia e Anatomia do Laboratoacuterio de

Microscopia Eletrocircnica do Departamento de Biologia Celular e Molecular e

43

Bioagentes Patogecircnicos da Faculdade de Medicina de Ribeiratildeo Preto Universidade

de Satildeo Paulo pela colaboraccedilatildeo nesta pesquisa e a CAPES pelo apoio financeiro

Referecircncias Bibliograacuteficas

AFIFI AK BERGMAN RA Neuroanatomia Funcional texto e atlas 2ordf ed Satildeo Paulo Roca 2008p 354 ANVISA ndash Agecircncia Nacional de Vigilacircncia Sanitaacuteria Metodologias utilizadas para a realizaccedilatildeo de estudos toxicoloacutegicos Brasiacutelia 2009 Disponiacutevel em wwwanvisagovbr ARAUacuteJO AJet al Exposiccedilatildeo muacuteltipla a agrotoacutexicos e efeitos agrave sauacutede estudo transversal em amostra de 102 trabalhadores rurais Nova Friburgo RJCiecircnc sauacutede coletiva Rio de Janeiro vol12 nordm1 JanMar 2007 Disponiacutevel emlthttpwwwscielobrscielophppid=S141381232007000100015ampscript=sci_arttextgt AZEVEDO K A A Neurotoxicidade perinatal por caacutedmio em ratos Wistar e interaccedilatildeo com clorpirifoacutes Tese de doutorado em Cliacutenica Veterinaacuteria UNESP 2009 BEAR MF CONNORS B W PARADISO MA Neurociecircncias DesvendandoSistema Nervoso 2ordf ed Porto Alegre Artmed 2002 p 350-395 DICK RB STEENLAND K KRIEG EF HINES CJ Evaluation of acute sensoryndashmotor effects and test sensitivity using termiticide workers exposed to chlorpyrifos Neurotoxicology and Teratology Vol 23 issue 4 July-August 2001 Pages 381-393 Disponiacutevelem lthttpwwwsciencedirectcomsciencegt

FARIA NMX ROSA JAR FACCHINI LA Intoxicaccedilotildees por agrotoacutexicos entre trabalhadores rurais de fruticultura Bento Gonccedilalves RS Rev Sauacutede Puacuteblica Satildeo Paulo vol43 no2 Apr 2009 Disponiacutevel em lthttpwwwscielobrpdfrsp2009nahead7200pdfgt

GANANCcedilA M M VIEIRA R M CAOVILLA H H Princiacutepios de Otoneurologia Volume 1 Satildeo Paulo Atheneu 1998 p1-3 23-43 GUAZZELLI MJ Brasil o maior consumidor de agrotoacutexicos [Entrevista concedida IHU On-line Instituto HumanitasUnisinos ndash IHU da Universidade do Vale

44

do Rio dos Sinos ndashUnisinos em Satildeo Leopoldo RS] Junho 2009 Disponiacutevel em lthttpwwwecodebatecombr20090609brasil-o-maior-consumidor-de-agrotoxicos-entrevista-especial-com-maria-jose-guazzelligt GUODONG D PEI W YING T JUN Z YU G XIAOJIN W et al Organophosphate pesticide exposure and neurodevelopment in young Shanghai children EnvironSci Technol Mar 2012 46(5) 2911-7 GUYTON A C Tratado de Fisiologia Meacutedica 8 ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 1992 p 583-548 HERDMAN S J Reabilitaccedilatildeo Vestibular 2ordf ed Barueri Manole 2002 p 3-24 HOSHINO A C H et al Estudo da ototoxicidade em trabalhadores expostos a organofosforadosRev Bras Otorrinolaringol Satildeo Paulovol74 no6 NovDez 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwscielobrscielophpscript=sci_arttextamppid=S003472992008000600015gt HOSHINO A C H et al A auto-percepccedilatildeo da sauacutede auditiva e vestibular de trabalhadores expostos a organofosforados Rev CEFAC 2009 Out-Dez 11(4)681-687 Disponiacutevel em httpwwwscielobrscielophppid=S1516-18462009000800017ampscript=sci_abstractamptlng=pt IBAMA - Instituto Brasileiro de Meio Ambiente e Recursos Naturais Renovaacuteveis Produtos agrotoacutexicos e afins comercializados em 2009 no Brasil uma abordagem ambiental Rafaela Maciel Rebelo et al ndash Brasiacutelia Ibama 2010 JERO J COLING D E LALWANI A K The use of Preyers reflex inevaluation of hearing in miceActaOtolaryngol 121(5) 585-589 2001 KOumlRBES D Toxicidade de agrotoacutexico organofosforado no sistema auditivo perifeacuterico de cobaias estudo anatocircmico e funcional Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana) UFSM 2009 KOumlRBES D SILVEIRA AF HYPPOLITO MA MUNARO G Ototoxicidade por organofosforados descriccedilatildeo dos aspectos ultraestruturais do sistema vestibulococlear de cobaias Braz J Otorhinolaryngol 201076(2)238-44 Disponiacutevel em lthttpwwwscielobrscielophpscript=sci_arttextamppid=S1808-86942010000200015gt

45

LISBOA R SENA J DUTRA T Uso de agrotoacutexicos na produccedilatildeo de hortaliccedilas da Bacia Hidrograacutefica do Natuba afluente do Tapacuraacute ndash PE e consequecircncias sobre o meio ambiente e sauacutede dos agricultores Artigo apresentado no II Congresso de Pesquisa e Inovaccedilatildeo da Rede Norte e Nordeste de Educaccedilatildeo Tecnoloacutegica Joatildeo Pessoa PB 2007 MAGALHAtildeES M A S Exposiccedilatildeo A Agrotoacutexicos Na Atividade Agriacutecola Um Estudo De Percepccedilatildeo De Riscos Aacute Sauacutede Dos Trabalhadores Rurais No Distrito De Pau Ferro ndash Salgueiro ndash PE (Dissertaccedilatildeo) Mestrado Profissional em Sauacutede Puacuteblica do Centro de Pesquisa Aggeu MagalhatildeesRecife Fundaccedilatildeo Osvaldo Cruz 2010 MANJABOSCO C W MORATA T C MARQUES J M Perfil Audiomeacutetrico de Trabalhadores Agriacutecolas Arq Otorrinolaringol Satildeo Paulo v8 n4 p 285-295 2004 Disponiacutevel emlthttpwwwarquivosdeorlorgbrconteudoacervo_portaspid=293gt MENDES R Patologia do Trabalho Rio de Janeiro Athneu 1995 p 504 MAPA - MINISTEacuteRIO DA AGRICULTURA PECUAacuteRIA E ABASTECIMENTO Disponiacutevel em lthttpwwwagriculturagovbrgt MORAES ACL Contribuiccedilatildeo para o estudo da intoxicaccedilatildeo humana por carbamatos o problema do ldquochumbinhordquo no Rio de Janeiro Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Sauacutede Puacuteblica) - FIOCRUZ 1999 MUNARO G SLEIFER P PEDROSO F S Anaacutelise da influecircncia do nistagmo espontacircneo e preacute-caloacuterico na Vectoeletronistagmografia Rev CEFAC Vol11 nordm 2 Satildeo Paulo AprJun 2009 Disponiacutevel emlthttpwwwscielobrscielophpscript=sci_arttextamppid=S151618462009000200019gt OLIVEIRA J A A CICILINI G A SOUZA M L ANDRADE M H Efeitos do aacutecido etacriacutenico sobre o sistema vestibular Rev Bras de Otorrinolaringol JanAbr 1979 45(1) p 8-16 PESSOcircA K S Avaliaccedilatildeo Otoneuroloacutegica Monografia (Especializaccedilatildeo em Audiologia Cliacutenica) ndash CEFAC Rio de Janeiro 1999 SEVERINO A J Metodologia Cientiacutefica Satildeo Paulo Cortez 2008

46

SILVA J M SILVA E N FARIA H P PINHEIRO T M M Agrotoacutexico e trabalho uma combinaccedilatildeo perigosa para a sauacutede do trabalhador ruralCiecircncia e Sauacutede Coletiva 10(4)891-903 2005 Disponiacutevel em httpwwwscielobrscielophpscript=sci_arttextamppid=S141381232005000400013 SINITOX - Sistema Nacional de Informaccedilotildees Toacutexico-Farmacoloacutegicas 2009 Disponiacutevel em lthttpwwwfiocruzbrsinitoxgt SOUZA J L N C O uso de agrotoacutexicos entre produtores de hortaliccedilas na localidade rural de Passo do Vigaacuterio ViamatildeoRS (Trabalho de Conclusatildeo de Curso) Graduaccedilatildeo Tecnoloacutegico em Planejamento e Gestatildeo para o Desenvolvimento Rural ndash PLAGEDER da Faculdade de Ciecircncias Econocircmicas Balneaacuterio Pinhal UFRGS 2011 TEIXEIRA CF AUGUSTO LGS MORATA TC Sauacutede auditiva de trabalhadores expostos a ruiacutedo e inseticidas Rev Sauacutede Puacuteblica200337(4)417-23 Disponiacutevel emlthttpwwwscielosporgpdfrspv37n416775pdfgt

47

4 ARTIGO 2

ANAacuteLISE MORFOLOacuteGICA DO SISTEMA VESTIBULAR DE COBAIAS

INTOXICADAS POR ORGANOFOSFORADO

Morphological Analysis of Vestibular System of Guinea Pigs Poisoned to

Organophosphate

Liacutecia Assunccedilatildeo Cogo1 Adriana de Andrade Batista Murashima2 Valdete Alves









3Fonoaudioacuteloga Professora - Doutora Adjunta do Departamento de Fonoaudiologia


valdetevhotmailcom

4Meacutedico Otorrinolaringologista Professor-Doutor Docente do Departamento de



mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

48





Telefone 55- 99484920




49

Resumo

O sistema vestibular eacute responsaacutevel pelo equiliacutebrio corporal Existem

substacircncias que o danificam causando tontura Estas satildeo chamadas

vestibulotoacutexicas Os agrotoacutexicos tornaram-se objeto de investigaccedilatildeo da ototoxicidade

a partir de pesquisas que apontaram a tontura como um sintoma recorrente entre as

queixas de produtores rurais O objetivo constitui-se em avaliar a histopatologia do

sistema vestibular de cobaias expostas a organofosforados identificando os efeitos

destes compostos nesse sistema O estudo eacute do tipo experimental Foram utilizadas

18 cobaias sendo seis intoxicadas com organofosforado clorpirifoacutes nas doses de 05

mgkgdia sete na dose de 1mgkgdia e grupo controle composto por cinco cobaias

expostas a aacutegua destilada durante 10 dias consecutivos Posteriormente realizou-se

a contagem dos tufos ciliares nas maacuteculas dos saacuteculos e utriacuteculos atraveacutes

Microscopia Eletrocircnica de Varredura Na comparaccedilatildeo dos dados intergrupos para a

variaacutevel saacuteculo realizou-se o Teste ANOVA one-way que resultou em p= 00569 jaacute

para a variaacutevel utriacuteculo utilizou-se o Teste Kruskal-Wallis que apresentou como

resultado p= 08958 revelando natildeo haver diferenccedila entre os grupos em ambas as

variaacuteveis Conclui-se que a anaacutelise histopatoloacutegica do sistema vestibular de cobaias

expostas agudamente ao agrotoacutexico organofosforado natildeo demonstrou diferenccedila

para a quantidade de tufos ciliares nas maacuteculas dos saacuteculos e utriacuteculos nas doses

testadas neste experimento


PraguicidaToxicidade

50

Abstract

The vestibular system is responsible for body balance There are substances

that damage causing dizziness These are called vestibulotoxicas Pesticides have

become the object of investigation of ototoxicity from research that showed dizziness

as a symptom of recurrent complaints among farmers The objective is to evaluate

the histopathology in vestibular system of guinea pigs exposed to organophosphates

identifying the effects of these compounds in this system The study is the

experimental type 18 guinea pigs were used six organophosphate intoxicated with

chlorpyrifos at doses of 05 mg kg day seven dose of 1mgkgday and control

group of five guinea pigs exposed to distilled water for 10 consecutive days Later

there was the counting of ciliary tufts in macules of saccules and utricles by Scanning

Electron Microscopy In intergroup comparison of data for the variable saccule held

the one-way ANOVA test resulted in p = 00569 whereas for the variable utricle we

used the Kruskal-Wallis test showed that as a result p = 08958 revealed no

differences between groups in both variables It is concluded that the histopathologic

analysis of the vestibular system of guinea pigs acutely exposed to organophosphate

pesticides showed no difference in the amount of the ciliary tufts macules saccules

and utricles of the doses tested in this experiment


PesticidesToxicity

51


O sistema vestibular eacute constituiacutedo por trecircs partes principais um sistema

sensorial perifeacuterico um processador central e um mecanismo de resposta motora O

sistema sensorial perifeacuterico eacute composto de um conjunto de sensores do movimento

os quais enviam informaccedilotildees ao sistema nervoso central (SNC) O SNC eacute

responsaacutevel pelo processamento desses sinais e os combina com outras

informaccedilotildees sensoriais para estimar a orientaccedilatildeo cefaacutelica (HERDMAN 2002)

Este sistema perifeacuterico eacute composto de um labirinto oacutesseo e um labirinto

membranoso (GUYTON 1992) O componente membranoso eacute a parte funcional do

sistema que detecta as sensaccedilotildees de equiliacutebrio Esta contecircm trecircs canais

semicirculares saacuteculo e utriacuteculo constituindo os oacutergatildeos sensoriais vestibulares

(MARTIN 1998)


semicirculares denominadas ampolas jaacute no saacuteculo e no utriacuteculo satildeo chamadas de

maacuteculas Estas ceacutelulas satildeo sensores bioloacutegicos que convertem o deslocamento

provocado pelo movimento cefaacutelico em uma descarga neural (HERDMAN 2002)

Contudo estas propriedades mecacircnicas do labirinto vestibular conferem aos

receptores a sensaccedilatildeo de movimento As ceacutelulas ciliadas do utriacuteculo e do saacuteculo

registram o movimento linear Estes oacutergatildeos possuem um revestimento gelatinoso

sobre as ceacutelulas sensoriais das suas maacuteculas com cristais de carbonato de caacutelcio

embebidos na superfiacutecie do material gelatinoso estes repousam sobre os


pelos movimentos da cabeccedila que acabam desviando os estereociacutelios (MARTIN

1998)


uma complexa interaccedilatildeo entre o sensorial e o motor que nos previne de quedas

permite-nos adotar posturas e realizar movimentos com harmonia (GANANCcedilA

MUNHOZ CAOVILLA SILVA 2000) Quando ocorre uma alteraccedilatildeo vestibular

ocorrem sintomas de desequiliacutebrio que entre outros a tontura eacute o mais comum e o

que mais afeta a qualidade de vida do indiviacuteduo (POPPER 2001)

Existem substacircncias que tem a capacidade de danificar ou perturbar o

sistema vestibular causando tontura Tais substacircncias que influenciam

negativamente o sistema ocasionando perda da funccedilatildeo vestibular ou lesatildeo celular

52

na orelha interna satildeo chamadas de ototoacutexicas ou vestibulotoacutexicas (JOHNSON

1993) O grau com que esta substacircncia vai influenciar no indiviacuteduo depende da

predisposiccedilatildeo individual da dose administrada do tempo de duraccedilatildeo da via de

administraccedilatildeo da idade da tendecircncia familiar eou de eventual dano preacutevio agrave orelha

interna (ZOCOLI REICHOW ZOCOLI 2003)

Diversas substacircncias ototoacutexicas vecircm sendo estudadas dentre elas antibioacuteticos

aminoglicosiacutedeos aspartame aacutecido saliciacutelico medicaccedilotildees oncoloacutegicas agrotoacutexicos

entre outros

Os agrotoacutexicos tornaram-se objeto de investigaccedilatildeo na linha de ototoxicidade a

partir de pesquisas realizadas com produtores rurais que apontaram a tontura eou

vertigem como sendo um sintoma recorrente entre as queixas desta populaccedilatildeo

(DICK STEENLAND KRIEG HINES 2001 ARAUacuteJO et al 2007 HOSHINO et al

2008 FARIA ROSA FACCHINI 2009)

As pesquisas com seres humanos permitem-nos identificar os sintomas

poreacutem natildeo nos permitem avaliar o impacto morfoloacutegico que estes sintomas causam

no sistema vestibular do indiviacuteduo Por isso o objetivo desta pesquisa constitui-se

em analisar a histopatologia do sistema vestibular de cobaias expostas a

organofosforados identificando os efeitos destes compostos nesse sistema

Materiais e Meacutetodos

Esta pesquisa foi submetida agrave Comissatildeo de Eacutetica em Experimentaccedilatildeo Animal

(CETEA) da FMRP-USP aprovada sob protocolo nuacutemero 1352011 (Anexo 1) e esta

de acordo com os Princiacutepios Eacuteticos na Experimentaccedilatildeo Animal adotados pelo

Coleacutegio Brasileiro de Experimentaccedilatildeo Animal (COBEA)

No presente estudo foram utilizadas dezoito cobaias albinas adultas machos

da espeacutecie Cavia porcellus selecionadas no Bioteacuterio Central da Universidade de Satildeo

Paulo Campus de Ribeiratildeo Preto com peso entre 300 e 500 gramas Foram

incluiacutedas no estudo as que apresentaram Reflexo de Preyer presente reflexo este

avaliado por observaccedilatildeo de pequenos movimentos de contratura do pavilhatildeo

auricular da cobaia quando a mesma eacute estimulada com sons de pequena e meacutedia

intensidade Tal reflexo eacute utilizado para avaliar a funccedilatildeo auditiva em roedores

(JERO COLING LALWANI 2001) Na seleccedilatildeo inicial as cobaias foram avaliadas e

53

submetidas agrave otoscopia manual Natildeo foram incluiacutedas no experimento aquelas que

apresentaram sinais de otite externa eou meacutedia e perfuraccedilatildeo timpacircnica

Os animais foram mantidos no Bioteacuterio do Laboratoacuterio de Cirurgia

Experimental do Departamento de Cirurgia e Anatomia da Faculdade de Medicina de

Ribeiratildeo Preto da Universidade de Satildeo Paulo (FMRP-USP) em gaiolas coletivas

separadas de acordo com o grupo experimental com maravalha em regime

claroescuro de 12 horas raccedilatildeo proacutepria e aacutegua ad libitum

Para realizaccedilatildeo do estudo as cobaias foram divididas em trecircs grupos sendo o

grupo I o controle

-Grupo I cinco cobaias com administraccedilatildeo de aacutegua destilada intraperitoneal

em dose uacutenica diaacuteria no mesmo volume correspondente agrave dose de agrotoacutexico para

o peso da cobaia durante 10 dias

-Grupo II seis cobaias com administraccedilatildeo intraperitoneal de agrotoacutexico na

dose uacutenica diaacuteria de 05 mgkgdia durante 10 dias consecutivos

-Grupo III sete cobaias com administraccedilatildeo intraperitoneal de agrotoacutexico na

dose uacutenica diaacuteria de 1mgkgdia durante 10 dias consecutivos

As dezoito cobaias totalizavam trinta e seis orelhas considerando-se trinta e

seis saacuteculos e trinta e seis utriacuteculos




experimento

O modelo experimental escolhido foi cobaia albina pois segundo estudo de

Albuquerque et al (2009) este modelo mostrou-se o melhor animal na etapa de

microdissecccedilatildeo em comparaccedilatildeo com o rato As vantagens deste modelo estatildeo no

tamanho e rigidez do osso temporal que permite uma maior facilidade para a retirada

do material anatocircmico para anaacutelise

Para a intoxicaccedilatildeo das cobaias foi administrado o agrotoacutexico organofosforado

Pyrinex 480 CEreg comercializado pela Milenia Agrociecircncias SA O Pyrinex 480 ECreg

eacute um inseticida organofosforado com accedilatildeo de contato e ingestatildeo recomendado para

o controle de pragas nas culturas de algodatildeo batata cafeacute citros feijatildeo maccedila

milho soja tomate rasteiro para fins industriais e trigo O produto estaacute registrado no

Ministeacuterio da Agricultura Pecuaacuteria e Abastecimento ndash MAPA sob nordm 09298

54



as normas da ANVISA de natildeo exceder 80 da DL 50 As cobaias tiveram seu peso

controlado diariamente para o caacutelculo adequado da dose do agrotoacutexico a ser

utilizada

Para o manejo das cobaias e administraccedilatildeo do agrotoacutexico foram utilizados os


Apoacutes 24 horas da uacuteltima administraccedilatildeo do agrotoacutexico os animais foram

anestesiados com Tionembutal (25 mgkg) na dose 6 mgkg de peso corporal via

intraperitoneal e eutanasiados pelo meacutetodo de decapitaccedilatildeo Imediatamente apoacutes o

sacrifiacutecio do animal os ossos temporais contendo as bulas timpacircnicas foram

removidos As bulas timpacircnicas foram abertas e removeram-se os oacutergatildeos

vestibulares

Posteriormente a eutanaacutesia dos animais para dissecccedilatildeo microscoacutepica as

peccedilas anatocircmicas foram perfundidas com soluccedilatildeo de fixaccedilatildeo de glutaraldeiacutedo a 3

a 4ordmC e mantidas na soluccedilatildeo por 24 horas Atraveacutes da janela redonda foi injetada

para fixaccedilatildeo uma soluccedilatildeo de glutaraldeiacutedo a 3 em tampatildeo fosfato 01M pH = 74

por 4 horas a 4ordmC lavadas trecircs vezes por cinco minutos com o mesmo tampatildeo Em

seguida foram fixadas com tetroacutexido de oacutesmio 1 por 2 horas a 4ordmC e a seguir

submetidas agrave desidrataccedilatildeo

A desidrataccedilatildeo das estruturas foi realizada com banhos sucessivos de etanol

em concentraccedilotildees crescentes de 50 70 90 e 95 durante 10 minutos cada

em temperatura ambiente A seguir utilizou-se etanol a 100 em trecircs banhos de 20

minutos cada deixando-se as estruturas imersas no uacuteltimo banho agrave temperatura

ambiente por 12 horas A secagem da aacutegua ainda presente nas amostras apoacutes

desidrataccedilatildeo foi realizada utilizando-se o equipamento BAL-TEC ndash CPD 030 ndash

Critical Point Dryer (Balzers 40 Liechtenstein) atraveacutes do processo de ponto criacutetico

sendo as amostras transferidas para a cacircmara do aparelho e recobertas por dioacutexido

de carbono (CO2) liacutequido

Para a adequada observaccedilatildeo agrave Microscopia Eletrocircnica de Varredura (MEV)

as peccedilas dissecadas e parcialmente preparadas foram fixadas em um porta-

espeacutecime ciliacutendrico de metal com pasta condutiva de carbono Colloidal Graphite

(Electron Microscopy Sciences ndash Hatfield PA) As estruturas foram cobertas por uma

camada fina de ouro 24 quilates atraveacutes do processo de vaporizaccedilatildeo com o

55

equipamento BAL-TEC ndash SCD 050 ndash Sputter Coater (Balzers Liechtenstein)

tornando-se eletricamente condutivas

A anaacutelise morfoloacutegica das estruturas vestibulares foi realizada atraveacutes da

Microscopia Eletrocircnica de Varredura no microscoacutepio eletrocircnico JEOL Scanning

Electron Microscope - JSM 5200 Procedeu-se o registro fotograacutefico das imagens

com aumento de 3500 vezes Apoacutes o registro fotograacutefico as fotografias foram

transferidas para o software IMAGE Jreg para que se processasse a avaliaccedilatildeo

Realizou-se uma avaliaccedilatildeo microscoacutepica dos tufos ciliares das maacuteculas do

saacuteculo e do utriacuteculo bilateralmente para cada animal incluso no experimento Esta

avaliaccedilatildeo se deu por meio da contagem do nuacutemero de tufos ciliares na regiatildeo da

estriacuteola presentes por campo fotograacutefico O aumento de 3500 vezes foi padronizado

para todas as fotografias

Para a anaacutelise estatiacutestica foi obtida a meacutedia ponderada do nuacutemero de tufos de

estereociacutelios presentes em cada orelha Os oacutergatildeos vestibulares que apresentaram agrave

MEV artefatos que pudessem interferir na contagem dos tufos ciliares como lesotildees

das estruturas durante a dissecccedilatildeo ou montagem do material foram excluiacutedos do

estudo


Statiacutestica versatildeo 90 considerando-se um niacutevel de significacircncia de 5 A

normalidade dos dados foi testada pelo Teste de Lilliefors Foi realizada a anaacutelise

descritiva dos dados Conforme o resultado do teste de normalidade os dados

normais foram comparados entre grupos pelo Teste ANOVA one-way e os dados

natildeo-normais foram comparados atraveacutes do Teste Kruskal-Wallis

Resultados

Ao final das anaacutelises perderam-se seis saacuteculos e trecircs utriacuteculos os quais

foram considerados nos itens ldquonrdquo das tabelas

O Teste de Lilliefors acusou normalidade para os dados da variaacutevel saacuteculo e

natildeo-normalidade para a variaacutevel utriacuteculo Foi realizada a anaacutelise descritiva dos

dados para o nuacutemero de tufos ciliares do saacuteculo e utriacuteculo nos grupos I II e III

conforme Tabela 1

56

Tabela 1 ndash Comparaccedilatildeo dos valores meacutedios do nuacutemero de tufos ciliares do saacuteculo e do utriacuteculo entre

os Grupos I II e III ()

Grupo Meacutedia Miacutenimo Maacuteximo

G I

Saacuteculo (n = 9) 2544plusmn650 1400 3500

Utriacuteculo (n = 10) 2486plusmn351 1700 2800

G II


Utriacuteculo (n = 11)

2645plusmn450 1800 3400

G III

Saacuteculo (n = 12)


3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750

() Os dados foram apresentados como a meacutedia plusmn desvio padratildeo n ndash nuacutemero de saacuteculo e de utriacuteculo

Para comparar os dados intergrupos para a variaacutevel saacuteculo foi realizado o

Teste ANOVA one-way que resultou em p= 00569 demonstrando natildeo haver

diferenccedila entre os valores dos grupos I II e III para a variaacutevel testada Jaacute para a

variaacutevel utriacuteculo a comparaccedilatildeo entre os grupos foi analisada atraveacutes do Teste

Kruskal-Wallis que apresentou como resultado p= 08958 revelando natildeo haver

diferenccedila entre os grupos

Os resultados dos testes comparativos entre o grupo controle e as diferentes

doses de agrotoacutexico organofosforado testadas natildeo causaram danos histopatoloacutegicos

as ceacutelulas ciliadas do saacuteculo e do utriacuteculo das cobaias envolvidas neste estudo

durante o periacuteodo de dez dias quando analisadas pela MEV

Discussatildeo

A meacutedia do grupo I foi menor do que os demais mas natildeo eacute possiacutevel afirmar

que houve diferenccedila significativa entre os grupos pois as meacutedias dos grupos II e III

estatildeo de acordo com os valores meacutedios encontradas por outros autores que

realizaram MEV em cobaias utilizando em seus grupos controles aacutegua destilada

57

durante 30 dias e outro soro fisioloacutegico durante 10 dias (SILVEIRA 2011

MARQUEZINI 2011)

Os resultados da presente pesquisa natildeo evidenciaram diferenccedila estatiacutestica

significativa entre o nuacutemero de tufos ciliares dos grupos de cobaias intoxicadas com

as diferentes doses de organofosforado Isto vai de encontro aos resultados de

outros pesquisadores que avaliaram o sistema vestibular de cobaias intoxicadas por

organofosforados durante sete dias nas doses de 03 e 3mgkgdia e que

encontraram alteraccedilotildees ciliares nos saacuteculos e utriacuteculos (KOumlRBES SILVEIRA

HYPPOLITO 2010) Conveacutem ressaltar que a referida pesquisa utilizou doses e

princiacutepio ativo diferentes da atual

Os danos morfoloacutegicos em animais exposto a organofosforados vem sendo

amplamente pesquisados Estudo que avaliou de forma aguda os efeitos de um

organofosforado no sistema nervoso observou alteraccedilatildeo estrutural no cerebelo

caracterizada por apoptose nas ceacutelulas de Purkinje e dano estrutural ao

citoesqueleto dos animais sobreviventes (QUILODRAacuteN MIRANDA JIMEacuteNEZ

2006) Em pesquisa que avaliou os efeitos crocircnicos no SNC de animais intoxicados

por organofosforado foi observada a hipertrofia da camada molecular do coacutertex

cerebral e que pode levar agrave perda ou afilamento das ramificaccedilotildees neurais

(PELEGRINO et al 2006 PEREZ et al 2006) poreacutem este natildeo foi objetivo de nossa

pesquisa que avaliou tufos ciliares em ceacutelulas sensoriais das maacuteculas do saacuteculo e

utriacuteculo

Pesquisa realizada com trabalhadores rurais que entraram em contato com

organofosforado clorpirifoacutes e posteriormente realizaram testes para avaliaccedilatildeo

sensoacuterio-motora demonstraram alteraccedilotildees principalmente nas medidas de oscilaccedilatildeo

postural com os olhos fechados e em superfiacutecie macia Este resultado sugere um

efeito subcliacutenico envolvendo os sistemas proprioceptivo e vestibular (HOSHINO et

al 2008)

Avaliaccedilatildeo funcional atraveacutes da Vectoeletronistagmografia de trabalhadores

expostos a organofosforados revelou que a grande maioria dos sujeitos apresentou

alteraccedilatildeo do tipo Disfunccedilatildeo Vestibular Perifeacuterica Irritativa (ARAUacuteJO et al 2007)

Isto evidencia que o agrotoacutexico organofosforado tem potencial neuro-ototoacutexico

poreacutem natildeo se pode ainda afirmar qual a dose e o tempo de exposiccedilatildeo seguros para

estes compostos natildeo causarem danos agrave sauacutede

58

Estudos funcionais comprovam que a intoxicaccedilatildeo por agrotoacutexico causa tontura

eou vertigem em trabalhadores expostos a estes compostos (DICK STEENLAND

KRIEG HINES 2001 HOSHINO et al 2008) poreacutem ainda natildeo foi possiacutevel elucidar

a origem morfoloacutegica especiacutefica deste sintoma nem mesmo se existe uma causa

uacutenica ou esta seria multifatorial

Ainda satildeo necessaacuterios estudos que possam determinar as doses e tempo de

exposiccedilatildeo seguros para os agrotoacutexicos organofosforados Portanto vale ressaltar

que em qualquer dose a ser utilizada e em eventual contato com estes compostos

utilize-se os equipamentos de proteccedilatildeo individual indicados para tal

Conclusatildeo

A anaacutelise histopatoloacutegica do sistema vestibular de cobaias expostas de forma

aguda ao agrotoacutexico organofosforado natildeo demonstrou diferenccedila para a quantidade

de tufos ciliares nas maacuteculas dos saacuteculos e dos utriacuteculos nas doses testadas neste

experimento

Agradecimentos





de Satildeo Paulo pela colaboraccedilatildeo nesta pesquisa e a Capes pelo apoio financeiro


ALBUQUERQUE A A S ROSSATO M OLIVEIRA J A A HYPPOLITO MA Conhecimento da anatomia da orelha de cobaias e ratos e sua aplicaccedilatildeo na pesquisa otoloacutegica baacutesica Rev Bras Otorrinolaringologia Satildeo Paulo vol75 nordm1 JanFev 2009 ANVISA ndash Agecircncia Nacional de Vigilacircncia Sanitaacuteria Metodologias utilizadas para a realizaccedilatildeo de estudos toxicoloacutegicos Brasiacutelia 2009 Disponiacutevel em wwwanvisagovbr

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ARAUacuteJO AJet al Exposiccedilatildeo muacuteltipla a agrotoacutexicos e efeitos agrave sauacutede estudo transversal em amostra de 102 trabalhadores rurais Nova Friburgo RJCiecircnc sauacutede coletiva Rio de Janeiro vol12 nordm1 JanMar 2007 Disponiacutevel emlthttpwwwscielobrscielophppid=S141381232007000100015ampscript=sci_arttextgt DICK RB STEENLAND K KRIEG EF HINES CJ Evaluation of acute sensoryndashmotor effects and test sensitivity using termiticide workers exposed to chlorpyrifos Neurotoxicology and Teratology Vol 23 issue 4 July-August 2001 Pages 381-393 Disponiacutevel em lthttpwwwsciencedirectcomsciencegt


GANANCcedilA M M MUNHOZ M S L CAOVILLA H H SILVA M L G Estrateacutegias Terapecircuticas em Otoneurologia Volume 4 Satildeo Paulo Atheneu 2000 GUYTON A C Tratado de Fisiologia Meacutedica 8 ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 1992 p 583-548 HERDMAN S J Reabilitaccedilatildeo Vestibular 2ordf ed Barueri Manole 2002 p 3-24 HOSHINO A C H et al Estudo da ototoxicidade em trabalhadores expostos a organofosforadosRev Bras Otorrinolaringol Satildeo Paulovol74 no6 NovDez 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwscielobrscielophpscript=sci_arttextamppid=S003472992008000600015gt JERO J COLING D E LALWANI A K The use of Preyers reflex inevaluation of hearing in miceActaOtolaryngol 121(5) 585-589 2001 JOHNSON A C The ototoxic effect of toluene and the influence of noise acetylsalicylic acid or genotype a study in rats and mice ScandinavianAudiology 1993 (30) 1-40 KOumlRBES D SILVEIRA A F HYPPOLITO M A MUNARO G Ototoxicidade por organofosforados descriccedilatildeo dos aspectos ultraestruturais do sistema vestibulococlear de cobaias Braz J Otorhinolaryngol 201076(2)238-44

60

Disponiacutevel em lthttpwwwscielobrscielophpscript=sci_arttextamppid=S1808-86942010000200015gt MARQUEZINI R M S Ototoxicidade vestibular provocada pelo uso sistecircmico de aminoglicosiacutedeos em cobaias [Dissertaccedilatildeo] Mestrado em Ciecircncias Meacutedicas Ribeiratildeo Preto Universidade de Satildeo Paulo 2011 MARTIN JH Neuroanatomia Texto e atlas 2ordm ed Artes Meacutedicas Porto Alegre 1998 MINISTEacuteRIO DA AGRICULTURA PECUAacuteRIA E ABASTECIMENTO Disponiacutevel em lthttpwwwagriculturagovbrgt PELEGRINO JR CALORE EE SALDIVA PHN ALMDEIDA VF PERES NM VLILELA-DE-ALMEIDA L Morphometric studies of specific brain regions of rats chronically intoxicated with the organophosphate methamidophos EcotoxicolEnvironSaf 200664(2)251-5 PEREZ N M CALORE E E VILELA-DE-ALMEIDA L NARCISO E S PUGA F R Aspectos morfoloacutegicos e morfomeacutetricos do ceacuterebro de ratos na intoxicaccedilatildeo crocircnica pelo organofosforado metamidofoacutes Rev Inst Adolfo Lutz 200665(1)50-3 POPPER VM A Reabilitaccedilatildeo Vestibular na Vertigem Monografia (Especializaccedilatildeo em Audiologia Cliacutenica)CEFAC Itajaiacute 2001 QUILODRAacuteN J MIRANDA J P JIMEacuteNEZ L EfectodelagropesticidaCiper-metrinaendosis uacutenica intraperitoneal sobre el cerebelo delratoacuten Int J Morphol 2006245-113 SILVEIRA S C R Estreptomicina ndash ototoxicidade e autoproteccedilatildeo [Tese] Doutorado em Ciecircncias Meacutedicas Ribeiratildeo Preto Universidade de Satildeo Paulo 2011 ZOCOLI R REICHOW SL ZOCOLI A M F Emissotildees otoacuacutesticas x cisplatina detecccedilatildeo precoce da ototoxicidade em pacientes oncoloacutegicos Rev Bras Otorrinolaringol 2003 69 (2) 222-225

61

5 DISCUSSAtildeO GERAL




(MORAES 1999 MENDES 1995)



entrevista com trabalhadores rurais expostos a estes compostos (ARAUacuteJO

2007AZEVEDO 2009 FARIA et al 2009 HOSHINO et al 2009 LISBOA et al

2007 MAGALHAtildeES 2010 MANJABOSCO et al 2004 SOUZA 2011) Os

resultados mostraram a tontura como sendo um sintoma recorrente referido por

esses trabalhadores Poreacutem no presente estudo natildeo se encontrou diferenccedila

significante entre as cobaias intoxicadas e as natildeo intoxicadas







em animais


significativa nas variaacuteveis pesquisadas Isto estaacute em desacordo com outros


como mudanccedila na medida de oscilaccedilatildeo postural com olhos fechados e em superfiacutecie

macia em trabalhadores rurais que entraram em contato com OF clorpirifoacutes Tal

achado sugere efeito subcliacutenico do agrotoacutexico nos sistemas vestibular e

proprioceptivo (HOSHINO 2008) Tambeacutem discorda da pesquisa que analisou a

Vectoeletronistagmografia de trabalhadores expostos a OF cronicamente que

encontraram alteraccedilotildees em 50 dos casos analisados estas alteraccedilotildees traduziram-

se em hiperreflexia na prova caloacuterica da VENG entretanto aqui avaliamos os efeitos

agudos de um organofosforado (DICK et al 2001)

Isto evidencia que o agrotoacutexico organofosforado tem potencial neuro-

ototoacutexico poreacutem natildeo se pode ainda afirmar qual a dose e o tempo de exposiccedilatildeo

62

seguros para estes compostos natildeo causarem danos agrave sauacutede o que vem de

encontro aos limiares de doses aqui testadas e que natildeo mostraram diferenccedila

estatiacutestica significativa



substacircncias por longos periacuteodos Outra limitante do estudo com seres humanos eacute de


avaliaccedilatildeo dos efeitos especiacuteficos de um uacutenico tipo de princiacutepio ativo o que justifica a

utilizaccedilatildeo de animais de laboratoacuterio de forma experimental

Ainda os achados dessa pesquisa satildeo similares agravequeles encontrados em

pesquisa realizada na China paiacutes de forte produccedilatildeo agriacutecola que utilizou como

amostra 301 crianccedilas com idade entre 23-25 meses expostas a OF Neste estudo

evidenciou-se a presenccedila de altos niacuteveis de metaboacutelitos OF nos testes de urina

poreacutem natildeo encontrou relaccedilatildeo entre este dado e os niacuteveis de desenvolvimento infantil

(GUADONG et al 2012) Este fato reforccedila a ideia de que mesmo na presenccedila do


este achado



efeitos destes compostos no sistema auditivo de cobaias com alteraccedilotildees nas

ceacutelulas ciliadas externas da coacuteclea poacutes-intoxicaccedilatildeo aguda por OF poreacutem esta lesatildeo

morfoloacutegica natildeo se traduziu em alteraccedilatildeo funcional no sistema auditivo perifeacuterico das

cobaias avaliadas pelos testes de Emissotildees Otoacuacutesticas Produto de Distorccedilatildeo e

Potencial Evocado Auditivo de Tronco Encefaacutelico (KOumlRBES 2009) No entanto

nessa pesquisa que objetivou avaliar os tufos ciliares nas maacuteculas das ceacutelulas

sensoriais estas natildeo mostraram alteraccedilotildees morfoloacutegicas pela MEV e nem funcionais

atraveacutes da ENG Todavia as doses e princiacutepio ativo foram diferentes apesar de ser

um composto da classe dos organofosforados

Os resultados da presente pesquisa demonstraram que a meacutedia do grupo I foi

menor do que os demais com relaccedilatildeo a variaacutevel nuacutemero de tufos ciliares mas natildeo eacute

possiacutevel afirmar que houve diferenccedila entre os grupos pois as meacutedias dos grupos II

e III estatildeo de acordo com as meacutedias encontradas por outros autores que realizaram

MEV em cobaias utilizando em seus grupos controles aacutegua destilada durante 30

dias e soro fisioloacutegico durante 10 dias (SILVEIRA 2011 MARQUEZINI 2011)

63

Os resultados da presente pesquisa que natildeo evidenciaram diferenccedila

estatiacutestica significante entre o nuacutemero de tufos ciliares dos grupos de cobaias

intoxicadas com as diferentes doses de organofosforado vatildeo de encontro aos

resultados de outros pesquisadores que avaliaram o sistema vestibular de cobaias

intoxicadas por organofosforados durante 7 dias nas doses de 03 e 3mgkgdia os

quais encontraram alteraccedilotildees ciliares nos saacuteculos e utriacuteculos (KOumlRBES et al 2010)

Conveacutem ressaltar que tal pesquisa utilizou doses e princiacutepio ativo diferentes da

atual


eou vertigem em trabalhadores expostos a estes compostos (DICK et al 2001

HOSHINO 2008) poreacutem ainda natildeo foi possiacutevel elucidar a origem morfoloacutegica

especiacutefica deste sintoma nem mesmo se existe uma causa uacutenica ou esta seria

multifatorial




caracterizada por apoptose nas ceacutelulas de Purkinge e dano estrutural ao

citoesqueleto dos animais sobreviventes (QUILODRAacuteN et al 2006) Em pesquisa

que avaliou os efeitos crocircnicos no SNC de animais intoxicados por organofosforado

foi observada a hipertrofia da camada molecular do coacutertex cerebral e que pode levar

agrave perda ou afilamento das ramificaccedilotildees neurais (PELEGRINO et al 2006 PEREZ et

al 2006) dados estes que reforccedilam e justificam os objetivos da presente pesquisa

em avaliar possiacuteveis injuacuterias celulares embora em locais diferentes como nas

maacuteculas dos saacuteculos e utriacuteculos









64

6 CONCLUSAtildeO

Conclui-se com este estudo que o organofosforado clorpirifoacutes nas doses

testadas de 05mgkgdia e 1mgkgdia natildeo teve influecircncia no sistema vestibular das

cobaias intoxicadas de forma aguda durante 10 dias pois os resultados da avaliaccedilatildeo

funcional atraveacutes da eletronistagmografia e da avaliaccedilatildeo morfoloacutegica por

microscopia eletrocircnica de varredura natildeo demonstraram diferenccedila para a frequecircncia

de aparecimento de nistagmos VACL e para o nuacutemero tufos ciliares nas maacuteculas

dos saacuteculos e utriacuteculos respectivamente

65

REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS

AFIFI AK BERGMAN RA Neuroanatomia Funcional texto e atlas 2ordf ed Satildeo Paulo Roca 2008p 354 ANVISA ndash Agecircncia Nacional de Vigilacircncia Sanitaacuteria Metodologias utilizadas para a realizaccedilatildeo de estudos toxicoloacutegicos Brasiacutelia 2009 Disponiacutevel em wwwanvisagovbr ARAUacuteJO AJet al Exposiccedilatildeo muacuteltipla a agrotoacutexicos e efeitos agrave sauacutede estudo transversal em amostra de 102 trabalhadores rurais Nova Friburgo RJCiecircnc sauacutede coletiva Rio de Janeiro vol12 nordm1 JanMar 2007 Disponiacutevel emlthttpwwwscielobrscielophppid=S141381232007000100015ampscript=sci_arttextgt AZEVEDO K A A Neurotoxicidade perinatal por caacutedmio em ratos Wistar e interaccedilatildeo com clorpirifoacutes Tese de doutorado em Cliacutenica Veterinaacuteria UNESP 2009 BEAR MF CONNORS B W PARADISO MA Neurociecircncias DesvendandoSistema Nervoso 2ordf ed Porto Alegre Artmed 2002 p 350-395 BRASIL Decreto Nordm 4074 de 4 de janeiro de 2002 Regulamenta a Lei nordm 7802 Disponiacutevel em lthttpwwwplanaltogovbrccivil_03decreto2002d4074htmgt BRASIL Lei Federal nordm 7802 de 11 de julho de 1989 dispotildee sobre a pesquisa a experimentaccedilatildeo a produccedilatildeo a embalagem e rotulagem o transporte o armazenamento a comercializaccedilatildeo a propaganda comercial a utilizaccedilatildeo a importaccedilatildeo a exportaccedilatildeo o destino final dos resiacuteduos e embalagens o registro a classificaccedilatildeo o controle a inspeccedilatildeo e a fiscalizaccedilatildeo de agrotoacutexicos seus componentes e afins e daacute outras providecircncias Disponiacutevel em lthttpwwwplanaltogovbrccivil_03LeisL7802htmgt BULA PYRINEX 480 EC Disponiacutevel em lthttpwwwseabprgovbrarquivosFiledefisDFIBulasInseticidasPYRINEX_480_ECpdfgt DICK RB STEENLAND K KRIEG EF HINES CJ Evaluation of acute sensoryndashmotor effects and test sensitivity using termiticide workers exposed to chlorpyrifos Neurotoxicology and Teratology Vol 23 issue 4 July-August 2001 Pages 381-393 Disponiacutevelem lthttpwwwsciencedirectcomsciencegt

66

EMBRAPA ndash Empresa Brasileira de Pesquisas Agropecuaacuterias Normas gerais sobre o uso de agrotoacutexicos Sistemas de Produccedilatildeo no 7 setembro 2006 Disponiacutevel em lthttpsistemasdeproducaocnptiaembrapabrFontesHTMLArrozArrozTerrasAltasMatoGrossonormas_gerais_uso_agrotoxicoshtmgt ENDERLE MS Abordagem Fisioterapecircutica na reabilitaccedilatildeo Vestibular Monografia (Curso de Fisioterapia) ndash UNIOESTE ndash Cascavel 2004


GANANCcedilA M M VIEIRA R M CAOVILLA H H Princiacutepios de Otoneurologia Volume 1 Satildeo Paulo Atheneu 1998 p1-3 23-43 GANANCcedilA M M MUNHOZ M S L CAOVILLA H H SILVA M L G Estrateacutegias Terapecircuticas em Otoneurologia Volume 4 Satildeo Paulo Atheneu 2000 GONCcedilALVES GMS Agrotoacutexicos sauacutede e ambiente na etnia Xukuru do Ororubaacute ndash Pernambuco Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Sauacutede Puacuteblica) -Fundaccedilatildeo Oswaldo Cruz Centro de pesquisas Aggeu Magalhatildees Recife 2008 GUAZZELLI MJ Brasil o maior consumidor de agrotoacutexicos [Entrevista concedida IHU On-line Instituto HumanitasUnisinos ndash IHU da Universidade do Vale do Rio dos Sinos ndashUnisinos em Satildeo Leopoldo RS] Junho 2009 Disponiacutevel em lthttpwwwecodebatecombr20090609brasil-o-maior-consumidor-de-agrotoxicos-entrevista-especial-com-maria-jose-guazzelligt GUODONG D PEI W YING T JUN Z YU G XIAOJIN W et al Organophosphate pesticide exposure and neurodevelopment in young Shanghai children EnvironSci Technol Mar 2012 46(5) 2911-7 GUYTON A C Tratado de Fisiologia Meacutedica 8 ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 1992 p 583-548 HERDMAN S J Reabilitaccedilatildeo Vestibular 2ordf ed Barueri Manole 2002 p 3-24

67

HOSHINO ACH et al Estudo da ototoxicidade em trabalhadores expostos a organofosforadosRev Bras Otorrinolaringol Satildeo Paulovol74 no6 NovDez 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwscielobrscielophpscript=sci_arttextamppid=S003472992008000600015gt HOSHINO ACH et al A auto-percepccedilatildeo da sauacutede auditiva e vestibular de trabalhadores expostos a organofosforados Rev CEFAC 2009 Out-Dez 11(4)681-687 Disponiacutevel em httpwwwscielobrscielophppid=S1516-18462009000800017ampscript=sci_abstractamptlng=pt KOumlRBES D Toxicidade de agrotoacutexico organofosforado no sistema auditivo perifeacuterico de cobaias estudo anatocircmico e funcional Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana) UFSM 2009 KOumlRBES D SILVEIRA AF HYPPOLITO MA MUNARO G Ototoxicidade por organofosforados descriccedilatildeo dos aspectos ultraestruturais do sistema vestibulococlear de cobaias Braz J Otorhinolaryngol 201076(2)238-44 Disponiacutevel em lthttpwwwscielobrscielophpscript=sci_arttextamppid=S1808-86942010000200015gt LISBOA R SENA J DUTRA T Uso de agrotoacutexicos na produccedilatildeo de hortaliccedilas da Bacia Hidrograacutefica do Natuba afluente do Tapacuraacute ndash PE e consequecircncias sobre o meio ambiente e sauacutede dos agricultores Artigo apresentado no II Congresso de Pesquisa e Inovaccedilatildeo da Rede Norte e Nordeste de Educaccedilatildeo Tecnoloacutegica Joatildeo Pessoa PB 2007 LOPES KC et al Manifestaccedilotildees Otoneuroloacutegicas do Acidente Vascular de Tronco Encefaacutelico O que o Otorrinolaringologista precisa saberActa ORL Satildeo Paulo v26 n2 p 89-93 AbrMaiJun ndash 2008 Disponiacutevel em lthttpwwwactaorlcombrdetalhe_artigoaspid=242gt MAGALHAtildeES MAS Exposiccedilatildeo A Agrotoacutexicos Na Atividade Agriacutecola Um Estudo De Percepccedilatildeo De Riscos Aacute Sauacutede Dos Trabalhadores Rurais No Distrito De Pau Ferro ndash Salgueiro ndash PE (Dissertaccedilatildeo) Mestrado Profissional em Sauacutede Puacuteblica do Centro de Pesquisa Aggeu MagalhatildeesRecife Fundaccedilatildeo Osvaldo Cruz 2010 MANJABOSCO C W MORATA T C MARQUES J M Perfil Audiomeacutetrico de Trabalhadores Agriacutecolas Arq Otorrinolaringol Satildeo Paulo v8 n4 p 285-295 2004 Disponiacutevel emlthttpwwwarquivosdeorlorgbrconteudoacervo_portaspid=293gt

68

Manual de Diagnoacutestico e Tratamento em Acidentes com Agrotoacutexicos ndash CITRS 2000 MARQUEZINI RMS Ototoxicidade vestibular provocada pelo uso sistecircmico de aminoglicosiacutedeos em cobaias [Dissertaccedilatildeo] Mestrado em Ciecircncias Meacutedicas Ribeiratildeo Preto Universidade de Satildeo Paulo 2011 MARTIN JH Neuroanatomia Texto e atlas 2ordm ed Artes Meacutedicas Porto Alegre 1998 MINISTEacuteRIO DA AGRICULTURA PECUAacuteRIA E ABASTECIMENTO Disponiacutevel em lthttpwwwagriculturagovbrgt MORAES ACL Contribuiccedilatildeo para o estudo da intoxicaccedilatildeo humana por carbamatos o problema do ldquochumbinhordquo no Rio de Janeiro Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Sauacutede Puacuteblica) - FIOCRUZ 1999 MENDES R Patologia do Trabalho Rio de Janeiro Athneu 1995 p 504 MOR R FRAGOSO M Vestibulometria na praacutetica fonoaudioloacutegica Pulso Editorial Satildeo Paulo 2012 MUNARO G SLEIFER P PEDROSO F S Anaacutelise da influecircncia do nistagmo espontacircneo e preacute-caloacuterico na Vectoeletronistagmografia Rev CEFAC Vol11 nordm 2 Satildeo Paulo AprJun 2009 Disponiacutevel emlthttpwwwscielobrscielophpscript=sci_arttextamppid=S151618462009000200019gt NISHIDA S M Curso de Fisiologia Ciclo de Neurofisiologia Departamento de Fisiologia IB Unesp-Botucatu 2012 OLIVEIRA J A A CICILINI G A SOUZA M L ANDRADE M H Efeitos do aacutecido etacriacutenico sobre o sistema vestibular Rev Bras de Otorrinolaringol JanAbr 1979 45(1) p 8-16 PELEGRINO JR CALORE EE SALDIVA PHN ALMDEIDA VF PERES NM VLILELA-DE-ALMEIDA L Morphometric studies of specific brain regions of rats chronically intoxicated with the organophosphate methamidophos Ecotoxicol Environ Saf 200664(2)251-5

69

PEREZ NM CALORE EE VILELA-DE-ALMEIDA L NARCISO ES PUGA FR Aspectos morfoloacutegicos e morfomeacutetricos do ceacuterebro de ratos na intoxicaccedilatildeo crocircnica pelo organofosforado metamidofoacutes RevInst Adolfo Lutz 200665(1)50-3 PESSOcircA KS Avaliaccedilatildeo Otoneuroloacutegica Monografia (Especializaccedilatildeo em Audiologia Cliacutenica) ndash CEFAC Rio de Janeiro 1999 POPPER VM A Reabilitaccedilatildeo Vestibular na Vertigem Monografia (Especializaccedilatildeo em Audiologia Cliacutenica)CEFAC Itajaiacute 2001 QIAO D SEIDLER F J PADILLA S SLOTKIN T A Developmental Neurotoxicity of Chlorpyrifos What Is the Vulnerable Period Environmental Health PerspectivesVol110 nordm 11Nov 2002 Disponiacutevel em lthttpwwwncbinlmnihgovpmcarticlesPMC1241065gt QUILODRAacuteN J MIRANDA JP JIMEacuteNEZ L Efecto del agropesticida Ciper-metrina en dosis uacutenica intraperitoneal sobre el cerebelo del ratoacuten Int J Morphol2006245-113 SILVA J M SILVA E N FARIA H P PINHEIRO T M M Agrotoacutexico e trabalho uma combinaccedilatildeo perigosa para a sauacutede do trabalhador ruralCiecircncia e Sauacutede Coletiva 10(4)891-903 2005 Disponiacutevel em httpwwwscielobrscielophpscript=sci_arttextamppid=S141381232005000400013 SILVEIRA SCR Estreptomicina ndash ototoxicidade e autoproteccedilatildeo [Tese] Doutorado em Ciecircncias Meacutedicas Ribeiratildeo Preto Universidade de Satildeo Paulo 2011 SINITOX - Sistema Nacional de Informaccedilotildees Toacutexico-Farmacoloacutegicas 2009 Disponiacutevel em lthttpwwwfiocruzbrsinitoxgt SOUZA JLNC O uso de agrotoacutexicos entre produtores de hortaliccedilas na localidade rural de Passo do Vigaacuterio ViamatildeoRS (Trabalho de Conclusatildeo de Curso) Graduaccedilatildeo Tecnoloacutegico em Planejamento e Gestatildeo para o Desenvolvimento Rural ndash PLAGEDER da Faculdade de Ciecircncias Econocircmicas Balneaacuterio Pinhal UFRGS 2011 TEIXEIRA CF AUGUSTO LGS MORATA TC Sauacutede auditiva de trabalhadores expostos a ruiacutedo e inseticidas Rev Sauacutede Puacuteblica200337(4)417-23Disponiacutevel emlthttpwwwscielosporgpdfrspv37n416775pdfgt

70

ZEIGELBOIM B Set alAvaliaccedilatildeo vestibular em crianccedilas com distuacuterbio de aprendizagemPediatria Moderna Nordm 5 SetOut2006 Disponiacutevel em lthttpwwwmoreirajrcombrrevistasaspfase=r003ampid_materia=3429gt

71

ANEXOS

72

Anexo A

Comprovante de aprovaccedilatildeo da Comissatildeo de Eacutetica em Experimentaccedilatildeo Animal

2



por


Dissertaccedilatildeo apresentada ao Curso de Mestrado do Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana Aacuterea de

Concentraccedilatildeo em Audiccedilatildeo e Equiliacutebrio da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM RS) como requisito parcial para a obtenccedilatildeo do

grau de Mestre em Distuacuterbios da Comunicaccedilatildeo Humana

Orientador Prof Dr Aron Ferreira da Silveira (UFSM)

Co-orientador Prof Dr Miguel Acircngelo Hyppolito (USP- Ribeiratildeo Preto)

Santa Maria RS Brasil 2013

3





71 p 30cm










4





elaborada por





(Presidente)




5



6

AGRADECIMENTOS

A Deus

















7



8






























9

ABSTRACT

























Pesticides Toxicity

10

LISTA DE FIGURAS

ARTIGO 1



11

LISTA DE TABELAS

ARTIGO 1



39



III

39

ARTIGO 2



51

12












Ltda Limitada



OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado












13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



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1999)




















2012)












27














(PESSOcircA 1999)

28

3 ARTIGO 1




through caloric












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

29





Telefone 55- 99484920




30

Resumo





















31

Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































33















2005)




















34
































35


2001)




























experimento




36



































37













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Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







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45


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47

4 ARTIGO 2




Organophosphate












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

48





Telefone 55- 99484920




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Resumo






















50

Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










52








entre outros
























53









grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


69


70


71

ANEXOS

72

Anexo A


3





71 p 30cm










4





elaborada por





(Presidente)




5



6

AGRADECIMENTOS

A Deus

















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8






























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ABSTRACT

























Pesticides Toxicity

10

LISTA DE FIGURAS

ARTIGO 1



11

LISTA DE TABELAS

ARTIGO 1



39



III

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ARTIGO 2



51

12












Ltda Limitada



OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado












13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















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HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















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horizontalmente



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1999)




















2012)












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(PESSOcircA 1999)

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3 ARTIGO 1




through caloric












valdetevhotmailcom




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Telefone 55- 99484920




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Resumo





















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Abstract



















Pesticides Toxicity

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2005)




















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2001)




























experimento




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Resultados





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p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

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017

054






Discussatildeo













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caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





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este achado








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Conclusatildeo



Agradecimentos




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Organophosphate












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Resumo






















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Abstract



















PesticidesToxicity

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(MARTIN 1998)












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entre outros
























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grupo I o controle













experimento












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utilizada








vestibulares






















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estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

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Discussatildeo





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MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







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Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








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em animais














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este achado


















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atual





multifatorial




















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6 CONCLUSAtildeO








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ANEXOS

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Anexo A


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elaborada por





(Presidente)




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AGRADECIMENTOS

A Deus

















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ABSTRACT

























Pesticides Toxicity

10

LISTA DE FIGURAS

ARTIGO 1



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LISTA DE TABELAS

ARTIGO 1



39



III

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ARTIGO 2



51

12












Ltda Limitada



OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado












13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

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LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















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HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















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through caloric












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Resumo





















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Abstract



















Pesticides Toxicity

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2005)




















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2001)




























experimento




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Resultados





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p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

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054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







44


45


46


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4 ARTIGO 2




Organophosphate












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

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Telefone 55- 99484920




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Resumo






















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Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










52








entre outros
























53









grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


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ANEXOS

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Anexo A


5



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AGRADECIMENTOS

A Deus

















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ABSTRACT

























Pesticides Toxicity

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LISTA DE FIGURAS

ARTIGO 1



11

LISTA DE TABELAS

ARTIGO 1



39



III

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ARTIGO 2



51

12












Ltda Limitada



OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado












13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



21



































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1999)




















2012)












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(PESSOcircA 1999)

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3 ARTIGO 1




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Resumo





















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Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































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2005)




















34
































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2001)




























experimento




36



































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Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







44


45


46


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4 ARTIGO 2




Organophosphate












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

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Telefone 55- 99484920




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Resumo






















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Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










52








entre outros
























53









grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


69


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ANEXOS

72

Anexo A


6

AGRADECIMENTOS

A Deus

















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ABSTRACT

























Pesticides Toxicity

10

LISTA DE FIGURAS

ARTIGO 1



11

LISTA DE TABELAS

ARTIGO 1



39



III

39

ARTIGO 2



51

12












Ltda Limitada



OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado












13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



21



































22



































23

































24



































25

































26



1999)




















2012)












27














(PESSOcircA 1999)

28

3 ARTIGO 1




through caloric












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

29





Telefone 55- 99484920




30

Resumo





















31

Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































33















2005)




















34
































35


2001)




























experimento




36



































37













38















Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







44


45


46


47

4 ARTIGO 2




Organophosphate












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

48





Telefone 55- 99484920




49

Resumo






















50

Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










52








entre outros
























53









grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


69


70


71

ANEXOS

72

Anexo A


7



8






























9

ABSTRACT

























Pesticides Toxicity

10

LISTA DE FIGURAS

ARTIGO 1



11

LISTA DE TABELAS

ARTIGO 1



39



III

39

ARTIGO 2



51

12












Ltda Limitada



OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado












13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



21



































22



































23

































24



































25

































26



1999)




















2012)












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(PESSOcircA 1999)

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through caloric












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30

Resumo





















31

Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































33















2005)




















34
































35


2001)




























experimento




36



































37













38















Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







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45


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Organophosphate












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Resumo






















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Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










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entre outros
























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grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







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Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


69


70


71

ANEXOS

72

Anexo A


8






























9

ABSTRACT

























Pesticides Toxicity

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11

LISTA DE TABELAS

ARTIGO 1



39



III

39

ARTIGO 2



51

12












Ltda Limitada



OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado












13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



21



































22



































23

































24



































25

































26



1999)




















2012)












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(PESSOcircA 1999)

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Resumo





















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Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































33















2005)




















34
































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2001)




























experimento




36



































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Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







44


45


46


47

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Organophosphate












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Resumo






















50

Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










52








entre outros
























53









grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


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70


71

ANEXOS

72

Anexo A


9

ABSTRACT

























Pesticides Toxicity

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11

LISTA DE TABELAS

ARTIGO 1



39



III

39

ARTIGO 2



51

12












Ltda Limitada



OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado












13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



21



































22



































23

































24



































25

































26



1999)




















2012)












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(PESSOcircA 1999)

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Resumo





















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Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































33















2005)




















34
































35


2001)




























experimento




36



































37













38















Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







44


45


46


47

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Organophosphate












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Resumo






















50

Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










52








entre outros
























53









grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


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70


71

ANEXOS

72

Anexo A


10

LISTA DE FIGURAS

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11

LISTA DE TABELAS

ARTIGO 1



39



III

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ARTIGO 2



51

12












Ltda Limitada



OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado












13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



21



































22



































23

































24



































25

































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1999)




















2012)












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Resumo





















31

Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































33















2005)




















34
































35


2001)




























experimento




36



































37













38















Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













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caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







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Abstract



















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(MARTIN 1998)












1998)










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entre outros
























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grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


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70


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ANEXOS

72

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11

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39



III

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12












Ltda Limitada



OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado












13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

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Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



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17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































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horizontalmente



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25

































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1999)




















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Abstract



















Pesticides Toxicity

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2005)




















34
































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experimento




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37













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Resultados





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p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







44


45


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(MARTIN 1998)












1998)










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entre outros
























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grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


69


70


71

ANEXOS

72

Anexo A


12












Ltda Limitada



OD Orelha Direita

OE Orelha Esquerda

OF Organofosforado












13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



21



































22



































23

































24



































25

































26



1999)




















2012)












27














(PESSOcircA 1999)

28

3 ARTIGO 1




through caloric












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

29





Telefone 55- 99484920




30

Resumo





















31

Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































33















2005)




















34
































35


2001)




























experimento




36



































37













38















Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







44


45


46


47

4 ARTIGO 2




Organophosphate












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

48





Telefone 55- 99484920




49

Resumo






















50

Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










52








entre outros
























53









grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


69


70


71

ANEXOS

72

Anexo A


13


cm Centiacutemetro


DL 50 Dose Letal 50


g Grama

Kg Kilograma

M Molar

mg Miligrama

ml Mililitros


Por cento




ordm Grau

+ Positivo

- Negativo

14

LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



21



































22



































23

































24



































25

































26



1999)




















2012)












27














(PESSOcircA 1999)

28

3 ARTIGO 1




through caloric












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

29





Telefone 55- 99484920




30

Resumo





















31

Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































33















2005)




















34
































35


2001)




























experimento




36



































37













38















Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







44


45


46


47

4 ARTIGO 2




Organophosphate












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

48





Telefone 55- 99484920




49

Resumo






















50

Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










52








entre outros
























53









grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


69


70


71

ANEXOS

72

Anexo A


14

LISTA DE ANEXOS


Animal

66

15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



21



































22



































23

































24



































25

































26



1999)




















2012)












27














(PESSOcircA 1999)

28

3 ARTIGO 1




through caloric












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

29





Telefone 55- 99484920




30

Resumo





















31

Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































33















2005)




















34
































35


2001)




























experimento




36



































37













38















Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







44


45


46


47

4 ARTIGO 2




Organophosphate












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

48





Telefone 55- 99484920




49

Resumo






















50

Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










52








entre outros
























53









grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


69


70


71

ANEXOS

72

Anexo A


15

SUMAacuteRIO









27

Resumo 29

Abstract 30



Resultados 37

Discussatildeo 39

Conclusatildeo 41




46

Resumo 48

Abstract 49



Resultados 54

Discussatildeo 55

Conclusatildeo 57



6 CONCLUSAtildeO 63


ANEXOS 70

16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



21



































22



































23

































24



































25

































26



1999)




















2012)












27














(PESSOcircA 1999)

28

3 ARTIGO 1




through caloric












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

29





Telefone 55- 99484920




30

Resumo





















31

Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































33















2005)




















34
































35


2001)




























experimento




36



































37













38















Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







44


45


46


47

4 ARTIGO 2




Organophosphate












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

48





Telefone 55- 99484920




49

Resumo






















50

Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










52








entre outros
























53









grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


69


70


71

ANEXOS

72

Anexo A


16



71

17














agropecuaacuterio



















18








HOSHINO et al 2008)












BERGMAN 2008)















19

































20





























horizontalmente



21



































22



































23

































24



































25

































26



1999)




















2012)












27














(PESSOcircA 1999)

28

3 ARTIGO 1




through caloric












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

29





Telefone 55- 99484920




30

Resumo





















31

Abstract



















Pesticides Toxicity

32

































33















2005)




















34
































35


2001)




























experimento




36



































37













38















Resultados





39












p-valor

G I (n= 5)



G II (n= 6)


OE


G III (n= 7)

OD

OE

442plusmn152

445plusmn127

394plusmn077

504plusmn079

047

037




40





p-valor

G I (n= 5)

OD 5975plusmn1919 6321plusmn2139 079

OE 5559plusmn2325 7339plusmn2270 009

G II (n= 6)

OD 5905plusmn1742 5734plusmn1574 076

OE 4431plusmn1437 5286plusmn1119 036

G III (n= 7)

OD

OE

5585plusmn2317

6266plusmn1671

6945plusmn2418

6831plusmn2569

017

054






Discussatildeo













41





caloacuterica







em animais


















KRIEG HINES 2001)





42











este achado








2009)





Conclusatildeo



Agradecimentos




43







44


45


46


47

4 ARTIGO 2




Organophosphate












valdetevhotmailcom




mhyppolitouolcombr




aronfergmailcom

48





Telefone 55- 99484920




49

Resumo






















50

Abstract



















PesticidesToxicity

51












(MARTIN 1998)












1998)










52








entre outros
























53









grupo I o controle













experimento












54





utilizada








vestibulares






















55

















estudo







Resultados






conforme Tabela 1

56




G I



G II



2645plusmn450 1800 3400

G III



3141plusmn535

2797plusmn377

2250

2366

4200

3750












Discussatildeo





57


MARQUEZINI 2011)



















utriacuteculo






al 2008)







58










Conclusatildeo




experimento

Agradecimentos








59




60


61




















em animais














62

















este achado


















63








atual





multifatorial




















64

6 CONCLUSAtildeO








65



66




67


68


69


70


71

ANEXOS

72

Anexo A


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A INFLUÊNCIA DO ORGANOFOSFORADO CLORPIRIFÓS NO …