Cultura in vitro vegetal

Embriogénese somática na videira

• Entidade: Universidade de Trás-os-Montes e Alto-Douro

• Local de Estágio: Dep. de Genética e Biotecnologia, Pav 1

• Coordenadora de Estágio: Ana Lúcia Pinto e Sintra

• Período de estágio: 4 -10 de Julho de 2006

• Meios de Cultura• Esterilização e desinfecção• Introdução de material in vitro• Repicagem• Aclimatização

Meios de cultura:

• O sucesso da cultura in vitroestá intimamente ligado a uma escolha dos meios de

cultura associada a explantes e condições

físico-químicas apropriadas.

• A composição do meio de cultura varia com o material vegetal e com os objectivos da cultura.

• Existe uma grande variedade de misturas de sais minerais e nutrientes orgânicos constituintes dos diferentes

meios de cultura, entre os quais o meio de Murashige e Skoog (MS), o

de Blaydes, o de Nitsch e Nitsch (NN),etc.

O pH do meio de cultura é outro factor crítico, interferindo na polimerização do meio (com

agar) sendo geralmente ajustado entre 5,5-5,8.

Esterilização e Desinfecção:• A eficácia do processo de desinfecção do material vegetal,

associada a uma esterilização eficaz dos recipientes e instrumentos de manipulação, são factores determinantes para o sucesso de

qualquer trabalho de cultura in vitro

• Existem diferentes fontes de infecção que podem comprometer a manutenção da assepsia necessária a estas técnicas: o material

vegetal, o meio de cultura, os utensilios empregues, o ar circundante, o manipulador, etc.

Alguns dos processos mais utilizados de desinfecção/esterilização são:

1. Autoclavagem

2. Irradiação por UV

3. Esterilização em estufa

Introdução de material in vitro

O material éintroduzido in

vitro após desinfecção superficial

RepicagemA

repicagem consiste na mudança

de meio em que se

encontra a plântula de

modo a permitir um

melhor crescimento da mesma

Aclimatização

• É uma das fases mais importantes da cultura in vitro, já que se procede gradualmente à

adaptação da planta ao meio ambiente, em contraste com a assepsia, humidade e

temperatura a que havia sido submetida.

fOTO

Embriogénese somática na videira

Várias fases desde o explante inicial até àregeneração de plântulas

Elaborado por:Ana Sofia Martins

Marta Moreira