MicroRNAs no contexto de cancro oral - cld.ptº... · (38 bp) Terminal loop Flanking single-stranded segments 02. Biogénese e função dos miRNAs Figura 01. Biogénese e função

MicroRNAs no contexto de cancro oral

Da biologia básica à utilidade clínica

Universidade de Lisboa - Faculdade de Medicina Dentária

Mestrado Integrado em Medicina Dentária – 2.º Ano/2.º Semestre

Ano Letivo 2014/2015

Unidade Curricular de Biologia Oral II

29 de maio de 2015

Cristina Sterbet, Daniela Lourenço, Luís Nepomuceno, Sara NevesRegente: Prof. Doutor António Mata

Índice Geral

01. Introdução;

02. Biogénese e função dos miRNAs;

03. Métodos de deteção de miRNAs;

04. Comportamento dos miRNAs no cancro;

05. Mecanismos de desregulação dos miRNAs no cancro;

06. miRNAs no cancro oral;

07. Utilidade clínica dos miRNAs associados a OSCC;

08. miRNAs e tratamento.

29 de maio de 2015MicroRNAs no contexto de cancro oral 2


01. Introdução

MicroRNA

Nucleótidos não

codificantes

RNA cadeia

simples

Reguladores pós-

transcricionais

Proliferação CelularDiferenciação

Apoptose

[1, 2, 4]


Transcrição pela RNA polimerase II

pri-miRNA

Stem(38 bp)

Terminal loop

Flankingsingle-strandedsegments

02. Biogénese e função dos miRNAs

Figura 01. Biogénese e função dos miRNAs.

Fonte: Gorenchtein M, Poh CF, Saini R, Garnis C (2012). MicroRNAs in an Oral

Cancer Context – from Basic Biology to Clinical Utility. J Dent Res

91(5):440-446

[1, 2]


Processamento/conversão

pré-miRNA

Microprocessorcomplex





91(5):440-446

[1, 2]


Exportação para o citoplasma

RAN-GTP-dependent





91(5):440-446

Exportin-5

[1, 2]


Ação da enzima Dicer RNase II

miRNA/miRNA duplex

Loqacious(Loqs)





91(5):440-446

[1, 2]


Cadeia simples de miRNA maduro

RISC

Funcional





91(5):440-446

[1, 2]


Ligação do miRNA a zonas 3’ não transcritas – UTR – do mRNA alvo

Degradação do mRNA





91(5):440-446

Repressão translacional

AGO2 + GW182

Down-regulation

[1, 2]


•Confiável e altamente sensível para a deteção de miRNA.PCR

•Globalmente estabelecida como a tecnologia padrão paraestudos sobre a expressão dos miRNA;

•Sondas e condições de hibridização.Tecnologia dos microarrays

Northern Blot, hibridização in situ e a análise em série da

expressão de gene

•Deteção de novos smallRNAs, incluindo miRNA.Sequenciação de smallRNA

•Identificação de novos biomarcadores de miRNA.Programas como o microRNA.org ou TargetScan. sequenciação

profunda

Outras técnicas como NGS (next-generation sequencing)

03. Métodos de deteção de miRNAs

[3, 5, 8]


Oncogenes

Genes supressores de tumores

miRNA-21 quando presente diminui a

apoptose e aumenta o crescimento das células

Let 7 alvo RAS

Let 7 Ras

Perda de função de alguns miRNA promove carcinogénese

04. Comportamento dos miRNAs no cancro

[1]


Causas

Consequências

05. Mecanismos de desregulação dos miRNAs no cancro

Figura 02. Mecanismos de desregulação dos miRNAs no cancro.

Fonte: Gorenchtein M, Poh CF, Saini R, Garnis C (2012). MicroRNAs in an Oral Cancer Context

– from Basic Biology to Clinical Utility. J Dent Res 91(5):440-446

[1]

miRNAs Agentes que afetam a proliferação celular, apoptose e até a resposta a quimioterapia


↑miR-21 e miR-221 e ↓ da

família let-7 miR-184

↑miR-21 ↔↓TPM1 e PTEN

↓ família let-7 ↔↑proteína

Dicer

miR-222/ miR-138

↓miR-1 e miR-133a

06. miRNAs no cancro oral

[1, 5]

miRNAs

• Apresentam um diferente perfil em células normais e cancerígenas

Biomarcadoresnão-invasivos

• Deteção de estados precoces de diagnóstico de cancro oral

Desenvolvimento de terapias e

tratamentos com base em miRNAs


07. Utilidade clínica dos miRNAs associados aos OSCC

[1, 5]


Silenciados com inibidores de miRNA

(miRNA-21)

Administração terapêutica em células

tumorais (miR-26a)

Oncogenes

Supressores tumorais

Vetores Administração

direta nos tecidos

08. miRNAs e tratamento

[1]

Bibliografia_Webgrafia[01] Gorenchtein M, Poh CF, Saini R, Garnis C (2012). MicroRNAs in an Oral Cancer Context – from Basic Biology to Clinical Utility. J Dent Res 91(5):440-446;

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