4
1. Introdução Esse trabalho tem como principal objetivo falar sobre o que é a clonagem molecular, clonagem reprodutiva e outras técnicas da engenharia genética, pretendemos também neste trabalho entender qual o papel delas no nosso dia a dia. 2. Clonagem Molecular Clonagem molecular é uma técnica que objetiva um elevado número de cópias de um fragmento gênico, podendo a partir daí ter várias aplicações na área da manipulação genética, existem dois tipo de clonagem molecular. Essa técnica consiste no isolamento e na propagação de moléculas de DNA idênticas. As passagens mais importantes do processo de clonagem molecular são duas. A primeira é quando o fragmento de DNA, chamado de inserto, é ligado a outra molécula de DNA, denominada vetor, para formar o DNA recombinante. A segunda acontece quando a molécula do DNA recombinante é introduzida numa célula hospedeira compatível, dá- se a esse processo o nome de transformação. A célula hospedeira que recebeu o DNA recombinante, passa a ser chamada de transformante ou célula transformada. Um único transformante, se obtido com sucesso, realiza ciclos de divisão celular, produzindo uma espécie de colônia, onde se tem milhares de cópias do DNA recombinante. A clonagem molecular pode ser feita de duas maneiras, in vivo, onde a clonagem ocorre em leveduras (seres unicelulares), e pode ser feita também in vitro, onde a clonagem ocorre em material de laboratório. 3. O que é PCR, e para que serve ? Reação em cadeia da polimerase ou PCR, é uma técnica da biologia molecular, desenvolvida em 1983 por Kary Banks Mullis, que consiste em multiplicar a fita de DNA. É uma técnica realizada em tubos de ensaio contendo o primer (DNA iniciador), a enzima DNA polimerase (enzima responsável pela multiplicação do DNA) e outros compostos. Os primers são fitas de DNA, com aproximadamente 20 bases nitrogenadas, são ligadas a sequência de DNA que se quer clonar . A técnica de PCR pode ser separada em 5 partes:

Bio Pronto

Embed Size (px)

Citation preview

1. Introduo Esse trabalho tem como principal objetivo falar sobre o que a clonagem molecular, clonagem reprodutiva e outras tcnicas da engenharia gentica, pretendemos tambm neste trabalho entender qual o papel delas no nosso dia a dia. 2. Clonagem Molecular Clonagem molecular uma tcnica que objetiva um elevado nmero de cpias de um fragmento gnico, podendo a partir da ter vrias aplicaes na rea da manipulao gentica, existem dois tipo de clonagem molecular. Essa tcnica consiste no isolamento e na propagao de molculas de DNA idnticas. As passagens mais importantes do processo de clonagem molecular so duas. A primeira quando o fragmento de DNA, chamado de inserto, ligado a outra molcula de DNA, denominada vetor, para formar o DNA recombinante. A segunda acontece quando a molcula do DNA recombinante introduzida numa clula hospedeira compatvel, d-se a esse processo o nome de transformao. A clula hospedeira que recebeu o DNA recombinante, passa a ser chamada de transformante ou clula transformada. Um nico transformante, se obtido com sucesso, realiza ciclos de diviso celular, produzindo uma espcie de colnia, onde se tem milhares de cpias do DNA recombinante. A clonagem molecular pode ser feita de duas maneiras, in vivo, onde a clonagem ocorre em leveduras (seres unicelulares), e pode ser feita tambm in vitro, onde a clonagem ocorre em material de laboratrio. 3. O que PCR, e para que serve ? Reao em cadeia da polimerase ou PCR, uma tcnica da biologia molecular, desenvolvida em 1983 por Kary Banks Mullis, que consiste em multiplicar a fita de DNA. uma tcnica realizada em tubos de ensaio contendo o primer (DNA iniciador), a enzima DNA polimerase (enzima responsvel pela multiplicao do DNA) e outros compostos. Os primers so fitas de DNA, com aproximadamente 20 bases nitrogenadas, so ligadas a sequncia de DNA que se quer clonar . A tcnica de PCR pode ser separada em 5 partes: 1- A amostra de DNA, o DNA polimerase, os nucleotdeos e os primes so postos em um tubo de ensaio. 2- O tubo de ensaio posto em uma mquina de PCR, que tem como funo, aumentar e diminuir a temperatura. 3- O tubo de ensaio aquecido 94oC, temperatura na qual as fitas de DNA se separam. 4- Cada fita que foi separada vira uma espcie de molde para sntese de novas cadeias complementares. A partir da, o tubo resfriado temperatura de 54oC, temperatura ideal para os primers se anelarem ao incio das duas fitas que tinham sido separadas, servindo de iniciadores para a enzima polimerase. 5- O tubo de ensaio aquecido novamente uma temperatura de 72oC, ideal para o funcionamento do DNA polimerase, para a duplicao da fita. A DNA polimerase comea a colocar os nucleotdeos livres na fita de DNA, ligando-os por complementariedade, formando assim uma nova fita dupla.

4- Transplante de Ncleo O transplante de ncleo consiste em retirar um ncleo de uma clula e coloc-lo em outra, no qual o ncleo original teria sido removido anteriormente. Esse processo realizado com o auxilio do microscpio ptico, que permite a visualizao das clulas e o correto manuseio das pipetas (instrumentos utilizados para a retirada do ncleo, e para a injeo do novo ncleo). O transporte de ncleo pode ser utilizado tanto em ncleos retirados de clulas adultas como clulas embrionrias. O experimento da gerao da ovelha Dolly utilizou o ncleo de uma clula adulta, esse ncleo retirado da clula das glndulas mamrias da ovelha, foi posto no vulo de outra ovelha. Este experimento serviu de resposta para uma grande dvida da poca, pois no sabia se o ncleo adulto de um mamfero era capaz de gerar outro indivduo (ou seja, ser totipotente). 5- Clonagem Reprodutiva A clonagem reprodutiva, a clonagem que objetiva criar um novo indivduo da espcie clonada, ela feita atravs do transplante de ncleo. Mesmo parecendo simples, a clonagem reprodutiva no algo compensador, podemos tirar como exemplo a ovelha Dolly, que apenas depois de 276 testes obteve um resultado positivo. Mesmo alcanando o objetivo de criar um novo indivduo, constatou-se tambm algumas outras caractersticas da clonagem reprodutiva, como : 1- A maioria dos clones morrem no incio da gestao. 2- Os animais clonados tm defeitos e anormalidades semelhantes, independente da clula doadora ou da espcie. 3- Essas anormalidades provavelmente ocorrem por falhas na reprogramao do genoma. 4- A eficincia da clonagem depende da situao da clula doadora, uma clula embrionria tem uma eficincia muito maior do que uma clula adulta. Temos tambm, uma grande discusso quanto a clonagem reprodutiva humana, muitas pessoas defendem uma ideia negativa dessa clonagem, enquanto uma minoria apoia a clonagem. Os argumentos expostos pelas pessoas que no so a favor da clonagem reprodutiva humana so de natureza tica e religiosa, como a dvida de quem ser o pai e a me e tambm h igrejas que defendem a ideia de que no de bem vista ao seu deus a clonagem humana. 6- Concluso Com esse trabalho pudemos concluir que a biotecnologia avanou muito desde 1980, porm fica evidente que ainda h muito o que ser trabalhado nesta rea, ainda h mtodos, como o transplante de ncleo, em que os cientistas no tem muito controle sobre os resultados. Vimos que a clonagem no muito bem vista por muitas pessoas, inclusive a clonagem humana, ns temos como ideia, que essa discusso sobre a permisso da clonagem humana, poderia ser adiada at o momento em que os cientistas tivessem mais maior controle dos resultados da clonagem reprodutiva com animais, fazendo com que mesmo que fosse proibida, a clonagem humana fosse possvel e entendida, quem sabe at futuramente aceita por todos.

7- Bibliografia http://www.sobiologia.com.br/conteudos/Biotecnologia/biotecnologia2.php http://www.e-escola.pt/topico.asp?hid=339 http://www.portaleducacao.com.br/farmacia/artigos/8577/tecnica-de-biologia-molecular-pcr-reacaoem-cadeia-da-polimerase http://www.engenhariageneticabioq.page.tl/Clonagem-Molecular.htm http://www.sobiologia.com.br/conteudos/Biotecnologia/PCR.php