O segredo da Vida...

Watson e Crick

A=T C=G

DNA se replica

Originando duas moléculas filhas iguais.

Como copia...

Replicação de DNA

Ligação fosfodiester

A reação de polimerização é feita pela DNA polimerase e necessita de nucleotídeos trifosfatos, uma extremidade “primer” ou iniciadora, que possui a hidroxila 3’ livre e um molde ou “template” para ser copiado.

“Bolha” de replicação

Replicação unidirecionalgera fragmentos:Fragmentos de Okazaki

DNA polimerase I tem função editorial

Seqüenciamento de DNA

Princípios

Reação com ddNTP

Produtos da reação

Leitura da seqüência

Genoma de S. cerevisae

Drosophila melanogasterCaenorhabditis elegans

Terminado em 2000

6200 genes12.147.813 nucleotídios

Fluxo da informação

Transcrição

RNA polimerase é a enzima responsável pela transcrição

Sítios de reconhecimento

Tradução necessita de adaptador

Que funciona pela complementariedade

Complementariedade

Estrutura do DNA

Complementariedade

Ligação cooperativa

quando rompida o efeito é

marcante.

Estrutura da água

Pontes de hidrogênio

no

. de

bol

has

Temperatura oC

Evaporação de água

?

no

. de

bol

has

Temperatura oC

Evaporação de água

curva de transição

Estrutura do DNA

Complementariedade

% d

esna

tura

ção

Temperatura oC

T’m

Desnaturação de DNA

Conteúdo de CG

% d

esna

tura

ção

Temperatura oC

T’m

Desnaturação de DNA

Desnaturação em função do conteúdo de GC

%C

G

T’m

Hibridação

Calor ou pH = desnaturação

Reassociação

Temperatura e força iônica

Reassociação depende da concentração das seqüências

% r

eass

ocia

ção

Cot

A velocidade de reassociação depende da complexidade do DNA

% r

eass

ocia

ção

Cot

Três classes de seqüências de DNA

Cot

% r

eass

ocia

ção