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CCTE_002 - ESTAÇÃO CIENTÍFICA FERREIRA PENNA - DEZ ANOS DE PESQUISA NA AMAZÔNIA População microbiana em Latossolo Amarelo e Terra Preta Arqueológica na Estação Científica Ferreira Penna, Floresta Nacional de Caxiuanã, Município de Melgaço, Pará Eric Bruno da Silva Batista, Maria de Lourdes Pinheiro Ruivo Maria de Lourdes Oliveira Museu Paraense Emílio Goeldi, campus de Pesquisa. Av. Perimetral, 1901 - Terra-Firme – Belém (PA) CEP: 66077-530 - Caixa Postal: 399 I NTRODUÇÃO A biomassa microbiana do solo é definida como o componente microbiano vivo do solo e é composta de bactérias, fungos, microfauna e algas. É esta comunidade a responsável pelo processo chamado de produção primária onde a existência e a continuidade da vida no globo terrestre tem sido baseada através de sua atuação e interação sobre os detritos (folhas, flores, frutos, galhos, raízes, etc) depositados pela vegetação no solo (Maciel 1991; Wardle & Hungria 1994). A biomassa, a atividade e a composição dessas populações deveriam ser conjuntamente investigadas, avaliando-se seus efeitos sobre a ciclagem natural de nutrientes. O presente trabalho tem como objetivos avaliar a composição da população microbiana (fungos e bactérias) do Latossolo Amarelo e Terra Preta Arqueológica na Estação Científica Ferreira Pena, Caxiuanã, PA, com o intuito de gerar informações sobre as diferenças existentes entre a diversidade e o número da população microbiana do solo. MÉTODOS As amostras de solo foram coletadas nos seguintes locais: a) sítios Ilha de Terra (IT) e Manduquinha (TP), ambos Terra Preta Arqueológica, b) Experimento de Seca da Floresta (ESF), em Latossolo Amarelo, ambos na Floresta Nacional de Caxiuanã, município de Melgaço - Pará. As amostras de IT foram coletadas nas profundidades de 0-10 e 10-20 cm; as de TP na profundidade de 0-10 cm; e as ESF nas profundidades de 0-05, 05-10, 10-25 e 25-50 cm. Para avaliar a população microbiana do solo foram utilizadas as etapas de contagem, isolamento e identificação, descritas a seguir. Contagem da população microbiana A determinação da população de fungos e bactérias foi realizada utilizando-se a técnica “ Pour Plate ” de contagem em placas de Petri. Foi preparada uma diluição decimal em série, adicionando-se 10g da amostra de solo em erlenmeyer contendo 90 ml de água peptonada 0,1% estéril. Após agitação da mistura, preparou-se a partir desta, diluições de 10 -2 a 10 -3 pelas sucessivas transferências de 1,0 ml de suspensão mais concentrada de solo, para tubos de ensaio contendo 9,0 ml de água peptonada a 0,1% estéril. Da diluição 10 -3 foi transferido 1,0 ml para placas de Petri esterilizadas, adicionando-se em seguida o meio de cultura fundido a +/- 45º C, sendo Agar Padrão para contagem de bactérias e Agar Batata para contagem de fungos, empregando- se um ligeiro movimento em forma de oito para melhor homogeneização do inoculo. Em seguida, as placas para contagem de bactérias foram incubadas em estufa a 32º C por 48 horas e as placas para contagem de fungos em Estufa Incubadora para B. O. D. por cinco dias a 25º C. O processo de contagem foi direto realizado com o auxilio do Contador de Colônias CP-602, em contraste com o meio opaco da cultura. Isolamento e identificação da população microbiana Após a contagem das colônias, o isolamento das bactérias foi realizado através da “pescagem” das colônias e repicagem das mesmas para meios estoques de conservação, onde foram realizados testes bioquímicos e montadas preparações microscópicas, para estudo dos caracteres morfológicos. Para a identificação de fungos foi empregada a técnica de microcultivo em lâmina. Uma placa de Petri foi forrada com papel filtro, em seguida, colocou-se um bastão de vidro em forma de U sobre o papel filtro e uma lâmina de microscopia em cima do bastão. Após o conjunto ter sido autoclavado, foi posto assepticamente, um bloco de Agar Batata, sobre a lâmina de microscopia dentro da placa de Petri. Com uma alça de metal removeu-se um fragmento da cultura a ser identificada e inoculou-se os blocos de Agar por arrastamento da alça em suas bordas e laterais. Posteriormente, flambou-se uma lamínula de vidro e deitou-se a sobre o bloco de Agar, logo após, adicionou-se na placa de Petri água destilada esterilizada até saturar o papel filtro. Incubou-se a placa em Estufa Incubadora para B. O. D. por cinco dias a 25ºC ou até o crescimento parecer maduro. Cuidadosamente retirou-se a lamínula de cima do bloco pondo-a em uma lâmina de microscopia que já continha uma gota de lactofenol com azul de metileno. A lamina foi visualizada em microscópio onde foi submetida a uma avaliação micromorfológica em microscópio luminoso comum. RESULTADOS E DISCUSSÃO

Penna et al.. 1994. População microbiana em Latossolo Amarelo e Terra Preta Arqueológica na Estação.pdf

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  • CCTE_002 - ESTAO CIENTFICA FERREIRA PENNA - DEZ ANOS DE PESQUISA NA AMAZNIA

    Populao microbiana em Latossolo Amarelo e Terra Preta Arqueolgica na Estao Cientfica Ferreira Penna, Floresta Nacional de Caxiuan, Municpio de Melgao, Par

    Eric Bruno da Silva Batista, Maria de Lourdes Pinheiro Ruivo Maria de Lourdes Oliveira Museu Paraense Emlio Goeldi, campus de Pesquisa. Av. Perimetral, 1901 - Terra-Firme Belm (PA) CEP: 66077-530 - Caixa Postal: 399

    INTRODUO A biomassa microbiana do solo definida

    como o componente microbiano vivo do solo e composta de bactrias, fungos, microfauna e algas. esta comunidade a responsvel pelo processo chamado de produo primria onde a existncia e a continuidade da vida no globo terrestre tem sido baseada atravs de sua atuao e interao sobre os detritos (folhas, flores, frutos, galhos, razes, etc) depositados pela vegetao no solo (Maciel 1991; Wardle & Hungria 1994). A biomassa, a atividade e a composio dessas populaes deveriam ser conjuntamente investigadas, avaliando-se seus efeitos sobre a ciclagem natural de nutrientes.

    O presente trabalho tem como objetivos avaliar a composio da populao microbiana (fungos e bactrias) do Latossolo Amarelo e Terra Preta Arqueolgica na Estao Cientfica Ferreira Pena, Caxiuan, PA, com o intuito de gerar informaes sobre as diferenas existentes entre a diversidade e o nmero da populao microbiana do solo.

    MTODOS As amostras de solo foram coletadas nos

    seguintes locais: a) stios Ilha de Terra (IT) e Manduquinha (TP), ambos Terra Preta Arqueolgica, b) Experimento de Seca da Floresta (ESF), em Latossolo Amarelo, ambos na Floresta Nacional de Caxiuan, municpio de Melgao - Par. As amostras de IT foram coletadas nas profundidades de 0-10 e 10-20 cm; as de TP na profundidade de 0-10 cm; e as ESF nas profundidades de 0-05, 05-10, 10-25 e 25-50 cm. Para avaliar a populao microbiana do solo foram utilizadas as etapas de contagem, isolamento e identificao, descritas a seguir.

    Contagem da populao microbiana A determinao da populao de fungos e

    bactrias foi realizada utilizando-se a tcnica Pour Plate de contagem em placas de Petri. Foi preparada uma diluio decimal em srie, adicionando-se 10g da amostra de solo em erlenmeyer contendo 90 ml de gua peptonada 0,1% estril. Aps agitao da mistura, preparou-se a partir desta, diluies de 10-2 a 10-3 pelas sucessivas transferncias de 1,0 ml de suspenso mais concentrada de solo, para tubos de ensaio contendo 9,0 ml de gua peptonada a 0,1% estril.

    Da diluio 10-3 foi transferido 1,0 ml para placas de Petri esterilizadas, adicionando-se em seguida o meio de cultura fundido a +/- 45 C, sendo Agar Padro para contagem de bactrias e Agar Batata para contagem de fungos, empregando-se um ligeiro movimento em forma de oito para melhor homogeneizao do inoculo. Em seguida, as placas para contagem de bactrias foram incubadas em estufa a 32 C por 48 horas e as placas para contagem de fungos em Estufa Incubadora para B. O. D. por cinco dias a 25 C. O processo de contagem foi direto realizado com o auxilio do Contador de Colnias CP-602, em contraste com o meio opaco da cultura.

    Isolamento e identificao da populao

    microbiana Aps a contagem das colnias, o isolamento

    das bactrias foi realizado atravs da pescagem das colnias e repicagem das mesmas para meios estoques de conservao, onde foram realizados testes bioqumicos e montadas preparaes microscpicas, para estudo dos caracteres morfolgicos.

    Para a identificao de fungos foi empregada a tcnica de microcultivo em lmina. Uma placa de Petri foi forrada com papel filtro, em seguida, colocou-se um basto de vidro em forma de U sobre o papel filtro e uma lmina de microscopia em cima do basto. Aps o conjunto ter sido autoclavado, foi posto assepticamente, um bloco de Agar Batata, sobre a lmina de microscopia dentro da placa de Petri. Com uma ala de metal removeu-se um fragmento da cultura a ser identificada e inoculou-se os blocos de Agar por arrastamento da ala em suas bordas e laterais. Posteriormente, flambou-se uma lamnula de vidro e deitou-se a sobre o bloco de Agar, logo aps, adicionou-se na placa de Petri gua destilada esterilizada at saturar o papel filtro. Incubou-se a placa em Estufa Incubadora para B. O. D. por cinco dias a 25C ou at o crescimento parecer maduro. Cuidadosamente retirou-se a lamnula de cima do bloco pondo-a em uma lmina de microscopia que j continha uma gota de lactofenol com azul de metileno. A lamina foi visualizada em microscpio onde foi submetida a uma avaliao micromorfolgica em microscpio luminoso comum.

    RESULTADOS E DISCUSSO

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    Os resultados da contagem da populao microbiana mostram que cada sitio teve sua distribuio de populao diferenciada.

    A Figura 1 mostra a distribuio da populao de fungos e bactrias no stio Ilha de Terra (IT),onde verifica-se que no houve homogeneidade

    na distribuio da populao microbiana do solo. J a populao microbiana de Terra Preta Arqueolgica (TP) apresentou-se diferente, onde houve uma predominncia de bactrias sobre fungos, em todas as amostras (Figura 2).

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    Perfil

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    Fungos 0-10

    Fungos 10-20

    Bactrias 0-10

    Bactrias 10-20

    Figura 1 - Distribuio da populao microbiana do solo no sitio Ilha de Terra (IT). Expressos em 103 UFC/g

    de solo.

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    Perfil

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    FungosBactrias

    Figura 2 - Distribuio da populao microbiana do solo no sitio Terra Preta Arqueolgica (TPA). Expressos em 103 UFC/g de solo.

    No entanto, a populao microbiana do stio do Experimento de Seca da Floresta (ESF), foi o

    inverso, a populao de fungos foi superior a de bactrias como mostra a Figura 3.

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    ESF (00-05 cm) ESF (05-10 cm) ESF (10-25 cm) ESF (25-50 cm)

    Perfil

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    Bacterias Fungos

    Figura 3 - Distribuio da populao microbiana do solo no sitio Experimento de Seca da Floresta (ESF). Expressos em 103 UFC/g de solo.

    A natureza da comunidade vegetal regula a fonte de nutrientes para a biomassa e contribue qualitativamente e quantitativamente para o acumulo de matria orgnica (Wardle & Hungria 1994). Tambm, o manejo, alm das caractersticas fisco-qumicas de cada solo, como por exemplo a temperatura e umidade do solo provocam diferenas marcantes na comunidade microbiana em cada tipo de solo (Maciel, 1991). Em se tratando de Terra Preta, deve-se considerar a populao humana que viveu no stio e que adicionou dejetos ao solo,

    podendo ter provocado essas diferenas marcantes nessas comunidades.

    Os testes de identificao revelaram que quanto natureza da populao de fungos, esta foi bem homognea, encontrando-se os mesmos gneros de fungos em todos stios, com algumas peculiaridades. Foram identificados at o momento os seguintes gneros de fungos: Mixotrichum, Rhizopus, Rhizomucor, Sporothrix, Trichoderma, Cladosporium, Penicillium, Mucor , Apergillus e Fusarium.

    Figura 4 - Fungos do gnero Fusarium e Aspergillus, respectivamente, encontrados em solo do sitio IT.

    CONCLUSES

    A ocorrncia da populao microbiana do solo foi caracterstica para cada stio, havendo grande diferena no nmero de indivduos entre os stios.

    A natureza da populao de fungos foi bem homognea, encontrando-se, na maioria das vezes, os mesmos gneros de fungos em todos stios.

    REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS Maciel, U.N. 1991. Influencia do Sistema de Manejo

    na Microbiologia do Solo em rea de Cultura de

    Milho no Nordeste do Par. Tese. MEC-FCAP.Belm-Par. 60p.

    Wardle, D.A. & M. Hungria. 1994. A Biomassa Microbiana do Solo e sua Importncia nos Ecossistemas Terrestres. In: Microrganismos de importncia agrcola. EMBRAPA-SP. Braslia-DF. 226p.