Aspectos morfológicos dos órgãos genitais femininos do

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Braz. J. vet. Res. anim. Sci., São Paulo, v. 46, n. 4, p. 332-338, 2009

Aspectos morfológicos dos órgãos genitais

femininos do gambá (Didelphis sp.)

1 - Curso de Ciências Biológicas do Centro Universitário da Fundação de EnsinoOctávio Bastos, São João da Boa Vista-SP2 - Departamento de Ciências Morfológicas do Centro Universitário da Fundaçãode Ensino Octávio Bastos, São João da Boa Vista-SP3 – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo,São Paulo-SP4- Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária da Universidade Federal doMato Grosso, Cuiabá-MT

Natalia NardelliGONÇALVES1

Celina Almeida FurlanettoMAÇANARES 2,3

Maria Angélica MIGLINO3

Vivian Yoshiko SAMOTO3

Daniele dos SantosMARTINS2,3

Carlos Eduardo AMBRÓSIO3

Rosa Helena dos SantosFERRAZ4

Ana Flávia de CARVALHO2

Correspondência para:Profa. Dra. Ana Flávia de Carvalho,Departamento de Ciências Morfológicas doCentro Universitário da Fundação de EnsinoOctávio Bastos, Avenida Doutor OctávioBastos s/n, Jardim Nova São João 13874-148 – São João da Boa Vista-SP,[email protected]

Recebido para publicação: 25/05/2006Aprovado para publicação: 29/06/2009

Resumo

Foram coletados oito sistemas reprodutores de fêmeas de gambás(Didelphis sp). Destes cinco, foram destinados ao estudo macroscópicoe três ao estudo microscópico. Estes animais encontravam-se fixadosno Departamento de Anatomia da UNIfeob, em formaldeído a 10%,provenientes do Criatório Científico de Araçatuba (IBAMA). Paraanálise macroscópica, os sistemas reprodutores foram retirados,guardando-se as devidas posições “in situ” e foi realizada adocumentação fotográfica para resultados macroscópicos. Para oestudo microscópico, o sistema reprodutor foi processadorotineiramente pela técnica de inclusão em Paraplast e cortadas emmicrótomo, com espessura média de 5 mm, e os cortes foram coradosem HE, Azul de Toluidina, Picrosírius, PAS e tricromo de Masson16,

17. O sistema reprodutor feminino do gambá era composto por doisovários, útero duplo, duas vaginas laterais e entre estas um canalpseudovaginal, estas três estruturas se unem formando o seiourogenital encerrando em um “monte” púbico ou tubérculo genital,formando uma abertura comum interna ao ânus e a vulva, chamadade pseudocloaca ou seio urogenital. Microscopicamente os ovárioseram funcionais com folículos mono e poliovulares. A tuba uterinaera característica, revestida por epitélio prismático ciliado. Os cornosuterinos apresentaram epitélio de revestimento prismático ciliado. Oseio urogenital apresentou três estruturas tubulares. A vulvaapresentou as mesmas características da pele.

Palavras-chaves:Gambá.Didelphis.Reprodução.Morfologia.

Introdução

Metatheria (Marsupialia) é um grupoformado por sete ordens, 19 famílias e 81gêneros, contendo inúmeras espécies.Encontra-se assim organizado com base emsemelhanças anatômicas e fisiológicas,particularmente relacionadas à reprodução.1, 2

Não ocorre diapausa embrionária nogambá cinza de rabo – curto (Monodelphisdomestica). A prenhez é muito curta, de apenas12 dias após a cópula, impossibilitandoeste processo.3,4,5

Entre os cangurus vermelhos aprimeira prenhez da estação é seguida poruma gestação de 33 dias, após a qual o filhotedirige-se até o marsúpio sem auxílio da mãeprendendo-se a uma papila mamária. A mãeengravida imediatamente após, mas apresença de um filhote sendo amamentadodentro do marsúpio suspende odesenvolvimento do novo embrião dentro doútero, aproximadamente no estágio de 100células. Este período de desenvolvimentosuspenso é denominado diapausa embrionáriae dura aproximadamente 235 dias.4

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O período gestacional médio é de12 dias, podendo variar de cinco a 13 dias,nascendo em média de 10 a 15 filhotespor ninhada, sendo sua estimativa de vidade 2 a 4 anos. Quando os marsupiaisnascem, eles devem deixar o órgão genitalda fêmea para se prender a um mamilocompletando seu desenvolvimento. Omarsúpio não está presente em algunsdasiurídeos (camundongo marsupial, etc)e em alguns didelfídeos (gambás). Algunsdidelfídeos apresentam filhotes maisaltriciais que os cangurus. Estes embriõessão expulsos do órgão genital da fêmeadiretamente para a bolsa (ou para a áreamamária de espécies sem a bolsa) aonascimento. O tempo que os filhotesmarsupiais passam em desenvolvimento,enquanto presos à glândula mamária(papila mamária), excede amplamente operíodo de gestação.4,6,7

A anatomia dos órgãos genitais dasfêmeas marsupiais, quando comparada aoutros mamíferos eutheria, tem muitosaspectos diferentes; o útero é duplo e éparalelo, mas está completamenteseparado um do outro, cada corno uterinopossui uma cérvix e ambas se abrem noseio vaginal. O canal vaginal é uma daspartes mais interessantes do órgão genitaldessas fêmeas, pois consiste em duasvaginas laterais que se estendem até apseudovagina (canal do parto) e chegamao seio urogenital.3,8,9,10

As vaginas laterais possuem váriasfunções durante o parto e na cópulaquando o sêmen passa através delas. Aexistência de duas vaginas influenciou odesenvolvimento do pênis e em muitosmarsupiais, a glande do pênis é umaestrutura proeminente e bifurcadaadequando-se a elas.11,12,13,14,15

Portanto, este trabalho teve porobjetivo, estudar os aspectos anatômicose histológicos dos órgãos genitaisfemininos do gambá (Didelphis sp.) quecaracteriza esse gênero sul-americano efornece subsídios morfológicos parainvestigações futuras sobre ocorrência ounão do fenômeno de diapausa, neste

gênero, visto que este evento ainda nãofoi descrito para esse gênero.

Material e Método

Para a realização desta pesquisa foramcolhidos oito órgãos genitais femininos degambás (Didelphis sp), sendo cinco destinadosao estudo macroscópico e três ao estudomicroscópico. Estes animais já estavam fixadosem formaldeído a 10% provenientes doCriatório Científico de Araçatuba (IBAMA).Para análise macroscópica, os órgãos genitaisforam esalados, dissecados e encaminhadospara o laboratório de Morfologia Animal daUNIfeob, onde foram documentadosdigitalmente através de câmera digital SonyMavica 3.2 megapixels (MP) e mediantedesenho esquemático.

Para o processamento microscópico,segmentos das diferentes partes dos órgãosgenitais foram retirados e pós-fixados emsolução de paraformaldeído a 4 % em tampãofosfato de sódio. (Dulbecco’s phosfate buffersaline-DPBS, Gibco Co., USA). Posteriormenteo material foi desidratado em uma sériecrescente de etanóis (de 70 a 100%) ediafanizado em xilol, seguido de inclusão emsimilar de parafina (Histosec®, Merk, lote:K91225309), conforme procedimentopadrão7. Em micrótomo LEICA RM 2165,os materiais foram cortados com espessuramédia de 5 micrômetros (mm). Após amontagem das lâminas, os cortes foramcorados pela hematoxilina-eosina (H.E), azulde toluidina, tricromo de Masson 16 e picrosírius17. Também foram submetidos a reaçãohistoquímica pelo ácido periódico-reativo deSchiff (PAS) com fundo de hematoxilinade Harris.

Resultados e Discussão

Os ovários, macroscopiacamente,eram ovóides, pequenos em relação aos doscaninos domésticos de mesmo porte,localizados na bolsa ovárica, na porção maiscranial da tuba uterina e lateralmente a bexigaurinária (Figura 1). 1 Microscopicamente, emtodos os animais estudados, foram obsevados

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folículos monovulares e folículos poliovulares,em diferentes fases de desenvolviventoconforme descrições na literatura. 12 Osfolículos apresentaram pouco antro e osovócitos eram grandes e repletos de vitelo. Oovário era envolto externamente por epitéliosimples cúbico (Figura 2).

As tubas uterinas ligadavam-se à bolsa

ovárica cranialmente e ao corno uterino maiscaudalmente. Macroscopicamente possuíamcoloração clara e formato enovelado eeram recobertas por tecido conjuntivo.Microscopicamente eram semelhantes àsde outras espécies de mamíferos.8,13,14

Apresentaram epitélio de revestimento internodo tipo prismático baixo ciliado e em algumas

de suas regiões havia célulassecretoras não ciliadas; a lâminaprópria compunha-se de tecidoconjuntivo frouxo; a camadamuscular lisa apresentava asseguintes túnicas, circular internae longitudinal externa; a serosaera espessa (Figura 3).

O útero dos marsupiaisé do tipo duplo caracterizadopor duas cérvix independentes,difereindo da classificaçãobicornuada encontradas naliteratura.7,11

Histologicamente o úteroera constituído por três camadas,

Figura 1 – Em 1A – Fotografia panorâmica da vista dorsal dos órgãos genitais femininos do gambá. Notar a bexiga(b), ovários (o), vagina lateral (setas), canal da pseudovagina (*) e o seio urogenital (SU). Em 1B -Esquema dos órgãos genitais femininos do gambá, vista ventral. Notar o útero duplo (setas cheias), osovários (O), as vaginas laterais (setas finas), o ureter (u), a bexiga (b), a pseudovagina (*) e o seiourogenital (SU). Figura adaptada a partir de Harder, Stonerook e Pondy 11

Figura 2 – Em 2A - Fotomicrografia do ovário. Notar folículos emcrescimento (setas). HE, barra = 90µm. Em 2b - Fotomicrografiado ovário. Notar um folículo em crescimento, evidenciandozona pelúcida (zp-seta) e ovócito rico em vitelo o citoplasma(o) reação histoquímica de PAS, barra = 20µm. Notar nafotomicrografia 2C um folículo poliovular (seta) e folículoprimordial (fp) HE, barra = 20µm. Na fotomicrografia 2Dfolículo poliovular (seta pontilhada) picrosírius, 20µm. Nafotomicrografia 2F visão panorâmica de um folículo maduroprestes a ovular, picrosírius, barra= 11µm

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sendo o endométrio a mais interna formadapor epitélio simples prismático e repleto deglândulas endometriais associadas ao tecidoconjuntivo subjacente. O miométrio é acamada muscular lisa, que se apresentouorganizada pelas seguintes túnicas: circularinterna e longitudinal externa; o perimétrio, acamada mais externa era formada por serosaou adventícia dependendo da localização nacavidade abdominal ou pélvica respectivamente(Figura 3). O endométrio era muito espesso,repleto de glândulas e ricamente vascularizadoapresentando, portanto, característicassemelhantes às demais espécies. A áreaproliferativa do epitélio uterino da espécieMonodelphis domestica é semelhante à de outrasespécies de mamíferos, apresentandoondulações e reentrâncias arredondadas 8,9, oque difere nos Didelphis sp. Pela característica

Figura 3 – Em 3A - Fotomicrografia da tuba uterina de gambá. Notar o epitélio prismático ciliado (ep), lâminaprópria (lp) e camadas musculares (m) HE, barra= 90µm. Em 3B - Fotomicrografia da tuba uterinaevidenciando o epitélio prismático ciliado (ep) e lâmina própria (lp) e musculares (m) tricromo deMasson, barra = 20µm. Em 3C - Fotomicrografia do útero notar as projeções da mucosa (setas) e asglândulas endometriais (ge) tricromo de Masson, barra = 90µm. Em 3D, fotomicrografia em detalhe deglândulas endometriais (ge) e células rodeando estas glândulas fortemente marcadas pela reaçãohistoquímica de PAS (setas) barra = 11µm. 3E – Fotomicrografia da vagina lateral evidenciando amucosa pregueada e epitélio pavimentoso estratificado queratinizado (ep) HE barra = 20µm. 3F –Fotomicrografia panorâmica da pseudovagina. Notar lâmina própria (lp), camadas musculares (m) eserosa (s) HE, barra = 220µm

encontrada na área proliferativacompletamente irregular com grandequantidade de glândulas e proliferação tecidualda mucosa, o que conferiu a esta regiãoaspecto diferenciado com inúmeras saliências.(Figura 3).

O complexo vaginal era formado porduas vaginas laterais e uma pseudovagina. Asduas vaginas laterais posicionavam-secuadaumente aos cornos uterinos e lateralmenteà pseudovagina. O tamanho das vaginas lateraisvariavam conforme o grau de maturidade dafêmea, as fêmeas que possuíam vaginas maisevidentes eram aquelas reprodutivamentemaduras ou multíparas e as que apresentavamvaginas pouco desenvolvidas eram fêmeasjovens 6 este fato entra em concordância comos nossos achados (Figura 1). A pseudovaginalocalizava-se no plano mediano e cranialmente

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ligava-se com os cornos uterinos juntamentecom as vaginas laterais formando o seio vaginalcranial. Caudalmente, estas três estruturas(vaginas laterias e pseudovagina), voltavam ase encontrar formando então o chamado seiovaginal caudal. O seio vaginal caudal ligava-sea cérvix, que, por sua vez, tambémcaudalmente, unia-se, finalmente, ao seiourogenital (Figura 1). O seio urogenitalassemelhou-se conforme decrito descrito emoutras espécies de marsupiais.3,5,15 Nestaestrutura, cranialmente, abria-se o óstio cervicale também o óstio urinário e o óstio intestinalmais caudalmente, fato este, que nos permitiuutilizar para sua porção mais caudal adenominação de pseudocloaca.2,9

A mucosa das vaginas laterais dogambá se apresentou muito pregueada econstituída por epitélio pavimentosoestratificado queratinizado e tecido conjuntivofrouxo. As camadas musculares dividiam-senas seguintes camadas: circular interna elongitudinal externa; a camada serosa seapresentou muito vascularizada (Figura 3).

A pseudovagina, também conhecidacomo canal do parto era formada por epitéliopavimentoso estratificado não queratinizado;

lâmina própria; camadas musculares e serosa(Figura 3).

Observou-se no seio vaginal epitéliocilíndrico, cuja mucosa era pregueada, porémna região próxima ao óstio cervival das vaginas,o epitélio era pavimentoso estratificado nãoqueratinizado. Logo abaixo do epitélio, notou-se a lâmina própria constituída de tecidoconjuntivo frouxo, em sequencia, constatou-se a camada muscular lisa entremeada ao tecidoconjuntivo e a túnica serosa. Neste mesmoórgão na região próxima à abertura do óstiouretral, o epitélio era de transição (Figura 4).

O seio urogenital possuía lâminaprópria muito vascularizada (Figura 4). Naporção ventral da abertura urogenital externahavia áreas de tecido erétil, formando otubérculo genital, estrutura esta semelhanteao clitóris.

Conclusões

Os órgãos genitais de Didelphis sp.assemelham-se macro e microscopicamenteaos dos demais marsupiais, porém diferem domamíferos domésticos; os folículos ovarianospodem ser mono ou poliovulares;

Figura 4 – Em 4A - Fotomicrografia do seio vaginal evidenciando os estratos murais: o epitélio estratificadopavimentoso semelhante a vagina quando próximo à este órgão (ep), lâmina própria (lp), camadasmusculares (m) e serosa (s) tricromo de Masson, barra = 90µm. 4B - Fotomicrografia do seio vaginal:epitélio cilíndrico simples (ep), com células apresentando na porção apical característica secreção compresença de vacúolos (setas), lâmina própria (lp) HE, barra = 20µm. 4C - Fotomicrografia do seiourogenital: epitélio de transição (ep), lâmina própria (lp), camadas musculares (m) e tecido erétil (te) HE,barra = 220µm. 4D - Fotomicrografia do seio urogenital: epitélio de transição (ep) e lâmina própria (lp)HE, barra = 20µm

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Morphological aspects of genital female of the opossum (Didelphis sp.)

Abstract

Eight reproductive systems of opossum females of had been collected(Didelphis sp). Five, had been destined to macrocospic study and threeto the microscopical study. These animals were died and fixeded inthe Department of Anatomy of the UNIfeob, with formaldehyde10% from Araçatuba scientific creator - IBAMA. For macrocospicanalysis, the reproductive systems had been removed, keeping to itspositions “in situ” and were carried through the photographicdocumentation for macrocospic results. For the microscopical study,the reproductive system was processed routinely by the technique ofinclusion in similar of paraffin and cut with 5µm thickness, and thecuts had been stained in HE, Toluidin blue, Picrosirius, PAS (periodicacid Shiff reaction) and tricromo de Masson16, 17. The femininereproductive system of the opossum was compose for two ovaries,double uterus, two lateral vagins and between these a pseudovaginalcanal, these three structures if they join forming the urogenital sinuslocking up in a “pubic mount” or genital tubercle, forming an internalcommon opening to the anus and vulva, call of pseudocloaca orurogenital sinus. Microscopically the ovarios were functional withmono and poliovulares follicles. The uterine tube was characteristic,coated for ciliad prismatic epithelium. The uterine horns had presentedepithelium of ciliad prismatic covering. The urogenital sinus presentedthree tubular structures. Vulva presented the same characteristics ofthe skin.

Key words:Opossum.Didelphis sp.Reproduction.Morphology.

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