Mapeamento genético humano e identificação de doenças genéticas

humanas

Prof. Dr. Carlos Eduardo

Introdução • Conhecimento da localização

precisa dos cerca de 50.000 genes distribuídos nos 24 cromossomos;

• Posições relativas de uns genes aos outros;

• Distâncias entre os genes.

• Localização feita exclusivamente com estudos familiares de grande heredogramas;

• Padrões ca rac te r í s t i cos de herança do cromossomo X e característ icas autossômicas dominantes ou co-dominantes;

• Relação do fenót ipo com a herança;

• D u a s a b o r d a g e n s u s a d a s n o mapeamento: mapeamento fisico e mapeamento genético;

• Mapeamento físico: situa genes em determinados locais ao longo de um cromossomo usando medidas que refletem a distância física;

• Mapeamen to gené t i co : mé todo baseado na análise de ligação; medida de frequência com o qual dois genes ficam juntos na meiose e são herdados;

Mapeamento físico dos genes humanos

• Engloba uma variedade de técnicas diferentes;

• Uso de unidades de medida diferentes;

• Níveis de resolução distintos;

Genética de células somáticas

• U s o d e células somáticas cultivadas em meio de cultura;

• Necessidade de satisfazer os requisitos nutricionais das células;

• Permite propagação de uma única célula de constituicão genética definida;

• Uso de fibroblastos, obtidos a partir de amostras de pele;

• Têm aspecto uniforme, crescem em monocamadas e dividem-se por cerca de 30 a 100 geracões;

• A l g u m a s l i n h a g e n s s o f r e m transformação e assemelham-se a células cancerosas;

• Induzida pelo vírus Epstein-Barr;

Mapeamento por transferência

cromossômica

• Transferênc ia de c romossomos inteiros de uma célula doadora a outra receptora;

• Células de mamíferos (camundongo) são utilizadas;

• C é l u l a s h í b r i d a s c o n t é m c o m b i n a ç õ e s d i f e r e n t e s d e cromosssomos humanos;

• Meio de seleção HAT (hipoxantina, aminopterina e timidina);

Mapeamento de genes humanos por análise de ligação

• Definida como tendência que os a le los p róx imos no mesmo c r o m o s s o m o t ê m d e s e r transmitidos juntos, pela meiose;

• Usa estudos famil iares para averiguar se dois genes co-segregam;

• Ún i c o método que permi te mapeamento de genes incluindo os genes de doença que são d e t e c t á v e i s a p e n a s c o m o caracteísticas fenotípicas;

Aplicação do mapeamento gênico

humano

• Localização e identificação dos genes de doenças;

• Marcadores podem servir como indicadores para mapas físicos usados para c lonar genes de doenças;

• O mapeamento físico pode ser orientado pela existência de crossing-over específico;

• Os mapas genéticos e físicos são interdependentes e complementares;

O Projeto Genoma Humano

• Iní c i o d a s p e s q u i s a s c o m iniciativas isoladas de clonagem de genes específicos;

• Ênfase do projeto foi construir mapas de ligação física e genética de todos os cromossomos;

• U s o d e técnicas de Biologia Molecular;

• Para muitos genes que estão envolvidos em doenças genéticas, os mapas podem ajudar na produção de testes diagnóstico;

• Aumento da compreensão sobre a base molecular de doenças;

• Muitos fragmentos de DNA ainda n ã o f o r a m c a r a c t e r i z a d o s (sequência total e função);