Caracterização Molecular de Cultivares de Videira.

Instituto Agronômico de Campinas

Haiko Enok Sawazaki

OS OBJECTIVOS E INTERESSES DOS PRODUTORES DE VINHOS E VINHAS DIFEREM

Produtor vinhas: grande produtividade e uvas com muita doçura Produtor vinhos: bons vinhos.

PARA A VITIVINICULTURA FUNCIONAR:

Método de determinar a "qualidade enológica" das uvas que permita estabelecer um sistema em que essa qualidade seja paga, de modo a que comece a haver uma sintonia entre os viticultores e os enólogos.

FATORES DETERMINANTES DA QUALIDADE DAS UVA PARA A VINIFICAÇÃO:

Material biológicoCaracterísticas fixas da vinha

Características variáveis da vinha Tipo de cultivo da vinha

A CULTIVAR DE UMA VIDEIRA OU DE UM PORTA-ENXERTO É FUNDAMENTAL COMO DETERMINANTE DA QUALIDADE .

 a) Cultivares diferentes têm custos diferenciais.b) O tipo de viticultura desejada requer cultivares específicas.c) Uvas e vinhos produzidos por cultivares diferentes têm características qualiquantitativas e preços diversos.d) O viticultor é legalmente responsável por assegurar que as cultivares declaradas são as que estão plantadas. Fazendo-se essa determinação de cultivar torna-se possível aplicar um critério de qualidade em que as boas cultivares sejam melhor pagas, o que levará a um incentivo de qualidade para os viticultores.

O problema é que embora haja cultivares que sejam perfeitamente distinguíveis a olho nu, há muitas cultivares

com características de matéria prima enológica muito diferentes, mas com aparências muito similares. A

acrescentar a isso, a influência ambiental dá um grande grau de variabilidade ao fenótipo (o resultado visível da

interação entre a herança genética e o ambiente), levando a uma dificuldade de identificação de certas cultivares.

Além da caracterização genética e avaliação serem importantes para conhecimento da qualidade e

potencialidade do germoplasma de uma videira, para se patentear a criação de um vinho tipicamente paulista é

necessário o fingerprinting do genoma da videira utilizada para a fabricação. Ou seja, para o

estabelecimento de uma coleção genética com as principais variedades de uvas destinadas à produção de

vinhos comuns, finos e derivados, a caracterização genética é importante para se criar o perfil genético-

molecular característico da cultivar de videira.

Principalmente para cultivares que não foram ainda caracterizadas geneticamente como a uva Máximo IAC

138 desenvolvida em 1946 pelo Dr. Santos Costa no instituto agronômico através da hibridização entre uma Shiraz e Seibel (híbrido de V. vinifera desenvolvido na França para tolerância a doenças), assim como outros

cultivares nacionais como Rainha, Madalena.

Ampelografia, método de utilização generalizada na identificação de cultivares de uva pela análise e

comparação de características morfológicas de folhas, tipo de brotos, cachos e tipo de baga.

Apresenta desvantagens inerentes ao fato de utilizar as características fenotípicas da videira, características

influenciadas pelo ambiente.

• CÉLULA: UNIDADE FUNDAMENTAL DOS ORGANISMOS QUE DÁ ORIGEM A OUTRA CÉLULA• COMPONENTES –PAREDE CELULAR, CITOPLASMA, ORGANELAS, NÚCLEO COM MATERIAL

GENÉTICO (MASSA COMPACTA DE ÁCIDOS NUCLÉICOS LIGADOS A PROTEÍNAS ESPECÍFICAS CHAMADAS CROMATINA QUE NO ESTÁGIO DE DIVISÃO CELULAR PODE SER VISTA NA FORMA DE PARTÍCULAS LARGAS: OS CROMOSSOMOS, OS QUAIS SÃO DUPLICADOS LEVANDO A INFORMAÇÃO GENÉTICA. 

COMPOSIÇÃO DOS ÁCIDOS NUCLÉICOS:

WATSON & CRICK (1953): TEORIA DA DUPLA HÉLICE DO DNA

AS 2 FITAS DA CADEIA POLINUCLEOTÍDEO SÃO

CONECTADAS POR LIGAÇÕES DE

HIDROGÊNIO ENTRE AS BASES NITROGENADAS:

PORTANTO A ADENINA SE LIGA APENAS A TIMINA

(OU URACILA) E A GUANINA APENAS A

CITOSINA. SÃO CHAMADAS BASES

COMPLEMENTARES EM REAÇÕES DE

PAREAMENTO DE BASES.

-PCR-

TÉCNICA QUE AMPLIFICA

SEQUÊNCIAS DE DNA IN VITRO-

MILLIS E OUTROS (1987) –

PRINCÍPIO KORONA E

OUTROS (1971).

UTILIZA A TAQ DNA

POLIMERASE- ESTÁVEL A ALTA TEMPERATURA

Marcadores Moleculares

Visando caracterizar os cultivares de videira, tentou-se estabelecer um fingerprinting específico para cada

cultivar, através da metodologia molecular Expressed sequence tag polymorphism (ESTP), aliada à restrição de

sítios específicos.

Marcadores ESTP (Expressed sequence tag polymorphism) podem ser facilmente testados por PCR (polymerase chain reaction) e são conhecidos ser mais

conservados que os microsatélites.

Figura2. Perfil de PCR com 9 EST-primers para as cultivares A= Máximo, B=Madalena, C=Rainha.

 136/107e108/Ra e Mx: PspHI, BstEII, BseRI, StuI 136/107e108/Md: PspHI, BstEII, BseRI,SduI, PspXI 28/121/Mx; BbvI, TseI, BsvI, Eco5I, GsuI, PspXI28/121/Ra: /Mx; BsvI, Eco5I. GsuI, PspXI