Everton dos SantosEverton dos Santos

E6446 - componente orgânico aromático

Conhecido antagonista TLR (3, 7,8,9)

Indivíduos AssimtomáticosIndivíduos Assimtomáticos

20082008Fontes de Fontes de InfecçãoInfecção

Indivíduos AssimtomáticosIndivíduos Assimtomáticos

Fontes de Fontes de InfecçãoInfecção

20022002

Populações RibeirinhasPopulações Ribeirinhas

Áreas:Áreas:Portuchuelo (Rio Madeira)6 comunidades (Rio Machado ou Ji-Paraná)

Existe uma maior prevalência de indivíduos assintomáticos nas regiões endemicas

Região endêmicaRegião endêmica

According to Brazilian legislation no test is mandatory for blood donors from non-endemic areas. However if they have traveled to malaria transmission

regions they are deferred for six months before they can donate

Doador : Juquia / RODoador : Juquia / RO

Indivíduos AssimtomáticosIndivíduos Assimtomáticos

20112011

O grupo O deve proteger o indivíduo de desenvolver malária graveO grupo O deve proteger o indivíduo de desenvolver malária grave

Suscetibilidade GenéticaSuscetibilidade Genética

20112011 Sistema ABOSistema ABOÍndia

Seleção naturalSeleção natural

Pressão Gênica SeletivaPressão Gênica Seletiva

Hemoglobina Malária

AA normal Podem apresentar qualquer tipo de malária

AS Traço Falciforme não apresentam malária grave

SS Anemia Falciforme Não apresentam malária

Pressão Gênica Seletiva protege contra a malária grave

Alta mortalidade associada a MaláriaAlta mortalidade associada a Malária

Eduardo Crosara RoncolatoEduardo Crosara Roncolato

Pressão Gênica SeletivaPressão Gênica Seletiva

LupusLupus

ArtriteArtrite

Alelo FcγRII - perda função+++++ ++

Mulheres portadores deste alelo desenvolvem 6-8 X mais Lupus

quando estão fora de areas endemicas

Mulheres portadores deste alelo desenvolvem 6-8 X mais Lupus

quando estão fora de areas endemicas

Eduardo Crosara RoncolatoEduardo Crosara Roncolato

FcFcγγRIIB RIIB -/--/-. yaa. yaa

Controle da produção de anticorpos

Controle da produção de anticorposX

2 X mais TLR72 X mais TLR7

Aumenta a produção de anticorpos anti-nuclear

Apresentam doença similar ao LUPUSApresentam doença similar ao LUPUS-Altos níveis de Acs anti-nuclearesAltos níveis de Acs anti-nucleares- GlomerulonefriteGlomerulonefrite

Composto sintético (E6446) pode inibir a ativação do receptor Toll-like e

também prevenir malaria cerebral?

LPS – TLR4 R848 – TLR7 CpG ODN – TLR9

O composto E6446 pode modular receptores Toll-like?

O composto E6446 inibe a atividade dos receptores TLR, e em baixas concentrações existe a inibição específica do TLR9 nas células tHEK293.

TLRs

NF-kB

luciferaseZangani et al, 2009 NF-kB ativado = emissão de luz

HEK293T

TLR

LPS, R848 ou CpG ODNE6446

Atividade da luciferase (luminometro)24h

TLRs

NF-kB

luciferase

O composto E6446 pode inibir TLR-9 in vivo?E6446 - via oral (60mg/kg)

90 minutos

CpG ODN

2 horasQuantificação de IL-6 do soro (ELISA)

CpG ODN/R848Células do baço

72 horas

E6446

Quantificação de IL-6 do sobrenadante (ELISA)

E6446 em baixa concentração pode inibir especificamente TLR9 in vivo.

60, 180, 360µg

E6446 - via oral (20mg/Kg)

2 horas

Ligantes de TLR

Quantificação citocinas do sobrenadante (ELISA)

1 2 3 4 5

Baço extraído Células do baço

Qual o efeito in vivo do composto E6446 na presença de diferentes agonistas de TLR?

O E6446 inibe a produção de citocinas, especificamente via TLR9.

48h

TLR2TLR3

TLR4

TLR7

iRBC (P. chabaudi)

E6446 (60mg/Kg) - via oral

1 2 3 4 5 6 7Baço extraído Cultura (48h) das

células do baço

ELISAdo sobrenadante

ELISA do soroColeta de sangue

Qual o efeito do E6446 na hiperresponsividade de TLR em animais que desenvolvem malaria?

O composto E6446 diminuiu a responsividade de TLR (2, 7 e 9) durante a malaria aguda.

SoroBaço

+

MediumLPS – TLR4Pam2Cys – TLR2Poly:IC – TLR3CL075 – TLR7Cpg ODN – TLR9P.c extract

iRBC (P. chabaudi)

E6446 (120mg/Kg) - via oral

1 2 3 4 5 6 7

LPS (10µg) – i.v

Monitoramento da sobrevivência(12-48 horas)

O E6446 protege animais infectados com malaria de choque séptico?

E6446 mostrou efeito protetor nos camundongos submetidos a choque séptico.