IMPORTNCIA DA ANLISE DE PARASITOS EM ALIMENTOS E GUA

Maria Ap. Moraes MarcianoMrcia Bittar Atui

Laboratrio de Microscopia Alimentar do Instituto Adolfo Lutz de So Paulo. Avenida Dr. Arnaldo, 355, Cerqueira Csar, So Paulo.

ATUAO DA MICROSCOPIA ALIMENTARIdentificao dos elementos histolgicos dos vegetais;

Pesquisa de fraudes;

Pesquisa de matrias estranhas, inclusive parasitos em alimentos, guas e bebidas;

Pesquisa de partes indesejveis de vegetais (ex: caf, ch mate);Auxilio na elucidao de surtos de DTAs

"foodborne" doenas veiculadas por alimentos;

+de 250 descritas parasitos??? parasitas??? gnero

Cosmopolita incidncia pases (desenvolvimento/e subdesenvolvidos hbitos de higiene; saneamento bsico; sistemas de tratamento de gua; vigilncia sanitria de alimentos; hbitos alimentares (cultural).

DTAs

Alimentos vias de veiculao de parasitos

Contaminao diversas etapas do processamento: Produo; Armazenamento; Conservao; Transporte; Comercializao

Manipulao at o consumo final.

VIAS DE TRANSMISSO

Hortalias e frutos precariamente lavados ou manipulados por mos contaminadas de indivduos parasitados;

Irrigao com gua contaminada;

Produtos de origem animal - carnes e derivados;

gua;

Alimentos e bebidas preparados com gua contaminada.

Geram nus aos cofres pblicos: 26 milhes de reais por ano com tratamento e internao.VIAS DE TRANSMISSO

Cistos de protozorios e ovos de helmintos

Protozorios: unicelulares (microscpicos)Giardia;Toxoplasma; Tripanossoma; Leishmania;Plasmodium;Criptosporidium, etc...Helmintos: vermes Tenias;Difilobotrium;Ancilostomas;etc...

OCORRNCIA DE SURTOSSurto de Difilobotrase: So Paulo (1995) - 27 casos :Diphyllobothrium latum -.

Ingesto de peixes crus ou mal cozidos, restaurantes japoneses;Surtos de toxoplasmose: Canad (1995) - 100 casosGois (2006) - carne crua de gado ovino: 17 indivduos kibe cr: 70 casos confirmados - festaSanta Isabel do Iva PR (2001) - gua com oocistos: 450 pessoas - 9.000 habitantes (reservatrio contaminado com fezes)Bragana Paulista SP (seminrio) 81 pessoas envolvidas,31 IgM + (causa inconclusiva) carne? gua?Recente: regio de Araraquara sendo descrito pelo IMT SP

Surto de Criptosporidase:Milwaukee (EUA) - 1993 + 400 mil pessoas(EUA) 1993 - suco de ma + 200 pessoas infectadasMinnesota (EUA) - 1995 salada de frango (manipulao) fralda contaminada 50 pessoasNo Brasil, surtos isolados

Surto de Doena de Chagas: picada barbeiro-alimentosSanta Catarina (2004) - Caldo-de-cana - 24 pessoas foram infectadas, com trs bitos Par e Amazonas (2006 e 2007) - Aa - 170 casos e 10 bitos OCORRNCIA DE SURTOS

AnisakaseNematdeos larvais famlia Anisakidae peixes crs Japo devido aos sushis e sashimis

+ 10 casos descritos ao ano nos EUA;

SINTOMAS:trato gastrointestinal clicas abdominais e vmitos lceras - pode haver perfurao da cavidade peritoneal; migra para orofaringe - tosse.

Brasil no h notificao de casos - peixes contaminados como o dourado, anchova, pargo e peixe-espada na costa brasileira;

litoral nordeste;

bacalhau importado analisado pelo Instituto Adolfo Lutz - 1997 e 1998;suspeita-se que muitos casos no estejam sendo detectados.Anisakase

AnisakaseMtodo diagnstico:Filetamento

Foto: Mrcia Bittar

DifilobotraseDifilobotrium sp (pacificum / latum) Ocorrncia - reas - ingesto de peixes crus ou mal cozidos;Maior tnia do homem : vermes 3 a 10 m;Ovos: gua limpa coracidio;Preveno: saneamento bsico e educao sanitria;populaes de esquims, provenientes do Alasca e Canad;

sushis e sashimis;

DifilobotrasePesquisa direta:filetamentoSALMO

ANCILOSTOMIASE OU AMARELO

Ancylostoma duodenale Necator americanus

Nematdeos vermes cilndricosOMS + 1,3 bilho de pessoas no planeta, 65 mil bitos (anemia)Regies tropicais e subtropicaisMonteiro Lobato - personagem Jeca Tatu 4 a 3 mil ovos/dia (fmea) larvas infectantes gua ou alimentos contaminados

Verduras mal lavadas

Dentes fixadores

ANCILOSTOMIASE OU AMARELOpele

Ancylostoma spOvos visualizados por microscopiaTcnicas de centrfugo-concentrao

HIMENOLEPASEHymenolepis nana : tenia; PlatelmintoSintomas : diarria, dor abdominal e outros sintomas, palidez, perda de peso;

Ocorrncia - (cosmopolita) regies de clima temperado;Ocorre com maior freqncia no sul dos Estados Unidos e Amrica Latina; comum tambm na Austrlia, pases do Mediterrneo, Oriente Mdio e ndia. diarria, perda de peso, desnutrio, desidratao e forte dor abdominal

ASCARIS LUMBRICIDES TRICHURIS TRICHIURAAscaridase + comum na Amrica do Norte;Trichurase na Europa alta prevalncia regies tropicais

consumidores de vegetais crus e frutas rasteiras ao solo;sintomas alrgicos (especialmente, a asma)Casos isolados, comum em reas rurais

ASCARIS LUMBRICIDES Mtodo diagnstico: Faust / Hofman (centrfugo-concentrao) lugolAdaptado IAL gua e verduras

TRICHURIS TRICHIURAMtodo diagnstico: Faust / Hofman (centrfugo-concentrao) lugolAdaptado IAL gua e verdurasIAL - roedor em caixa de leiteovos nas fezes (lembra bandeja)

AngiostrongilaseLesmas e caramujos (escargots)

2007 relatados 2 casos meningite eosinfilaconsumo lesma africana crua, Estado do Esprito Santo, 1 bito (Fonte: SVS/MS).

Angiostrongylus sp(cantonensis / costaricensis) SNC - doena abdominal

TENASEPlatelmintos: vermes chatosTaenia saginata: transmitida pela carne bovina;infeco intestinal; distribuio mundial;Gado : hospedeiro intermedirio;Humanos : hospedeiros definitivos;Modo de transmisso - carne bovina crua ou mal cozida;

Taenia solium : transmitida pela carne suna(cisticercose)ingesto de alimentos (geralmente verduras) ougua contaminada ovos de Taenia solium.

TENASE (cisticercose)homem cisticercose - ingesto ovos de T. Solium alimentos contaminados - material fecal humano;???Protena de superfcie

Pases muulmanos : no h ocorrncia (proibido consumo de carne suna)Tocantins porcos - esgotoMxico, Guatemala, El Salvador, Peru, Chile e Brasil; saneamento deficiente;ingesto carne mal passada;crises convulsivas

TENASE (cisticercose)Mtodo diagnstico: Faust / Hofman (centrfugo-concentrao) lminas com lugol (Adaptado IAL)

gua e verdurasMtodo diagnstico: Filetamento carnes( 2 lminas) estereoscpio(translucidez)cisticerco

Cryptosporidium sp (parvum/hominis)Oocisto mede de 2-4 m transmisso - fecal-oral;

Ingesto gua e alimentos contaminados com oocistos;Piscinas e lagos (recreao) ingesto de gua; gelo(viajantes)Fulminante para imunodeprimidos; AIDSDiarria;Resistente a cloraoFiltragem - eficienteCriptosporidase

CriptosporidaseMtodo diagnstico:(centrfugao+concentrao+ flutuao) - colorao de Kynion - Adaptado IAL Cora estruturas alcool-cido resistentes.

GiardaseGiardia sp CISTOS(intestinalis /lamblia) protozorio

Ocorrncia - distribuio mundial;+crianas

prevalncia em reas com saneamentobsico deficiente; diarria crnica

GiardaseTransmisso: fecal-oral ingesto - alimentos e gua contaminados com cistos;Surtos isolados;

Trofozotos (intestino) Cistos (ambiente)

TOXOPLASMOSEO Toxoplasma gondii protozorio intracelular do Filo Apicomplexa

Seu nome vem do grego: Toxon = arco Plasma = molde

Encontrado em diversos tecidos no organismoPrincipalmente clulas estveis (msculo/neurnios)Hospedeiro intermedirio: animais de sangue quenteHospedeiro definitivo: felinos

Zoonose cosmopolita amplamente distribudo no Mundo .

>1 bilho indivduos no mundo

~70% adultos infectados no Brasil

60% adultos infectados em So Paulo

10% sintomticos (doena aguda)

2% corioretinite~100000 casos/SP-1milho

EncefaliteAIDS20% bitostoxoplasmose congnita230/ano novos casos

CICLO DE VIDA DO T.gondii

TRANSMISSO

VIA ALIMENTO Ingesto de carne mal cozida contendo cistos de Toxoplasma; Ingesto de oocistos provenientes de gua e alimentos contaminados.Sua transmisso est associada a:carncia de sistemas de tratamento de guaOs oocistos boiam, decantao vigilncia sanitria de alimentoshbitos alimentares hbitos de higiene

MTODOS LABORATORIAISmtodo de centrifugo-flutuao - soluo de sulfato de zinco ou sacarose; cistos e oocistos;Centrfugo-concentrao (pellet) lugol ovos de helmintos

Membrana filtrante; esfregao - colorao

IMS - separao imunomagntica

A IMS usa partculas de ltex magnetizadas, cobertas com anticorpos poli ou monoclonais, para remoo dos microrganismos de culturas lquidas.

Reao em cadeia polimerase PCR (onerosas)MTODOS LABORATORIAISPesquisa de fragmento de DNA do parasita

Floculao - aglutinao (flocos) alterao do pH (normalmente - hidrxido de alumnio) carrega impurezas em suspensoMTODOS LABORATORIAIS

Kits ElisaMTODOS LABORATORIAIS

Microscpio apropriadoImunofluorescncia (marcados) anticorpos monoclonais;DIRETAS / INDIRETASMTODOS LABORATORIAIS

NOVA ABORDAGEMInstituto de Medicina Tropical de So Paulo

DETECO DE ANTICORPOS IgG ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM CARNE BOVINA Pesquisa de anticorpos especficos em exsudato crneo

Mestrado em Doenas Tropicais

Orientao: Dra Luciana R. Meireles e Dr Heitor Franco A. Junior

EXSUDATO CRNEODESCONGELAMENTO(ALTERNATIVO) deteco de anticorpos IgG,

NOVA ABORDAGEM

PADRONIZAO

Figura 1: Correlao entre os valores mdios das densidades pticas e as respectivas diluies seriadas das amostras de sangue total (r = 0,9941; valor de P < 0,0001).PADRONIZAO

Figura 2: Correlao entre os resultados do ELISA em amostras de soro, sangue e exsudato crneo e as suas respectivas absorbncias a 540nm. PADRONIZAO

APLICAOPadronizar para outros agentes

mtodo para monitoramento e prevalncia da infeco preveno de doenas de importncia veterinria e de sade pblica;

programa de monitoramento;carnes rotuladas (Toxoplasma free)EUA GESTANTEELUCIDAO DE SURTOS Demanda

Resoluo Normativa n 12/78, da extinta CNNPA/MS em vigor at 2003;

no item Caractersticas Microscpicas exigia: Ausncia de sujidades, parasitos e larvas;

Ficando difcil de se encontrar um alimento que se adequasse a esse padro.LEGISLAO

Resoluo RDC n 175, de 8/07/2003, da ANVISA/MS Revogou a RN n 12/78

estabelece as disposies gerais para avaliao de matrias macroscpicas e microscpicas prejudiciais sade humana em alimentos embalados, inclusive bebidas e guas envasadas, relacionadas aos riscos sade.

LEGISLAO

insetos em qualquer fase de desenvolvimento, vivos ou mortos, inteiros ou partes: vetores mecnicos (Ordem Blattodea e Ordem Diptera);

outros animais vivos ou mortos, inteiros ou em partes: vetores mecnicos (ratos, morcegos, pombas);

parasitas;

excrementos de insetos e de outros animais;

objetos rgidos, pontiagudos e/ou cortantes, que podem causar leses.LEGISLAO

RDC n 175/2003 Item 4.5: para as anlises deve-se colher amostras dos alimentos em suas embalagens originais ntegras, sem quaisquer sinais de violao, perfuraes ou outros indcios da no integridade da embalagem.LEGISLAO

Alimentos que contm matrias estranhas prejudiciais sade ou no (embalagens no ntegras)

Insatisfatrios

Portaria n 326/97 (indicando a no adoo e/ou manuteno BPF) LEGISLAO

Portaria n 326, de 30/07/1997, da SVS/MS aprova o Regulamento Tcnico sobre Condies Higinico-Sanitrias e de BPF para Estabelecimentos Produtores/Industrializadores de Alimentos;

estabelece os requisitos gerais de higiene e de boas prticas de fabricao para alimentos produzidos ou fabricados para consumo. LEGISLAO

Lei 8.078 de 11/9/1990 Artigo 18 Pargrafo 6

So imprprios ao uso e consumo:

Cdigo de Defesa do Consumidor

LEGISLAO

I os produtos cujos prazos de validade estejam vencidos,

II os produtos deteriorados, alterados, adulterados, avariados, falsificados, corrompidos, fraudados, nocivos vida ou sade, perigosos ou, ainda, aqueles em desacordo com as normas regulamentares de fabricao, distribuio ou apresentao,

III os produtos que, por qualquer motivo, se revelem inadequados ao fim a que se destinam.LEGISLAO

Resoluo RDC n 274, 22/09/05, da ANVISA/MS (gua envasada e gelo)

Portaria n 518, 25/03/2004, do MS (gua p/ consumo humano)guaLEGISLAO

Introduzir tcnicas rpidas de deteco e caracterizao gentica destes parasitas na rotina/monitorizao como o PCR em Tempo Real e outras tcnicas imunolgicas.

EDUCAO SANITARIA

PERSPECTIVAS FUTURAS

A Microscopia Alimentar uma rea muito ampla, tem muito a ser estudada e esperamos que, com a introduo de novas metodologias e trabalho conjunto, possamos lev-la a novos e promissores rumos, auxiliando na elucidao dos casos de DTAs e colaborando indiretamente com a sade da populao.

mamarciano@ial.sp.gov.brmamarciano@usp.brmarcatui@ial.sp.gov.br

*A TOXOPLASMOSE UMA ZOONOSE CAUSADA PELO TOXOPLASMA GONDII,UM PROTOZOARIO DA FAMLIA DOS COCCDIOS QUE SE ENCONTRA DISTRIBUDO NO MUNDO TODO . SOMENTE EM REGIES MUITO ISOLADAS E SEM A PRESENA DE FELINOS QUE NO OBSERVAMOS INCIDNCIA DESSA DOENA.

*A toxoplasma acomete mais de 1 bilho de indivduos no mundoO SEU CICLO SEXUADO OCORRE NOS FELINOS QUE LIBERAM OOCISTOS NO AMBIENTE E CONTAMINAM TANTO O HOMEM COMO OS ANIMAIS DE SANGUE QUENTE QUE SO SEUS SEUS HOSPEDEIROS INTERMEDIARIOS.FORMANDO CISTOS NOS TECIDOS PRINCIPALMENTE EM CLULAS ESTVEIS. OS FELINOS SE REINFECTAM AO INGERIR CISTOS ATRAVS DO CARNIVORISMO FECHANDO ASSIM SEU CICLO SEXUADO. O HOMEM TAMBM SE INFECTA ATRAVS DO CARNIVORISMO,VIA TRANSPLACENTRIA E MENOS FREQUENTEMENTE DURANTE TRANSFUSO SANGUNEA, TRANSPLANTE DE RGOS E ACIDENTES DE LABORATRIO