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O Respirômetro de Warburg Década de 20 Coloca o substrato Papel de filtro com KOH Tecido Meio de cultura Fluido com cor Detecta CO 2 Produzido Detecta o O 2 Consumido icose + 6O 2 6CO 2 + 6 H 2 O + Energia CO 2 KHCO 3 Pressão no frasco Leitura do líquido KOH + CO 2 KHCO 3

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O Respirômetro de WarburgDécada de 20

Coloca o substrato

Papel de filtro com KOH

Tecido Meio de cultura

Fluido com cor

•Detecta CO2 Produzido•Detecta o O2 Consumido

Glicose + 6O2 6CO2 + 6 H2O + Energia

CO2 KHCO3

Pressão no frascoLeitura do líquido

KOH + CO2 KHCO3

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Qual o destino do Piruvato na presença de O2 ?

0 5 10 15 20Tempo (min)

A

Moles CO2 produzidos

40 3 2 1 0

B: Piruvato (C3) + ácidos dicarboxílicos (C4) + 7O2 7CO2 + 7 H2OA: Piruvato (C3) + 3O2 3CO2 + 3 H2O

Szent – Györg (1930) testa os ácidos C4•Malato•Oxalacetato•Succinato•Fumarato

Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos

Músculo de peito de pombo

B

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Onde o CO2 esta sendo produzido?Não era na fermentação ...

Enzima da respiraçãocitocromo

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Moles CO2 produzidos

Moles CO2 produzidos

Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos

Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos

3210

3210

0 6 12 18 24 30

0 6 12 18 24 30

Sir Hans-Krebs (1935)Testa ácidos dicarboxílicos de 5 carbonos - Alfa cetoglutarato

Sir Hans-Krebs (1937)Testa ácidos dicarboxílicos de 6 carbonos

•Citrato•Aconitato•IsocitratoPiruvato

Piruvato

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3C + 4C = 7CPiruvato + ac. dicarboxilicos

Não funciona

6C citrato

5C α-cetoglutarato

4C malato

4C succinato

4C fumarato

4C oxalacetato

Raciocínio de Krebs

3C piruvato7C ?

CO2

CO2

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Raciocínio de Krebs

6C citrato

5C α-cetoglutarato

4C malato

4C succinato

4C fumarato

4C oxalacetato

3C piruvato

CO2

CO2

CO2

2C acetil co-A