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Produtos Naturais e o Controle do Barbeiro Rhodnius prolixus,vetor da Doença de Chagas
Colaboradores: Marise Maleck de Oliveira Cabral Elói de Souza Garcia Patrícia Azambuja
Alphonse KelecomDepartamento de Biologia Geral
Universidade Federal Fluminense - Niterói, RJ
O parasita, Trypanosoma cruzi, no tubo digestivo do barbeiro, Rhodnius prolixus
Estágios de muda de ninfas de Rhodnius prolixus
A-E : ninfas de 1º - 5º estágio
Mamadeira para alimentação do barbeiro
membrana de látex
entrada de água a ~37ºC
sangue humano
saída de água
Rhonius prolixus, alimentado
Testes com ninfas de Rhodnius prolixus
Ninfas de 4º estágio lotes de 25-30 animais mantidos em jejum por um
período de 25-30 dias alimentados uma única
vez ad libidum pesados antes e depois do
repasto mantidos a 28ºC durante
3-4 semanas lote controle: sangue com
EtOH-salina (1:4) testes: sangue contendo
1-500 g/ml da amostra testada
O objetivo original
Azadirachtina A : toxicidade, fagoinibição, deformação das pupas,
atraso no desenvolvimento do inseto (DE50 25g/ml)
anti-muda (DE50 40 ng/ml)
O
O
OO
H
HO
OOH
OHH
COOCH3
CH3COO
CH3COO
O
O
Produtos Naturais de Melia(ceae)
Cumarinas
O O
MeO
HO
Antraquinonas Flanonóides
Diterpenos
HHO
HO H
H OH
O
O
H
Esteróides
HO
OH
OHH O
OH
Limonóides
O
OCH3
OOH
HOH
OO
OH
H
escopoletina
O
O
OH
CH3
OGal
OH
azedarachol
nimbaflavona
nimosona meliantriol
Estudo fitoquímico de Melia azedarach(Meliaceae)
Extração de sementes de M. azedarach com MeOH (rdt.: 12%)
extrato apresenta atividades fagoinibidora e anti-ecdise
purificação guiada por bioensaio partição MeOH(5% aquoso) versus n-hexano
– fração hexânica : inativa
evapora-se o MeOH e a fase aquosa é extraída com EtOAc– fase EtOAc contém toda a atividade
filtração em gel de sílica e ensaio biológico
Efeito de uma fração do extrato de Melia azedarach, contendo azadirachtina A, sobre a ecdise de larvas de 4º estágio de Rhodnius prolixus
• controle - 10 � g/ml - 25 g/ml
O
O
OO
H
HO
OOH
OHH
COOCH3
CH3COO
CH3COO
O
O
azadirachtina A
Isolamento de cinamodiol
triterpeno inédito
da série do eufano
cinamodiol
O
HO
OOH
H
H
H
particularidades:• posição da lactona (21-16)• hidroxila em C-12• hidroxila em C-3
Atividade biológica em Rhodnius prolixus :
• provoca ligeiro atraso da muda
• inibe a ecdise em 27% na conc. de 10 g/ml
Isolamento de quatro lignanas
, 2 bis-epi-pinoresinol , 3 hemicetal , 4 diácido
O
O
OH
HO
MeO
OMe
H H
O
O
OH
HO
MeO
OMe
H H
OHO
O
OH
HO
MeO
OMe
H H
COOH
HOOC
1 2
3 4
O
O
OH
HO
MeO
OMe
H H
1 pinoresinol
Atividades biológicas de pinoresinolem Rhodnius prolixus 1.
Toxicidade
tratamento contínuo
0
5
10
15
20
25
control 1 10 100
concentration
% m
ort
alit
y
0
20
40
60
80
100
120
140
control 1ug/ml 10ug/ml 100ug/ml
concentrationm
g in
ge
ste
d b
loo
d
Fagorrepelência
via repasto sangüíneo
O
O
OH
HO
MeO
OMe
H H
Atividades biológicas de pinoresinolem Rhodnius prolixus 2.
Anti-ecdise
Tratamento contínuo Repasto sangüíneo
Legenda: controle ; pinoresinol : 1 , 10, 50, 100 & 500g/ml
0
20
40
60
80
100
120
12 14 16 18 21
days after treatment
% e
cdys
is
0
20
40
60
80
100
120
12 14 16 18 21 24
days after feeding
% e
cdys
is
Atividades de lignanas em insetos
matairesinol: inseticida exerce ação sinergística
O
O
OMe
MeO
MeO
OMe
H H
eudesmina: • fagorrepelente
O
O
H H
O
O
O
O
sesamina: • inibe o crescimento e• mimetiza o hormônio juvenil
O
MeO
HO
O
OMe
OH
H
H
Ação de lignanas e neolignanasem Rhodnius prolixus
podofilotoxina
O
OMe
OMe
H
H
O
O
OH
MeO
O O
O
O O
OCH3
burchelina
• não é fagorrepelente• atrasa a muda em 6 dias • inibe a ecdise em 50% • altamente tóxica• inibe a diurese em ~90%
•não é fagorrepelente• atrasa ligeiramente a muda • não inibe a ecdise• não é tóxica• inibe a diurese em até 80%
em 10 g/ml
Análise em CG-EM da hemolinfa de Rhodnius prolixus tratado com 100 g/ml de burchelina
1a : cromatograma (CG) da hemolinfa coletada 30 min após o repasto 1b : cromatograma (GC) da hemolinfa coletada 1 hora após o repasto
O
O
O O
OCH3
Identificação dos produtos de degradação da burchelina (1) na hemolinfa de Rhodnius prolixus
1
O
O
O O
OCH3
6
O
O
O OH
OCH3
O
O
O O
OCH3
8a
O
O
O O
OCH3
8b
HO O
OCH3
7a
O
OCH3
O
7b
O
OCH3
O
7c
NH2
2
4
OCH3
5
3
O
O
OH
Mecanismo provável da degradação da burchelina
a degradação ocorre principalmente a nível do anel furânico
O
O
O O
OCH3
H
H
O
O
O OH
OCH3
a
H
b
b
bH
c
b
-C3H4
1 6
O
O
O O
OCH3
8b
O
O
O O
OCH3
8a
a
-H2
O
O
O O
OCH3
a,c
HO O
OCH3
O
O
OHHO H
7a
3
Preparação de derivados do álcool piperonílico
Agradeço pela sua atenção
1817
16
15
14
O
O
OAc
O
O
O
OCH3
O
O
O
OH
O
O
OH
O
O
O
H
CNPq, DAAD, FAPERJ
