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~ dnicamente pOI Argentina, Brasil, Chile, Mexico, Uruguay y Venezuela (el estudio no incluy6 CUba ni RepUblica , Dominicana). Enla regi6ncentroamericana, Costa Ricaaparece como el pais mas avanzado (Arias, 1987). La capacidad de 1nvestigaci6n y Desarrollo (I y D) de la biotecnologia en el pais se localiza fundamentalmente en lag universidadesy otros entes estatales y en centros regionales como el Centro Agron6mico Tropical de 1nvestigaci6n y Ensenanza (CAT1E), habiendo un desarrollo incipiente de la empresa biotecno16gica productiva. El CUadro 6 muestra lag tecnologias en uso en I y Den agrobiotecnologias en CostaRica. La ubicaci6n de lag diferentes tecnicas en lag unidades de investigaci6n se presentaen el CUadro 7. CUadro 6. Tecnologias en uso en I y D en Agrobiotecnologias en CostaRica Area Tipo de Tecnologia Molecular ADN recombinante Aislamiento, caracterizaci6n y clonaje de genes Hibridizaci6n de acidos nucleicos Transferenciade genes Manipulaci6n de plasmidos Regulaci6n y expresi6ngenica citogenetica Cariotipos, Mapeo genetico, Mutaci6n Celular CUltivo de celulas vegetales V CUltivo de protoplastos CUltivo de meriste.as y ye.as CUltivo de anteras y 6vulos CUltivo y transferencia de 6vulos y embriones animales 1nseminaci6n artificial Bioquimica Purificaci6n y separaci6n de proteinas y acidos nucleicos Biosintesis de metabolitos secundarios Sintesis de acidos nucleicos peptidos 1nmunologia Anticuerposmonoclonales Pruebas inmuno16gicasjAnti-cuerpos policlonales Bioproducci6n de vacunas Radioisotopos 1rradiaci6njmutagenesis Sondas marcadas Radioinmunoanalisis 1ngenieria Bioquimica Tecnologias enzimaticas Fer.entaciones s6lidas Separaci6n y purificaci6n Ecologia Control biol6gico Fijaci6n biol6gica de Nitr6geno Ecologia licrobial-Asociaci6n microorganismojplanta ;~ Fuente: Jaffe (1988)

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~ dnicamente pOI Argentina, Brasil, Chile, Mexico, Uruguay y Venezuela (el estudio no incluy6 CUba ni RepUblica, Dominicana). En la regi6n centroamericana, Costa Rica aparece como el pais mas avanzado (Arias, 1987).

La capacidad de 1nvestigaci6n y Desarrollo (I y D) de la biotecnologia en el pais se localiza fundamentalmenteen lag universidades y otros entes estatales y en centros regionales como el Centro Agron6mico Tropical de1nvestigaci6n y Ensenanza (CAT1E), habiendo un desarrollo incipiente de la empresa biotecno16gica productiva.

El CUadro 6 muestra lag tecnologias en uso en I y Den agrobiotecnologias en Costa Rica. La ubicaci6n de lagdiferentes tecnicas en lag unidades de investigaci6n se presenta en el CUadro 7.

CUadro 6. Tecnologias en uso en I y D en Agrobiotecnologias en Costa Rica

Area Tipo de Tecnologia

Molecular ADN recombinanteAislamiento, caracterizaci6n y clonaje de genesHibridizaci6n de acidos nucleicosTransferencia de genesManipulaci6n de plasmidosRegulaci6n y expresi6n genica

citogenetica Cariotipos, Mapeo genetico, Mutaci6n

Celular CUltivo de celulas vegetalesV CUltivo de protoplastos

CUltivo de meriste.as y ye.asCUltivo de anteras y 6vulosCUltivo y transferencia de 6vulos y embriones animales1nseminaci6n artificial

Bioquimica Purificaci6n y separaci6n de proteinas y acidos nucleicosBiosintesis de metabolitos secundariosSintesis de acidos nucleicos peptidos

1nmunologia Anticuerpos monoclonalesPruebas inmuno16gicasjAnti-cuerpos policlonalesBioproducci6n de vacunas

Radioisotopos 1rradiaci6njmutagenesisSondas marcadasRadioinmunoanalisis

1ngenieriaBioquimica Tecnologias enzimaticas

Fer.entaciones s6lidasSeparaci6n y purificaci6n

Ecologia Control biol6gicoFijaci6n biol6gica de Nitr6genoEcologia licrobial-Asociaci6n microorganismojplanta

;~ Fuente: Jaffe (1988)

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Cuadro 7. Proyectos de investigaci6n en agrobiotecnologias en log Centros Academicos y de Investigaci6n :r-1~~-

Instituci6n Descripci6n del Proyecto Cultivos

CATIE Micropropagaci6n: cafe, cacao, forestales, banano,platano y orquideas

Variaci6n solaclonal: Musaceas (Resistencia aSigatoka Negra)

Conservaci6n de genoplaslain vitro

CIA-UCR obtencion de plantas libres Araceas comestibles, name,yuca y papa

Micropropagacion: Orquideas, raices ytuberculos, pejibaye,mora, ornamentales

Conservacion de gerlOplaslain vitro

CIBCM-UCR Ingenieria genetica: Arroz (Resistencia avirus de hoja blanca)

Diagn6stico viral: Producci6n de lil!:}:) r-anticuerpos mono y LVJpoliclonales (varios) c';,c"

CIGRAS-UCR Micropropagacion: arboles frutalesMicroinjerto en citricos

CORBANA Micropropagacion: Musaceas

INA Micropropagacion: uva, orquideas,ornalentales de follaje

ITCR Micropropagacion: forestales, especias,raicilla, jengibre,chayote

Conservacion de gerlOplaslain vitro

MAG Micropropagaci6n: Papa

UNA Micropropagacion: Plantas medicinales,

name, arroz,ornamentales

CUltivo de anteras: arrozMutagenesis in vitro: arroz, musaceas

~'u!~, ,f~!:C

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~ Como se observa, la tecnica mas difundida es el cultivo de meristemas y apices caulinares para la lultiplicaci6nin vitro de plantas.

Tecnicas mas complejas COIO la transformaci6n genetica son practicadas Unicamente por el Centro deInvestigaciones en Biologia Celular y Molecular (CIBCM). En este caso se trata de la obtenci6n de plantas dearroz resistentes al virus de la Hoja Blanca, mediante la expresi6n del gen de la proteina de la caps ide delvirus en lag plantas transgenicas. A la fecha se ha identificado y clonado el gen que codifica para la proteinade capside y se trabaja en el establecimiento de lag condiciones necesarias para la inducci6n de callo a partirde anteras y embriones zig6ticos y la posterior regeneraci6n de plantas. El proyecto se enlarca dentro de unared internacional para desarrollar procesos biotecnol6gicos de mejoraliento genetico de arroz, establecida yauspiciada por la Fundaci6n Rockefeller (Roca y Thro, 1992).

En la Universidad Nacional (UNA) el programa de lutagenesis in vitro mediante la combinaci6n del uso de rayosgalla y mutantes quimicos y el cultivo de anteras en arroz, ha conducido a la obtenci6n de cinco lineaspromisorias en cuanto a rendiliento y resistencia a enfer;edades (Piricularia). Estas lineas estan siendoevaluadas a nivel nacional y pr6xilamente en ensayos regionales. En Musaceas se ban identificado 13 clones contolerancia aumentada a Sigatoka Negra. Un trabajo sililar es ejecutado en el Centro Agron61ico Tropical deInvestigaci6n y Ensenanza (CATIE) para la explotaci6n de la variaci6n solaclonal. Para una descripci6n alpliadade log programas de biotecnologia del CATIE consultar Villalobos (1991).

Varios laboratorios trabajan en la conservaci6n in vitro de ger;oplasla, 10 que luestra la creciente preocupaci6npor la aplicaci6n de la biotecnologia a la conservaci6n de la biodiversidad.

En el Centro de Investigaciones Agron6micas (CIA) de la Universidad de Costa Rica, se ejecuta un proyecto parala obtenci6n y lultiplicaci6n de plantas de falces y tuberculos libres de virus. El proyecto se ha desarrolladodurante casi diez aDos, bajo el auspicio del Centro Internacional de Investigaciones para el Desarrollo (CIID) ,

~ Canada. Se ha establecido lag condiciones para la producci6n in vitro de estas plantas y realizado ensayos decampo, con resultados prolisorios para el incremento de log rendimientos en estos cultivos, log cuales se

describiran las adelante.

Aplicaciones co.erciales 0 selicoaerciales en la Aqricultura

Micropropaqaci6n

La multiplicaci6n lasiva de plantas 0 licropropagaci6n es la aplicaci6n biotecnol6gica las conocida en el pais.De hecho el cultivo de leristemas ha llegado a ser sin6nilo de biotecnologia en el sector agricola.

Las plantulas producidas in vitro destacan entre log productos biotecnol6gicos que se estan colercializando en

el pais y el exterior.

En los ultimos afios se ban constituido alBeDos 11laboratorios dedicados a la licropropagaci6n colercial dediversos cultivos. El Cuadro 8 lista log laboratorios comerciales existentes en el pais basta 1992 (algunos hancerrado) y lag especies en ellos micropropagadas. La capacidad de producci6n de estos laboratorios varia entre5000 a 10 000 plantulas por selana para laboratorios peguenos y de 40 000 a 60 000 plantas por selana para loglaboratorios grandes. La mayoria de log laboratorios poseen sus propios invernaderos para la aclilatizaci6n delag plantulas una vez sacadas de log frascos de cultivo. El capital para la constituci6n de log laboratorioses nacional, extranjero 0 normalmente mixto. Algunos laboratorios reciben la tecnologia para la lultiplicaci6nde ciertas plantas de sus socios extranjeros. Laboratorios nacionales tambien se haD involucrado en proyectosconjuntos para la licropropagaci6n de cultivos tropicales con corporaciones norteamericanas y laboratoriosubicados en otros paises tropicales. Tal es el caso de Agribiotecnologia S.A., que forla parte de un progralapara la multiplicaci6n lasiva de banano, pina, cafe y pallas ornalentales junto con la Corporaci6n ADM Plant

~ Technology de log EE.UU. y Fitotek Unggul de Indonesia. El prograla consiste en el desarrollo de protocolos parala propagaci6n a gran escala de estos cultivos elpleando medics liquidos (bioreactores), para dislinuir loscostos de producci6n. La metodologia sera desarrollada por la corporaci6n DNA y transferida a Agribiotecnologia

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y Fitotek Unggul para su aplicacion colercial (Sondabl, 1993). ~;;~La Jayor parte de log laboratorios colerciales trabaja en la multiplicacion de plantas ornamentales y de banano '

debido a su alto valor econolico. Las primeras se colercializan, principalmente, en el exterior, mientras quelag plantulas de banano se ban utilizado en el proceso de expansion bananera en Costa Rica.

CUadro 8. Laboratorios coJerciales de micropropagacion en Costa Rica

Nolbre Localizacion Cultivos

Agribiotecnologla Alajuela Banano, Platano, Aloe, Ornamentales

cristal vitro S.A. San Jose Banano

Poly terra S.A. Alajuela Banano

Flora Feliz Cartago Plantas Ornalentales de Follaje

Flores Y Helechoscentroalericanos S.!. Moravia Anturios roc

Gelines San Jose Banano is [5'Go 51

Lab. Tico Planta Belen Orquldeas, Ornalentales de Follaje !li:i1J-'t '.

i',c"",,-; Il ;~.rmw~ ~Linda Vista S.!. Cartago Ornalentales de Flor ~ c'c

'1;)~

Micropropagaciones S.!. Alajuela Ornalentales de Follaje

Palla Tica S.!. Coto 47 Palla aceitera

vitro Plantas de C.R. san Jose Banano

Fuente: Oficina Nacional de Selillas, 1992.Ornalentales de Follaje: SyuqoniUl, Scindapsus, Philodendron,

Ficus, Calathea, SpathipbyllUi

En el caso del banano el precio de lag plantulas producidas in vitro es mayor que el del material de siembraconvencional pero su uso se ha visto favorecido debido a la disponibilidad de un gran nUmero de plantulas encorto tielpo, ala sanidad del Iaterial, ala uniforlidad en el crecimiento, el rendimiento es similar 0 mayora1 de plantas propagadas en folia convenciona1, es posib1e progralar la siembra y la cosecha, para aprovecharlag ventajas de lercado y en areas de siembra nuevas es posible evitar ap1icaciones de nematicidas durante tIesa cuatro aDos, 10 que representa un aborro anual pol hectarea de cerca de C 70 000. Se estima que en el palsexisten alrededor de 7000 a 8000 hectareas de banano selbradas con plantulas micropropagadas 0 de rebrotes de

estas.

Un problela con el uso de plantulas de banano provenientes de cultivo de tejidos ha sido la aparicion devariantes solaclonales 0 plantas fuera de tipo, cuyo producto no es colerciable. El porcentaje de variantesobservadas varla entre un 1% y un 5% (Arias y Valverde, 1987), aunque hay quienes hablan de porcentajes mucholayores. Las variantes observadas incluyen plantas enanas, variegadas, en folia de roseta. El enanismo ha sido .'~-

la variante lag frecuente en otros palses (Slith y Drew, 1990). Las causas para estas variaciones pueden ser ,~de dos orlgenes, propias dellaterial utilizado y debido a lag condiciones de cultivo in vitro. Los laboratorios

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~ -- ~~ trabajan en metodos para la detecci6n temprana de estas variantes. Un excelente progreso ha sido alcanzado a

nivel de invernadero con personal entrenado para el reconocimiento de log mutantes. Deben realizarse trabajosa nivel bioqufmico y molecular para el desarrollo de metodos de diagn6stico.

La aparici6n de lag variaciones gener6 una actitud esceptica en cuanto al uso de material proveniente de cultivode tejidos y algunos productores optaron por importar plantulas desde Israel. Aunque cabe recalcar que loglaboratorios locales han trabajado fuertemente en el control de lag causas de la variaci6n y existen algunoscuyo material presenta tasas de mutaci6n aceptables comercialmente. Boy dfa se da un fuerte sequimiento alasplantas donadoras de log explantes, pues se ha establecido que algunos materiales son mas propensos alasvariaciones que otros. Se espera que el uso de lag plantulas in vitro continue debido alas ventajasanteriormente senaladas.

Las mayores ventajas de la aplicaci6n de log metodos de cultivo de tejidos vegetales para la propagaci6nvegetativa se relaciona con log arboles (forestales y frutales); pero poco se hace en el pais en esta area. Comomuestra el CUadro 7, Unicalente el Instituto Tecnol6gico de Costa Rica (ITCR), el Centro de Investigaciones enGranos Y semillas (CIGRAS) y el Centro Agron6mico Tropical de Investigaci6n y Ensenanza (CATIE) ejecutan

I proyectos de investigaci6n en la propagaci6n de arboles. Colercialmente, Palma Tica, S.A. aplica la tecnologfain vitro para la multiplicaci6n y el lejoramiento genetico de la palma de aceite.

La propagaci6n vegetativa de arboles maderables ha permitido obtener plantulas que presentan un crecimiento masrapido y un mejoramiento en la producci6n de celulosa y densidad de madera, entre otras caracterfsticas deseables(Sondahl et al., 1984). En Costa Rica, la tasa de deforestaci6n anual es de 18 000 hectaxeas y se estima que45 especies de arboles maderables son amenazados 0 estan en peligro de extinci6n, entre log cuales destacan elGuayacan Real casi extinto, el Laurel Negro, el Ajo, el Chiricano, el Gavilan, el Caoba, el Nazareno y elGuapinol Negro (Quesada, 1990). La multiplicaci6n rapida in vitro de estas especies permitirfa obtener materialde sielbra para log programas de reforestaci6n en un corto perfodo de tiempo y posibilitarfa un lanejo sostenible

~ de log recursos forestales aut6ctonos. El establecimiento y reproducci6n in vitro de arboles no es facil por10 que urge fortalecer la investigaci6n en esta area.

En el CUadro 9 se present a lag oportunidades para la propagaci6n in vitro de arboles frutales de ilportanciaI econ6mica en el pais.

Producci6n de plantas libres de virus

Esta tecnica del cultivo de tejidos ha sido aplicada en el pais principallente en el grupo de lag raices ytuberculos, log cuales debido a su propagaci6n exclusivamente vegetativa son lag afectados por infeccionesvirales, lag cuales inciden sobre el rendiliento y la calidad de lag cosechas.

En el Centro de Investigaciones Agron6micas de la Universidad de Costa Rica se trabaja desde 1984 en la obtenci6ny multiplicaci6n de plantas de araceas comestibles (tiquisque blanco y morado y nampf) libres del virus dellosaico de la lalanga (DMV, siglas en ingles); recientemente se incluy6 el name (Dioscorea sp) y la yuca. Elproyecto ha sido auspiciado por el CIID), Canada. El DMV es el principal virus que afecta alas araceas tantocomestibles como ornamentales. SU distribuci6n es generalizada y afecta el desarrollo y el rendimiento de lagplantas. En Costa Rica la incidencia del DMV en lag plantaciones comerciales de tiquisque es de por 10 lenos80% (Ramfrez, 1985). En lag plantas en que se observa una sintomatologfa severa, se presenta una merma en laproducci6n de un 24% en tiquisque blanco y un 47% en tiquisque morado (Monge y Arias, 1984), con efectos sobrela calidad del producto. Actualmente, se conocen log medios de cultivo para la obtenci6n y multiplicaci6n invitro de plantas libres del DMV (Monge et al., 1987, 1988; GOmez et al., 1989; 1991); se utiliza la tecnica deELISA para la indexaci6n de lag plantulas y se haD realizado ensayos de campo, en log que se han evaluadodiversas generaciones. El rendimiento de lag plantulas es al menos el doble de lag obtenidas con el materialde propagaci6n convencional. El proceso de reinfecci6n en el campo es acelerado; pero lag plantas lantienen un

~ rendimiento superior a lag de propagaci6n tradicional durante por 10 menos tres generaciones, momento en el quese deberfa obtener material nuevo. El alto costo unitario de lag plantulas y el bajo valor comercial de lagaraceas comestibles en relaci6n a sus contraparte ornamentales, limitan su uso como material de siembra. Se ha~

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CUadro 9. oportunidades para la multiplicaci6n y lejoramiento de arboles frutales mediante cultivo de tejidos ~

Arbol Problema Soluci6n mediante cultivo de tejidos

Aguacate Propagaci6n convencional dificil y costosa Micropropagaci6n de patrones y yemasDesuniformidad patr6n e injerto compatibles

Micropropagaci6n de patrones resistentesa enfermedades (Phyto~htora)

Micropropagaci6n de materiales nati vos conpotencial de alto rendimiento

Cacao Necesidad de cultivares superiore5 Micropropagaci6n de lineas seleccionadas

Cafe Propagaci6n rapida de cultivares promisorios Micropropagaci6n de cultivaresy resistentes a roya, nematodos, broca del resistentes a royacafe. Microinjerto: CatimorjRobusta para

control de nematodos y roya

Citricos Requieren patrones enanos y resistentes a Micropropagaci6n de patronesenfermedades. CUltivo de meristemas para obtenci6n deNecesidad de yemas libres de virus plantas libres de virus (yemas)CicIo de mejoramiento muy largo Microinjerto

Regeneraci6n de plantas a partir del ~endospermo triploide 0 rescate delembri6n triploide para la producci6n delineas sin semillasProducci6n de plantas haploidesRescate del elbri6n diploide de lineasembriogenicas proveerian un mayor nUmerode plantas femeninas para programas de

mejoramiento

Mango Mejoramiento convencional muy lento Micropropagaci6n de lineasmonoembriogenicas para aumentar lavariabilidad

Papaya Variabilidad a partir de semilla sexual Micropropagaci6nDesuniformidad del material de siembra Obtenci6n de plantas libres de virusInfecci6n viral (cultivo de meristemas)

Fuente: Drew y Smith (1990)

propuesto un programa de producci6n de "semilla" certificada con el objetivo de disminuir log costos y entregaral productor la "semilla" que el conoce. Para ello lag plantulas provenientes dellaboratorio se trasladariana zonas de producci6n no tradicionales I para disminuir la presi6n de in6culo, y se realizarian varios incrementosen el campo. Pruebas realizadasen Quepos y Guanacaste demuestran que esto es factible.

El impacto social y econ6mico del estableciliento de un programa de "semilla" certificada en araceas comestibles ~j

y name ha sido estudiado mediante simulaci6n por Rodriquez y Weisleder (1988) quienes concluyeron entre otras '-"

cosas que "el cambio tecnico perlitiria lograr un aporte sustancial en divisas, un aumento en la productividad~

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par trabajador y una mejor situaci6n para una gran cantidad de agricultores de la zona del tr6pico hUiedo".'--' Ademas permitiria evitar la diseminaci6n del "mal seco", otra seria enfermedad del tiquisque, bacia nuevas areas

de siembra.

Hasta el momento no se ha encontrado la voluntad politica para el implemento de un programa de este tipo. ElCIA ha iniciado liniprogralas con cooperativas de productores y recientemente una empresa privada, interesadaen la producci6n y exportaci6n de estos cultivos, ha comprado 10000 plantulas, que seran utilizadas para iniciarla producci6n de su propia "semilla".

En papa (SolanUi tuberosUl) , el Ministerio de Agricultura y Ganaderia (MAG) ha establecido, en coordinaci6n conla Oficina Nacional de Semillas, un programa de producci6n de "semilla" certificada libre de virus, a partirde plantas producidas in vitro. Plantulas in vitro de lag principales variedades cultivadas en el pais eindexadas como libres de log principales virus que afectan la papa, son introducidas del Centro Internacionalde la Papa (CIP), Peru, y multiplicadas en ellaboratorio que el MAG posee en Tierra Blanca, Cartago. Lasplantulas son selbradas en invernadero para la producci6n de tuberculos, log cuales se distribuyen a productoresseleccionados para su incremento en el campo. Los tuberculos producto de log incrementos a nivel de calpo, enzonas adecuadas, son vendidos como "semilla" certificada a log productores. Evaluaciones del estado de infecci6nviral se realizan en diferentes etapas del proceso.

Los productores de papa son concientes de los beneficios de elplear "semilla" sana y estan dispuestos aadquirirlai pero la producci6n actual de la misla es insuficiente para abastecer la delanda. El factor lilitantees la cantidad de plantulas provenientes dellaboratorio. El MAG debe resolver este faltante de plantulas yasea aumentando su volumen de producci6n 0 bien coordinando con otros laboratorios privados 0 pUblicos,eventuallente interesados en la micropropagaci6n de la papa. Recientemente productores de papa panalenos banmostrado su interes en obtener "semilla" certificada de papa, 10 que indica la posibilidad de unacomercializaci6n regional de la "semilla" producida. Cabe senalar que log productores panamenos ban importado

~ "semilla" de papa de Holanda y Canada, con un costo superior al que tendria la producida en Costa Rica.

Diagn6stico de enferledades de plantas

El diagn6stico e identificaci6n de log agentes causales de enfermedades en plantas (hongos, bacterias ynematodos), se realiza utilizando los metodos tradicionales, basados en sintomatologia, aspectos 10rfol6gicosy medics diferenciales de aislamiento y caracterizaci6n bioquilica. En el Centro de Biologia Celular y Molecularde la Universidad de Costa Rica (CIBCM) se ofrece el servicio de diagn6stico molecular e inmunol6gico de virusde plantas. El CIBCM ha sido reconocido pol su capacidad actual para el aislamiento y purificaci6n de virus,producci6n de anti cuerpos poli y lonoclonales (varios sistemas), analisis de ARBs de doble banda y producci6nde sondag moleculares (Rivera, 1988).

Fijaci6n biolOgica de nitr6geno

Ellaboratorio de microbiologia de suelos del CIA, trabaja desde hace aDOS en proyectos de fijaci6n bio16gicade nitr6geno, soble todo la asociaci6n RhizobiUl-leguminosas. Como resultado de este trabajo ban sido aisladasy seleccionadas cepas para utilizarlas en la fabricaci6n de inoculantes para diversos cultivos. En el CUadro10 se presentan lag cepas (C6digos), los cultivos en que se emplean y el uso de los mismos.

El mayor uso de log inoculantes producidos es en leguminosas de cobertura y recientemente se ha incursionadoen leguminosas arb6reas y forrajeras. El empleo en cultivos anuales como frijol y soya aunque presenta un granpotencial basta la fecha es limitado. En este aspecto se requiere mas difusi6n del impacto de la tecnologfa soblelog rendimientos, los costos de producci6n y los efectos beneficos soble el medic ambiente.

Hasta ahora el principal cliente para los inoculantes ha sido Palla Tica S.A., que los utiliza para lagI leguminosas de cobertura, tanto en Costa Rica como Honduras. Tambien se ban vendido inoculantes a Organizaciones~ No Gubernamentales (ONG) y algunos agricultores independientes.

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CUadro 10. Cepas de RhizobiUl utilizadas en la producci6n de inoculantes, cultivos ,1i1) ~Y funci6n ;;;l)a;7~:: ~

Cepa CUltivo Funci6n

3101 Arachis pintoi coberturaCentrocela cobertura

CR-700-703 Arachis hipogea (manl) grano

477-436 Phaseolus vulgaris (frijol) grano

CR-200 pisUi satiVUI (arveja) grano

4099 DeslodiUl coberturastylo z antes cobertura

729-730 731 Leucaena arb6rea

751 Erytbrina (por6) arb6rea "~i '

&t$i:

3918 Pueraria phaseoloides (kudzu) cobertura f!,(,i;~tii'i~':;Di:.lfa';!1

4983 Ca' . ( d' l) ";~.~fi~~' Janus ca Jan gaD u grano 'J,,~.. ~""".,;: ,

i:J U i!!,~a f: ~100-101 Medicago sativa (alfalfa) forraje .-'

[jBi;i~15 [0

CIAT-61300 TrifoliUl repens (trebol) forraje ,~[,

4462 Canavalia cobertura 1,';;'.-'.,1&[~3[j&~ ~'

4062 Mucuna cobertura (;,

4203 Flelingia cobertura

506-514 Glycine lax (soya) grano

747 Sesbania cobertura

Fuente: Laboratorio Microbiologla de suelos CIA-UCR (1993)

El programa de fijaci6n bio16gica de nitr6geno del CIA es el Unico en el pals y el mas avanzado en la regi6ncentroamericana, donde solamente Guatemala recientemente, ha iniciado estudios en este proceso (Rolz, 1988).

El uso potencial de inoculantes en Costa Rica y la regi6n centroamericana es grande, si se considera laimportancia del frijol en la dieta de los centroamericanos y el cultivo de la soya en Nicaragua. En el cortoplazo se contara con el primer inoculante comercial denominado PROBIOL, para el cual existe ya un instructivo

de uso.

En los ultimos aftos se ha estudiado la asociaci6n micorrizal entre el actinomicete Frankia y el genero Alnus ~~(JaUl) , como otro sistema para el aprovechamiento del nitr6geno atmosferico. El Jaul ha sido una de las especies ~mas utilizadas para la reforestaci6n en Costa Rica, con un 6,2% del area plantada (Quesada, 1990).

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-Aplicaciones en la Ganaderia

\-:El trabajo realizado pol Rodriguez (1988) describe alplialente las oportunidades de las biotecnologias para laproducci6n animal en Centro Alerica y se utiliza COIO base en esta conferencia para la presentaci6n de lasaplicaciones actuales en Costa Rica.

Inselinaci6n artificial

Esta tecnica es la mas conocida y utilizada a nivellundial, sobre todo en ganado bovino y porcino.

Las ventajas de la inseminaci6n artificial son:

a. Mejor control sanitario, en especial de enferledades de la reproducci6nb. Mayor uso de los machosc. Mayor uso de los lachos lejoradosd. Mejoramiento zootecnico las rapidoe. Uso de reproductores imposibilitados para la lonta naturalf. Dislinuye los costos de producci6ng. Facil y rentable propagaci6n de nuevo laterial geneticof. Evita consanguinidadg. Refrescaliento rapido de sangre en las granjas (Lotz 1993).

En Centroalerica el semen utilizado para la inselinaci6n artificial en ganado bovino ha sido en un 80% ilportadode los EE.UU. y Canada y .enos del 20% selen local.

En ganado porcino se haD introducido padrotes y selen de EE.UU. y Europa. Las granjas porcinas las grandes~ utilizan la inselinaci6n artificial COIO parte del proceso productivo y adelas colercializan selen. La Misi6n

China en Costa Rica ha trabajado en ellejoraliento de cerdos utilizando esta tecnica en zonas COIO Guapilesy Laurel. En forma privada ha sido establecido, en San Jose de la Montana, Heredia, el Centro de Inselinaci6nArtificial POI el Dr. Johann Lotz Artavia, donde es posible obtener padrotes y cerdas para pie de cr1a, productode un programa de inseminaci6n artificial, as1 como semen.

Transferencia y lanipulaci6n de elbriones

La transferencia de elbriones es en la actualidad, una de las biotecnicas que las auge tolan en todo ellundo.Se usa para incrementar la descendencia de hembras con caracter1sticas valiosas, en un tielpo corto, lediantela utilizaci6n de superovulaci6n y transferencia de elbriones a ladles "sustitutas".

SegUn Rodriguez (1988), en Centroamerica se ha realizado transferencia de elbriones en forla semi -colercial desde1983 con exito variable. Los porcentajes de exito a nivel de calpo varian de un 30% y un 50%, pero conforle sedoline la tecnica se espera que estos porcentajes sean layores. Los elbriones transferidos haD sido obtenidostanto de donadoras locales COIO elbriones importados.

La Escuela de veterinaria de la Universidad Nacional (UNA) investiga sobre el clonaje y microlanipulaci6n deembriones y el transplante y congelaliento de los lislOS. El CUadro 11 contiene las instituciones/elpresas querealizan transferencia de embriones y el tipo de aplicaci6n, en Costa Rica.

Producci6n de sustancias de oriqen anilal para uso en diaqn6stico, investiqaci6n y terapeutica

En la actualidad el suero fetal bovino se usa en grandes cantidades en investigaci6n y diaqn6stico, en EE.UU.

y Europa.I En 1987 Costa Rica export6 al menos 25 000 litros de este suero COIO "Iateria prila" que fue procesada en otros

~ paises y vendida a mas de US $ 230 pOI litro (US $ 5 750000) por las colpafiias procesadoras (Rodriguez, 1988).El procesamiento consiste en centrifuqaci6n, filtraci6n e irradiaci6n con rayos galla, adelas de las pruebas

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de e~terili~ad y control de calidad necesarias. POI 10 que, Rodriguez (1988) ha sugerido que el procesamiento ~podrla reallzarse localmente y exportarse el producto termlnado. IIiiiI

CUadro 11. InstitucionesjEmpresas que haD realizado transferencia de embriones en Costa Rica ~,~,,'

,."" "

Instituci6njEmpresa Tip041

Escuela Medicina veterinaria (UNA) Experimental

Dres. Quir6s Y Solis Semi-comercial

Dres. Robert y Fernandez Semi-comercial

Prograla UNA-MAG-GTZ Experimental

CATIEjUniv. Missouri Experimental

Fuente: Rodriguez (1988)

En Costa Rica la compaftia Polybiotica, S.A., en convenio con un consorcio Europeo, produjo albUmina de suerofetal bovino e inmunoglobulina bovina del tipo IgG, utilizados en trabajos sero16gicos, para la empresa Sigma.Lalentablelente la colpaftia ha dejado de operar.

El Instituto Clodomiro Picado produce sueros antiofidicos (polivalente, anticoral y veterinario) yanticuerposlonoclonales. Talbien subproductos sanguineos: plasma de conejo, eritrocitos de carnero, plasma equino, albUmina ~y sangre de caballo.

Consideraciones finales

La aplicaci6n de la biotecnologia a la agricultura ofrece muchas oportunidades para aumentar log rendimientosPOI ledio del desarrollo de plantas de rapido creciliento, de alta producci6n, resistentes a insectos yenferledades y tolerantes a lag condiciones adversas del albiente (salinidad, acidez, temperatura, estreshidrico). En el sector pecuario, el aumento de la productividad estara asociado al desarrollo mediantebiotecnologia de nuevas metodos de diagn6stico y para la prevenci6n y control de lag enferledades (vacunas),ellejoraliento de la nutrici6n animal y la proloci6n del crecimiento y a la aplicaci6n de nuevas tecnicas al

mejoraliento genetico.

Cola se describi6, en el pais se hace usa de lag biotecnicas menos complejas, posiblemente asociado a log menorescostas econ6micos y a que requieren equipos simples.

Algunos obstaculos han sido identificados para la rapida y eficiente inclusi6n de la nueva biotecnologia en logprocesos de producci6n y desarrollo tecno16gico en Costa Rica y otros paises de America Latina (Arias, 1987;

Izquierdo y villalobos, 1992):

1. falta de recursos humanos especializados en el calpo de la biotecnologia

2. lilitados recursos financieros y operacionales para log laboratoriosrr:.i6 £( Ii:!

3. falta de capital de riesgo para el estableciliento de compaftias de biotecnologia .f~O1V! 1

4. debiles relaciones entre el sector academico y el sector productivo ::)~ \::;l~ .. [J;;;'J:c,l'~ ff!

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~ 5. falta de mecanismos de informacion adecuados entre laboratorios

6. falta de una actitud positiva para el trabajo multidisciplinario.

Estos obstaculos deben ser superados para obtener el mayor provecho de log avances en el campo de labiotecnologia. Debe formularse una clara estrategia nacional para identificar log problemas locales, donde labiotecnologia podria aportar soluciones, como base para el impulso de la misma en el pais, de manera que seconcentren recursos y esfuerzos en programas de impacto nacional.

Si bien la biotecnologia puede ofrecer grandes beneficios, tambien existen problemas potenciales. Los pequenosproductores pueden experimentar una desventaja socioeconomica en relaci6n con aquellos que poseen capacidadeconomica para utilizar log productos de la biotecnologia. Ya se mencion6 el caso de lag araceas comestiblesen Costa Rica, en el que la ausencia de decision politica para la implementaci6n de un programa nacional deproduccion de "semillaft certificada, impide que log beneficios de la nueva tecnologia lleguen basta el pequenoy medianos productor. La biotecnologia puede tambien contribuir a reducir la diversidad genetica en varioscultivos, 10 que podria aumentar la susceptibilidad a lag plagas, lag enfermedades y lag condiciones de clila.Ademas unas pocas industrias podrian obtener el control de lag nuevas aplicaciones industriales y, por tanto,el de la oferta de semillas y plantas de alto rendimiento. Esto significaria para log productores y consUlidoresde paises tropicales con una gran diversidad genetica, pagar derechos por productos biotecno16gicos desarrolladosusando sus recursos naturales y su conociliento, sin costo alguno. En este aspecto debe legislarse sobre elmanejo de la biodiversidad y se deben realizar esfuerzos para su caracterizaci6n y conservaci6n. El tela de lagpatentes debe ser criticamente analizado y politicas formuladas, que provean ellayor beneficio posible paralog poseedores de log recursos naturales. No debe olvidarse que son log paises desarrollados, log que bastaabora, producen log "inventos " patentables, y log paises en vias de desarrollo log consUlidores de talesadelantos. Ademas debe considerarse que mucha de la investigacion y desarrollo en biotecnologia en log paisesindustrializados esta dirigida a la sustituci6n de lag importaciones de productos provenientes de paises

~ tropicales (cacao, coco, palma aceitera, vainilla y otros).

El desarrollo de una masa critica, mediante la formacion de recursos humanos, debe considerarse prioritaria.La investigaci6n y desarrollo en biotecnologia en el pais no debe responder a una moda, sino a la bUsqueda desoluciones a problemas concretos con la nueva herramienta de la biotecnologia.

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