Isolamento de coliformes fecais em cursos de água doce

Ribeira da Rua da Tacoa e Praia de Alcochete

12ºCOBJECTIVO

Avaliar duas amostras de água da ribeira da Rua da Tacoa e

da praia de Alcochete, quanto à presença de matéria fecal, tendo

como indicador a Escherichia coli.

Trabalhou-se em bancadas desinfectadas, sempre perto de

uma chama para manter o meio estéril e e utilizou-se o método das

diluições seriadas para facilitar a contagem de colónias bacterianas.

METODOLOGIA

Preparou-se soro fisiológico e TBX, com antecedência.

O soro fisiológico é utilizado em microbiologia para se efectuar

diluições das amostras e/ou culturas bacterianas, já que se trata de

um meio isotónico em relação ao seu meio interno, evitando assim a

ruptura ou a perda excessiva de água das células bacterianas.

O TBX é um meio de cultura para bactérias, isto é, um meio

que contém os nutrientes necessários para o desenvolvimento de

colónias bacterianas, cromogénico, sendo selectivo para as E. coli,

pois as colónias ficam com uma cor verde. Isto acontece porque as E.

coli produzem uma enzima, que reage com alguns dos constituintes

do meio, mudando a sua cor. Além das E. coli, apenas algumas

estirpes de Salmonella e Shigella produzem esta enzima, pelo que

este meio é uma óptima maneira de determinar a presença desta

bactéria em amostras de água.

Todos os materiais e preparações foram esterilizados (180ºc

durante 2h), excepto os frascos utilizados para as amostras, que

foram fervidos durante 30 mins e fechados ao pé de uma chama, e

tapados em folha de alumínio.

Os frascos só se abriram e fecharam dentro de água, no

próprio dia, de forma a garantir somente a existência de bactérias

presentes na água.

A ribeira da Rua da Tacoa situa-se perto de zonas agrícolas, de

algum gado, como ovelhas e aves, e de habitações.

A Praia de Alcochete é uma praia fluvial com descargas de

esgoto, mas as águas são tratadas no Verão, segundo a CMA.

Praia de Alcochete:

Não se formaram colónias em nenhuma das diluições: CFU/ml =0 .

DISCUSSÃO

Escherichia coli, E. coli, encontra-se no intestino de animais

homeotérmicos ou de sangue quente. A maioria das estirpes de E.

coli é inofensiva, mas algumas podem causar graves intoxicações

alimentares em humanos uma vez que produzem exotoxinas

potencialmente letais.

Como esta bactéria coexiste, muitas vezes, com bactérias

patogénicas entéricas, a sua presença serve como indicador da

presença destas e de outros organismos de origem fecal prejudiciais

à saúde humana, como ovos de larvas e de parasitas intestinais, já

que estas podem ser eliminadas com as fezes.

As estirpes inofensivas, que fazem parte da microbiota do

intestino, produzem vitamina K2 ou evitam que bactérias

patogénicas se instalem no intestino.

A E. coli sobrevive longos períodos fora do intestino, por isso é

considerado o organismo a utilizar como indicador de contaminação

fecal em amostras de água, um coliforme fecal.

Coliformes fecais são uma parte do grupo dos coliformes

totais, bactérias usuais no tracto intestinal do Homem e de outros

animais. São termotolerantes, aeróbios facultativos, apresentam

uma forma bacilar, não formam esporos e a espécie maioritária é a

E. coli.

INTRODUÇÃO

CONCLUSÃO

Só uma amostra de água se encontrava contaminada com

matéria fecal, o que sugere que se deve ter cuidados com a água da

ribeira, nomeadamente com as culturas agrícolas pois podem

transmitir bactérias nocivas para o ser humano e pecuária.

Apesar de a amostra de água da Praia de Alcochete não

conter matéria fecal, não deve ser considerada saudável, pois a E.

coli não é o único método de análise da qualidade da água.

Apoio:

Escola Secundária de Alcochete

RESULTADOS

Só o curso de água da ribeira da Rua da Tacoa apresenta

colónias de E. coli, podendo observar-se na diluição 10-1.

O facto de não existirem colónias de E. coli na diluição 10-2

pode ser devido ao grande crescimento de outro tipo de bactéria,

Tacoa5.05.10 que limitou o seu desenvolvimento.

É natural a presença de E. coli nesta ribeira devido à sua

proximidade de zonas agrícolas e zonas de pecuária e também a

esgotos provenientes de habitações locais.

A água da Praia de Alcochete não apresentou nenhum tipo de

colónia bacteriana, o que significa que não se encontra

contaminada com fontes orgânicas.

No entanto, não foi sempre possível manter a esterilidade, o

que pode ter afectado alguns resultados.

BIBLIOGRAFIA

FCUP e Ciência Viva (2010): “E quando os antibióticos não funcionam?” (Documento não publicado)

http://pt.wikipedia.org/wiki/Coliforme_fecal IMaio 2010)

http://utilizadores.leirianet.pt/~labmicbio/indicdoresf.htm (Maio 2010)

http://www.ibb.unesp.br/departamentos/Educacao/Trabalhos/obichoquemedeu/bacteria_coliformes_fecais.htm (Maio 2010)

http://maps.google.pt/maps (Maio 2010)

3) Amostra da água da Praia de

Alcochete. (diluições -1 e -2)

4) Amostra da água da Ribeira da

Rua da Tacoa. (diluições -1 e -2)

CFU/ml para a diluição 10-1

E. coli =2500 CFU/ml

Tacoa5.05.10= 30000 CFU/ml

CFU/ml para diluição 10-2

E. coli = 0 CFU/ml

Tacoa5.05.10= 300000 CFU/ml.

Ribeira da Rua da Tacoa:

Bruno Segurado, nº 6

Diogo Oliveira, nº14

João Oliveira, nº1731 de Maio de 2010

CFU Colony forming units

2) Ribeira da Rua da Tacoa.1) Praia de Alcochete.