Relatório 1 - Espectrofotometria

7/24/2019 Relatrio 1 - Espectrofotometria

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1. Objetivos

Atravs da anlise espectrofotomtrica obter a absorbncia e construir uma

curva padro para determinao da concentrao de leveduras em amostras

desconhecidas e o clculo da absortividade.

2. Introduo

a) Espectrofotometria:

A espectrofotometria um dos mais utilizados mtodos no somente para

anlises (bio)u!micas como tambm para identificao de propriedades f!sicas devrios ob"etos e suas classifica#es. A aplicao da espectrofotometria inclui t$picos

variados na ind%stria de alimentos& na u!mica forense& na medicina& na biotecnolo'ia&

na ind%stria ttil e controle de ualidade em 'eral.

b) *nd%stria de alimentos:

A Espectrofotometria um "avano" cientco por assim dizer, e

atualmente a tcnica mais precisa e exata para a medio, controle

de qualidade e formulao de cores em produtos alimentcios. de

extrema importncia para essa ind!stria, pois possuem riorosas

scaliza#es, em especial para colora#es dos alimentos, o que no

caso de um no atendimento, lotes inteiros podem ser descartados.

$s espectrofot%metros oferecem maior especicidade, sendo os

instrumentos ideias para a formulao de cor, especicao de

normas e tolerncias, comunicao inter&la'oratorial e controle de

qualidade no processamento de produtos alimentcios.

(urante a !ltima dcada, os espectrofot%metros foram cada vez mais

adotados nas ind!strias alimentcias para a padronizao de cor e

inspeo de controle de qualidade de entrada de inredientes. Eles

contri'uem para a especicao de cor do produto nal, como por

exemplo, em compotas, elias, conservas, 'e'idas, etc, em pesquisa

e desenvolvimento de novos alimentos e 'e'idas, e para o


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rastreamento ocasional de alimentos e triaem tcnica como por

exemplo classicao de qualidade de carnes, aves e peixes.

c) *nd%stria de alimentos associada + medicina:

A comercializao da maior parte dos alimentos precedida por

um processamento complexo, o qual necessita de ser devidamente

monitorizado, de forma a controlar a presena de su'stncias

nocivas. )o entanto, estas su'stncias, desinadamente anti'i*ticos,

so necess+rias no com'ate de diversas patoloias.

$ leite um lquido produzido pela secreo das lndulas mam+rias

das fmeas dos mamferos e por ser um alimento de elevado

potencial nutritivo, muito susceptvel - atividade micro'iana.

(evido a esta contaminao, o leite necessita de processos

industriais, tais como a elevao da temperatura, para destruir os

aentes patonicos e permitir a sua conservao /atos et al.,

01123. )o entanto, esses microranismos so excepcionais

produtores de su'stncias com poder anti'i*tico.

A classicao do leite efetuada com 'ase na quantidade de

microranismos presentes. Existem diversos tipos de leite. $ leite

pasteurizado pode ser classicado em tipo A, ' ou c, de acordo com o

rau de qualidade que apresenta. $ tipo A pasteurizado loo ap*s a

orden4a mecnica executada na explorao com o m+ximo de

4iiene. $ tipo ' transportado at 5 4oras ap*s a orden4a, para que

se6a pasteurizado e o tipo c o'tido por orden4a manual 7opel8a et

al., 01193.

$s anti'i*ticos so utilizados tanto em medicina 4umana, como

veterin+ria. 7ara controlar as concentra#es destes resduos em

produtos alimentares utiliza&se entre outros mtodos a

espectrofotometria :uedes catia et al, 011;3

d) ,edicina - ftalmolo'ia:


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(iante da proressiva destruio da camada de oz%nio, com

uma perda estimada de


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$ princpio da medida assenta na incidncia, numa amostra de

+ua residual com uma espessura 'em determinada contida numa

6anela *tica3, de um feixe de radiao a'ranendo a ama ?@&@is, que

corresponde aos comprimentos de onda entre 11 nm. Ao

atravessar a amostra de +ua residual, a radiao incidente vai sofrer

fen%menos de disperso mudana de direo por coliso com

partculas s*lidas em suspenso3 e de a'soro incorporao da

radiao nas molculas presentes na +ua, de acordo com os

diferentes nveis enerticos que aquelas podem assumir3.

(epois de atravessar a amostra, a radiao remanescente

analisada num detector e comparada com a radiao incidente. 7ara

cada comprimento de onda, calculado um rau de atenuao da

radiao, o'tendo&se um espectro. $ espectro , assim, uma

impresso diital da qualidade da amostra, reHetindo a sua

composio qumica e fsica. rito et al, 01


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'iomolculas em diversas amostras, sendo ento aplicadas -s

an+lises clnicas para dian*sticos de dia'etes, lipidemias,

colesterolemias, protein!rias e produtos nitroenados como +cido

!rico, uria e am%nia, enzimas como amilase, lpase, fosfatase

alcalina, fosfatase +cida, aminotransferases, lactato desidroenas

entre outras, alm de ons como c+lcio, s*dio e pot+ssio. $liveira,

01


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C=msoluto

V(L)

Loram pesados aproximadamente


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7ara medir a a'sor'ncia, o espectrofot%metro, foi a6ustado

para o comprimento de a'soro m+xima do fermento que de B21

nm. A ta'ela 0 mostra os resultados o'tidos.

Tabela + - Valor de absorb/ncia obtido de acordo com a concentrao em !"

%oncentrao &!"' bsorb/ncia


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r23co 1 - r23co da bsorb/ncia 4 %oncentrao &!"' com auste linear

Aplicando o a6uste linear, a equao da reta dada porK

y=a+bx y =0,853+0,0604x (1)R2=0,946

A lei de Gam'ert&eer esta'elece uma relao linear entre

a'sor'ncia e concentrao. $ r+co < apresenta um C0 iual a

1,;95, o que sinica que os pontos no esto muito 'em a6ustados

ao modelo de reresso linear. Esse desvio pode ser resultado de

erros, como falta de tcnica no preparo das suspens#es, o uso de

'alana desreulada ou com pouca preciso e +ua encanada ao

invs de +ua destilada.

Alm desses fatores, relevante mencionar que a'sor'ncia e

concentrao podem no o'edecer a Gei de eer atravs de rela#es

no lineares denotando um desvio. A principal causa de desvios da lei

a utilizao de solu#es concentradas. $ aumento da concentrao

pode seuir a proporcionalidade linear com a a'sor'ncia at um

ponto limite no qual essa proporo deixa de existir N0O.


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r23co + - r23co da bsorb/ncia 4 %oncentrao &!"' com auste loar6tmico

Aplicando o a6uste loartmico, a equao loartimica natural dada porK

y=a+bln (x )y=0,346+0,628 ln (x )(2)R2=0,998

$'servando o r+co os pontos no se comportam de fomar

linear sendo a lin4a de tendncia mais con+vel aquela cu6o valor de

C0 est+ mais pr*ximo de


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2,282=0,853+0,0604x

x=23,659 g /L

Amostra

2,044=0,853+0,0604x

x=19,718g /L

(e acordo com a ta'ela M e com a equao 0 tem&seK

Amostra AK

2,282=0,346+0,628ln (x )

x=21,820 g /L

Amostra

2,044=0,346+0,628 ln ( x )

x=14,937 g/L

VI. %2lculo do %oe3ciente de bsorti$idade

$ coeciente de a'sortividade calculado seuindo a f*rmulaK

|

|

KCd &)'

Em que A's a a'sor'ncia, d o camin4o *ptico, I a

concentrao e k a a'sortividade especca, pois a concentrao

se encontra em JG N


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||cm.g/L

k=( Lgcm )||Cd

k=

k=

A a'sortividade o'tida su'stituindo os respectivos valores na

equao M. A ta'ela 9 mostra a a'sortividade correspondente a cada

valor especco de a'sor'ncia e concentrao.

Tabela 7 - Valores da absorti$idade re#erente aos pares absorb/ncia econcentrao

bsorb/ncia %oncentrao &!"' bsorti$idade

&"!.cm'(*,,, 1*5 (*777(*8,+ )*( (*)+11*759 ,*( (*+7)+*(+8 15*( (*1)5+*5(7 )(*( (*()5+*++ +)*++( (*(8)+*(77 18*),8 (*1(5+*++ +1*+( (*1(7+*(77 17*8)9 (*1)9

,. %oncluses

$ espectrofot%metro um instrumento cu6o funcionamento se

'aseia na emisso e a'soro de ondas eletromanticas que

compreende uma ama de comprimentos de onda desde o

infravermel4o ao ultravioleta. ?m espectrofot%metro que opera no

espectro visvel no fornece, por exemplo, informa#es estruturais,

mas muito !til qualitativa e quantitativamente N


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$ espectrofot%metro tem uso muito variado que vai desde a

medicina, passando pela ind!stria de alimentos at a ind!stria textil.

Fam'm est+ intimamente liado a micro'ioloia experimental sendo

utilizado em diversas pr+ticas como determinao da densidade

celular de 'actrias e funos, avaliao do crescimento de micro&

oranismos,etc NMO.

9. Re#er;ncias


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@homas o.& 1aurs E.& 9ouet ,.2 spectrophotometrB as a non-

parametric measurement of Cater and CasteCater ualitB variabilitB. Dater

ual. Fes. G. /an.& 2ol. H4(7)&373I.

2an der 1roeJe G.& 5an'er'raber .& Dien'artner A.& 844K. on-line and in-situ

>2Lvis spectroscopB for multi-parameter measurements: a brief revieC.

MpectroscopB Europe& 2ol. 7I (H).

1rito M. F.& et al.&Espectrofotometria para monitorizaro da ualidade de 'ua

residual em drena'em urbana. Fecursos N!dricos& associao 9ortu'uesa dos

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Alves ,M. Ener'ia radiante. *n: Alves AA. Fefrao.Fio de Ganeiro: /ultura

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1er'manson G9& Moderber' 9. @he si'nificance of ultraviolet radiation for eBe

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Milva M2& niversitB 9ress& 7QQK.

liveira ,29. Aplica#es de estudos biou!micos uantitativos em cincias

biol$'icas e da sa%de. 1iolo'ia /elular e ,olecular6


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1arreto DG& 1arreto MF& Mcarminio *M& *noue 2-vis associada + metodolo'ia de

re'resso nas componentes principais. Mociedade 1rasileira de u!mica (M1).

O4a Feunio Anual da Mociedade 1rasileira de u!mica 844H.

uedes& /tia. Set al.T - Avaliao da utilizao da espectrofotometria de u2L2is

na uantificao de antibi$ticos em etratos de leite de vaca. Fevista da

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