DETERMINAO DOS GRUPOS SANGUNEOS DO SISTEMA ABOAntonio Altair M.
Oliveira Domenico H.G.P. Barbieri Lcia Helena M. Bruneri Primavera
Borelli 1. PRINCPIO A determinao do grupo sanguneo consiste na
identificao dos antgenos do sistema ABO existentes nos eritrcitos e
que so geneticamente determinados por 3 genes, respectivamente, os
genes A, B e O. Tais genes so autossmicos (genes alelos) presentes
em um nico lcus ou ento muito prximos entre si, dificultando o
crossing-over. Conforme a existncia dos antgenos A e B , as hemcias
sero classificadas (fenotipicamente) como sendo do grupo A, B, AB
ou O. No soro de indivduos de cada um dos grupos, existem
anticorpos chamados naturais: Anti-A (em indivduos do grupo B);
anti-B (em indivduos do grupo A); anti-A e anti-B (em indivduos do
grupo O), sendo que os indivduos do grupo AB no possuem os
anticorpos anti-A e anti-B em seu soro. Os grupos sanguneos so
transmitidos por genes autossmicos e para a sua determinao
empregam-se soros padres, cujas principais qualidades devem ser:
ESPECIFICIDADE (antigenicidade), POTNCIA (ttulo) e AVIDEZ (rapidez
para que se estabelea a aglutinao). COMPORTAMENTO DA PROVA
DIRETAHEMCIAS DO INDIVDUO TESTADAS COM SORO ANTI-A ANTI-B Aglutinao
Aglutinao Aglutinao Aglutinao ANTGENO PRESENTES NAS HEMCIAS A B AB
O GRUPO SANGUNEO
A B AB O
COMPORTAMENTO DA PROVA REVERSA SORO DO INDIVDUO ANTICORPO
PRESENTE TESTADO COM HEMCIAS NO SORO TIPO A TIPO B Aglutinao Anti-A
Aglutinao Anti-B Aglutinao Aglutinao Anti-A Anti-B
2. PROVA DIRETA- EM TUBO a. preparar uma suspenso a 5% das
hemcias (2,5 ml de salina e 2 a 3 gotas de sangue); b. em dois
tubos de 12 x 75 mm, adicionar 2 gotas de suspenso acima; em um
deles colocar uma gota de soro anti-A e no outro uma gota de soro
Anti-B. Homogeneizar; c. centrifugar por 15 segundos a 1.000
r.p.m.; d. inclinando e agitando delicadamente o tubo, observar a
presena ou no de aglutinao.
3. PROVA REVERSANa prova reversa utiliza-se o soro (ou plasma)
do paciente e suspenses de hemcias (5%) conhecidas (hemcias do tipo
A, Rh negativo e do tipo B, Rh negativo). a. em dois tubos de
ensaio 12x75mm, colocar duas gotas do soro ou do plasma; em um dos
tubos adicionar 2 gotas de suspenso de hemcias A, Rh negativo e, no
outro, duas gotas da suspenso de hemcias B, Rh negativo; b.
homogeneizar; c. centrifugar por 15 segundos a 1.000 r.p.m.; d.
inclinando e agitando delicadamente os tubos, observar a presena ou
no de aglutinao. e.
DETERMINAO DO FATOR Rh1. PRINCPIOOs antgenos eritrocitrios do
sitema Rh-hr (D, C, E e seus respectivos alelos d, c, e) so
determinados geneticamente . O sistema Rh comandado por 2 genes
estruturais, intimamente ligados: 1 gene codifica o Ag D e outro
codifica os Ags C ou c, E ou e. Os soros especficos existentes para
identificao destes antgenos so os soros anti-D, anti-C, anti-E,
anti-c, anti-e, no existindo o soro anti-d. Propriedades destes
soros: a. so adquiridos por imunizao; b. possuem um timo de
temperatura de 37 graus C; c. especificidade; d. potncia; e. reao
em meio albuminoso. A separao dos indivduos em Rh positivo ou Rh
negativo se faz segundo a presena ou no na hemcia, de antgeno D
(Rh).
Soro
Anti-Rho (D)
REAO COM HEMCIAS DO PACIENTE Aglutinao positiva Ausncia de
aglutinao
GENTIPO FATOR Rh
D/D ou D/-/-
2. TCNICA EM TUBO:a. preparar a partir do sangue total em
estudo, uma suspenso salina de hemcias a 5%; b. colocar em tubos
(12 x75 mm) 2 gotas da suspenso acima e 2 gotas do soro anti-D;
homogeneizar; c. centrifugar a 1.000 r.p.m. por 15 segundos; d.
inclinar e agitando suavemente o tubo observar a presena ou no de
aglutinao; e. se houver aglutinao, o indivduo classificado como Rh
positivo; caso no haja aglutinao, colocar o tubo em banho a 37.C,
durante 30 a 45 minutos; f. proceder como no item c; g. leitura: se
houver aglutinao, o paciente classificado como Rh positivo, se no
houver, dever-se- fazer pesquisa do fator Du. OBS: Em paralelo,
fazer um controle positivo (com hemcias O, Rh positivo), um
controle negativo (com hemcias O, Rh negativo) e um controle de
albumina. 3. TCNICA PARA PESQUISA DO FATOR D DE BAIXA EXPRESSO a.
proceder como nos itens a e g da tcnica em tubo; b. a seguir, lavar
as hemcias 3 vezes com soluo fisiolgica (centrifugar a 3.000 r.p.m.
por 1 minuto); c. aps a ltima lavagem, adicionar duas gotas do Soro
de Coombs (soro anti-globulina humana) e agitar; d. centrifugar a
1.000 r.p.m. por 15 segundos e proceder a leitura. Presena de
aglutinao: o paciente classificado como D positivo. Ausncia de
aglutinao: o paciente classificado como Rh negativo.
