i

UFRRJ

INSTITUTO DE BIOLOGIA

PROGRAMA DE POacuteS-GRADUACcedilAtildeO EM CIEcircNCIAS

FISIOLOacuteGICAS

DISSERTACcedilAtildeO

Respostas autonocircmicas e comportamentais ao estresse

sonoro agudo em catildees de companhia com histoacuterico de

fobia a sons de trovatildeo eou fogos de artifiacutecio

Carla Caroline Franzini de Souza

2015

ii

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO

INSTITUTO DE BIOLOGIA

PROGRAMA DE POacuteS-GRADUACcedilAtildeO EM CIEcircNCIAS

FISIOLOacuteGICAS

RESPOSTAS AUTONOcircMICAS E COMPORTAMENTAIS AO

ESTRESSE SONORO AGUDO EM CAtildeES DE COMPANHIA COM

HISTOacuteRICO DE FOBIA A SONS DE TROVAtildeO EOU FOGOS DE

ARTIFIacuteCIO

CARLA CAROLINE FRANZINI DE SOUZA

Sob a Orientaccedilatildeo da Professora

Magda Alves de Medeiros

Dissertaccedilatildeo submetida como

requisito parcial para obtenccedilatildeo do

grau de Mestre em Ciecircncias no

Programa de poacutes-graduaccedilatildeo em

Ciecircncias Fisioloacutegicas

Seropeacutedica RJ

Fevereiro de 2015

iii

6367

S729r

T

Souza Carla Caroline Franzini de 1988-

Respostas autonocircmicas e comportamentais

ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de

trovatildeo eou fogos de artifiacutecio Carla

Caroline Franzini de Souza ndash 2015

102 f il

Orientador Magda Alves de Medeiros

Dissertaccedilatildeo (mestrado) ndash Universidade

Federal Rural do Rio de Janeiro Curso de

Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Fisioloacutegicas

Bibliografia f 67-76

1 Catildeo ndash Fisiologia ndash Teses 2 Catildeo ndash

Efeito do stress ndash Teses 3 Catildeo ndash

Comportamento ndash Teses 4 Stress

(Fisiologia) ndash Teses I Medeiros Magda

Alves de 1973- II Universidade Federal

Rural do Rio de Janeiro Curso de Poacutes-

Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Fisioloacutegicas III

Tiacutetulo

iv

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO

INSTITUTO DE BIOLOGIA

PROGRAMA DE POacuteS-GRADUACcedilAtildeO EM CIEcircNCIAS FISIOLOacuteGICAS

CARLA CAROLINE FRANZINI DE SOUZA

Dissertaccedilatildeo submetida como requisito parcial para obtenccedilatildeo do grau de Mestre em

Ciecircncias no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Fisioloacutegicas

DISSERTACcedilAtildeO APROVADA EM 25022015

Magda Alves de Medeiros (Ph D) UFRRJ

(Orientadora)

Faacutebio Fagundes da Rocha (Ph D) UFRRJ

Luciene Covolan (Ph D) UNIFESP

v

DEDICATOacuteRIA

Dedico esse trabalho agrave Francesco (catildeo) Sarah (gata) e Myul

(gata) os animais que me acompanharam desde a infacircncia me

encantando no dia a dia com o carinho companheirismo e

inteligecircncia e que nos uacuteltimos meses nos deixaram apoacutes 15 anos

de maravilhosos tempos

Dedico tambeacutem a minha amada Universidade Rural que me

deu natildeo soacute a oportunidade de ter uma profissatildeo como a de seguir

na pesquisa do que amo

vi

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a meu amado marido Rodrigo que me apoiou incondicionalmente em

todos os momentos bons e difiacuteceis nesses dois anos de pesquisa me ajudando do

trabalho braccedilal ao apoio emocional sempre acreditando que eu era capaz

Agradeccedilo a meus familiares queridos agrave Helena que mesmo precisando de meus

cuidados e atenccedilatildeo foi compreensiva me ajudando e me dando todo o carinho quando

eu mais precisava A meus avoacutes pelo amor incondicional meus pais Carlos e Cris e a

minha irmatilde Catarine que mesmo agrave distacircncia participaram de tudo e se fizeram sempre

presentes A meus sogros queridos Anna e Aluisio e a meu cunhado Rocircmulo sempre

me apoiando e dando forccedila no dia a dia para que eu desse conta de tudo

Agradeccedilo imensamente aos catildees que foram todos maravilhosos e agrave seus

proprietaacuterios que sem medir esforccedilos ajudaram muito em nossa pesquisa colaborando

e confiando seus animais a noacutes

Agradeccedilo agrave Raquel por me ajudar nos estudos na pesquisa no experimento

sempre com muita dedicaccedilatildeo Agrave Marissa querida por dedicar muitas de suas manhatildes

para me ajudar com os catildees Agrave Julia sempre com seus conselhos saacutebios e oportunos

Agradeccedilo agraves meninas do grupo de estudo em Medicina Alternativa Beth

Morgana Giulia Alana Renata Tati que fizeram me sentir parte de um grupo de

trabalho e amizade

A meus queridos colegas de curso Raoni Bruno Debora Liacutevia Gabi e Joice

que passaram comigo momentos de muito estudo dedicaccedilatildeo e cansaccedilo sempre

transformando os momentos mais tensos em divertimento

Agradeccedilo aos professores do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas por me

guiarem no caminho do conhecimento e da ciecircncia

Agradeccedilo ao professor Argemiro pelo imenso apoio e acolhimento quando

mais precisamos

Agradeccedilo a banca pela disponibilidade em contribuir com nosso trabalho

Agradeccedilo agraves agecircncias de fomento CAPES e FAPERJ

E finalmente agradeccedilo a minha orientadora Magda por esse projeto e por ter

sido a primeira a acreditar que eu era capaz e que chegariacuteamos ateacute aqui Sempre com

muita paciecircncia me explicando explicando e explicando caminhou comigo

ultrapassando as dificuldades natildeo me deixando desistir nunca

vii

RESUMO

FRANZINI Carla Caroline de Souza Respostas autonocircmicas e comportamentais ao

estresse sonoro agudo em catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de

trovatildeo eou fogos de artifiacutecio 2015 102 p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias

Fisioloacutegicas) Instituto de Biologia Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

Seropeacutedica RJ 2015

O estresse eacute a situaccedilatildeo gerada por um desafio ao qual um organismo estaacute submetido E

apesar da resposta de estresse ser fundamental para homeostase a persistecircncia do

estiacutemulo estressor ou o exagero na resposta pode provocar consequecircncias deleteacuterias para

o indiviacuteduo A fobia eacute considerada um transtorno de ansiedade onde o medo (estado

emocional em resposta a uma situaccedilatildeo de perigo) eacute persistente e excessivo o que resulta

num aumento da reatividade ao estresse Nesse contexto vaacuterios estiacutemulos satildeo

considerados estressores em catildees e a exposiccedilatildeo a estiacutemulos sonoros como trovotildees e

fogos de artifiacutecio representa uma opccedilatildeo natural para o estudo da reatividade ao estresse

Desta forma avaliamos a reatividade de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a

sons de trovatildeo eou fogos de artifiacutecio a um modelo de estresse sonoro agudo atraveacutes da

anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e de paracircmetros comportamentais

Foram utilizados 28 catildees de companhia de diversas raccedilas de 2 a 6 anos pesando de 10

a 30 Kg sem sinais de outras doenccedilas provenientes de proprietaacuterios voluntaacuterios do

municipio de Seropeacutedica-RJ Estes foram selecionados por questionaacuterio referente a

intensidade do medo de trovatildeo e fogos de artifiacutecio dividos em grupos de foacutebicos e natildeo

foacutebicos e ainda entre os estiacutemulos som de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O estiacutemulo sonoro

consistiu numa gravaccedilatildeo padronizada de 25 minutos a uma intensidade sonora maacutexima

de 103-104 dB Para a anaacutelise da VIC os intervalos RR foram registrados atraveacutes de

frequenciacutemetro (Polarreg modelo RS800CX) computados e analisados pelo programa

CardioSeries 241 Tambeacutem foram avaliados o perfil dos proprietaacuterios caracteriacutesticas

gerais (peso idade raccedila e sexo) e de manejo dos animais Natildeo foram detectadas

diferenccedilas no perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios nem caracteriacutesticas gerais ou de

manejo entre animais foacutebicos e natildeo-foacutebicos O estiacutemulo sonoro (trovatildeo ou fogos) foi

capaz produzir aumento significativo da razatildeo LFHF tanto em animais natildeo-foacutebicos

como em animais foacutebicos No entanto a magnitude do aumento na razatildeo LFHF

produzida pelo som foi significativamente maior em animais foacutebicos do que em animais

natildeo-foacutebicos O modelo de estresse sonoro agudo produziu um aumento nos

comportamentos de vigilacircncia tremer e se esconder Apenas animais foacutebicos

submetidos ao modelo som de fogos apresentaram respostas comportamentais

significativamente mais intensas que catildees natildeo-foacutebicos nos paracircmetros Tremer Se

Esconder Vigilacircncia e Salivaccedilatildeo As respostas comportamentais descritas pelos

proprietaacuterios e as exibidas pelos catildees durante o modelo de estresse foram

correlacionadas apenas nos paracircmetros Tremer e Se Esconder Foi detectada correlaccedilatildeo

significativa entre os valores da razatildeo LFHF e os seguintes paracircmetros

comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio Arfar Tremer Se Esconder Fugir

Inquietaccedilatildeo Vigilacircncia Salivaccedilatildeo e Sobressalto O modelo utilizado foi capaz de

induzir respostas comportamentais e autonocircmicas de estresse e se mostra uma boa

ferramenta na mensuraccedilatildeo da magnitude das respostas de estresse de animais de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e pode ser

utilizado na avaliaccedilatildeo de novos caminhos terapecircuticos

Palavras-chaves estresse em catildeo variabilidade do intervalo cardiacuteaco comportamento

fobia a sons

viii

ABSTRACT

FRANZINI Carla Caroline de Souza Autonomic and behavioural responses to noise

acute stress in companion dogs with phobia of thunder andor fireworks sounds 2015 p 105 Thesis (MA in Physiological Sciences) Institute of Biology Federal Rural

University of Rio de Janeiro Seropeacutedica RJ 2015

Stress is a situation caused by a challenge in which a body is subject And despite the

stress response is essential for homeostasis the persistence of the stressor stimulus or

exaggerated response can induce deleterious consequences A phobia is considered an

anxiety disorder where the fear (emotional state in response to a situation of danger) is

persistent and excessive which results in increased reactivity to stress In this context

many stimuli are considered stressors in dogs and the exposure to noise stimuli as

thunder and fireworks is a natural choice for the study of reactivity to stress Thus we

have evaluated the reactivity of companion dogs with history of phobia of the thunder

sounds andor fireworks to an acute acoustic stress model by analysing the variability

of Cardiac Interval (VCI) and behavioural parameters We used 28 companion dogs

different breeds 2 to 6 years old weighing 10 to 30 kg with no signs of other diseases

from volunteers owners of City of Seropeacutedica-RJ The dogs were selected by

questionnaire on the intensity of the fear of thunder and fireworks divided in phobic or

not phobic and between the stimuli sound of thunder or fireworks The sound stimulus

consisted of a standardized recording from 25 minutes to a maximum intensity of

sound of 103-104 dB For the analysis of VCI RR intervals were recorded through

frequency meter (Polar reg RS800CX model) stored and analysed using CardioSeries

241 sofware We also evaluated the profile of the owners general characteristics

(weight age race and gender) and handling of animals No differences were found in

the socioeconomic profile of the owners or general characteristics or animal handling

between phobic and non-phobic dogs The sound stimulus (thunder or fireworks) was

able to induce a significant increase in LF HF ratio in both non-phobic animals and

phobic animals However the magnitude of the sound-induced increase in the LFHF

was significantly higher in phobic than in non-phobic animals The acute sound stress

model produced an increase in the behaviour of surveillance trembling and hiding Only

phobic animals submitted to fireworks sound model had significantly more intense

behavioural responses than non-phobic dogs in the behaviours Shivering Hiding

Surveillance and Salivation Behavioural responses described by the owners and shown

by dogs during the stress model were correlated only in the behaviours Shivering and

Hiding Significant correlation was found between the ratio values LF HF and the

following behavioural parameters induced by sound in the laboratory Panting

Shivering Hiding Escape Shockwave Surveillance Salivation and Startle The sound

model was able to induce behavioural and autonomic responses of stress and it shown a

good tool to measure the magnitude of stress responses in the companion dogs with

history of phobia of thunder and fireworks sounds and it can be used in the study of new

therapeutic targets

Keywords stress in dogs variability of cardiac interval behaviour noise phobia

ix

LISTA DE TABELAS E FIGURAS

Tabela 1 Descriccedilatildeo dos 14 paracircmetros comportamentais analisados 31

Tabela 2 Perfil geral dos proprietaacuterios 33

Tabela 3 Perfil dos proprietaacuterios dos catildees segundo os grupos natildeo-foacutebicos e foacutebicos 34

Tabela 4Caracteriacutesticas gerais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 35

Tabela 5 Caracteriacutesticas de manejo dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 36

Tabela 6 Caracteriacutesticas comportamentais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 38

Tabela 7 Paracircmetros comportamentais avaliados no experimento 47

Tabela 8 Correlaccedilatildeo entre paracircmetros comportamentais avaliados pelos proprietaacuterios e

os avaliados durante o experimento 51

Figura 1Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA 8

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC 13

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional 19

Figura 4 Conexotildees nuacutecleo central da amiacutegdala 20

Figura 5 Esquema do protocolo experimental 25

Figura 6 Catildeo no momento do som 26

Figura 7 Componentes do Polar modelo RS800CX 27

Figura 8 Tela inicial do programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 9 Graacutefico confeccionado pelo programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 10 Tela do programa CardioSeries demonstrando a razatildeo entre os componentes de

frequecircncia LF e HF a partir da FFT 30

Figura 11 Paracircmetros avaliados segundo proprietaacuterio 40

Figura 12 Razatildeo LFHF de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos a sons de Trovatildeo eou Fogos de

Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 41

Figura 13 LF (componente de baixa frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos submetidos ao

estresse sonoro agudo atraveacutes de sons de Trovatildeo e Fogos de Artifiacutecio 42

Figura 14 HF (componente de alta frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo-foacutebicos a sons de

Trovatildeo eou Fogos de Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 44

Figura 15 FC (Frequecircncia Cardiacuteaca Meacutedia) dos catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

Figura 16 RMSSD (raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado) de catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

x

Figura 17 Oito dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 49

Figura 18 Seis dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 50

Figura 19 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e os paracircmetros comportamentais segundo os proprietaacuterios 53

Figura 20 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e a razatildeo LFHF 54

xi

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS

AC Adenilatociclase

ACh Acetilcolina

ACTH Hormocircnio adrenocorticotroacutefico

AVP Vasopressina

CCP Corpos Celulares Preacute-ganglionares

CEUA Comissatildeo de Eacutetica no Uso de Animais

CRH Hormocircnio liberador de corticotropina

dB decibeacuteis

DCF Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas

DPA Departamento de Parasitologia Animal

FC Frequecircncia Cardiacuteaca

FFT Transformada Raacutepida de Fourier

GR Receptor de Glicocorticoacuteides

HF Frequecircncia alta

HHA Eixo Hipotaacutelamo Hipoacutefise Adrenal

IRR Intervalos RR

LC Locus Coeruleus

LF Frequecircncia baixa

MR Receptor de Mineralocorticoacuteide

NAV Nodo Atrioventricular

NA Noradrenalina

NS Nodo Sinoatrial

PKA Proteiacutena quinase dependente de AMPc

PVN Nuacutecleo Paraventricular do Hipotaacutelamo

RMSSD raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado

SAM Sistema Simpato-adreno-medular

SNA Sistema Nervoso Autocircnomo

SNC Sistema Nervoso Central

SNP Sistema Nervoso Parassimpaacutetico

SNS Sistema Nervoso Simpaacutetico

xii

SRD Sem raccedila definida

STDRR Desvio padratildeo de todos os intervalos RR do segmento

UFRRJ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

VIC Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco

xiii

SUMAacuteRIO

DEDICATOacuteRIA v

AGRADECIMENTOS vi

RESUMO vii

LISTA DE TABELAS E FIGURAS ix

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS xi

1 INTRODUCcedilAtildeO 1

11 Justificativa 3

12 Objetivos 4

121 Geral 4

122 Especiacuteficos 4

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 5

21 Estresse 5

22 Fisiologia do estresse 6

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse 10

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca 10

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) 12

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees 14

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees 16

26 Fobia em catildees 18

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS 22

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental 22

32 Animais 22

321 Consideraccedilotildees eacuteticas 23

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som 23

33 Procedimentos Experimentais 24

xiv

331 Estiacutemulo Sonoro 25

34 Grupos experimentais 26

35 Coletas de sangue 26

36 Uso do Frequenciacutemetro 27

37 Anaacutelise Espectral da VIC 27

38 Anaacutelise Comportamental 30

39 Anaacutelise Estatiacutestica 31

4 RESULTADOS 33

41 Perfil dos proprietaacuterios e caracteriacutesticas gerais dos animais 33

42 Anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco 41

43 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 46

44 Correlaccedilotildees entre os dados 51

5 DISCUSSAtildeO 55

51 Perfil dos proprietaacuterios e manejo dos animais 55

52 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e o estresse sonoro agudo 59

53 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 61

54 Correlaccedilotildees entre dados 62

55 O Modelo de Estresse Sonoro Agudo em Catildees 63

6 CONCLUSOtildeES 65

7 REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 67

8 ANEXOS 77

ANEXO 1 Ficha geral de cadastro 77

ANEXO 2 Ficha Neuroloacutegica 81

ANEXO 3 Ficha de avaliaccedilatildeo de Fobia 83

ANEXO 4 Folder de divulgaccedilatildeo 85

ANEXO 5 Termo de Consentimento 86

xv

ANEXO 6 Ficha de Protocolo Experimental 88

1

1 INTRODUCcedilAtildeO

Situaccedilotildees de estresse e medo fazem parte da vida de todos os animais e as

reaccedilotildees fisioloacutegicas provocadas por elas satildeo essenciais para sobrevivecircncia no meio

selvagem mas tambeacutem na vida urbana para aqueles animais que foram domesticados

acompanhando o homem em sua caminhada de vida em sociedade

A espeacutecie canina foi a que mais se envolveu com o homem tornando-se um

animal domeacutestico e dependente de cuidados sendo alvo de problemas sociais

ambientais e de sauacutede puacuteblica quando abandonados ou em vida livre pelas cidades e

comunidades

Essa relaccedilatildeo criada ao longo dos tempos entre os catildees e o homem trouxe para

os dias atuais um viacutenculo afetivo de ambas as espeacutecies modificando e ateacute selecionando

atraveacutes das raccedilas o comportamento canino acentuando caracteriacutesticas que podem estar

influenciando a forma dos catildees de lidar com as situaccedilotildees de estresse e medo no

cotidiano

A fisiologia do comportamento regula-se baseada nos estiacutemulos externos aos

quais o animal estaacute sujeito conforme suas necessidades de sobrevivecircncia e ateacute de bem

estar Dessa forma o estresse vem a ser responsaacutevel por modelar o comportamento de

um indiviacuteduo conforme seu modo de vida e sua exposiccedilatildeo a esses estiacutemulos

O estresse como mecanismo de adaptaccedilatildeo a situaccedilotildees adversas eacute extremamente

importante na manutenccedilatildeo da vida pois sem esse mecanismo qualquer situaccedilatildeo

desfavoraacutevel poderia causar morte imediata sendo a capacidade de responder

rapidamente a uma situaccedilatildeo de perigo uma importante caracteriacutestica da evoluccedilatildeo dos

seres

Mais especificamente em situaccedilotildees de estresse o organismo de um indiviacuteduo

redistribui sua energia e o sistema locomotor e sensorial satildeo priorizados em detrimento

de outros (reprodutivo digestivo e imune) fazendo assim com que a resposta

momentacircnea seja eficiente O problema comeccedila quando haacute a persistecircncia destas

situaccedilotildees e ou dessas respostas causando prejuiacutezo aos sistemas deprimidos

A influecircncia dos estiacutemulos sonoros tem demonstrado importacircncia cliacutenica na

espeacutecie canina jaacute que leva diversos indiviacuteduos a sofrerem alteraccedilotildees comportamentais e

2

neuroendoacutecrinas que podem evoluir para graves distuacuterbios comportamentais e

fisioloacutegicos como a fobia Em alguns casos de estresse crocircnico severo podem ocorrer

danos neurais doenccedilas gastrointestinais aleacutem da diminuiccedilatildeo da resposta imune

A fobia eacute descrita como um medo acentuado irracional persistente e excessivo

claramente discerniacutevel de objetos seres lugares ou situaccedilotildees de forma desproporcional

e exagerada acompanhada de comportamento de fuga esquiva antecipaccedilatildeo e intenso

sofrimento que geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase

fisioloacutegica mas que leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas

ao medo coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o

eixo Hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HPA) na liberaccedilatildeo de glicocorticoides e o sistema

nervoso simpaacutetico

Na fobia os limiares de ativaccedilatildeo dos circuitos neurais de medo estatildeo reduzidos

podendo ser observado no indiviacuteduo clara hiperexcitabilidade hipervigilacircncia e

aumento da responsividade comportamental aos estiacutemulos Idealmente os graus de

ativaccedilotildees seriam proporcionais agrave ameaccedila e uma adaptaccedilatildeo agrave situaccedilatildeo normalizaria a

resposta de estresse diminuindo-a conforme a ameaccedila desaparecesse o que natildeo ocorre

na fobia

Os criteacuterios para o diagnoacutestico de fobia em humanos costumam usar termos

que se referem a sintomas emocionais envolvendo sentimentos e estados de consciecircncia

subjetivos o que difiacuteculta a abordagem cientifica e cliacutenica nos animais Poreacutem as

alteraccedilotildees dos paracircmetros comportamentais e fisioloacutegicos dos sistemas

neuroendoacutecrinos envolvidos nesses distuacuterbios satildeo um caminho de estudo e pesquisa

Dessa forma os niacuteveis de estresse podem ser avaliados atraveacutes da mensuraccedilatildeo

de paracircmetros fisioloacutegicos e comportamentais Em vaacuterias espeacutecies o paracircmetro mais

utilizado eacute a dosagem de cortisol Aleacutem desse a anaacutelise da variabilidade do intervalo

cardiacuteaco (VIC) vem se mostrando um paracircmetro importante e natildeo invasivo para avaliar

o balanccedilo simpato-vagal em indiviacuteduos submetidos a estiacutemulos potencialmente

desafiadores As alteraccedilotildees comportamentais analisadas em conjunto com as anaacutelises

citadas a cima formam uma importante fonte de dados ainda natildeo correlacionadas nos

estudos mais recentes

Contudo o presente estudo teve como objetivo avaliar as respostas autonocircmicas

e comportamentais induzidas pelo estresse sonoro agudo em catildees de companhia com

3

histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O modelo de estresse utilizado

consiste em um meacutetodo natildeo invasivo e seguro uma vez que cada animal foi submetido

a um estiacutemulo sonoro (sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio) de curta duraccedilatildeo (25 min) a

uma intensidade sonora maacutexima de 1039 dB natildeo sendo capaz de causar efeitos

deleteacuterios para a audiccedilatildeo dos animais

Para tal foram utilizados 28 catildees de diversas raccedilas dos quais 16 eram

historicamente foacutebicos a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e 12 natildeo apresentavam

qualquer sinal de medo a esses sons Os animais foram dividos ainda entre submetidos

ao som de trovatildeo e submetidos ao som de fogos de artifiacutecio

Foram avaliados o balanccedilo simpato-vagal atraveacutes da mensuraccedilatildeo da VIC e 14

paracircmetros comportamentais aleacutem da coleta de amostras sanguiacuteneas em 6 momentos

para posterior anaacutelise dos niacuteveis seacutericos de cortisol

11 Justificativa

Animais e humanos satildeo constantemente submetidos a situaccedilotildees de estresse no

seu cotidiano Em catildees vaacuterios estiacutemulos podem ser considerados geradores de estresse

e sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio tecircm se mostrado estiacutemulos estressores importantes

devido agrave frequente ocorrecircncia de fobia a esses sons nesta espeacutecie

O tema escolhido eacute de grande importacircncia na atualidade uma vez que satildeo

necessaacuterias mais pesquisas sobre o efeito do estresse em humanos e animais Neste

sentido a avaliaccedilatildeo dos paracircmetros fisioloacutegicos em situaccedilotildees de estresse eacute uma forma

de estudar e compreender melhor os distuacuterbios relacionados ao estresse e traccedilar novos

caminhos terapecircuticos

Eacute relevante para a Medicina Veterinaacuteria e para a aacuterea de sauacutede como um todo

pois modelos de estresse sonoro agudo podem ser uacuteteis na verificaccedilatildeo da reatividade ao

estresse aleacutem de serem pouco invasivos e de relativa faacutecil execuccedilatildeo

4

12 Objetivos

121 Geral

Verificar as respostas fisioloacutegicas ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

122 Especiacuteficos

Avaliar o perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios as caracteriacutesticas gerais e

comportamentais e o manejo dos animais em catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

Avaliar a resposta autonocircmica a partir da anaacutelise espectral da variabilidade do

intervalo cardiacuteaco de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos

de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar a resposta comportamental de catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre o comportamento dos animais relatado pelos

proprietaacuterios durante a ocorrecircncia natural de trovotildees ou fogos e os comportamentos

exibidos pelos catildees em resposta ao modelo de estresse sonoro em laboratoacuterio

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre paracircmetros autonocircmicos e comportamentais em

catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

5

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

21 Estresse

O fisiologista Claude Bernard em 1872 definiu o conceito de meio interno pela

primeira vez como um princiacutepio do equiliacutebrio dinacircmico do meio interno essencial para

a sobrevivecircncia (FRANCI 2005)

Apesar disso foi Walter Canon em 1929 o responsaacutevel por definir esse

conceito da condiccedilatildeo de equiliacutebrio do meio interno criado por Claude Bernard com o

termo homeostase Aleacutem de ter reconhecidoos agentes desafiadores da homeostase

como fiacutesicos e emocionais e elaborado o conceito de ldquoreaccedilatildeo de emergecircnciardquo que

ocorre quando haacute um desafio capaz de ativar a liberaccedilatildeo de noradrenalina de terminais

nervosos simpaacuteticos e adrenalina da medula da adrenal (FRANCI 2005)

E mais recentemente entre 1946 e 1976 o fisiologista canadense Hans Selye

definiu ldquoa situaccedilatildeo gerada pelo desafio ao qual um organismo estaria submetidordquo com o

termo estresse E ao ocorrerem controveacutersias conceituais uma vez que natildeo se podia

distinguir a causa do efeito ele criou o termo estressor para designar o agente causador

(estiacutemulo) e manteve o termo estresse para designar a condiccedilatildeo gerada pelo estiacutemulo

desafiador (FRANCI 2005)

A resposta a um estiacutemulo estressor eacute fundamental para a homeostase de um ser

vivo e sua sobrevivecircncia Nas condiccedilotildees de estresse o organismo reage por meio da

ativaccedilatildeo e desativaccedilatildeo do mecanismo de controle de vaacuterias funccedilotildees para recuperar e

manter a homeostase No entanto essas respostas podem ser insuficientes para

restabelecer ou manter a homeostase ou podem ser exageradas representando risco de

doenccedilas Portanto o estresse pode ser definido como a soma de respostas fiacutesicas e

mentais causadas por determinados estiacutemulos externos e que permitem ao indiviacuteduo

superar determinadas exigecircncias do meio-ambiente (FRANCI 2005)

A reaccedilatildeo de estresse maximiza o gasto de energia que ajuda a preparar o corpo

para atender a uma situaccedilatildeo ameaccediladora ou desafiadora em que o indiviacuteduo tende a

mobilizar um grande esforccedilo a fim de lidar com o evento No entanto enquanto uma

certa quantidade de estresse eacute necessaacuteria para a sobrevivecircncia o estresse prolongado

pode afetar adversamente a sauacutede (BERNARD amp KRUPAT 1994)

6

Em situaccedilotildees de estresse ocorre a ativaccedilatildeo de duas principais vias o eixo

hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) atraveacutes do aumento da produccedilatildeo de cortisol e o

sistema nervoso simpaacutetico atraveacutes da liberaccedilatildeo de catecolaminas (Noradrenalina

Adrenalina)

A desregulaccedilatildeo de qualquer um desses sistemas de estresse pode levar a

distuacuterbios fisioloacutegicos de vaacuterios outros sistemas incluindo os sistemas imunoloacutegico

cardiovascular funccedilatildeo metaboacutelica e comportamento levando a maacute adaptaccedilatildeo da

resposta ao estresse (MARQUES et al 2010)

22 Fisiologia do estresse

Os estiacutemulos estressores podem ser definidos como aqueles que desafiam a

homeostase Esses estiacutemulos geram respostas que variam de acordo com a duraccedilatildeo e

intensidade e ainda com a predisposiccedilatildeo geneacutetica e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo

Os estiacutemulos causadores de estresse podem ser classificados em quatro grupos

estressores fiacutesicos e quiacutemicos (calor frio barulho radiaccedilatildeo intensa e substacircncias

toacutexicas) psicoloacutegicos (medo e frustraccedilatildeo) sociais (um ambiente hostil e rompimento de

relaccedilotildees) e os que alteram a homeostase vegetativa como em casos de exerciacutecio intenso

e hemorragias Quanto agrave duraccedilatildeo os estiacutemulos causadores de estresse podem ser ainda

classificados como agudos ou crocircnicos (PACAacuteK amp PALKOVITS 2001)

Moberg (2000) propotildee um modelo para compreensatildeo do estresse em toda

espeacutecie animal que sugere uma resposta bioloacutegica ao estresse a partir de trecircs estaacutegios

gerais

1ordm O reconhecimento de um estiacutemulo estressante

2deg A defesa bioloacutegica contra o estiacutemulo estressante

3deg As consequecircncias da resposta de estresse

Esta resposta ao estressor iraacute abranger aspectos cognitivos comportamentais e

fisioloacutegicos (MARGIS et al 2003)

Em uma situaccedilatildeo de estresse satildeo ativados o sistema simpato-adrenomedular

gerando o aumento da secreccedilatildeo de catecolaminas e logo excitaccedilatildeo raacutepida do sistema

cardiovascular ocasionando um aumento da frequecircncia cardiacuteaca e da pressatildeo arterial E

7

o outro eixo ativado eacute o hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) levando ao aumento na

produccedilatildeo de cortisol e naturalmente mobilizaccedilatildeo de energia (ULRICH-LAI amp

HERMAN 2009) (Figura 1)

As respostas de emergecircncia ativadas pelo SAM ocorrem quando o organismo se

prepara para a defesa ou ataque excretando adrenalina Entatildeoo suprimento de sangue eacute

desviado para os muacutesculos havendo elevaccedilatildeo do deacutebito cardiacuteaco total e da

redistribuiccedilatildeo sanguiacutenea aumentando a oferta de nutrientes e oxigecircnio para as estruturas

vitais A pressatildeo arterial se eleva e os bronquiolos se dilatam tornando a respiraccedilatildeo

mais raacutepida e profunda para retirada do dioacutexido de carbono excedente As funccedilotildees

digestivas e secretoacuterias diminuem aleacutem da reaccedilatildeo de aliacutevio com a liberaccedilatildeo de qualquer

excesso da bexiga e intestino A taxa metaboacutelica aumenta e a liberaccedilatildeo de endorfinas

diminue a sensibilidade agrave dor e os sentidos satildeo mantidos em estado de alerta

(ROGERSON 1997)

8

Figura 1 Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA A ativaccedilatildeo do sistema simpato-adrenomedular

(SAM) e do eixo do hipotaacutelamo hipoacutefise adrenal (HHA) como sistemas primaacuterios para a

manutenccedilatildeo e restabelecimento da homeostase A exposiccedilatildeo ao estressor resulta em ativaccedilatildeo de

neurocircnios preacute-ganglionares simpaacuteticos na coluna intermediolateral da medula espinhal

toracolombar (T1 a L2) Estes neurocircnios preacute-ganglionares se projetam para gacircnglios preacute e para

vertebrais que entatildeo terminam em oacutergatildeos alvo e nas ceacutelulas cromafins da medula da adrenal

Esta ativaccedilatildeo simpaacutetica (em ciacuterculos) representa a resposta claacutessica de luta e fuga que foi

primariamente caracterizada por Walter Cannon e colaboradores no iniacutecio do seacuteculo passado e

leva a um aumento dos niacuteveis de adrenalina (proveniente da adrenal) e de noradrenalina dos

terminais simpaacuteticos aumento da frequecircncia e da forccedila de contraccedilatildeo do coraccedilatildeo vasoconstriccedilatildeo

perifeacuterica e mobilizaccedilatildeo de energia O tocircnus parassimpaacutetico tambeacutem eacute mobilizado durante o

estresse No sistema parassimpaacutetico (em estrelas) representa a ativaccedilatildeo de nuacutecleos preacute-

ganglionares cracircnios-sacrais ativam nuacutecleos poacutes-ganglionares localizados proacuteximos aos oacutergatildeos

inervados com efeito geralmente oposto ao sistema simpaacutetico Para o eixo HHA a exposiccedilatildeo ao

estressor ativa neurocircnios hipofisiotroacuteficos no nuacutecleo paraventricular do hipotaacutelamo (PVN) que

secretam hormocircnios de liberaccedilatildeo como hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH) e

vasopressina (AVP) na circulaccedilatildeo porta da eminecircncia meacutedia Estes hormocircnios liberadores atuam

na hipoacutefise anterior para promover a secreccedilatildeo de hormocircnio adrenocorticotroacutefico (ACTH) que

atua no coacutertex da adrenal (zona fasciculata) para iniciar a siacutentese e liberaccedilatildeo dos hormocircnios

glicocorticoacuteides Os glicocorticoacuteides circulantes promovem a mobilizaccedilatildeo de energia estocada e

potencializam numerosos efeitos simpaacuteticos como a vasoconstriccedilatildeo perifeacuterica Aleacutem disso o

coacutertex da adrenal eacute diretamente inervado pelo sistema simpaacutetico que regula a liberaccedilatildeo de

glicocorticoacuteides Entatildeo a ativaccedilatildeo do sistema simpaacutetico e do eixo HHA tem accedilotildees

complementares no organismo incluindo a mobilizaccedilatildeo de energia e a manutenccedilatildeo da pressatildeo

arterial durante o estresse (Adaptado de ULRICH-LAI amp HERMAN 2009)

CRH

AVP

9

As respostas ao estresse que envolvem emoccedilatildeo passaratildeo por avaliaccedilatildeo afetiva

onde a informaccedilatildeo seraacute processada e interpretada para se estimar o potencial de ameaccedila

Esta avaliaccedilatildeo afetiva iraacute determinar o padratildeo de respostas e o tipo de defesa de acordo

com a histoacuteria pessoal aprendizado e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo que entatildeo faraacute

a avaliaccedilatildeo da capacidade para lidar com a situaccedilatildeo e organizaccedilatildeo da resposta

(MARGIS et al 2003)

A intensidade da resposta eacute que determina se o animal estaacute sofrendo de estresse

ou eacute meramente experimentado um episoacutedio breve em sua vida sem nenhum impacto

significativo ao seu bem-estar

Circuitos neurais espinais e supra espinais estatildeo envolvidos nas respostas de

estresse Os supra espinais processam as informaccedilotildees vindas das vias somatossensoriais

e viscerossensoriais e elaboram as respostas atraveacutes do taacutelamo hipotaacutelamo aacuterea preacute-

optica estruturas liacutembicas e sistemas amineacutergicos e natildeo amineacutergicos do tronco cerebral

Os neurocircnios do PVN secretores de hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH)

e vasopressina com os neurocircnios catecolamineacutergicos do locus coeruleus (LC) (o nuacutecleo

com maior densidade de neurocircnios noradreneacutergicos com papel fundamental no

desencadeamento da resposta ao estresse e reaccedilotildees de fuga) inervam o hipocampo a

amiacutegdala e o neocortex aleacutem de nuacutecleos do rafe (5-HT) e grupamentos celulares da

medula e ponte compondo assim um dos principais reguladores centrais de resposta ao

estresse na ativaccedilatildeo do eixo HHA e SNS (FRANCI 2005)

O eixo HHA eacute ativado por diferentes categorias de estresse como traumaacutetico

inflamatoacuterio e psicoloacutegico E o estresse psicoloacutegico tem regulaccedilatildeo por estruturas

liacutembicas que exercem atividade modulatoacuteria sobre o eixo (ULRICH-LAI amp HERMAN

2009)

O PVN monitora sinais relacionados com o estado emocional atraveacutes de sinais

metaboacutelicos como a composiccedilatildeo plasmaacutetica O CRH o principal neurotransmissor

coordenador das alteraccedilotildees psicoloacutegicas e comportamentais relacionadas ao estresse eacute

sintetizado no PVN e liberado nos capilares da eminecircncia meacutedia juntamente com a

vasopressina (AVP) e alcanccedilam diretamente a hipoacutefise anterior via circulaccedilatildeo portal

hipotalacircmica-hipofisaacuteria que por sua vez estimula na hipoacutefise a liberaccedilatildeo do hormocircnio

adrenocorticotroacutefico (ACTH) (MORMEgraveDE et al 2006)

10

O ACTH eacute sintetizado por ceacutelulas especializadas da hipoacutefise anterior vai para a

corrente sanguiacutenea e estimula o coacutertex da glacircndula adrenal (na zona fasciculada) que

sintetiza o glicocorticoide atraveacutes de esteroides derivados do colesterol O cortisol eacute o

glicocorticoacuteide ativo do eixo para catildees gatos e humanos e a corticosterona para

paacutessaros e roedores (MORMEgraveDE et al 2006)

Esse hormocircnio final do eixo HHA interage com as ceacutelulas atraveacutes da ligaccedilatildeo a

dois receptores o receptor glicocorticoide (GR) e o receptor de mineralocorticoide

(MR) O receptor GR eacute encontrado na maioria dos tecidos do corpo incluindo a maioria

das aacutereas do enceacutefalo No rim e em outros tecidos a aldosterona liga-se ao MR durante a

regulaccedilatildeo da reabsorccedilatildeo de soacutedio mas o MR tambeacutem estaacute presente no hipocampo onde

ocorre a ligaccedilatildeo do cortisol Estes complexos esteroacuteide-receptores entatildeo interagem

com o DNA para iniciar ou para reprimir a transcriccedilatildeo de genes especiacuteficos a fim de

regular a siacutentese de proteiacutenas que provoca alteraccedilotildees fisioloacutegicas em resposta ao

estresse

O cortisol tem 10 vezes mais afinidade ao MR que ao GR Em niacuteveis baixos ou

em situaccedilotildees de ausecircncia de estresse a maior parte do cortisol liga-se aos MRs no

ceacuterebro (principalmente no hipocampo) e modula a atividade basal do eixo HHA e o

aparecimento de resposta ao estresse Com a elevaccedilatildeo dos niacuteveis de cortisol ocorre um

aumento de ligaccedilotildees nos receptores GR reduzindo a atividade do eixo HHA

(mecanismo de ldquofeed-backrdquo negativo) No entanto a ativaccedilatildeo crocircnica deste receptor

estaacute ligada a vaacuterios distuacuterbios cognitivos relativos ao estresse (DE KLOET et al 1999)

Proteger o organismo de possiacuteveis danos eacute um dos papeis principais das

respostas hormonais a situaccedilotildees de estresse E seus principais hormocircnios satildeo a

adrenalina de secreccedilatildeo raacutepida pelo envolvimento na reaccedilatildeo de luta ou fuga e o

corticosteroacuteides na restauraccedilatildeo e na reparaccedilatildeo dos sistemas agindo na segunda linha de

defesa regulando as respostas inflamatoacuteria e imune (MC EWEN 2000)

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca

11

O Nodo Sinoatrial (NS) apresenta a frequecircncia de disparo mais intensa no

coraccedilatildeo estimulando outros locais como os nodos atrioventriculares que principiam

seus proacuteprios impulsos eleacutetricos E com a ausecircncia de influecircncias hormonais ou neurais

a frequecircncia cardiacuteaca (FC) permanece equivalente agrave frequecircncia de disparos do NS ou

seja constante (STAUSS 2007)

Os sistemas nervoso simpaacutetico (SNS) e parassimpaacutetico (SNP) estatildeo

constantemente ativados regulando a atividade cardiacuteaca com a predominacircncia de um ou

outro conforme a situaccedilatildeo Em repouso a predominacircncia eacute vagal o que em humanos

leva a respostas raacutepidas de no maacuteximo 5 segundo na FC diminuindo-a em poucos

batimentos Jaacute as respostas da ativaccedilatildeo simpaacutetica ocorrem apoacutes cinco segundos

aumentando progressivamente chegando a sua resposta maacutexima de aumento da FC

apoacutes 20 a 30 segundos (HAINSWORTH 1995)

No entanto os sistemas simpaacutetico e parassimpaacutetico atuam de forma simultacircnea

na regulaccedilatildeo da atividade cardiacuteaca onde o aumento da atividade vagal natildeo resulta tatildeo

logo na reduccedilatildeo da atividade simpaacutetica e vice-versa (VON BORELL et al 2007)

Quando o SNS eacute ativado as fibras nervosas promovem a descarga de

noradrenalina (NA) nos aacutetrios e ventriacuteculos que por sua vez juntamente com a

adrenalina liberada pela adrenal estimula os receptores β1 adreneacutergicos presentes no

coraccedilatildeo ativando atraveacutes de uma proteiacutena G excitatoacuteria (Gs) a enzima adenilato ciclase

(AC) agrave produzir AMPc Seu aumento intracelular leva agrave ativaccedilatildeo da proteiacutena quinase

dependente de AMPc aumentando as correntes de canais iocircnicos de Ca+2

e Na+

acelerando a velocidade de despolarizaccedilatildeo levando ao aumento da frequecircncia de

disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas do NA desencadeando o aumento da

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Do mesmo modo o miocaacuterdio atrial o nodo aacutetrio-ventricular e o NS satildeo

inervados pelas fibra nervosa parassimpaacutetica dos nervos vagos liberando acetilcolina

(ACh) ativando receptores M2 que estatildeo acoplados a uma proteiacutena G inibitoacuteria (Gi)

inibindo a siacutentese de AMPc intracelular reduzindo a atividade da PKA Aleacutem de a ACh

ativar uma corrente de efluxo de K+ gerando uma hiperpolarizaccedilatildeo da membrana

levando ao aumento do limiar de ativaccedilatildeo do potencial de accedilatildeo sinusal o que reduz a

12

frequecircncia de disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas sinusais diminuindo por fim a

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Existem diferenccedilas no tempo de resposta da ativaccedilatildeo dos ramos simpaacutetico e

parassimpaacutetico que ocorrem em certo modo pela liberaccedilatildeo lenta de noradrenalina nos

terminais nervosos simpaacuteticos e pelas fibras preacute-ganglionares vagais serem

mielinizadas contribuindo para uma transmissatildeo eleacutetrica mais raacutepida Aleacutem das

diferenccedilas anatocircmicas entre os ramos como eacute o caso dos corpos celulares preacute-

ganglionares do parassimpaacutetico localizados dentro do coraccedilatildeo enquanto que os corpos

celulares preacute-ganglionares simpaacuteticos se localizam no gacircnglio paravertebral (VON

BORELL et al 2007)

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC)

A manutenccedilatildeo da homeostase do sistema cardiovascular eacute resultado da oscilaccedilatildeo

riacutetmica de componentes regulatoacuterios da atividade cardiacuteaca onde se observa intervalos

irregulares de tempo entre os batimentos consecutivos (VON BORELL et al 2007)

A anaacutelise da variabilidade do intervalo cardiacuteaco pode ser realizada atraveacutes dos

iacutendices no domiacutenio do tempo e da frequecircncia

No domiacutenio do tempo cada intervalo entre um batimento cardiacuteaco e outro pode

ser medido em milissegundos e no domiacutenio da frequecircncia as flutuaccedilotildees riacutetmicas podem

caracterizar os estados de repouso e atividade influindo na seacuterie cronoloacutegica contida

entre os intervalos tornando possiacutevel a mensurar a atividade do SNA (HOSHI 2009

SONG et al 2006)

Os dados satildeo obtidos atraveacutes da gravaccedilatildeo dos intervalos entre batimentos

cardiacuteacos feitos por frequenciacutemetros capazes de detectar em milissegundos (ms) o

tempo entre os batimentos e armazenaacute-los (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al

2007)

A teacutecnica utilizada com esse objetivo eacute chamada de anaacutelise espectral e consiste

no uso de algoritmos matemaacuteticos como eacute o caso da transformada raacutepida de fourier

(FFT) para obter diagramas dimensionais Dispondo em um graacutefico os componentes

oscilatoacuterios de frequecircncia da VIC no eixo X e a amplitude dos componentes oscilatoacuterios

no eixo Y permitindo atraveacutes dessa teacutecnica determinar a forccedila espectral das

frequecircncias baixas e altas da VIC

13

Nesse contexto os dois Sendo assim os dois componentes de frequecircncia principais satildeo

divididos atraveacutes da anaacutelise espectral em Frequecircncia baixa (LF) caracterizado pelo

espectro de 004 a 015Hz e Frequecircncia alta (HF) situada na faixa de 015 a 04 Hz na

anaacutelise espectral (KAWASE et al 2002 VON BORELL et al 2007 PICCIRILLO et

al 2009)

Quando os IRR satildeo dispostos em uma escala de tempo um graacutefico eacute

confeccionado e as oscilaccedilotildees formadas representam a accedilatildeo dos diferentes componentes

regulam os pulsos cardiacuteacos onde as frequecircncias mais altas representam a atividade

riacutetmica resultante da ativaccedilatildeo parassimpaacutetica e as mais baixas exibem aquelas

resultantes da atividade simpaacutetica (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al 2007)

(Figura 2)

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC Variabilidade do intervalo cardiacuteaco em um indiviacuteduo

jovem durante o repouso e quando em movimento A seacuterie temporal de intervalos RR estaacute

Repouso Movimento

14

disposta nos graacuteficos do topo Os graacuteficos centrais ilustram a presenccedila de dois componentes

principais da densidade espectral LF e HF Durante o movimento o componente LF se torna

predominante em relaccedilatildeo ao repouso Os graacuteficos na base da figura demonstram a distribuiccedilatildeo

relativa dos dois componentes (representada pela aacuterea) (MALLIANI 1997)

A razatildeo entre os dois componentes de frequecircncia eacute calculada a partir dos valores

obtidos de LF e HF resultando em valor que representa o balanccedilo entre a atividade

simpaacutetica e parassimpaacutetica aleacutem de possibilitar a decomposiccedilatildeo dos componentes

espectrais atraveacutes do caacutelculo das frequecircncias centrais desses componentes que se

situam impliacutecitos no sinal da variabilidade (PAGANI et al 1986 LOMBARDI et

al1996 LOMBARDI 1997 MALLIANI et al 1997 VON BORELL et al 2007

HARADA et al 2005)

A anaacutelise espectral da VIC natildeo acessa o tocircnus autonocircmico cardiacuteaco mas sim o

seu balanccedilo o que justifica a ocorrecircncia de alteraccedilotildees na capacidade do coraccedilatildeo de

responder a esses estiacutemulos quando haacute alteraccedilotildees crocircnicas na atividade autonocircmica

Nesses casos natildeo seria aplicaacutevel a anaacutelise espectral da VIC (STAUSS 2007

PICCIRILLO et al 2009)

Deste modo a anaacutelise espectral da VIC tem como principal utilidade a funccedilatildeo de

indicadora da atividade autonocircmica em resposta ao estresse psicoloacutegico e fiacutesico (VON

BORELL et al 2007) E quando eacute aplicada no estudo das alteraccedilotildees agudas da

atividade autonocircmica cardiacuteaca essa anaacutelise eacute utilizada de maneira a obter dados

fidedignos onde diante de uma resposta ao estresse psicoloacutegico pode ser observado um

aumento agudo na atividade cardiacuteaca simpaacutetica caracterizado pelo aumento do

componente LF com provavelmente baixa ou nenhuma alteraccedilatildeo do componente HF

(STAUSS 2007)

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees

O oacutergatildeo auditivo dentre outras funccedilotildees se caracteriza especialmente por seu

desempenho no reconhecimento de situaccedilotildees ameaccediladoras estando em funcionamento

ininterrupto atraveacutes da conexatildeo direta do ouvido interno com os mecanismos neurais de

ldquoluta ou fugardquo Esse sistema eacute capaz de diferenciar sons de frequecircncias e intensidades

relevantes para a sobrevivecircncia do indiviacuteduo em seu meio ambiente (WESTMAN amp

WALTERS 1981)

15

A percepccedilatildeo do som colabora no balanccedilo homeostaacutetico do sistema nervoso

central influenciando consequentemente o equiliacutebrio fisioloacutegico de forma geral atraveacutes

dos centros autonocircmicos e neuroendoacutecrinos do hipotaacutelamo variando em resposta

conforme o significado do estiacutemulo sonoro e sua intensidade previsibilidade

variabilidade e complexidade

Nesse contexto as respostas fundamentais ao som satildeo de orientaccedilatildeo reflexo de

surpresa e de defesa Sendo a resposta de orientaccedilatildeo fundamental por ser a reaccedilatildeo

comportamental de busca pela fonte sonora permitindo que o indiviacuteduo se prepare para

a resposta necessaacuteria e caso o reconhecimento do som mostre ser esse de baixa

significacircncia a habituaccedilatildeo iraacute ocorrer diminuindo o grau da reaccedilatildeo

Jaacute o reflexo de surpresa iraacute ocorrer em resposta a sons repentinos de alta

intensidade e caraacuteter assustador podendo ser atenuado quando o indiviacuteduo sabe que ele

iraacute ocorrer e podendo ser exacerbado em situaccedilotildees de tensatildeo medo e de abalo

emocional

E a resposta de defesa acontece em resposta a sons de significado intensidade e

duraccedilatildeo relacionados agrave ameaccedila onde haacute excitaccedilatildeo emocional e preparaccedilatildeo dos sistemas

para a accedilatildeo consistindo na resposta de estresse (WESTMAN amp WALTERS 1981)

Alguns sons adquirem significado particular para o indiviacuteduo representando

perigo em potencial assim como os sons de caracteriacutesticas ameaccediladoras Mas

geralmente o significado conotativo de um som potencialmente ameaccedilador estaacute no fato

de ser desconhecido e apresentar mudanccedilas raacutepidas de intensidade aleacutem das associaccedilotildees

extra-auditivas relacionadas a ele Aleacutem disso a previsibilidade desse estiacutemulo sonoro

tambeacutem poderaacute constituir um fator determinante na resposta jaacute que sons imprevisiacuteveis

caracterizam-se como um estiacutemulo estressor maior desencadeando uma reduccedilatildeo geral

de performance e uma baixa toleracircncia a frustraccedilotildees (WESTMAN amp WALTERS

1981)

Os catildees particularmente apresentam muita sensibilidade a estiacutemulos sonoros

visto que seu sistema auditivo eacute extremamente desenvolvido especialmente com a

funccedilatildeo de caccedila e guarda Poreacutem a resposta de defesa exagerada dos indiviacuteduos dessa

espeacutecie tem sido relatada principalmente aos sons de fogos de artifiacutecio trovatildeo e tiro de

16

armas de fogo Provavelmente o caraacuteter imprevisiacutevel a conotaccedilatildeo negativa que a

espeacutecie apresenta a esses sons e a intensidade proacutexima ao limiar de audiccedilatildeo possa

justificar tal reaccedilatildeo (HYDBRING et al 2004)

E eacute com base nessa reaccedilatildeo desmedida que os estiacutemulos sonoros como os sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio vecircm sendo utilizados como modelos de estresse em catildees

(HYDBRING et al 2004 ENGELAND et al 1990) Representando uma opccedilatildeo para o

estudo da reatividade ao estresse que pode ser comparada ao modelo de estresse

acuacutestico de sobressalto em ratos

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees

Ao iniciar um estudo a respeito de uma espeacutecie deve-se ter em mente que cada

sujeito analisado natildeo eacute um sistema inerte e fechado mas sim um somatoacuterio de eventos

que possibilitam ter um exame mais amplo e completo das interaccedilotildees do animal com o

ambiente (SULTAN 2003 BATESON et al 2004)

Assim o estudo comportamental se mostra uma importante ferramenta pois

permite entender que processos bioloacutegicos satildeo compostos por eventos fisioloacutegicos e

psicoloacutegicos natildeo havendo exclusatildeo entre eles mas sim uma sobreposiccedilatildeo com fortes

correlaccedilotildees (HARVERBEKE et al 2008 BEERDA 1999 SPANGENBERG 2006

MONTANHA et al 2009) Conhecer a etologia canina iraacute permitir uma melhor

utilizaccedilatildeo do animal respeitando seus limites e possibilitando a manutenccedilatildeo fiacutesica e

mental dentro dos padrotildees de bem-estar da espeacutecie (SNOWDON 1999 DAWNKINS

1989 DARWIN 2004)

Com relaccedilatildeo ao bem-estar Broom amp Johnson (1993) e Broom amp Fraser (2010)

definem como o estado de um animal em relaccedilatildeo agraves suas tentativas de se adaptar ao

meio em que vive Para os animais domeacutesticos principalmente para os animais de

companhia esse eacute um conceito que muitas vezes pode ser confundido e mal aplicado

pelo homem agrave medida que esse confronta a realidade do animal com a sua proacutepria

passando a adequar paracircmetros humanos a esses animais

Os catildees satildeo marcados pela socializaccedilatildeo baseada em relaccedilotildees familiares com

organizaccedilotildees flexiacuteveis e respostas a um liacuteder aleacutem de possuiacuterem necessidade de

17

ambientes complexos e variados marcadamente importantes na vida gregaacuteria de seus

ancestrais (BROOM amp FRASER 2010)

Pensando nisso um manejo inadequado pode ter consequecircncias que variam

desde alteraccedilotildees comportamentais a quadros patoloacutegicos tendo como agravantes

alteraccedilotildees substanciais nos seus niacuteveis de bem-estar

Poreacutem o estudo do comportamento animal ainda se mostra bastante pioneiro jaacute

que as pesquisas cientiacuteficas a niacutevel cliacutenico comeccedilaram a ser realizados haacute poucas

deacutecadas em animais com problemas comportamentais

Dessa forma se faz presente a necessidade de um maior desenvolvimento de

estudos e pesquisas nesse sentido visto que os problemas comportamentais satildeo

apontados como a principal causa de abandono ou morte de animais de companhia

apresentando maior nuacutemero de relatos do que as doenccedilas infecciosas neoplaacutesicas e

metaboacutelicas concomitantes (OVERALL et al 2001)

A relaccedilatildeo homem-animal eacute muito antiga mas eacute pouco estudada E isso faz com

que o diagnoacutestico e o tratamento dos distuacuterbios comportamentais sejam dificultados

Muitas vezes a origem dos problemas comportamentais estaacute ligada ao tipo de

relacionamento existente entre o homem e o seu animal E isso acontece porque os

animais passam por processos de humanizaccedilatildeo para se adaptarem ao modo e ao estilo de

vida do seu proprietaacuterio nem que para isso tenham que modificar as suas caracteriacutesticas

naturais (OVERALL et al 2001)

Embora os catildees apresentem uma flexibilidade comportamental as exigecircncias

criadas pelos seus proprietaacuterios podem desencadear conflitos e frustraccedilotildees que levam ao

aparecimento de problemas comportamentais (OVERALL et al 2001)

Com frequecircncia o stress ou a ansiedade estatildeo relacionados com o ambiente e

mostram que o limiar entre normal e anormal varia entre indiviacuteduos (BEAVER 2005)

O rompimento da homeostase pode resultar de estimulaccedilatildeo interna externa ou

ambos E o potencial de ruptura da homeostase aumenta com a magnitude do desafio

(APPLEBY amp PLUIJMAKERS 2004) Dessa forma sendo a fobia um transtorno de

reaccedilotildees exageradas e desproporcionais ao real grau de importacircncia do estimulo

18

estressor podemos sugerir que o indiviacuteduo foacutebico eacute mais susceptiacutevel ao estresse de

forma geral reagindo com paracircmetros mais facilmente alterados

26 Fobia em catildees

Medo e ansiedade satildeo funccedilotildees adaptativas de sobrevivecircncia que sinalizam para o

organismo a presenccedila de perigo em potencial no ambiente O medo eacute a resposta

imediata acionada por um evento ou objeto potencialmente nocivo e ansiedade envolve

processos cognitivos mais complexos como antecipaccedilatildeo e preocupaccedilatildeo com

hipervigilacircncia diante de um perigo iminente no ambiente (FEINSTEIN et al 2011)

Entre as respostas comportamentais e fisioloacutegicas claacutessicas imediatas do medo

destacam-se o congelamento sobressalto aumento da frequecircncia cardiacuteaca alteraccedilotildees da

pressatildeo arterial e aumento da vigilacircncia Satildeo respostas comportamentais e perceptivas

que facilitam as respostas defensivas como a fuga e esquiva de forma apropriada afim

de reduzir o perigo ou lesatildeo (CHUDASAMA 2009)

O neurocircuito do medo envolve principalmente a amiacutegdala estrutura cerebral

responsaacutevel pela detecccedilatildeo geraccedilatildeo e manutenccedilatildeo das emoccedilotildees relacionadas ao medo e

ansiedade Eacute uma estrutura complexa pertencente ao sistema liacutembico que consiste em

aproximadamente 10 nuacutecleos que coordenam respostas apropriadas agrave ameaccedila e ao

perigo atraveacutes das respostas comportamentais cardiovasculares e endoacutecrinas ao

estresse (ROSEN amp SCHULKIN 1998)

A amiacutegdala faz ligaccedilotildees entre as aacutereas do coacutertex cerebral e recebe informaccedilotildees

de todos os sistemas sensoriais permite a integraccedilatildeo da informaccedilatildeo proveniente das

diversas aacutereas atraveacutes de conexotildees excitatoacuterias e inibitoacuterias

Os nuacutecleos basolaterais satildeo as principais portas de entrada da amiacutegdala

recebendo informaccedilotildees sensoriais e auditivas vindas do taacutelamo coacutertex sensorial e

associativo (Figura 3) Ele estaacute sob tocircnica inibiccedilatildeo GABAeacutergica e quando bloqueada

esta inibiccedilatildeo resulta em aumento do comportamento de ansiedade com ativaccedilatildeo

cardiovascular simpaticamente mediada (KESSLER et al 2005)

19

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional A informaccedilatildeo

sensoacuteria eacute transmitida para o taacutelamo atraveacutes da via leminiscal A aferecircncia auditiva chega na

divisatildeo ventral do nuacutecleo geniculado medial e projeta-se para o coacutertex auditivo primaacuterio

enquanto outras vias extra leminiscais carreiam informaccedilotildees auditivas para outras partes do

taacutelamo como a divisatildeo medial do nuacutecleo geniculado medial e nuacutecleos intralaminares

posteriores que se projetam tanto para o coacutertex auditivo primaacuterio quanto para o coacutertex auditivo

associativo assim como para os nuacutecleos basolaterias da amiacutegdala Essa via do taacutelamo para

amiacutegdala eacute implicada na aprendizagem emocional (IVERSEN et al 2003)

A amiacutegdala ventrolateral em seres humanos eacute mais sensiacutevel aos estiacutemulos

negativos (especialmente se os estiacutemulos sinalizam informaccedilatildeo negativa iminente) E a

amiacutegdala centromedial (CMA) dorsal tem projeccedilotildees principalmente subcorticais

especialmente aquelas ligadas ao hipotaacutelamo lateral e substacircncia cinzenta periaquedutal

(PAG) Essas projeccedilotildees podem explicar em parte as respostas fisioloacutegicas associadas

ao medo com o hipotaacutelamo (Figura 4) (KESSLER et al 2005)

Kandel 2003

20

Figura 4 Conexotildees diretas entre o nuacutecleo central da amiacutegdala e uma variedade de aacutereas

hipotalacircmicas e do tronco encefaacutelico envolvidas no medo e na ansiedade (IVERSEN et al

2003)

O Locus coeruleus importante nuacutecleo com grande densidade de neurocircnios

noradreneacutergicos com papel no desencadeamento da resposta ao estresse e das reaccedilotildees de

fuga tem tambeacutem papel importante no controle do medo A desregulaccedilatildeo desse nuacutecleo

parece ter relaccedilatildeo com o aparecimento do pacircnico e fobias em humanos (CHARNEY

1984) certamente atraveacutes de sua ligaccedilatildeo ao sistema liacutembico (CHARNEY 1984)

Medos podem desenvolver-se gradualmente e pode haver variaccedilatildeo na resposta

Em contraste fobias geralmente se desenvolvem rapidamente e uma vez desenvolvidas

haacute pouca mudanccedila em sua apresentaccedilatildeo entre as seacuteries Situaccedilotildees indutoras de fobia ou

satildeo evitadas a todo custo pelo foacutebico ou se inevitaacutevel satildeo suportadas com intensa

ansiedade e sofrimento (OVERALL 2010)

A Associaccedilatildeo Norte Americana de Psiquiatria no manual de diagnoacutestico e

estatiacutestica de transtornos mentais (DSM-IV-TR 2002) e a CID-10 (1993) definem em

humanos fobias especiacuteficas como medos irracionais excessivos acentuados e

persistentes revelados pela presenccedila ou antecipaccedilatildeo de um objeto situaccedilatildeo ou

atividade foacutebica especiacutefica de forma desproporcional acompanhados de

comportamentos de fuga esquiva antecipaccedilatildeo ansiosa e intenso sofrimento

Geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase fisioloacutegica

mas leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas ao medo

21

coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o eixo

HHA e o Sistema Nervoso Simpaacutetico

Em catildees natildeo haacute ateacute o momento descrito na literatura uma definiccedilatildeo oficial para

tal transtorno

As fobias satildeo transtornos de ansiedade de difiacutecil cura e geralmente a memoacuteria

de uma resposta foacutebica pode desencadear outros transtornos de ansiedade Dessa forma

o tratamento tem importacircncia natildeo soacute pela questatildeo do bem-estar e qualidade de vida

mas tambeacutem devido a seus componentes de comorbidade (OVERALL 2010)

Resposta exagerada a sons de trovatildeo estatildeo entre as doenccedilas comportamentais

mais comumente associados com pacircnico ou fobia em catildees Ocorre geralmente em

todas as raccedilas embora natildeo existam dados sobre a incidecircncia relativa destes problemas

(OVERALL et al 2001 DUNHAM amp FRANK 2001 VOITH amp BORCHELT 1985)

A fobia agrave sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio constitui uma classe que apresenta

resposta extrema repentina e profunda e que apesar de existir uma variaccedilatildeo consideraacutevel

nas respostas dos catildees (BEERDA SCHILDER VAN HOOFF VRIES 1997) no geral

se manifesta com comportamentos de ansiedade associados com atividades acentuadas

do sistema nervoso simpaacutetico Os comportamentos podem incluir catatonia ou mania

concomitante com diminuiccedilatildeo da sensibilidade ou capacidade de resposta agrave dor ou

estiacutemulos sociais aleacutem de fuga vocalizaccedilatildeo salivaccedilatildeo micccedilatildeo defecaccedilatildeo tremores

comportamentos autodestrutivos e ateacute convulsotildees (OVERALL 2010 SHULL-

SELCER amp STAGG 1991)

Jaacute se sabe que existe um fator hereditaacuterio para esse tipo de fobia e embora os

mecanismos pelos quais ela ocorre ainda natildeo sejam compreendidos parece estar em

alguma alteraccedilatildeo na forma como a informaccedilatildeo eacute processada entre a amiacutegdala e o coacutertex

(OVERALL 2010)

E como ansiedade medos e fobias satildeo queixas comportamentais comuns e

problemaacuteticas dos donos de catildees a falta de tratamento pode resultar no rompimento do

viacutenculo humano-animal e posterior abandono desistecircncia ou ateacute mesmo eutanaacutesia do

catildeo afetado (MILLS etal 2003)

22

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental

Os procedimentos experimentais foram realizados na Estaccedilatildeo experimental de

Parasitologia Veterinaacuteria do Departamento de Parasitologia Animal (DPA) da

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) e no Laboratoacuterio de Fisiologia

Animal do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas (DCF) da UFRRJ Todos os

procedimentos estatildeo de acordo com a lei de bem-estar animal Instruccedilatildeo Normativa ndeg

56 de 2008 O presente experimento encontra-se aprovado pelo Comitecirc de Eacutetica na

Pesquisa da UFRRJ CEUA-IB nordm 2308347962014-14

32 Animais

Foram entrevistados 35 proprietaacuterios de catildees entre os quais foram selecionados

28 com 2 a 6 anos de idade pesando de 10 a 30 Kg doacuteceis saudaacuteveis com vacinas e

vermifugaccedilatildeo em dia do muniacutecipio de Seropeacutedica-RJ

Proprietaacuterios de animais com medo de sons de trovatildeo e fogos de artificio

interessados em participar do estudo e proprietaacuterios de animais sem medo convidados a

participar do estudo incialmente responderam a um formulaacuterio de cadastro dos

animais contendo dados gerais e histoacuterico de respostas comportamentais em geral

(Anexo 1) Em seguida os animais foram submetidos a um exame cliacutenico baacutesico que

constitiu em inspeccedilatildeo palpaccedilatildeo auscultaccedilatildeo e termometria retal e um exame

neuroloacutegico para descartar doenccedilas concomitantes (Anexo 2) Foram dispensados

animais arredios agressivos com peso ou idade fora da faixa estabelecida no criteacuterio de

seleccedilatildeo e animais doentes Os animais selecionados foram caracterizados como foacutebicos

e natildeo-foacutebicos a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio e entatildeo submetidos uma uacutenica vez ao

modelo de estresse sonoro A caracterizaccedilatildeo de animais foacutebicos foi realizada conforme

as respostas dos proprietaacuterios ao questionaacuterio de reaccedilotildees comportamentais aos sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009 CROWELL-

DAVIS 2003) (Anexo 3)

23

Meios de divulgaccedilatildeo do estudo atraveacutes de folder e cartazes de divulgaccedilatildeo do projeto

veiculado pela internet e afixado em diversos estabelecimentos veterinaacuterios no

municiacutepio e pela UFRRJ (Anexo 4)

Avaliaccedilatildeo comportamental atraveacutes de entrevista com o proprietaacuterio (questionaacuterio

adaptado de OVERALL 1997) (Anexo 1)

321 Consideraccedilotildees eacuteticas

A participaccedilatildeo no estudo ocorreu somente com a autorizaccedilatildeo dos entrevistados

mediante um termo de consentimento em que se garantia plena liberdade para

interromper a participaccedilatildeo quando desejado (Anexo 5) Natildeo houve riscos agrave sauacutede fiacutesica

ou mental dos animais que participaram do projeto

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som

Os catildees foram selecionados para compor os grupos conforme as respostas ao

questionaacuterio comportamental previamente preenchido pelo proprietaacuterio

O questionaacuterio especiacutefico para medo de sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio

(Anexo 3) eacute composto de alguns paracircmetros comportamentais comuns em catildees foacutebicos

como atitude destrutiva eliminaccedilatildeo inadequada salivaccedilatildeo excessiva vocalizaccedilatildeo

esconder passadas arfar procurar pelo proprietaacuterio auto-trauma tremor Esses

parametros foram ainda classificados em escala de 0 (comportamento nunca observado)

a 5 (comportamento frequente e grave) (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009

CROWELL-DAVIS 2003)

Os catildees foram considerados aptos a participarem do grupo Foacutebicotrovatildeo e

Foacutebicosfogos quando

Apresentaram pelo menos trecircs dos comportamentos anteriores durante

o som de trovatildeo ou fogos de artifiacutecio com escore igual ou maior que 3

ou algum item com escore maacuteximo (5)

Ou as atitudes do animal no momento do som apresentaram risco a sauacutede

e integridade fiacutesica

E quando as respostas comportamentais foram apresentadas na maior

parte do tempo durante o estiacutemulo

24

33 Procedimentos Experimentais

O protocolo experimental foi realizado individualmente iniciando-se sempre agraves

9 horas da manhatilde Um pesquisador acompanhado de um pesquisador colaborador

realizou todo o protocolo experimental sem se ausentar em nenhuma etapa do

experimento

Dias antes do experimento os animais foram submetidos a um exame cliacutenico e

os proprietaacuterios responderam a questionaacuterios (Anexo 1 e 3) referentes ao manejo e

comportamento do animal

A partir dos dados dos questionaacuterios os animais foram classificados conforme

as respostas dadas referente ao medo de trovatildeo e fogos de artiacutefiacutecio entre animais com

histoacuterico comportamental de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Foacutebicos) e

animais historicamente natildeo foacutebicos a esses sons (Natildeo-foacutebicos)

No dia do experimento cada animal foi submetido a inserccedilatildeo de um cateacuteter de

silicone endovenoso para coleta de sangue ainda em sua moradia (amostra 1 casa) e a

colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro (Polar Pro Trainer RS800CX) Os animais permaneceram

com o frequenciacutemetro durante todo o protocolo experimental

Apoacutes a colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro os animais permaneceram no mesmo local

por 10 minutos para adaptaccedilatildeo ao frequeciacutemetro e registro dos dados de VIC do

momento basal 1 (casa) Em seguida cada animal foi transportado para o laboratoacuterio

onde foi executado o modelo de estresse sonoro agudo O transporte foi realizado

acondicionando o animal numa caixa de transporte num carro de passeio com

ventilaccedilatildeo adequada

Apoacutes a chegada ao local do experimento os animais permaneceram na sala sem

manipulaccedilatildeo e sem interaccedilatildeo por parte dos pesquisadores por 30 minutos para registro

dos dados de VIC do momento basal 2 (laboratoacuterio) Em seguida foi coletada a

segunda amostra de sangue (amostra 2 laboratoacuterio)

O estiacutemulo sonoro consistiu numa gravaccedilatildeo de sons de trovatildeo e outra de sons de

fogos de artifiacutecio numa intensidade sonora maacutexima de 103-104 dB e duraccedilatildeo de 2

minutos e 30 segundos (MACCARIELLO 2012)

Durante e apoacutes o fim do estiacutemulo sonoro cada animal permaneceu sem qualquer

manipulaccedilatildeo A terceira coleta de sangue foi realizada 5 minutos apoacutes o teacutermino do

estresse (amostra 3) a quarta aos 15 minutos (amostra 4) a quinta aos 30 minutos

(amostra 5) e a sexta coleta aos 60 minutos apoacutes o teacutermino do estresse (amostra 6)

25

A filmagem foi realizada durante todo o experimento para registrar as reaccedilotildees

comportamentais

Apoacutes a uacuteltima coleta o polar foi retirado e o animal levado de volta para sua

casa no mesmo transporte e nas mesmas condiccedilotildees em que veio

Figura 5 Esquema do protocolo experimental

331 Estiacutemulo Sonoro

Os estiacutemulos sonoros consistiram de uma gravaccedilatildeo com duraccedilatildeo de 2 minutos e

30 segundos de sons de trovatildeo mixados alternadamente a partir de dois arquivos

sonoros no formato wave (ldquovery loud thunder close thunder crackrdquo e ldquohigh quality

stereo sound of a major thunder clap during a stormrdquo) e outra gravaccedilatildeo de sons de

fogos de artifiacutecio mixado de um arquivo sonoro no formato wave (ldquocontinuous

fireworkrdquo) adquiridos no endereccedilo eletrocircnico httpwwwsound-effectcom

O formato utilizado possui a vantagem de ser uma gravaccedilatildeo que preserva todas

as variaccedilotildees de frequecircncia do som original A intensidade do som foi padronizada

atraveacutes de um decibeliacutemetro modelo BK Precision 732A Sound Level Meters a 103-

104 dB por ser uma pressatildeo sonora capaz de aumentar as concentraccedilotildees de cortisol

seacuterico em catildees estando abaixo dos limites que possam causar danos ao aparelho

auditivo (ISING et al 1999)

O estiacutemulo sonoro foi emitido por um aparelho de som (Pioneer home theater

DVD 120w RMS) com 5 caixas de som acopladas Cada animal foi posicionado a um

metro das caixas de som Para observaccedilatildeo das reaccedilotildees comportamentais cada animal foi

contido apenas por uma guia solta de 15 m podendo reagir e se locomover

naturalmente sem intervenccedilotildees

ii

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO

INSTITUTO DE BIOLOGIA

PROGRAMA DE POacuteS-GRADUACcedilAtildeO EM CIEcircNCIAS

FISIOLOacuteGICAS

RESPOSTAS AUTONOcircMICAS E COMPORTAMENTAIS AO

ESTRESSE SONORO AGUDO EM CAtildeES DE COMPANHIA COM

HISTOacuteRICO DE FOBIA A SONS DE TROVAtildeO EOU FOGOS DE

ARTIFIacuteCIO

CARLA CAROLINE FRANZINI DE SOUZA

Sob a Orientaccedilatildeo da Professora

Magda Alves de Medeiros

Dissertaccedilatildeo submetida como

requisito parcial para obtenccedilatildeo do

grau de Mestre em Ciecircncias no

Programa de poacutes-graduaccedilatildeo em

Ciecircncias Fisioloacutegicas

Seropeacutedica RJ

Fevereiro de 2015

iii

6367

S729r

T

Souza Carla Caroline Franzini de 1988-

Respostas autonocircmicas e comportamentais

ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de

trovatildeo eou fogos de artifiacutecio Carla

Caroline Franzini de Souza ndash 2015

102 f il

Orientador Magda Alves de Medeiros

Dissertaccedilatildeo (mestrado) ndash Universidade

Federal Rural do Rio de Janeiro Curso de

Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Fisioloacutegicas

Bibliografia f 67-76

1 Catildeo ndash Fisiologia ndash Teses 2 Catildeo ndash

Efeito do stress ndash Teses 3 Catildeo ndash

Comportamento ndash Teses 4 Stress

(Fisiologia) ndash Teses I Medeiros Magda

Alves de 1973- II Universidade Federal

Rural do Rio de Janeiro Curso de Poacutes-

Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Fisioloacutegicas III

Tiacutetulo

iv

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO

INSTITUTO DE BIOLOGIA

PROGRAMA DE POacuteS-GRADUACcedilAtildeO EM CIEcircNCIAS FISIOLOacuteGICAS

CARLA CAROLINE FRANZINI DE SOUZA

Dissertaccedilatildeo submetida como requisito parcial para obtenccedilatildeo do grau de Mestre em

Ciecircncias no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Fisioloacutegicas

DISSERTACcedilAtildeO APROVADA EM 25022015

Magda Alves de Medeiros (Ph D) UFRRJ

(Orientadora)

Faacutebio Fagundes da Rocha (Ph D) UFRRJ

Luciene Covolan (Ph D) UNIFESP

v

DEDICATOacuteRIA

Dedico esse trabalho agrave Francesco (catildeo) Sarah (gata) e Myul

(gata) os animais que me acompanharam desde a infacircncia me

encantando no dia a dia com o carinho companheirismo e

inteligecircncia e que nos uacuteltimos meses nos deixaram apoacutes 15 anos

de maravilhosos tempos

Dedico tambeacutem a minha amada Universidade Rural que me

deu natildeo soacute a oportunidade de ter uma profissatildeo como a de seguir

na pesquisa do que amo

vi

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a meu amado marido Rodrigo que me apoiou incondicionalmente em

todos os momentos bons e difiacuteceis nesses dois anos de pesquisa me ajudando do

trabalho braccedilal ao apoio emocional sempre acreditando que eu era capaz

Agradeccedilo a meus familiares queridos agrave Helena que mesmo precisando de meus

cuidados e atenccedilatildeo foi compreensiva me ajudando e me dando todo o carinho quando

eu mais precisava A meus avoacutes pelo amor incondicional meus pais Carlos e Cris e a

minha irmatilde Catarine que mesmo agrave distacircncia participaram de tudo e se fizeram sempre

presentes A meus sogros queridos Anna e Aluisio e a meu cunhado Rocircmulo sempre

me apoiando e dando forccedila no dia a dia para que eu desse conta de tudo

Agradeccedilo imensamente aos catildees que foram todos maravilhosos e agrave seus

proprietaacuterios que sem medir esforccedilos ajudaram muito em nossa pesquisa colaborando

e confiando seus animais a noacutes

Agradeccedilo agrave Raquel por me ajudar nos estudos na pesquisa no experimento

sempre com muita dedicaccedilatildeo Agrave Marissa querida por dedicar muitas de suas manhatildes

para me ajudar com os catildees Agrave Julia sempre com seus conselhos saacutebios e oportunos

Agradeccedilo agraves meninas do grupo de estudo em Medicina Alternativa Beth

Morgana Giulia Alana Renata Tati que fizeram me sentir parte de um grupo de

trabalho e amizade

A meus queridos colegas de curso Raoni Bruno Debora Liacutevia Gabi e Joice

que passaram comigo momentos de muito estudo dedicaccedilatildeo e cansaccedilo sempre

transformando os momentos mais tensos em divertimento

Agradeccedilo aos professores do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas por me

guiarem no caminho do conhecimento e da ciecircncia

Agradeccedilo ao professor Argemiro pelo imenso apoio e acolhimento quando

mais precisamos

Agradeccedilo a banca pela disponibilidade em contribuir com nosso trabalho

Agradeccedilo agraves agecircncias de fomento CAPES e FAPERJ

E finalmente agradeccedilo a minha orientadora Magda por esse projeto e por ter

sido a primeira a acreditar que eu era capaz e que chegariacuteamos ateacute aqui Sempre com

muita paciecircncia me explicando explicando e explicando caminhou comigo

ultrapassando as dificuldades natildeo me deixando desistir nunca

vii

RESUMO

FRANZINI Carla Caroline de Souza Respostas autonocircmicas e comportamentais ao

estresse sonoro agudo em catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de

trovatildeo eou fogos de artifiacutecio 2015 102 p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias

Fisioloacutegicas) Instituto de Biologia Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

Seropeacutedica RJ 2015

O estresse eacute a situaccedilatildeo gerada por um desafio ao qual um organismo estaacute submetido E

apesar da resposta de estresse ser fundamental para homeostase a persistecircncia do

estiacutemulo estressor ou o exagero na resposta pode provocar consequecircncias deleteacuterias para

o indiviacuteduo A fobia eacute considerada um transtorno de ansiedade onde o medo (estado

emocional em resposta a uma situaccedilatildeo de perigo) eacute persistente e excessivo o que resulta

num aumento da reatividade ao estresse Nesse contexto vaacuterios estiacutemulos satildeo

considerados estressores em catildees e a exposiccedilatildeo a estiacutemulos sonoros como trovotildees e

fogos de artifiacutecio representa uma opccedilatildeo natural para o estudo da reatividade ao estresse

Desta forma avaliamos a reatividade de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a

sons de trovatildeo eou fogos de artifiacutecio a um modelo de estresse sonoro agudo atraveacutes da

anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e de paracircmetros comportamentais

Foram utilizados 28 catildees de companhia de diversas raccedilas de 2 a 6 anos pesando de 10

a 30 Kg sem sinais de outras doenccedilas provenientes de proprietaacuterios voluntaacuterios do

municipio de Seropeacutedica-RJ Estes foram selecionados por questionaacuterio referente a

intensidade do medo de trovatildeo e fogos de artifiacutecio dividos em grupos de foacutebicos e natildeo

foacutebicos e ainda entre os estiacutemulos som de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O estiacutemulo sonoro

consistiu numa gravaccedilatildeo padronizada de 25 minutos a uma intensidade sonora maacutexima

de 103-104 dB Para a anaacutelise da VIC os intervalos RR foram registrados atraveacutes de

frequenciacutemetro (Polarreg modelo RS800CX) computados e analisados pelo programa

CardioSeries 241 Tambeacutem foram avaliados o perfil dos proprietaacuterios caracteriacutesticas

gerais (peso idade raccedila e sexo) e de manejo dos animais Natildeo foram detectadas

diferenccedilas no perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios nem caracteriacutesticas gerais ou de

manejo entre animais foacutebicos e natildeo-foacutebicos O estiacutemulo sonoro (trovatildeo ou fogos) foi

capaz produzir aumento significativo da razatildeo LFHF tanto em animais natildeo-foacutebicos

como em animais foacutebicos No entanto a magnitude do aumento na razatildeo LFHF

produzida pelo som foi significativamente maior em animais foacutebicos do que em animais

natildeo-foacutebicos O modelo de estresse sonoro agudo produziu um aumento nos

comportamentos de vigilacircncia tremer e se esconder Apenas animais foacutebicos

submetidos ao modelo som de fogos apresentaram respostas comportamentais

significativamente mais intensas que catildees natildeo-foacutebicos nos paracircmetros Tremer Se

Esconder Vigilacircncia e Salivaccedilatildeo As respostas comportamentais descritas pelos

proprietaacuterios e as exibidas pelos catildees durante o modelo de estresse foram

correlacionadas apenas nos paracircmetros Tremer e Se Esconder Foi detectada correlaccedilatildeo

significativa entre os valores da razatildeo LFHF e os seguintes paracircmetros

comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio Arfar Tremer Se Esconder Fugir

Inquietaccedilatildeo Vigilacircncia Salivaccedilatildeo e Sobressalto O modelo utilizado foi capaz de

induzir respostas comportamentais e autonocircmicas de estresse e se mostra uma boa

ferramenta na mensuraccedilatildeo da magnitude das respostas de estresse de animais de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e pode ser

utilizado na avaliaccedilatildeo de novos caminhos terapecircuticos

Palavras-chaves estresse em catildeo variabilidade do intervalo cardiacuteaco comportamento

fobia a sons

viii

ABSTRACT

FRANZINI Carla Caroline de Souza Autonomic and behavioural responses to noise

acute stress in companion dogs with phobia of thunder andor fireworks sounds 2015 p 105 Thesis (MA in Physiological Sciences) Institute of Biology Federal Rural

University of Rio de Janeiro Seropeacutedica RJ 2015

Stress is a situation caused by a challenge in which a body is subject And despite the

stress response is essential for homeostasis the persistence of the stressor stimulus or

exaggerated response can induce deleterious consequences A phobia is considered an

anxiety disorder where the fear (emotional state in response to a situation of danger) is

persistent and excessive which results in increased reactivity to stress In this context

many stimuli are considered stressors in dogs and the exposure to noise stimuli as

thunder and fireworks is a natural choice for the study of reactivity to stress Thus we

have evaluated the reactivity of companion dogs with history of phobia of the thunder

sounds andor fireworks to an acute acoustic stress model by analysing the variability

of Cardiac Interval (VCI) and behavioural parameters We used 28 companion dogs

different breeds 2 to 6 years old weighing 10 to 30 kg with no signs of other diseases

from volunteers owners of City of Seropeacutedica-RJ The dogs were selected by

questionnaire on the intensity of the fear of thunder and fireworks divided in phobic or

not phobic and between the stimuli sound of thunder or fireworks The sound stimulus

consisted of a standardized recording from 25 minutes to a maximum intensity of

sound of 103-104 dB For the analysis of VCI RR intervals were recorded through

frequency meter (Polar reg RS800CX model) stored and analysed using CardioSeries

241 sofware We also evaluated the profile of the owners general characteristics

(weight age race and gender) and handling of animals No differences were found in

the socioeconomic profile of the owners or general characteristics or animal handling

between phobic and non-phobic dogs The sound stimulus (thunder or fireworks) was

able to induce a significant increase in LF HF ratio in both non-phobic animals and

phobic animals However the magnitude of the sound-induced increase in the LFHF

was significantly higher in phobic than in non-phobic animals The acute sound stress

model produced an increase in the behaviour of surveillance trembling and hiding Only

phobic animals submitted to fireworks sound model had significantly more intense

behavioural responses than non-phobic dogs in the behaviours Shivering Hiding

Surveillance and Salivation Behavioural responses described by the owners and shown

by dogs during the stress model were correlated only in the behaviours Shivering and

Hiding Significant correlation was found between the ratio values LF HF and the

following behavioural parameters induced by sound in the laboratory Panting

Shivering Hiding Escape Shockwave Surveillance Salivation and Startle The sound

model was able to induce behavioural and autonomic responses of stress and it shown a

good tool to measure the magnitude of stress responses in the companion dogs with

history of phobia of thunder and fireworks sounds and it can be used in the study of new

therapeutic targets

Keywords stress in dogs variability of cardiac interval behaviour noise phobia

ix

LISTA DE TABELAS E FIGURAS

Tabela 1 Descriccedilatildeo dos 14 paracircmetros comportamentais analisados 31

Tabela 2 Perfil geral dos proprietaacuterios 33

Tabela 3 Perfil dos proprietaacuterios dos catildees segundo os grupos natildeo-foacutebicos e foacutebicos 34

Tabela 4Caracteriacutesticas gerais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 35

Tabela 5 Caracteriacutesticas de manejo dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 36

Tabela 6 Caracteriacutesticas comportamentais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 38

Tabela 7 Paracircmetros comportamentais avaliados no experimento 47

Tabela 8 Correlaccedilatildeo entre paracircmetros comportamentais avaliados pelos proprietaacuterios e

os avaliados durante o experimento 51

Figura 1Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA 8

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC 13

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional 19

Figura 4 Conexotildees nuacutecleo central da amiacutegdala 20

Figura 5 Esquema do protocolo experimental 25

Figura 6 Catildeo no momento do som 26

Figura 7 Componentes do Polar modelo RS800CX 27

Figura 8 Tela inicial do programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 9 Graacutefico confeccionado pelo programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 10 Tela do programa CardioSeries demonstrando a razatildeo entre os componentes de

frequecircncia LF e HF a partir da FFT 30

Figura 11 Paracircmetros avaliados segundo proprietaacuterio 40

Figura 12 Razatildeo LFHF de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos a sons de Trovatildeo eou Fogos de

Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 41

Figura 13 LF (componente de baixa frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos submetidos ao

estresse sonoro agudo atraveacutes de sons de Trovatildeo e Fogos de Artifiacutecio 42

Figura 14 HF (componente de alta frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo-foacutebicos a sons de

Trovatildeo eou Fogos de Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 44

Figura 15 FC (Frequecircncia Cardiacuteaca Meacutedia) dos catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

Figura 16 RMSSD (raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado) de catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

x

Figura 17 Oito dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 49

Figura 18 Seis dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 50

Figura 19 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e os paracircmetros comportamentais segundo os proprietaacuterios 53

Figura 20 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e a razatildeo LFHF 54

xi

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS

AC Adenilatociclase

ACh Acetilcolina

ACTH Hormocircnio adrenocorticotroacutefico

AVP Vasopressina

CCP Corpos Celulares Preacute-ganglionares

CEUA Comissatildeo de Eacutetica no Uso de Animais

CRH Hormocircnio liberador de corticotropina

dB decibeacuteis

DCF Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas

DPA Departamento de Parasitologia Animal

FC Frequecircncia Cardiacuteaca

FFT Transformada Raacutepida de Fourier

GR Receptor de Glicocorticoacuteides

HF Frequecircncia alta

HHA Eixo Hipotaacutelamo Hipoacutefise Adrenal

IRR Intervalos RR

LC Locus Coeruleus

LF Frequecircncia baixa

MR Receptor de Mineralocorticoacuteide

NAV Nodo Atrioventricular

NA Noradrenalina

NS Nodo Sinoatrial

PKA Proteiacutena quinase dependente de AMPc

PVN Nuacutecleo Paraventricular do Hipotaacutelamo

RMSSD raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado

SAM Sistema Simpato-adreno-medular

SNA Sistema Nervoso Autocircnomo

SNC Sistema Nervoso Central

SNP Sistema Nervoso Parassimpaacutetico

SNS Sistema Nervoso Simpaacutetico

xii

SRD Sem raccedila definida

STDRR Desvio padratildeo de todos os intervalos RR do segmento

UFRRJ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

VIC Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco

xiii

SUMAacuteRIO

DEDICATOacuteRIA v

AGRADECIMENTOS vi

RESUMO vii

LISTA DE TABELAS E FIGURAS ix

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS xi

1 INTRODUCcedilAtildeO 1

11 Justificativa 3

12 Objetivos 4

121 Geral 4

122 Especiacuteficos 4

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 5

21 Estresse 5

22 Fisiologia do estresse 6

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse 10

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca 10

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) 12

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees 14

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees 16

26 Fobia em catildees 18

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS 22

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental 22

32 Animais 22

321 Consideraccedilotildees eacuteticas 23

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som 23

33 Procedimentos Experimentais 24

xiv

331 Estiacutemulo Sonoro 25

34 Grupos experimentais 26

35 Coletas de sangue 26

36 Uso do Frequenciacutemetro 27

37 Anaacutelise Espectral da VIC 27

38 Anaacutelise Comportamental 30

39 Anaacutelise Estatiacutestica 31

4 RESULTADOS 33

41 Perfil dos proprietaacuterios e caracteriacutesticas gerais dos animais 33

42 Anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco 41

43 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 46

44 Correlaccedilotildees entre os dados 51

5 DISCUSSAtildeO 55

51 Perfil dos proprietaacuterios e manejo dos animais 55

52 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e o estresse sonoro agudo 59

53 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 61

54 Correlaccedilotildees entre dados 62

55 O Modelo de Estresse Sonoro Agudo em Catildees 63

6 CONCLUSOtildeES 65

7 REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 67

8 ANEXOS 77

ANEXO 1 Ficha geral de cadastro 77

ANEXO 2 Ficha Neuroloacutegica 81

ANEXO 3 Ficha de avaliaccedilatildeo de Fobia 83

ANEXO 4 Folder de divulgaccedilatildeo 85

ANEXO 5 Termo de Consentimento 86

xv

ANEXO 6 Ficha de Protocolo Experimental 88

1

1 INTRODUCcedilAtildeO

Situaccedilotildees de estresse e medo fazem parte da vida de todos os animais e as

reaccedilotildees fisioloacutegicas provocadas por elas satildeo essenciais para sobrevivecircncia no meio

selvagem mas tambeacutem na vida urbana para aqueles animais que foram domesticados

acompanhando o homem em sua caminhada de vida em sociedade

A espeacutecie canina foi a que mais se envolveu com o homem tornando-se um

animal domeacutestico e dependente de cuidados sendo alvo de problemas sociais

ambientais e de sauacutede puacuteblica quando abandonados ou em vida livre pelas cidades e

comunidades

Essa relaccedilatildeo criada ao longo dos tempos entre os catildees e o homem trouxe para

os dias atuais um viacutenculo afetivo de ambas as espeacutecies modificando e ateacute selecionando

atraveacutes das raccedilas o comportamento canino acentuando caracteriacutesticas que podem estar

influenciando a forma dos catildees de lidar com as situaccedilotildees de estresse e medo no

cotidiano

A fisiologia do comportamento regula-se baseada nos estiacutemulos externos aos

quais o animal estaacute sujeito conforme suas necessidades de sobrevivecircncia e ateacute de bem

estar Dessa forma o estresse vem a ser responsaacutevel por modelar o comportamento de

um indiviacuteduo conforme seu modo de vida e sua exposiccedilatildeo a esses estiacutemulos

O estresse como mecanismo de adaptaccedilatildeo a situaccedilotildees adversas eacute extremamente

importante na manutenccedilatildeo da vida pois sem esse mecanismo qualquer situaccedilatildeo

desfavoraacutevel poderia causar morte imediata sendo a capacidade de responder

rapidamente a uma situaccedilatildeo de perigo uma importante caracteriacutestica da evoluccedilatildeo dos

seres

Mais especificamente em situaccedilotildees de estresse o organismo de um indiviacuteduo

redistribui sua energia e o sistema locomotor e sensorial satildeo priorizados em detrimento

de outros (reprodutivo digestivo e imune) fazendo assim com que a resposta

momentacircnea seja eficiente O problema comeccedila quando haacute a persistecircncia destas

situaccedilotildees e ou dessas respostas causando prejuiacutezo aos sistemas deprimidos

A influecircncia dos estiacutemulos sonoros tem demonstrado importacircncia cliacutenica na

espeacutecie canina jaacute que leva diversos indiviacuteduos a sofrerem alteraccedilotildees comportamentais e

2

neuroendoacutecrinas que podem evoluir para graves distuacuterbios comportamentais e

fisioloacutegicos como a fobia Em alguns casos de estresse crocircnico severo podem ocorrer

danos neurais doenccedilas gastrointestinais aleacutem da diminuiccedilatildeo da resposta imune

A fobia eacute descrita como um medo acentuado irracional persistente e excessivo

claramente discerniacutevel de objetos seres lugares ou situaccedilotildees de forma desproporcional

e exagerada acompanhada de comportamento de fuga esquiva antecipaccedilatildeo e intenso

sofrimento que geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase

fisioloacutegica mas que leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas

ao medo coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o

eixo Hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HPA) na liberaccedilatildeo de glicocorticoides e o sistema

nervoso simpaacutetico

Na fobia os limiares de ativaccedilatildeo dos circuitos neurais de medo estatildeo reduzidos

podendo ser observado no indiviacuteduo clara hiperexcitabilidade hipervigilacircncia e

aumento da responsividade comportamental aos estiacutemulos Idealmente os graus de

ativaccedilotildees seriam proporcionais agrave ameaccedila e uma adaptaccedilatildeo agrave situaccedilatildeo normalizaria a

resposta de estresse diminuindo-a conforme a ameaccedila desaparecesse o que natildeo ocorre

na fobia

Os criteacuterios para o diagnoacutestico de fobia em humanos costumam usar termos

que se referem a sintomas emocionais envolvendo sentimentos e estados de consciecircncia

subjetivos o que difiacuteculta a abordagem cientifica e cliacutenica nos animais Poreacutem as

alteraccedilotildees dos paracircmetros comportamentais e fisioloacutegicos dos sistemas

neuroendoacutecrinos envolvidos nesses distuacuterbios satildeo um caminho de estudo e pesquisa

Dessa forma os niacuteveis de estresse podem ser avaliados atraveacutes da mensuraccedilatildeo

de paracircmetros fisioloacutegicos e comportamentais Em vaacuterias espeacutecies o paracircmetro mais

utilizado eacute a dosagem de cortisol Aleacutem desse a anaacutelise da variabilidade do intervalo

cardiacuteaco (VIC) vem se mostrando um paracircmetro importante e natildeo invasivo para avaliar

o balanccedilo simpato-vagal em indiviacuteduos submetidos a estiacutemulos potencialmente

desafiadores As alteraccedilotildees comportamentais analisadas em conjunto com as anaacutelises

citadas a cima formam uma importante fonte de dados ainda natildeo correlacionadas nos

estudos mais recentes

Contudo o presente estudo teve como objetivo avaliar as respostas autonocircmicas

e comportamentais induzidas pelo estresse sonoro agudo em catildees de companhia com

3

histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O modelo de estresse utilizado

consiste em um meacutetodo natildeo invasivo e seguro uma vez que cada animal foi submetido

a um estiacutemulo sonoro (sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio) de curta duraccedilatildeo (25 min) a

uma intensidade sonora maacutexima de 1039 dB natildeo sendo capaz de causar efeitos

deleteacuterios para a audiccedilatildeo dos animais

Para tal foram utilizados 28 catildees de diversas raccedilas dos quais 16 eram

historicamente foacutebicos a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e 12 natildeo apresentavam

qualquer sinal de medo a esses sons Os animais foram dividos ainda entre submetidos

ao som de trovatildeo e submetidos ao som de fogos de artifiacutecio

Foram avaliados o balanccedilo simpato-vagal atraveacutes da mensuraccedilatildeo da VIC e 14

paracircmetros comportamentais aleacutem da coleta de amostras sanguiacuteneas em 6 momentos

para posterior anaacutelise dos niacuteveis seacutericos de cortisol

11 Justificativa

Animais e humanos satildeo constantemente submetidos a situaccedilotildees de estresse no

seu cotidiano Em catildees vaacuterios estiacutemulos podem ser considerados geradores de estresse

e sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio tecircm se mostrado estiacutemulos estressores importantes

devido agrave frequente ocorrecircncia de fobia a esses sons nesta espeacutecie

O tema escolhido eacute de grande importacircncia na atualidade uma vez que satildeo

necessaacuterias mais pesquisas sobre o efeito do estresse em humanos e animais Neste

sentido a avaliaccedilatildeo dos paracircmetros fisioloacutegicos em situaccedilotildees de estresse eacute uma forma

de estudar e compreender melhor os distuacuterbios relacionados ao estresse e traccedilar novos

caminhos terapecircuticos

Eacute relevante para a Medicina Veterinaacuteria e para a aacuterea de sauacutede como um todo

pois modelos de estresse sonoro agudo podem ser uacuteteis na verificaccedilatildeo da reatividade ao

estresse aleacutem de serem pouco invasivos e de relativa faacutecil execuccedilatildeo

4

12 Objetivos

121 Geral

Verificar as respostas fisioloacutegicas ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

122 Especiacuteficos

Avaliar o perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios as caracteriacutesticas gerais e

comportamentais e o manejo dos animais em catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

Avaliar a resposta autonocircmica a partir da anaacutelise espectral da variabilidade do

intervalo cardiacuteaco de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos

de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar a resposta comportamental de catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre o comportamento dos animais relatado pelos

proprietaacuterios durante a ocorrecircncia natural de trovotildees ou fogos e os comportamentos

exibidos pelos catildees em resposta ao modelo de estresse sonoro em laboratoacuterio

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre paracircmetros autonocircmicos e comportamentais em

catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

5

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

21 Estresse

O fisiologista Claude Bernard em 1872 definiu o conceito de meio interno pela

primeira vez como um princiacutepio do equiliacutebrio dinacircmico do meio interno essencial para

a sobrevivecircncia (FRANCI 2005)

Apesar disso foi Walter Canon em 1929 o responsaacutevel por definir esse

conceito da condiccedilatildeo de equiliacutebrio do meio interno criado por Claude Bernard com o

termo homeostase Aleacutem de ter reconhecidoos agentes desafiadores da homeostase

como fiacutesicos e emocionais e elaborado o conceito de ldquoreaccedilatildeo de emergecircnciardquo que

ocorre quando haacute um desafio capaz de ativar a liberaccedilatildeo de noradrenalina de terminais

nervosos simpaacuteticos e adrenalina da medula da adrenal (FRANCI 2005)

E mais recentemente entre 1946 e 1976 o fisiologista canadense Hans Selye

definiu ldquoa situaccedilatildeo gerada pelo desafio ao qual um organismo estaria submetidordquo com o

termo estresse E ao ocorrerem controveacutersias conceituais uma vez que natildeo se podia

distinguir a causa do efeito ele criou o termo estressor para designar o agente causador

(estiacutemulo) e manteve o termo estresse para designar a condiccedilatildeo gerada pelo estiacutemulo

desafiador (FRANCI 2005)

A resposta a um estiacutemulo estressor eacute fundamental para a homeostase de um ser

vivo e sua sobrevivecircncia Nas condiccedilotildees de estresse o organismo reage por meio da

ativaccedilatildeo e desativaccedilatildeo do mecanismo de controle de vaacuterias funccedilotildees para recuperar e

manter a homeostase No entanto essas respostas podem ser insuficientes para

restabelecer ou manter a homeostase ou podem ser exageradas representando risco de

doenccedilas Portanto o estresse pode ser definido como a soma de respostas fiacutesicas e

mentais causadas por determinados estiacutemulos externos e que permitem ao indiviacuteduo

superar determinadas exigecircncias do meio-ambiente (FRANCI 2005)

A reaccedilatildeo de estresse maximiza o gasto de energia que ajuda a preparar o corpo

para atender a uma situaccedilatildeo ameaccediladora ou desafiadora em que o indiviacuteduo tende a

mobilizar um grande esforccedilo a fim de lidar com o evento No entanto enquanto uma

certa quantidade de estresse eacute necessaacuteria para a sobrevivecircncia o estresse prolongado

pode afetar adversamente a sauacutede (BERNARD amp KRUPAT 1994)

6

Em situaccedilotildees de estresse ocorre a ativaccedilatildeo de duas principais vias o eixo

hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) atraveacutes do aumento da produccedilatildeo de cortisol e o

sistema nervoso simpaacutetico atraveacutes da liberaccedilatildeo de catecolaminas (Noradrenalina

Adrenalina)

A desregulaccedilatildeo de qualquer um desses sistemas de estresse pode levar a

distuacuterbios fisioloacutegicos de vaacuterios outros sistemas incluindo os sistemas imunoloacutegico

cardiovascular funccedilatildeo metaboacutelica e comportamento levando a maacute adaptaccedilatildeo da

resposta ao estresse (MARQUES et al 2010)

22 Fisiologia do estresse

Os estiacutemulos estressores podem ser definidos como aqueles que desafiam a

homeostase Esses estiacutemulos geram respostas que variam de acordo com a duraccedilatildeo e

intensidade e ainda com a predisposiccedilatildeo geneacutetica e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo

Os estiacutemulos causadores de estresse podem ser classificados em quatro grupos

estressores fiacutesicos e quiacutemicos (calor frio barulho radiaccedilatildeo intensa e substacircncias

toacutexicas) psicoloacutegicos (medo e frustraccedilatildeo) sociais (um ambiente hostil e rompimento de

relaccedilotildees) e os que alteram a homeostase vegetativa como em casos de exerciacutecio intenso

e hemorragias Quanto agrave duraccedilatildeo os estiacutemulos causadores de estresse podem ser ainda

classificados como agudos ou crocircnicos (PACAacuteK amp PALKOVITS 2001)

Moberg (2000) propotildee um modelo para compreensatildeo do estresse em toda

espeacutecie animal que sugere uma resposta bioloacutegica ao estresse a partir de trecircs estaacutegios

gerais

1ordm O reconhecimento de um estiacutemulo estressante

2deg A defesa bioloacutegica contra o estiacutemulo estressante

3deg As consequecircncias da resposta de estresse

Esta resposta ao estressor iraacute abranger aspectos cognitivos comportamentais e

fisioloacutegicos (MARGIS et al 2003)

Em uma situaccedilatildeo de estresse satildeo ativados o sistema simpato-adrenomedular

gerando o aumento da secreccedilatildeo de catecolaminas e logo excitaccedilatildeo raacutepida do sistema

cardiovascular ocasionando um aumento da frequecircncia cardiacuteaca e da pressatildeo arterial E

7

o outro eixo ativado eacute o hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) levando ao aumento na

produccedilatildeo de cortisol e naturalmente mobilizaccedilatildeo de energia (ULRICH-LAI amp

HERMAN 2009) (Figura 1)

As respostas de emergecircncia ativadas pelo SAM ocorrem quando o organismo se

prepara para a defesa ou ataque excretando adrenalina Entatildeoo suprimento de sangue eacute

desviado para os muacutesculos havendo elevaccedilatildeo do deacutebito cardiacuteaco total e da

redistribuiccedilatildeo sanguiacutenea aumentando a oferta de nutrientes e oxigecircnio para as estruturas

vitais A pressatildeo arterial se eleva e os bronquiolos se dilatam tornando a respiraccedilatildeo

mais raacutepida e profunda para retirada do dioacutexido de carbono excedente As funccedilotildees

digestivas e secretoacuterias diminuem aleacutem da reaccedilatildeo de aliacutevio com a liberaccedilatildeo de qualquer

excesso da bexiga e intestino A taxa metaboacutelica aumenta e a liberaccedilatildeo de endorfinas

diminue a sensibilidade agrave dor e os sentidos satildeo mantidos em estado de alerta

(ROGERSON 1997)

8

Figura 1 Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA A ativaccedilatildeo do sistema simpato-adrenomedular

(SAM) e do eixo do hipotaacutelamo hipoacutefise adrenal (HHA) como sistemas primaacuterios para a

manutenccedilatildeo e restabelecimento da homeostase A exposiccedilatildeo ao estressor resulta em ativaccedilatildeo de

neurocircnios preacute-ganglionares simpaacuteticos na coluna intermediolateral da medula espinhal

toracolombar (T1 a L2) Estes neurocircnios preacute-ganglionares se projetam para gacircnglios preacute e para

vertebrais que entatildeo terminam em oacutergatildeos alvo e nas ceacutelulas cromafins da medula da adrenal

Esta ativaccedilatildeo simpaacutetica (em ciacuterculos) representa a resposta claacutessica de luta e fuga que foi

primariamente caracterizada por Walter Cannon e colaboradores no iniacutecio do seacuteculo passado e

leva a um aumento dos niacuteveis de adrenalina (proveniente da adrenal) e de noradrenalina dos

terminais simpaacuteticos aumento da frequecircncia e da forccedila de contraccedilatildeo do coraccedilatildeo vasoconstriccedilatildeo

perifeacuterica e mobilizaccedilatildeo de energia O tocircnus parassimpaacutetico tambeacutem eacute mobilizado durante o

estresse No sistema parassimpaacutetico (em estrelas) representa a ativaccedilatildeo de nuacutecleos preacute-

ganglionares cracircnios-sacrais ativam nuacutecleos poacutes-ganglionares localizados proacuteximos aos oacutergatildeos

inervados com efeito geralmente oposto ao sistema simpaacutetico Para o eixo HHA a exposiccedilatildeo ao

estressor ativa neurocircnios hipofisiotroacuteficos no nuacutecleo paraventricular do hipotaacutelamo (PVN) que

secretam hormocircnios de liberaccedilatildeo como hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH) e

vasopressina (AVP) na circulaccedilatildeo porta da eminecircncia meacutedia Estes hormocircnios liberadores atuam

na hipoacutefise anterior para promover a secreccedilatildeo de hormocircnio adrenocorticotroacutefico (ACTH) que

atua no coacutertex da adrenal (zona fasciculata) para iniciar a siacutentese e liberaccedilatildeo dos hormocircnios

glicocorticoacuteides Os glicocorticoacuteides circulantes promovem a mobilizaccedilatildeo de energia estocada e

potencializam numerosos efeitos simpaacuteticos como a vasoconstriccedilatildeo perifeacuterica Aleacutem disso o

coacutertex da adrenal eacute diretamente inervado pelo sistema simpaacutetico que regula a liberaccedilatildeo de

glicocorticoacuteides Entatildeo a ativaccedilatildeo do sistema simpaacutetico e do eixo HHA tem accedilotildees

complementares no organismo incluindo a mobilizaccedilatildeo de energia e a manutenccedilatildeo da pressatildeo

arterial durante o estresse (Adaptado de ULRICH-LAI amp HERMAN 2009)

CRH

AVP

9

As respostas ao estresse que envolvem emoccedilatildeo passaratildeo por avaliaccedilatildeo afetiva

onde a informaccedilatildeo seraacute processada e interpretada para se estimar o potencial de ameaccedila

Esta avaliaccedilatildeo afetiva iraacute determinar o padratildeo de respostas e o tipo de defesa de acordo

com a histoacuteria pessoal aprendizado e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo que entatildeo faraacute

a avaliaccedilatildeo da capacidade para lidar com a situaccedilatildeo e organizaccedilatildeo da resposta

(MARGIS et al 2003)

A intensidade da resposta eacute que determina se o animal estaacute sofrendo de estresse

ou eacute meramente experimentado um episoacutedio breve em sua vida sem nenhum impacto

significativo ao seu bem-estar

Circuitos neurais espinais e supra espinais estatildeo envolvidos nas respostas de

estresse Os supra espinais processam as informaccedilotildees vindas das vias somatossensoriais

e viscerossensoriais e elaboram as respostas atraveacutes do taacutelamo hipotaacutelamo aacuterea preacute-

optica estruturas liacutembicas e sistemas amineacutergicos e natildeo amineacutergicos do tronco cerebral

Os neurocircnios do PVN secretores de hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH)

e vasopressina com os neurocircnios catecolamineacutergicos do locus coeruleus (LC) (o nuacutecleo

com maior densidade de neurocircnios noradreneacutergicos com papel fundamental no

desencadeamento da resposta ao estresse e reaccedilotildees de fuga) inervam o hipocampo a

amiacutegdala e o neocortex aleacutem de nuacutecleos do rafe (5-HT) e grupamentos celulares da

medula e ponte compondo assim um dos principais reguladores centrais de resposta ao

estresse na ativaccedilatildeo do eixo HHA e SNS (FRANCI 2005)

O eixo HHA eacute ativado por diferentes categorias de estresse como traumaacutetico

inflamatoacuterio e psicoloacutegico E o estresse psicoloacutegico tem regulaccedilatildeo por estruturas

liacutembicas que exercem atividade modulatoacuteria sobre o eixo (ULRICH-LAI amp HERMAN

2009)

O PVN monitora sinais relacionados com o estado emocional atraveacutes de sinais

metaboacutelicos como a composiccedilatildeo plasmaacutetica O CRH o principal neurotransmissor

coordenador das alteraccedilotildees psicoloacutegicas e comportamentais relacionadas ao estresse eacute

sintetizado no PVN e liberado nos capilares da eminecircncia meacutedia juntamente com a

vasopressina (AVP) e alcanccedilam diretamente a hipoacutefise anterior via circulaccedilatildeo portal

hipotalacircmica-hipofisaacuteria que por sua vez estimula na hipoacutefise a liberaccedilatildeo do hormocircnio

adrenocorticotroacutefico (ACTH) (MORMEgraveDE et al 2006)

10

O ACTH eacute sintetizado por ceacutelulas especializadas da hipoacutefise anterior vai para a

corrente sanguiacutenea e estimula o coacutertex da glacircndula adrenal (na zona fasciculada) que

sintetiza o glicocorticoide atraveacutes de esteroides derivados do colesterol O cortisol eacute o

glicocorticoacuteide ativo do eixo para catildees gatos e humanos e a corticosterona para

paacutessaros e roedores (MORMEgraveDE et al 2006)

Esse hormocircnio final do eixo HHA interage com as ceacutelulas atraveacutes da ligaccedilatildeo a

dois receptores o receptor glicocorticoide (GR) e o receptor de mineralocorticoide

(MR) O receptor GR eacute encontrado na maioria dos tecidos do corpo incluindo a maioria

das aacutereas do enceacutefalo No rim e em outros tecidos a aldosterona liga-se ao MR durante a

regulaccedilatildeo da reabsorccedilatildeo de soacutedio mas o MR tambeacutem estaacute presente no hipocampo onde

ocorre a ligaccedilatildeo do cortisol Estes complexos esteroacuteide-receptores entatildeo interagem

com o DNA para iniciar ou para reprimir a transcriccedilatildeo de genes especiacuteficos a fim de

regular a siacutentese de proteiacutenas que provoca alteraccedilotildees fisioloacutegicas em resposta ao

estresse

O cortisol tem 10 vezes mais afinidade ao MR que ao GR Em niacuteveis baixos ou

em situaccedilotildees de ausecircncia de estresse a maior parte do cortisol liga-se aos MRs no

ceacuterebro (principalmente no hipocampo) e modula a atividade basal do eixo HHA e o

aparecimento de resposta ao estresse Com a elevaccedilatildeo dos niacuteveis de cortisol ocorre um

aumento de ligaccedilotildees nos receptores GR reduzindo a atividade do eixo HHA

(mecanismo de ldquofeed-backrdquo negativo) No entanto a ativaccedilatildeo crocircnica deste receptor

estaacute ligada a vaacuterios distuacuterbios cognitivos relativos ao estresse (DE KLOET et al 1999)

Proteger o organismo de possiacuteveis danos eacute um dos papeis principais das

respostas hormonais a situaccedilotildees de estresse E seus principais hormocircnios satildeo a

adrenalina de secreccedilatildeo raacutepida pelo envolvimento na reaccedilatildeo de luta ou fuga e o

corticosteroacuteides na restauraccedilatildeo e na reparaccedilatildeo dos sistemas agindo na segunda linha de

defesa regulando as respostas inflamatoacuteria e imune (MC EWEN 2000)

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca

11

O Nodo Sinoatrial (NS) apresenta a frequecircncia de disparo mais intensa no

coraccedilatildeo estimulando outros locais como os nodos atrioventriculares que principiam

seus proacuteprios impulsos eleacutetricos E com a ausecircncia de influecircncias hormonais ou neurais

a frequecircncia cardiacuteaca (FC) permanece equivalente agrave frequecircncia de disparos do NS ou

seja constante (STAUSS 2007)

Os sistemas nervoso simpaacutetico (SNS) e parassimpaacutetico (SNP) estatildeo

constantemente ativados regulando a atividade cardiacuteaca com a predominacircncia de um ou

outro conforme a situaccedilatildeo Em repouso a predominacircncia eacute vagal o que em humanos

leva a respostas raacutepidas de no maacuteximo 5 segundo na FC diminuindo-a em poucos

batimentos Jaacute as respostas da ativaccedilatildeo simpaacutetica ocorrem apoacutes cinco segundos

aumentando progressivamente chegando a sua resposta maacutexima de aumento da FC

apoacutes 20 a 30 segundos (HAINSWORTH 1995)

No entanto os sistemas simpaacutetico e parassimpaacutetico atuam de forma simultacircnea

na regulaccedilatildeo da atividade cardiacuteaca onde o aumento da atividade vagal natildeo resulta tatildeo

logo na reduccedilatildeo da atividade simpaacutetica e vice-versa (VON BORELL et al 2007)

Quando o SNS eacute ativado as fibras nervosas promovem a descarga de

noradrenalina (NA) nos aacutetrios e ventriacuteculos que por sua vez juntamente com a

adrenalina liberada pela adrenal estimula os receptores β1 adreneacutergicos presentes no

coraccedilatildeo ativando atraveacutes de uma proteiacutena G excitatoacuteria (Gs) a enzima adenilato ciclase

(AC) agrave produzir AMPc Seu aumento intracelular leva agrave ativaccedilatildeo da proteiacutena quinase

dependente de AMPc aumentando as correntes de canais iocircnicos de Ca+2

e Na+

acelerando a velocidade de despolarizaccedilatildeo levando ao aumento da frequecircncia de

disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas do NA desencadeando o aumento da

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Do mesmo modo o miocaacuterdio atrial o nodo aacutetrio-ventricular e o NS satildeo

inervados pelas fibra nervosa parassimpaacutetica dos nervos vagos liberando acetilcolina

(ACh) ativando receptores M2 que estatildeo acoplados a uma proteiacutena G inibitoacuteria (Gi)

inibindo a siacutentese de AMPc intracelular reduzindo a atividade da PKA Aleacutem de a ACh

ativar uma corrente de efluxo de K+ gerando uma hiperpolarizaccedilatildeo da membrana

levando ao aumento do limiar de ativaccedilatildeo do potencial de accedilatildeo sinusal o que reduz a

12

frequecircncia de disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas sinusais diminuindo por fim a

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Existem diferenccedilas no tempo de resposta da ativaccedilatildeo dos ramos simpaacutetico e

parassimpaacutetico que ocorrem em certo modo pela liberaccedilatildeo lenta de noradrenalina nos

terminais nervosos simpaacuteticos e pelas fibras preacute-ganglionares vagais serem

mielinizadas contribuindo para uma transmissatildeo eleacutetrica mais raacutepida Aleacutem das

diferenccedilas anatocircmicas entre os ramos como eacute o caso dos corpos celulares preacute-

ganglionares do parassimpaacutetico localizados dentro do coraccedilatildeo enquanto que os corpos

celulares preacute-ganglionares simpaacuteticos se localizam no gacircnglio paravertebral (VON

BORELL et al 2007)

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC)

A manutenccedilatildeo da homeostase do sistema cardiovascular eacute resultado da oscilaccedilatildeo

riacutetmica de componentes regulatoacuterios da atividade cardiacuteaca onde se observa intervalos

irregulares de tempo entre os batimentos consecutivos (VON BORELL et al 2007)

A anaacutelise da variabilidade do intervalo cardiacuteaco pode ser realizada atraveacutes dos

iacutendices no domiacutenio do tempo e da frequecircncia

No domiacutenio do tempo cada intervalo entre um batimento cardiacuteaco e outro pode

ser medido em milissegundos e no domiacutenio da frequecircncia as flutuaccedilotildees riacutetmicas podem

caracterizar os estados de repouso e atividade influindo na seacuterie cronoloacutegica contida

entre os intervalos tornando possiacutevel a mensurar a atividade do SNA (HOSHI 2009

SONG et al 2006)

Os dados satildeo obtidos atraveacutes da gravaccedilatildeo dos intervalos entre batimentos

cardiacuteacos feitos por frequenciacutemetros capazes de detectar em milissegundos (ms) o

tempo entre os batimentos e armazenaacute-los (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al

2007)

A teacutecnica utilizada com esse objetivo eacute chamada de anaacutelise espectral e consiste

no uso de algoritmos matemaacuteticos como eacute o caso da transformada raacutepida de fourier

(FFT) para obter diagramas dimensionais Dispondo em um graacutefico os componentes

oscilatoacuterios de frequecircncia da VIC no eixo X e a amplitude dos componentes oscilatoacuterios

no eixo Y permitindo atraveacutes dessa teacutecnica determinar a forccedila espectral das

frequecircncias baixas e altas da VIC

13

Nesse contexto os dois Sendo assim os dois componentes de frequecircncia principais satildeo

divididos atraveacutes da anaacutelise espectral em Frequecircncia baixa (LF) caracterizado pelo

espectro de 004 a 015Hz e Frequecircncia alta (HF) situada na faixa de 015 a 04 Hz na

anaacutelise espectral (KAWASE et al 2002 VON BORELL et al 2007 PICCIRILLO et

al 2009)

Quando os IRR satildeo dispostos em uma escala de tempo um graacutefico eacute

confeccionado e as oscilaccedilotildees formadas representam a accedilatildeo dos diferentes componentes

regulam os pulsos cardiacuteacos onde as frequecircncias mais altas representam a atividade

riacutetmica resultante da ativaccedilatildeo parassimpaacutetica e as mais baixas exibem aquelas

resultantes da atividade simpaacutetica (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al 2007)

(Figura 2)

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC Variabilidade do intervalo cardiacuteaco em um indiviacuteduo

jovem durante o repouso e quando em movimento A seacuterie temporal de intervalos RR estaacute

Repouso Movimento

14

disposta nos graacuteficos do topo Os graacuteficos centrais ilustram a presenccedila de dois componentes

principais da densidade espectral LF e HF Durante o movimento o componente LF se torna

predominante em relaccedilatildeo ao repouso Os graacuteficos na base da figura demonstram a distribuiccedilatildeo

relativa dos dois componentes (representada pela aacuterea) (MALLIANI 1997)

A razatildeo entre os dois componentes de frequecircncia eacute calculada a partir dos valores

obtidos de LF e HF resultando em valor que representa o balanccedilo entre a atividade

simpaacutetica e parassimpaacutetica aleacutem de possibilitar a decomposiccedilatildeo dos componentes

espectrais atraveacutes do caacutelculo das frequecircncias centrais desses componentes que se

situam impliacutecitos no sinal da variabilidade (PAGANI et al 1986 LOMBARDI et

al1996 LOMBARDI 1997 MALLIANI et al 1997 VON BORELL et al 2007

HARADA et al 2005)

A anaacutelise espectral da VIC natildeo acessa o tocircnus autonocircmico cardiacuteaco mas sim o

seu balanccedilo o que justifica a ocorrecircncia de alteraccedilotildees na capacidade do coraccedilatildeo de

responder a esses estiacutemulos quando haacute alteraccedilotildees crocircnicas na atividade autonocircmica

Nesses casos natildeo seria aplicaacutevel a anaacutelise espectral da VIC (STAUSS 2007

PICCIRILLO et al 2009)

Deste modo a anaacutelise espectral da VIC tem como principal utilidade a funccedilatildeo de

indicadora da atividade autonocircmica em resposta ao estresse psicoloacutegico e fiacutesico (VON

BORELL et al 2007) E quando eacute aplicada no estudo das alteraccedilotildees agudas da

atividade autonocircmica cardiacuteaca essa anaacutelise eacute utilizada de maneira a obter dados

fidedignos onde diante de uma resposta ao estresse psicoloacutegico pode ser observado um

aumento agudo na atividade cardiacuteaca simpaacutetica caracterizado pelo aumento do

componente LF com provavelmente baixa ou nenhuma alteraccedilatildeo do componente HF

(STAUSS 2007)

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees

O oacutergatildeo auditivo dentre outras funccedilotildees se caracteriza especialmente por seu

desempenho no reconhecimento de situaccedilotildees ameaccediladoras estando em funcionamento

ininterrupto atraveacutes da conexatildeo direta do ouvido interno com os mecanismos neurais de

ldquoluta ou fugardquo Esse sistema eacute capaz de diferenciar sons de frequecircncias e intensidades

relevantes para a sobrevivecircncia do indiviacuteduo em seu meio ambiente (WESTMAN amp

WALTERS 1981)

15

A percepccedilatildeo do som colabora no balanccedilo homeostaacutetico do sistema nervoso

central influenciando consequentemente o equiliacutebrio fisioloacutegico de forma geral atraveacutes

dos centros autonocircmicos e neuroendoacutecrinos do hipotaacutelamo variando em resposta

conforme o significado do estiacutemulo sonoro e sua intensidade previsibilidade

variabilidade e complexidade

Nesse contexto as respostas fundamentais ao som satildeo de orientaccedilatildeo reflexo de

surpresa e de defesa Sendo a resposta de orientaccedilatildeo fundamental por ser a reaccedilatildeo

comportamental de busca pela fonte sonora permitindo que o indiviacuteduo se prepare para

a resposta necessaacuteria e caso o reconhecimento do som mostre ser esse de baixa

significacircncia a habituaccedilatildeo iraacute ocorrer diminuindo o grau da reaccedilatildeo

Jaacute o reflexo de surpresa iraacute ocorrer em resposta a sons repentinos de alta

intensidade e caraacuteter assustador podendo ser atenuado quando o indiviacuteduo sabe que ele

iraacute ocorrer e podendo ser exacerbado em situaccedilotildees de tensatildeo medo e de abalo

emocional

E a resposta de defesa acontece em resposta a sons de significado intensidade e

duraccedilatildeo relacionados agrave ameaccedila onde haacute excitaccedilatildeo emocional e preparaccedilatildeo dos sistemas

para a accedilatildeo consistindo na resposta de estresse (WESTMAN amp WALTERS 1981)

Alguns sons adquirem significado particular para o indiviacuteduo representando

perigo em potencial assim como os sons de caracteriacutesticas ameaccediladoras Mas

geralmente o significado conotativo de um som potencialmente ameaccedilador estaacute no fato

de ser desconhecido e apresentar mudanccedilas raacutepidas de intensidade aleacutem das associaccedilotildees

extra-auditivas relacionadas a ele Aleacutem disso a previsibilidade desse estiacutemulo sonoro

tambeacutem poderaacute constituir um fator determinante na resposta jaacute que sons imprevisiacuteveis

caracterizam-se como um estiacutemulo estressor maior desencadeando uma reduccedilatildeo geral

de performance e uma baixa toleracircncia a frustraccedilotildees (WESTMAN amp WALTERS

1981)

Os catildees particularmente apresentam muita sensibilidade a estiacutemulos sonoros

visto que seu sistema auditivo eacute extremamente desenvolvido especialmente com a

funccedilatildeo de caccedila e guarda Poreacutem a resposta de defesa exagerada dos indiviacuteduos dessa

espeacutecie tem sido relatada principalmente aos sons de fogos de artifiacutecio trovatildeo e tiro de

16

armas de fogo Provavelmente o caraacuteter imprevisiacutevel a conotaccedilatildeo negativa que a

espeacutecie apresenta a esses sons e a intensidade proacutexima ao limiar de audiccedilatildeo possa

justificar tal reaccedilatildeo (HYDBRING et al 2004)

E eacute com base nessa reaccedilatildeo desmedida que os estiacutemulos sonoros como os sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio vecircm sendo utilizados como modelos de estresse em catildees

(HYDBRING et al 2004 ENGELAND et al 1990) Representando uma opccedilatildeo para o

estudo da reatividade ao estresse que pode ser comparada ao modelo de estresse

acuacutestico de sobressalto em ratos

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees

Ao iniciar um estudo a respeito de uma espeacutecie deve-se ter em mente que cada

sujeito analisado natildeo eacute um sistema inerte e fechado mas sim um somatoacuterio de eventos

que possibilitam ter um exame mais amplo e completo das interaccedilotildees do animal com o

ambiente (SULTAN 2003 BATESON et al 2004)

Assim o estudo comportamental se mostra uma importante ferramenta pois

permite entender que processos bioloacutegicos satildeo compostos por eventos fisioloacutegicos e

psicoloacutegicos natildeo havendo exclusatildeo entre eles mas sim uma sobreposiccedilatildeo com fortes

correlaccedilotildees (HARVERBEKE et al 2008 BEERDA 1999 SPANGENBERG 2006

MONTANHA et al 2009) Conhecer a etologia canina iraacute permitir uma melhor

utilizaccedilatildeo do animal respeitando seus limites e possibilitando a manutenccedilatildeo fiacutesica e

mental dentro dos padrotildees de bem-estar da espeacutecie (SNOWDON 1999 DAWNKINS

1989 DARWIN 2004)

Com relaccedilatildeo ao bem-estar Broom amp Johnson (1993) e Broom amp Fraser (2010)

definem como o estado de um animal em relaccedilatildeo agraves suas tentativas de se adaptar ao

meio em que vive Para os animais domeacutesticos principalmente para os animais de

companhia esse eacute um conceito que muitas vezes pode ser confundido e mal aplicado

pelo homem agrave medida que esse confronta a realidade do animal com a sua proacutepria

passando a adequar paracircmetros humanos a esses animais

Os catildees satildeo marcados pela socializaccedilatildeo baseada em relaccedilotildees familiares com

organizaccedilotildees flexiacuteveis e respostas a um liacuteder aleacutem de possuiacuterem necessidade de

17

ambientes complexos e variados marcadamente importantes na vida gregaacuteria de seus

ancestrais (BROOM amp FRASER 2010)

Pensando nisso um manejo inadequado pode ter consequecircncias que variam

desde alteraccedilotildees comportamentais a quadros patoloacutegicos tendo como agravantes

alteraccedilotildees substanciais nos seus niacuteveis de bem-estar

Poreacutem o estudo do comportamento animal ainda se mostra bastante pioneiro jaacute

que as pesquisas cientiacuteficas a niacutevel cliacutenico comeccedilaram a ser realizados haacute poucas

deacutecadas em animais com problemas comportamentais

Dessa forma se faz presente a necessidade de um maior desenvolvimento de

estudos e pesquisas nesse sentido visto que os problemas comportamentais satildeo

apontados como a principal causa de abandono ou morte de animais de companhia

apresentando maior nuacutemero de relatos do que as doenccedilas infecciosas neoplaacutesicas e

metaboacutelicas concomitantes (OVERALL et al 2001)

A relaccedilatildeo homem-animal eacute muito antiga mas eacute pouco estudada E isso faz com

que o diagnoacutestico e o tratamento dos distuacuterbios comportamentais sejam dificultados

Muitas vezes a origem dos problemas comportamentais estaacute ligada ao tipo de

relacionamento existente entre o homem e o seu animal E isso acontece porque os

animais passam por processos de humanizaccedilatildeo para se adaptarem ao modo e ao estilo de

vida do seu proprietaacuterio nem que para isso tenham que modificar as suas caracteriacutesticas

naturais (OVERALL et al 2001)

Embora os catildees apresentem uma flexibilidade comportamental as exigecircncias

criadas pelos seus proprietaacuterios podem desencadear conflitos e frustraccedilotildees que levam ao

aparecimento de problemas comportamentais (OVERALL et al 2001)

Com frequecircncia o stress ou a ansiedade estatildeo relacionados com o ambiente e

mostram que o limiar entre normal e anormal varia entre indiviacuteduos (BEAVER 2005)

O rompimento da homeostase pode resultar de estimulaccedilatildeo interna externa ou

ambos E o potencial de ruptura da homeostase aumenta com a magnitude do desafio

(APPLEBY amp PLUIJMAKERS 2004) Dessa forma sendo a fobia um transtorno de

reaccedilotildees exageradas e desproporcionais ao real grau de importacircncia do estimulo

18

estressor podemos sugerir que o indiviacuteduo foacutebico eacute mais susceptiacutevel ao estresse de

forma geral reagindo com paracircmetros mais facilmente alterados

26 Fobia em catildees

Medo e ansiedade satildeo funccedilotildees adaptativas de sobrevivecircncia que sinalizam para o

organismo a presenccedila de perigo em potencial no ambiente O medo eacute a resposta

imediata acionada por um evento ou objeto potencialmente nocivo e ansiedade envolve

processos cognitivos mais complexos como antecipaccedilatildeo e preocupaccedilatildeo com

hipervigilacircncia diante de um perigo iminente no ambiente (FEINSTEIN et al 2011)

Entre as respostas comportamentais e fisioloacutegicas claacutessicas imediatas do medo

destacam-se o congelamento sobressalto aumento da frequecircncia cardiacuteaca alteraccedilotildees da

pressatildeo arterial e aumento da vigilacircncia Satildeo respostas comportamentais e perceptivas

que facilitam as respostas defensivas como a fuga e esquiva de forma apropriada afim

de reduzir o perigo ou lesatildeo (CHUDASAMA 2009)

O neurocircuito do medo envolve principalmente a amiacutegdala estrutura cerebral

responsaacutevel pela detecccedilatildeo geraccedilatildeo e manutenccedilatildeo das emoccedilotildees relacionadas ao medo e

ansiedade Eacute uma estrutura complexa pertencente ao sistema liacutembico que consiste em

aproximadamente 10 nuacutecleos que coordenam respostas apropriadas agrave ameaccedila e ao

perigo atraveacutes das respostas comportamentais cardiovasculares e endoacutecrinas ao

estresse (ROSEN amp SCHULKIN 1998)

A amiacutegdala faz ligaccedilotildees entre as aacutereas do coacutertex cerebral e recebe informaccedilotildees

de todos os sistemas sensoriais permite a integraccedilatildeo da informaccedilatildeo proveniente das

diversas aacutereas atraveacutes de conexotildees excitatoacuterias e inibitoacuterias

Os nuacutecleos basolaterais satildeo as principais portas de entrada da amiacutegdala

recebendo informaccedilotildees sensoriais e auditivas vindas do taacutelamo coacutertex sensorial e

associativo (Figura 3) Ele estaacute sob tocircnica inibiccedilatildeo GABAeacutergica e quando bloqueada

esta inibiccedilatildeo resulta em aumento do comportamento de ansiedade com ativaccedilatildeo

cardiovascular simpaticamente mediada (KESSLER et al 2005)

19

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional A informaccedilatildeo

sensoacuteria eacute transmitida para o taacutelamo atraveacutes da via leminiscal A aferecircncia auditiva chega na

divisatildeo ventral do nuacutecleo geniculado medial e projeta-se para o coacutertex auditivo primaacuterio

enquanto outras vias extra leminiscais carreiam informaccedilotildees auditivas para outras partes do

taacutelamo como a divisatildeo medial do nuacutecleo geniculado medial e nuacutecleos intralaminares

posteriores que se projetam tanto para o coacutertex auditivo primaacuterio quanto para o coacutertex auditivo

associativo assim como para os nuacutecleos basolaterias da amiacutegdala Essa via do taacutelamo para

amiacutegdala eacute implicada na aprendizagem emocional (IVERSEN et al 2003)

A amiacutegdala ventrolateral em seres humanos eacute mais sensiacutevel aos estiacutemulos

negativos (especialmente se os estiacutemulos sinalizam informaccedilatildeo negativa iminente) E a

amiacutegdala centromedial (CMA) dorsal tem projeccedilotildees principalmente subcorticais

especialmente aquelas ligadas ao hipotaacutelamo lateral e substacircncia cinzenta periaquedutal

(PAG) Essas projeccedilotildees podem explicar em parte as respostas fisioloacutegicas associadas

ao medo com o hipotaacutelamo (Figura 4) (KESSLER et al 2005)

Kandel 2003

20

Figura 4 Conexotildees diretas entre o nuacutecleo central da amiacutegdala e uma variedade de aacutereas

hipotalacircmicas e do tronco encefaacutelico envolvidas no medo e na ansiedade (IVERSEN et al

2003)

O Locus coeruleus importante nuacutecleo com grande densidade de neurocircnios

noradreneacutergicos com papel no desencadeamento da resposta ao estresse e das reaccedilotildees de

fuga tem tambeacutem papel importante no controle do medo A desregulaccedilatildeo desse nuacutecleo

parece ter relaccedilatildeo com o aparecimento do pacircnico e fobias em humanos (CHARNEY

1984) certamente atraveacutes de sua ligaccedilatildeo ao sistema liacutembico (CHARNEY 1984)

Medos podem desenvolver-se gradualmente e pode haver variaccedilatildeo na resposta

Em contraste fobias geralmente se desenvolvem rapidamente e uma vez desenvolvidas

haacute pouca mudanccedila em sua apresentaccedilatildeo entre as seacuteries Situaccedilotildees indutoras de fobia ou

satildeo evitadas a todo custo pelo foacutebico ou se inevitaacutevel satildeo suportadas com intensa

ansiedade e sofrimento (OVERALL 2010)

A Associaccedilatildeo Norte Americana de Psiquiatria no manual de diagnoacutestico e

estatiacutestica de transtornos mentais (DSM-IV-TR 2002) e a CID-10 (1993) definem em

humanos fobias especiacuteficas como medos irracionais excessivos acentuados e

persistentes revelados pela presenccedila ou antecipaccedilatildeo de um objeto situaccedilatildeo ou

atividade foacutebica especiacutefica de forma desproporcional acompanhados de

comportamentos de fuga esquiva antecipaccedilatildeo ansiosa e intenso sofrimento

Geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase fisioloacutegica

mas leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas ao medo

21

coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o eixo

HHA e o Sistema Nervoso Simpaacutetico

Em catildees natildeo haacute ateacute o momento descrito na literatura uma definiccedilatildeo oficial para

tal transtorno

As fobias satildeo transtornos de ansiedade de difiacutecil cura e geralmente a memoacuteria

de uma resposta foacutebica pode desencadear outros transtornos de ansiedade Dessa forma

o tratamento tem importacircncia natildeo soacute pela questatildeo do bem-estar e qualidade de vida

mas tambeacutem devido a seus componentes de comorbidade (OVERALL 2010)

Resposta exagerada a sons de trovatildeo estatildeo entre as doenccedilas comportamentais

mais comumente associados com pacircnico ou fobia em catildees Ocorre geralmente em

todas as raccedilas embora natildeo existam dados sobre a incidecircncia relativa destes problemas

(OVERALL et al 2001 DUNHAM amp FRANK 2001 VOITH amp BORCHELT 1985)

A fobia agrave sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio constitui uma classe que apresenta

resposta extrema repentina e profunda e que apesar de existir uma variaccedilatildeo consideraacutevel

nas respostas dos catildees (BEERDA SCHILDER VAN HOOFF VRIES 1997) no geral

se manifesta com comportamentos de ansiedade associados com atividades acentuadas

do sistema nervoso simpaacutetico Os comportamentos podem incluir catatonia ou mania

concomitante com diminuiccedilatildeo da sensibilidade ou capacidade de resposta agrave dor ou

estiacutemulos sociais aleacutem de fuga vocalizaccedilatildeo salivaccedilatildeo micccedilatildeo defecaccedilatildeo tremores

comportamentos autodestrutivos e ateacute convulsotildees (OVERALL 2010 SHULL-

SELCER amp STAGG 1991)

Jaacute se sabe que existe um fator hereditaacuterio para esse tipo de fobia e embora os

mecanismos pelos quais ela ocorre ainda natildeo sejam compreendidos parece estar em

alguma alteraccedilatildeo na forma como a informaccedilatildeo eacute processada entre a amiacutegdala e o coacutertex

(OVERALL 2010)

E como ansiedade medos e fobias satildeo queixas comportamentais comuns e

problemaacuteticas dos donos de catildees a falta de tratamento pode resultar no rompimento do

viacutenculo humano-animal e posterior abandono desistecircncia ou ateacute mesmo eutanaacutesia do

catildeo afetado (MILLS etal 2003)

22

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental

Os procedimentos experimentais foram realizados na Estaccedilatildeo experimental de

Parasitologia Veterinaacuteria do Departamento de Parasitologia Animal (DPA) da

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) e no Laboratoacuterio de Fisiologia

Animal do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas (DCF) da UFRRJ Todos os

procedimentos estatildeo de acordo com a lei de bem-estar animal Instruccedilatildeo Normativa ndeg

56 de 2008 O presente experimento encontra-se aprovado pelo Comitecirc de Eacutetica na

Pesquisa da UFRRJ CEUA-IB nordm 2308347962014-14

32 Animais

Foram entrevistados 35 proprietaacuterios de catildees entre os quais foram selecionados

28 com 2 a 6 anos de idade pesando de 10 a 30 Kg doacuteceis saudaacuteveis com vacinas e

vermifugaccedilatildeo em dia do muniacutecipio de Seropeacutedica-RJ

Proprietaacuterios de animais com medo de sons de trovatildeo e fogos de artificio

interessados em participar do estudo e proprietaacuterios de animais sem medo convidados a

participar do estudo incialmente responderam a um formulaacuterio de cadastro dos

animais contendo dados gerais e histoacuterico de respostas comportamentais em geral

(Anexo 1) Em seguida os animais foram submetidos a um exame cliacutenico baacutesico que

constitiu em inspeccedilatildeo palpaccedilatildeo auscultaccedilatildeo e termometria retal e um exame

neuroloacutegico para descartar doenccedilas concomitantes (Anexo 2) Foram dispensados

animais arredios agressivos com peso ou idade fora da faixa estabelecida no criteacuterio de

seleccedilatildeo e animais doentes Os animais selecionados foram caracterizados como foacutebicos

e natildeo-foacutebicos a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio e entatildeo submetidos uma uacutenica vez ao

modelo de estresse sonoro A caracterizaccedilatildeo de animais foacutebicos foi realizada conforme

as respostas dos proprietaacuterios ao questionaacuterio de reaccedilotildees comportamentais aos sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009 CROWELL-

DAVIS 2003) (Anexo 3)

23

Meios de divulgaccedilatildeo do estudo atraveacutes de folder e cartazes de divulgaccedilatildeo do projeto

veiculado pela internet e afixado em diversos estabelecimentos veterinaacuterios no

municiacutepio e pela UFRRJ (Anexo 4)

Avaliaccedilatildeo comportamental atraveacutes de entrevista com o proprietaacuterio (questionaacuterio

adaptado de OVERALL 1997) (Anexo 1)

321 Consideraccedilotildees eacuteticas

A participaccedilatildeo no estudo ocorreu somente com a autorizaccedilatildeo dos entrevistados

mediante um termo de consentimento em que se garantia plena liberdade para

interromper a participaccedilatildeo quando desejado (Anexo 5) Natildeo houve riscos agrave sauacutede fiacutesica

ou mental dos animais que participaram do projeto

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som

Os catildees foram selecionados para compor os grupos conforme as respostas ao

questionaacuterio comportamental previamente preenchido pelo proprietaacuterio

O questionaacuterio especiacutefico para medo de sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio

(Anexo 3) eacute composto de alguns paracircmetros comportamentais comuns em catildees foacutebicos

como atitude destrutiva eliminaccedilatildeo inadequada salivaccedilatildeo excessiva vocalizaccedilatildeo

esconder passadas arfar procurar pelo proprietaacuterio auto-trauma tremor Esses

parametros foram ainda classificados em escala de 0 (comportamento nunca observado)

a 5 (comportamento frequente e grave) (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009

CROWELL-DAVIS 2003)

Os catildees foram considerados aptos a participarem do grupo Foacutebicotrovatildeo e

Foacutebicosfogos quando

Apresentaram pelo menos trecircs dos comportamentos anteriores durante

o som de trovatildeo ou fogos de artifiacutecio com escore igual ou maior que 3

ou algum item com escore maacuteximo (5)

Ou as atitudes do animal no momento do som apresentaram risco a sauacutede

e integridade fiacutesica

E quando as respostas comportamentais foram apresentadas na maior

parte do tempo durante o estiacutemulo

24

33 Procedimentos Experimentais

O protocolo experimental foi realizado individualmente iniciando-se sempre agraves

9 horas da manhatilde Um pesquisador acompanhado de um pesquisador colaborador

realizou todo o protocolo experimental sem se ausentar em nenhuma etapa do

experimento

Dias antes do experimento os animais foram submetidos a um exame cliacutenico e

os proprietaacuterios responderam a questionaacuterios (Anexo 1 e 3) referentes ao manejo e

comportamento do animal

A partir dos dados dos questionaacuterios os animais foram classificados conforme

as respostas dadas referente ao medo de trovatildeo e fogos de artiacutefiacutecio entre animais com

histoacuterico comportamental de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Foacutebicos) e

animais historicamente natildeo foacutebicos a esses sons (Natildeo-foacutebicos)

No dia do experimento cada animal foi submetido a inserccedilatildeo de um cateacuteter de

silicone endovenoso para coleta de sangue ainda em sua moradia (amostra 1 casa) e a

colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro (Polar Pro Trainer RS800CX) Os animais permaneceram

com o frequenciacutemetro durante todo o protocolo experimental

Apoacutes a colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro os animais permaneceram no mesmo local

por 10 minutos para adaptaccedilatildeo ao frequeciacutemetro e registro dos dados de VIC do

momento basal 1 (casa) Em seguida cada animal foi transportado para o laboratoacuterio

onde foi executado o modelo de estresse sonoro agudo O transporte foi realizado

acondicionando o animal numa caixa de transporte num carro de passeio com

ventilaccedilatildeo adequada

Apoacutes a chegada ao local do experimento os animais permaneceram na sala sem

manipulaccedilatildeo e sem interaccedilatildeo por parte dos pesquisadores por 30 minutos para registro

dos dados de VIC do momento basal 2 (laboratoacuterio) Em seguida foi coletada a

segunda amostra de sangue (amostra 2 laboratoacuterio)

O estiacutemulo sonoro consistiu numa gravaccedilatildeo de sons de trovatildeo e outra de sons de

fogos de artifiacutecio numa intensidade sonora maacutexima de 103-104 dB e duraccedilatildeo de 2

minutos e 30 segundos (MACCARIELLO 2012)

Durante e apoacutes o fim do estiacutemulo sonoro cada animal permaneceu sem qualquer

manipulaccedilatildeo A terceira coleta de sangue foi realizada 5 minutos apoacutes o teacutermino do

estresse (amostra 3) a quarta aos 15 minutos (amostra 4) a quinta aos 30 minutos

(amostra 5) e a sexta coleta aos 60 minutos apoacutes o teacutermino do estresse (amostra 6)

25

A filmagem foi realizada durante todo o experimento para registrar as reaccedilotildees

comportamentais

Apoacutes a uacuteltima coleta o polar foi retirado e o animal levado de volta para sua

casa no mesmo transporte e nas mesmas condiccedilotildees em que veio

Figura 5 Esquema do protocolo experimental

331 Estiacutemulo Sonoro

Os estiacutemulos sonoros consistiram de uma gravaccedilatildeo com duraccedilatildeo de 2 minutos e

30 segundos de sons de trovatildeo mixados alternadamente a partir de dois arquivos

sonoros no formato wave (ldquovery loud thunder close thunder crackrdquo e ldquohigh quality

stereo sound of a major thunder clap during a stormrdquo) e outra gravaccedilatildeo de sons de

fogos de artifiacutecio mixado de um arquivo sonoro no formato wave (ldquocontinuous

fireworkrdquo) adquiridos no endereccedilo eletrocircnico httpwwwsound-effectcom

O formato utilizado possui a vantagem de ser uma gravaccedilatildeo que preserva todas

as variaccedilotildees de frequecircncia do som original A intensidade do som foi padronizada

atraveacutes de um decibeliacutemetro modelo BK Precision 732A Sound Level Meters a 103-

104 dB por ser uma pressatildeo sonora capaz de aumentar as concentraccedilotildees de cortisol

seacuterico em catildees estando abaixo dos limites que possam causar danos ao aparelho

auditivo (ISING et al 1999)

O estiacutemulo sonoro foi emitido por um aparelho de som (Pioneer home theater

DVD 120w RMS) com 5 caixas de som acopladas Cada animal foi posicionado a um

metro das caixas de som Para observaccedilatildeo das reaccedilotildees comportamentais cada animal foi

contido apenas por uma guia solta de 15 m podendo reagir e se locomover

naturalmente sem intervenccedilotildees

iii

6367

S729r

T

Souza Carla Caroline Franzini de 1988-

Respostas autonocircmicas e comportamentais

ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de

trovatildeo eou fogos de artifiacutecio Carla

Caroline Franzini de Souza ndash 2015

102 f il

Orientador Magda Alves de Medeiros

Dissertaccedilatildeo (mestrado) ndash Universidade

Federal Rural do Rio de Janeiro Curso de

Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Fisioloacutegicas

Bibliografia f 67-76

1 Catildeo ndash Fisiologia ndash Teses 2 Catildeo ndash

Efeito do stress ndash Teses 3 Catildeo ndash

Comportamento ndash Teses 4 Stress

(Fisiologia) ndash Teses I Medeiros Magda

Alves de 1973- II Universidade Federal

Rural do Rio de Janeiro Curso de Poacutes-

Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Fisioloacutegicas III

Tiacutetulo

iv

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO

INSTITUTO DE BIOLOGIA

PROGRAMA DE POacuteS-GRADUACcedilAtildeO EM CIEcircNCIAS FISIOLOacuteGICAS

CARLA CAROLINE FRANZINI DE SOUZA

Dissertaccedilatildeo submetida como requisito parcial para obtenccedilatildeo do grau de Mestre em

Ciecircncias no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Fisioloacutegicas

DISSERTACcedilAtildeO APROVADA EM 25022015

Magda Alves de Medeiros (Ph D) UFRRJ

(Orientadora)

Faacutebio Fagundes da Rocha (Ph D) UFRRJ

Luciene Covolan (Ph D) UNIFESP

v

DEDICATOacuteRIA

Dedico esse trabalho agrave Francesco (catildeo) Sarah (gata) e Myul

(gata) os animais que me acompanharam desde a infacircncia me

encantando no dia a dia com o carinho companheirismo e

inteligecircncia e que nos uacuteltimos meses nos deixaram apoacutes 15 anos

de maravilhosos tempos

Dedico tambeacutem a minha amada Universidade Rural que me

deu natildeo soacute a oportunidade de ter uma profissatildeo como a de seguir

na pesquisa do que amo

vi

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a meu amado marido Rodrigo que me apoiou incondicionalmente em

todos os momentos bons e difiacuteceis nesses dois anos de pesquisa me ajudando do

trabalho braccedilal ao apoio emocional sempre acreditando que eu era capaz

Agradeccedilo a meus familiares queridos agrave Helena que mesmo precisando de meus

cuidados e atenccedilatildeo foi compreensiva me ajudando e me dando todo o carinho quando

eu mais precisava A meus avoacutes pelo amor incondicional meus pais Carlos e Cris e a

minha irmatilde Catarine que mesmo agrave distacircncia participaram de tudo e se fizeram sempre

presentes A meus sogros queridos Anna e Aluisio e a meu cunhado Rocircmulo sempre

me apoiando e dando forccedila no dia a dia para que eu desse conta de tudo

Agradeccedilo imensamente aos catildees que foram todos maravilhosos e agrave seus

proprietaacuterios que sem medir esforccedilos ajudaram muito em nossa pesquisa colaborando

e confiando seus animais a noacutes

Agradeccedilo agrave Raquel por me ajudar nos estudos na pesquisa no experimento

sempre com muita dedicaccedilatildeo Agrave Marissa querida por dedicar muitas de suas manhatildes

para me ajudar com os catildees Agrave Julia sempre com seus conselhos saacutebios e oportunos

Agradeccedilo agraves meninas do grupo de estudo em Medicina Alternativa Beth

Morgana Giulia Alana Renata Tati que fizeram me sentir parte de um grupo de

trabalho e amizade

A meus queridos colegas de curso Raoni Bruno Debora Liacutevia Gabi e Joice

que passaram comigo momentos de muito estudo dedicaccedilatildeo e cansaccedilo sempre

transformando os momentos mais tensos em divertimento

Agradeccedilo aos professores do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas por me

guiarem no caminho do conhecimento e da ciecircncia

Agradeccedilo ao professor Argemiro pelo imenso apoio e acolhimento quando

mais precisamos

Agradeccedilo a banca pela disponibilidade em contribuir com nosso trabalho

Agradeccedilo agraves agecircncias de fomento CAPES e FAPERJ

E finalmente agradeccedilo a minha orientadora Magda por esse projeto e por ter

sido a primeira a acreditar que eu era capaz e que chegariacuteamos ateacute aqui Sempre com

muita paciecircncia me explicando explicando e explicando caminhou comigo

ultrapassando as dificuldades natildeo me deixando desistir nunca

vii

RESUMO

FRANZINI Carla Caroline de Souza Respostas autonocircmicas e comportamentais ao

estresse sonoro agudo em catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de

trovatildeo eou fogos de artifiacutecio 2015 102 p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias

Fisioloacutegicas) Instituto de Biologia Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

Seropeacutedica RJ 2015

O estresse eacute a situaccedilatildeo gerada por um desafio ao qual um organismo estaacute submetido E

apesar da resposta de estresse ser fundamental para homeostase a persistecircncia do

estiacutemulo estressor ou o exagero na resposta pode provocar consequecircncias deleteacuterias para

o indiviacuteduo A fobia eacute considerada um transtorno de ansiedade onde o medo (estado

emocional em resposta a uma situaccedilatildeo de perigo) eacute persistente e excessivo o que resulta

num aumento da reatividade ao estresse Nesse contexto vaacuterios estiacutemulos satildeo

considerados estressores em catildees e a exposiccedilatildeo a estiacutemulos sonoros como trovotildees e

fogos de artifiacutecio representa uma opccedilatildeo natural para o estudo da reatividade ao estresse

Desta forma avaliamos a reatividade de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a

sons de trovatildeo eou fogos de artifiacutecio a um modelo de estresse sonoro agudo atraveacutes da

anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e de paracircmetros comportamentais

Foram utilizados 28 catildees de companhia de diversas raccedilas de 2 a 6 anos pesando de 10

a 30 Kg sem sinais de outras doenccedilas provenientes de proprietaacuterios voluntaacuterios do

municipio de Seropeacutedica-RJ Estes foram selecionados por questionaacuterio referente a

intensidade do medo de trovatildeo e fogos de artifiacutecio dividos em grupos de foacutebicos e natildeo

foacutebicos e ainda entre os estiacutemulos som de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O estiacutemulo sonoro

consistiu numa gravaccedilatildeo padronizada de 25 minutos a uma intensidade sonora maacutexima

de 103-104 dB Para a anaacutelise da VIC os intervalos RR foram registrados atraveacutes de

frequenciacutemetro (Polarreg modelo RS800CX) computados e analisados pelo programa

CardioSeries 241 Tambeacutem foram avaliados o perfil dos proprietaacuterios caracteriacutesticas

gerais (peso idade raccedila e sexo) e de manejo dos animais Natildeo foram detectadas

diferenccedilas no perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios nem caracteriacutesticas gerais ou de

manejo entre animais foacutebicos e natildeo-foacutebicos O estiacutemulo sonoro (trovatildeo ou fogos) foi

capaz produzir aumento significativo da razatildeo LFHF tanto em animais natildeo-foacutebicos

como em animais foacutebicos No entanto a magnitude do aumento na razatildeo LFHF

produzida pelo som foi significativamente maior em animais foacutebicos do que em animais

natildeo-foacutebicos O modelo de estresse sonoro agudo produziu um aumento nos

comportamentos de vigilacircncia tremer e se esconder Apenas animais foacutebicos

submetidos ao modelo som de fogos apresentaram respostas comportamentais

significativamente mais intensas que catildees natildeo-foacutebicos nos paracircmetros Tremer Se

Esconder Vigilacircncia e Salivaccedilatildeo As respostas comportamentais descritas pelos

proprietaacuterios e as exibidas pelos catildees durante o modelo de estresse foram

correlacionadas apenas nos paracircmetros Tremer e Se Esconder Foi detectada correlaccedilatildeo

significativa entre os valores da razatildeo LFHF e os seguintes paracircmetros

comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio Arfar Tremer Se Esconder Fugir

Inquietaccedilatildeo Vigilacircncia Salivaccedilatildeo e Sobressalto O modelo utilizado foi capaz de

induzir respostas comportamentais e autonocircmicas de estresse e se mostra uma boa

ferramenta na mensuraccedilatildeo da magnitude das respostas de estresse de animais de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e pode ser

utilizado na avaliaccedilatildeo de novos caminhos terapecircuticos

Palavras-chaves estresse em catildeo variabilidade do intervalo cardiacuteaco comportamento

fobia a sons

viii

ABSTRACT

FRANZINI Carla Caroline de Souza Autonomic and behavioural responses to noise

acute stress in companion dogs with phobia of thunder andor fireworks sounds 2015 p 105 Thesis (MA in Physiological Sciences) Institute of Biology Federal Rural

University of Rio de Janeiro Seropeacutedica RJ 2015

Stress is a situation caused by a challenge in which a body is subject And despite the

stress response is essential for homeostasis the persistence of the stressor stimulus or

exaggerated response can induce deleterious consequences A phobia is considered an

anxiety disorder where the fear (emotional state in response to a situation of danger) is

persistent and excessive which results in increased reactivity to stress In this context

many stimuli are considered stressors in dogs and the exposure to noise stimuli as

thunder and fireworks is a natural choice for the study of reactivity to stress Thus we

have evaluated the reactivity of companion dogs with history of phobia of the thunder

sounds andor fireworks to an acute acoustic stress model by analysing the variability

of Cardiac Interval (VCI) and behavioural parameters We used 28 companion dogs

different breeds 2 to 6 years old weighing 10 to 30 kg with no signs of other diseases

from volunteers owners of City of Seropeacutedica-RJ The dogs were selected by

questionnaire on the intensity of the fear of thunder and fireworks divided in phobic or

not phobic and between the stimuli sound of thunder or fireworks The sound stimulus

consisted of a standardized recording from 25 minutes to a maximum intensity of

sound of 103-104 dB For the analysis of VCI RR intervals were recorded through

frequency meter (Polar reg RS800CX model) stored and analysed using CardioSeries

241 sofware We also evaluated the profile of the owners general characteristics

(weight age race and gender) and handling of animals No differences were found in

the socioeconomic profile of the owners or general characteristics or animal handling

between phobic and non-phobic dogs The sound stimulus (thunder or fireworks) was

able to induce a significant increase in LF HF ratio in both non-phobic animals and

phobic animals However the magnitude of the sound-induced increase in the LFHF

was significantly higher in phobic than in non-phobic animals The acute sound stress

model produced an increase in the behaviour of surveillance trembling and hiding Only

phobic animals submitted to fireworks sound model had significantly more intense

behavioural responses than non-phobic dogs in the behaviours Shivering Hiding

Surveillance and Salivation Behavioural responses described by the owners and shown

by dogs during the stress model were correlated only in the behaviours Shivering and

Hiding Significant correlation was found between the ratio values LF HF and the

following behavioural parameters induced by sound in the laboratory Panting

Shivering Hiding Escape Shockwave Surveillance Salivation and Startle The sound

model was able to induce behavioural and autonomic responses of stress and it shown a

good tool to measure the magnitude of stress responses in the companion dogs with

history of phobia of thunder and fireworks sounds and it can be used in the study of new

therapeutic targets

Keywords stress in dogs variability of cardiac interval behaviour noise phobia

ix

LISTA DE TABELAS E FIGURAS

Tabela 1 Descriccedilatildeo dos 14 paracircmetros comportamentais analisados 31

Tabela 2 Perfil geral dos proprietaacuterios 33

Tabela 3 Perfil dos proprietaacuterios dos catildees segundo os grupos natildeo-foacutebicos e foacutebicos 34

Tabela 4Caracteriacutesticas gerais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 35

Tabela 5 Caracteriacutesticas de manejo dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 36

Tabela 6 Caracteriacutesticas comportamentais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 38

Tabela 7 Paracircmetros comportamentais avaliados no experimento 47

Tabela 8 Correlaccedilatildeo entre paracircmetros comportamentais avaliados pelos proprietaacuterios e

os avaliados durante o experimento 51

Figura 1Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA 8

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC 13

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional 19

Figura 4 Conexotildees nuacutecleo central da amiacutegdala 20

Figura 5 Esquema do protocolo experimental 25

Figura 6 Catildeo no momento do som 26

Figura 7 Componentes do Polar modelo RS800CX 27

Figura 8 Tela inicial do programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 9 Graacutefico confeccionado pelo programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 10 Tela do programa CardioSeries demonstrando a razatildeo entre os componentes de

frequecircncia LF e HF a partir da FFT 30

Figura 11 Paracircmetros avaliados segundo proprietaacuterio 40

Figura 12 Razatildeo LFHF de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos a sons de Trovatildeo eou Fogos de

Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 41

Figura 13 LF (componente de baixa frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos submetidos ao

estresse sonoro agudo atraveacutes de sons de Trovatildeo e Fogos de Artifiacutecio 42

Figura 14 HF (componente de alta frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo-foacutebicos a sons de

Trovatildeo eou Fogos de Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 44

Figura 15 FC (Frequecircncia Cardiacuteaca Meacutedia) dos catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

Figura 16 RMSSD (raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado) de catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

x

Figura 17 Oito dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 49

Figura 18 Seis dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 50

Figura 19 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e os paracircmetros comportamentais segundo os proprietaacuterios 53

Figura 20 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e a razatildeo LFHF 54

xi

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS

AC Adenilatociclase

ACh Acetilcolina

ACTH Hormocircnio adrenocorticotroacutefico

AVP Vasopressina

CCP Corpos Celulares Preacute-ganglionares

CEUA Comissatildeo de Eacutetica no Uso de Animais

CRH Hormocircnio liberador de corticotropina

dB decibeacuteis

DCF Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas

DPA Departamento de Parasitologia Animal

FC Frequecircncia Cardiacuteaca

FFT Transformada Raacutepida de Fourier

GR Receptor de Glicocorticoacuteides

HF Frequecircncia alta

HHA Eixo Hipotaacutelamo Hipoacutefise Adrenal

IRR Intervalos RR

LC Locus Coeruleus

LF Frequecircncia baixa

MR Receptor de Mineralocorticoacuteide

NAV Nodo Atrioventricular

NA Noradrenalina

NS Nodo Sinoatrial

PKA Proteiacutena quinase dependente de AMPc

PVN Nuacutecleo Paraventricular do Hipotaacutelamo

RMSSD raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado

SAM Sistema Simpato-adreno-medular

SNA Sistema Nervoso Autocircnomo

SNC Sistema Nervoso Central

SNP Sistema Nervoso Parassimpaacutetico

SNS Sistema Nervoso Simpaacutetico

xii

SRD Sem raccedila definida

STDRR Desvio padratildeo de todos os intervalos RR do segmento

UFRRJ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

VIC Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco

xiii

SUMAacuteRIO

DEDICATOacuteRIA v

AGRADECIMENTOS vi

RESUMO vii

LISTA DE TABELAS E FIGURAS ix

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS xi

1 INTRODUCcedilAtildeO 1

11 Justificativa 3

12 Objetivos 4

121 Geral 4

122 Especiacuteficos 4

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 5

21 Estresse 5

22 Fisiologia do estresse 6

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse 10

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca 10

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) 12

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees 14

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees 16

26 Fobia em catildees 18

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS 22

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental 22

32 Animais 22

321 Consideraccedilotildees eacuteticas 23

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som 23

33 Procedimentos Experimentais 24

xiv

331 Estiacutemulo Sonoro 25

34 Grupos experimentais 26

35 Coletas de sangue 26

36 Uso do Frequenciacutemetro 27

37 Anaacutelise Espectral da VIC 27

38 Anaacutelise Comportamental 30

39 Anaacutelise Estatiacutestica 31

4 RESULTADOS 33

41 Perfil dos proprietaacuterios e caracteriacutesticas gerais dos animais 33

42 Anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco 41

43 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 46

44 Correlaccedilotildees entre os dados 51

5 DISCUSSAtildeO 55

51 Perfil dos proprietaacuterios e manejo dos animais 55

52 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e o estresse sonoro agudo 59

53 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 61

54 Correlaccedilotildees entre dados 62

55 O Modelo de Estresse Sonoro Agudo em Catildees 63

6 CONCLUSOtildeES 65

7 REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 67

8 ANEXOS 77

ANEXO 1 Ficha geral de cadastro 77

ANEXO 2 Ficha Neuroloacutegica 81

ANEXO 3 Ficha de avaliaccedilatildeo de Fobia 83

ANEXO 4 Folder de divulgaccedilatildeo 85

ANEXO 5 Termo de Consentimento 86

xv

ANEXO 6 Ficha de Protocolo Experimental 88

1

1 INTRODUCcedilAtildeO

Situaccedilotildees de estresse e medo fazem parte da vida de todos os animais e as

reaccedilotildees fisioloacutegicas provocadas por elas satildeo essenciais para sobrevivecircncia no meio

selvagem mas tambeacutem na vida urbana para aqueles animais que foram domesticados

acompanhando o homem em sua caminhada de vida em sociedade

A espeacutecie canina foi a que mais se envolveu com o homem tornando-se um

animal domeacutestico e dependente de cuidados sendo alvo de problemas sociais

ambientais e de sauacutede puacuteblica quando abandonados ou em vida livre pelas cidades e

comunidades

Essa relaccedilatildeo criada ao longo dos tempos entre os catildees e o homem trouxe para

os dias atuais um viacutenculo afetivo de ambas as espeacutecies modificando e ateacute selecionando

atraveacutes das raccedilas o comportamento canino acentuando caracteriacutesticas que podem estar

influenciando a forma dos catildees de lidar com as situaccedilotildees de estresse e medo no

cotidiano

A fisiologia do comportamento regula-se baseada nos estiacutemulos externos aos

quais o animal estaacute sujeito conforme suas necessidades de sobrevivecircncia e ateacute de bem

estar Dessa forma o estresse vem a ser responsaacutevel por modelar o comportamento de

um indiviacuteduo conforme seu modo de vida e sua exposiccedilatildeo a esses estiacutemulos

O estresse como mecanismo de adaptaccedilatildeo a situaccedilotildees adversas eacute extremamente

importante na manutenccedilatildeo da vida pois sem esse mecanismo qualquer situaccedilatildeo

desfavoraacutevel poderia causar morte imediata sendo a capacidade de responder

rapidamente a uma situaccedilatildeo de perigo uma importante caracteriacutestica da evoluccedilatildeo dos

seres

Mais especificamente em situaccedilotildees de estresse o organismo de um indiviacuteduo

redistribui sua energia e o sistema locomotor e sensorial satildeo priorizados em detrimento

de outros (reprodutivo digestivo e imune) fazendo assim com que a resposta

momentacircnea seja eficiente O problema comeccedila quando haacute a persistecircncia destas

situaccedilotildees e ou dessas respostas causando prejuiacutezo aos sistemas deprimidos

A influecircncia dos estiacutemulos sonoros tem demonstrado importacircncia cliacutenica na

espeacutecie canina jaacute que leva diversos indiviacuteduos a sofrerem alteraccedilotildees comportamentais e

2

neuroendoacutecrinas que podem evoluir para graves distuacuterbios comportamentais e

fisioloacutegicos como a fobia Em alguns casos de estresse crocircnico severo podem ocorrer

danos neurais doenccedilas gastrointestinais aleacutem da diminuiccedilatildeo da resposta imune

A fobia eacute descrita como um medo acentuado irracional persistente e excessivo

claramente discerniacutevel de objetos seres lugares ou situaccedilotildees de forma desproporcional

e exagerada acompanhada de comportamento de fuga esquiva antecipaccedilatildeo e intenso

sofrimento que geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase

fisioloacutegica mas que leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas

ao medo coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o

eixo Hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HPA) na liberaccedilatildeo de glicocorticoides e o sistema

nervoso simpaacutetico

Na fobia os limiares de ativaccedilatildeo dos circuitos neurais de medo estatildeo reduzidos

podendo ser observado no indiviacuteduo clara hiperexcitabilidade hipervigilacircncia e

aumento da responsividade comportamental aos estiacutemulos Idealmente os graus de

ativaccedilotildees seriam proporcionais agrave ameaccedila e uma adaptaccedilatildeo agrave situaccedilatildeo normalizaria a

resposta de estresse diminuindo-a conforme a ameaccedila desaparecesse o que natildeo ocorre

na fobia

Os criteacuterios para o diagnoacutestico de fobia em humanos costumam usar termos

que se referem a sintomas emocionais envolvendo sentimentos e estados de consciecircncia

subjetivos o que difiacuteculta a abordagem cientifica e cliacutenica nos animais Poreacutem as

alteraccedilotildees dos paracircmetros comportamentais e fisioloacutegicos dos sistemas

neuroendoacutecrinos envolvidos nesses distuacuterbios satildeo um caminho de estudo e pesquisa

Dessa forma os niacuteveis de estresse podem ser avaliados atraveacutes da mensuraccedilatildeo

de paracircmetros fisioloacutegicos e comportamentais Em vaacuterias espeacutecies o paracircmetro mais

utilizado eacute a dosagem de cortisol Aleacutem desse a anaacutelise da variabilidade do intervalo

cardiacuteaco (VIC) vem se mostrando um paracircmetro importante e natildeo invasivo para avaliar

o balanccedilo simpato-vagal em indiviacuteduos submetidos a estiacutemulos potencialmente

desafiadores As alteraccedilotildees comportamentais analisadas em conjunto com as anaacutelises

citadas a cima formam uma importante fonte de dados ainda natildeo correlacionadas nos

estudos mais recentes

Contudo o presente estudo teve como objetivo avaliar as respostas autonocircmicas

e comportamentais induzidas pelo estresse sonoro agudo em catildees de companhia com

3

histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O modelo de estresse utilizado

consiste em um meacutetodo natildeo invasivo e seguro uma vez que cada animal foi submetido

a um estiacutemulo sonoro (sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio) de curta duraccedilatildeo (25 min) a

uma intensidade sonora maacutexima de 1039 dB natildeo sendo capaz de causar efeitos

deleteacuterios para a audiccedilatildeo dos animais

Para tal foram utilizados 28 catildees de diversas raccedilas dos quais 16 eram

historicamente foacutebicos a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e 12 natildeo apresentavam

qualquer sinal de medo a esses sons Os animais foram dividos ainda entre submetidos

ao som de trovatildeo e submetidos ao som de fogos de artifiacutecio

Foram avaliados o balanccedilo simpato-vagal atraveacutes da mensuraccedilatildeo da VIC e 14

paracircmetros comportamentais aleacutem da coleta de amostras sanguiacuteneas em 6 momentos

para posterior anaacutelise dos niacuteveis seacutericos de cortisol

11 Justificativa

Animais e humanos satildeo constantemente submetidos a situaccedilotildees de estresse no

seu cotidiano Em catildees vaacuterios estiacutemulos podem ser considerados geradores de estresse

e sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio tecircm se mostrado estiacutemulos estressores importantes

devido agrave frequente ocorrecircncia de fobia a esses sons nesta espeacutecie

O tema escolhido eacute de grande importacircncia na atualidade uma vez que satildeo

necessaacuterias mais pesquisas sobre o efeito do estresse em humanos e animais Neste

sentido a avaliaccedilatildeo dos paracircmetros fisioloacutegicos em situaccedilotildees de estresse eacute uma forma

de estudar e compreender melhor os distuacuterbios relacionados ao estresse e traccedilar novos

caminhos terapecircuticos

Eacute relevante para a Medicina Veterinaacuteria e para a aacuterea de sauacutede como um todo

pois modelos de estresse sonoro agudo podem ser uacuteteis na verificaccedilatildeo da reatividade ao

estresse aleacutem de serem pouco invasivos e de relativa faacutecil execuccedilatildeo

4

12 Objetivos

121 Geral

Verificar as respostas fisioloacutegicas ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

122 Especiacuteficos

Avaliar o perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios as caracteriacutesticas gerais e

comportamentais e o manejo dos animais em catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

Avaliar a resposta autonocircmica a partir da anaacutelise espectral da variabilidade do

intervalo cardiacuteaco de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos

de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar a resposta comportamental de catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre o comportamento dos animais relatado pelos

proprietaacuterios durante a ocorrecircncia natural de trovotildees ou fogos e os comportamentos

exibidos pelos catildees em resposta ao modelo de estresse sonoro em laboratoacuterio

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre paracircmetros autonocircmicos e comportamentais em

catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

5

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

21 Estresse

O fisiologista Claude Bernard em 1872 definiu o conceito de meio interno pela

primeira vez como um princiacutepio do equiliacutebrio dinacircmico do meio interno essencial para

a sobrevivecircncia (FRANCI 2005)

Apesar disso foi Walter Canon em 1929 o responsaacutevel por definir esse

conceito da condiccedilatildeo de equiliacutebrio do meio interno criado por Claude Bernard com o

termo homeostase Aleacutem de ter reconhecidoos agentes desafiadores da homeostase

como fiacutesicos e emocionais e elaborado o conceito de ldquoreaccedilatildeo de emergecircnciardquo que

ocorre quando haacute um desafio capaz de ativar a liberaccedilatildeo de noradrenalina de terminais

nervosos simpaacuteticos e adrenalina da medula da adrenal (FRANCI 2005)

E mais recentemente entre 1946 e 1976 o fisiologista canadense Hans Selye

definiu ldquoa situaccedilatildeo gerada pelo desafio ao qual um organismo estaria submetidordquo com o

termo estresse E ao ocorrerem controveacutersias conceituais uma vez que natildeo se podia

distinguir a causa do efeito ele criou o termo estressor para designar o agente causador

(estiacutemulo) e manteve o termo estresse para designar a condiccedilatildeo gerada pelo estiacutemulo

desafiador (FRANCI 2005)

A resposta a um estiacutemulo estressor eacute fundamental para a homeostase de um ser

vivo e sua sobrevivecircncia Nas condiccedilotildees de estresse o organismo reage por meio da

ativaccedilatildeo e desativaccedilatildeo do mecanismo de controle de vaacuterias funccedilotildees para recuperar e

manter a homeostase No entanto essas respostas podem ser insuficientes para

restabelecer ou manter a homeostase ou podem ser exageradas representando risco de

doenccedilas Portanto o estresse pode ser definido como a soma de respostas fiacutesicas e

mentais causadas por determinados estiacutemulos externos e que permitem ao indiviacuteduo

superar determinadas exigecircncias do meio-ambiente (FRANCI 2005)

A reaccedilatildeo de estresse maximiza o gasto de energia que ajuda a preparar o corpo

para atender a uma situaccedilatildeo ameaccediladora ou desafiadora em que o indiviacuteduo tende a

mobilizar um grande esforccedilo a fim de lidar com o evento No entanto enquanto uma

certa quantidade de estresse eacute necessaacuteria para a sobrevivecircncia o estresse prolongado

pode afetar adversamente a sauacutede (BERNARD amp KRUPAT 1994)

6

Em situaccedilotildees de estresse ocorre a ativaccedilatildeo de duas principais vias o eixo

hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) atraveacutes do aumento da produccedilatildeo de cortisol e o

sistema nervoso simpaacutetico atraveacutes da liberaccedilatildeo de catecolaminas (Noradrenalina

Adrenalina)

A desregulaccedilatildeo de qualquer um desses sistemas de estresse pode levar a

distuacuterbios fisioloacutegicos de vaacuterios outros sistemas incluindo os sistemas imunoloacutegico

cardiovascular funccedilatildeo metaboacutelica e comportamento levando a maacute adaptaccedilatildeo da

resposta ao estresse (MARQUES et al 2010)

22 Fisiologia do estresse

Os estiacutemulos estressores podem ser definidos como aqueles que desafiam a

homeostase Esses estiacutemulos geram respostas que variam de acordo com a duraccedilatildeo e

intensidade e ainda com a predisposiccedilatildeo geneacutetica e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo

Os estiacutemulos causadores de estresse podem ser classificados em quatro grupos

estressores fiacutesicos e quiacutemicos (calor frio barulho radiaccedilatildeo intensa e substacircncias

toacutexicas) psicoloacutegicos (medo e frustraccedilatildeo) sociais (um ambiente hostil e rompimento de

relaccedilotildees) e os que alteram a homeostase vegetativa como em casos de exerciacutecio intenso

e hemorragias Quanto agrave duraccedilatildeo os estiacutemulos causadores de estresse podem ser ainda

classificados como agudos ou crocircnicos (PACAacuteK amp PALKOVITS 2001)

Moberg (2000) propotildee um modelo para compreensatildeo do estresse em toda

espeacutecie animal que sugere uma resposta bioloacutegica ao estresse a partir de trecircs estaacutegios

gerais

1ordm O reconhecimento de um estiacutemulo estressante

2deg A defesa bioloacutegica contra o estiacutemulo estressante

3deg As consequecircncias da resposta de estresse

Esta resposta ao estressor iraacute abranger aspectos cognitivos comportamentais e

fisioloacutegicos (MARGIS et al 2003)

Em uma situaccedilatildeo de estresse satildeo ativados o sistema simpato-adrenomedular

gerando o aumento da secreccedilatildeo de catecolaminas e logo excitaccedilatildeo raacutepida do sistema

cardiovascular ocasionando um aumento da frequecircncia cardiacuteaca e da pressatildeo arterial E

7

o outro eixo ativado eacute o hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) levando ao aumento na

produccedilatildeo de cortisol e naturalmente mobilizaccedilatildeo de energia (ULRICH-LAI amp

HERMAN 2009) (Figura 1)

As respostas de emergecircncia ativadas pelo SAM ocorrem quando o organismo se

prepara para a defesa ou ataque excretando adrenalina Entatildeoo suprimento de sangue eacute

desviado para os muacutesculos havendo elevaccedilatildeo do deacutebito cardiacuteaco total e da

redistribuiccedilatildeo sanguiacutenea aumentando a oferta de nutrientes e oxigecircnio para as estruturas

vitais A pressatildeo arterial se eleva e os bronquiolos se dilatam tornando a respiraccedilatildeo

mais raacutepida e profunda para retirada do dioacutexido de carbono excedente As funccedilotildees

digestivas e secretoacuterias diminuem aleacutem da reaccedilatildeo de aliacutevio com a liberaccedilatildeo de qualquer

excesso da bexiga e intestino A taxa metaboacutelica aumenta e a liberaccedilatildeo de endorfinas

diminue a sensibilidade agrave dor e os sentidos satildeo mantidos em estado de alerta

(ROGERSON 1997)

8

Figura 1 Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA A ativaccedilatildeo do sistema simpato-adrenomedular

(SAM) e do eixo do hipotaacutelamo hipoacutefise adrenal (HHA) como sistemas primaacuterios para a

manutenccedilatildeo e restabelecimento da homeostase A exposiccedilatildeo ao estressor resulta em ativaccedilatildeo de

neurocircnios preacute-ganglionares simpaacuteticos na coluna intermediolateral da medula espinhal

toracolombar (T1 a L2) Estes neurocircnios preacute-ganglionares se projetam para gacircnglios preacute e para

vertebrais que entatildeo terminam em oacutergatildeos alvo e nas ceacutelulas cromafins da medula da adrenal

Esta ativaccedilatildeo simpaacutetica (em ciacuterculos) representa a resposta claacutessica de luta e fuga que foi

primariamente caracterizada por Walter Cannon e colaboradores no iniacutecio do seacuteculo passado e

leva a um aumento dos niacuteveis de adrenalina (proveniente da adrenal) e de noradrenalina dos

terminais simpaacuteticos aumento da frequecircncia e da forccedila de contraccedilatildeo do coraccedilatildeo vasoconstriccedilatildeo

perifeacuterica e mobilizaccedilatildeo de energia O tocircnus parassimpaacutetico tambeacutem eacute mobilizado durante o

estresse No sistema parassimpaacutetico (em estrelas) representa a ativaccedilatildeo de nuacutecleos preacute-

ganglionares cracircnios-sacrais ativam nuacutecleos poacutes-ganglionares localizados proacuteximos aos oacutergatildeos

inervados com efeito geralmente oposto ao sistema simpaacutetico Para o eixo HHA a exposiccedilatildeo ao

estressor ativa neurocircnios hipofisiotroacuteficos no nuacutecleo paraventricular do hipotaacutelamo (PVN) que

secretam hormocircnios de liberaccedilatildeo como hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH) e

vasopressina (AVP) na circulaccedilatildeo porta da eminecircncia meacutedia Estes hormocircnios liberadores atuam

na hipoacutefise anterior para promover a secreccedilatildeo de hormocircnio adrenocorticotroacutefico (ACTH) que

atua no coacutertex da adrenal (zona fasciculata) para iniciar a siacutentese e liberaccedilatildeo dos hormocircnios

glicocorticoacuteides Os glicocorticoacuteides circulantes promovem a mobilizaccedilatildeo de energia estocada e

potencializam numerosos efeitos simpaacuteticos como a vasoconstriccedilatildeo perifeacuterica Aleacutem disso o

coacutertex da adrenal eacute diretamente inervado pelo sistema simpaacutetico que regula a liberaccedilatildeo de

glicocorticoacuteides Entatildeo a ativaccedilatildeo do sistema simpaacutetico e do eixo HHA tem accedilotildees

complementares no organismo incluindo a mobilizaccedilatildeo de energia e a manutenccedilatildeo da pressatildeo

arterial durante o estresse (Adaptado de ULRICH-LAI amp HERMAN 2009)

CRH

AVP

9

As respostas ao estresse que envolvem emoccedilatildeo passaratildeo por avaliaccedilatildeo afetiva

onde a informaccedilatildeo seraacute processada e interpretada para se estimar o potencial de ameaccedila

Esta avaliaccedilatildeo afetiva iraacute determinar o padratildeo de respostas e o tipo de defesa de acordo

com a histoacuteria pessoal aprendizado e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo que entatildeo faraacute

a avaliaccedilatildeo da capacidade para lidar com a situaccedilatildeo e organizaccedilatildeo da resposta

(MARGIS et al 2003)

A intensidade da resposta eacute que determina se o animal estaacute sofrendo de estresse

ou eacute meramente experimentado um episoacutedio breve em sua vida sem nenhum impacto

significativo ao seu bem-estar

Circuitos neurais espinais e supra espinais estatildeo envolvidos nas respostas de

estresse Os supra espinais processam as informaccedilotildees vindas das vias somatossensoriais

e viscerossensoriais e elaboram as respostas atraveacutes do taacutelamo hipotaacutelamo aacuterea preacute-

optica estruturas liacutembicas e sistemas amineacutergicos e natildeo amineacutergicos do tronco cerebral

Os neurocircnios do PVN secretores de hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH)

e vasopressina com os neurocircnios catecolamineacutergicos do locus coeruleus (LC) (o nuacutecleo

com maior densidade de neurocircnios noradreneacutergicos com papel fundamental no

desencadeamento da resposta ao estresse e reaccedilotildees de fuga) inervam o hipocampo a

amiacutegdala e o neocortex aleacutem de nuacutecleos do rafe (5-HT) e grupamentos celulares da

medula e ponte compondo assim um dos principais reguladores centrais de resposta ao

estresse na ativaccedilatildeo do eixo HHA e SNS (FRANCI 2005)

O eixo HHA eacute ativado por diferentes categorias de estresse como traumaacutetico

inflamatoacuterio e psicoloacutegico E o estresse psicoloacutegico tem regulaccedilatildeo por estruturas

liacutembicas que exercem atividade modulatoacuteria sobre o eixo (ULRICH-LAI amp HERMAN

2009)

O PVN monitora sinais relacionados com o estado emocional atraveacutes de sinais

metaboacutelicos como a composiccedilatildeo plasmaacutetica O CRH o principal neurotransmissor

coordenador das alteraccedilotildees psicoloacutegicas e comportamentais relacionadas ao estresse eacute

sintetizado no PVN e liberado nos capilares da eminecircncia meacutedia juntamente com a

vasopressina (AVP) e alcanccedilam diretamente a hipoacutefise anterior via circulaccedilatildeo portal

hipotalacircmica-hipofisaacuteria que por sua vez estimula na hipoacutefise a liberaccedilatildeo do hormocircnio

adrenocorticotroacutefico (ACTH) (MORMEgraveDE et al 2006)

10

O ACTH eacute sintetizado por ceacutelulas especializadas da hipoacutefise anterior vai para a

corrente sanguiacutenea e estimula o coacutertex da glacircndula adrenal (na zona fasciculada) que

sintetiza o glicocorticoide atraveacutes de esteroides derivados do colesterol O cortisol eacute o

glicocorticoacuteide ativo do eixo para catildees gatos e humanos e a corticosterona para

paacutessaros e roedores (MORMEgraveDE et al 2006)

Esse hormocircnio final do eixo HHA interage com as ceacutelulas atraveacutes da ligaccedilatildeo a

dois receptores o receptor glicocorticoide (GR) e o receptor de mineralocorticoide

(MR) O receptor GR eacute encontrado na maioria dos tecidos do corpo incluindo a maioria

das aacutereas do enceacutefalo No rim e em outros tecidos a aldosterona liga-se ao MR durante a

regulaccedilatildeo da reabsorccedilatildeo de soacutedio mas o MR tambeacutem estaacute presente no hipocampo onde

ocorre a ligaccedilatildeo do cortisol Estes complexos esteroacuteide-receptores entatildeo interagem

com o DNA para iniciar ou para reprimir a transcriccedilatildeo de genes especiacuteficos a fim de

regular a siacutentese de proteiacutenas que provoca alteraccedilotildees fisioloacutegicas em resposta ao

estresse

O cortisol tem 10 vezes mais afinidade ao MR que ao GR Em niacuteveis baixos ou

em situaccedilotildees de ausecircncia de estresse a maior parte do cortisol liga-se aos MRs no

ceacuterebro (principalmente no hipocampo) e modula a atividade basal do eixo HHA e o

aparecimento de resposta ao estresse Com a elevaccedilatildeo dos niacuteveis de cortisol ocorre um

aumento de ligaccedilotildees nos receptores GR reduzindo a atividade do eixo HHA

(mecanismo de ldquofeed-backrdquo negativo) No entanto a ativaccedilatildeo crocircnica deste receptor

estaacute ligada a vaacuterios distuacuterbios cognitivos relativos ao estresse (DE KLOET et al 1999)

Proteger o organismo de possiacuteveis danos eacute um dos papeis principais das

respostas hormonais a situaccedilotildees de estresse E seus principais hormocircnios satildeo a

adrenalina de secreccedilatildeo raacutepida pelo envolvimento na reaccedilatildeo de luta ou fuga e o

corticosteroacuteides na restauraccedilatildeo e na reparaccedilatildeo dos sistemas agindo na segunda linha de

defesa regulando as respostas inflamatoacuteria e imune (MC EWEN 2000)

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca

11

O Nodo Sinoatrial (NS) apresenta a frequecircncia de disparo mais intensa no

coraccedilatildeo estimulando outros locais como os nodos atrioventriculares que principiam

seus proacuteprios impulsos eleacutetricos E com a ausecircncia de influecircncias hormonais ou neurais

a frequecircncia cardiacuteaca (FC) permanece equivalente agrave frequecircncia de disparos do NS ou

seja constante (STAUSS 2007)

Os sistemas nervoso simpaacutetico (SNS) e parassimpaacutetico (SNP) estatildeo

constantemente ativados regulando a atividade cardiacuteaca com a predominacircncia de um ou

outro conforme a situaccedilatildeo Em repouso a predominacircncia eacute vagal o que em humanos

leva a respostas raacutepidas de no maacuteximo 5 segundo na FC diminuindo-a em poucos

batimentos Jaacute as respostas da ativaccedilatildeo simpaacutetica ocorrem apoacutes cinco segundos

aumentando progressivamente chegando a sua resposta maacutexima de aumento da FC

apoacutes 20 a 30 segundos (HAINSWORTH 1995)

No entanto os sistemas simpaacutetico e parassimpaacutetico atuam de forma simultacircnea

na regulaccedilatildeo da atividade cardiacuteaca onde o aumento da atividade vagal natildeo resulta tatildeo

logo na reduccedilatildeo da atividade simpaacutetica e vice-versa (VON BORELL et al 2007)

Quando o SNS eacute ativado as fibras nervosas promovem a descarga de

noradrenalina (NA) nos aacutetrios e ventriacuteculos que por sua vez juntamente com a

adrenalina liberada pela adrenal estimula os receptores β1 adreneacutergicos presentes no

coraccedilatildeo ativando atraveacutes de uma proteiacutena G excitatoacuteria (Gs) a enzima adenilato ciclase

(AC) agrave produzir AMPc Seu aumento intracelular leva agrave ativaccedilatildeo da proteiacutena quinase

dependente de AMPc aumentando as correntes de canais iocircnicos de Ca+2

e Na+

acelerando a velocidade de despolarizaccedilatildeo levando ao aumento da frequecircncia de

disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas do NA desencadeando o aumento da

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Do mesmo modo o miocaacuterdio atrial o nodo aacutetrio-ventricular e o NS satildeo

inervados pelas fibra nervosa parassimpaacutetica dos nervos vagos liberando acetilcolina

(ACh) ativando receptores M2 que estatildeo acoplados a uma proteiacutena G inibitoacuteria (Gi)

inibindo a siacutentese de AMPc intracelular reduzindo a atividade da PKA Aleacutem de a ACh

ativar uma corrente de efluxo de K+ gerando uma hiperpolarizaccedilatildeo da membrana

levando ao aumento do limiar de ativaccedilatildeo do potencial de accedilatildeo sinusal o que reduz a

12

frequecircncia de disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas sinusais diminuindo por fim a

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Existem diferenccedilas no tempo de resposta da ativaccedilatildeo dos ramos simpaacutetico e

parassimpaacutetico que ocorrem em certo modo pela liberaccedilatildeo lenta de noradrenalina nos

terminais nervosos simpaacuteticos e pelas fibras preacute-ganglionares vagais serem

mielinizadas contribuindo para uma transmissatildeo eleacutetrica mais raacutepida Aleacutem das

diferenccedilas anatocircmicas entre os ramos como eacute o caso dos corpos celulares preacute-

ganglionares do parassimpaacutetico localizados dentro do coraccedilatildeo enquanto que os corpos

celulares preacute-ganglionares simpaacuteticos se localizam no gacircnglio paravertebral (VON

BORELL et al 2007)

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC)

A manutenccedilatildeo da homeostase do sistema cardiovascular eacute resultado da oscilaccedilatildeo

riacutetmica de componentes regulatoacuterios da atividade cardiacuteaca onde se observa intervalos

irregulares de tempo entre os batimentos consecutivos (VON BORELL et al 2007)

A anaacutelise da variabilidade do intervalo cardiacuteaco pode ser realizada atraveacutes dos

iacutendices no domiacutenio do tempo e da frequecircncia

No domiacutenio do tempo cada intervalo entre um batimento cardiacuteaco e outro pode

ser medido em milissegundos e no domiacutenio da frequecircncia as flutuaccedilotildees riacutetmicas podem

caracterizar os estados de repouso e atividade influindo na seacuterie cronoloacutegica contida

entre os intervalos tornando possiacutevel a mensurar a atividade do SNA (HOSHI 2009

SONG et al 2006)

Os dados satildeo obtidos atraveacutes da gravaccedilatildeo dos intervalos entre batimentos

cardiacuteacos feitos por frequenciacutemetros capazes de detectar em milissegundos (ms) o

tempo entre os batimentos e armazenaacute-los (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al

2007)

A teacutecnica utilizada com esse objetivo eacute chamada de anaacutelise espectral e consiste

no uso de algoritmos matemaacuteticos como eacute o caso da transformada raacutepida de fourier

(FFT) para obter diagramas dimensionais Dispondo em um graacutefico os componentes

oscilatoacuterios de frequecircncia da VIC no eixo X e a amplitude dos componentes oscilatoacuterios

no eixo Y permitindo atraveacutes dessa teacutecnica determinar a forccedila espectral das

frequecircncias baixas e altas da VIC

13

Nesse contexto os dois Sendo assim os dois componentes de frequecircncia principais satildeo

divididos atraveacutes da anaacutelise espectral em Frequecircncia baixa (LF) caracterizado pelo

espectro de 004 a 015Hz e Frequecircncia alta (HF) situada na faixa de 015 a 04 Hz na

anaacutelise espectral (KAWASE et al 2002 VON BORELL et al 2007 PICCIRILLO et

al 2009)

Quando os IRR satildeo dispostos em uma escala de tempo um graacutefico eacute

confeccionado e as oscilaccedilotildees formadas representam a accedilatildeo dos diferentes componentes

regulam os pulsos cardiacuteacos onde as frequecircncias mais altas representam a atividade

riacutetmica resultante da ativaccedilatildeo parassimpaacutetica e as mais baixas exibem aquelas

resultantes da atividade simpaacutetica (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al 2007)

(Figura 2)

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC Variabilidade do intervalo cardiacuteaco em um indiviacuteduo

jovem durante o repouso e quando em movimento A seacuterie temporal de intervalos RR estaacute

Repouso Movimento

14

disposta nos graacuteficos do topo Os graacuteficos centrais ilustram a presenccedila de dois componentes

principais da densidade espectral LF e HF Durante o movimento o componente LF se torna

predominante em relaccedilatildeo ao repouso Os graacuteficos na base da figura demonstram a distribuiccedilatildeo

relativa dos dois componentes (representada pela aacuterea) (MALLIANI 1997)

A razatildeo entre os dois componentes de frequecircncia eacute calculada a partir dos valores

obtidos de LF e HF resultando em valor que representa o balanccedilo entre a atividade

simpaacutetica e parassimpaacutetica aleacutem de possibilitar a decomposiccedilatildeo dos componentes

espectrais atraveacutes do caacutelculo das frequecircncias centrais desses componentes que se

situam impliacutecitos no sinal da variabilidade (PAGANI et al 1986 LOMBARDI et

al1996 LOMBARDI 1997 MALLIANI et al 1997 VON BORELL et al 2007

HARADA et al 2005)

A anaacutelise espectral da VIC natildeo acessa o tocircnus autonocircmico cardiacuteaco mas sim o

seu balanccedilo o que justifica a ocorrecircncia de alteraccedilotildees na capacidade do coraccedilatildeo de

responder a esses estiacutemulos quando haacute alteraccedilotildees crocircnicas na atividade autonocircmica

Nesses casos natildeo seria aplicaacutevel a anaacutelise espectral da VIC (STAUSS 2007

PICCIRILLO et al 2009)

Deste modo a anaacutelise espectral da VIC tem como principal utilidade a funccedilatildeo de

indicadora da atividade autonocircmica em resposta ao estresse psicoloacutegico e fiacutesico (VON

BORELL et al 2007) E quando eacute aplicada no estudo das alteraccedilotildees agudas da

atividade autonocircmica cardiacuteaca essa anaacutelise eacute utilizada de maneira a obter dados

fidedignos onde diante de uma resposta ao estresse psicoloacutegico pode ser observado um

aumento agudo na atividade cardiacuteaca simpaacutetica caracterizado pelo aumento do

componente LF com provavelmente baixa ou nenhuma alteraccedilatildeo do componente HF

(STAUSS 2007)

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees

O oacutergatildeo auditivo dentre outras funccedilotildees se caracteriza especialmente por seu

desempenho no reconhecimento de situaccedilotildees ameaccediladoras estando em funcionamento

ininterrupto atraveacutes da conexatildeo direta do ouvido interno com os mecanismos neurais de

ldquoluta ou fugardquo Esse sistema eacute capaz de diferenciar sons de frequecircncias e intensidades

relevantes para a sobrevivecircncia do indiviacuteduo em seu meio ambiente (WESTMAN amp

WALTERS 1981)

15

A percepccedilatildeo do som colabora no balanccedilo homeostaacutetico do sistema nervoso

central influenciando consequentemente o equiliacutebrio fisioloacutegico de forma geral atraveacutes

dos centros autonocircmicos e neuroendoacutecrinos do hipotaacutelamo variando em resposta

conforme o significado do estiacutemulo sonoro e sua intensidade previsibilidade

variabilidade e complexidade

Nesse contexto as respostas fundamentais ao som satildeo de orientaccedilatildeo reflexo de

surpresa e de defesa Sendo a resposta de orientaccedilatildeo fundamental por ser a reaccedilatildeo

comportamental de busca pela fonte sonora permitindo que o indiviacuteduo se prepare para

a resposta necessaacuteria e caso o reconhecimento do som mostre ser esse de baixa

significacircncia a habituaccedilatildeo iraacute ocorrer diminuindo o grau da reaccedilatildeo

Jaacute o reflexo de surpresa iraacute ocorrer em resposta a sons repentinos de alta

intensidade e caraacuteter assustador podendo ser atenuado quando o indiviacuteduo sabe que ele

iraacute ocorrer e podendo ser exacerbado em situaccedilotildees de tensatildeo medo e de abalo

emocional

E a resposta de defesa acontece em resposta a sons de significado intensidade e

duraccedilatildeo relacionados agrave ameaccedila onde haacute excitaccedilatildeo emocional e preparaccedilatildeo dos sistemas

para a accedilatildeo consistindo na resposta de estresse (WESTMAN amp WALTERS 1981)

Alguns sons adquirem significado particular para o indiviacuteduo representando

perigo em potencial assim como os sons de caracteriacutesticas ameaccediladoras Mas

geralmente o significado conotativo de um som potencialmente ameaccedilador estaacute no fato

de ser desconhecido e apresentar mudanccedilas raacutepidas de intensidade aleacutem das associaccedilotildees

extra-auditivas relacionadas a ele Aleacutem disso a previsibilidade desse estiacutemulo sonoro

tambeacutem poderaacute constituir um fator determinante na resposta jaacute que sons imprevisiacuteveis

caracterizam-se como um estiacutemulo estressor maior desencadeando uma reduccedilatildeo geral

de performance e uma baixa toleracircncia a frustraccedilotildees (WESTMAN amp WALTERS

1981)

Os catildees particularmente apresentam muita sensibilidade a estiacutemulos sonoros

visto que seu sistema auditivo eacute extremamente desenvolvido especialmente com a

funccedilatildeo de caccedila e guarda Poreacutem a resposta de defesa exagerada dos indiviacuteduos dessa

espeacutecie tem sido relatada principalmente aos sons de fogos de artifiacutecio trovatildeo e tiro de

16

armas de fogo Provavelmente o caraacuteter imprevisiacutevel a conotaccedilatildeo negativa que a

espeacutecie apresenta a esses sons e a intensidade proacutexima ao limiar de audiccedilatildeo possa

justificar tal reaccedilatildeo (HYDBRING et al 2004)

E eacute com base nessa reaccedilatildeo desmedida que os estiacutemulos sonoros como os sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio vecircm sendo utilizados como modelos de estresse em catildees

(HYDBRING et al 2004 ENGELAND et al 1990) Representando uma opccedilatildeo para o

estudo da reatividade ao estresse que pode ser comparada ao modelo de estresse

acuacutestico de sobressalto em ratos

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees

Ao iniciar um estudo a respeito de uma espeacutecie deve-se ter em mente que cada

sujeito analisado natildeo eacute um sistema inerte e fechado mas sim um somatoacuterio de eventos

que possibilitam ter um exame mais amplo e completo das interaccedilotildees do animal com o

ambiente (SULTAN 2003 BATESON et al 2004)

Assim o estudo comportamental se mostra uma importante ferramenta pois

permite entender que processos bioloacutegicos satildeo compostos por eventos fisioloacutegicos e

psicoloacutegicos natildeo havendo exclusatildeo entre eles mas sim uma sobreposiccedilatildeo com fortes

correlaccedilotildees (HARVERBEKE et al 2008 BEERDA 1999 SPANGENBERG 2006

MONTANHA et al 2009) Conhecer a etologia canina iraacute permitir uma melhor

utilizaccedilatildeo do animal respeitando seus limites e possibilitando a manutenccedilatildeo fiacutesica e

mental dentro dos padrotildees de bem-estar da espeacutecie (SNOWDON 1999 DAWNKINS

1989 DARWIN 2004)

Com relaccedilatildeo ao bem-estar Broom amp Johnson (1993) e Broom amp Fraser (2010)

definem como o estado de um animal em relaccedilatildeo agraves suas tentativas de se adaptar ao

meio em que vive Para os animais domeacutesticos principalmente para os animais de

companhia esse eacute um conceito que muitas vezes pode ser confundido e mal aplicado

pelo homem agrave medida que esse confronta a realidade do animal com a sua proacutepria

passando a adequar paracircmetros humanos a esses animais

Os catildees satildeo marcados pela socializaccedilatildeo baseada em relaccedilotildees familiares com

organizaccedilotildees flexiacuteveis e respostas a um liacuteder aleacutem de possuiacuterem necessidade de

17

ambientes complexos e variados marcadamente importantes na vida gregaacuteria de seus

ancestrais (BROOM amp FRASER 2010)

Pensando nisso um manejo inadequado pode ter consequecircncias que variam

desde alteraccedilotildees comportamentais a quadros patoloacutegicos tendo como agravantes

alteraccedilotildees substanciais nos seus niacuteveis de bem-estar

Poreacutem o estudo do comportamento animal ainda se mostra bastante pioneiro jaacute

que as pesquisas cientiacuteficas a niacutevel cliacutenico comeccedilaram a ser realizados haacute poucas

deacutecadas em animais com problemas comportamentais

Dessa forma se faz presente a necessidade de um maior desenvolvimento de

estudos e pesquisas nesse sentido visto que os problemas comportamentais satildeo

apontados como a principal causa de abandono ou morte de animais de companhia

apresentando maior nuacutemero de relatos do que as doenccedilas infecciosas neoplaacutesicas e

metaboacutelicas concomitantes (OVERALL et al 2001)

A relaccedilatildeo homem-animal eacute muito antiga mas eacute pouco estudada E isso faz com

que o diagnoacutestico e o tratamento dos distuacuterbios comportamentais sejam dificultados

Muitas vezes a origem dos problemas comportamentais estaacute ligada ao tipo de

relacionamento existente entre o homem e o seu animal E isso acontece porque os

animais passam por processos de humanizaccedilatildeo para se adaptarem ao modo e ao estilo de

vida do seu proprietaacuterio nem que para isso tenham que modificar as suas caracteriacutesticas

naturais (OVERALL et al 2001)

Embora os catildees apresentem uma flexibilidade comportamental as exigecircncias

criadas pelos seus proprietaacuterios podem desencadear conflitos e frustraccedilotildees que levam ao

aparecimento de problemas comportamentais (OVERALL et al 2001)

Com frequecircncia o stress ou a ansiedade estatildeo relacionados com o ambiente e

mostram que o limiar entre normal e anormal varia entre indiviacuteduos (BEAVER 2005)

O rompimento da homeostase pode resultar de estimulaccedilatildeo interna externa ou

ambos E o potencial de ruptura da homeostase aumenta com a magnitude do desafio

(APPLEBY amp PLUIJMAKERS 2004) Dessa forma sendo a fobia um transtorno de

reaccedilotildees exageradas e desproporcionais ao real grau de importacircncia do estimulo

18

estressor podemos sugerir que o indiviacuteduo foacutebico eacute mais susceptiacutevel ao estresse de

forma geral reagindo com paracircmetros mais facilmente alterados

26 Fobia em catildees

Medo e ansiedade satildeo funccedilotildees adaptativas de sobrevivecircncia que sinalizam para o

organismo a presenccedila de perigo em potencial no ambiente O medo eacute a resposta

imediata acionada por um evento ou objeto potencialmente nocivo e ansiedade envolve

processos cognitivos mais complexos como antecipaccedilatildeo e preocupaccedilatildeo com

hipervigilacircncia diante de um perigo iminente no ambiente (FEINSTEIN et al 2011)

Entre as respostas comportamentais e fisioloacutegicas claacutessicas imediatas do medo

destacam-se o congelamento sobressalto aumento da frequecircncia cardiacuteaca alteraccedilotildees da

pressatildeo arterial e aumento da vigilacircncia Satildeo respostas comportamentais e perceptivas

que facilitam as respostas defensivas como a fuga e esquiva de forma apropriada afim

de reduzir o perigo ou lesatildeo (CHUDASAMA 2009)

O neurocircuito do medo envolve principalmente a amiacutegdala estrutura cerebral

responsaacutevel pela detecccedilatildeo geraccedilatildeo e manutenccedilatildeo das emoccedilotildees relacionadas ao medo e

ansiedade Eacute uma estrutura complexa pertencente ao sistema liacutembico que consiste em

aproximadamente 10 nuacutecleos que coordenam respostas apropriadas agrave ameaccedila e ao

perigo atraveacutes das respostas comportamentais cardiovasculares e endoacutecrinas ao

estresse (ROSEN amp SCHULKIN 1998)

A amiacutegdala faz ligaccedilotildees entre as aacutereas do coacutertex cerebral e recebe informaccedilotildees

de todos os sistemas sensoriais permite a integraccedilatildeo da informaccedilatildeo proveniente das

diversas aacutereas atraveacutes de conexotildees excitatoacuterias e inibitoacuterias

Os nuacutecleos basolaterais satildeo as principais portas de entrada da amiacutegdala

recebendo informaccedilotildees sensoriais e auditivas vindas do taacutelamo coacutertex sensorial e

associativo (Figura 3) Ele estaacute sob tocircnica inibiccedilatildeo GABAeacutergica e quando bloqueada

esta inibiccedilatildeo resulta em aumento do comportamento de ansiedade com ativaccedilatildeo

cardiovascular simpaticamente mediada (KESSLER et al 2005)

19

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional A informaccedilatildeo

sensoacuteria eacute transmitida para o taacutelamo atraveacutes da via leminiscal A aferecircncia auditiva chega na

divisatildeo ventral do nuacutecleo geniculado medial e projeta-se para o coacutertex auditivo primaacuterio

enquanto outras vias extra leminiscais carreiam informaccedilotildees auditivas para outras partes do

taacutelamo como a divisatildeo medial do nuacutecleo geniculado medial e nuacutecleos intralaminares

posteriores que se projetam tanto para o coacutertex auditivo primaacuterio quanto para o coacutertex auditivo

associativo assim como para os nuacutecleos basolaterias da amiacutegdala Essa via do taacutelamo para

amiacutegdala eacute implicada na aprendizagem emocional (IVERSEN et al 2003)

A amiacutegdala ventrolateral em seres humanos eacute mais sensiacutevel aos estiacutemulos

negativos (especialmente se os estiacutemulos sinalizam informaccedilatildeo negativa iminente) E a

amiacutegdala centromedial (CMA) dorsal tem projeccedilotildees principalmente subcorticais

especialmente aquelas ligadas ao hipotaacutelamo lateral e substacircncia cinzenta periaquedutal

(PAG) Essas projeccedilotildees podem explicar em parte as respostas fisioloacutegicas associadas

ao medo com o hipotaacutelamo (Figura 4) (KESSLER et al 2005)

Kandel 2003

20

Figura 4 Conexotildees diretas entre o nuacutecleo central da amiacutegdala e uma variedade de aacutereas

hipotalacircmicas e do tronco encefaacutelico envolvidas no medo e na ansiedade (IVERSEN et al

2003)

O Locus coeruleus importante nuacutecleo com grande densidade de neurocircnios

noradreneacutergicos com papel no desencadeamento da resposta ao estresse e das reaccedilotildees de

fuga tem tambeacutem papel importante no controle do medo A desregulaccedilatildeo desse nuacutecleo

parece ter relaccedilatildeo com o aparecimento do pacircnico e fobias em humanos (CHARNEY

1984) certamente atraveacutes de sua ligaccedilatildeo ao sistema liacutembico (CHARNEY 1984)

Medos podem desenvolver-se gradualmente e pode haver variaccedilatildeo na resposta

Em contraste fobias geralmente se desenvolvem rapidamente e uma vez desenvolvidas

haacute pouca mudanccedila em sua apresentaccedilatildeo entre as seacuteries Situaccedilotildees indutoras de fobia ou

satildeo evitadas a todo custo pelo foacutebico ou se inevitaacutevel satildeo suportadas com intensa

ansiedade e sofrimento (OVERALL 2010)

A Associaccedilatildeo Norte Americana de Psiquiatria no manual de diagnoacutestico e

estatiacutestica de transtornos mentais (DSM-IV-TR 2002) e a CID-10 (1993) definem em

humanos fobias especiacuteficas como medos irracionais excessivos acentuados e

persistentes revelados pela presenccedila ou antecipaccedilatildeo de um objeto situaccedilatildeo ou

atividade foacutebica especiacutefica de forma desproporcional acompanhados de

comportamentos de fuga esquiva antecipaccedilatildeo ansiosa e intenso sofrimento

Geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase fisioloacutegica

mas leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas ao medo

21

coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o eixo

HHA e o Sistema Nervoso Simpaacutetico

Em catildees natildeo haacute ateacute o momento descrito na literatura uma definiccedilatildeo oficial para

tal transtorno

As fobias satildeo transtornos de ansiedade de difiacutecil cura e geralmente a memoacuteria

de uma resposta foacutebica pode desencadear outros transtornos de ansiedade Dessa forma

o tratamento tem importacircncia natildeo soacute pela questatildeo do bem-estar e qualidade de vida

mas tambeacutem devido a seus componentes de comorbidade (OVERALL 2010)

Resposta exagerada a sons de trovatildeo estatildeo entre as doenccedilas comportamentais

mais comumente associados com pacircnico ou fobia em catildees Ocorre geralmente em

todas as raccedilas embora natildeo existam dados sobre a incidecircncia relativa destes problemas

(OVERALL et al 2001 DUNHAM amp FRANK 2001 VOITH amp BORCHELT 1985)

A fobia agrave sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio constitui uma classe que apresenta

resposta extrema repentina e profunda e que apesar de existir uma variaccedilatildeo consideraacutevel

nas respostas dos catildees (BEERDA SCHILDER VAN HOOFF VRIES 1997) no geral

se manifesta com comportamentos de ansiedade associados com atividades acentuadas

do sistema nervoso simpaacutetico Os comportamentos podem incluir catatonia ou mania

concomitante com diminuiccedilatildeo da sensibilidade ou capacidade de resposta agrave dor ou

estiacutemulos sociais aleacutem de fuga vocalizaccedilatildeo salivaccedilatildeo micccedilatildeo defecaccedilatildeo tremores

comportamentos autodestrutivos e ateacute convulsotildees (OVERALL 2010 SHULL-

SELCER amp STAGG 1991)

Jaacute se sabe que existe um fator hereditaacuterio para esse tipo de fobia e embora os

mecanismos pelos quais ela ocorre ainda natildeo sejam compreendidos parece estar em

alguma alteraccedilatildeo na forma como a informaccedilatildeo eacute processada entre a amiacutegdala e o coacutertex

(OVERALL 2010)

E como ansiedade medos e fobias satildeo queixas comportamentais comuns e

problemaacuteticas dos donos de catildees a falta de tratamento pode resultar no rompimento do

viacutenculo humano-animal e posterior abandono desistecircncia ou ateacute mesmo eutanaacutesia do

catildeo afetado (MILLS etal 2003)

22

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental

Os procedimentos experimentais foram realizados na Estaccedilatildeo experimental de

Parasitologia Veterinaacuteria do Departamento de Parasitologia Animal (DPA) da

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) e no Laboratoacuterio de Fisiologia

Animal do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas (DCF) da UFRRJ Todos os

procedimentos estatildeo de acordo com a lei de bem-estar animal Instruccedilatildeo Normativa ndeg

56 de 2008 O presente experimento encontra-se aprovado pelo Comitecirc de Eacutetica na

Pesquisa da UFRRJ CEUA-IB nordm 2308347962014-14

32 Animais

Foram entrevistados 35 proprietaacuterios de catildees entre os quais foram selecionados

28 com 2 a 6 anos de idade pesando de 10 a 30 Kg doacuteceis saudaacuteveis com vacinas e

vermifugaccedilatildeo em dia do muniacutecipio de Seropeacutedica-RJ

Proprietaacuterios de animais com medo de sons de trovatildeo e fogos de artificio

interessados em participar do estudo e proprietaacuterios de animais sem medo convidados a

participar do estudo incialmente responderam a um formulaacuterio de cadastro dos

animais contendo dados gerais e histoacuterico de respostas comportamentais em geral

(Anexo 1) Em seguida os animais foram submetidos a um exame cliacutenico baacutesico que

constitiu em inspeccedilatildeo palpaccedilatildeo auscultaccedilatildeo e termometria retal e um exame

neuroloacutegico para descartar doenccedilas concomitantes (Anexo 2) Foram dispensados

animais arredios agressivos com peso ou idade fora da faixa estabelecida no criteacuterio de

seleccedilatildeo e animais doentes Os animais selecionados foram caracterizados como foacutebicos

e natildeo-foacutebicos a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio e entatildeo submetidos uma uacutenica vez ao

modelo de estresse sonoro A caracterizaccedilatildeo de animais foacutebicos foi realizada conforme

as respostas dos proprietaacuterios ao questionaacuterio de reaccedilotildees comportamentais aos sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009 CROWELL-

DAVIS 2003) (Anexo 3)

23

Meios de divulgaccedilatildeo do estudo atraveacutes de folder e cartazes de divulgaccedilatildeo do projeto

veiculado pela internet e afixado em diversos estabelecimentos veterinaacuterios no

municiacutepio e pela UFRRJ (Anexo 4)

Avaliaccedilatildeo comportamental atraveacutes de entrevista com o proprietaacuterio (questionaacuterio

adaptado de OVERALL 1997) (Anexo 1)

321 Consideraccedilotildees eacuteticas

A participaccedilatildeo no estudo ocorreu somente com a autorizaccedilatildeo dos entrevistados

mediante um termo de consentimento em que se garantia plena liberdade para

interromper a participaccedilatildeo quando desejado (Anexo 5) Natildeo houve riscos agrave sauacutede fiacutesica

ou mental dos animais que participaram do projeto

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som

Os catildees foram selecionados para compor os grupos conforme as respostas ao

questionaacuterio comportamental previamente preenchido pelo proprietaacuterio

O questionaacuterio especiacutefico para medo de sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio

(Anexo 3) eacute composto de alguns paracircmetros comportamentais comuns em catildees foacutebicos

como atitude destrutiva eliminaccedilatildeo inadequada salivaccedilatildeo excessiva vocalizaccedilatildeo

esconder passadas arfar procurar pelo proprietaacuterio auto-trauma tremor Esses

parametros foram ainda classificados em escala de 0 (comportamento nunca observado)

a 5 (comportamento frequente e grave) (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009

CROWELL-DAVIS 2003)

Os catildees foram considerados aptos a participarem do grupo Foacutebicotrovatildeo e

Foacutebicosfogos quando

Apresentaram pelo menos trecircs dos comportamentos anteriores durante

o som de trovatildeo ou fogos de artifiacutecio com escore igual ou maior que 3

ou algum item com escore maacuteximo (5)

Ou as atitudes do animal no momento do som apresentaram risco a sauacutede

e integridade fiacutesica

E quando as respostas comportamentais foram apresentadas na maior

parte do tempo durante o estiacutemulo

24

33 Procedimentos Experimentais

O protocolo experimental foi realizado individualmente iniciando-se sempre agraves

9 horas da manhatilde Um pesquisador acompanhado de um pesquisador colaborador

realizou todo o protocolo experimental sem se ausentar em nenhuma etapa do

experimento

Dias antes do experimento os animais foram submetidos a um exame cliacutenico e

os proprietaacuterios responderam a questionaacuterios (Anexo 1 e 3) referentes ao manejo e

comportamento do animal

A partir dos dados dos questionaacuterios os animais foram classificados conforme

as respostas dadas referente ao medo de trovatildeo e fogos de artiacutefiacutecio entre animais com

histoacuterico comportamental de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Foacutebicos) e

animais historicamente natildeo foacutebicos a esses sons (Natildeo-foacutebicos)

No dia do experimento cada animal foi submetido a inserccedilatildeo de um cateacuteter de

silicone endovenoso para coleta de sangue ainda em sua moradia (amostra 1 casa) e a

colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro (Polar Pro Trainer RS800CX) Os animais permaneceram

com o frequenciacutemetro durante todo o protocolo experimental

Apoacutes a colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro os animais permaneceram no mesmo local

por 10 minutos para adaptaccedilatildeo ao frequeciacutemetro e registro dos dados de VIC do

momento basal 1 (casa) Em seguida cada animal foi transportado para o laboratoacuterio

onde foi executado o modelo de estresse sonoro agudo O transporte foi realizado

acondicionando o animal numa caixa de transporte num carro de passeio com

ventilaccedilatildeo adequada

Apoacutes a chegada ao local do experimento os animais permaneceram na sala sem

manipulaccedilatildeo e sem interaccedilatildeo por parte dos pesquisadores por 30 minutos para registro

dos dados de VIC do momento basal 2 (laboratoacuterio) Em seguida foi coletada a

segunda amostra de sangue (amostra 2 laboratoacuterio)

O estiacutemulo sonoro consistiu numa gravaccedilatildeo de sons de trovatildeo e outra de sons de

fogos de artifiacutecio numa intensidade sonora maacutexima de 103-104 dB e duraccedilatildeo de 2

minutos e 30 segundos (MACCARIELLO 2012)

Durante e apoacutes o fim do estiacutemulo sonoro cada animal permaneceu sem qualquer

manipulaccedilatildeo A terceira coleta de sangue foi realizada 5 minutos apoacutes o teacutermino do

estresse (amostra 3) a quarta aos 15 minutos (amostra 4) a quinta aos 30 minutos

(amostra 5) e a sexta coleta aos 60 minutos apoacutes o teacutermino do estresse (amostra 6)

25

A filmagem foi realizada durante todo o experimento para registrar as reaccedilotildees

comportamentais

Apoacutes a uacuteltima coleta o polar foi retirado e o animal levado de volta para sua

casa no mesmo transporte e nas mesmas condiccedilotildees em que veio

Figura 5 Esquema do protocolo experimental

331 Estiacutemulo Sonoro

Os estiacutemulos sonoros consistiram de uma gravaccedilatildeo com duraccedilatildeo de 2 minutos e

30 segundos de sons de trovatildeo mixados alternadamente a partir de dois arquivos

sonoros no formato wave (ldquovery loud thunder close thunder crackrdquo e ldquohigh quality

stereo sound of a major thunder clap during a stormrdquo) e outra gravaccedilatildeo de sons de

fogos de artifiacutecio mixado de um arquivo sonoro no formato wave (ldquocontinuous

fireworkrdquo) adquiridos no endereccedilo eletrocircnico httpwwwsound-effectcom

O formato utilizado possui a vantagem de ser uma gravaccedilatildeo que preserva todas

as variaccedilotildees de frequecircncia do som original A intensidade do som foi padronizada

atraveacutes de um decibeliacutemetro modelo BK Precision 732A Sound Level Meters a 103-

104 dB por ser uma pressatildeo sonora capaz de aumentar as concentraccedilotildees de cortisol

seacuterico em catildees estando abaixo dos limites que possam causar danos ao aparelho

auditivo (ISING et al 1999)

O estiacutemulo sonoro foi emitido por um aparelho de som (Pioneer home theater

DVD 120w RMS) com 5 caixas de som acopladas Cada animal foi posicionado a um

metro das caixas de som Para observaccedilatildeo das reaccedilotildees comportamentais cada animal foi

contido apenas por uma guia solta de 15 m podendo reagir e se locomover

naturalmente sem intervenccedilotildees

iv

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO

INSTITUTO DE BIOLOGIA

PROGRAMA DE POacuteS-GRADUACcedilAtildeO EM CIEcircNCIAS FISIOLOacuteGICAS

CARLA CAROLINE FRANZINI DE SOUZA

Dissertaccedilatildeo submetida como requisito parcial para obtenccedilatildeo do grau de Mestre em

Ciecircncias no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Fisioloacutegicas

DISSERTACcedilAtildeO APROVADA EM 25022015

Magda Alves de Medeiros (Ph D) UFRRJ

(Orientadora)

Faacutebio Fagundes da Rocha (Ph D) UFRRJ

Luciene Covolan (Ph D) UNIFESP

v

DEDICATOacuteRIA

Dedico esse trabalho agrave Francesco (catildeo) Sarah (gata) e Myul

(gata) os animais que me acompanharam desde a infacircncia me

encantando no dia a dia com o carinho companheirismo e

inteligecircncia e que nos uacuteltimos meses nos deixaram apoacutes 15 anos

de maravilhosos tempos

Dedico tambeacutem a minha amada Universidade Rural que me

deu natildeo soacute a oportunidade de ter uma profissatildeo como a de seguir

na pesquisa do que amo

vi

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a meu amado marido Rodrigo que me apoiou incondicionalmente em

todos os momentos bons e difiacuteceis nesses dois anos de pesquisa me ajudando do

trabalho braccedilal ao apoio emocional sempre acreditando que eu era capaz

Agradeccedilo a meus familiares queridos agrave Helena que mesmo precisando de meus

cuidados e atenccedilatildeo foi compreensiva me ajudando e me dando todo o carinho quando

eu mais precisava A meus avoacutes pelo amor incondicional meus pais Carlos e Cris e a

minha irmatilde Catarine que mesmo agrave distacircncia participaram de tudo e se fizeram sempre

presentes A meus sogros queridos Anna e Aluisio e a meu cunhado Rocircmulo sempre

me apoiando e dando forccedila no dia a dia para que eu desse conta de tudo

Agradeccedilo imensamente aos catildees que foram todos maravilhosos e agrave seus

proprietaacuterios que sem medir esforccedilos ajudaram muito em nossa pesquisa colaborando

e confiando seus animais a noacutes

Agradeccedilo agrave Raquel por me ajudar nos estudos na pesquisa no experimento

sempre com muita dedicaccedilatildeo Agrave Marissa querida por dedicar muitas de suas manhatildes

para me ajudar com os catildees Agrave Julia sempre com seus conselhos saacutebios e oportunos

Agradeccedilo agraves meninas do grupo de estudo em Medicina Alternativa Beth

Morgana Giulia Alana Renata Tati que fizeram me sentir parte de um grupo de

trabalho e amizade

A meus queridos colegas de curso Raoni Bruno Debora Liacutevia Gabi e Joice

que passaram comigo momentos de muito estudo dedicaccedilatildeo e cansaccedilo sempre

transformando os momentos mais tensos em divertimento

Agradeccedilo aos professores do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas por me

guiarem no caminho do conhecimento e da ciecircncia

Agradeccedilo ao professor Argemiro pelo imenso apoio e acolhimento quando

mais precisamos

Agradeccedilo a banca pela disponibilidade em contribuir com nosso trabalho

Agradeccedilo agraves agecircncias de fomento CAPES e FAPERJ

E finalmente agradeccedilo a minha orientadora Magda por esse projeto e por ter

sido a primeira a acreditar que eu era capaz e que chegariacuteamos ateacute aqui Sempre com

muita paciecircncia me explicando explicando e explicando caminhou comigo

ultrapassando as dificuldades natildeo me deixando desistir nunca

vii

RESUMO

FRANZINI Carla Caroline de Souza Respostas autonocircmicas e comportamentais ao

estresse sonoro agudo em catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de

trovatildeo eou fogos de artifiacutecio 2015 102 p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias

Fisioloacutegicas) Instituto de Biologia Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

Seropeacutedica RJ 2015

O estresse eacute a situaccedilatildeo gerada por um desafio ao qual um organismo estaacute submetido E

apesar da resposta de estresse ser fundamental para homeostase a persistecircncia do

estiacutemulo estressor ou o exagero na resposta pode provocar consequecircncias deleteacuterias para

o indiviacuteduo A fobia eacute considerada um transtorno de ansiedade onde o medo (estado

emocional em resposta a uma situaccedilatildeo de perigo) eacute persistente e excessivo o que resulta

num aumento da reatividade ao estresse Nesse contexto vaacuterios estiacutemulos satildeo

considerados estressores em catildees e a exposiccedilatildeo a estiacutemulos sonoros como trovotildees e

fogos de artifiacutecio representa uma opccedilatildeo natural para o estudo da reatividade ao estresse

Desta forma avaliamos a reatividade de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a

sons de trovatildeo eou fogos de artifiacutecio a um modelo de estresse sonoro agudo atraveacutes da

anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e de paracircmetros comportamentais

Foram utilizados 28 catildees de companhia de diversas raccedilas de 2 a 6 anos pesando de 10

a 30 Kg sem sinais de outras doenccedilas provenientes de proprietaacuterios voluntaacuterios do

municipio de Seropeacutedica-RJ Estes foram selecionados por questionaacuterio referente a

intensidade do medo de trovatildeo e fogos de artifiacutecio dividos em grupos de foacutebicos e natildeo

foacutebicos e ainda entre os estiacutemulos som de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O estiacutemulo sonoro

consistiu numa gravaccedilatildeo padronizada de 25 minutos a uma intensidade sonora maacutexima

de 103-104 dB Para a anaacutelise da VIC os intervalos RR foram registrados atraveacutes de

frequenciacutemetro (Polarreg modelo RS800CX) computados e analisados pelo programa

CardioSeries 241 Tambeacutem foram avaliados o perfil dos proprietaacuterios caracteriacutesticas

gerais (peso idade raccedila e sexo) e de manejo dos animais Natildeo foram detectadas

diferenccedilas no perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios nem caracteriacutesticas gerais ou de

manejo entre animais foacutebicos e natildeo-foacutebicos O estiacutemulo sonoro (trovatildeo ou fogos) foi

capaz produzir aumento significativo da razatildeo LFHF tanto em animais natildeo-foacutebicos

como em animais foacutebicos No entanto a magnitude do aumento na razatildeo LFHF

produzida pelo som foi significativamente maior em animais foacutebicos do que em animais

natildeo-foacutebicos O modelo de estresse sonoro agudo produziu um aumento nos

comportamentos de vigilacircncia tremer e se esconder Apenas animais foacutebicos

submetidos ao modelo som de fogos apresentaram respostas comportamentais

significativamente mais intensas que catildees natildeo-foacutebicos nos paracircmetros Tremer Se

Esconder Vigilacircncia e Salivaccedilatildeo As respostas comportamentais descritas pelos

proprietaacuterios e as exibidas pelos catildees durante o modelo de estresse foram

correlacionadas apenas nos paracircmetros Tremer e Se Esconder Foi detectada correlaccedilatildeo

significativa entre os valores da razatildeo LFHF e os seguintes paracircmetros

comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio Arfar Tremer Se Esconder Fugir

Inquietaccedilatildeo Vigilacircncia Salivaccedilatildeo e Sobressalto O modelo utilizado foi capaz de

induzir respostas comportamentais e autonocircmicas de estresse e se mostra uma boa

ferramenta na mensuraccedilatildeo da magnitude das respostas de estresse de animais de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e pode ser

utilizado na avaliaccedilatildeo de novos caminhos terapecircuticos

Palavras-chaves estresse em catildeo variabilidade do intervalo cardiacuteaco comportamento

fobia a sons

viii

ABSTRACT

FRANZINI Carla Caroline de Souza Autonomic and behavioural responses to noise

acute stress in companion dogs with phobia of thunder andor fireworks sounds 2015 p 105 Thesis (MA in Physiological Sciences) Institute of Biology Federal Rural

University of Rio de Janeiro Seropeacutedica RJ 2015

Stress is a situation caused by a challenge in which a body is subject And despite the

stress response is essential for homeostasis the persistence of the stressor stimulus or

exaggerated response can induce deleterious consequences A phobia is considered an

anxiety disorder where the fear (emotional state in response to a situation of danger) is

persistent and excessive which results in increased reactivity to stress In this context

many stimuli are considered stressors in dogs and the exposure to noise stimuli as

thunder and fireworks is a natural choice for the study of reactivity to stress Thus we

have evaluated the reactivity of companion dogs with history of phobia of the thunder

sounds andor fireworks to an acute acoustic stress model by analysing the variability

of Cardiac Interval (VCI) and behavioural parameters We used 28 companion dogs

different breeds 2 to 6 years old weighing 10 to 30 kg with no signs of other diseases

from volunteers owners of City of Seropeacutedica-RJ The dogs were selected by

questionnaire on the intensity of the fear of thunder and fireworks divided in phobic or

not phobic and between the stimuli sound of thunder or fireworks The sound stimulus

consisted of a standardized recording from 25 minutes to a maximum intensity of

sound of 103-104 dB For the analysis of VCI RR intervals were recorded through

frequency meter (Polar reg RS800CX model) stored and analysed using CardioSeries

241 sofware We also evaluated the profile of the owners general characteristics

(weight age race and gender) and handling of animals No differences were found in

the socioeconomic profile of the owners or general characteristics or animal handling

between phobic and non-phobic dogs The sound stimulus (thunder or fireworks) was

able to induce a significant increase in LF HF ratio in both non-phobic animals and

phobic animals However the magnitude of the sound-induced increase in the LFHF

was significantly higher in phobic than in non-phobic animals The acute sound stress

model produced an increase in the behaviour of surveillance trembling and hiding Only

phobic animals submitted to fireworks sound model had significantly more intense

behavioural responses than non-phobic dogs in the behaviours Shivering Hiding

Surveillance and Salivation Behavioural responses described by the owners and shown

by dogs during the stress model were correlated only in the behaviours Shivering and

Hiding Significant correlation was found between the ratio values LF HF and the

following behavioural parameters induced by sound in the laboratory Panting

Shivering Hiding Escape Shockwave Surveillance Salivation and Startle The sound

model was able to induce behavioural and autonomic responses of stress and it shown a

good tool to measure the magnitude of stress responses in the companion dogs with

history of phobia of thunder and fireworks sounds and it can be used in the study of new

therapeutic targets

Keywords stress in dogs variability of cardiac interval behaviour noise phobia

ix

LISTA DE TABELAS E FIGURAS

Tabela 1 Descriccedilatildeo dos 14 paracircmetros comportamentais analisados 31

Tabela 2 Perfil geral dos proprietaacuterios 33

Tabela 3 Perfil dos proprietaacuterios dos catildees segundo os grupos natildeo-foacutebicos e foacutebicos 34

Tabela 4Caracteriacutesticas gerais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 35

Tabela 5 Caracteriacutesticas de manejo dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 36

Tabela 6 Caracteriacutesticas comportamentais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 38

Tabela 7 Paracircmetros comportamentais avaliados no experimento 47

Tabela 8 Correlaccedilatildeo entre paracircmetros comportamentais avaliados pelos proprietaacuterios e

os avaliados durante o experimento 51

Figura 1Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA 8

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC 13

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional 19

Figura 4 Conexotildees nuacutecleo central da amiacutegdala 20

Figura 5 Esquema do protocolo experimental 25

Figura 6 Catildeo no momento do som 26

Figura 7 Componentes do Polar modelo RS800CX 27

Figura 8 Tela inicial do programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 9 Graacutefico confeccionado pelo programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 10 Tela do programa CardioSeries demonstrando a razatildeo entre os componentes de

frequecircncia LF e HF a partir da FFT 30

Figura 11 Paracircmetros avaliados segundo proprietaacuterio 40

Figura 12 Razatildeo LFHF de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos a sons de Trovatildeo eou Fogos de

Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 41

Figura 13 LF (componente de baixa frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos submetidos ao

estresse sonoro agudo atraveacutes de sons de Trovatildeo e Fogos de Artifiacutecio 42

Figura 14 HF (componente de alta frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo-foacutebicos a sons de

Trovatildeo eou Fogos de Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 44

Figura 15 FC (Frequecircncia Cardiacuteaca Meacutedia) dos catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

Figura 16 RMSSD (raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado) de catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

x

Figura 17 Oito dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 49

Figura 18 Seis dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 50

Figura 19 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e os paracircmetros comportamentais segundo os proprietaacuterios 53

Figura 20 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e a razatildeo LFHF 54

xi

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS

AC Adenilatociclase

ACh Acetilcolina

ACTH Hormocircnio adrenocorticotroacutefico

AVP Vasopressina

CCP Corpos Celulares Preacute-ganglionares

CEUA Comissatildeo de Eacutetica no Uso de Animais

CRH Hormocircnio liberador de corticotropina

dB decibeacuteis

DCF Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas

DPA Departamento de Parasitologia Animal

FC Frequecircncia Cardiacuteaca

FFT Transformada Raacutepida de Fourier

GR Receptor de Glicocorticoacuteides

HF Frequecircncia alta

HHA Eixo Hipotaacutelamo Hipoacutefise Adrenal

IRR Intervalos RR

LC Locus Coeruleus

LF Frequecircncia baixa

MR Receptor de Mineralocorticoacuteide

NAV Nodo Atrioventricular

NA Noradrenalina

NS Nodo Sinoatrial

PKA Proteiacutena quinase dependente de AMPc

PVN Nuacutecleo Paraventricular do Hipotaacutelamo

RMSSD raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado

SAM Sistema Simpato-adreno-medular

SNA Sistema Nervoso Autocircnomo

SNC Sistema Nervoso Central

SNP Sistema Nervoso Parassimpaacutetico

SNS Sistema Nervoso Simpaacutetico

xii

SRD Sem raccedila definida

STDRR Desvio padratildeo de todos os intervalos RR do segmento

UFRRJ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

VIC Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco

xiii

SUMAacuteRIO

DEDICATOacuteRIA v

AGRADECIMENTOS vi

RESUMO vii

LISTA DE TABELAS E FIGURAS ix

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS xi

1 INTRODUCcedilAtildeO 1

11 Justificativa 3

12 Objetivos 4

121 Geral 4

122 Especiacuteficos 4

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 5

21 Estresse 5

22 Fisiologia do estresse 6

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse 10

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca 10

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) 12

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees 14

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees 16

26 Fobia em catildees 18

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS 22

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental 22

32 Animais 22

321 Consideraccedilotildees eacuteticas 23

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som 23

33 Procedimentos Experimentais 24

xiv

331 Estiacutemulo Sonoro 25

34 Grupos experimentais 26

35 Coletas de sangue 26

36 Uso do Frequenciacutemetro 27

37 Anaacutelise Espectral da VIC 27

38 Anaacutelise Comportamental 30

39 Anaacutelise Estatiacutestica 31

4 RESULTADOS 33

41 Perfil dos proprietaacuterios e caracteriacutesticas gerais dos animais 33

42 Anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco 41

43 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 46

44 Correlaccedilotildees entre os dados 51

5 DISCUSSAtildeO 55

51 Perfil dos proprietaacuterios e manejo dos animais 55

52 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e o estresse sonoro agudo 59

53 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 61

54 Correlaccedilotildees entre dados 62

55 O Modelo de Estresse Sonoro Agudo em Catildees 63

6 CONCLUSOtildeES 65

7 REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 67

8 ANEXOS 77

ANEXO 1 Ficha geral de cadastro 77

ANEXO 2 Ficha Neuroloacutegica 81

ANEXO 3 Ficha de avaliaccedilatildeo de Fobia 83

ANEXO 4 Folder de divulgaccedilatildeo 85

ANEXO 5 Termo de Consentimento 86

xv

ANEXO 6 Ficha de Protocolo Experimental 88

1

1 INTRODUCcedilAtildeO

Situaccedilotildees de estresse e medo fazem parte da vida de todos os animais e as

reaccedilotildees fisioloacutegicas provocadas por elas satildeo essenciais para sobrevivecircncia no meio

selvagem mas tambeacutem na vida urbana para aqueles animais que foram domesticados

acompanhando o homem em sua caminhada de vida em sociedade

A espeacutecie canina foi a que mais se envolveu com o homem tornando-se um

animal domeacutestico e dependente de cuidados sendo alvo de problemas sociais

ambientais e de sauacutede puacuteblica quando abandonados ou em vida livre pelas cidades e

comunidades

Essa relaccedilatildeo criada ao longo dos tempos entre os catildees e o homem trouxe para

os dias atuais um viacutenculo afetivo de ambas as espeacutecies modificando e ateacute selecionando

atraveacutes das raccedilas o comportamento canino acentuando caracteriacutesticas que podem estar

influenciando a forma dos catildees de lidar com as situaccedilotildees de estresse e medo no

cotidiano

A fisiologia do comportamento regula-se baseada nos estiacutemulos externos aos

quais o animal estaacute sujeito conforme suas necessidades de sobrevivecircncia e ateacute de bem

estar Dessa forma o estresse vem a ser responsaacutevel por modelar o comportamento de

um indiviacuteduo conforme seu modo de vida e sua exposiccedilatildeo a esses estiacutemulos

O estresse como mecanismo de adaptaccedilatildeo a situaccedilotildees adversas eacute extremamente

importante na manutenccedilatildeo da vida pois sem esse mecanismo qualquer situaccedilatildeo

desfavoraacutevel poderia causar morte imediata sendo a capacidade de responder

rapidamente a uma situaccedilatildeo de perigo uma importante caracteriacutestica da evoluccedilatildeo dos

seres

Mais especificamente em situaccedilotildees de estresse o organismo de um indiviacuteduo

redistribui sua energia e o sistema locomotor e sensorial satildeo priorizados em detrimento

de outros (reprodutivo digestivo e imune) fazendo assim com que a resposta

momentacircnea seja eficiente O problema comeccedila quando haacute a persistecircncia destas

situaccedilotildees e ou dessas respostas causando prejuiacutezo aos sistemas deprimidos

A influecircncia dos estiacutemulos sonoros tem demonstrado importacircncia cliacutenica na

espeacutecie canina jaacute que leva diversos indiviacuteduos a sofrerem alteraccedilotildees comportamentais e

2

neuroendoacutecrinas que podem evoluir para graves distuacuterbios comportamentais e

fisioloacutegicos como a fobia Em alguns casos de estresse crocircnico severo podem ocorrer

danos neurais doenccedilas gastrointestinais aleacutem da diminuiccedilatildeo da resposta imune

A fobia eacute descrita como um medo acentuado irracional persistente e excessivo

claramente discerniacutevel de objetos seres lugares ou situaccedilotildees de forma desproporcional

e exagerada acompanhada de comportamento de fuga esquiva antecipaccedilatildeo e intenso

sofrimento que geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase

fisioloacutegica mas que leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas

ao medo coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o

eixo Hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HPA) na liberaccedilatildeo de glicocorticoides e o sistema

nervoso simpaacutetico

Na fobia os limiares de ativaccedilatildeo dos circuitos neurais de medo estatildeo reduzidos

podendo ser observado no indiviacuteduo clara hiperexcitabilidade hipervigilacircncia e

aumento da responsividade comportamental aos estiacutemulos Idealmente os graus de

ativaccedilotildees seriam proporcionais agrave ameaccedila e uma adaptaccedilatildeo agrave situaccedilatildeo normalizaria a

resposta de estresse diminuindo-a conforme a ameaccedila desaparecesse o que natildeo ocorre

na fobia

Os criteacuterios para o diagnoacutestico de fobia em humanos costumam usar termos

que se referem a sintomas emocionais envolvendo sentimentos e estados de consciecircncia

subjetivos o que difiacuteculta a abordagem cientifica e cliacutenica nos animais Poreacutem as

alteraccedilotildees dos paracircmetros comportamentais e fisioloacutegicos dos sistemas

neuroendoacutecrinos envolvidos nesses distuacuterbios satildeo um caminho de estudo e pesquisa

Dessa forma os niacuteveis de estresse podem ser avaliados atraveacutes da mensuraccedilatildeo

de paracircmetros fisioloacutegicos e comportamentais Em vaacuterias espeacutecies o paracircmetro mais

utilizado eacute a dosagem de cortisol Aleacutem desse a anaacutelise da variabilidade do intervalo

cardiacuteaco (VIC) vem se mostrando um paracircmetro importante e natildeo invasivo para avaliar

o balanccedilo simpato-vagal em indiviacuteduos submetidos a estiacutemulos potencialmente

desafiadores As alteraccedilotildees comportamentais analisadas em conjunto com as anaacutelises

citadas a cima formam uma importante fonte de dados ainda natildeo correlacionadas nos

estudos mais recentes

Contudo o presente estudo teve como objetivo avaliar as respostas autonocircmicas

e comportamentais induzidas pelo estresse sonoro agudo em catildees de companhia com

3

histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O modelo de estresse utilizado

consiste em um meacutetodo natildeo invasivo e seguro uma vez que cada animal foi submetido

a um estiacutemulo sonoro (sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio) de curta duraccedilatildeo (25 min) a

uma intensidade sonora maacutexima de 1039 dB natildeo sendo capaz de causar efeitos

deleteacuterios para a audiccedilatildeo dos animais

Para tal foram utilizados 28 catildees de diversas raccedilas dos quais 16 eram

historicamente foacutebicos a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e 12 natildeo apresentavam

qualquer sinal de medo a esses sons Os animais foram dividos ainda entre submetidos

ao som de trovatildeo e submetidos ao som de fogos de artifiacutecio

Foram avaliados o balanccedilo simpato-vagal atraveacutes da mensuraccedilatildeo da VIC e 14

paracircmetros comportamentais aleacutem da coleta de amostras sanguiacuteneas em 6 momentos

para posterior anaacutelise dos niacuteveis seacutericos de cortisol

11 Justificativa

Animais e humanos satildeo constantemente submetidos a situaccedilotildees de estresse no

seu cotidiano Em catildees vaacuterios estiacutemulos podem ser considerados geradores de estresse

e sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio tecircm se mostrado estiacutemulos estressores importantes

devido agrave frequente ocorrecircncia de fobia a esses sons nesta espeacutecie

O tema escolhido eacute de grande importacircncia na atualidade uma vez que satildeo

necessaacuterias mais pesquisas sobre o efeito do estresse em humanos e animais Neste

sentido a avaliaccedilatildeo dos paracircmetros fisioloacutegicos em situaccedilotildees de estresse eacute uma forma

de estudar e compreender melhor os distuacuterbios relacionados ao estresse e traccedilar novos

caminhos terapecircuticos

Eacute relevante para a Medicina Veterinaacuteria e para a aacuterea de sauacutede como um todo

pois modelos de estresse sonoro agudo podem ser uacuteteis na verificaccedilatildeo da reatividade ao

estresse aleacutem de serem pouco invasivos e de relativa faacutecil execuccedilatildeo

4

12 Objetivos

121 Geral

Verificar as respostas fisioloacutegicas ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

122 Especiacuteficos

Avaliar o perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios as caracteriacutesticas gerais e

comportamentais e o manejo dos animais em catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

Avaliar a resposta autonocircmica a partir da anaacutelise espectral da variabilidade do

intervalo cardiacuteaco de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos

de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar a resposta comportamental de catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre o comportamento dos animais relatado pelos

proprietaacuterios durante a ocorrecircncia natural de trovotildees ou fogos e os comportamentos

exibidos pelos catildees em resposta ao modelo de estresse sonoro em laboratoacuterio

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre paracircmetros autonocircmicos e comportamentais em

catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

5

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

21 Estresse

O fisiologista Claude Bernard em 1872 definiu o conceito de meio interno pela

primeira vez como um princiacutepio do equiliacutebrio dinacircmico do meio interno essencial para

a sobrevivecircncia (FRANCI 2005)

Apesar disso foi Walter Canon em 1929 o responsaacutevel por definir esse

conceito da condiccedilatildeo de equiliacutebrio do meio interno criado por Claude Bernard com o

termo homeostase Aleacutem de ter reconhecidoos agentes desafiadores da homeostase

como fiacutesicos e emocionais e elaborado o conceito de ldquoreaccedilatildeo de emergecircnciardquo que

ocorre quando haacute um desafio capaz de ativar a liberaccedilatildeo de noradrenalina de terminais

nervosos simpaacuteticos e adrenalina da medula da adrenal (FRANCI 2005)

E mais recentemente entre 1946 e 1976 o fisiologista canadense Hans Selye

definiu ldquoa situaccedilatildeo gerada pelo desafio ao qual um organismo estaria submetidordquo com o

termo estresse E ao ocorrerem controveacutersias conceituais uma vez que natildeo se podia

distinguir a causa do efeito ele criou o termo estressor para designar o agente causador

(estiacutemulo) e manteve o termo estresse para designar a condiccedilatildeo gerada pelo estiacutemulo

desafiador (FRANCI 2005)

A resposta a um estiacutemulo estressor eacute fundamental para a homeostase de um ser

vivo e sua sobrevivecircncia Nas condiccedilotildees de estresse o organismo reage por meio da

ativaccedilatildeo e desativaccedilatildeo do mecanismo de controle de vaacuterias funccedilotildees para recuperar e

manter a homeostase No entanto essas respostas podem ser insuficientes para

restabelecer ou manter a homeostase ou podem ser exageradas representando risco de

doenccedilas Portanto o estresse pode ser definido como a soma de respostas fiacutesicas e

mentais causadas por determinados estiacutemulos externos e que permitem ao indiviacuteduo

superar determinadas exigecircncias do meio-ambiente (FRANCI 2005)

A reaccedilatildeo de estresse maximiza o gasto de energia que ajuda a preparar o corpo

para atender a uma situaccedilatildeo ameaccediladora ou desafiadora em que o indiviacuteduo tende a

mobilizar um grande esforccedilo a fim de lidar com o evento No entanto enquanto uma

certa quantidade de estresse eacute necessaacuteria para a sobrevivecircncia o estresse prolongado

pode afetar adversamente a sauacutede (BERNARD amp KRUPAT 1994)

6

Em situaccedilotildees de estresse ocorre a ativaccedilatildeo de duas principais vias o eixo

hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) atraveacutes do aumento da produccedilatildeo de cortisol e o

sistema nervoso simpaacutetico atraveacutes da liberaccedilatildeo de catecolaminas (Noradrenalina

Adrenalina)

A desregulaccedilatildeo de qualquer um desses sistemas de estresse pode levar a

distuacuterbios fisioloacutegicos de vaacuterios outros sistemas incluindo os sistemas imunoloacutegico

cardiovascular funccedilatildeo metaboacutelica e comportamento levando a maacute adaptaccedilatildeo da

resposta ao estresse (MARQUES et al 2010)

22 Fisiologia do estresse

Os estiacutemulos estressores podem ser definidos como aqueles que desafiam a

homeostase Esses estiacutemulos geram respostas que variam de acordo com a duraccedilatildeo e

intensidade e ainda com a predisposiccedilatildeo geneacutetica e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo

Os estiacutemulos causadores de estresse podem ser classificados em quatro grupos

estressores fiacutesicos e quiacutemicos (calor frio barulho radiaccedilatildeo intensa e substacircncias

toacutexicas) psicoloacutegicos (medo e frustraccedilatildeo) sociais (um ambiente hostil e rompimento de

relaccedilotildees) e os que alteram a homeostase vegetativa como em casos de exerciacutecio intenso

e hemorragias Quanto agrave duraccedilatildeo os estiacutemulos causadores de estresse podem ser ainda

classificados como agudos ou crocircnicos (PACAacuteK amp PALKOVITS 2001)

Moberg (2000) propotildee um modelo para compreensatildeo do estresse em toda

espeacutecie animal que sugere uma resposta bioloacutegica ao estresse a partir de trecircs estaacutegios

gerais

1ordm O reconhecimento de um estiacutemulo estressante

2deg A defesa bioloacutegica contra o estiacutemulo estressante

3deg As consequecircncias da resposta de estresse

Esta resposta ao estressor iraacute abranger aspectos cognitivos comportamentais e

fisioloacutegicos (MARGIS et al 2003)

Em uma situaccedilatildeo de estresse satildeo ativados o sistema simpato-adrenomedular

gerando o aumento da secreccedilatildeo de catecolaminas e logo excitaccedilatildeo raacutepida do sistema

cardiovascular ocasionando um aumento da frequecircncia cardiacuteaca e da pressatildeo arterial E

7

o outro eixo ativado eacute o hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) levando ao aumento na

produccedilatildeo de cortisol e naturalmente mobilizaccedilatildeo de energia (ULRICH-LAI amp

HERMAN 2009) (Figura 1)

As respostas de emergecircncia ativadas pelo SAM ocorrem quando o organismo se

prepara para a defesa ou ataque excretando adrenalina Entatildeoo suprimento de sangue eacute

desviado para os muacutesculos havendo elevaccedilatildeo do deacutebito cardiacuteaco total e da

redistribuiccedilatildeo sanguiacutenea aumentando a oferta de nutrientes e oxigecircnio para as estruturas

vitais A pressatildeo arterial se eleva e os bronquiolos se dilatam tornando a respiraccedilatildeo

mais raacutepida e profunda para retirada do dioacutexido de carbono excedente As funccedilotildees

digestivas e secretoacuterias diminuem aleacutem da reaccedilatildeo de aliacutevio com a liberaccedilatildeo de qualquer

excesso da bexiga e intestino A taxa metaboacutelica aumenta e a liberaccedilatildeo de endorfinas

diminue a sensibilidade agrave dor e os sentidos satildeo mantidos em estado de alerta

(ROGERSON 1997)

8

Figura 1 Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA A ativaccedilatildeo do sistema simpato-adrenomedular

(SAM) e do eixo do hipotaacutelamo hipoacutefise adrenal (HHA) como sistemas primaacuterios para a

manutenccedilatildeo e restabelecimento da homeostase A exposiccedilatildeo ao estressor resulta em ativaccedilatildeo de

neurocircnios preacute-ganglionares simpaacuteticos na coluna intermediolateral da medula espinhal

toracolombar (T1 a L2) Estes neurocircnios preacute-ganglionares se projetam para gacircnglios preacute e para

vertebrais que entatildeo terminam em oacutergatildeos alvo e nas ceacutelulas cromafins da medula da adrenal

Esta ativaccedilatildeo simpaacutetica (em ciacuterculos) representa a resposta claacutessica de luta e fuga que foi

primariamente caracterizada por Walter Cannon e colaboradores no iniacutecio do seacuteculo passado e

leva a um aumento dos niacuteveis de adrenalina (proveniente da adrenal) e de noradrenalina dos

terminais simpaacuteticos aumento da frequecircncia e da forccedila de contraccedilatildeo do coraccedilatildeo vasoconstriccedilatildeo

perifeacuterica e mobilizaccedilatildeo de energia O tocircnus parassimpaacutetico tambeacutem eacute mobilizado durante o

estresse No sistema parassimpaacutetico (em estrelas) representa a ativaccedilatildeo de nuacutecleos preacute-

ganglionares cracircnios-sacrais ativam nuacutecleos poacutes-ganglionares localizados proacuteximos aos oacutergatildeos

inervados com efeito geralmente oposto ao sistema simpaacutetico Para o eixo HHA a exposiccedilatildeo ao

estressor ativa neurocircnios hipofisiotroacuteficos no nuacutecleo paraventricular do hipotaacutelamo (PVN) que

secretam hormocircnios de liberaccedilatildeo como hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH) e

vasopressina (AVP) na circulaccedilatildeo porta da eminecircncia meacutedia Estes hormocircnios liberadores atuam

na hipoacutefise anterior para promover a secreccedilatildeo de hormocircnio adrenocorticotroacutefico (ACTH) que

atua no coacutertex da adrenal (zona fasciculata) para iniciar a siacutentese e liberaccedilatildeo dos hormocircnios

glicocorticoacuteides Os glicocorticoacuteides circulantes promovem a mobilizaccedilatildeo de energia estocada e

potencializam numerosos efeitos simpaacuteticos como a vasoconstriccedilatildeo perifeacuterica Aleacutem disso o

coacutertex da adrenal eacute diretamente inervado pelo sistema simpaacutetico que regula a liberaccedilatildeo de

glicocorticoacuteides Entatildeo a ativaccedilatildeo do sistema simpaacutetico e do eixo HHA tem accedilotildees

complementares no organismo incluindo a mobilizaccedilatildeo de energia e a manutenccedilatildeo da pressatildeo

arterial durante o estresse (Adaptado de ULRICH-LAI amp HERMAN 2009)

CRH

AVP

9

As respostas ao estresse que envolvem emoccedilatildeo passaratildeo por avaliaccedilatildeo afetiva

onde a informaccedilatildeo seraacute processada e interpretada para se estimar o potencial de ameaccedila

Esta avaliaccedilatildeo afetiva iraacute determinar o padratildeo de respostas e o tipo de defesa de acordo

com a histoacuteria pessoal aprendizado e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo que entatildeo faraacute

a avaliaccedilatildeo da capacidade para lidar com a situaccedilatildeo e organizaccedilatildeo da resposta

(MARGIS et al 2003)

A intensidade da resposta eacute que determina se o animal estaacute sofrendo de estresse

ou eacute meramente experimentado um episoacutedio breve em sua vida sem nenhum impacto

significativo ao seu bem-estar

Circuitos neurais espinais e supra espinais estatildeo envolvidos nas respostas de

estresse Os supra espinais processam as informaccedilotildees vindas das vias somatossensoriais

e viscerossensoriais e elaboram as respostas atraveacutes do taacutelamo hipotaacutelamo aacuterea preacute-

optica estruturas liacutembicas e sistemas amineacutergicos e natildeo amineacutergicos do tronco cerebral

Os neurocircnios do PVN secretores de hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH)

e vasopressina com os neurocircnios catecolamineacutergicos do locus coeruleus (LC) (o nuacutecleo

com maior densidade de neurocircnios noradreneacutergicos com papel fundamental no

desencadeamento da resposta ao estresse e reaccedilotildees de fuga) inervam o hipocampo a

amiacutegdala e o neocortex aleacutem de nuacutecleos do rafe (5-HT) e grupamentos celulares da

medula e ponte compondo assim um dos principais reguladores centrais de resposta ao

estresse na ativaccedilatildeo do eixo HHA e SNS (FRANCI 2005)

O eixo HHA eacute ativado por diferentes categorias de estresse como traumaacutetico

inflamatoacuterio e psicoloacutegico E o estresse psicoloacutegico tem regulaccedilatildeo por estruturas

liacutembicas que exercem atividade modulatoacuteria sobre o eixo (ULRICH-LAI amp HERMAN

2009)

O PVN monitora sinais relacionados com o estado emocional atraveacutes de sinais

metaboacutelicos como a composiccedilatildeo plasmaacutetica O CRH o principal neurotransmissor

coordenador das alteraccedilotildees psicoloacutegicas e comportamentais relacionadas ao estresse eacute

sintetizado no PVN e liberado nos capilares da eminecircncia meacutedia juntamente com a

vasopressina (AVP) e alcanccedilam diretamente a hipoacutefise anterior via circulaccedilatildeo portal

hipotalacircmica-hipofisaacuteria que por sua vez estimula na hipoacutefise a liberaccedilatildeo do hormocircnio

adrenocorticotroacutefico (ACTH) (MORMEgraveDE et al 2006)

10

O ACTH eacute sintetizado por ceacutelulas especializadas da hipoacutefise anterior vai para a

corrente sanguiacutenea e estimula o coacutertex da glacircndula adrenal (na zona fasciculada) que

sintetiza o glicocorticoide atraveacutes de esteroides derivados do colesterol O cortisol eacute o

glicocorticoacuteide ativo do eixo para catildees gatos e humanos e a corticosterona para

paacutessaros e roedores (MORMEgraveDE et al 2006)

Esse hormocircnio final do eixo HHA interage com as ceacutelulas atraveacutes da ligaccedilatildeo a

dois receptores o receptor glicocorticoide (GR) e o receptor de mineralocorticoide

(MR) O receptor GR eacute encontrado na maioria dos tecidos do corpo incluindo a maioria

das aacutereas do enceacutefalo No rim e em outros tecidos a aldosterona liga-se ao MR durante a

regulaccedilatildeo da reabsorccedilatildeo de soacutedio mas o MR tambeacutem estaacute presente no hipocampo onde

ocorre a ligaccedilatildeo do cortisol Estes complexos esteroacuteide-receptores entatildeo interagem

com o DNA para iniciar ou para reprimir a transcriccedilatildeo de genes especiacuteficos a fim de

regular a siacutentese de proteiacutenas que provoca alteraccedilotildees fisioloacutegicas em resposta ao

estresse

O cortisol tem 10 vezes mais afinidade ao MR que ao GR Em niacuteveis baixos ou

em situaccedilotildees de ausecircncia de estresse a maior parte do cortisol liga-se aos MRs no

ceacuterebro (principalmente no hipocampo) e modula a atividade basal do eixo HHA e o

aparecimento de resposta ao estresse Com a elevaccedilatildeo dos niacuteveis de cortisol ocorre um

aumento de ligaccedilotildees nos receptores GR reduzindo a atividade do eixo HHA

(mecanismo de ldquofeed-backrdquo negativo) No entanto a ativaccedilatildeo crocircnica deste receptor

estaacute ligada a vaacuterios distuacuterbios cognitivos relativos ao estresse (DE KLOET et al 1999)

Proteger o organismo de possiacuteveis danos eacute um dos papeis principais das

respostas hormonais a situaccedilotildees de estresse E seus principais hormocircnios satildeo a

adrenalina de secreccedilatildeo raacutepida pelo envolvimento na reaccedilatildeo de luta ou fuga e o

corticosteroacuteides na restauraccedilatildeo e na reparaccedilatildeo dos sistemas agindo na segunda linha de

defesa regulando as respostas inflamatoacuteria e imune (MC EWEN 2000)

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca

11

O Nodo Sinoatrial (NS) apresenta a frequecircncia de disparo mais intensa no

coraccedilatildeo estimulando outros locais como os nodos atrioventriculares que principiam

seus proacuteprios impulsos eleacutetricos E com a ausecircncia de influecircncias hormonais ou neurais

a frequecircncia cardiacuteaca (FC) permanece equivalente agrave frequecircncia de disparos do NS ou

seja constante (STAUSS 2007)

Os sistemas nervoso simpaacutetico (SNS) e parassimpaacutetico (SNP) estatildeo

constantemente ativados regulando a atividade cardiacuteaca com a predominacircncia de um ou

outro conforme a situaccedilatildeo Em repouso a predominacircncia eacute vagal o que em humanos

leva a respostas raacutepidas de no maacuteximo 5 segundo na FC diminuindo-a em poucos

batimentos Jaacute as respostas da ativaccedilatildeo simpaacutetica ocorrem apoacutes cinco segundos

aumentando progressivamente chegando a sua resposta maacutexima de aumento da FC

apoacutes 20 a 30 segundos (HAINSWORTH 1995)

No entanto os sistemas simpaacutetico e parassimpaacutetico atuam de forma simultacircnea

na regulaccedilatildeo da atividade cardiacuteaca onde o aumento da atividade vagal natildeo resulta tatildeo

logo na reduccedilatildeo da atividade simpaacutetica e vice-versa (VON BORELL et al 2007)

Quando o SNS eacute ativado as fibras nervosas promovem a descarga de

noradrenalina (NA) nos aacutetrios e ventriacuteculos que por sua vez juntamente com a

adrenalina liberada pela adrenal estimula os receptores β1 adreneacutergicos presentes no

coraccedilatildeo ativando atraveacutes de uma proteiacutena G excitatoacuteria (Gs) a enzima adenilato ciclase

(AC) agrave produzir AMPc Seu aumento intracelular leva agrave ativaccedilatildeo da proteiacutena quinase

dependente de AMPc aumentando as correntes de canais iocircnicos de Ca+2

e Na+

acelerando a velocidade de despolarizaccedilatildeo levando ao aumento da frequecircncia de

disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas do NA desencadeando o aumento da

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Do mesmo modo o miocaacuterdio atrial o nodo aacutetrio-ventricular e o NS satildeo

inervados pelas fibra nervosa parassimpaacutetica dos nervos vagos liberando acetilcolina

(ACh) ativando receptores M2 que estatildeo acoplados a uma proteiacutena G inibitoacuteria (Gi)

inibindo a siacutentese de AMPc intracelular reduzindo a atividade da PKA Aleacutem de a ACh

ativar uma corrente de efluxo de K+ gerando uma hiperpolarizaccedilatildeo da membrana

levando ao aumento do limiar de ativaccedilatildeo do potencial de accedilatildeo sinusal o que reduz a

12

frequecircncia de disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas sinusais diminuindo por fim a

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Existem diferenccedilas no tempo de resposta da ativaccedilatildeo dos ramos simpaacutetico e

parassimpaacutetico que ocorrem em certo modo pela liberaccedilatildeo lenta de noradrenalina nos

terminais nervosos simpaacuteticos e pelas fibras preacute-ganglionares vagais serem

mielinizadas contribuindo para uma transmissatildeo eleacutetrica mais raacutepida Aleacutem das

diferenccedilas anatocircmicas entre os ramos como eacute o caso dos corpos celulares preacute-

ganglionares do parassimpaacutetico localizados dentro do coraccedilatildeo enquanto que os corpos

celulares preacute-ganglionares simpaacuteticos se localizam no gacircnglio paravertebral (VON

BORELL et al 2007)

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC)

A manutenccedilatildeo da homeostase do sistema cardiovascular eacute resultado da oscilaccedilatildeo

riacutetmica de componentes regulatoacuterios da atividade cardiacuteaca onde se observa intervalos

irregulares de tempo entre os batimentos consecutivos (VON BORELL et al 2007)

A anaacutelise da variabilidade do intervalo cardiacuteaco pode ser realizada atraveacutes dos

iacutendices no domiacutenio do tempo e da frequecircncia

No domiacutenio do tempo cada intervalo entre um batimento cardiacuteaco e outro pode

ser medido em milissegundos e no domiacutenio da frequecircncia as flutuaccedilotildees riacutetmicas podem

caracterizar os estados de repouso e atividade influindo na seacuterie cronoloacutegica contida

entre os intervalos tornando possiacutevel a mensurar a atividade do SNA (HOSHI 2009

SONG et al 2006)

Os dados satildeo obtidos atraveacutes da gravaccedilatildeo dos intervalos entre batimentos

cardiacuteacos feitos por frequenciacutemetros capazes de detectar em milissegundos (ms) o

tempo entre os batimentos e armazenaacute-los (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al

2007)

A teacutecnica utilizada com esse objetivo eacute chamada de anaacutelise espectral e consiste

no uso de algoritmos matemaacuteticos como eacute o caso da transformada raacutepida de fourier

(FFT) para obter diagramas dimensionais Dispondo em um graacutefico os componentes

oscilatoacuterios de frequecircncia da VIC no eixo X e a amplitude dos componentes oscilatoacuterios

no eixo Y permitindo atraveacutes dessa teacutecnica determinar a forccedila espectral das

frequecircncias baixas e altas da VIC

13

Nesse contexto os dois Sendo assim os dois componentes de frequecircncia principais satildeo

divididos atraveacutes da anaacutelise espectral em Frequecircncia baixa (LF) caracterizado pelo

espectro de 004 a 015Hz e Frequecircncia alta (HF) situada na faixa de 015 a 04 Hz na

anaacutelise espectral (KAWASE et al 2002 VON BORELL et al 2007 PICCIRILLO et

al 2009)

Quando os IRR satildeo dispostos em uma escala de tempo um graacutefico eacute

confeccionado e as oscilaccedilotildees formadas representam a accedilatildeo dos diferentes componentes

regulam os pulsos cardiacuteacos onde as frequecircncias mais altas representam a atividade

riacutetmica resultante da ativaccedilatildeo parassimpaacutetica e as mais baixas exibem aquelas

resultantes da atividade simpaacutetica (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al 2007)

(Figura 2)

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC Variabilidade do intervalo cardiacuteaco em um indiviacuteduo

jovem durante o repouso e quando em movimento A seacuterie temporal de intervalos RR estaacute

Repouso Movimento

14

disposta nos graacuteficos do topo Os graacuteficos centrais ilustram a presenccedila de dois componentes

principais da densidade espectral LF e HF Durante o movimento o componente LF se torna

predominante em relaccedilatildeo ao repouso Os graacuteficos na base da figura demonstram a distribuiccedilatildeo

relativa dos dois componentes (representada pela aacuterea) (MALLIANI 1997)

A razatildeo entre os dois componentes de frequecircncia eacute calculada a partir dos valores

obtidos de LF e HF resultando em valor que representa o balanccedilo entre a atividade

simpaacutetica e parassimpaacutetica aleacutem de possibilitar a decomposiccedilatildeo dos componentes

espectrais atraveacutes do caacutelculo das frequecircncias centrais desses componentes que se

situam impliacutecitos no sinal da variabilidade (PAGANI et al 1986 LOMBARDI et

al1996 LOMBARDI 1997 MALLIANI et al 1997 VON BORELL et al 2007

HARADA et al 2005)

A anaacutelise espectral da VIC natildeo acessa o tocircnus autonocircmico cardiacuteaco mas sim o

seu balanccedilo o que justifica a ocorrecircncia de alteraccedilotildees na capacidade do coraccedilatildeo de

responder a esses estiacutemulos quando haacute alteraccedilotildees crocircnicas na atividade autonocircmica

Nesses casos natildeo seria aplicaacutevel a anaacutelise espectral da VIC (STAUSS 2007

PICCIRILLO et al 2009)

Deste modo a anaacutelise espectral da VIC tem como principal utilidade a funccedilatildeo de

indicadora da atividade autonocircmica em resposta ao estresse psicoloacutegico e fiacutesico (VON

BORELL et al 2007) E quando eacute aplicada no estudo das alteraccedilotildees agudas da

atividade autonocircmica cardiacuteaca essa anaacutelise eacute utilizada de maneira a obter dados

fidedignos onde diante de uma resposta ao estresse psicoloacutegico pode ser observado um

aumento agudo na atividade cardiacuteaca simpaacutetica caracterizado pelo aumento do

componente LF com provavelmente baixa ou nenhuma alteraccedilatildeo do componente HF

(STAUSS 2007)

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees

O oacutergatildeo auditivo dentre outras funccedilotildees se caracteriza especialmente por seu

desempenho no reconhecimento de situaccedilotildees ameaccediladoras estando em funcionamento

ininterrupto atraveacutes da conexatildeo direta do ouvido interno com os mecanismos neurais de

ldquoluta ou fugardquo Esse sistema eacute capaz de diferenciar sons de frequecircncias e intensidades

relevantes para a sobrevivecircncia do indiviacuteduo em seu meio ambiente (WESTMAN amp

WALTERS 1981)

15

A percepccedilatildeo do som colabora no balanccedilo homeostaacutetico do sistema nervoso

central influenciando consequentemente o equiliacutebrio fisioloacutegico de forma geral atraveacutes

dos centros autonocircmicos e neuroendoacutecrinos do hipotaacutelamo variando em resposta

conforme o significado do estiacutemulo sonoro e sua intensidade previsibilidade

variabilidade e complexidade

Nesse contexto as respostas fundamentais ao som satildeo de orientaccedilatildeo reflexo de

surpresa e de defesa Sendo a resposta de orientaccedilatildeo fundamental por ser a reaccedilatildeo

comportamental de busca pela fonte sonora permitindo que o indiviacuteduo se prepare para

a resposta necessaacuteria e caso o reconhecimento do som mostre ser esse de baixa

significacircncia a habituaccedilatildeo iraacute ocorrer diminuindo o grau da reaccedilatildeo

Jaacute o reflexo de surpresa iraacute ocorrer em resposta a sons repentinos de alta

intensidade e caraacuteter assustador podendo ser atenuado quando o indiviacuteduo sabe que ele

iraacute ocorrer e podendo ser exacerbado em situaccedilotildees de tensatildeo medo e de abalo

emocional

E a resposta de defesa acontece em resposta a sons de significado intensidade e

duraccedilatildeo relacionados agrave ameaccedila onde haacute excitaccedilatildeo emocional e preparaccedilatildeo dos sistemas

para a accedilatildeo consistindo na resposta de estresse (WESTMAN amp WALTERS 1981)

Alguns sons adquirem significado particular para o indiviacuteduo representando

perigo em potencial assim como os sons de caracteriacutesticas ameaccediladoras Mas

geralmente o significado conotativo de um som potencialmente ameaccedilador estaacute no fato

de ser desconhecido e apresentar mudanccedilas raacutepidas de intensidade aleacutem das associaccedilotildees

extra-auditivas relacionadas a ele Aleacutem disso a previsibilidade desse estiacutemulo sonoro

tambeacutem poderaacute constituir um fator determinante na resposta jaacute que sons imprevisiacuteveis

caracterizam-se como um estiacutemulo estressor maior desencadeando uma reduccedilatildeo geral

de performance e uma baixa toleracircncia a frustraccedilotildees (WESTMAN amp WALTERS

1981)

Os catildees particularmente apresentam muita sensibilidade a estiacutemulos sonoros

visto que seu sistema auditivo eacute extremamente desenvolvido especialmente com a

funccedilatildeo de caccedila e guarda Poreacutem a resposta de defesa exagerada dos indiviacuteduos dessa

espeacutecie tem sido relatada principalmente aos sons de fogos de artifiacutecio trovatildeo e tiro de

16

armas de fogo Provavelmente o caraacuteter imprevisiacutevel a conotaccedilatildeo negativa que a

espeacutecie apresenta a esses sons e a intensidade proacutexima ao limiar de audiccedilatildeo possa

justificar tal reaccedilatildeo (HYDBRING et al 2004)

E eacute com base nessa reaccedilatildeo desmedida que os estiacutemulos sonoros como os sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio vecircm sendo utilizados como modelos de estresse em catildees

(HYDBRING et al 2004 ENGELAND et al 1990) Representando uma opccedilatildeo para o

estudo da reatividade ao estresse que pode ser comparada ao modelo de estresse

acuacutestico de sobressalto em ratos

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees

Ao iniciar um estudo a respeito de uma espeacutecie deve-se ter em mente que cada

sujeito analisado natildeo eacute um sistema inerte e fechado mas sim um somatoacuterio de eventos

que possibilitam ter um exame mais amplo e completo das interaccedilotildees do animal com o

ambiente (SULTAN 2003 BATESON et al 2004)

Assim o estudo comportamental se mostra uma importante ferramenta pois

permite entender que processos bioloacutegicos satildeo compostos por eventos fisioloacutegicos e

psicoloacutegicos natildeo havendo exclusatildeo entre eles mas sim uma sobreposiccedilatildeo com fortes

correlaccedilotildees (HARVERBEKE et al 2008 BEERDA 1999 SPANGENBERG 2006

MONTANHA et al 2009) Conhecer a etologia canina iraacute permitir uma melhor

utilizaccedilatildeo do animal respeitando seus limites e possibilitando a manutenccedilatildeo fiacutesica e

mental dentro dos padrotildees de bem-estar da espeacutecie (SNOWDON 1999 DAWNKINS

1989 DARWIN 2004)

Com relaccedilatildeo ao bem-estar Broom amp Johnson (1993) e Broom amp Fraser (2010)

definem como o estado de um animal em relaccedilatildeo agraves suas tentativas de se adaptar ao

meio em que vive Para os animais domeacutesticos principalmente para os animais de

companhia esse eacute um conceito que muitas vezes pode ser confundido e mal aplicado

pelo homem agrave medida que esse confronta a realidade do animal com a sua proacutepria

passando a adequar paracircmetros humanos a esses animais

Os catildees satildeo marcados pela socializaccedilatildeo baseada em relaccedilotildees familiares com

organizaccedilotildees flexiacuteveis e respostas a um liacuteder aleacutem de possuiacuterem necessidade de

17

ambientes complexos e variados marcadamente importantes na vida gregaacuteria de seus

ancestrais (BROOM amp FRASER 2010)

Pensando nisso um manejo inadequado pode ter consequecircncias que variam

desde alteraccedilotildees comportamentais a quadros patoloacutegicos tendo como agravantes

alteraccedilotildees substanciais nos seus niacuteveis de bem-estar

Poreacutem o estudo do comportamento animal ainda se mostra bastante pioneiro jaacute

que as pesquisas cientiacuteficas a niacutevel cliacutenico comeccedilaram a ser realizados haacute poucas

deacutecadas em animais com problemas comportamentais

Dessa forma se faz presente a necessidade de um maior desenvolvimento de

estudos e pesquisas nesse sentido visto que os problemas comportamentais satildeo

apontados como a principal causa de abandono ou morte de animais de companhia

apresentando maior nuacutemero de relatos do que as doenccedilas infecciosas neoplaacutesicas e

metaboacutelicas concomitantes (OVERALL et al 2001)

A relaccedilatildeo homem-animal eacute muito antiga mas eacute pouco estudada E isso faz com

que o diagnoacutestico e o tratamento dos distuacuterbios comportamentais sejam dificultados

Muitas vezes a origem dos problemas comportamentais estaacute ligada ao tipo de

relacionamento existente entre o homem e o seu animal E isso acontece porque os

animais passam por processos de humanizaccedilatildeo para se adaptarem ao modo e ao estilo de

vida do seu proprietaacuterio nem que para isso tenham que modificar as suas caracteriacutesticas

naturais (OVERALL et al 2001)

Embora os catildees apresentem uma flexibilidade comportamental as exigecircncias

criadas pelos seus proprietaacuterios podem desencadear conflitos e frustraccedilotildees que levam ao

aparecimento de problemas comportamentais (OVERALL et al 2001)

Com frequecircncia o stress ou a ansiedade estatildeo relacionados com o ambiente e

mostram que o limiar entre normal e anormal varia entre indiviacuteduos (BEAVER 2005)

O rompimento da homeostase pode resultar de estimulaccedilatildeo interna externa ou

ambos E o potencial de ruptura da homeostase aumenta com a magnitude do desafio

(APPLEBY amp PLUIJMAKERS 2004) Dessa forma sendo a fobia um transtorno de

reaccedilotildees exageradas e desproporcionais ao real grau de importacircncia do estimulo

18

estressor podemos sugerir que o indiviacuteduo foacutebico eacute mais susceptiacutevel ao estresse de

forma geral reagindo com paracircmetros mais facilmente alterados

26 Fobia em catildees

Medo e ansiedade satildeo funccedilotildees adaptativas de sobrevivecircncia que sinalizam para o

organismo a presenccedila de perigo em potencial no ambiente O medo eacute a resposta

imediata acionada por um evento ou objeto potencialmente nocivo e ansiedade envolve

processos cognitivos mais complexos como antecipaccedilatildeo e preocupaccedilatildeo com

hipervigilacircncia diante de um perigo iminente no ambiente (FEINSTEIN et al 2011)

Entre as respostas comportamentais e fisioloacutegicas claacutessicas imediatas do medo

destacam-se o congelamento sobressalto aumento da frequecircncia cardiacuteaca alteraccedilotildees da

pressatildeo arterial e aumento da vigilacircncia Satildeo respostas comportamentais e perceptivas

que facilitam as respostas defensivas como a fuga e esquiva de forma apropriada afim

de reduzir o perigo ou lesatildeo (CHUDASAMA 2009)

O neurocircuito do medo envolve principalmente a amiacutegdala estrutura cerebral

responsaacutevel pela detecccedilatildeo geraccedilatildeo e manutenccedilatildeo das emoccedilotildees relacionadas ao medo e

ansiedade Eacute uma estrutura complexa pertencente ao sistema liacutembico que consiste em

aproximadamente 10 nuacutecleos que coordenam respostas apropriadas agrave ameaccedila e ao

perigo atraveacutes das respostas comportamentais cardiovasculares e endoacutecrinas ao

estresse (ROSEN amp SCHULKIN 1998)

A amiacutegdala faz ligaccedilotildees entre as aacutereas do coacutertex cerebral e recebe informaccedilotildees

de todos os sistemas sensoriais permite a integraccedilatildeo da informaccedilatildeo proveniente das

diversas aacutereas atraveacutes de conexotildees excitatoacuterias e inibitoacuterias

Os nuacutecleos basolaterais satildeo as principais portas de entrada da amiacutegdala

recebendo informaccedilotildees sensoriais e auditivas vindas do taacutelamo coacutertex sensorial e

associativo (Figura 3) Ele estaacute sob tocircnica inibiccedilatildeo GABAeacutergica e quando bloqueada

esta inibiccedilatildeo resulta em aumento do comportamento de ansiedade com ativaccedilatildeo

cardiovascular simpaticamente mediada (KESSLER et al 2005)

19

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional A informaccedilatildeo

sensoacuteria eacute transmitida para o taacutelamo atraveacutes da via leminiscal A aferecircncia auditiva chega na

divisatildeo ventral do nuacutecleo geniculado medial e projeta-se para o coacutertex auditivo primaacuterio

enquanto outras vias extra leminiscais carreiam informaccedilotildees auditivas para outras partes do

taacutelamo como a divisatildeo medial do nuacutecleo geniculado medial e nuacutecleos intralaminares

posteriores que se projetam tanto para o coacutertex auditivo primaacuterio quanto para o coacutertex auditivo

associativo assim como para os nuacutecleos basolaterias da amiacutegdala Essa via do taacutelamo para

amiacutegdala eacute implicada na aprendizagem emocional (IVERSEN et al 2003)

A amiacutegdala ventrolateral em seres humanos eacute mais sensiacutevel aos estiacutemulos

negativos (especialmente se os estiacutemulos sinalizam informaccedilatildeo negativa iminente) E a

amiacutegdala centromedial (CMA) dorsal tem projeccedilotildees principalmente subcorticais

especialmente aquelas ligadas ao hipotaacutelamo lateral e substacircncia cinzenta periaquedutal

(PAG) Essas projeccedilotildees podem explicar em parte as respostas fisioloacutegicas associadas

ao medo com o hipotaacutelamo (Figura 4) (KESSLER et al 2005)

Kandel 2003

20

Figura 4 Conexotildees diretas entre o nuacutecleo central da amiacutegdala e uma variedade de aacutereas

hipotalacircmicas e do tronco encefaacutelico envolvidas no medo e na ansiedade (IVERSEN et al

2003)

O Locus coeruleus importante nuacutecleo com grande densidade de neurocircnios

noradreneacutergicos com papel no desencadeamento da resposta ao estresse e das reaccedilotildees de

fuga tem tambeacutem papel importante no controle do medo A desregulaccedilatildeo desse nuacutecleo

parece ter relaccedilatildeo com o aparecimento do pacircnico e fobias em humanos (CHARNEY

1984) certamente atraveacutes de sua ligaccedilatildeo ao sistema liacutembico (CHARNEY 1984)

Medos podem desenvolver-se gradualmente e pode haver variaccedilatildeo na resposta

Em contraste fobias geralmente se desenvolvem rapidamente e uma vez desenvolvidas

haacute pouca mudanccedila em sua apresentaccedilatildeo entre as seacuteries Situaccedilotildees indutoras de fobia ou

satildeo evitadas a todo custo pelo foacutebico ou se inevitaacutevel satildeo suportadas com intensa

ansiedade e sofrimento (OVERALL 2010)

A Associaccedilatildeo Norte Americana de Psiquiatria no manual de diagnoacutestico e

estatiacutestica de transtornos mentais (DSM-IV-TR 2002) e a CID-10 (1993) definem em

humanos fobias especiacuteficas como medos irracionais excessivos acentuados e

persistentes revelados pela presenccedila ou antecipaccedilatildeo de um objeto situaccedilatildeo ou

atividade foacutebica especiacutefica de forma desproporcional acompanhados de

comportamentos de fuga esquiva antecipaccedilatildeo ansiosa e intenso sofrimento

Geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase fisioloacutegica

mas leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas ao medo

21

coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o eixo

HHA e o Sistema Nervoso Simpaacutetico

Em catildees natildeo haacute ateacute o momento descrito na literatura uma definiccedilatildeo oficial para

tal transtorno

As fobias satildeo transtornos de ansiedade de difiacutecil cura e geralmente a memoacuteria

de uma resposta foacutebica pode desencadear outros transtornos de ansiedade Dessa forma

o tratamento tem importacircncia natildeo soacute pela questatildeo do bem-estar e qualidade de vida

mas tambeacutem devido a seus componentes de comorbidade (OVERALL 2010)

Resposta exagerada a sons de trovatildeo estatildeo entre as doenccedilas comportamentais

mais comumente associados com pacircnico ou fobia em catildees Ocorre geralmente em

todas as raccedilas embora natildeo existam dados sobre a incidecircncia relativa destes problemas

(OVERALL et al 2001 DUNHAM amp FRANK 2001 VOITH amp BORCHELT 1985)

A fobia agrave sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio constitui uma classe que apresenta

resposta extrema repentina e profunda e que apesar de existir uma variaccedilatildeo consideraacutevel

nas respostas dos catildees (BEERDA SCHILDER VAN HOOFF VRIES 1997) no geral

se manifesta com comportamentos de ansiedade associados com atividades acentuadas

do sistema nervoso simpaacutetico Os comportamentos podem incluir catatonia ou mania

concomitante com diminuiccedilatildeo da sensibilidade ou capacidade de resposta agrave dor ou

estiacutemulos sociais aleacutem de fuga vocalizaccedilatildeo salivaccedilatildeo micccedilatildeo defecaccedilatildeo tremores

comportamentos autodestrutivos e ateacute convulsotildees (OVERALL 2010 SHULL-

SELCER amp STAGG 1991)

Jaacute se sabe que existe um fator hereditaacuterio para esse tipo de fobia e embora os

mecanismos pelos quais ela ocorre ainda natildeo sejam compreendidos parece estar em

alguma alteraccedilatildeo na forma como a informaccedilatildeo eacute processada entre a amiacutegdala e o coacutertex

(OVERALL 2010)

E como ansiedade medos e fobias satildeo queixas comportamentais comuns e

problemaacuteticas dos donos de catildees a falta de tratamento pode resultar no rompimento do

viacutenculo humano-animal e posterior abandono desistecircncia ou ateacute mesmo eutanaacutesia do

catildeo afetado (MILLS etal 2003)

22

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental

Os procedimentos experimentais foram realizados na Estaccedilatildeo experimental de

Parasitologia Veterinaacuteria do Departamento de Parasitologia Animal (DPA) da

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) e no Laboratoacuterio de Fisiologia

Animal do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas (DCF) da UFRRJ Todos os

procedimentos estatildeo de acordo com a lei de bem-estar animal Instruccedilatildeo Normativa ndeg

56 de 2008 O presente experimento encontra-se aprovado pelo Comitecirc de Eacutetica na

Pesquisa da UFRRJ CEUA-IB nordm 2308347962014-14

32 Animais

Foram entrevistados 35 proprietaacuterios de catildees entre os quais foram selecionados

28 com 2 a 6 anos de idade pesando de 10 a 30 Kg doacuteceis saudaacuteveis com vacinas e

vermifugaccedilatildeo em dia do muniacutecipio de Seropeacutedica-RJ

Proprietaacuterios de animais com medo de sons de trovatildeo e fogos de artificio

interessados em participar do estudo e proprietaacuterios de animais sem medo convidados a

participar do estudo incialmente responderam a um formulaacuterio de cadastro dos

animais contendo dados gerais e histoacuterico de respostas comportamentais em geral

(Anexo 1) Em seguida os animais foram submetidos a um exame cliacutenico baacutesico que

constitiu em inspeccedilatildeo palpaccedilatildeo auscultaccedilatildeo e termometria retal e um exame

neuroloacutegico para descartar doenccedilas concomitantes (Anexo 2) Foram dispensados

animais arredios agressivos com peso ou idade fora da faixa estabelecida no criteacuterio de

seleccedilatildeo e animais doentes Os animais selecionados foram caracterizados como foacutebicos

e natildeo-foacutebicos a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio e entatildeo submetidos uma uacutenica vez ao

modelo de estresse sonoro A caracterizaccedilatildeo de animais foacutebicos foi realizada conforme

as respostas dos proprietaacuterios ao questionaacuterio de reaccedilotildees comportamentais aos sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009 CROWELL-

DAVIS 2003) (Anexo 3)

23

Meios de divulgaccedilatildeo do estudo atraveacutes de folder e cartazes de divulgaccedilatildeo do projeto

veiculado pela internet e afixado em diversos estabelecimentos veterinaacuterios no

municiacutepio e pela UFRRJ (Anexo 4)

Avaliaccedilatildeo comportamental atraveacutes de entrevista com o proprietaacuterio (questionaacuterio

adaptado de OVERALL 1997) (Anexo 1)

321 Consideraccedilotildees eacuteticas

A participaccedilatildeo no estudo ocorreu somente com a autorizaccedilatildeo dos entrevistados

mediante um termo de consentimento em que se garantia plena liberdade para

interromper a participaccedilatildeo quando desejado (Anexo 5) Natildeo houve riscos agrave sauacutede fiacutesica

ou mental dos animais que participaram do projeto

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som

Os catildees foram selecionados para compor os grupos conforme as respostas ao

questionaacuterio comportamental previamente preenchido pelo proprietaacuterio

O questionaacuterio especiacutefico para medo de sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio

(Anexo 3) eacute composto de alguns paracircmetros comportamentais comuns em catildees foacutebicos

como atitude destrutiva eliminaccedilatildeo inadequada salivaccedilatildeo excessiva vocalizaccedilatildeo

esconder passadas arfar procurar pelo proprietaacuterio auto-trauma tremor Esses

parametros foram ainda classificados em escala de 0 (comportamento nunca observado)

a 5 (comportamento frequente e grave) (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009

CROWELL-DAVIS 2003)

Os catildees foram considerados aptos a participarem do grupo Foacutebicotrovatildeo e

Foacutebicosfogos quando

Apresentaram pelo menos trecircs dos comportamentos anteriores durante

o som de trovatildeo ou fogos de artifiacutecio com escore igual ou maior que 3

ou algum item com escore maacuteximo (5)

Ou as atitudes do animal no momento do som apresentaram risco a sauacutede

e integridade fiacutesica

E quando as respostas comportamentais foram apresentadas na maior

parte do tempo durante o estiacutemulo

24

33 Procedimentos Experimentais

O protocolo experimental foi realizado individualmente iniciando-se sempre agraves

9 horas da manhatilde Um pesquisador acompanhado de um pesquisador colaborador

realizou todo o protocolo experimental sem se ausentar em nenhuma etapa do

experimento

Dias antes do experimento os animais foram submetidos a um exame cliacutenico e

os proprietaacuterios responderam a questionaacuterios (Anexo 1 e 3) referentes ao manejo e

comportamento do animal

A partir dos dados dos questionaacuterios os animais foram classificados conforme

as respostas dadas referente ao medo de trovatildeo e fogos de artiacutefiacutecio entre animais com

histoacuterico comportamental de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Foacutebicos) e

animais historicamente natildeo foacutebicos a esses sons (Natildeo-foacutebicos)

No dia do experimento cada animal foi submetido a inserccedilatildeo de um cateacuteter de

silicone endovenoso para coleta de sangue ainda em sua moradia (amostra 1 casa) e a

colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro (Polar Pro Trainer RS800CX) Os animais permaneceram

com o frequenciacutemetro durante todo o protocolo experimental

Apoacutes a colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro os animais permaneceram no mesmo local

por 10 minutos para adaptaccedilatildeo ao frequeciacutemetro e registro dos dados de VIC do

momento basal 1 (casa) Em seguida cada animal foi transportado para o laboratoacuterio

onde foi executado o modelo de estresse sonoro agudo O transporte foi realizado

acondicionando o animal numa caixa de transporte num carro de passeio com

ventilaccedilatildeo adequada

Apoacutes a chegada ao local do experimento os animais permaneceram na sala sem

manipulaccedilatildeo e sem interaccedilatildeo por parte dos pesquisadores por 30 minutos para registro

dos dados de VIC do momento basal 2 (laboratoacuterio) Em seguida foi coletada a

segunda amostra de sangue (amostra 2 laboratoacuterio)

O estiacutemulo sonoro consistiu numa gravaccedilatildeo de sons de trovatildeo e outra de sons de

fogos de artifiacutecio numa intensidade sonora maacutexima de 103-104 dB e duraccedilatildeo de 2

minutos e 30 segundos (MACCARIELLO 2012)

Durante e apoacutes o fim do estiacutemulo sonoro cada animal permaneceu sem qualquer

manipulaccedilatildeo A terceira coleta de sangue foi realizada 5 minutos apoacutes o teacutermino do

estresse (amostra 3) a quarta aos 15 minutos (amostra 4) a quinta aos 30 minutos

(amostra 5) e a sexta coleta aos 60 minutos apoacutes o teacutermino do estresse (amostra 6)

25

A filmagem foi realizada durante todo o experimento para registrar as reaccedilotildees

comportamentais

Apoacutes a uacuteltima coleta o polar foi retirado e o animal levado de volta para sua

casa no mesmo transporte e nas mesmas condiccedilotildees em que veio

Figura 5 Esquema do protocolo experimental

331 Estiacutemulo Sonoro

Os estiacutemulos sonoros consistiram de uma gravaccedilatildeo com duraccedilatildeo de 2 minutos e

30 segundos de sons de trovatildeo mixados alternadamente a partir de dois arquivos

sonoros no formato wave (ldquovery loud thunder close thunder crackrdquo e ldquohigh quality

stereo sound of a major thunder clap during a stormrdquo) e outra gravaccedilatildeo de sons de

fogos de artifiacutecio mixado de um arquivo sonoro no formato wave (ldquocontinuous

fireworkrdquo) adquiridos no endereccedilo eletrocircnico httpwwwsound-effectcom

O formato utilizado possui a vantagem de ser uma gravaccedilatildeo que preserva todas

as variaccedilotildees de frequecircncia do som original A intensidade do som foi padronizada

atraveacutes de um decibeliacutemetro modelo BK Precision 732A Sound Level Meters a 103-

104 dB por ser uma pressatildeo sonora capaz de aumentar as concentraccedilotildees de cortisol

seacuterico em catildees estando abaixo dos limites que possam causar danos ao aparelho

auditivo (ISING et al 1999)

O estiacutemulo sonoro foi emitido por um aparelho de som (Pioneer home theater

DVD 120w RMS) com 5 caixas de som acopladas Cada animal foi posicionado a um

metro das caixas de som Para observaccedilatildeo das reaccedilotildees comportamentais cada animal foi

contido apenas por uma guia solta de 15 m podendo reagir e se locomover

naturalmente sem intervenccedilotildees

v

DEDICATOacuteRIA

Dedico esse trabalho agrave Francesco (catildeo) Sarah (gata) e Myul

(gata) os animais que me acompanharam desde a infacircncia me

encantando no dia a dia com o carinho companheirismo e

inteligecircncia e que nos uacuteltimos meses nos deixaram apoacutes 15 anos

de maravilhosos tempos

Dedico tambeacutem a minha amada Universidade Rural que me

deu natildeo soacute a oportunidade de ter uma profissatildeo como a de seguir

na pesquisa do que amo

vi

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a meu amado marido Rodrigo que me apoiou incondicionalmente em

todos os momentos bons e difiacuteceis nesses dois anos de pesquisa me ajudando do

trabalho braccedilal ao apoio emocional sempre acreditando que eu era capaz

Agradeccedilo a meus familiares queridos agrave Helena que mesmo precisando de meus

cuidados e atenccedilatildeo foi compreensiva me ajudando e me dando todo o carinho quando

eu mais precisava A meus avoacutes pelo amor incondicional meus pais Carlos e Cris e a

minha irmatilde Catarine que mesmo agrave distacircncia participaram de tudo e se fizeram sempre

presentes A meus sogros queridos Anna e Aluisio e a meu cunhado Rocircmulo sempre

me apoiando e dando forccedila no dia a dia para que eu desse conta de tudo

Agradeccedilo imensamente aos catildees que foram todos maravilhosos e agrave seus

proprietaacuterios que sem medir esforccedilos ajudaram muito em nossa pesquisa colaborando

e confiando seus animais a noacutes

Agradeccedilo agrave Raquel por me ajudar nos estudos na pesquisa no experimento

sempre com muita dedicaccedilatildeo Agrave Marissa querida por dedicar muitas de suas manhatildes

para me ajudar com os catildees Agrave Julia sempre com seus conselhos saacutebios e oportunos

Agradeccedilo agraves meninas do grupo de estudo em Medicina Alternativa Beth

Morgana Giulia Alana Renata Tati que fizeram me sentir parte de um grupo de

trabalho e amizade

A meus queridos colegas de curso Raoni Bruno Debora Liacutevia Gabi e Joice

que passaram comigo momentos de muito estudo dedicaccedilatildeo e cansaccedilo sempre

transformando os momentos mais tensos em divertimento

Agradeccedilo aos professores do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas por me

guiarem no caminho do conhecimento e da ciecircncia

Agradeccedilo ao professor Argemiro pelo imenso apoio e acolhimento quando

mais precisamos

Agradeccedilo a banca pela disponibilidade em contribuir com nosso trabalho

Agradeccedilo agraves agecircncias de fomento CAPES e FAPERJ

E finalmente agradeccedilo a minha orientadora Magda por esse projeto e por ter

sido a primeira a acreditar que eu era capaz e que chegariacuteamos ateacute aqui Sempre com

muita paciecircncia me explicando explicando e explicando caminhou comigo

ultrapassando as dificuldades natildeo me deixando desistir nunca

vii

RESUMO

FRANZINI Carla Caroline de Souza Respostas autonocircmicas e comportamentais ao

estresse sonoro agudo em catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de

trovatildeo eou fogos de artifiacutecio 2015 102 p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias

Fisioloacutegicas) Instituto de Biologia Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

Seropeacutedica RJ 2015

O estresse eacute a situaccedilatildeo gerada por um desafio ao qual um organismo estaacute submetido E

apesar da resposta de estresse ser fundamental para homeostase a persistecircncia do

estiacutemulo estressor ou o exagero na resposta pode provocar consequecircncias deleteacuterias para

o indiviacuteduo A fobia eacute considerada um transtorno de ansiedade onde o medo (estado

emocional em resposta a uma situaccedilatildeo de perigo) eacute persistente e excessivo o que resulta

num aumento da reatividade ao estresse Nesse contexto vaacuterios estiacutemulos satildeo

considerados estressores em catildees e a exposiccedilatildeo a estiacutemulos sonoros como trovotildees e

fogos de artifiacutecio representa uma opccedilatildeo natural para o estudo da reatividade ao estresse

Desta forma avaliamos a reatividade de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a

sons de trovatildeo eou fogos de artifiacutecio a um modelo de estresse sonoro agudo atraveacutes da

anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e de paracircmetros comportamentais

Foram utilizados 28 catildees de companhia de diversas raccedilas de 2 a 6 anos pesando de 10

a 30 Kg sem sinais de outras doenccedilas provenientes de proprietaacuterios voluntaacuterios do

municipio de Seropeacutedica-RJ Estes foram selecionados por questionaacuterio referente a

intensidade do medo de trovatildeo e fogos de artifiacutecio dividos em grupos de foacutebicos e natildeo

foacutebicos e ainda entre os estiacutemulos som de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O estiacutemulo sonoro

consistiu numa gravaccedilatildeo padronizada de 25 minutos a uma intensidade sonora maacutexima

de 103-104 dB Para a anaacutelise da VIC os intervalos RR foram registrados atraveacutes de

frequenciacutemetro (Polarreg modelo RS800CX) computados e analisados pelo programa

CardioSeries 241 Tambeacutem foram avaliados o perfil dos proprietaacuterios caracteriacutesticas

gerais (peso idade raccedila e sexo) e de manejo dos animais Natildeo foram detectadas

diferenccedilas no perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios nem caracteriacutesticas gerais ou de

manejo entre animais foacutebicos e natildeo-foacutebicos O estiacutemulo sonoro (trovatildeo ou fogos) foi

capaz produzir aumento significativo da razatildeo LFHF tanto em animais natildeo-foacutebicos

como em animais foacutebicos No entanto a magnitude do aumento na razatildeo LFHF

produzida pelo som foi significativamente maior em animais foacutebicos do que em animais

natildeo-foacutebicos O modelo de estresse sonoro agudo produziu um aumento nos

comportamentos de vigilacircncia tremer e se esconder Apenas animais foacutebicos

submetidos ao modelo som de fogos apresentaram respostas comportamentais

significativamente mais intensas que catildees natildeo-foacutebicos nos paracircmetros Tremer Se

Esconder Vigilacircncia e Salivaccedilatildeo As respostas comportamentais descritas pelos

proprietaacuterios e as exibidas pelos catildees durante o modelo de estresse foram

correlacionadas apenas nos paracircmetros Tremer e Se Esconder Foi detectada correlaccedilatildeo

significativa entre os valores da razatildeo LFHF e os seguintes paracircmetros

comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio Arfar Tremer Se Esconder Fugir

Inquietaccedilatildeo Vigilacircncia Salivaccedilatildeo e Sobressalto O modelo utilizado foi capaz de

induzir respostas comportamentais e autonocircmicas de estresse e se mostra uma boa

ferramenta na mensuraccedilatildeo da magnitude das respostas de estresse de animais de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e pode ser

utilizado na avaliaccedilatildeo de novos caminhos terapecircuticos

Palavras-chaves estresse em catildeo variabilidade do intervalo cardiacuteaco comportamento

fobia a sons

viii

ABSTRACT

FRANZINI Carla Caroline de Souza Autonomic and behavioural responses to noise

acute stress in companion dogs with phobia of thunder andor fireworks sounds 2015 p 105 Thesis (MA in Physiological Sciences) Institute of Biology Federal Rural

University of Rio de Janeiro Seropeacutedica RJ 2015

Stress is a situation caused by a challenge in which a body is subject And despite the

stress response is essential for homeostasis the persistence of the stressor stimulus or

exaggerated response can induce deleterious consequences A phobia is considered an

anxiety disorder where the fear (emotional state in response to a situation of danger) is

persistent and excessive which results in increased reactivity to stress In this context

many stimuli are considered stressors in dogs and the exposure to noise stimuli as

thunder and fireworks is a natural choice for the study of reactivity to stress Thus we

have evaluated the reactivity of companion dogs with history of phobia of the thunder

sounds andor fireworks to an acute acoustic stress model by analysing the variability

of Cardiac Interval (VCI) and behavioural parameters We used 28 companion dogs

different breeds 2 to 6 years old weighing 10 to 30 kg with no signs of other diseases

from volunteers owners of City of Seropeacutedica-RJ The dogs were selected by

questionnaire on the intensity of the fear of thunder and fireworks divided in phobic or

not phobic and between the stimuli sound of thunder or fireworks The sound stimulus

consisted of a standardized recording from 25 minutes to a maximum intensity of

sound of 103-104 dB For the analysis of VCI RR intervals were recorded through

frequency meter (Polar reg RS800CX model) stored and analysed using CardioSeries

241 sofware We also evaluated the profile of the owners general characteristics

(weight age race and gender) and handling of animals No differences were found in

the socioeconomic profile of the owners or general characteristics or animal handling

between phobic and non-phobic dogs The sound stimulus (thunder or fireworks) was

able to induce a significant increase in LF HF ratio in both non-phobic animals and

phobic animals However the magnitude of the sound-induced increase in the LFHF

was significantly higher in phobic than in non-phobic animals The acute sound stress

model produced an increase in the behaviour of surveillance trembling and hiding Only

phobic animals submitted to fireworks sound model had significantly more intense

behavioural responses than non-phobic dogs in the behaviours Shivering Hiding

Surveillance and Salivation Behavioural responses described by the owners and shown

by dogs during the stress model were correlated only in the behaviours Shivering and

Hiding Significant correlation was found between the ratio values LF HF and the

following behavioural parameters induced by sound in the laboratory Panting

Shivering Hiding Escape Shockwave Surveillance Salivation and Startle The sound

model was able to induce behavioural and autonomic responses of stress and it shown a

good tool to measure the magnitude of stress responses in the companion dogs with

history of phobia of thunder and fireworks sounds and it can be used in the study of new

therapeutic targets

Keywords stress in dogs variability of cardiac interval behaviour noise phobia

ix

LISTA DE TABELAS E FIGURAS

Tabela 1 Descriccedilatildeo dos 14 paracircmetros comportamentais analisados 31

Tabela 2 Perfil geral dos proprietaacuterios 33

Tabela 3 Perfil dos proprietaacuterios dos catildees segundo os grupos natildeo-foacutebicos e foacutebicos 34

Tabela 4Caracteriacutesticas gerais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 35

Tabela 5 Caracteriacutesticas de manejo dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 36

Tabela 6 Caracteriacutesticas comportamentais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 38

Tabela 7 Paracircmetros comportamentais avaliados no experimento 47

Tabela 8 Correlaccedilatildeo entre paracircmetros comportamentais avaliados pelos proprietaacuterios e

os avaliados durante o experimento 51

Figura 1Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA 8

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC 13

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional 19

Figura 4 Conexotildees nuacutecleo central da amiacutegdala 20

Figura 5 Esquema do protocolo experimental 25

Figura 6 Catildeo no momento do som 26

Figura 7 Componentes do Polar modelo RS800CX 27

Figura 8 Tela inicial do programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 9 Graacutefico confeccionado pelo programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 10 Tela do programa CardioSeries demonstrando a razatildeo entre os componentes de

frequecircncia LF e HF a partir da FFT 30

Figura 11 Paracircmetros avaliados segundo proprietaacuterio 40

Figura 12 Razatildeo LFHF de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos a sons de Trovatildeo eou Fogos de

Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 41

Figura 13 LF (componente de baixa frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos submetidos ao

estresse sonoro agudo atraveacutes de sons de Trovatildeo e Fogos de Artifiacutecio 42

Figura 14 HF (componente de alta frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo-foacutebicos a sons de

Trovatildeo eou Fogos de Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 44

Figura 15 FC (Frequecircncia Cardiacuteaca Meacutedia) dos catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

Figura 16 RMSSD (raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado) de catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

x

Figura 17 Oito dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 49

Figura 18 Seis dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 50

Figura 19 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e os paracircmetros comportamentais segundo os proprietaacuterios 53

Figura 20 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e a razatildeo LFHF 54

xi

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS

AC Adenilatociclase

ACh Acetilcolina

ACTH Hormocircnio adrenocorticotroacutefico

AVP Vasopressina

CCP Corpos Celulares Preacute-ganglionares

CEUA Comissatildeo de Eacutetica no Uso de Animais

CRH Hormocircnio liberador de corticotropina

dB decibeacuteis

DCF Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas

DPA Departamento de Parasitologia Animal

FC Frequecircncia Cardiacuteaca

FFT Transformada Raacutepida de Fourier

GR Receptor de Glicocorticoacuteides

HF Frequecircncia alta

HHA Eixo Hipotaacutelamo Hipoacutefise Adrenal

IRR Intervalos RR

LC Locus Coeruleus

LF Frequecircncia baixa

MR Receptor de Mineralocorticoacuteide

NAV Nodo Atrioventricular

NA Noradrenalina

NS Nodo Sinoatrial

PKA Proteiacutena quinase dependente de AMPc

PVN Nuacutecleo Paraventricular do Hipotaacutelamo

RMSSD raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado

SAM Sistema Simpato-adreno-medular

SNA Sistema Nervoso Autocircnomo

SNC Sistema Nervoso Central

SNP Sistema Nervoso Parassimpaacutetico

SNS Sistema Nervoso Simpaacutetico

xii

SRD Sem raccedila definida

STDRR Desvio padratildeo de todos os intervalos RR do segmento

UFRRJ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

VIC Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco

xiii

SUMAacuteRIO

DEDICATOacuteRIA v

AGRADECIMENTOS vi

RESUMO vii

LISTA DE TABELAS E FIGURAS ix

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS xi

1 INTRODUCcedilAtildeO 1

11 Justificativa 3

12 Objetivos 4

121 Geral 4

122 Especiacuteficos 4

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 5

21 Estresse 5

22 Fisiologia do estresse 6

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse 10

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca 10

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) 12

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees 14

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees 16

26 Fobia em catildees 18

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS 22

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental 22

32 Animais 22

321 Consideraccedilotildees eacuteticas 23

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som 23

33 Procedimentos Experimentais 24

xiv

331 Estiacutemulo Sonoro 25

34 Grupos experimentais 26

35 Coletas de sangue 26

36 Uso do Frequenciacutemetro 27

37 Anaacutelise Espectral da VIC 27

38 Anaacutelise Comportamental 30

39 Anaacutelise Estatiacutestica 31

4 RESULTADOS 33

41 Perfil dos proprietaacuterios e caracteriacutesticas gerais dos animais 33

42 Anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco 41

43 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 46

44 Correlaccedilotildees entre os dados 51

5 DISCUSSAtildeO 55

51 Perfil dos proprietaacuterios e manejo dos animais 55

52 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e o estresse sonoro agudo 59

53 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 61

54 Correlaccedilotildees entre dados 62

55 O Modelo de Estresse Sonoro Agudo em Catildees 63

6 CONCLUSOtildeES 65

7 REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 67

8 ANEXOS 77

ANEXO 1 Ficha geral de cadastro 77

ANEXO 2 Ficha Neuroloacutegica 81

ANEXO 3 Ficha de avaliaccedilatildeo de Fobia 83

ANEXO 4 Folder de divulgaccedilatildeo 85

ANEXO 5 Termo de Consentimento 86

xv

ANEXO 6 Ficha de Protocolo Experimental 88

1

1 INTRODUCcedilAtildeO

Situaccedilotildees de estresse e medo fazem parte da vida de todos os animais e as

reaccedilotildees fisioloacutegicas provocadas por elas satildeo essenciais para sobrevivecircncia no meio

selvagem mas tambeacutem na vida urbana para aqueles animais que foram domesticados

acompanhando o homem em sua caminhada de vida em sociedade

A espeacutecie canina foi a que mais se envolveu com o homem tornando-se um

animal domeacutestico e dependente de cuidados sendo alvo de problemas sociais

ambientais e de sauacutede puacuteblica quando abandonados ou em vida livre pelas cidades e

comunidades

Essa relaccedilatildeo criada ao longo dos tempos entre os catildees e o homem trouxe para

os dias atuais um viacutenculo afetivo de ambas as espeacutecies modificando e ateacute selecionando

atraveacutes das raccedilas o comportamento canino acentuando caracteriacutesticas que podem estar

influenciando a forma dos catildees de lidar com as situaccedilotildees de estresse e medo no

cotidiano

A fisiologia do comportamento regula-se baseada nos estiacutemulos externos aos

quais o animal estaacute sujeito conforme suas necessidades de sobrevivecircncia e ateacute de bem

estar Dessa forma o estresse vem a ser responsaacutevel por modelar o comportamento de

um indiviacuteduo conforme seu modo de vida e sua exposiccedilatildeo a esses estiacutemulos

O estresse como mecanismo de adaptaccedilatildeo a situaccedilotildees adversas eacute extremamente

importante na manutenccedilatildeo da vida pois sem esse mecanismo qualquer situaccedilatildeo

desfavoraacutevel poderia causar morte imediata sendo a capacidade de responder

rapidamente a uma situaccedilatildeo de perigo uma importante caracteriacutestica da evoluccedilatildeo dos

seres

Mais especificamente em situaccedilotildees de estresse o organismo de um indiviacuteduo

redistribui sua energia e o sistema locomotor e sensorial satildeo priorizados em detrimento

de outros (reprodutivo digestivo e imune) fazendo assim com que a resposta

momentacircnea seja eficiente O problema comeccedila quando haacute a persistecircncia destas

situaccedilotildees e ou dessas respostas causando prejuiacutezo aos sistemas deprimidos

A influecircncia dos estiacutemulos sonoros tem demonstrado importacircncia cliacutenica na

espeacutecie canina jaacute que leva diversos indiviacuteduos a sofrerem alteraccedilotildees comportamentais e

2

neuroendoacutecrinas que podem evoluir para graves distuacuterbios comportamentais e

fisioloacutegicos como a fobia Em alguns casos de estresse crocircnico severo podem ocorrer

danos neurais doenccedilas gastrointestinais aleacutem da diminuiccedilatildeo da resposta imune

A fobia eacute descrita como um medo acentuado irracional persistente e excessivo

claramente discerniacutevel de objetos seres lugares ou situaccedilotildees de forma desproporcional

e exagerada acompanhada de comportamento de fuga esquiva antecipaccedilatildeo e intenso

sofrimento que geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase

fisioloacutegica mas que leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas

ao medo coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o

eixo Hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HPA) na liberaccedilatildeo de glicocorticoides e o sistema

nervoso simpaacutetico

Na fobia os limiares de ativaccedilatildeo dos circuitos neurais de medo estatildeo reduzidos

podendo ser observado no indiviacuteduo clara hiperexcitabilidade hipervigilacircncia e

aumento da responsividade comportamental aos estiacutemulos Idealmente os graus de

ativaccedilotildees seriam proporcionais agrave ameaccedila e uma adaptaccedilatildeo agrave situaccedilatildeo normalizaria a

resposta de estresse diminuindo-a conforme a ameaccedila desaparecesse o que natildeo ocorre

na fobia

Os criteacuterios para o diagnoacutestico de fobia em humanos costumam usar termos

que se referem a sintomas emocionais envolvendo sentimentos e estados de consciecircncia

subjetivos o que difiacuteculta a abordagem cientifica e cliacutenica nos animais Poreacutem as

alteraccedilotildees dos paracircmetros comportamentais e fisioloacutegicos dos sistemas

neuroendoacutecrinos envolvidos nesses distuacuterbios satildeo um caminho de estudo e pesquisa

Dessa forma os niacuteveis de estresse podem ser avaliados atraveacutes da mensuraccedilatildeo

de paracircmetros fisioloacutegicos e comportamentais Em vaacuterias espeacutecies o paracircmetro mais

utilizado eacute a dosagem de cortisol Aleacutem desse a anaacutelise da variabilidade do intervalo

cardiacuteaco (VIC) vem se mostrando um paracircmetro importante e natildeo invasivo para avaliar

o balanccedilo simpato-vagal em indiviacuteduos submetidos a estiacutemulos potencialmente

desafiadores As alteraccedilotildees comportamentais analisadas em conjunto com as anaacutelises

citadas a cima formam uma importante fonte de dados ainda natildeo correlacionadas nos

estudos mais recentes

Contudo o presente estudo teve como objetivo avaliar as respostas autonocircmicas

e comportamentais induzidas pelo estresse sonoro agudo em catildees de companhia com

3

histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O modelo de estresse utilizado

consiste em um meacutetodo natildeo invasivo e seguro uma vez que cada animal foi submetido

a um estiacutemulo sonoro (sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio) de curta duraccedilatildeo (25 min) a

uma intensidade sonora maacutexima de 1039 dB natildeo sendo capaz de causar efeitos

deleteacuterios para a audiccedilatildeo dos animais

Para tal foram utilizados 28 catildees de diversas raccedilas dos quais 16 eram

historicamente foacutebicos a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e 12 natildeo apresentavam

qualquer sinal de medo a esses sons Os animais foram dividos ainda entre submetidos

ao som de trovatildeo e submetidos ao som de fogos de artifiacutecio

Foram avaliados o balanccedilo simpato-vagal atraveacutes da mensuraccedilatildeo da VIC e 14

paracircmetros comportamentais aleacutem da coleta de amostras sanguiacuteneas em 6 momentos

para posterior anaacutelise dos niacuteveis seacutericos de cortisol

11 Justificativa

Animais e humanos satildeo constantemente submetidos a situaccedilotildees de estresse no

seu cotidiano Em catildees vaacuterios estiacutemulos podem ser considerados geradores de estresse

e sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio tecircm se mostrado estiacutemulos estressores importantes

devido agrave frequente ocorrecircncia de fobia a esses sons nesta espeacutecie

O tema escolhido eacute de grande importacircncia na atualidade uma vez que satildeo

necessaacuterias mais pesquisas sobre o efeito do estresse em humanos e animais Neste

sentido a avaliaccedilatildeo dos paracircmetros fisioloacutegicos em situaccedilotildees de estresse eacute uma forma

de estudar e compreender melhor os distuacuterbios relacionados ao estresse e traccedilar novos

caminhos terapecircuticos

Eacute relevante para a Medicina Veterinaacuteria e para a aacuterea de sauacutede como um todo

pois modelos de estresse sonoro agudo podem ser uacuteteis na verificaccedilatildeo da reatividade ao

estresse aleacutem de serem pouco invasivos e de relativa faacutecil execuccedilatildeo

4

12 Objetivos

121 Geral

Verificar as respostas fisioloacutegicas ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

122 Especiacuteficos

Avaliar o perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios as caracteriacutesticas gerais e

comportamentais e o manejo dos animais em catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

Avaliar a resposta autonocircmica a partir da anaacutelise espectral da variabilidade do

intervalo cardiacuteaco de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos

de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar a resposta comportamental de catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre o comportamento dos animais relatado pelos

proprietaacuterios durante a ocorrecircncia natural de trovotildees ou fogos e os comportamentos

exibidos pelos catildees em resposta ao modelo de estresse sonoro em laboratoacuterio

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre paracircmetros autonocircmicos e comportamentais em

catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

5

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

21 Estresse

O fisiologista Claude Bernard em 1872 definiu o conceito de meio interno pela

primeira vez como um princiacutepio do equiliacutebrio dinacircmico do meio interno essencial para

a sobrevivecircncia (FRANCI 2005)

Apesar disso foi Walter Canon em 1929 o responsaacutevel por definir esse

conceito da condiccedilatildeo de equiliacutebrio do meio interno criado por Claude Bernard com o

termo homeostase Aleacutem de ter reconhecidoos agentes desafiadores da homeostase

como fiacutesicos e emocionais e elaborado o conceito de ldquoreaccedilatildeo de emergecircnciardquo que

ocorre quando haacute um desafio capaz de ativar a liberaccedilatildeo de noradrenalina de terminais

nervosos simpaacuteticos e adrenalina da medula da adrenal (FRANCI 2005)

E mais recentemente entre 1946 e 1976 o fisiologista canadense Hans Selye

definiu ldquoa situaccedilatildeo gerada pelo desafio ao qual um organismo estaria submetidordquo com o

termo estresse E ao ocorrerem controveacutersias conceituais uma vez que natildeo se podia

distinguir a causa do efeito ele criou o termo estressor para designar o agente causador

(estiacutemulo) e manteve o termo estresse para designar a condiccedilatildeo gerada pelo estiacutemulo

desafiador (FRANCI 2005)

A resposta a um estiacutemulo estressor eacute fundamental para a homeostase de um ser

vivo e sua sobrevivecircncia Nas condiccedilotildees de estresse o organismo reage por meio da

ativaccedilatildeo e desativaccedilatildeo do mecanismo de controle de vaacuterias funccedilotildees para recuperar e

manter a homeostase No entanto essas respostas podem ser insuficientes para

restabelecer ou manter a homeostase ou podem ser exageradas representando risco de

doenccedilas Portanto o estresse pode ser definido como a soma de respostas fiacutesicas e

mentais causadas por determinados estiacutemulos externos e que permitem ao indiviacuteduo

superar determinadas exigecircncias do meio-ambiente (FRANCI 2005)

A reaccedilatildeo de estresse maximiza o gasto de energia que ajuda a preparar o corpo

para atender a uma situaccedilatildeo ameaccediladora ou desafiadora em que o indiviacuteduo tende a

mobilizar um grande esforccedilo a fim de lidar com o evento No entanto enquanto uma

certa quantidade de estresse eacute necessaacuteria para a sobrevivecircncia o estresse prolongado

pode afetar adversamente a sauacutede (BERNARD amp KRUPAT 1994)

6

Em situaccedilotildees de estresse ocorre a ativaccedilatildeo de duas principais vias o eixo

hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) atraveacutes do aumento da produccedilatildeo de cortisol e o

sistema nervoso simpaacutetico atraveacutes da liberaccedilatildeo de catecolaminas (Noradrenalina

Adrenalina)

A desregulaccedilatildeo de qualquer um desses sistemas de estresse pode levar a

distuacuterbios fisioloacutegicos de vaacuterios outros sistemas incluindo os sistemas imunoloacutegico

cardiovascular funccedilatildeo metaboacutelica e comportamento levando a maacute adaptaccedilatildeo da

resposta ao estresse (MARQUES et al 2010)

22 Fisiologia do estresse

Os estiacutemulos estressores podem ser definidos como aqueles que desafiam a

homeostase Esses estiacutemulos geram respostas que variam de acordo com a duraccedilatildeo e

intensidade e ainda com a predisposiccedilatildeo geneacutetica e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo

Os estiacutemulos causadores de estresse podem ser classificados em quatro grupos

estressores fiacutesicos e quiacutemicos (calor frio barulho radiaccedilatildeo intensa e substacircncias

toacutexicas) psicoloacutegicos (medo e frustraccedilatildeo) sociais (um ambiente hostil e rompimento de

relaccedilotildees) e os que alteram a homeostase vegetativa como em casos de exerciacutecio intenso

e hemorragias Quanto agrave duraccedilatildeo os estiacutemulos causadores de estresse podem ser ainda

classificados como agudos ou crocircnicos (PACAacuteK amp PALKOVITS 2001)

Moberg (2000) propotildee um modelo para compreensatildeo do estresse em toda

espeacutecie animal que sugere uma resposta bioloacutegica ao estresse a partir de trecircs estaacutegios

gerais

1ordm O reconhecimento de um estiacutemulo estressante

2deg A defesa bioloacutegica contra o estiacutemulo estressante

3deg As consequecircncias da resposta de estresse

Esta resposta ao estressor iraacute abranger aspectos cognitivos comportamentais e

fisioloacutegicos (MARGIS et al 2003)

Em uma situaccedilatildeo de estresse satildeo ativados o sistema simpato-adrenomedular

gerando o aumento da secreccedilatildeo de catecolaminas e logo excitaccedilatildeo raacutepida do sistema

cardiovascular ocasionando um aumento da frequecircncia cardiacuteaca e da pressatildeo arterial E

7

o outro eixo ativado eacute o hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) levando ao aumento na

produccedilatildeo de cortisol e naturalmente mobilizaccedilatildeo de energia (ULRICH-LAI amp

HERMAN 2009) (Figura 1)

As respostas de emergecircncia ativadas pelo SAM ocorrem quando o organismo se

prepara para a defesa ou ataque excretando adrenalina Entatildeoo suprimento de sangue eacute

desviado para os muacutesculos havendo elevaccedilatildeo do deacutebito cardiacuteaco total e da

redistribuiccedilatildeo sanguiacutenea aumentando a oferta de nutrientes e oxigecircnio para as estruturas

vitais A pressatildeo arterial se eleva e os bronquiolos se dilatam tornando a respiraccedilatildeo

mais raacutepida e profunda para retirada do dioacutexido de carbono excedente As funccedilotildees

digestivas e secretoacuterias diminuem aleacutem da reaccedilatildeo de aliacutevio com a liberaccedilatildeo de qualquer

excesso da bexiga e intestino A taxa metaboacutelica aumenta e a liberaccedilatildeo de endorfinas

diminue a sensibilidade agrave dor e os sentidos satildeo mantidos em estado de alerta

(ROGERSON 1997)

8

Figura 1 Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA A ativaccedilatildeo do sistema simpato-adrenomedular

(SAM) e do eixo do hipotaacutelamo hipoacutefise adrenal (HHA) como sistemas primaacuterios para a

manutenccedilatildeo e restabelecimento da homeostase A exposiccedilatildeo ao estressor resulta em ativaccedilatildeo de

neurocircnios preacute-ganglionares simpaacuteticos na coluna intermediolateral da medula espinhal

toracolombar (T1 a L2) Estes neurocircnios preacute-ganglionares se projetam para gacircnglios preacute e para

vertebrais que entatildeo terminam em oacutergatildeos alvo e nas ceacutelulas cromafins da medula da adrenal

Esta ativaccedilatildeo simpaacutetica (em ciacuterculos) representa a resposta claacutessica de luta e fuga que foi

primariamente caracterizada por Walter Cannon e colaboradores no iniacutecio do seacuteculo passado e

leva a um aumento dos niacuteveis de adrenalina (proveniente da adrenal) e de noradrenalina dos

terminais simpaacuteticos aumento da frequecircncia e da forccedila de contraccedilatildeo do coraccedilatildeo vasoconstriccedilatildeo

perifeacuterica e mobilizaccedilatildeo de energia O tocircnus parassimpaacutetico tambeacutem eacute mobilizado durante o

estresse No sistema parassimpaacutetico (em estrelas) representa a ativaccedilatildeo de nuacutecleos preacute-

ganglionares cracircnios-sacrais ativam nuacutecleos poacutes-ganglionares localizados proacuteximos aos oacutergatildeos

inervados com efeito geralmente oposto ao sistema simpaacutetico Para o eixo HHA a exposiccedilatildeo ao

estressor ativa neurocircnios hipofisiotroacuteficos no nuacutecleo paraventricular do hipotaacutelamo (PVN) que

secretam hormocircnios de liberaccedilatildeo como hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH) e

vasopressina (AVP) na circulaccedilatildeo porta da eminecircncia meacutedia Estes hormocircnios liberadores atuam

na hipoacutefise anterior para promover a secreccedilatildeo de hormocircnio adrenocorticotroacutefico (ACTH) que

atua no coacutertex da adrenal (zona fasciculata) para iniciar a siacutentese e liberaccedilatildeo dos hormocircnios

glicocorticoacuteides Os glicocorticoacuteides circulantes promovem a mobilizaccedilatildeo de energia estocada e

potencializam numerosos efeitos simpaacuteticos como a vasoconstriccedilatildeo perifeacuterica Aleacutem disso o

coacutertex da adrenal eacute diretamente inervado pelo sistema simpaacutetico que regula a liberaccedilatildeo de

glicocorticoacuteides Entatildeo a ativaccedilatildeo do sistema simpaacutetico e do eixo HHA tem accedilotildees

complementares no organismo incluindo a mobilizaccedilatildeo de energia e a manutenccedilatildeo da pressatildeo

arterial durante o estresse (Adaptado de ULRICH-LAI amp HERMAN 2009)

CRH

AVP

9

As respostas ao estresse que envolvem emoccedilatildeo passaratildeo por avaliaccedilatildeo afetiva

onde a informaccedilatildeo seraacute processada e interpretada para se estimar o potencial de ameaccedila

Esta avaliaccedilatildeo afetiva iraacute determinar o padratildeo de respostas e o tipo de defesa de acordo

com a histoacuteria pessoal aprendizado e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo que entatildeo faraacute

a avaliaccedilatildeo da capacidade para lidar com a situaccedilatildeo e organizaccedilatildeo da resposta

(MARGIS et al 2003)

A intensidade da resposta eacute que determina se o animal estaacute sofrendo de estresse

ou eacute meramente experimentado um episoacutedio breve em sua vida sem nenhum impacto

significativo ao seu bem-estar

Circuitos neurais espinais e supra espinais estatildeo envolvidos nas respostas de

estresse Os supra espinais processam as informaccedilotildees vindas das vias somatossensoriais

e viscerossensoriais e elaboram as respostas atraveacutes do taacutelamo hipotaacutelamo aacuterea preacute-

optica estruturas liacutembicas e sistemas amineacutergicos e natildeo amineacutergicos do tronco cerebral

Os neurocircnios do PVN secretores de hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH)

e vasopressina com os neurocircnios catecolamineacutergicos do locus coeruleus (LC) (o nuacutecleo

com maior densidade de neurocircnios noradreneacutergicos com papel fundamental no

desencadeamento da resposta ao estresse e reaccedilotildees de fuga) inervam o hipocampo a

amiacutegdala e o neocortex aleacutem de nuacutecleos do rafe (5-HT) e grupamentos celulares da

medula e ponte compondo assim um dos principais reguladores centrais de resposta ao

estresse na ativaccedilatildeo do eixo HHA e SNS (FRANCI 2005)

O eixo HHA eacute ativado por diferentes categorias de estresse como traumaacutetico

inflamatoacuterio e psicoloacutegico E o estresse psicoloacutegico tem regulaccedilatildeo por estruturas

liacutembicas que exercem atividade modulatoacuteria sobre o eixo (ULRICH-LAI amp HERMAN

2009)

O PVN monitora sinais relacionados com o estado emocional atraveacutes de sinais

metaboacutelicos como a composiccedilatildeo plasmaacutetica O CRH o principal neurotransmissor

coordenador das alteraccedilotildees psicoloacutegicas e comportamentais relacionadas ao estresse eacute

sintetizado no PVN e liberado nos capilares da eminecircncia meacutedia juntamente com a

vasopressina (AVP) e alcanccedilam diretamente a hipoacutefise anterior via circulaccedilatildeo portal

hipotalacircmica-hipofisaacuteria que por sua vez estimula na hipoacutefise a liberaccedilatildeo do hormocircnio

adrenocorticotroacutefico (ACTH) (MORMEgraveDE et al 2006)

10

O ACTH eacute sintetizado por ceacutelulas especializadas da hipoacutefise anterior vai para a

corrente sanguiacutenea e estimula o coacutertex da glacircndula adrenal (na zona fasciculada) que

sintetiza o glicocorticoide atraveacutes de esteroides derivados do colesterol O cortisol eacute o

glicocorticoacuteide ativo do eixo para catildees gatos e humanos e a corticosterona para

paacutessaros e roedores (MORMEgraveDE et al 2006)

Esse hormocircnio final do eixo HHA interage com as ceacutelulas atraveacutes da ligaccedilatildeo a

dois receptores o receptor glicocorticoide (GR) e o receptor de mineralocorticoide

(MR) O receptor GR eacute encontrado na maioria dos tecidos do corpo incluindo a maioria

das aacutereas do enceacutefalo No rim e em outros tecidos a aldosterona liga-se ao MR durante a

regulaccedilatildeo da reabsorccedilatildeo de soacutedio mas o MR tambeacutem estaacute presente no hipocampo onde

ocorre a ligaccedilatildeo do cortisol Estes complexos esteroacuteide-receptores entatildeo interagem

com o DNA para iniciar ou para reprimir a transcriccedilatildeo de genes especiacuteficos a fim de

regular a siacutentese de proteiacutenas que provoca alteraccedilotildees fisioloacutegicas em resposta ao

estresse

O cortisol tem 10 vezes mais afinidade ao MR que ao GR Em niacuteveis baixos ou

em situaccedilotildees de ausecircncia de estresse a maior parte do cortisol liga-se aos MRs no

ceacuterebro (principalmente no hipocampo) e modula a atividade basal do eixo HHA e o

aparecimento de resposta ao estresse Com a elevaccedilatildeo dos niacuteveis de cortisol ocorre um

aumento de ligaccedilotildees nos receptores GR reduzindo a atividade do eixo HHA

(mecanismo de ldquofeed-backrdquo negativo) No entanto a ativaccedilatildeo crocircnica deste receptor

estaacute ligada a vaacuterios distuacuterbios cognitivos relativos ao estresse (DE KLOET et al 1999)

Proteger o organismo de possiacuteveis danos eacute um dos papeis principais das

respostas hormonais a situaccedilotildees de estresse E seus principais hormocircnios satildeo a

adrenalina de secreccedilatildeo raacutepida pelo envolvimento na reaccedilatildeo de luta ou fuga e o

corticosteroacuteides na restauraccedilatildeo e na reparaccedilatildeo dos sistemas agindo na segunda linha de

defesa regulando as respostas inflamatoacuteria e imune (MC EWEN 2000)

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca

11

O Nodo Sinoatrial (NS) apresenta a frequecircncia de disparo mais intensa no

coraccedilatildeo estimulando outros locais como os nodos atrioventriculares que principiam

seus proacuteprios impulsos eleacutetricos E com a ausecircncia de influecircncias hormonais ou neurais

a frequecircncia cardiacuteaca (FC) permanece equivalente agrave frequecircncia de disparos do NS ou

seja constante (STAUSS 2007)

Os sistemas nervoso simpaacutetico (SNS) e parassimpaacutetico (SNP) estatildeo

constantemente ativados regulando a atividade cardiacuteaca com a predominacircncia de um ou

outro conforme a situaccedilatildeo Em repouso a predominacircncia eacute vagal o que em humanos

leva a respostas raacutepidas de no maacuteximo 5 segundo na FC diminuindo-a em poucos

batimentos Jaacute as respostas da ativaccedilatildeo simpaacutetica ocorrem apoacutes cinco segundos

aumentando progressivamente chegando a sua resposta maacutexima de aumento da FC

apoacutes 20 a 30 segundos (HAINSWORTH 1995)

No entanto os sistemas simpaacutetico e parassimpaacutetico atuam de forma simultacircnea

na regulaccedilatildeo da atividade cardiacuteaca onde o aumento da atividade vagal natildeo resulta tatildeo

logo na reduccedilatildeo da atividade simpaacutetica e vice-versa (VON BORELL et al 2007)

Quando o SNS eacute ativado as fibras nervosas promovem a descarga de

noradrenalina (NA) nos aacutetrios e ventriacuteculos que por sua vez juntamente com a

adrenalina liberada pela adrenal estimula os receptores β1 adreneacutergicos presentes no

coraccedilatildeo ativando atraveacutes de uma proteiacutena G excitatoacuteria (Gs) a enzima adenilato ciclase

(AC) agrave produzir AMPc Seu aumento intracelular leva agrave ativaccedilatildeo da proteiacutena quinase

dependente de AMPc aumentando as correntes de canais iocircnicos de Ca+2

e Na+

acelerando a velocidade de despolarizaccedilatildeo levando ao aumento da frequecircncia de

disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas do NA desencadeando o aumento da

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Do mesmo modo o miocaacuterdio atrial o nodo aacutetrio-ventricular e o NS satildeo

inervados pelas fibra nervosa parassimpaacutetica dos nervos vagos liberando acetilcolina

(ACh) ativando receptores M2 que estatildeo acoplados a uma proteiacutena G inibitoacuteria (Gi)

inibindo a siacutentese de AMPc intracelular reduzindo a atividade da PKA Aleacutem de a ACh

ativar uma corrente de efluxo de K+ gerando uma hiperpolarizaccedilatildeo da membrana

levando ao aumento do limiar de ativaccedilatildeo do potencial de accedilatildeo sinusal o que reduz a

12

frequecircncia de disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas sinusais diminuindo por fim a

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Existem diferenccedilas no tempo de resposta da ativaccedilatildeo dos ramos simpaacutetico e

parassimpaacutetico que ocorrem em certo modo pela liberaccedilatildeo lenta de noradrenalina nos

terminais nervosos simpaacuteticos e pelas fibras preacute-ganglionares vagais serem

mielinizadas contribuindo para uma transmissatildeo eleacutetrica mais raacutepida Aleacutem das

diferenccedilas anatocircmicas entre os ramos como eacute o caso dos corpos celulares preacute-

ganglionares do parassimpaacutetico localizados dentro do coraccedilatildeo enquanto que os corpos

celulares preacute-ganglionares simpaacuteticos se localizam no gacircnglio paravertebral (VON

BORELL et al 2007)

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC)

A manutenccedilatildeo da homeostase do sistema cardiovascular eacute resultado da oscilaccedilatildeo

riacutetmica de componentes regulatoacuterios da atividade cardiacuteaca onde se observa intervalos

irregulares de tempo entre os batimentos consecutivos (VON BORELL et al 2007)

A anaacutelise da variabilidade do intervalo cardiacuteaco pode ser realizada atraveacutes dos

iacutendices no domiacutenio do tempo e da frequecircncia

No domiacutenio do tempo cada intervalo entre um batimento cardiacuteaco e outro pode

ser medido em milissegundos e no domiacutenio da frequecircncia as flutuaccedilotildees riacutetmicas podem

caracterizar os estados de repouso e atividade influindo na seacuterie cronoloacutegica contida

entre os intervalos tornando possiacutevel a mensurar a atividade do SNA (HOSHI 2009

SONG et al 2006)

Os dados satildeo obtidos atraveacutes da gravaccedilatildeo dos intervalos entre batimentos

cardiacuteacos feitos por frequenciacutemetros capazes de detectar em milissegundos (ms) o

tempo entre os batimentos e armazenaacute-los (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al

2007)

A teacutecnica utilizada com esse objetivo eacute chamada de anaacutelise espectral e consiste

no uso de algoritmos matemaacuteticos como eacute o caso da transformada raacutepida de fourier

(FFT) para obter diagramas dimensionais Dispondo em um graacutefico os componentes

oscilatoacuterios de frequecircncia da VIC no eixo X e a amplitude dos componentes oscilatoacuterios

no eixo Y permitindo atraveacutes dessa teacutecnica determinar a forccedila espectral das

frequecircncias baixas e altas da VIC

13

Nesse contexto os dois Sendo assim os dois componentes de frequecircncia principais satildeo

divididos atraveacutes da anaacutelise espectral em Frequecircncia baixa (LF) caracterizado pelo

espectro de 004 a 015Hz e Frequecircncia alta (HF) situada na faixa de 015 a 04 Hz na

anaacutelise espectral (KAWASE et al 2002 VON BORELL et al 2007 PICCIRILLO et

al 2009)

Quando os IRR satildeo dispostos em uma escala de tempo um graacutefico eacute

confeccionado e as oscilaccedilotildees formadas representam a accedilatildeo dos diferentes componentes

regulam os pulsos cardiacuteacos onde as frequecircncias mais altas representam a atividade

riacutetmica resultante da ativaccedilatildeo parassimpaacutetica e as mais baixas exibem aquelas

resultantes da atividade simpaacutetica (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al 2007)

(Figura 2)

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC Variabilidade do intervalo cardiacuteaco em um indiviacuteduo

jovem durante o repouso e quando em movimento A seacuterie temporal de intervalos RR estaacute

Repouso Movimento

14

disposta nos graacuteficos do topo Os graacuteficos centrais ilustram a presenccedila de dois componentes

principais da densidade espectral LF e HF Durante o movimento o componente LF se torna

predominante em relaccedilatildeo ao repouso Os graacuteficos na base da figura demonstram a distribuiccedilatildeo

relativa dos dois componentes (representada pela aacuterea) (MALLIANI 1997)

A razatildeo entre os dois componentes de frequecircncia eacute calculada a partir dos valores

obtidos de LF e HF resultando em valor que representa o balanccedilo entre a atividade

simpaacutetica e parassimpaacutetica aleacutem de possibilitar a decomposiccedilatildeo dos componentes

espectrais atraveacutes do caacutelculo das frequecircncias centrais desses componentes que se

situam impliacutecitos no sinal da variabilidade (PAGANI et al 1986 LOMBARDI et

al1996 LOMBARDI 1997 MALLIANI et al 1997 VON BORELL et al 2007

HARADA et al 2005)

A anaacutelise espectral da VIC natildeo acessa o tocircnus autonocircmico cardiacuteaco mas sim o

seu balanccedilo o que justifica a ocorrecircncia de alteraccedilotildees na capacidade do coraccedilatildeo de

responder a esses estiacutemulos quando haacute alteraccedilotildees crocircnicas na atividade autonocircmica

Nesses casos natildeo seria aplicaacutevel a anaacutelise espectral da VIC (STAUSS 2007

PICCIRILLO et al 2009)

Deste modo a anaacutelise espectral da VIC tem como principal utilidade a funccedilatildeo de

indicadora da atividade autonocircmica em resposta ao estresse psicoloacutegico e fiacutesico (VON

BORELL et al 2007) E quando eacute aplicada no estudo das alteraccedilotildees agudas da

atividade autonocircmica cardiacuteaca essa anaacutelise eacute utilizada de maneira a obter dados

fidedignos onde diante de uma resposta ao estresse psicoloacutegico pode ser observado um

aumento agudo na atividade cardiacuteaca simpaacutetica caracterizado pelo aumento do

componente LF com provavelmente baixa ou nenhuma alteraccedilatildeo do componente HF

(STAUSS 2007)

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees

O oacutergatildeo auditivo dentre outras funccedilotildees se caracteriza especialmente por seu

desempenho no reconhecimento de situaccedilotildees ameaccediladoras estando em funcionamento

ininterrupto atraveacutes da conexatildeo direta do ouvido interno com os mecanismos neurais de

ldquoluta ou fugardquo Esse sistema eacute capaz de diferenciar sons de frequecircncias e intensidades

relevantes para a sobrevivecircncia do indiviacuteduo em seu meio ambiente (WESTMAN amp

WALTERS 1981)

15

A percepccedilatildeo do som colabora no balanccedilo homeostaacutetico do sistema nervoso

central influenciando consequentemente o equiliacutebrio fisioloacutegico de forma geral atraveacutes

dos centros autonocircmicos e neuroendoacutecrinos do hipotaacutelamo variando em resposta

conforme o significado do estiacutemulo sonoro e sua intensidade previsibilidade

variabilidade e complexidade

Nesse contexto as respostas fundamentais ao som satildeo de orientaccedilatildeo reflexo de

surpresa e de defesa Sendo a resposta de orientaccedilatildeo fundamental por ser a reaccedilatildeo

comportamental de busca pela fonte sonora permitindo que o indiviacuteduo se prepare para

a resposta necessaacuteria e caso o reconhecimento do som mostre ser esse de baixa

significacircncia a habituaccedilatildeo iraacute ocorrer diminuindo o grau da reaccedilatildeo

Jaacute o reflexo de surpresa iraacute ocorrer em resposta a sons repentinos de alta

intensidade e caraacuteter assustador podendo ser atenuado quando o indiviacuteduo sabe que ele

iraacute ocorrer e podendo ser exacerbado em situaccedilotildees de tensatildeo medo e de abalo

emocional

E a resposta de defesa acontece em resposta a sons de significado intensidade e

duraccedilatildeo relacionados agrave ameaccedila onde haacute excitaccedilatildeo emocional e preparaccedilatildeo dos sistemas

para a accedilatildeo consistindo na resposta de estresse (WESTMAN amp WALTERS 1981)

Alguns sons adquirem significado particular para o indiviacuteduo representando

perigo em potencial assim como os sons de caracteriacutesticas ameaccediladoras Mas

geralmente o significado conotativo de um som potencialmente ameaccedilador estaacute no fato

de ser desconhecido e apresentar mudanccedilas raacutepidas de intensidade aleacutem das associaccedilotildees

extra-auditivas relacionadas a ele Aleacutem disso a previsibilidade desse estiacutemulo sonoro

tambeacutem poderaacute constituir um fator determinante na resposta jaacute que sons imprevisiacuteveis

caracterizam-se como um estiacutemulo estressor maior desencadeando uma reduccedilatildeo geral

de performance e uma baixa toleracircncia a frustraccedilotildees (WESTMAN amp WALTERS

1981)

Os catildees particularmente apresentam muita sensibilidade a estiacutemulos sonoros

visto que seu sistema auditivo eacute extremamente desenvolvido especialmente com a

funccedilatildeo de caccedila e guarda Poreacutem a resposta de defesa exagerada dos indiviacuteduos dessa

espeacutecie tem sido relatada principalmente aos sons de fogos de artifiacutecio trovatildeo e tiro de

16

armas de fogo Provavelmente o caraacuteter imprevisiacutevel a conotaccedilatildeo negativa que a

espeacutecie apresenta a esses sons e a intensidade proacutexima ao limiar de audiccedilatildeo possa

justificar tal reaccedilatildeo (HYDBRING et al 2004)

E eacute com base nessa reaccedilatildeo desmedida que os estiacutemulos sonoros como os sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio vecircm sendo utilizados como modelos de estresse em catildees

(HYDBRING et al 2004 ENGELAND et al 1990) Representando uma opccedilatildeo para o

estudo da reatividade ao estresse que pode ser comparada ao modelo de estresse

acuacutestico de sobressalto em ratos

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees

Ao iniciar um estudo a respeito de uma espeacutecie deve-se ter em mente que cada

sujeito analisado natildeo eacute um sistema inerte e fechado mas sim um somatoacuterio de eventos

que possibilitam ter um exame mais amplo e completo das interaccedilotildees do animal com o

ambiente (SULTAN 2003 BATESON et al 2004)

Assim o estudo comportamental se mostra uma importante ferramenta pois

permite entender que processos bioloacutegicos satildeo compostos por eventos fisioloacutegicos e

psicoloacutegicos natildeo havendo exclusatildeo entre eles mas sim uma sobreposiccedilatildeo com fortes

correlaccedilotildees (HARVERBEKE et al 2008 BEERDA 1999 SPANGENBERG 2006

MONTANHA et al 2009) Conhecer a etologia canina iraacute permitir uma melhor

utilizaccedilatildeo do animal respeitando seus limites e possibilitando a manutenccedilatildeo fiacutesica e

mental dentro dos padrotildees de bem-estar da espeacutecie (SNOWDON 1999 DAWNKINS

1989 DARWIN 2004)

Com relaccedilatildeo ao bem-estar Broom amp Johnson (1993) e Broom amp Fraser (2010)

definem como o estado de um animal em relaccedilatildeo agraves suas tentativas de se adaptar ao

meio em que vive Para os animais domeacutesticos principalmente para os animais de

companhia esse eacute um conceito que muitas vezes pode ser confundido e mal aplicado

pelo homem agrave medida que esse confronta a realidade do animal com a sua proacutepria

passando a adequar paracircmetros humanos a esses animais

Os catildees satildeo marcados pela socializaccedilatildeo baseada em relaccedilotildees familiares com

organizaccedilotildees flexiacuteveis e respostas a um liacuteder aleacutem de possuiacuterem necessidade de

17

ambientes complexos e variados marcadamente importantes na vida gregaacuteria de seus

ancestrais (BROOM amp FRASER 2010)

Pensando nisso um manejo inadequado pode ter consequecircncias que variam

desde alteraccedilotildees comportamentais a quadros patoloacutegicos tendo como agravantes

alteraccedilotildees substanciais nos seus niacuteveis de bem-estar

Poreacutem o estudo do comportamento animal ainda se mostra bastante pioneiro jaacute

que as pesquisas cientiacuteficas a niacutevel cliacutenico comeccedilaram a ser realizados haacute poucas

deacutecadas em animais com problemas comportamentais

Dessa forma se faz presente a necessidade de um maior desenvolvimento de

estudos e pesquisas nesse sentido visto que os problemas comportamentais satildeo

apontados como a principal causa de abandono ou morte de animais de companhia

apresentando maior nuacutemero de relatos do que as doenccedilas infecciosas neoplaacutesicas e

metaboacutelicas concomitantes (OVERALL et al 2001)

A relaccedilatildeo homem-animal eacute muito antiga mas eacute pouco estudada E isso faz com

que o diagnoacutestico e o tratamento dos distuacuterbios comportamentais sejam dificultados

Muitas vezes a origem dos problemas comportamentais estaacute ligada ao tipo de

relacionamento existente entre o homem e o seu animal E isso acontece porque os

animais passam por processos de humanizaccedilatildeo para se adaptarem ao modo e ao estilo de

vida do seu proprietaacuterio nem que para isso tenham que modificar as suas caracteriacutesticas

naturais (OVERALL et al 2001)

Embora os catildees apresentem uma flexibilidade comportamental as exigecircncias

criadas pelos seus proprietaacuterios podem desencadear conflitos e frustraccedilotildees que levam ao

aparecimento de problemas comportamentais (OVERALL et al 2001)

Com frequecircncia o stress ou a ansiedade estatildeo relacionados com o ambiente e

mostram que o limiar entre normal e anormal varia entre indiviacuteduos (BEAVER 2005)

O rompimento da homeostase pode resultar de estimulaccedilatildeo interna externa ou

ambos E o potencial de ruptura da homeostase aumenta com a magnitude do desafio

(APPLEBY amp PLUIJMAKERS 2004) Dessa forma sendo a fobia um transtorno de

reaccedilotildees exageradas e desproporcionais ao real grau de importacircncia do estimulo

18

estressor podemos sugerir que o indiviacuteduo foacutebico eacute mais susceptiacutevel ao estresse de

forma geral reagindo com paracircmetros mais facilmente alterados

26 Fobia em catildees

Medo e ansiedade satildeo funccedilotildees adaptativas de sobrevivecircncia que sinalizam para o

organismo a presenccedila de perigo em potencial no ambiente O medo eacute a resposta

imediata acionada por um evento ou objeto potencialmente nocivo e ansiedade envolve

processos cognitivos mais complexos como antecipaccedilatildeo e preocupaccedilatildeo com

hipervigilacircncia diante de um perigo iminente no ambiente (FEINSTEIN et al 2011)

Entre as respostas comportamentais e fisioloacutegicas claacutessicas imediatas do medo

destacam-se o congelamento sobressalto aumento da frequecircncia cardiacuteaca alteraccedilotildees da

pressatildeo arterial e aumento da vigilacircncia Satildeo respostas comportamentais e perceptivas

que facilitam as respostas defensivas como a fuga e esquiva de forma apropriada afim

de reduzir o perigo ou lesatildeo (CHUDASAMA 2009)

O neurocircuito do medo envolve principalmente a amiacutegdala estrutura cerebral

responsaacutevel pela detecccedilatildeo geraccedilatildeo e manutenccedilatildeo das emoccedilotildees relacionadas ao medo e

ansiedade Eacute uma estrutura complexa pertencente ao sistema liacutembico que consiste em

aproximadamente 10 nuacutecleos que coordenam respostas apropriadas agrave ameaccedila e ao

perigo atraveacutes das respostas comportamentais cardiovasculares e endoacutecrinas ao

estresse (ROSEN amp SCHULKIN 1998)

A amiacutegdala faz ligaccedilotildees entre as aacutereas do coacutertex cerebral e recebe informaccedilotildees

de todos os sistemas sensoriais permite a integraccedilatildeo da informaccedilatildeo proveniente das

diversas aacutereas atraveacutes de conexotildees excitatoacuterias e inibitoacuterias

Os nuacutecleos basolaterais satildeo as principais portas de entrada da amiacutegdala

recebendo informaccedilotildees sensoriais e auditivas vindas do taacutelamo coacutertex sensorial e

associativo (Figura 3) Ele estaacute sob tocircnica inibiccedilatildeo GABAeacutergica e quando bloqueada

esta inibiccedilatildeo resulta em aumento do comportamento de ansiedade com ativaccedilatildeo

cardiovascular simpaticamente mediada (KESSLER et al 2005)

19

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional A informaccedilatildeo

sensoacuteria eacute transmitida para o taacutelamo atraveacutes da via leminiscal A aferecircncia auditiva chega na

divisatildeo ventral do nuacutecleo geniculado medial e projeta-se para o coacutertex auditivo primaacuterio

enquanto outras vias extra leminiscais carreiam informaccedilotildees auditivas para outras partes do

taacutelamo como a divisatildeo medial do nuacutecleo geniculado medial e nuacutecleos intralaminares

posteriores que se projetam tanto para o coacutertex auditivo primaacuterio quanto para o coacutertex auditivo

associativo assim como para os nuacutecleos basolaterias da amiacutegdala Essa via do taacutelamo para

amiacutegdala eacute implicada na aprendizagem emocional (IVERSEN et al 2003)

A amiacutegdala ventrolateral em seres humanos eacute mais sensiacutevel aos estiacutemulos

negativos (especialmente se os estiacutemulos sinalizam informaccedilatildeo negativa iminente) E a

amiacutegdala centromedial (CMA) dorsal tem projeccedilotildees principalmente subcorticais

especialmente aquelas ligadas ao hipotaacutelamo lateral e substacircncia cinzenta periaquedutal

(PAG) Essas projeccedilotildees podem explicar em parte as respostas fisioloacutegicas associadas

ao medo com o hipotaacutelamo (Figura 4) (KESSLER et al 2005)

Kandel 2003

20

Figura 4 Conexotildees diretas entre o nuacutecleo central da amiacutegdala e uma variedade de aacutereas

hipotalacircmicas e do tronco encefaacutelico envolvidas no medo e na ansiedade (IVERSEN et al

2003)

O Locus coeruleus importante nuacutecleo com grande densidade de neurocircnios

noradreneacutergicos com papel no desencadeamento da resposta ao estresse e das reaccedilotildees de

fuga tem tambeacutem papel importante no controle do medo A desregulaccedilatildeo desse nuacutecleo

parece ter relaccedilatildeo com o aparecimento do pacircnico e fobias em humanos (CHARNEY

1984) certamente atraveacutes de sua ligaccedilatildeo ao sistema liacutembico (CHARNEY 1984)

Medos podem desenvolver-se gradualmente e pode haver variaccedilatildeo na resposta

Em contraste fobias geralmente se desenvolvem rapidamente e uma vez desenvolvidas

haacute pouca mudanccedila em sua apresentaccedilatildeo entre as seacuteries Situaccedilotildees indutoras de fobia ou

satildeo evitadas a todo custo pelo foacutebico ou se inevitaacutevel satildeo suportadas com intensa

ansiedade e sofrimento (OVERALL 2010)

A Associaccedilatildeo Norte Americana de Psiquiatria no manual de diagnoacutestico e

estatiacutestica de transtornos mentais (DSM-IV-TR 2002) e a CID-10 (1993) definem em

humanos fobias especiacuteficas como medos irracionais excessivos acentuados e

persistentes revelados pela presenccedila ou antecipaccedilatildeo de um objeto situaccedilatildeo ou

atividade foacutebica especiacutefica de forma desproporcional acompanhados de

comportamentos de fuga esquiva antecipaccedilatildeo ansiosa e intenso sofrimento

Geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase fisioloacutegica

mas leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas ao medo

21

coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o eixo

HHA e o Sistema Nervoso Simpaacutetico

Em catildees natildeo haacute ateacute o momento descrito na literatura uma definiccedilatildeo oficial para

tal transtorno

As fobias satildeo transtornos de ansiedade de difiacutecil cura e geralmente a memoacuteria

de uma resposta foacutebica pode desencadear outros transtornos de ansiedade Dessa forma

o tratamento tem importacircncia natildeo soacute pela questatildeo do bem-estar e qualidade de vida

mas tambeacutem devido a seus componentes de comorbidade (OVERALL 2010)

Resposta exagerada a sons de trovatildeo estatildeo entre as doenccedilas comportamentais

mais comumente associados com pacircnico ou fobia em catildees Ocorre geralmente em

todas as raccedilas embora natildeo existam dados sobre a incidecircncia relativa destes problemas

(OVERALL et al 2001 DUNHAM amp FRANK 2001 VOITH amp BORCHELT 1985)

A fobia agrave sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio constitui uma classe que apresenta

resposta extrema repentina e profunda e que apesar de existir uma variaccedilatildeo consideraacutevel

nas respostas dos catildees (BEERDA SCHILDER VAN HOOFF VRIES 1997) no geral

se manifesta com comportamentos de ansiedade associados com atividades acentuadas

do sistema nervoso simpaacutetico Os comportamentos podem incluir catatonia ou mania

concomitante com diminuiccedilatildeo da sensibilidade ou capacidade de resposta agrave dor ou

estiacutemulos sociais aleacutem de fuga vocalizaccedilatildeo salivaccedilatildeo micccedilatildeo defecaccedilatildeo tremores

comportamentos autodestrutivos e ateacute convulsotildees (OVERALL 2010 SHULL-

SELCER amp STAGG 1991)

Jaacute se sabe que existe um fator hereditaacuterio para esse tipo de fobia e embora os

mecanismos pelos quais ela ocorre ainda natildeo sejam compreendidos parece estar em

alguma alteraccedilatildeo na forma como a informaccedilatildeo eacute processada entre a amiacutegdala e o coacutertex

(OVERALL 2010)

E como ansiedade medos e fobias satildeo queixas comportamentais comuns e

problemaacuteticas dos donos de catildees a falta de tratamento pode resultar no rompimento do

viacutenculo humano-animal e posterior abandono desistecircncia ou ateacute mesmo eutanaacutesia do

catildeo afetado (MILLS etal 2003)

22

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental

Os procedimentos experimentais foram realizados na Estaccedilatildeo experimental de

Parasitologia Veterinaacuteria do Departamento de Parasitologia Animal (DPA) da

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) e no Laboratoacuterio de Fisiologia

Animal do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas (DCF) da UFRRJ Todos os

procedimentos estatildeo de acordo com a lei de bem-estar animal Instruccedilatildeo Normativa ndeg

56 de 2008 O presente experimento encontra-se aprovado pelo Comitecirc de Eacutetica na

Pesquisa da UFRRJ CEUA-IB nordm 2308347962014-14

32 Animais

Foram entrevistados 35 proprietaacuterios de catildees entre os quais foram selecionados

28 com 2 a 6 anos de idade pesando de 10 a 30 Kg doacuteceis saudaacuteveis com vacinas e

vermifugaccedilatildeo em dia do muniacutecipio de Seropeacutedica-RJ

Proprietaacuterios de animais com medo de sons de trovatildeo e fogos de artificio

interessados em participar do estudo e proprietaacuterios de animais sem medo convidados a

participar do estudo incialmente responderam a um formulaacuterio de cadastro dos

animais contendo dados gerais e histoacuterico de respostas comportamentais em geral

(Anexo 1) Em seguida os animais foram submetidos a um exame cliacutenico baacutesico que

constitiu em inspeccedilatildeo palpaccedilatildeo auscultaccedilatildeo e termometria retal e um exame

neuroloacutegico para descartar doenccedilas concomitantes (Anexo 2) Foram dispensados

animais arredios agressivos com peso ou idade fora da faixa estabelecida no criteacuterio de

seleccedilatildeo e animais doentes Os animais selecionados foram caracterizados como foacutebicos

e natildeo-foacutebicos a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio e entatildeo submetidos uma uacutenica vez ao

modelo de estresse sonoro A caracterizaccedilatildeo de animais foacutebicos foi realizada conforme

as respostas dos proprietaacuterios ao questionaacuterio de reaccedilotildees comportamentais aos sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009 CROWELL-

DAVIS 2003) (Anexo 3)

23

Meios de divulgaccedilatildeo do estudo atraveacutes de folder e cartazes de divulgaccedilatildeo do projeto

veiculado pela internet e afixado em diversos estabelecimentos veterinaacuterios no

municiacutepio e pela UFRRJ (Anexo 4)

Avaliaccedilatildeo comportamental atraveacutes de entrevista com o proprietaacuterio (questionaacuterio

adaptado de OVERALL 1997) (Anexo 1)

321 Consideraccedilotildees eacuteticas

A participaccedilatildeo no estudo ocorreu somente com a autorizaccedilatildeo dos entrevistados

mediante um termo de consentimento em que se garantia plena liberdade para

interromper a participaccedilatildeo quando desejado (Anexo 5) Natildeo houve riscos agrave sauacutede fiacutesica

ou mental dos animais que participaram do projeto

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som

Os catildees foram selecionados para compor os grupos conforme as respostas ao

questionaacuterio comportamental previamente preenchido pelo proprietaacuterio

O questionaacuterio especiacutefico para medo de sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio

(Anexo 3) eacute composto de alguns paracircmetros comportamentais comuns em catildees foacutebicos

como atitude destrutiva eliminaccedilatildeo inadequada salivaccedilatildeo excessiva vocalizaccedilatildeo

esconder passadas arfar procurar pelo proprietaacuterio auto-trauma tremor Esses

parametros foram ainda classificados em escala de 0 (comportamento nunca observado)

a 5 (comportamento frequente e grave) (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009

CROWELL-DAVIS 2003)

Os catildees foram considerados aptos a participarem do grupo Foacutebicotrovatildeo e

Foacutebicosfogos quando

Apresentaram pelo menos trecircs dos comportamentos anteriores durante

o som de trovatildeo ou fogos de artifiacutecio com escore igual ou maior que 3

ou algum item com escore maacuteximo (5)

Ou as atitudes do animal no momento do som apresentaram risco a sauacutede

e integridade fiacutesica

E quando as respostas comportamentais foram apresentadas na maior

parte do tempo durante o estiacutemulo

24

33 Procedimentos Experimentais

O protocolo experimental foi realizado individualmente iniciando-se sempre agraves

9 horas da manhatilde Um pesquisador acompanhado de um pesquisador colaborador

realizou todo o protocolo experimental sem se ausentar em nenhuma etapa do

experimento

Dias antes do experimento os animais foram submetidos a um exame cliacutenico e

os proprietaacuterios responderam a questionaacuterios (Anexo 1 e 3) referentes ao manejo e

comportamento do animal

A partir dos dados dos questionaacuterios os animais foram classificados conforme

as respostas dadas referente ao medo de trovatildeo e fogos de artiacutefiacutecio entre animais com

histoacuterico comportamental de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Foacutebicos) e

animais historicamente natildeo foacutebicos a esses sons (Natildeo-foacutebicos)

No dia do experimento cada animal foi submetido a inserccedilatildeo de um cateacuteter de

silicone endovenoso para coleta de sangue ainda em sua moradia (amostra 1 casa) e a

colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro (Polar Pro Trainer RS800CX) Os animais permaneceram

com o frequenciacutemetro durante todo o protocolo experimental

Apoacutes a colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro os animais permaneceram no mesmo local

por 10 minutos para adaptaccedilatildeo ao frequeciacutemetro e registro dos dados de VIC do

momento basal 1 (casa) Em seguida cada animal foi transportado para o laboratoacuterio

onde foi executado o modelo de estresse sonoro agudo O transporte foi realizado

acondicionando o animal numa caixa de transporte num carro de passeio com

ventilaccedilatildeo adequada

Apoacutes a chegada ao local do experimento os animais permaneceram na sala sem

manipulaccedilatildeo e sem interaccedilatildeo por parte dos pesquisadores por 30 minutos para registro

dos dados de VIC do momento basal 2 (laboratoacuterio) Em seguida foi coletada a

segunda amostra de sangue (amostra 2 laboratoacuterio)

O estiacutemulo sonoro consistiu numa gravaccedilatildeo de sons de trovatildeo e outra de sons de

fogos de artifiacutecio numa intensidade sonora maacutexima de 103-104 dB e duraccedilatildeo de 2

minutos e 30 segundos (MACCARIELLO 2012)

Durante e apoacutes o fim do estiacutemulo sonoro cada animal permaneceu sem qualquer

manipulaccedilatildeo A terceira coleta de sangue foi realizada 5 minutos apoacutes o teacutermino do

estresse (amostra 3) a quarta aos 15 minutos (amostra 4) a quinta aos 30 minutos

(amostra 5) e a sexta coleta aos 60 minutos apoacutes o teacutermino do estresse (amostra 6)

25

A filmagem foi realizada durante todo o experimento para registrar as reaccedilotildees

comportamentais

Apoacutes a uacuteltima coleta o polar foi retirado e o animal levado de volta para sua

casa no mesmo transporte e nas mesmas condiccedilotildees em que veio

Figura 5 Esquema do protocolo experimental

331 Estiacutemulo Sonoro

Os estiacutemulos sonoros consistiram de uma gravaccedilatildeo com duraccedilatildeo de 2 minutos e

30 segundos de sons de trovatildeo mixados alternadamente a partir de dois arquivos

sonoros no formato wave (ldquovery loud thunder close thunder crackrdquo e ldquohigh quality

stereo sound of a major thunder clap during a stormrdquo) e outra gravaccedilatildeo de sons de

fogos de artifiacutecio mixado de um arquivo sonoro no formato wave (ldquocontinuous

fireworkrdquo) adquiridos no endereccedilo eletrocircnico httpwwwsound-effectcom

O formato utilizado possui a vantagem de ser uma gravaccedilatildeo que preserva todas

as variaccedilotildees de frequecircncia do som original A intensidade do som foi padronizada

atraveacutes de um decibeliacutemetro modelo BK Precision 732A Sound Level Meters a 103-

104 dB por ser uma pressatildeo sonora capaz de aumentar as concentraccedilotildees de cortisol

seacuterico em catildees estando abaixo dos limites que possam causar danos ao aparelho

auditivo (ISING et al 1999)

O estiacutemulo sonoro foi emitido por um aparelho de som (Pioneer home theater

DVD 120w RMS) com 5 caixas de som acopladas Cada animal foi posicionado a um

metro das caixas de som Para observaccedilatildeo das reaccedilotildees comportamentais cada animal foi

contido apenas por uma guia solta de 15 m podendo reagir e se locomover

naturalmente sem intervenccedilotildees

vi

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a meu amado marido Rodrigo que me apoiou incondicionalmente em

todos os momentos bons e difiacuteceis nesses dois anos de pesquisa me ajudando do

trabalho braccedilal ao apoio emocional sempre acreditando que eu era capaz

Agradeccedilo a meus familiares queridos agrave Helena que mesmo precisando de meus

cuidados e atenccedilatildeo foi compreensiva me ajudando e me dando todo o carinho quando

eu mais precisava A meus avoacutes pelo amor incondicional meus pais Carlos e Cris e a

minha irmatilde Catarine que mesmo agrave distacircncia participaram de tudo e se fizeram sempre

presentes A meus sogros queridos Anna e Aluisio e a meu cunhado Rocircmulo sempre

me apoiando e dando forccedila no dia a dia para que eu desse conta de tudo

Agradeccedilo imensamente aos catildees que foram todos maravilhosos e agrave seus

proprietaacuterios que sem medir esforccedilos ajudaram muito em nossa pesquisa colaborando

e confiando seus animais a noacutes

Agradeccedilo agrave Raquel por me ajudar nos estudos na pesquisa no experimento

sempre com muita dedicaccedilatildeo Agrave Marissa querida por dedicar muitas de suas manhatildes

para me ajudar com os catildees Agrave Julia sempre com seus conselhos saacutebios e oportunos

Agradeccedilo agraves meninas do grupo de estudo em Medicina Alternativa Beth

Morgana Giulia Alana Renata Tati que fizeram me sentir parte de um grupo de

trabalho e amizade

A meus queridos colegas de curso Raoni Bruno Debora Liacutevia Gabi e Joice

que passaram comigo momentos de muito estudo dedicaccedilatildeo e cansaccedilo sempre

transformando os momentos mais tensos em divertimento

Agradeccedilo aos professores do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas por me

guiarem no caminho do conhecimento e da ciecircncia

Agradeccedilo ao professor Argemiro pelo imenso apoio e acolhimento quando

mais precisamos

Agradeccedilo a banca pela disponibilidade em contribuir com nosso trabalho

Agradeccedilo agraves agecircncias de fomento CAPES e FAPERJ

E finalmente agradeccedilo a minha orientadora Magda por esse projeto e por ter

sido a primeira a acreditar que eu era capaz e que chegariacuteamos ateacute aqui Sempre com

muita paciecircncia me explicando explicando e explicando caminhou comigo

ultrapassando as dificuldades natildeo me deixando desistir nunca

vii

RESUMO

FRANZINI Carla Caroline de Souza Respostas autonocircmicas e comportamentais ao

estresse sonoro agudo em catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de

trovatildeo eou fogos de artifiacutecio 2015 102 p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias

Fisioloacutegicas) Instituto de Biologia Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

Seropeacutedica RJ 2015

O estresse eacute a situaccedilatildeo gerada por um desafio ao qual um organismo estaacute submetido E

apesar da resposta de estresse ser fundamental para homeostase a persistecircncia do

estiacutemulo estressor ou o exagero na resposta pode provocar consequecircncias deleteacuterias para

o indiviacuteduo A fobia eacute considerada um transtorno de ansiedade onde o medo (estado

emocional em resposta a uma situaccedilatildeo de perigo) eacute persistente e excessivo o que resulta

num aumento da reatividade ao estresse Nesse contexto vaacuterios estiacutemulos satildeo

considerados estressores em catildees e a exposiccedilatildeo a estiacutemulos sonoros como trovotildees e

fogos de artifiacutecio representa uma opccedilatildeo natural para o estudo da reatividade ao estresse

Desta forma avaliamos a reatividade de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a

sons de trovatildeo eou fogos de artifiacutecio a um modelo de estresse sonoro agudo atraveacutes da

anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e de paracircmetros comportamentais

Foram utilizados 28 catildees de companhia de diversas raccedilas de 2 a 6 anos pesando de 10

a 30 Kg sem sinais de outras doenccedilas provenientes de proprietaacuterios voluntaacuterios do

municipio de Seropeacutedica-RJ Estes foram selecionados por questionaacuterio referente a

intensidade do medo de trovatildeo e fogos de artifiacutecio dividos em grupos de foacutebicos e natildeo

foacutebicos e ainda entre os estiacutemulos som de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O estiacutemulo sonoro

consistiu numa gravaccedilatildeo padronizada de 25 minutos a uma intensidade sonora maacutexima

de 103-104 dB Para a anaacutelise da VIC os intervalos RR foram registrados atraveacutes de

frequenciacutemetro (Polarreg modelo RS800CX) computados e analisados pelo programa

CardioSeries 241 Tambeacutem foram avaliados o perfil dos proprietaacuterios caracteriacutesticas

gerais (peso idade raccedila e sexo) e de manejo dos animais Natildeo foram detectadas

diferenccedilas no perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios nem caracteriacutesticas gerais ou de

manejo entre animais foacutebicos e natildeo-foacutebicos O estiacutemulo sonoro (trovatildeo ou fogos) foi

capaz produzir aumento significativo da razatildeo LFHF tanto em animais natildeo-foacutebicos

como em animais foacutebicos No entanto a magnitude do aumento na razatildeo LFHF

produzida pelo som foi significativamente maior em animais foacutebicos do que em animais

natildeo-foacutebicos O modelo de estresse sonoro agudo produziu um aumento nos

comportamentos de vigilacircncia tremer e se esconder Apenas animais foacutebicos

submetidos ao modelo som de fogos apresentaram respostas comportamentais

significativamente mais intensas que catildees natildeo-foacutebicos nos paracircmetros Tremer Se

Esconder Vigilacircncia e Salivaccedilatildeo As respostas comportamentais descritas pelos

proprietaacuterios e as exibidas pelos catildees durante o modelo de estresse foram

correlacionadas apenas nos paracircmetros Tremer e Se Esconder Foi detectada correlaccedilatildeo

significativa entre os valores da razatildeo LFHF e os seguintes paracircmetros

comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio Arfar Tremer Se Esconder Fugir

Inquietaccedilatildeo Vigilacircncia Salivaccedilatildeo e Sobressalto O modelo utilizado foi capaz de

induzir respostas comportamentais e autonocircmicas de estresse e se mostra uma boa

ferramenta na mensuraccedilatildeo da magnitude das respostas de estresse de animais de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e pode ser

utilizado na avaliaccedilatildeo de novos caminhos terapecircuticos

Palavras-chaves estresse em catildeo variabilidade do intervalo cardiacuteaco comportamento

fobia a sons

viii

ABSTRACT

FRANZINI Carla Caroline de Souza Autonomic and behavioural responses to noise

acute stress in companion dogs with phobia of thunder andor fireworks sounds 2015 p 105 Thesis (MA in Physiological Sciences) Institute of Biology Federal Rural

University of Rio de Janeiro Seropeacutedica RJ 2015

Stress is a situation caused by a challenge in which a body is subject And despite the

stress response is essential for homeostasis the persistence of the stressor stimulus or

exaggerated response can induce deleterious consequences A phobia is considered an

anxiety disorder where the fear (emotional state in response to a situation of danger) is

persistent and excessive which results in increased reactivity to stress In this context

many stimuli are considered stressors in dogs and the exposure to noise stimuli as

thunder and fireworks is a natural choice for the study of reactivity to stress Thus we

have evaluated the reactivity of companion dogs with history of phobia of the thunder

sounds andor fireworks to an acute acoustic stress model by analysing the variability

of Cardiac Interval (VCI) and behavioural parameters We used 28 companion dogs

different breeds 2 to 6 years old weighing 10 to 30 kg with no signs of other diseases

from volunteers owners of City of Seropeacutedica-RJ The dogs were selected by

questionnaire on the intensity of the fear of thunder and fireworks divided in phobic or

not phobic and between the stimuli sound of thunder or fireworks The sound stimulus

consisted of a standardized recording from 25 minutes to a maximum intensity of

sound of 103-104 dB For the analysis of VCI RR intervals were recorded through

frequency meter (Polar reg RS800CX model) stored and analysed using CardioSeries

241 sofware We also evaluated the profile of the owners general characteristics

(weight age race and gender) and handling of animals No differences were found in

the socioeconomic profile of the owners or general characteristics or animal handling

between phobic and non-phobic dogs The sound stimulus (thunder or fireworks) was

able to induce a significant increase in LF HF ratio in both non-phobic animals and

phobic animals However the magnitude of the sound-induced increase in the LFHF

was significantly higher in phobic than in non-phobic animals The acute sound stress

model produced an increase in the behaviour of surveillance trembling and hiding Only

phobic animals submitted to fireworks sound model had significantly more intense

behavioural responses than non-phobic dogs in the behaviours Shivering Hiding

Surveillance and Salivation Behavioural responses described by the owners and shown

by dogs during the stress model were correlated only in the behaviours Shivering and

Hiding Significant correlation was found between the ratio values LF HF and the

following behavioural parameters induced by sound in the laboratory Panting

Shivering Hiding Escape Shockwave Surveillance Salivation and Startle The sound

model was able to induce behavioural and autonomic responses of stress and it shown a

good tool to measure the magnitude of stress responses in the companion dogs with

history of phobia of thunder and fireworks sounds and it can be used in the study of new

therapeutic targets

Keywords stress in dogs variability of cardiac interval behaviour noise phobia

ix

LISTA DE TABELAS E FIGURAS

Tabela 1 Descriccedilatildeo dos 14 paracircmetros comportamentais analisados 31

Tabela 2 Perfil geral dos proprietaacuterios 33

Tabela 3 Perfil dos proprietaacuterios dos catildees segundo os grupos natildeo-foacutebicos e foacutebicos 34

Tabela 4Caracteriacutesticas gerais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 35

Tabela 5 Caracteriacutesticas de manejo dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 36

Tabela 6 Caracteriacutesticas comportamentais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 38

Tabela 7 Paracircmetros comportamentais avaliados no experimento 47

Tabela 8 Correlaccedilatildeo entre paracircmetros comportamentais avaliados pelos proprietaacuterios e

os avaliados durante o experimento 51

Figura 1Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA 8

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC 13

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional 19

Figura 4 Conexotildees nuacutecleo central da amiacutegdala 20

Figura 5 Esquema do protocolo experimental 25

Figura 6 Catildeo no momento do som 26

Figura 7 Componentes do Polar modelo RS800CX 27

Figura 8 Tela inicial do programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 9 Graacutefico confeccionado pelo programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 10 Tela do programa CardioSeries demonstrando a razatildeo entre os componentes de

frequecircncia LF e HF a partir da FFT 30

Figura 11 Paracircmetros avaliados segundo proprietaacuterio 40

Figura 12 Razatildeo LFHF de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos a sons de Trovatildeo eou Fogos de

Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 41

Figura 13 LF (componente de baixa frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos submetidos ao

estresse sonoro agudo atraveacutes de sons de Trovatildeo e Fogos de Artifiacutecio 42

Figura 14 HF (componente de alta frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo-foacutebicos a sons de

Trovatildeo eou Fogos de Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 44

Figura 15 FC (Frequecircncia Cardiacuteaca Meacutedia) dos catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

Figura 16 RMSSD (raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado) de catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

x

Figura 17 Oito dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 49

Figura 18 Seis dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 50

Figura 19 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e os paracircmetros comportamentais segundo os proprietaacuterios 53

Figura 20 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e a razatildeo LFHF 54

xi

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS

AC Adenilatociclase

ACh Acetilcolina

ACTH Hormocircnio adrenocorticotroacutefico

AVP Vasopressina

CCP Corpos Celulares Preacute-ganglionares

CEUA Comissatildeo de Eacutetica no Uso de Animais

CRH Hormocircnio liberador de corticotropina

dB decibeacuteis

DCF Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas

DPA Departamento de Parasitologia Animal

FC Frequecircncia Cardiacuteaca

FFT Transformada Raacutepida de Fourier

GR Receptor de Glicocorticoacuteides

HF Frequecircncia alta

HHA Eixo Hipotaacutelamo Hipoacutefise Adrenal

IRR Intervalos RR

LC Locus Coeruleus

LF Frequecircncia baixa

MR Receptor de Mineralocorticoacuteide

NAV Nodo Atrioventricular

NA Noradrenalina

NS Nodo Sinoatrial

PKA Proteiacutena quinase dependente de AMPc

PVN Nuacutecleo Paraventricular do Hipotaacutelamo

RMSSD raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado

SAM Sistema Simpato-adreno-medular

SNA Sistema Nervoso Autocircnomo

SNC Sistema Nervoso Central

SNP Sistema Nervoso Parassimpaacutetico

SNS Sistema Nervoso Simpaacutetico

xii

SRD Sem raccedila definida

STDRR Desvio padratildeo de todos os intervalos RR do segmento

UFRRJ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

VIC Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco

xiii

SUMAacuteRIO

DEDICATOacuteRIA v

AGRADECIMENTOS vi

RESUMO vii

LISTA DE TABELAS E FIGURAS ix

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS xi

1 INTRODUCcedilAtildeO 1

11 Justificativa 3

12 Objetivos 4

121 Geral 4

122 Especiacuteficos 4

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 5

21 Estresse 5

22 Fisiologia do estresse 6

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse 10

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca 10

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) 12

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees 14

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees 16

26 Fobia em catildees 18

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS 22

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental 22

32 Animais 22

321 Consideraccedilotildees eacuteticas 23

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som 23

33 Procedimentos Experimentais 24

xiv

331 Estiacutemulo Sonoro 25

34 Grupos experimentais 26

35 Coletas de sangue 26

36 Uso do Frequenciacutemetro 27

37 Anaacutelise Espectral da VIC 27

38 Anaacutelise Comportamental 30

39 Anaacutelise Estatiacutestica 31

4 RESULTADOS 33

41 Perfil dos proprietaacuterios e caracteriacutesticas gerais dos animais 33

42 Anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco 41

43 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 46

44 Correlaccedilotildees entre os dados 51

5 DISCUSSAtildeO 55

51 Perfil dos proprietaacuterios e manejo dos animais 55

52 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e o estresse sonoro agudo 59

53 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 61

54 Correlaccedilotildees entre dados 62

55 O Modelo de Estresse Sonoro Agudo em Catildees 63

6 CONCLUSOtildeES 65

7 REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 67

8 ANEXOS 77

ANEXO 1 Ficha geral de cadastro 77

ANEXO 2 Ficha Neuroloacutegica 81

ANEXO 3 Ficha de avaliaccedilatildeo de Fobia 83

ANEXO 4 Folder de divulgaccedilatildeo 85

ANEXO 5 Termo de Consentimento 86

xv

ANEXO 6 Ficha de Protocolo Experimental 88

1

1 INTRODUCcedilAtildeO

Situaccedilotildees de estresse e medo fazem parte da vida de todos os animais e as

reaccedilotildees fisioloacutegicas provocadas por elas satildeo essenciais para sobrevivecircncia no meio

selvagem mas tambeacutem na vida urbana para aqueles animais que foram domesticados

acompanhando o homem em sua caminhada de vida em sociedade

A espeacutecie canina foi a que mais se envolveu com o homem tornando-se um

animal domeacutestico e dependente de cuidados sendo alvo de problemas sociais

ambientais e de sauacutede puacuteblica quando abandonados ou em vida livre pelas cidades e

comunidades

Essa relaccedilatildeo criada ao longo dos tempos entre os catildees e o homem trouxe para

os dias atuais um viacutenculo afetivo de ambas as espeacutecies modificando e ateacute selecionando

atraveacutes das raccedilas o comportamento canino acentuando caracteriacutesticas que podem estar

influenciando a forma dos catildees de lidar com as situaccedilotildees de estresse e medo no

cotidiano

A fisiologia do comportamento regula-se baseada nos estiacutemulos externos aos

quais o animal estaacute sujeito conforme suas necessidades de sobrevivecircncia e ateacute de bem

estar Dessa forma o estresse vem a ser responsaacutevel por modelar o comportamento de

um indiviacuteduo conforme seu modo de vida e sua exposiccedilatildeo a esses estiacutemulos

O estresse como mecanismo de adaptaccedilatildeo a situaccedilotildees adversas eacute extremamente

importante na manutenccedilatildeo da vida pois sem esse mecanismo qualquer situaccedilatildeo

desfavoraacutevel poderia causar morte imediata sendo a capacidade de responder

rapidamente a uma situaccedilatildeo de perigo uma importante caracteriacutestica da evoluccedilatildeo dos

seres

Mais especificamente em situaccedilotildees de estresse o organismo de um indiviacuteduo

redistribui sua energia e o sistema locomotor e sensorial satildeo priorizados em detrimento

de outros (reprodutivo digestivo e imune) fazendo assim com que a resposta

momentacircnea seja eficiente O problema comeccedila quando haacute a persistecircncia destas

situaccedilotildees e ou dessas respostas causando prejuiacutezo aos sistemas deprimidos

A influecircncia dos estiacutemulos sonoros tem demonstrado importacircncia cliacutenica na

espeacutecie canina jaacute que leva diversos indiviacuteduos a sofrerem alteraccedilotildees comportamentais e

2

neuroendoacutecrinas que podem evoluir para graves distuacuterbios comportamentais e

fisioloacutegicos como a fobia Em alguns casos de estresse crocircnico severo podem ocorrer

danos neurais doenccedilas gastrointestinais aleacutem da diminuiccedilatildeo da resposta imune

A fobia eacute descrita como um medo acentuado irracional persistente e excessivo

claramente discerniacutevel de objetos seres lugares ou situaccedilotildees de forma desproporcional

e exagerada acompanhada de comportamento de fuga esquiva antecipaccedilatildeo e intenso

sofrimento que geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase

fisioloacutegica mas que leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas

ao medo coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o

eixo Hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HPA) na liberaccedilatildeo de glicocorticoides e o sistema

nervoso simpaacutetico

Na fobia os limiares de ativaccedilatildeo dos circuitos neurais de medo estatildeo reduzidos

podendo ser observado no indiviacuteduo clara hiperexcitabilidade hipervigilacircncia e

aumento da responsividade comportamental aos estiacutemulos Idealmente os graus de

ativaccedilotildees seriam proporcionais agrave ameaccedila e uma adaptaccedilatildeo agrave situaccedilatildeo normalizaria a

resposta de estresse diminuindo-a conforme a ameaccedila desaparecesse o que natildeo ocorre

na fobia

Os criteacuterios para o diagnoacutestico de fobia em humanos costumam usar termos

que se referem a sintomas emocionais envolvendo sentimentos e estados de consciecircncia

subjetivos o que difiacuteculta a abordagem cientifica e cliacutenica nos animais Poreacutem as

alteraccedilotildees dos paracircmetros comportamentais e fisioloacutegicos dos sistemas

neuroendoacutecrinos envolvidos nesses distuacuterbios satildeo um caminho de estudo e pesquisa

Dessa forma os niacuteveis de estresse podem ser avaliados atraveacutes da mensuraccedilatildeo

de paracircmetros fisioloacutegicos e comportamentais Em vaacuterias espeacutecies o paracircmetro mais

utilizado eacute a dosagem de cortisol Aleacutem desse a anaacutelise da variabilidade do intervalo

cardiacuteaco (VIC) vem se mostrando um paracircmetro importante e natildeo invasivo para avaliar

o balanccedilo simpato-vagal em indiviacuteduos submetidos a estiacutemulos potencialmente

desafiadores As alteraccedilotildees comportamentais analisadas em conjunto com as anaacutelises

citadas a cima formam uma importante fonte de dados ainda natildeo correlacionadas nos

estudos mais recentes

Contudo o presente estudo teve como objetivo avaliar as respostas autonocircmicas

e comportamentais induzidas pelo estresse sonoro agudo em catildees de companhia com

3

histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O modelo de estresse utilizado

consiste em um meacutetodo natildeo invasivo e seguro uma vez que cada animal foi submetido

a um estiacutemulo sonoro (sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio) de curta duraccedilatildeo (25 min) a

uma intensidade sonora maacutexima de 1039 dB natildeo sendo capaz de causar efeitos

deleteacuterios para a audiccedilatildeo dos animais

Para tal foram utilizados 28 catildees de diversas raccedilas dos quais 16 eram

historicamente foacutebicos a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e 12 natildeo apresentavam

qualquer sinal de medo a esses sons Os animais foram dividos ainda entre submetidos

ao som de trovatildeo e submetidos ao som de fogos de artifiacutecio

Foram avaliados o balanccedilo simpato-vagal atraveacutes da mensuraccedilatildeo da VIC e 14

paracircmetros comportamentais aleacutem da coleta de amostras sanguiacuteneas em 6 momentos

para posterior anaacutelise dos niacuteveis seacutericos de cortisol

11 Justificativa

Animais e humanos satildeo constantemente submetidos a situaccedilotildees de estresse no

seu cotidiano Em catildees vaacuterios estiacutemulos podem ser considerados geradores de estresse

e sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio tecircm se mostrado estiacutemulos estressores importantes

devido agrave frequente ocorrecircncia de fobia a esses sons nesta espeacutecie

O tema escolhido eacute de grande importacircncia na atualidade uma vez que satildeo

necessaacuterias mais pesquisas sobre o efeito do estresse em humanos e animais Neste

sentido a avaliaccedilatildeo dos paracircmetros fisioloacutegicos em situaccedilotildees de estresse eacute uma forma

de estudar e compreender melhor os distuacuterbios relacionados ao estresse e traccedilar novos

caminhos terapecircuticos

Eacute relevante para a Medicina Veterinaacuteria e para a aacuterea de sauacutede como um todo

pois modelos de estresse sonoro agudo podem ser uacuteteis na verificaccedilatildeo da reatividade ao

estresse aleacutem de serem pouco invasivos e de relativa faacutecil execuccedilatildeo

4

12 Objetivos

121 Geral

Verificar as respostas fisioloacutegicas ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

122 Especiacuteficos

Avaliar o perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios as caracteriacutesticas gerais e

comportamentais e o manejo dos animais em catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

Avaliar a resposta autonocircmica a partir da anaacutelise espectral da variabilidade do

intervalo cardiacuteaco de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos

de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar a resposta comportamental de catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre o comportamento dos animais relatado pelos

proprietaacuterios durante a ocorrecircncia natural de trovotildees ou fogos e os comportamentos

exibidos pelos catildees em resposta ao modelo de estresse sonoro em laboratoacuterio

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre paracircmetros autonocircmicos e comportamentais em

catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

5

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

21 Estresse

O fisiologista Claude Bernard em 1872 definiu o conceito de meio interno pela

primeira vez como um princiacutepio do equiliacutebrio dinacircmico do meio interno essencial para

a sobrevivecircncia (FRANCI 2005)

Apesar disso foi Walter Canon em 1929 o responsaacutevel por definir esse

conceito da condiccedilatildeo de equiliacutebrio do meio interno criado por Claude Bernard com o

termo homeostase Aleacutem de ter reconhecidoos agentes desafiadores da homeostase

como fiacutesicos e emocionais e elaborado o conceito de ldquoreaccedilatildeo de emergecircnciardquo que

ocorre quando haacute um desafio capaz de ativar a liberaccedilatildeo de noradrenalina de terminais

nervosos simpaacuteticos e adrenalina da medula da adrenal (FRANCI 2005)

E mais recentemente entre 1946 e 1976 o fisiologista canadense Hans Selye

definiu ldquoa situaccedilatildeo gerada pelo desafio ao qual um organismo estaria submetidordquo com o

termo estresse E ao ocorrerem controveacutersias conceituais uma vez que natildeo se podia

distinguir a causa do efeito ele criou o termo estressor para designar o agente causador

(estiacutemulo) e manteve o termo estresse para designar a condiccedilatildeo gerada pelo estiacutemulo

desafiador (FRANCI 2005)

A resposta a um estiacutemulo estressor eacute fundamental para a homeostase de um ser

vivo e sua sobrevivecircncia Nas condiccedilotildees de estresse o organismo reage por meio da

ativaccedilatildeo e desativaccedilatildeo do mecanismo de controle de vaacuterias funccedilotildees para recuperar e

manter a homeostase No entanto essas respostas podem ser insuficientes para

restabelecer ou manter a homeostase ou podem ser exageradas representando risco de

doenccedilas Portanto o estresse pode ser definido como a soma de respostas fiacutesicas e

mentais causadas por determinados estiacutemulos externos e que permitem ao indiviacuteduo

superar determinadas exigecircncias do meio-ambiente (FRANCI 2005)

A reaccedilatildeo de estresse maximiza o gasto de energia que ajuda a preparar o corpo

para atender a uma situaccedilatildeo ameaccediladora ou desafiadora em que o indiviacuteduo tende a

mobilizar um grande esforccedilo a fim de lidar com o evento No entanto enquanto uma

certa quantidade de estresse eacute necessaacuteria para a sobrevivecircncia o estresse prolongado

pode afetar adversamente a sauacutede (BERNARD amp KRUPAT 1994)

6

Em situaccedilotildees de estresse ocorre a ativaccedilatildeo de duas principais vias o eixo

hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) atraveacutes do aumento da produccedilatildeo de cortisol e o

sistema nervoso simpaacutetico atraveacutes da liberaccedilatildeo de catecolaminas (Noradrenalina

Adrenalina)

A desregulaccedilatildeo de qualquer um desses sistemas de estresse pode levar a

distuacuterbios fisioloacutegicos de vaacuterios outros sistemas incluindo os sistemas imunoloacutegico

cardiovascular funccedilatildeo metaboacutelica e comportamento levando a maacute adaptaccedilatildeo da

resposta ao estresse (MARQUES et al 2010)

22 Fisiologia do estresse

Os estiacutemulos estressores podem ser definidos como aqueles que desafiam a

homeostase Esses estiacutemulos geram respostas que variam de acordo com a duraccedilatildeo e

intensidade e ainda com a predisposiccedilatildeo geneacutetica e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo

Os estiacutemulos causadores de estresse podem ser classificados em quatro grupos

estressores fiacutesicos e quiacutemicos (calor frio barulho radiaccedilatildeo intensa e substacircncias

toacutexicas) psicoloacutegicos (medo e frustraccedilatildeo) sociais (um ambiente hostil e rompimento de

relaccedilotildees) e os que alteram a homeostase vegetativa como em casos de exerciacutecio intenso

e hemorragias Quanto agrave duraccedilatildeo os estiacutemulos causadores de estresse podem ser ainda

classificados como agudos ou crocircnicos (PACAacuteK amp PALKOVITS 2001)

Moberg (2000) propotildee um modelo para compreensatildeo do estresse em toda

espeacutecie animal que sugere uma resposta bioloacutegica ao estresse a partir de trecircs estaacutegios

gerais

1ordm O reconhecimento de um estiacutemulo estressante

2deg A defesa bioloacutegica contra o estiacutemulo estressante

3deg As consequecircncias da resposta de estresse

Esta resposta ao estressor iraacute abranger aspectos cognitivos comportamentais e

fisioloacutegicos (MARGIS et al 2003)

Em uma situaccedilatildeo de estresse satildeo ativados o sistema simpato-adrenomedular

gerando o aumento da secreccedilatildeo de catecolaminas e logo excitaccedilatildeo raacutepida do sistema

cardiovascular ocasionando um aumento da frequecircncia cardiacuteaca e da pressatildeo arterial E

7

o outro eixo ativado eacute o hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) levando ao aumento na

produccedilatildeo de cortisol e naturalmente mobilizaccedilatildeo de energia (ULRICH-LAI amp

HERMAN 2009) (Figura 1)

As respostas de emergecircncia ativadas pelo SAM ocorrem quando o organismo se

prepara para a defesa ou ataque excretando adrenalina Entatildeoo suprimento de sangue eacute

desviado para os muacutesculos havendo elevaccedilatildeo do deacutebito cardiacuteaco total e da

redistribuiccedilatildeo sanguiacutenea aumentando a oferta de nutrientes e oxigecircnio para as estruturas

vitais A pressatildeo arterial se eleva e os bronquiolos se dilatam tornando a respiraccedilatildeo

mais raacutepida e profunda para retirada do dioacutexido de carbono excedente As funccedilotildees

digestivas e secretoacuterias diminuem aleacutem da reaccedilatildeo de aliacutevio com a liberaccedilatildeo de qualquer

excesso da bexiga e intestino A taxa metaboacutelica aumenta e a liberaccedilatildeo de endorfinas

diminue a sensibilidade agrave dor e os sentidos satildeo mantidos em estado de alerta

(ROGERSON 1997)

8

Figura 1 Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA A ativaccedilatildeo do sistema simpato-adrenomedular

(SAM) e do eixo do hipotaacutelamo hipoacutefise adrenal (HHA) como sistemas primaacuterios para a

manutenccedilatildeo e restabelecimento da homeostase A exposiccedilatildeo ao estressor resulta em ativaccedilatildeo de

neurocircnios preacute-ganglionares simpaacuteticos na coluna intermediolateral da medula espinhal

toracolombar (T1 a L2) Estes neurocircnios preacute-ganglionares se projetam para gacircnglios preacute e para

vertebrais que entatildeo terminam em oacutergatildeos alvo e nas ceacutelulas cromafins da medula da adrenal

Esta ativaccedilatildeo simpaacutetica (em ciacuterculos) representa a resposta claacutessica de luta e fuga que foi

primariamente caracterizada por Walter Cannon e colaboradores no iniacutecio do seacuteculo passado e

leva a um aumento dos niacuteveis de adrenalina (proveniente da adrenal) e de noradrenalina dos

terminais simpaacuteticos aumento da frequecircncia e da forccedila de contraccedilatildeo do coraccedilatildeo vasoconstriccedilatildeo

perifeacuterica e mobilizaccedilatildeo de energia O tocircnus parassimpaacutetico tambeacutem eacute mobilizado durante o

estresse No sistema parassimpaacutetico (em estrelas) representa a ativaccedilatildeo de nuacutecleos preacute-

ganglionares cracircnios-sacrais ativam nuacutecleos poacutes-ganglionares localizados proacuteximos aos oacutergatildeos

inervados com efeito geralmente oposto ao sistema simpaacutetico Para o eixo HHA a exposiccedilatildeo ao

estressor ativa neurocircnios hipofisiotroacuteficos no nuacutecleo paraventricular do hipotaacutelamo (PVN) que

secretam hormocircnios de liberaccedilatildeo como hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH) e

vasopressina (AVP) na circulaccedilatildeo porta da eminecircncia meacutedia Estes hormocircnios liberadores atuam

na hipoacutefise anterior para promover a secreccedilatildeo de hormocircnio adrenocorticotroacutefico (ACTH) que

atua no coacutertex da adrenal (zona fasciculata) para iniciar a siacutentese e liberaccedilatildeo dos hormocircnios

glicocorticoacuteides Os glicocorticoacuteides circulantes promovem a mobilizaccedilatildeo de energia estocada e

potencializam numerosos efeitos simpaacuteticos como a vasoconstriccedilatildeo perifeacuterica Aleacutem disso o

coacutertex da adrenal eacute diretamente inervado pelo sistema simpaacutetico que regula a liberaccedilatildeo de

glicocorticoacuteides Entatildeo a ativaccedilatildeo do sistema simpaacutetico e do eixo HHA tem accedilotildees

complementares no organismo incluindo a mobilizaccedilatildeo de energia e a manutenccedilatildeo da pressatildeo

arterial durante o estresse (Adaptado de ULRICH-LAI amp HERMAN 2009)

CRH

AVP

9

As respostas ao estresse que envolvem emoccedilatildeo passaratildeo por avaliaccedilatildeo afetiva

onde a informaccedilatildeo seraacute processada e interpretada para se estimar o potencial de ameaccedila

Esta avaliaccedilatildeo afetiva iraacute determinar o padratildeo de respostas e o tipo de defesa de acordo

com a histoacuteria pessoal aprendizado e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo que entatildeo faraacute

a avaliaccedilatildeo da capacidade para lidar com a situaccedilatildeo e organizaccedilatildeo da resposta

(MARGIS et al 2003)

A intensidade da resposta eacute que determina se o animal estaacute sofrendo de estresse

ou eacute meramente experimentado um episoacutedio breve em sua vida sem nenhum impacto

significativo ao seu bem-estar

Circuitos neurais espinais e supra espinais estatildeo envolvidos nas respostas de

estresse Os supra espinais processam as informaccedilotildees vindas das vias somatossensoriais

e viscerossensoriais e elaboram as respostas atraveacutes do taacutelamo hipotaacutelamo aacuterea preacute-

optica estruturas liacutembicas e sistemas amineacutergicos e natildeo amineacutergicos do tronco cerebral

Os neurocircnios do PVN secretores de hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH)

e vasopressina com os neurocircnios catecolamineacutergicos do locus coeruleus (LC) (o nuacutecleo

com maior densidade de neurocircnios noradreneacutergicos com papel fundamental no

desencadeamento da resposta ao estresse e reaccedilotildees de fuga) inervam o hipocampo a

amiacutegdala e o neocortex aleacutem de nuacutecleos do rafe (5-HT) e grupamentos celulares da

medula e ponte compondo assim um dos principais reguladores centrais de resposta ao

estresse na ativaccedilatildeo do eixo HHA e SNS (FRANCI 2005)

O eixo HHA eacute ativado por diferentes categorias de estresse como traumaacutetico

inflamatoacuterio e psicoloacutegico E o estresse psicoloacutegico tem regulaccedilatildeo por estruturas

liacutembicas que exercem atividade modulatoacuteria sobre o eixo (ULRICH-LAI amp HERMAN

2009)

O PVN monitora sinais relacionados com o estado emocional atraveacutes de sinais

metaboacutelicos como a composiccedilatildeo plasmaacutetica O CRH o principal neurotransmissor

coordenador das alteraccedilotildees psicoloacutegicas e comportamentais relacionadas ao estresse eacute

sintetizado no PVN e liberado nos capilares da eminecircncia meacutedia juntamente com a

vasopressina (AVP) e alcanccedilam diretamente a hipoacutefise anterior via circulaccedilatildeo portal

hipotalacircmica-hipofisaacuteria que por sua vez estimula na hipoacutefise a liberaccedilatildeo do hormocircnio

adrenocorticotroacutefico (ACTH) (MORMEgraveDE et al 2006)

10

O ACTH eacute sintetizado por ceacutelulas especializadas da hipoacutefise anterior vai para a

corrente sanguiacutenea e estimula o coacutertex da glacircndula adrenal (na zona fasciculada) que

sintetiza o glicocorticoide atraveacutes de esteroides derivados do colesterol O cortisol eacute o

glicocorticoacuteide ativo do eixo para catildees gatos e humanos e a corticosterona para

paacutessaros e roedores (MORMEgraveDE et al 2006)

Esse hormocircnio final do eixo HHA interage com as ceacutelulas atraveacutes da ligaccedilatildeo a

dois receptores o receptor glicocorticoide (GR) e o receptor de mineralocorticoide

(MR) O receptor GR eacute encontrado na maioria dos tecidos do corpo incluindo a maioria

das aacutereas do enceacutefalo No rim e em outros tecidos a aldosterona liga-se ao MR durante a

regulaccedilatildeo da reabsorccedilatildeo de soacutedio mas o MR tambeacutem estaacute presente no hipocampo onde

ocorre a ligaccedilatildeo do cortisol Estes complexos esteroacuteide-receptores entatildeo interagem

com o DNA para iniciar ou para reprimir a transcriccedilatildeo de genes especiacuteficos a fim de

regular a siacutentese de proteiacutenas que provoca alteraccedilotildees fisioloacutegicas em resposta ao

estresse

O cortisol tem 10 vezes mais afinidade ao MR que ao GR Em niacuteveis baixos ou

em situaccedilotildees de ausecircncia de estresse a maior parte do cortisol liga-se aos MRs no

ceacuterebro (principalmente no hipocampo) e modula a atividade basal do eixo HHA e o

aparecimento de resposta ao estresse Com a elevaccedilatildeo dos niacuteveis de cortisol ocorre um

aumento de ligaccedilotildees nos receptores GR reduzindo a atividade do eixo HHA

(mecanismo de ldquofeed-backrdquo negativo) No entanto a ativaccedilatildeo crocircnica deste receptor

estaacute ligada a vaacuterios distuacuterbios cognitivos relativos ao estresse (DE KLOET et al 1999)

Proteger o organismo de possiacuteveis danos eacute um dos papeis principais das

respostas hormonais a situaccedilotildees de estresse E seus principais hormocircnios satildeo a

adrenalina de secreccedilatildeo raacutepida pelo envolvimento na reaccedilatildeo de luta ou fuga e o

corticosteroacuteides na restauraccedilatildeo e na reparaccedilatildeo dos sistemas agindo na segunda linha de

defesa regulando as respostas inflamatoacuteria e imune (MC EWEN 2000)

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca

11

O Nodo Sinoatrial (NS) apresenta a frequecircncia de disparo mais intensa no

coraccedilatildeo estimulando outros locais como os nodos atrioventriculares que principiam

seus proacuteprios impulsos eleacutetricos E com a ausecircncia de influecircncias hormonais ou neurais

a frequecircncia cardiacuteaca (FC) permanece equivalente agrave frequecircncia de disparos do NS ou

seja constante (STAUSS 2007)

Os sistemas nervoso simpaacutetico (SNS) e parassimpaacutetico (SNP) estatildeo

constantemente ativados regulando a atividade cardiacuteaca com a predominacircncia de um ou

outro conforme a situaccedilatildeo Em repouso a predominacircncia eacute vagal o que em humanos

leva a respostas raacutepidas de no maacuteximo 5 segundo na FC diminuindo-a em poucos

batimentos Jaacute as respostas da ativaccedilatildeo simpaacutetica ocorrem apoacutes cinco segundos

aumentando progressivamente chegando a sua resposta maacutexima de aumento da FC

apoacutes 20 a 30 segundos (HAINSWORTH 1995)

No entanto os sistemas simpaacutetico e parassimpaacutetico atuam de forma simultacircnea

na regulaccedilatildeo da atividade cardiacuteaca onde o aumento da atividade vagal natildeo resulta tatildeo

logo na reduccedilatildeo da atividade simpaacutetica e vice-versa (VON BORELL et al 2007)

Quando o SNS eacute ativado as fibras nervosas promovem a descarga de

noradrenalina (NA) nos aacutetrios e ventriacuteculos que por sua vez juntamente com a

adrenalina liberada pela adrenal estimula os receptores β1 adreneacutergicos presentes no

coraccedilatildeo ativando atraveacutes de uma proteiacutena G excitatoacuteria (Gs) a enzima adenilato ciclase

(AC) agrave produzir AMPc Seu aumento intracelular leva agrave ativaccedilatildeo da proteiacutena quinase

dependente de AMPc aumentando as correntes de canais iocircnicos de Ca+2

e Na+

acelerando a velocidade de despolarizaccedilatildeo levando ao aumento da frequecircncia de

disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas do NA desencadeando o aumento da

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Do mesmo modo o miocaacuterdio atrial o nodo aacutetrio-ventricular e o NS satildeo

inervados pelas fibra nervosa parassimpaacutetica dos nervos vagos liberando acetilcolina

(ACh) ativando receptores M2 que estatildeo acoplados a uma proteiacutena G inibitoacuteria (Gi)

inibindo a siacutentese de AMPc intracelular reduzindo a atividade da PKA Aleacutem de a ACh

ativar uma corrente de efluxo de K+ gerando uma hiperpolarizaccedilatildeo da membrana

levando ao aumento do limiar de ativaccedilatildeo do potencial de accedilatildeo sinusal o que reduz a

12

frequecircncia de disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas sinusais diminuindo por fim a

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Existem diferenccedilas no tempo de resposta da ativaccedilatildeo dos ramos simpaacutetico e

parassimpaacutetico que ocorrem em certo modo pela liberaccedilatildeo lenta de noradrenalina nos

terminais nervosos simpaacuteticos e pelas fibras preacute-ganglionares vagais serem

mielinizadas contribuindo para uma transmissatildeo eleacutetrica mais raacutepida Aleacutem das

diferenccedilas anatocircmicas entre os ramos como eacute o caso dos corpos celulares preacute-

ganglionares do parassimpaacutetico localizados dentro do coraccedilatildeo enquanto que os corpos

celulares preacute-ganglionares simpaacuteticos se localizam no gacircnglio paravertebral (VON

BORELL et al 2007)

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC)

A manutenccedilatildeo da homeostase do sistema cardiovascular eacute resultado da oscilaccedilatildeo

riacutetmica de componentes regulatoacuterios da atividade cardiacuteaca onde se observa intervalos

irregulares de tempo entre os batimentos consecutivos (VON BORELL et al 2007)

A anaacutelise da variabilidade do intervalo cardiacuteaco pode ser realizada atraveacutes dos

iacutendices no domiacutenio do tempo e da frequecircncia

No domiacutenio do tempo cada intervalo entre um batimento cardiacuteaco e outro pode

ser medido em milissegundos e no domiacutenio da frequecircncia as flutuaccedilotildees riacutetmicas podem

caracterizar os estados de repouso e atividade influindo na seacuterie cronoloacutegica contida

entre os intervalos tornando possiacutevel a mensurar a atividade do SNA (HOSHI 2009

SONG et al 2006)

Os dados satildeo obtidos atraveacutes da gravaccedilatildeo dos intervalos entre batimentos

cardiacuteacos feitos por frequenciacutemetros capazes de detectar em milissegundos (ms) o

tempo entre os batimentos e armazenaacute-los (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al

2007)

A teacutecnica utilizada com esse objetivo eacute chamada de anaacutelise espectral e consiste

no uso de algoritmos matemaacuteticos como eacute o caso da transformada raacutepida de fourier

(FFT) para obter diagramas dimensionais Dispondo em um graacutefico os componentes

oscilatoacuterios de frequecircncia da VIC no eixo X e a amplitude dos componentes oscilatoacuterios

no eixo Y permitindo atraveacutes dessa teacutecnica determinar a forccedila espectral das

frequecircncias baixas e altas da VIC

13

Nesse contexto os dois Sendo assim os dois componentes de frequecircncia principais satildeo

divididos atraveacutes da anaacutelise espectral em Frequecircncia baixa (LF) caracterizado pelo

espectro de 004 a 015Hz e Frequecircncia alta (HF) situada na faixa de 015 a 04 Hz na

anaacutelise espectral (KAWASE et al 2002 VON BORELL et al 2007 PICCIRILLO et

al 2009)

Quando os IRR satildeo dispostos em uma escala de tempo um graacutefico eacute

confeccionado e as oscilaccedilotildees formadas representam a accedilatildeo dos diferentes componentes

regulam os pulsos cardiacuteacos onde as frequecircncias mais altas representam a atividade

riacutetmica resultante da ativaccedilatildeo parassimpaacutetica e as mais baixas exibem aquelas

resultantes da atividade simpaacutetica (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al 2007)

(Figura 2)

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC Variabilidade do intervalo cardiacuteaco em um indiviacuteduo

jovem durante o repouso e quando em movimento A seacuterie temporal de intervalos RR estaacute

Repouso Movimento

14

disposta nos graacuteficos do topo Os graacuteficos centrais ilustram a presenccedila de dois componentes

principais da densidade espectral LF e HF Durante o movimento o componente LF se torna

predominante em relaccedilatildeo ao repouso Os graacuteficos na base da figura demonstram a distribuiccedilatildeo

relativa dos dois componentes (representada pela aacuterea) (MALLIANI 1997)

A razatildeo entre os dois componentes de frequecircncia eacute calculada a partir dos valores

obtidos de LF e HF resultando em valor que representa o balanccedilo entre a atividade

simpaacutetica e parassimpaacutetica aleacutem de possibilitar a decomposiccedilatildeo dos componentes

espectrais atraveacutes do caacutelculo das frequecircncias centrais desses componentes que se

situam impliacutecitos no sinal da variabilidade (PAGANI et al 1986 LOMBARDI et

al1996 LOMBARDI 1997 MALLIANI et al 1997 VON BORELL et al 2007

HARADA et al 2005)

A anaacutelise espectral da VIC natildeo acessa o tocircnus autonocircmico cardiacuteaco mas sim o

seu balanccedilo o que justifica a ocorrecircncia de alteraccedilotildees na capacidade do coraccedilatildeo de

responder a esses estiacutemulos quando haacute alteraccedilotildees crocircnicas na atividade autonocircmica

Nesses casos natildeo seria aplicaacutevel a anaacutelise espectral da VIC (STAUSS 2007

PICCIRILLO et al 2009)

Deste modo a anaacutelise espectral da VIC tem como principal utilidade a funccedilatildeo de

indicadora da atividade autonocircmica em resposta ao estresse psicoloacutegico e fiacutesico (VON

BORELL et al 2007) E quando eacute aplicada no estudo das alteraccedilotildees agudas da

atividade autonocircmica cardiacuteaca essa anaacutelise eacute utilizada de maneira a obter dados

fidedignos onde diante de uma resposta ao estresse psicoloacutegico pode ser observado um

aumento agudo na atividade cardiacuteaca simpaacutetica caracterizado pelo aumento do

componente LF com provavelmente baixa ou nenhuma alteraccedilatildeo do componente HF

(STAUSS 2007)

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees

O oacutergatildeo auditivo dentre outras funccedilotildees se caracteriza especialmente por seu

desempenho no reconhecimento de situaccedilotildees ameaccediladoras estando em funcionamento

ininterrupto atraveacutes da conexatildeo direta do ouvido interno com os mecanismos neurais de

ldquoluta ou fugardquo Esse sistema eacute capaz de diferenciar sons de frequecircncias e intensidades

relevantes para a sobrevivecircncia do indiviacuteduo em seu meio ambiente (WESTMAN amp

WALTERS 1981)

15

A percepccedilatildeo do som colabora no balanccedilo homeostaacutetico do sistema nervoso

central influenciando consequentemente o equiliacutebrio fisioloacutegico de forma geral atraveacutes

dos centros autonocircmicos e neuroendoacutecrinos do hipotaacutelamo variando em resposta

conforme o significado do estiacutemulo sonoro e sua intensidade previsibilidade

variabilidade e complexidade

Nesse contexto as respostas fundamentais ao som satildeo de orientaccedilatildeo reflexo de

surpresa e de defesa Sendo a resposta de orientaccedilatildeo fundamental por ser a reaccedilatildeo

comportamental de busca pela fonte sonora permitindo que o indiviacuteduo se prepare para

a resposta necessaacuteria e caso o reconhecimento do som mostre ser esse de baixa

significacircncia a habituaccedilatildeo iraacute ocorrer diminuindo o grau da reaccedilatildeo

Jaacute o reflexo de surpresa iraacute ocorrer em resposta a sons repentinos de alta

intensidade e caraacuteter assustador podendo ser atenuado quando o indiviacuteduo sabe que ele

iraacute ocorrer e podendo ser exacerbado em situaccedilotildees de tensatildeo medo e de abalo

emocional

E a resposta de defesa acontece em resposta a sons de significado intensidade e

duraccedilatildeo relacionados agrave ameaccedila onde haacute excitaccedilatildeo emocional e preparaccedilatildeo dos sistemas

para a accedilatildeo consistindo na resposta de estresse (WESTMAN amp WALTERS 1981)

Alguns sons adquirem significado particular para o indiviacuteduo representando

perigo em potencial assim como os sons de caracteriacutesticas ameaccediladoras Mas

geralmente o significado conotativo de um som potencialmente ameaccedilador estaacute no fato

de ser desconhecido e apresentar mudanccedilas raacutepidas de intensidade aleacutem das associaccedilotildees

extra-auditivas relacionadas a ele Aleacutem disso a previsibilidade desse estiacutemulo sonoro

tambeacutem poderaacute constituir um fator determinante na resposta jaacute que sons imprevisiacuteveis

caracterizam-se como um estiacutemulo estressor maior desencadeando uma reduccedilatildeo geral

de performance e uma baixa toleracircncia a frustraccedilotildees (WESTMAN amp WALTERS

1981)

Os catildees particularmente apresentam muita sensibilidade a estiacutemulos sonoros

visto que seu sistema auditivo eacute extremamente desenvolvido especialmente com a

funccedilatildeo de caccedila e guarda Poreacutem a resposta de defesa exagerada dos indiviacuteduos dessa

espeacutecie tem sido relatada principalmente aos sons de fogos de artifiacutecio trovatildeo e tiro de

16

armas de fogo Provavelmente o caraacuteter imprevisiacutevel a conotaccedilatildeo negativa que a

espeacutecie apresenta a esses sons e a intensidade proacutexima ao limiar de audiccedilatildeo possa

justificar tal reaccedilatildeo (HYDBRING et al 2004)

E eacute com base nessa reaccedilatildeo desmedida que os estiacutemulos sonoros como os sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio vecircm sendo utilizados como modelos de estresse em catildees

(HYDBRING et al 2004 ENGELAND et al 1990) Representando uma opccedilatildeo para o

estudo da reatividade ao estresse que pode ser comparada ao modelo de estresse

acuacutestico de sobressalto em ratos

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees

Ao iniciar um estudo a respeito de uma espeacutecie deve-se ter em mente que cada

sujeito analisado natildeo eacute um sistema inerte e fechado mas sim um somatoacuterio de eventos

que possibilitam ter um exame mais amplo e completo das interaccedilotildees do animal com o

ambiente (SULTAN 2003 BATESON et al 2004)

Assim o estudo comportamental se mostra uma importante ferramenta pois

permite entender que processos bioloacutegicos satildeo compostos por eventos fisioloacutegicos e

psicoloacutegicos natildeo havendo exclusatildeo entre eles mas sim uma sobreposiccedilatildeo com fortes

correlaccedilotildees (HARVERBEKE et al 2008 BEERDA 1999 SPANGENBERG 2006

MONTANHA et al 2009) Conhecer a etologia canina iraacute permitir uma melhor

utilizaccedilatildeo do animal respeitando seus limites e possibilitando a manutenccedilatildeo fiacutesica e

mental dentro dos padrotildees de bem-estar da espeacutecie (SNOWDON 1999 DAWNKINS

1989 DARWIN 2004)

Com relaccedilatildeo ao bem-estar Broom amp Johnson (1993) e Broom amp Fraser (2010)

definem como o estado de um animal em relaccedilatildeo agraves suas tentativas de se adaptar ao

meio em que vive Para os animais domeacutesticos principalmente para os animais de

companhia esse eacute um conceito que muitas vezes pode ser confundido e mal aplicado

pelo homem agrave medida que esse confronta a realidade do animal com a sua proacutepria

passando a adequar paracircmetros humanos a esses animais

Os catildees satildeo marcados pela socializaccedilatildeo baseada em relaccedilotildees familiares com

organizaccedilotildees flexiacuteveis e respostas a um liacuteder aleacutem de possuiacuterem necessidade de

17

ambientes complexos e variados marcadamente importantes na vida gregaacuteria de seus

ancestrais (BROOM amp FRASER 2010)

Pensando nisso um manejo inadequado pode ter consequecircncias que variam

desde alteraccedilotildees comportamentais a quadros patoloacutegicos tendo como agravantes

alteraccedilotildees substanciais nos seus niacuteveis de bem-estar

Poreacutem o estudo do comportamento animal ainda se mostra bastante pioneiro jaacute

que as pesquisas cientiacuteficas a niacutevel cliacutenico comeccedilaram a ser realizados haacute poucas

deacutecadas em animais com problemas comportamentais

Dessa forma se faz presente a necessidade de um maior desenvolvimento de

estudos e pesquisas nesse sentido visto que os problemas comportamentais satildeo

apontados como a principal causa de abandono ou morte de animais de companhia

apresentando maior nuacutemero de relatos do que as doenccedilas infecciosas neoplaacutesicas e

metaboacutelicas concomitantes (OVERALL et al 2001)

A relaccedilatildeo homem-animal eacute muito antiga mas eacute pouco estudada E isso faz com

que o diagnoacutestico e o tratamento dos distuacuterbios comportamentais sejam dificultados

Muitas vezes a origem dos problemas comportamentais estaacute ligada ao tipo de

relacionamento existente entre o homem e o seu animal E isso acontece porque os

animais passam por processos de humanizaccedilatildeo para se adaptarem ao modo e ao estilo de

vida do seu proprietaacuterio nem que para isso tenham que modificar as suas caracteriacutesticas

naturais (OVERALL et al 2001)

Embora os catildees apresentem uma flexibilidade comportamental as exigecircncias

criadas pelos seus proprietaacuterios podem desencadear conflitos e frustraccedilotildees que levam ao

aparecimento de problemas comportamentais (OVERALL et al 2001)

Com frequecircncia o stress ou a ansiedade estatildeo relacionados com o ambiente e

mostram que o limiar entre normal e anormal varia entre indiviacuteduos (BEAVER 2005)

O rompimento da homeostase pode resultar de estimulaccedilatildeo interna externa ou

ambos E o potencial de ruptura da homeostase aumenta com a magnitude do desafio

(APPLEBY amp PLUIJMAKERS 2004) Dessa forma sendo a fobia um transtorno de

reaccedilotildees exageradas e desproporcionais ao real grau de importacircncia do estimulo

18

estressor podemos sugerir que o indiviacuteduo foacutebico eacute mais susceptiacutevel ao estresse de

forma geral reagindo com paracircmetros mais facilmente alterados

26 Fobia em catildees

Medo e ansiedade satildeo funccedilotildees adaptativas de sobrevivecircncia que sinalizam para o

organismo a presenccedila de perigo em potencial no ambiente O medo eacute a resposta

imediata acionada por um evento ou objeto potencialmente nocivo e ansiedade envolve

processos cognitivos mais complexos como antecipaccedilatildeo e preocupaccedilatildeo com

hipervigilacircncia diante de um perigo iminente no ambiente (FEINSTEIN et al 2011)

Entre as respostas comportamentais e fisioloacutegicas claacutessicas imediatas do medo

destacam-se o congelamento sobressalto aumento da frequecircncia cardiacuteaca alteraccedilotildees da

pressatildeo arterial e aumento da vigilacircncia Satildeo respostas comportamentais e perceptivas

que facilitam as respostas defensivas como a fuga e esquiva de forma apropriada afim

de reduzir o perigo ou lesatildeo (CHUDASAMA 2009)

O neurocircuito do medo envolve principalmente a amiacutegdala estrutura cerebral

responsaacutevel pela detecccedilatildeo geraccedilatildeo e manutenccedilatildeo das emoccedilotildees relacionadas ao medo e

ansiedade Eacute uma estrutura complexa pertencente ao sistema liacutembico que consiste em

aproximadamente 10 nuacutecleos que coordenam respostas apropriadas agrave ameaccedila e ao

perigo atraveacutes das respostas comportamentais cardiovasculares e endoacutecrinas ao

estresse (ROSEN amp SCHULKIN 1998)

A amiacutegdala faz ligaccedilotildees entre as aacutereas do coacutertex cerebral e recebe informaccedilotildees

de todos os sistemas sensoriais permite a integraccedilatildeo da informaccedilatildeo proveniente das

diversas aacutereas atraveacutes de conexotildees excitatoacuterias e inibitoacuterias

Os nuacutecleos basolaterais satildeo as principais portas de entrada da amiacutegdala

recebendo informaccedilotildees sensoriais e auditivas vindas do taacutelamo coacutertex sensorial e

associativo (Figura 3) Ele estaacute sob tocircnica inibiccedilatildeo GABAeacutergica e quando bloqueada

esta inibiccedilatildeo resulta em aumento do comportamento de ansiedade com ativaccedilatildeo

cardiovascular simpaticamente mediada (KESSLER et al 2005)

19

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional A informaccedilatildeo

sensoacuteria eacute transmitida para o taacutelamo atraveacutes da via leminiscal A aferecircncia auditiva chega na

divisatildeo ventral do nuacutecleo geniculado medial e projeta-se para o coacutertex auditivo primaacuterio

enquanto outras vias extra leminiscais carreiam informaccedilotildees auditivas para outras partes do

taacutelamo como a divisatildeo medial do nuacutecleo geniculado medial e nuacutecleos intralaminares

posteriores que se projetam tanto para o coacutertex auditivo primaacuterio quanto para o coacutertex auditivo

associativo assim como para os nuacutecleos basolaterias da amiacutegdala Essa via do taacutelamo para

amiacutegdala eacute implicada na aprendizagem emocional (IVERSEN et al 2003)

A amiacutegdala ventrolateral em seres humanos eacute mais sensiacutevel aos estiacutemulos

negativos (especialmente se os estiacutemulos sinalizam informaccedilatildeo negativa iminente) E a

amiacutegdala centromedial (CMA) dorsal tem projeccedilotildees principalmente subcorticais

especialmente aquelas ligadas ao hipotaacutelamo lateral e substacircncia cinzenta periaquedutal

(PAG) Essas projeccedilotildees podem explicar em parte as respostas fisioloacutegicas associadas

ao medo com o hipotaacutelamo (Figura 4) (KESSLER et al 2005)

Kandel 2003

20

Figura 4 Conexotildees diretas entre o nuacutecleo central da amiacutegdala e uma variedade de aacutereas

hipotalacircmicas e do tronco encefaacutelico envolvidas no medo e na ansiedade (IVERSEN et al

2003)

O Locus coeruleus importante nuacutecleo com grande densidade de neurocircnios

noradreneacutergicos com papel no desencadeamento da resposta ao estresse e das reaccedilotildees de

fuga tem tambeacutem papel importante no controle do medo A desregulaccedilatildeo desse nuacutecleo

parece ter relaccedilatildeo com o aparecimento do pacircnico e fobias em humanos (CHARNEY

1984) certamente atraveacutes de sua ligaccedilatildeo ao sistema liacutembico (CHARNEY 1984)

Medos podem desenvolver-se gradualmente e pode haver variaccedilatildeo na resposta

Em contraste fobias geralmente se desenvolvem rapidamente e uma vez desenvolvidas

haacute pouca mudanccedila em sua apresentaccedilatildeo entre as seacuteries Situaccedilotildees indutoras de fobia ou

satildeo evitadas a todo custo pelo foacutebico ou se inevitaacutevel satildeo suportadas com intensa

ansiedade e sofrimento (OVERALL 2010)

A Associaccedilatildeo Norte Americana de Psiquiatria no manual de diagnoacutestico e

estatiacutestica de transtornos mentais (DSM-IV-TR 2002) e a CID-10 (1993) definem em

humanos fobias especiacuteficas como medos irracionais excessivos acentuados e

persistentes revelados pela presenccedila ou antecipaccedilatildeo de um objeto situaccedilatildeo ou

atividade foacutebica especiacutefica de forma desproporcional acompanhados de

comportamentos de fuga esquiva antecipaccedilatildeo ansiosa e intenso sofrimento

Geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase fisioloacutegica

mas leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas ao medo

21

coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o eixo

HHA e o Sistema Nervoso Simpaacutetico

Em catildees natildeo haacute ateacute o momento descrito na literatura uma definiccedilatildeo oficial para

tal transtorno

As fobias satildeo transtornos de ansiedade de difiacutecil cura e geralmente a memoacuteria

de uma resposta foacutebica pode desencadear outros transtornos de ansiedade Dessa forma

o tratamento tem importacircncia natildeo soacute pela questatildeo do bem-estar e qualidade de vida

mas tambeacutem devido a seus componentes de comorbidade (OVERALL 2010)

Resposta exagerada a sons de trovatildeo estatildeo entre as doenccedilas comportamentais

mais comumente associados com pacircnico ou fobia em catildees Ocorre geralmente em

todas as raccedilas embora natildeo existam dados sobre a incidecircncia relativa destes problemas

(OVERALL et al 2001 DUNHAM amp FRANK 2001 VOITH amp BORCHELT 1985)

A fobia agrave sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio constitui uma classe que apresenta

resposta extrema repentina e profunda e que apesar de existir uma variaccedilatildeo consideraacutevel

nas respostas dos catildees (BEERDA SCHILDER VAN HOOFF VRIES 1997) no geral

se manifesta com comportamentos de ansiedade associados com atividades acentuadas

do sistema nervoso simpaacutetico Os comportamentos podem incluir catatonia ou mania

concomitante com diminuiccedilatildeo da sensibilidade ou capacidade de resposta agrave dor ou

estiacutemulos sociais aleacutem de fuga vocalizaccedilatildeo salivaccedilatildeo micccedilatildeo defecaccedilatildeo tremores

comportamentos autodestrutivos e ateacute convulsotildees (OVERALL 2010 SHULL-

SELCER amp STAGG 1991)

Jaacute se sabe que existe um fator hereditaacuterio para esse tipo de fobia e embora os

mecanismos pelos quais ela ocorre ainda natildeo sejam compreendidos parece estar em

alguma alteraccedilatildeo na forma como a informaccedilatildeo eacute processada entre a amiacutegdala e o coacutertex

(OVERALL 2010)

E como ansiedade medos e fobias satildeo queixas comportamentais comuns e

problemaacuteticas dos donos de catildees a falta de tratamento pode resultar no rompimento do

viacutenculo humano-animal e posterior abandono desistecircncia ou ateacute mesmo eutanaacutesia do

catildeo afetado (MILLS etal 2003)

22

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental

Os procedimentos experimentais foram realizados na Estaccedilatildeo experimental de

Parasitologia Veterinaacuteria do Departamento de Parasitologia Animal (DPA) da

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) e no Laboratoacuterio de Fisiologia

Animal do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas (DCF) da UFRRJ Todos os

procedimentos estatildeo de acordo com a lei de bem-estar animal Instruccedilatildeo Normativa ndeg

56 de 2008 O presente experimento encontra-se aprovado pelo Comitecirc de Eacutetica na

Pesquisa da UFRRJ CEUA-IB nordm 2308347962014-14

32 Animais

Foram entrevistados 35 proprietaacuterios de catildees entre os quais foram selecionados

28 com 2 a 6 anos de idade pesando de 10 a 30 Kg doacuteceis saudaacuteveis com vacinas e

vermifugaccedilatildeo em dia do muniacutecipio de Seropeacutedica-RJ

Proprietaacuterios de animais com medo de sons de trovatildeo e fogos de artificio

interessados em participar do estudo e proprietaacuterios de animais sem medo convidados a

participar do estudo incialmente responderam a um formulaacuterio de cadastro dos

animais contendo dados gerais e histoacuterico de respostas comportamentais em geral

(Anexo 1) Em seguida os animais foram submetidos a um exame cliacutenico baacutesico que

constitiu em inspeccedilatildeo palpaccedilatildeo auscultaccedilatildeo e termometria retal e um exame

neuroloacutegico para descartar doenccedilas concomitantes (Anexo 2) Foram dispensados

animais arredios agressivos com peso ou idade fora da faixa estabelecida no criteacuterio de

seleccedilatildeo e animais doentes Os animais selecionados foram caracterizados como foacutebicos

e natildeo-foacutebicos a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio e entatildeo submetidos uma uacutenica vez ao

modelo de estresse sonoro A caracterizaccedilatildeo de animais foacutebicos foi realizada conforme

as respostas dos proprietaacuterios ao questionaacuterio de reaccedilotildees comportamentais aos sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009 CROWELL-

DAVIS 2003) (Anexo 3)

23

Meios de divulgaccedilatildeo do estudo atraveacutes de folder e cartazes de divulgaccedilatildeo do projeto

veiculado pela internet e afixado em diversos estabelecimentos veterinaacuterios no

municiacutepio e pela UFRRJ (Anexo 4)

Avaliaccedilatildeo comportamental atraveacutes de entrevista com o proprietaacuterio (questionaacuterio

adaptado de OVERALL 1997) (Anexo 1)

321 Consideraccedilotildees eacuteticas

A participaccedilatildeo no estudo ocorreu somente com a autorizaccedilatildeo dos entrevistados

mediante um termo de consentimento em que se garantia plena liberdade para

interromper a participaccedilatildeo quando desejado (Anexo 5) Natildeo houve riscos agrave sauacutede fiacutesica

ou mental dos animais que participaram do projeto

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som

Os catildees foram selecionados para compor os grupos conforme as respostas ao

questionaacuterio comportamental previamente preenchido pelo proprietaacuterio

O questionaacuterio especiacutefico para medo de sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio

(Anexo 3) eacute composto de alguns paracircmetros comportamentais comuns em catildees foacutebicos

como atitude destrutiva eliminaccedilatildeo inadequada salivaccedilatildeo excessiva vocalizaccedilatildeo

esconder passadas arfar procurar pelo proprietaacuterio auto-trauma tremor Esses

parametros foram ainda classificados em escala de 0 (comportamento nunca observado)

a 5 (comportamento frequente e grave) (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009

CROWELL-DAVIS 2003)

Os catildees foram considerados aptos a participarem do grupo Foacutebicotrovatildeo e

Foacutebicosfogos quando

Apresentaram pelo menos trecircs dos comportamentos anteriores durante

o som de trovatildeo ou fogos de artifiacutecio com escore igual ou maior que 3

ou algum item com escore maacuteximo (5)

Ou as atitudes do animal no momento do som apresentaram risco a sauacutede

e integridade fiacutesica

E quando as respostas comportamentais foram apresentadas na maior

parte do tempo durante o estiacutemulo

24

33 Procedimentos Experimentais

O protocolo experimental foi realizado individualmente iniciando-se sempre agraves

9 horas da manhatilde Um pesquisador acompanhado de um pesquisador colaborador

realizou todo o protocolo experimental sem se ausentar em nenhuma etapa do

experimento

Dias antes do experimento os animais foram submetidos a um exame cliacutenico e

os proprietaacuterios responderam a questionaacuterios (Anexo 1 e 3) referentes ao manejo e

comportamento do animal

A partir dos dados dos questionaacuterios os animais foram classificados conforme

as respostas dadas referente ao medo de trovatildeo e fogos de artiacutefiacutecio entre animais com

histoacuterico comportamental de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Foacutebicos) e

animais historicamente natildeo foacutebicos a esses sons (Natildeo-foacutebicos)

No dia do experimento cada animal foi submetido a inserccedilatildeo de um cateacuteter de

silicone endovenoso para coleta de sangue ainda em sua moradia (amostra 1 casa) e a

colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro (Polar Pro Trainer RS800CX) Os animais permaneceram

com o frequenciacutemetro durante todo o protocolo experimental

Apoacutes a colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro os animais permaneceram no mesmo local

por 10 minutos para adaptaccedilatildeo ao frequeciacutemetro e registro dos dados de VIC do

momento basal 1 (casa) Em seguida cada animal foi transportado para o laboratoacuterio

onde foi executado o modelo de estresse sonoro agudo O transporte foi realizado

acondicionando o animal numa caixa de transporte num carro de passeio com

ventilaccedilatildeo adequada

Apoacutes a chegada ao local do experimento os animais permaneceram na sala sem

manipulaccedilatildeo e sem interaccedilatildeo por parte dos pesquisadores por 30 minutos para registro

dos dados de VIC do momento basal 2 (laboratoacuterio) Em seguida foi coletada a

segunda amostra de sangue (amostra 2 laboratoacuterio)

O estiacutemulo sonoro consistiu numa gravaccedilatildeo de sons de trovatildeo e outra de sons de

fogos de artifiacutecio numa intensidade sonora maacutexima de 103-104 dB e duraccedilatildeo de 2

minutos e 30 segundos (MACCARIELLO 2012)

Durante e apoacutes o fim do estiacutemulo sonoro cada animal permaneceu sem qualquer

manipulaccedilatildeo A terceira coleta de sangue foi realizada 5 minutos apoacutes o teacutermino do

estresse (amostra 3) a quarta aos 15 minutos (amostra 4) a quinta aos 30 minutos

(amostra 5) e a sexta coleta aos 60 minutos apoacutes o teacutermino do estresse (amostra 6)

25

A filmagem foi realizada durante todo o experimento para registrar as reaccedilotildees

comportamentais

Apoacutes a uacuteltima coleta o polar foi retirado e o animal levado de volta para sua

casa no mesmo transporte e nas mesmas condiccedilotildees em que veio

Figura 5 Esquema do protocolo experimental

331 Estiacutemulo Sonoro

Os estiacutemulos sonoros consistiram de uma gravaccedilatildeo com duraccedilatildeo de 2 minutos e

30 segundos de sons de trovatildeo mixados alternadamente a partir de dois arquivos

sonoros no formato wave (ldquovery loud thunder close thunder crackrdquo e ldquohigh quality

stereo sound of a major thunder clap during a stormrdquo) e outra gravaccedilatildeo de sons de

fogos de artifiacutecio mixado de um arquivo sonoro no formato wave (ldquocontinuous

fireworkrdquo) adquiridos no endereccedilo eletrocircnico httpwwwsound-effectcom

O formato utilizado possui a vantagem de ser uma gravaccedilatildeo que preserva todas

as variaccedilotildees de frequecircncia do som original A intensidade do som foi padronizada

atraveacutes de um decibeliacutemetro modelo BK Precision 732A Sound Level Meters a 103-

104 dB por ser uma pressatildeo sonora capaz de aumentar as concentraccedilotildees de cortisol

seacuterico em catildees estando abaixo dos limites que possam causar danos ao aparelho

auditivo (ISING et al 1999)

O estiacutemulo sonoro foi emitido por um aparelho de som (Pioneer home theater

DVD 120w RMS) com 5 caixas de som acopladas Cada animal foi posicionado a um

metro das caixas de som Para observaccedilatildeo das reaccedilotildees comportamentais cada animal foi

contido apenas por uma guia solta de 15 m podendo reagir e se locomover

naturalmente sem intervenccedilotildees

vii

RESUMO

FRANZINI Carla Caroline de Souza Respostas autonocircmicas e comportamentais ao

estresse sonoro agudo em catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de

trovatildeo eou fogos de artifiacutecio 2015 102 p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias

Fisioloacutegicas) Instituto de Biologia Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

Seropeacutedica RJ 2015

O estresse eacute a situaccedilatildeo gerada por um desafio ao qual um organismo estaacute submetido E

apesar da resposta de estresse ser fundamental para homeostase a persistecircncia do

estiacutemulo estressor ou o exagero na resposta pode provocar consequecircncias deleteacuterias para

o indiviacuteduo A fobia eacute considerada um transtorno de ansiedade onde o medo (estado

emocional em resposta a uma situaccedilatildeo de perigo) eacute persistente e excessivo o que resulta

num aumento da reatividade ao estresse Nesse contexto vaacuterios estiacutemulos satildeo

considerados estressores em catildees e a exposiccedilatildeo a estiacutemulos sonoros como trovotildees e

fogos de artifiacutecio representa uma opccedilatildeo natural para o estudo da reatividade ao estresse

Desta forma avaliamos a reatividade de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a

sons de trovatildeo eou fogos de artifiacutecio a um modelo de estresse sonoro agudo atraveacutes da

anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e de paracircmetros comportamentais

Foram utilizados 28 catildees de companhia de diversas raccedilas de 2 a 6 anos pesando de 10

a 30 Kg sem sinais de outras doenccedilas provenientes de proprietaacuterios voluntaacuterios do

municipio de Seropeacutedica-RJ Estes foram selecionados por questionaacuterio referente a

intensidade do medo de trovatildeo e fogos de artifiacutecio dividos em grupos de foacutebicos e natildeo

foacutebicos e ainda entre os estiacutemulos som de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O estiacutemulo sonoro

consistiu numa gravaccedilatildeo padronizada de 25 minutos a uma intensidade sonora maacutexima

de 103-104 dB Para a anaacutelise da VIC os intervalos RR foram registrados atraveacutes de

frequenciacutemetro (Polarreg modelo RS800CX) computados e analisados pelo programa

CardioSeries 241 Tambeacutem foram avaliados o perfil dos proprietaacuterios caracteriacutesticas

gerais (peso idade raccedila e sexo) e de manejo dos animais Natildeo foram detectadas

diferenccedilas no perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios nem caracteriacutesticas gerais ou de

manejo entre animais foacutebicos e natildeo-foacutebicos O estiacutemulo sonoro (trovatildeo ou fogos) foi

capaz produzir aumento significativo da razatildeo LFHF tanto em animais natildeo-foacutebicos

como em animais foacutebicos No entanto a magnitude do aumento na razatildeo LFHF

produzida pelo som foi significativamente maior em animais foacutebicos do que em animais

natildeo-foacutebicos O modelo de estresse sonoro agudo produziu um aumento nos

comportamentos de vigilacircncia tremer e se esconder Apenas animais foacutebicos

submetidos ao modelo som de fogos apresentaram respostas comportamentais

significativamente mais intensas que catildees natildeo-foacutebicos nos paracircmetros Tremer Se

Esconder Vigilacircncia e Salivaccedilatildeo As respostas comportamentais descritas pelos

proprietaacuterios e as exibidas pelos catildees durante o modelo de estresse foram

correlacionadas apenas nos paracircmetros Tremer e Se Esconder Foi detectada correlaccedilatildeo

significativa entre os valores da razatildeo LFHF e os seguintes paracircmetros

comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio Arfar Tremer Se Esconder Fugir

Inquietaccedilatildeo Vigilacircncia Salivaccedilatildeo e Sobressalto O modelo utilizado foi capaz de

induzir respostas comportamentais e autonocircmicas de estresse e se mostra uma boa

ferramenta na mensuraccedilatildeo da magnitude das respostas de estresse de animais de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e pode ser

utilizado na avaliaccedilatildeo de novos caminhos terapecircuticos

Palavras-chaves estresse em catildeo variabilidade do intervalo cardiacuteaco comportamento

fobia a sons

viii

ABSTRACT

FRANZINI Carla Caroline de Souza Autonomic and behavioural responses to noise

acute stress in companion dogs with phobia of thunder andor fireworks sounds 2015 p 105 Thesis (MA in Physiological Sciences) Institute of Biology Federal Rural

University of Rio de Janeiro Seropeacutedica RJ 2015

Stress is a situation caused by a challenge in which a body is subject And despite the

stress response is essential for homeostasis the persistence of the stressor stimulus or

exaggerated response can induce deleterious consequences A phobia is considered an

anxiety disorder where the fear (emotional state in response to a situation of danger) is

persistent and excessive which results in increased reactivity to stress In this context

many stimuli are considered stressors in dogs and the exposure to noise stimuli as

thunder and fireworks is a natural choice for the study of reactivity to stress Thus we

have evaluated the reactivity of companion dogs with history of phobia of the thunder

sounds andor fireworks to an acute acoustic stress model by analysing the variability

of Cardiac Interval (VCI) and behavioural parameters We used 28 companion dogs

different breeds 2 to 6 years old weighing 10 to 30 kg with no signs of other diseases

from volunteers owners of City of Seropeacutedica-RJ The dogs were selected by

questionnaire on the intensity of the fear of thunder and fireworks divided in phobic or

not phobic and between the stimuli sound of thunder or fireworks The sound stimulus

consisted of a standardized recording from 25 minutes to a maximum intensity of

sound of 103-104 dB For the analysis of VCI RR intervals were recorded through

frequency meter (Polar reg RS800CX model) stored and analysed using CardioSeries

241 sofware We also evaluated the profile of the owners general characteristics

(weight age race and gender) and handling of animals No differences were found in

the socioeconomic profile of the owners or general characteristics or animal handling

between phobic and non-phobic dogs The sound stimulus (thunder or fireworks) was

able to induce a significant increase in LF HF ratio in both non-phobic animals and

phobic animals However the magnitude of the sound-induced increase in the LFHF

was significantly higher in phobic than in non-phobic animals The acute sound stress

model produced an increase in the behaviour of surveillance trembling and hiding Only

phobic animals submitted to fireworks sound model had significantly more intense

behavioural responses than non-phobic dogs in the behaviours Shivering Hiding

Surveillance and Salivation Behavioural responses described by the owners and shown

by dogs during the stress model were correlated only in the behaviours Shivering and

Hiding Significant correlation was found between the ratio values LF HF and the

following behavioural parameters induced by sound in the laboratory Panting

Shivering Hiding Escape Shockwave Surveillance Salivation and Startle The sound

model was able to induce behavioural and autonomic responses of stress and it shown a

good tool to measure the magnitude of stress responses in the companion dogs with

history of phobia of thunder and fireworks sounds and it can be used in the study of new

therapeutic targets

Keywords stress in dogs variability of cardiac interval behaviour noise phobia

ix

LISTA DE TABELAS E FIGURAS

Tabela 1 Descriccedilatildeo dos 14 paracircmetros comportamentais analisados 31

Tabela 2 Perfil geral dos proprietaacuterios 33

Tabela 3 Perfil dos proprietaacuterios dos catildees segundo os grupos natildeo-foacutebicos e foacutebicos 34

Tabela 4Caracteriacutesticas gerais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 35

Tabela 5 Caracteriacutesticas de manejo dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 36

Tabela 6 Caracteriacutesticas comportamentais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 38

Tabela 7 Paracircmetros comportamentais avaliados no experimento 47

Tabela 8 Correlaccedilatildeo entre paracircmetros comportamentais avaliados pelos proprietaacuterios e

os avaliados durante o experimento 51

Figura 1Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA 8

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC 13

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional 19

Figura 4 Conexotildees nuacutecleo central da amiacutegdala 20

Figura 5 Esquema do protocolo experimental 25

Figura 6 Catildeo no momento do som 26

Figura 7 Componentes do Polar modelo RS800CX 27

Figura 8 Tela inicial do programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 9 Graacutefico confeccionado pelo programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 10 Tela do programa CardioSeries demonstrando a razatildeo entre os componentes de

frequecircncia LF e HF a partir da FFT 30

Figura 11 Paracircmetros avaliados segundo proprietaacuterio 40

Figura 12 Razatildeo LFHF de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos a sons de Trovatildeo eou Fogos de

Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 41

Figura 13 LF (componente de baixa frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos submetidos ao

estresse sonoro agudo atraveacutes de sons de Trovatildeo e Fogos de Artifiacutecio 42

Figura 14 HF (componente de alta frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo-foacutebicos a sons de

Trovatildeo eou Fogos de Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 44

Figura 15 FC (Frequecircncia Cardiacuteaca Meacutedia) dos catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

Figura 16 RMSSD (raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado) de catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

x

Figura 17 Oito dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 49

Figura 18 Seis dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 50

Figura 19 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e os paracircmetros comportamentais segundo os proprietaacuterios 53

Figura 20 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e a razatildeo LFHF 54

xi

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS

AC Adenilatociclase

ACh Acetilcolina

ACTH Hormocircnio adrenocorticotroacutefico

AVP Vasopressina

CCP Corpos Celulares Preacute-ganglionares

CEUA Comissatildeo de Eacutetica no Uso de Animais

CRH Hormocircnio liberador de corticotropina

dB decibeacuteis

DCF Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas

DPA Departamento de Parasitologia Animal

FC Frequecircncia Cardiacuteaca

FFT Transformada Raacutepida de Fourier

GR Receptor de Glicocorticoacuteides

HF Frequecircncia alta

HHA Eixo Hipotaacutelamo Hipoacutefise Adrenal

IRR Intervalos RR

LC Locus Coeruleus

LF Frequecircncia baixa

MR Receptor de Mineralocorticoacuteide

NAV Nodo Atrioventricular

NA Noradrenalina

NS Nodo Sinoatrial

PKA Proteiacutena quinase dependente de AMPc

PVN Nuacutecleo Paraventricular do Hipotaacutelamo

RMSSD raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado

SAM Sistema Simpato-adreno-medular

SNA Sistema Nervoso Autocircnomo

SNC Sistema Nervoso Central

SNP Sistema Nervoso Parassimpaacutetico

SNS Sistema Nervoso Simpaacutetico

xii

SRD Sem raccedila definida

STDRR Desvio padratildeo de todos os intervalos RR do segmento

UFRRJ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

VIC Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco

xiii

SUMAacuteRIO

DEDICATOacuteRIA v

AGRADECIMENTOS vi

RESUMO vii

LISTA DE TABELAS E FIGURAS ix

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS xi

1 INTRODUCcedilAtildeO 1

11 Justificativa 3

12 Objetivos 4

121 Geral 4

122 Especiacuteficos 4

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 5

21 Estresse 5

22 Fisiologia do estresse 6

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse 10

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca 10

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) 12

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees 14

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees 16

26 Fobia em catildees 18

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS 22

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental 22

32 Animais 22

321 Consideraccedilotildees eacuteticas 23

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som 23

33 Procedimentos Experimentais 24

xiv

331 Estiacutemulo Sonoro 25

34 Grupos experimentais 26

35 Coletas de sangue 26

36 Uso do Frequenciacutemetro 27

37 Anaacutelise Espectral da VIC 27

38 Anaacutelise Comportamental 30

39 Anaacutelise Estatiacutestica 31

4 RESULTADOS 33

41 Perfil dos proprietaacuterios e caracteriacutesticas gerais dos animais 33

42 Anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco 41

43 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 46

44 Correlaccedilotildees entre os dados 51

5 DISCUSSAtildeO 55

51 Perfil dos proprietaacuterios e manejo dos animais 55

52 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e o estresse sonoro agudo 59

53 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 61

54 Correlaccedilotildees entre dados 62

55 O Modelo de Estresse Sonoro Agudo em Catildees 63

6 CONCLUSOtildeES 65

7 REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 67

8 ANEXOS 77

ANEXO 1 Ficha geral de cadastro 77

ANEXO 2 Ficha Neuroloacutegica 81

ANEXO 3 Ficha de avaliaccedilatildeo de Fobia 83

ANEXO 4 Folder de divulgaccedilatildeo 85

ANEXO 5 Termo de Consentimento 86

xv

ANEXO 6 Ficha de Protocolo Experimental 88

1

1 INTRODUCcedilAtildeO

Situaccedilotildees de estresse e medo fazem parte da vida de todos os animais e as

reaccedilotildees fisioloacutegicas provocadas por elas satildeo essenciais para sobrevivecircncia no meio

selvagem mas tambeacutem na vida urbana para aqueles animais que foram domesticados

acompanhando o homem em sua caminhada de vida em sociedade

A espeacutecie canina foi a que mais se envolveu com o homem tornando-se um

animal domeacutestico e dependente de cuidados sendo alvo de problemas sociais

ambientais e de sauacutede puacuteblica quando abandonados ou em vida livre pelas cidades e

comunidades

Essa relaccedilatildeo criada ao longo dos tempos entre os catildees e o homem trouxe para

os dias atuais um viacutenculo afetivo de ambas as espeacutecies modificando e ateacute selecionando

atraveacutes das raccedilas o comportamento canino acentuando caracteriacutesticas que podem estar

influenciando a forma dos catildees de lidar com as situaccedilotildees de estresse e medo no

cotidiano

A fisiologia do comportamento regula-se baseada nos estiacutemulos externos aos

quais o animal estaacute sujeito conforme suas necessidades de sobrevivecircncia e ateacute de bem

estar Dessa forma o estresse vem a ser responsaacutevel por modelar o comportamento de

um indiviacuteduo conforme seu modo de vida e sua exposiccedilatildeo a esses estiacutemulos

O estresse como mecanismo de adaptaccedilatildeo a situaccedilotildees adversas eacute extremamente

importante na manutenccedilatildeo da vida pois sem esse mecanismo qualquer situaccedilatildeo

desfavoraacutevel poderia causar morte imediata sendo a capacidade de responder

rapidamente a uma situaccedilatildeo de perigo uma importante caracteriacutestica da evoluccedilatildeo dos

seres

Mais especificamente em situaccedilotildees de estresse o organismo de um indiviacuteduo

redistribui sua energia e o sistema locomotor e sensorial satildeo priorizados em detrimento

de outros (reprodutivo digestivo e imune) fazendo assim com que a resposta

momentacircnea seja eficiente O problema comeccedila quando haacute a persistecircncia destas

situaccedilotildees e ou dessas respostas causando prejuiacutezo aos sistemas deprimidos

A influecircncia dos estiacutemulos sonoros tem demonstrado importacircncia cliacutenica na

espeacutecie canina jaacute que leva diversos indiviacuteduos a sofrerem alteraccedilotildees comportamentais e

2

neuroendoacutecrinas que podem evoluir para graves distuacuterbios comportamentais e

fisioloacutegicos como a fobia Em alguns casos de estresse crocircnico severo podem ocorrer

danos neurais doenccedilas gastrointestinais aleacutem da diminuiccedilatildeo da resposta imune

A fobia eacute descrita como um medo acentuado irracional persistente e excessivo

claramente discerniacutevel de objetos seres lugares ou situaccedilotildees de forma desproporcional

e exagerada acompanhada de comportamento de fuga esquiva antecipaccedilatildeo e intenso

sofrimento que geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase

fisioloacutegica mas que leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas

ao medo coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o

eixo Hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HPA) na liberaccedilatildeo de glicocorticoides e o sistema

nervoso simpaacutetico

Na fobia os limiares de ativaccedilatildeo dos circuitos neurais de medo estatildeo reduzidos

podendo ser observado no indiviacuteduo clara hiperexcitabilidade hipervigilacircncia e

aumento da responsividade comportamental aos estiacutemulos Idealmente os graus de

ativaccedilotildees seriam proporcionais agrave ameaccedila e uma adaptaccedilatildeo agrave situaccedilatildeo normalizaria a

resposta de estresse diminuindo-a conforme a ameaccedila desaparecesse o que natildeo ocorre

na fobia

Os criteacuterios para o diagnoacutestico de fobia em humanos costumam usar termos

que se referem a sintomas emocionais envolvendo sentimentos e estados de consciecircncia

subjetivos o que difiacuteculta a abordagem cientifica e cliacutenica nos animais Poreacutem as

alteraccedilotildees dos paracircmetros comportamentais e fisioloacutegicos dos sistemas

neuroendoacutecrinos envolvidos nesses distuacuterbios satildeo um caminho de estudo e pesquisa

Dessa forma os niacuteveis de estresse podem ser avaliados atraveacutes da mensuraccedilatildeo

de paracircmetros fisioloacutegicos e comportamentais Em vaacuterias espeacutecies o paracircmetro mais

utilizado eacute a dosagem de cortisol Aleacutem desse a anaacutelise da variabilidade do intervalo

cardiacuteaco (VIC) vem se mostrando um paracircmetro importante e natildeo invasivo para avaliar

o balanccedilo simpato-vagal em indiviacuteduos submetidos a estiacutemulos potencialmente

desafiadores As alteraccedilotildees comportamentais analisadas em conjunto com as anaacutelises

citadas a cima formam uma importante fonte de dados ainda natildeo correlacionadas nos

estudos mais recentes

Contudo o presente estudo teve como objetivo avaliar as respostas autonocircmicas

e comportamentais induzidas pelo estresse sonoro agudo em catildees de companhia com

3

histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O modelo de estresse utilizado

consiste em um meacutetodo natildeo invasivo e seguro uma vez que cada animal foi submetido

a um estiacutemulo sonoro (sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio) de curta duraccedilatildeo (25 min) a

uma intensidade sonora maacutexima de 1039 dB natildeo sendo capaz de causar efeitos

deleteacuterios para a audiccedilatildeo dos animais

Para tal foram utilizados 28 catildees de diversas raccedilas dos quais 16 eram

historicamente foacutebicos a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e 12 natildeo apresentavam

qualquer sinal de medo a esses sons Os animais foram dividos ainda entre submetidos

ao som de trovatildeo e submetidos ao som de fogos de artifiacutecio

Foram avaliados o balanccedilo simpato-vagal atraveacutes da mensuraccedilatildeo da VIC e 14

paracircmetros comportamentais aleacutem da coleta de amostras sanguiacuteneas em 6 momentos

para posterior anaacutelise dos niacuteveis seacutericos de cortisol

11 Justificativa

Animais e humanos satildeo constantemente submetidos a situaccedilotildees de estresse no

seu cotidiano Em catildees vaacuterios estiacutemulos podem ser considerados geradores de estresse

e sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio tecircm se mostrado estiacutemulos estressores importantes

devido agrave frequente ocorrecircncia de fobia a esses sons nesta espeacutecie

O tema escolhido eacute de grande importacircncia na atualidade uma vez que satildeo

necessaacuterias mais pesquisas sobre o efeito do estresse em humanos e animais Neste

sentido a avaliaccedilatildeo dos paracircmetros fisioloacutegicos em situaccedilotildees de estresse eacute uma forma

de estudar e compreender melhor os distuacuterbios relacionados ao estresse e traccedilar novos

caminhos terapecircuticos

Eacute relevante para a Medicina Veterinaacuteria e para a aacuterea de sauacutede como um todo

pois modelos de estresse sonoro agudo podem ser uacuteteis na verificaccedilatildeo da reatividade ao

estresse aleacutem de serem pouco invasivos e de relativa faacutecil execuccedilatildeo

4

12 Objetivos

121 Geral

Verificar as respostas fisioloacutegicas ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

122 Especiacuteficos

Avaliar o perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios as caracteriacutesticas gerais e

comportamentais e o manejo dos animais em catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

Avaliar a resposta autonocircmica a partir da anaacutelise espectral da variabilidade do

intervalo cardiacuteaco de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos

de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar a resposta comportamental de catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre o comportamento dos animais relatado pelos

proprietaacuterios durante a ocorrecircncia natural de trovotildees ou fogos e os comportamentos

exibidos pelos catildees em resposta ao modelo de estresse sonoro em laboratoacuterio

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre paracircmetros autonocircmicos e comportamentais em

catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

5

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

21 Estresse

O fisiologista Claude Bernard em 1872 definiu o conceito de meio interno pela

primeira vez como um princiacutepio do equiliacutebrio dinacircmico do meio interno essencial para

a sobrevivecircncia (FRANCI 2005)

Apesar disso foi Walter Canon em 1929 o responsaacutevel por definir esse

conceito da condiccedilatildeo de equiliacutebrio do meio interno criado por Claude Bernard com o

termo homeostase Aleacutem de ter reconhecidoos agentes desafiadores da homeostase

como fiacutesicos e emocionais e elaborado o conceito de ldquoreaccedilatildeo de emergecircnciardquo que

ocorre quando haacute um desafio capaz de ativar a liberaccedilatildeo de noradrenalina de terminais

nervosos simpaacuteticos e adrenalina da medula da adrenal (FRANCI 2005)

E mais recentemente entre 1946 e 1976 o fisiologista canadense Hans Selye

definiu ldquoa situaccedilatildeo gerada pelo desafio ao qual um organismo estaria submetidordquo com o

termo estresse E ao ocorrerem controveacutersias conceituais uma vez que natildeo se podia

distinguir a causa do efeito ele criou o termo estressor para designar o agente causador

(estiacutemulo) e manteve o termo estresse para designar a condiccedilatildeo gerada pelo estiacutemulo

desafiador (FRANCI 2005)

A resposta a um estiacutemulo estressor eacute fundamental para a homeostase de um ser

vivo e sua sobrevivecircncia Nas condiccedilotildees de estresse o organismo reage por meio da

ativaccedilatildeo e desativaccedilatildeo do mecanismo de controle de vaacuterias funccedilotildees para recuperar e

manter a homeostase No entanto essas respostas podem ser insuficientes para

restabelecer ou manter a homeostase ou podem ser exageradas representando risco de

doenccedilas Portanto o estresse pode ser definido como a soma de respostas fiacutesicas e

mentais causadas por determinados estiacutemulos externos e que permitem ao indiviacuteduo

superar determinadas exigecircncias do meio-ambiente (FRANCI 2005)

A reaccedilatildeo de estresse maximiza o gasto de energia que ajuda a preparar o corpo

para atender a uma situaccedilatildeo ameaccediladora ou desafiadora em que o indiviacuteduo tende a

mobilizar um grande esforccedilo a fim de lidar com o evento No entanto enquanto uma

certa quantidade de estresse eacute necessaacuteria para a sobrevivecircncia o estresse prolongado

pode afetar adversamente a sauacutede (BERNARD amp KRUPAT 1994)

6

Em situaccedilotildees de estresse ocorre a ativaccedilatildeo de duas principais vias o eixo

hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) atraveacutes do aumento da produccedilatildeo de cortisol e o

sistema nervoso simpaacutetico atraveacutes da liberaccedilatildeo de catecolaminas (Noradrenalina

Adrenalina)

A desregulaccedilatildeo de qualquer um desses sistemas de estresse pode levar a

distuacuterbios fisioloacutegicos de vaacuterios outros sistemas incluindo os sistemas imunoloacutegico

cardiovascular funccedilatildeo metaboacutelica e comportamento levando a maacute adaptaccedilatildeo da

resposta ao estresse (MARQUES et al 2010)

22 Fisiologia do estresse

Os estiacutemulos estressores podem ser definidos como aqueles que desafiam a

homeostase Esses estiacutemulos geram respostas que variam de acordo com a duraccedilatildeo e

intensidade e ainda com a predisposiccedilatildeo geneacutetica e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo

Os estiacutemulos causadores de estresse podem ser classificados em quatro grupos

estressores fiacutesicos e quiacutemicos (calor frio barulho radiaccedilatildeo intensa e substacircncias

toacutexicas) psicoloacutegicos (medo e frustraccedilatildeo) sociais (um ambiente hostil e rompimento de

relaccedilotildees) e os que alteram a homeostase vegetativa como em casos de exerciacutecio intenso

e hemorragias Quanto agrave duraccedilatildeo os estiacutemulos causadores de estresse podem ser ainda

classificados como agudos ou crocircnicos (PACAacuteK amp PALKOVITS 2001)

Moberg (2000) propotildee um modelo para compreensatildeo do estresse em toda

espeacutecie animal que sugere uma resposta bioloacutegica ao estresse a partir de trecircs estaacutegios

gerais

1ordm O reconhecimento de um estiacutemulo estressante

2deg A defesa bioloacutegica contra o estiacutemulo estressante

3deg As consequecircncias da resposta de estresse

Esta resposta ao estressor iraacute abranger aspectos cognitivos comportamentais e

fisioloacutegicos (MARGIS et al 2003)

Em uma situaccedilatildeo de estresse satildeo ativados o sistema simpato-adrenomedular

gerando o aumento da secreccedilatildeo de catecolaminas e logo excitaccedilatildeo raacutepida do sistema

cardiovascular ocasionando um aumento da frequecircncia cardiacuteaca e da pressatildeo arterial E

7

o outro eixo ativado eacute o hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) levando ao aumento na

produccedilatildeo de cortisol e naturalmente mobilizaccedilatildeo de energia (ULRICH-LAI amp

HERMAN 2009) (Figura 1)

As respostas de emergecircncia ativadas pelo SAM ocorrem quando o organismo se

prepara para a defesa ou ataque excretando adrenalina Entatildeoo suprimento de sangue eacute

desviado para os muacutesculos havendo elevaccedilatildeo do deacutebito cardiacuteaco total e da

redistribuiccedilatildeo sanguiacutenea aumentando a oferta de nutrientes e oxigecircnio para as estruturas

vitais A pressatildeo arterial se eleva e os bronquiolos se dilatam tornando a respiraccedilatildeo

mais raacutepida e profunda para retirada do dioacutexido de carbono excedente As funccedilotildees

digestivas e secretoacuterias diminuem aleacutem da reaccedilatildeo de aliacutevio com a liberaccedilatildeo de qualquer

excesso da bexiga e intestino A taxa metaboacutelica aumenta e a liberaccedilatildeo de endorfinas

diminue a sensibilidade agrave dor e os sentidos satildeo mantidos em estado de alerta

(ROGERSON 1997)

8

Figura 1 Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA A ativaccedilatildeo do sistema simpato-adrenomedular

(SAM) e do eixo do hipotaacutelamo hipoacutefise adrenal (HHA) como sistemas primaacuterios para a

manutenccedilatildeo e restabelecimento da homeostase A exposiccedilatildeo ao estressor resulta em ativaccedilatildeo de

neurocircnios preacute-ganglionares simpaacuteticos na coluna intermediolateral da medula espinhal

toracolombar (T1 a L2) Estes neurocircnios preacute-ganglionares se projetam para gacircnglios preacute e para

vertebrais que entatildeo terminam em oacutergatildeos alvo e nas ceacutelulas cromafins da medula da adrenal

Esta ativaccedilatildeo simpaacutetica (em ciacuterculos) representa a resposta claacutessica de luta e fuga que foi

primariamente caracterizada por Walter Cannon e colaboradores no iniacutecio do seacuteculo passado e

leva a um aumento dos niacuteveis de adrenalina (proveniente da adrenal) e de noradrenalina dos

terminais simpaacuteticos aumento da frequecircncia e da forccedila de contraccedilatildeo do coraccedilatildeo vasoconstriccedilatildeo

perifeacuterica e mobilizaccedilatildeo de energia O tocircnus parassimpaacutetico tambeacutem eacute mobilizado durante o

estresse No sistema parassimpaacutetico (em estrelas) representa a ativaccedilatildeo de nuacutecleos preacute-

ganglionares cracircnios-sacrais ativam nuacutecleos poacutes-ganglionares localizados proacuteximos aos oacutergatildeos

inervados com efeito geralmente oposto ao sistema simpaacutetico Para o eixo HHA a exposiccedilatildeo ao

estressor ativa neurocircnios hipofisiotroacuteficos no nuacutecleo paraventricular do hipotaacutelamo (PVN) que

secretam hormocircnios de liberaccedilatildeo como hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH) e

vasopressina (AVP) na circulaccedilatildeo porta da eminecircncia meacutedia Estes hormocircnios liberadores atuam

na hipoacutefise anterior para promover a secreccedilatildeo de hormocircnio adrenocorticotroacutefico (ACTH) que

atua no coacutertex da adrenal (zona fasciculata) para iniciar a siacutentese e liberaccedilatildeo dos hormocircnios

glicocorticoacuteides Os glicocorticoacuteides circulantes promovem a mobilizaccedilatildeo de energia estocada e

potencializam numerosos efeitos simpaacuteticos como a vasoconstriccedilatildeo perifeacuterica Aleacutem disso o

coacutertex da adrenal eacute diretamente inervado pelo sistema simpaacutetico que regula a liberaccedilatildeo de

glicocorticoacuteides Entatildeo a ativaccedilatildeo do sistema simpaacutetico e do eixo HHA tem accedilotildees

complementares no organismo incluindo a mobilizaccedilatildeo de energia e a manutenccedilatildeo da pressatildeo

arterial durante o estresse (Adaptado de ULRICH-LAI amp HERMAN 2009)

CRH

AVP

9

As respostas ao estresse que envolvem emoccedilatildeo passaratildeo por avaliaccedilatildeo afetiva

onde a informaccedilatildeo seraacute processada e interpretada para se estimar o potencial de ameaccedila

Esta avaliaccedilatildeo afetiva iraacute determinar o padratildeo de respostas e o tipo de defesa de acordo

com a histoacuteria pessoal aprendizado e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo que entatildeo faraacute

a avaliaccedilatildeo da capacidade para lidar com a situaccedilatildeo e organizaccedilatildeo da resposta

(MARGIS et al 2003)

A intensidade da resposta eacute que determina se o animal estaacute sofrendo de estresse

ou eacute meramente experimentado um episoacutedio breve em sua vida sem nenhum impacto

significativo ao seu bem-estar

Circuitos neurais espinais e supra espinais estatildeo envolvidos nas respostas de

estresse Os supra espinais processam as informaccedilotildees vindas das vias somatossensoriais

e viscerossensoriais e elaboram as respostas atraveacutes do taacutelamo hipotaacutelamo aacuterea preacute-

optica estruturas liacutembicas e sistemas amineacutergicos e natildeo amineacutergicos do tronco cerebral

Os neurocircnios do PVN secretores de hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH)

e vasopressina com os neurocircnios catecolamineacutergicos do locus coeruleus (LC) (o nuacutecleo

com maior densidade de neurocircnios noradreneacutergicos com papel fundamental no

desencadeamento da resposta ao estresse e reaccedilotildees de fuga) inervam o hipocampo a

amiacutegdala e o neocortex aleacutem de nuacutecleos do rafe (5-HT) e grupamentos celulares da

medula e ponte compondo assim um dos principais reguladores centrais de resposta ao

estresse na ativaccedilatildeo do eixo HHA e SNS (FRANCI 2005)

O eixo HHA eacute ativado por diferentes categorias de estresse como traumaacutetico

inflamatoacuterio e psicoloacutegico E o estresse psicoloacutegico tem regulaccedilatildeo por estruturas

liacutembicas que exercem atividade modulatoacuteria sobre o eixo (ULRICH-LAI amp HERMAN

2009)

O PVN monitora sinais relacionados com o estado emocional atraveacutes de sinais

metaboacutelicos como a composiccedilatildeo plasmaacutetica O CRH o principal neurotransmissor

coordenador das alteraccedilotildees psicoloacutegicas e comportamentais relacionadas ao estresse eacute

sintetizado no PVN e liberado nos capilares da eminecircncia meacutedia juntamente com a

vasopressina (AVP) e alcanccedilam diretamente a hipoacutefise anterior via circulaccedilatildeo portal

hipotalacircmica-hipofisaacuteria que por sua vez estimula na hipoacutefise a liberaccedilatildeo do hormocircnio

adrenocorticotroacutefico (ACTH) (MORMEgraveDE et al 2006)

10

O ACTH eacute sintetizado por ceacutelulas especializadas da hipoacutefise anterior vai para a

corrente sanguiacutenea e estimula o coacutertex da glacircndula adrenal (na zona fasciculada) que

sintetiza o glicocorticoide atraveacutes de esteroides derivados do colesterol O cortisol eacute o

glicocorticoacuteide ativo do eixo para catildees gatos e humanos e a corticosterona para

paacutessaros e roedores (MORMEgraveDE et al 2006)

Esse hormocircnio final do eixo HHA interage com as ceacutelulas atraveacutes da ligaccedilatildeo a

dois receptores o receptor glicocorticoide (GR) e o receptor de mineralocorticoide

(MR) O receptor GR eacute encontrado na maioria dos tecidos do corpo incluindo a maioria

das aacutereas do enceacutefalo No rim e em outros tecidos a aldosterona liga-se ao MR durante a

regulaccedilatildeo da reabsorccedilatildeo de soacutedio mas o MR tambeacutem estaacute presente no hipocampo onde

ocorre a ligaccedilatildeo do cortisol Estes complexos esteroacuteide-receptores entatildeo interagem

com o DNA para iniciar ou para reprimir a transcriccedilatildeo de genes especiacuteficos a fim de

regular a siacutentese de proteiacutenas que provoca alteraccedilotildees fisioloacutegicas em resposta ao

estresse

O cortisol tem 10 vezes mais afinidade ao MR que ao GR Em niacuteveis baixos ou

em situaccedilotildees de ausecircncia de estresse a maior parte do cortisol liga-se aos MRs no

ceacuterebro (principalmente no hipocampo) e modula a atividade basal do eixo HHA e o

aparecimento de resposta ao estresse Com a elevaccedilatildeo dos niacuteveis de cortisol ocorre um

aumento de ligaccedilotildees nos receptores GR reduzindo a atividade do eixo HHA

(mecanismo de ldquofeed-backrdquo negativo) No entanto a ativaccedilatildeo crocircnica deste receptor

estaacute ligada a vaacuterios distuacuterbios cognitivos relativos ao estresse (DE KLOET et al 1999)

Proteger o organismo de possiacuteveis danos eacute um dos papeis principais das

respostas hormonais a situaccedilotildees de estresse E seus principais hormocircnios satildeo a

adrenalina de secreccedilatildeo raacutepida pelo envolvimento na reaccedilatildeo de luta ou fuga e o

corticosteroacuteides na restauraccedilatildeo e na reparaccedilatildeo dos sistemas agindo na segunda linha de

defesa regulando as respostas inflamatoacuteria e imune (MC EWEN 2000)

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca

11

O Nodo Sinoatrial (NS) apresenta a frequecircncia de disparo mais intensa no

coraccedilatildeo estimulando outros locais como os nodos atrioventriculares que principiam

seus proacuteprios impulsos eleacutetricos E com a ausecircncia de influecircncias hormonais ou neurais

a frequecircncia cardiacuteaca (FC) permanece equivalente agrave frequecircncia de disparos do NS ou

seja constante (STAUSS 2007)

Os sistemas nervoso simpaacutetico (SNS) e parassimpaacutetico (SNP) estatildeo

constantemente ativados regulando a atividade cardiacuteaca com a predominacircncia de um ou

outro conforme a situaccedilatildeo Em repouso a predominacircncia eacute vagal o que em humanos

leva a respostas raacutepidas de no maacuteximo 5 segundo na FC diminuindo-a em poucos

batimentos Jaacute as respostas da ativaccedilatildeo simpaacutetica ocorrem apoacutes cinco segundos

aumentando progressivamente chegando a sua resposta maacutexima de aumento da FC

apoacutes 20 a 30 segundos (HAINSWORTH 1995)

No entanto os sistemas simpaacutetico e parassimpaacutetico atuam de forma simultacircnea

na regulaccedilatildeo da atividade cardiacuteaca onde o aumento da atividade vagal natildeo resulta tatildeo

logo na reduccedilatildeo da atividade simpaacutetica e vice-versa (VON BORELL et al 2007)

Quando o SNS eacute ativado as fibras nervosas promovem a descarga de

noradrenalina (NA) nos aacutetrios e ventriacuteculos que por sua vez juntamente com a

adrenalina liberada pela adrenal estimula os receptores β1 adreneacutergicos presentes no

coraccedilatildeo ativando atraveacutes de uma proteiacutena G excitatoacuteria (Gs) a enzima adenilato ciclase

(AC) agrave produzir AMPc Seu aumento intracelular leva agrave ativaccedilatildeo da proteiacutena quinase

dependente de AMPc aumentando as correntes de canais iocircnicos de Ca+2

e Na+

acelerando a velocidade de despolarizaccedilatildeo levando ao aumento da frequecircncia de

disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas do NA desencadeando o aumento da

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Do mesmo modo o miocaacuterdio atrial o nodo aacutetrio-ventricular e o NS satildeo

inervados pelas fibra nervosa parassimpaacutetica dos nervos vagos liberando acetilcolina

(ACh) ativando receptores M2 que estatildeo acoplados a uma proteiacutena G inibitoacuteria (Gi)

inibindo a siacutentese de AMPc intracelular reduzindo a atividade da PKA Aleacutem de a ACh

ativar uma corrente de efluxo de K+ gerando uma hiperpolarizaccedilatildeo da membrana

levando ao aumento do limiar de ativaccedilatildeo do potencial de accedilatildeo sinusal o que reduz a

12

frequecircncia de disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas sinusais diminuindo por fim a

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Existem diferenccedilas no tempo de resposta da ativaccedilatildeo dos ramos simpaacutetico e

parassimpaacutetico que ocorrem em certo modo pela liberaccedilatildeo lenta de noradrenalina nos

terminais nervosos simpaacuteticos e pelas fibras preacute-ganglionares vagais serem

mielinizadas contribuindo para uma transmissatildeo eleacutetrica mais raacutepida Aleacutem das

diferenccedilas anatocircmicas entre os ramos como eacute o caso dos corpos celulares preacute-

ganglionares do parassimpaacutetico localizados dentro do coraccedilatildeo enquanto que os corpos

celulares preacute-ganglionares simpaacuteticos se localizam no gacircnglio paravertebral (VON

BORELL et al 2007)

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC)

A manutenccedilatildeo da homeostase do sistema cardiovascular eacute resultado da oscilaccedilatildeo

riacutetmica de componentes regulatoacuterios da atividade cardiacuteaca onde se observa intervalos

irregulares de tempo entre os batimentos consecutivos (VON BORELL et al 2007)

A anaacutelise da variabilidade do intervalo cardiacuteaco pode ser realizada atraveacutes dos

iacutendices no domiacutenio do tempo e da frequecircncia

No domiacutenio do tempo cada intervalo entre um batimento cardiacuteaco e outro pode

ser medido em milissegundos e no domiacutenio da frequecircncia as flutuaccedilotildees riacutetmicas podem

caracterizar os estados de repouso e atividade influindo na seacuterie cronoloacutegica contida

entre os intervalos tornando possiacutevel a mensurar a atividade do SNA (HOSHI 2009

SONG et al 2006)

Os dados satildeo obtidos atraveacutes da gravaccedilatildeo dos intervalos entre batimentos

cardiacuteacos feitos por frequenciacutemetros capazes de detectar em milissegundos (ms) o

tempo entre os batimentos e armazenaacute-los (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al

2007)

A teacutecnica utilizada com esse objetivo eacute chamada de anaacutelise espectral e consiste

no uso de algoritmos matemaacuteticos como eacute o caso da transformada raacutepida de fourier

(FFT) para obter diagramas dimensionais Dispondo em um graacutefico os componentes

oscilatoacuterios de frequecircncia da VIC no eixo X e a amplitude dos componentes oscilatoacuterios

no eixo Y permitindo atraveacutes dessa teacutecnica determinar a forccedila espectral das

frequecircncias baixas e altas da VIC

13

Nesse contexto os dois Sendo assim os dois componentes de frequecircncia principais satildeo

divididos atraveacutes da anaacutelise espectral em Frequecircncia baixa (LF) caracterizado pelo

espectro de 004 a 015Hz e Frequecircncia alta (HF) situada na faixa de 015 a 04 Hz na

anaacutelise espectral (KAWASE et al 2002 VON BORELL et al 2007 PICCIRILLO et

al 2009)

Quando os IRR satildeo dispostos em uma escala de tempo um graacutefico eacute

confeccionado e as oscilaccedilotildees formadas representam a accedilatildeo dos diferentes componentes

regulam os pulsos cardiacuteacos onde as frequecircncias mais altas representam a atividade

riacutetmica resultante da ativaccedilatildeo parassimpaacutetica e as mais baixas exibem aquelas

resultantes da atividade simpaacutetica (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al 2007)

(Figura 2)

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC Variabilidade do intervalo cardiacuteaco em um indiviacuteduo

jovem durante o repouso e quando em movimento A seacuterie temporal de intervalos RR estaacute

Repouso Movimento

14

disposta nos graacuteficos do topo Os graacuteficos centrais ilustram a presenccedila de dois componentes

principais da densidade espectral LF e HF Durante o movimento o componente LF se torna

predominante em relaccedilatildeo ao repouso Os graacuteficos na base da figura demonstram a distribuiccedilatildeo

relativa dos dois componentes (representada pela aacuterea) (MALLIANI 1997)

A razatildeo entre os dois componentes de frequecircncia eacute calculada a partir dos valores

obtidos de LF e HF resultando em valor que representa o balanccedilo entre a atividade

simpaacutetica e parassimpaacutetica aleacutem de possibilitar a decomposiccedilatildeo dos componentes

espectrais atraveacutes do caacutelculo das frequecircncias centrais desses componentes que se

situam impliacutecitos no sinal da variabilidade (PAGANI et al 1986 LOMBARDI et

al1996 LOMBARDI 1997 MALLIANI et al 1997 VON BORELL et al 2007

HARADA et al 2005)

A anaacutelise espectral da VIC natildeo acessa o tocircnus autonocircmico cardiacuteaco mas sim o

seu balanccedilo o que justifica a ocorrecircncia de alteraccedilotildees na capacidade do coraccedilatildeo de

responder a esses estiacutemulos quando haacute alteraccedilotildees crocircnicas na atividade autonocircmica

Nesses casos natildeo seria aplicaacutevel a anaacutelise espectral da VIC (STAUSS 2007

PICCIRILLO et al 2009)

Deste modo a anaacutelise espectral da VIC tem como principal utilidade a funccedilatildeo de

indicadora da atividade autonocircmica em resposta ao estresse psicoloacutegico e fiacutesico (VON

BORELL et al 2007) E quando eacute aplicada no estudo das alteraccedilotildees agudas da

atividade autonocircmica cardiacuteaca essa anaacutelise eacute utilizada de maneira a obter dados

fidedignos onde diante de uma resposta ao estresse psicoloacutegico pode ser observado um

aumento agudo na atividade cardiacuteaca simpaacutetica caracterizado pelo aumento do

componente LF com provavelmente baixa ou nenhuma alteraccedilatildeo do componente HF

(STAUSS 2007)

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees

O oacutergatildeo auditivo dentre outras funccedilotildees se caracteriza especialmente por seu

desempenho no reconhecimento de situaccedilotildees ameaccediladoras estando em funcionamento

ininterrupto atraveacutes da conexatildeo direta do ouvido interno com os mecanismos neurais de

ldquoluta ou fugardquo Esse sistema eacute capaz de diferenciar sons de frequecircncias e intensidades

relevantes para a sobrevivecircncia do indiviacuteduo em seu meio ambiente (WESTMAN amp

WALTERS 1981)

15

A percepccedilatildeo do som colabora no balanccedilo homeostaacutetico do sistema nervoso

central influenciando consequentemente o equiliacutebrio fisioloacutegico de forma geral atraveacutes

dos centros autonocircmicos e neuroendoacutecrinos do hipotaacutelamo variando em resposta

conforme o significado do estiacutemulo sonoro e sua intensidade previsibilidade

variabilidade e complexidade

Nesse contexto as respostas fundamentais ao som satildeo de orientaccedilatildeo reflexo de

surpresa e de defesa Sendo a resposta de orientaccedilatildeo fundamental por ser a reaccedilatildeo

comportamental de busca pela fonte sonora permitindo que o indiviacuteduo se prepare para

a resposta necessaacuteria e caso o reconhecimento do som mostre ser esse de baixa

significacircncia a habituaccedilatildeo iraacute ocorrer diminuindo o grau da reaccedilatildeo

Jaacute o reflexo de surpresa iraacute ocorrer em resposta a sons repentinos de alta

intensidade e caraacuteter assustador podendo ser atenuado quando o indiviacuteduo sabe que ele

iraacute ocorrer e podendo ser exacerbado em situaccedilotildees de tensatildeo medo e de abalo

emocional

E a resposta de defesa acontece em resposta a sons de significado intensidade e

duraccedilatildeo relacionados agrave ameaccedila onde haacute excitaccedilatildeo emocional e preparaccedilatildeo dos sistemas

para a accedilatildeo consistindo na resposta de estresse (WESTMAN amp WALTERS 1981)

Alguns sons adquirem significado particular para o indiviacuteduo representando

perigo em potencial assim como os sons de caracteriacutesticas ameaccediladoras Mas

geralmente o significado conotativo de um som potencialmente ameaccedilador estaacute no fato

de ser desconhecido e apresentar mudanccedilas raacutepidas de intensidade aleacutem das associaccedilotildees

extra-auditivas relacionadas a ele Aleacutem disso a previsibilidade desse estiacutemulo sonoro

tambeacutem poderaacute constituir um fator determinante na resposta jaacute que sons imprevisiacuteveis

caracterizam-se como um estiacutemulo estressor maior desencadeando uma reduccedilatildeo geral

de performance e uma baixa toleracircncia a frustraccedilotildees (WESTMAN amp WALTERS

1981)

Os catildees particularmente apresentam muita sensibilidade a estiacutemulos sonoros

visto que seu sistema auditivo eacute extremamente desenvolvido especialmente com a

funccedilatildeo de caccedila e guarda Poreacutem a resposta de defesa exagerada dos indiviacuteduos dessa

espeacutecie tem sido relatada principalmente aos sons de fogos de artifiacutecio trovatildeo e tiro de

16

armas de fogo Provavelmente o caraacuteter imprevisiacutevel a conotaccedilatildeo negativa que a

espeacutecie apresenta a esses sons e a intensidade proacutexima ao limiar de audiccedilatildeo possa

justificar tal reaccedilatildeo (HYDBRING et al 2004)

E eacute com base nessa reaccedilatildeo desmedida que os estiacutemulos sonoros como os sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio vecircm sendo utilizados como modelos de estresse em catildees

(HYDBRING et al 2004 ENGELAND et al 1990) Representando uma opccedilatildeo para o

estudo da reatividade ao estresse que pode ser comparada ao modelo de estresse

acuacutestico de sobressalto em ratos

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees

Ao iniciar um estudo a respeito de uma espeacutecie deve-se ter em mente que cada

sujeito analisado natildeo eacute um sistema inerte e fechado mas sim um somatoacuterio de eventos

que possibilitam ter um exame mais amplo e completo das interaccedilotildees do animal com o

ambiente (SULTAN 2003 BATESON et al 2004)

Assim o estudo comportamental se mostra uma importante ferramenta pois

permite entender que processos bioloacutegicos satildeo compostos por eventos fisioloacutegicos e

psicoloacutegicos natildeo havendo exclusatildeo entre eles mas sim uma sobreposiccedilatildeo com fortes

correlaccedilotildees (HARVERBEKE et al 2008 BEERDA 1999 SPANGENBERG 2006

MONTANHA et al 2009) Conhecer a etologia canina iraacute permitir uma melhor

utilizaccedilatildeo do animal respeitando seus limites e possibilitando a manutenccedilatildeo fiacutesica e

mental dentro dos padrotildees de bem-estar da espeacutecie (SNOWDON 1999 DAWNKINS

1989 DARWIN 2004)

Com relaccedilatildeo ao bem-estar Broom amp Johnson (1993) e Broom amp Fraser (2010)

definem como o estado de um animal em relaccedilatildeo agraves suas tentativas de se adaptar ao

meio em que vive Para os animais domeacutesticos principalmente para os animais de

companhia esse eacute um conceito que muitas vezes pode ser confundido e mal aplicado

pelo homem agrave medida que esse confronta a realidade do animal com a sua proacutepria

passando a adequar paracircmetros humanos a esses animais

Os catildees satildeo marcados pela socializaccedilatildeo baseada em relaccedilotildees familiares com

organizaccedilotildees flexiacuteveis e respostas a um liacuteder aleacutem de possuiacuterem necessidade de

17

ambientes complexos e variados marcadamente importantes na vida gregaacuteria de seus

ancestrais (BROOM amp FRASER 2010)

Pensando nisso um manejo inadequado pode ter consequecircncias que variam

desde alteraccedilotildees comportamentais a quadros patoloacutegicos tendo como agravantes

alteraccedilotildees substanciais nos seus niacuteveis de bem-estar

Poreacutem o estudo do comportamento animal ainda se mostra bastante pioneiro jaacute

que as pesquisas cientiacuteficas a niacutevel cliacutenico comeccedilaram a ser realizados haacute poucas

deacutecadas em animais com problemas comportamentais

Dessa forma se faz presente a necessidade de um maior desenvolvimento de

estudos e pesquisas nesse sentido visto que os problemas comportamentais satildeo

apontados como a principal causa de abandono ou morte de animais de companhia

apresentando maior nuacutemero de relatos do que as doenccedilas infecciosas neoplaacutesicas e

metaboacutelicas concomitantes (OVERALL et al 2001)

A relaccedilatildeo homem-animal eacute muito antiga mas eacute pouco estudada E isso faz com

que o diagnoacutestico e o tratamento dos distuacuterbios comportamentais sejam dificultados

Muitas vezes a origem dos problemas comportamentais estaacute ligada ao tipo de

relacionamento existente entre o homem e o seu animal E isso acontece porque os

animais passam por processos de humanizaccedilatildeo para se adaptarem ao modo e ao estilo de

vida do seu proprietaacuterio nem que para isso tenham que modificar as suas caracteriacutesticas

naturais (OVERALL et al 2001)

Embora os catildees apresentem uma flexibilidade comportamental as exigecircncias

criadas pelos seus proprietaacuterios podem desencadear conflitos e frustraccedilotildees que levam ao

aparecimento de problemas comportamentais (OVERALL et al 2001)

Com frequecircncia o stress ou a ansiedade estatildeo relacionados com o ambiente e

mostram que o limiar entre normal e anormal varia entre indiviacuteduos (BEAVER 2005)

O rompimento da homeostase pode resultar de estimulaccedilatildeo interna externa ou

ambos E o potencial de ruptura da homeostase aumenta com a magnitude do desafio

(APPLEBY amp PLUIJMAKERS 2004) Dessa forma sendo a fobia um transtorno de

reaccedilotildees exageradas e desproporcionais ao real grau de importacircncia do estimulo

18

estressor podemos sugerir que o indiviacuteduo foacutebico eacute mais susceptiacutevel ao estresse de

forma geral reagindo com paracircmetros mais facilmente alterados

26 Fobia em catildees

Medo e ansiedade satildeo funccedilotildees adaptativas de sobrevivecircncia que sinalizam para o

organismo a presenccedila de perigo em potencial no ambiente O medo eacute a resposta

imediata acionada por um evento ou objeto potencialmente nocivo e ansiedade envolve

processos cognitivos mais complexos como antecipaccedilatildeo e preocupaccedilatildeo com

hipervigilacircncia diante de um perigo iminente no ambiente (FEINSTEIN et al 2011)

Entre as respostas comportamentais e fisioloacutegicas claacutessicas imediatas do medo

destacam-se o congelamento sobressalto aumento da frequecircncia cardiacuteaca alteraccedilotildees da

pressatildeo arterial e aumento da vigilacircncia Satildeo respostas comportamentais e perceptivas

que facilitam as respostas defensivas como a fuga e esquiva de forma apropriada afim

de reduzir o perigo ou lesatildeo (CHUDASAMA 2009)

O neurocircuito do medo envolve principalmente a amiacutegdala estrutura cerebral

responsaacutevel pela detecccedilatildeo geraccedilatildeo e manutenccedilatildeo das emoccedilotildees relacionadas ao medo e

ansiedade Eacute uma estrutura complexa pertencente ao sistema liacutembico que consiste em

aproximadamente 10 nuacutecleos que coordenam respostas apropriadas agrave ameaccedila e ao

perigo atraveacutes das respostas comportamentais cardiovasculares e endoacutecrinas ao

estresse (ROSEN amp SCHULKIN 1998)

A amiacutegdala faz ligaccedilotildees entre as aacutereas do coacutertex cerebral e recebe informaccedilotildees

de todos os sistemas sensoriais permite a integraccedilatildeo da informaccedilatildeo proveniente das

diversas aacutereas atraveacutes de conexotildees excitatoacuterias e inibitoacuterias

Os nuacutecleos basolaterais satildeo as principais portas de entrada da amiacutegdala

recebendo informaccedilotildees sensoriais e auditivas vindas do taacutelamo coacutertex sensorial e

associativo (Figura 3) Ele estaacute sob tocircnica inibiccedilatildeo GABAeacutergica e quando bloqueada

esta inibiccedilatildeo resulta em aumento do comportamento de ansiedade com ativaccedilatildeo

cardiovascular simpaticamente mediada (KESSLER et al 2005)

19

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional A informaccedilatildeo

sensoacuteria eacute transmitida para o taacutelamo atraveacutes da via leminiscal A aferecircncia auditiva chega na

divisatildeo ventral do nuacutecleo geniculado medial e projeta-se para o coacutertex auditivo primaacuterio

enquanto outras vias extra leminiscais carreiam informaccedilotildees auditivas para outras partes do

taacutelamo como a divisatildeo medial do nuacutecleo geniculado medial e nuacutecleos intralaminares

posteriores que se projetam tanto para o coacutertex auditivo primaacuterio quanto para o coacutertex auditivo

associativo assim como para os nuacutecleos basolaterias da amiacutegdala Essa via do taacutelamo para

amiacutegdala eacute implicada na aprendizagem emocional (IVERSEN et al 2003)

A amiacutegdala ventrolateral em seres humanos eacute mais sensiacutevel aos estiacutemulos

negativos (especialmente se os estiacutemulos sinalizam informaccedilatildeo negativa iminente) E a

amiacutegdala centromedial (CMA) dorsal tem projeccedilotildees principalmente subcorticais

especialmente aquelas ligadas ao hipotaacutelamo lateral e substacircncia cinzenta periaquedutal

(PAG) Essas projeccedilotildees podem explicar em parte as respostas fisioloacutegicas associadas

ao medo com o hipotaacutelamo (Figura 4) (KESSLER et al 2005)

Kandel 2003

20

Figura 4 Conexotildees diretas entre o nuacutecleo central da amiacutegdala e uma variedade de aacutereas

hipotalacircmicas e do tronco encefaacutelico envolvidas no medo e na ansiedade (IVERSEN et al

2003)

O Locus coeruleus importante nuacutecleo com grande densidade de neurocircnios

noradreneacutergicos com papel no desencadeamento da resposta ao estresse e das reaccedilotildees de

fuga tem tambeacutem papel importante no controle do medo A desregulaccedilatildeo desse nuacutecleo

parece ter relaccedilatildeo com o aparecimento do pacircnico e fobias em humanos (CHARNEY

1984) certamente atraveacutes de sua ligaccedilatildeo ao sistema liacutembico (CHARNEY 1984)

Medos podem desenvolver-se gradualmente e pode haver variaccedilatildeo na resposta

Em contraste fobias geralmente se desenvolvem rapidamente e uma vez desenvolvidas

haacute pouca mudanccedila em sua apresentaccedilatildeo entre as seacuteries Situaccedilotildees indutoras de fobia ou

satildeo evitadas a todo custo pelo foacutebico ou se inevitaacutevel satildeo suportadas com intensa

ansiedade e sofrimento (OVERALL 2010)

A Associaccedilatildeo Norte Americana de Psiquiatria no manual de diagnoacutestico e

estatiacutestica de transtornos mentais (DSM-IV-TR 2002) e a CID-10 (1993) definem em

humanos fobias especiacuteficas como medos irracionais excessivos acentuados e

persistentes revelados pela presenccedila ou antecipaccedilatildeo de um objeto situaccedilatildeo ou

atividade foacutebica especiacutefica de forma desproporcional acompanhados de

comportamentos de fuga esquiva antecipaccedilatildeo ansiosa e intenso sofrimento

Geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase fisioloacutegica

mas leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas ao medo

21

coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o eixo

HHA e o Sistema Nervoso Simpaacutetico

Em catildees natildeo haacute ateacute o momento descrito na literatura uma definiccedilatildeo oficial para

tal transtorno

As fobias satildeo transtornos de ansiedade de difiacutecil cura e geralmente a memoacuteria

de uma resposta foacutebica pode desencadear outros transtornos de ansiedade Dessa forma

o tratamento tem importacircncia natildeo soacute pela questatildeo do bem-estar e qualidade de vida

mas tambeacutem devido a seus componentes de comorbidade (OVERALL 2010)

Resposta exagerada a sons de trovatildeo estatildeo entre as doenccedilas comportamentais

mais comumente associados com pacircnico ou fobia em catildees Ocorre geralmente em

todas as raccedilas embora natildeo existam dados sobre a incidecircncia relativa destes problemas

(OVERALL et al 2001 DUNHAM amp FRANK 2001 VOITH amp BORCHELT 1985)

A fobia agrave sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio constitui uma classe que apresenta

resposta extrema repentina e profunda e que apesar de existir uma variaccedilatildeo consideraacutevel

nas respostas dos catildees (BEERDA SCHILDER VAN HOOFF VRIES 1997) no geral

se manifesta com comportamentos de ansiedade associados com atividades acentuadas

do sistema nervoso simpaacutetico Os comportamentos podem incluir catatonia ou mania

concomitante com diminuiccedilatildeo da sensibilidade ou capacidade de resposta agrave dor ou

estiacutemulos sociais aleacutem de fuga vocalizaccedilatildeo salivaccedilatildeo micccedilatildeo defecaccedilatildeo tremores

comportamentos autodestrutivos e ateacute convulsotildees (OVERALL 2010 SHULL-

SELCER amp STAGG 1991)

Jaacute se sabe que existe um fator hereditaacuterio para esse tipo de fobia e embora os

mecanismos pelos quais ela ocorre ainda natildeo sejam compreendidos parece estar em

alguma alteraccedilatildeo na forma como a informaccedilatildeo eacute processada entre a amiacutegdala e o coacutertex

(OVERALL 2010)

E como ansiedade medos e fobias satildeo queixas comportamentais comuns e

problemaacuteticas dos donos de catildees a falta de tratamento pode resultar no rompimento do

viacutenculo humano-animal e posterior abandono desistecircncia ou ateacute mesmo eutanaacutesia do

catildeo afetado (MILLS etal 2003)

22

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental

Os procedimentos experimentais foram realizados na Estaccedilatildeo experimental de

Parasitologia Veterinaacuteria do Departamento de Parasitologia Animal (DPA) da

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) e no Laboratoacuterio de Fisiologia

Animal do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas (DCF) da UFRRJ Todos os

procedimentos estatildeo de acordo com a lei de bem-estar animal Instruccedilatildeo Normativa ndeg

56 de 2008 O presente experimento encontra-se aprovado pelo Comitecirc de Eacutetica na

Pesquisa da UFRRJ CEUA-IB nordm 2308347962014-14

32 Animais

Foram entrevistados 35 proprietaacuterios de catildees entre os quais foram selecionados

28 com 2 a 6 anos de idade pesando de 10 a 30 Kg doacuteceis saudaacuteveis com vacinas e

vermifugaccedilatildeo em dia do muniacutecipio de Seropeacutedica-RJ

Proprietaacuterios de animais com medo de sons de trovatildeo e fogos de artificio

interessados em participar do estudo e proprietaacuterios de animais sem medo convidados a

participar do estudo incialmente responderam a um formulaacuterio de cadastro dos

animais contendo dados gerais e histoacuterico de respostas comportamentais em geral

(Anexo 1) Em seguida os animais foram submetidos a um exame cliacutenico baacutesico que

constitiu em inspeccedilatildeo palpaccedilatildeo auscultaccedilatildeo e termometria retal e um exame

neuroloacutegico para descartar doenccedilas concomitantes (Anexo 2) Foram dispensados

animais arredios agressivos com peso ou idade fora da faixa estabelecida no criteacuterio de

seleccedilatildeo e animais doentes Os animais selecionados foram caracterizados como foacutebicos

e natildeo-foacutebicos a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio e entatildeo submetidos uma uacutenica vez ao

modelo de estresse sonoro A caracterizaccedilatildeo de animais foacutebicos foi realizada conforme

as respostas dos proprietaacuterios ao questionaacuterio de reaccedilotildees comportamentais aos sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009 CROWELL-

DAVIS 2003) (Anexo 3)

23

Meios de divulgaccedilatildeo do estudo atraveacutes de folder e cartazes de divulgaccedilatildeo do projeto

veiculado pela internet e afixado em diversos estabelecimentos veterinaacuterios no

municiacutepio e pela UFRRJ (Anexo 4)

Avaliaccedilatildeo comportamental atraveacutes de entrevista com o proprietaacuterio (questionaacuterio

adaptado de OVERALL 1997) (Anexo 1)

321 Consideraccedilotildees eacuteticas

A participaccedilatildeo no estudo ocorreu somente com a autorizaccedilatildeo dos entrevistados

mediante um termo de consentimento em que se garantia plena liberdade para

interromper a participaccedilatildeo quando desejado (Anexo 5) Natildeo houve riscos agrave sauacutede fiacutesica

ou mental dos animais que participaram do projeto

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som

Os catildees foram selecionados para compor os grupos conforme as respostas ao

questionaacuterio comportamental previamente preenchido pelo proprietaacuterio

O questionaacuterio especiacutefico para medo de sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio

(Anexo 3) eacute composto de alguns paracircmetros comportamentais comuns em catildees foacutebicos

como atitude destrutiva eliminaccedilatildeo inadequada salivaccedilatildeo excessiva vocalizaccedilatildeo

esconder passadas arfar procurar pelo proprietaacuterio auto-trauma tremor Esses

parametros foram ainda classificados em escala de 0 (comportamento nunca observado)

a 5 (comportamento frequente e grave) (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009

CROWELL-DAVIS 2003)

Os catildees foram considerados aptos a participarem do grupo Foacutebicotrovatildeo e

Foacutebicosfogos quando

Apresentaram pelo menos trecircs dos comportamentos anteriores durante

o som de trovatildeo ou fogos de artifiacutecio com escore igual ou maior que 3

ou algum item com escore maacuteximo (5)

Ou as atitudes do animal no momento do som apresentaram risco a sauacutede

e integridade fiacutesica

E quando as respostas comportamentais foram apresentadas na maior

parte do tempo durante o estiacutemulo

24

33 Procedimentos Experimentais

O protocolo experimental foi realizado individualmente iniciando-se sempre agraves

9 horas da manhatilde Um pesquisador acompanhado de um pesquisador colaborador

realizou todo o protocolo experimental sem se ausentar em nenhuma etapa do

experimento

Dias antes do experimento os animais foram submetidos a um exame cliacutenico e

os proprietaacuterios responderam a questionaacuterios (Anexo 1 e 3) referentes ao manejo e

comportamento do animal

A partir dos dados dos questionaacuterios os animais foram classificados conforme

as respostas dadas referente ao medo de trovatildeo e fogos de artiacutefiacutecio entre animais com

histoacuterico comportamental de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Foacutebicos) e

animais historicamente natildeo foacutebicos a esses sons (Natildeo-foacutebicos)

No dia do experimento cada animal foi submetido a inserccedilatildeo de um cateacuteter de

silicone endovenoso para coleta de sangue ainda em sua moradia (amostra 1 casa) e a

colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro (Polar Pro Trainer RS800CX) Os animais permaneceram

com o frequenciacutemetro durante todo o protocolo experimental

Apoacutes a colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro os animais permaneceram no mesmo local

por 10 minutos para adaptaccedilatildeo ao frequeciacutemetro e registro dos dados de VIC do

momento basal 1 (casa) Em seguida cada animal foi transportado para o laboratoacuterio

onde foi executado o modelo de estresse sonoro agudo O transporte foi realizado

acondicionando o animal numa caixa de transporte num carro de passeio com

ventilaccedilatildeo adequada

Apoacutes a chegada ao local do experimento os animais permaneceram na sala sem

manipulaccedilatildeo e sem interaccedilatildeo por parte dos pesquisadores por 30 minutos para registro

dos dados de VIC do momento basal 2 (laboratoacuterio) Em seguida foi coletada a

segunda amostra de sangue (amostra 2 laboratoacuterio)

O estiacutemulo sonoro consistiu numa gravaccedilatildeo de sons de trovatildeo e outra de sons de

fogos de artifiacutecio numa intensidade sonora maacutexima de 103-104 dB e duraccedilatildeo de 2

minutos e 30 segundos (MACCARIELLO 2012)

Durante e apoacutes o fim do estiacutemulo sonoro cada animal permaneceu sem qualquer

manipulaccedilatildeo A terceira coleta de sangue foi realizada 5 minutos apoacutes o teacutermino do

estresse (amostra 3) a quarta aos 15 minutos (amostra 4) a quinta aos 30 minutos

(amostra 5) e a sexta coleta aos 60 minutos apoacutes o teacutermino do estresse (amostra 6)

25

A filmagem foi realizada durante todo o experimento para registrar as reaccedilotildees

comportamentais

Apoacutes a uacuteltima coleta o polar foi retirado e o animal levado de volta para sua

casa no mesmo transporte e nas mesmas condiccedilotildees em que veio

Figura 5 Esquema do protocolo experimental

331 Estiacutemulo Sonoro

Os estiacutemulos sonoros consistiram de uma gravaccedilatildeo com duraccedilatildeo de 2 minutos e

30 segundos de sons de trovatildeo mixados alternadamente a partir de dois arquivos

sonoros no formato wave (ldquovery loud thunder close thunder crackrdquo e ldquohigh quality

stereo sound of a major thunder clap during a stormrdquo) e outra gravaccedilatildeo de sons de

fogos de artifiacutecio mixado de um arquivo sonoro no formato wave (ldquocontinuous

fireworkrdquo) adquiridos no endereccedilo eletrocircnico httpwwwsound-effectcom

O formato utilizado possui a vantagem de ser uma gravaccedilatildeo que preserva todas

as variaccedilotildees de frequecircncia do som original A intensidade do som foi padronizada

atraveacutes de um decibeliacutemetro modelo BK Precision 732A Sound Level Meters a 103-

104 dB por ser uma pressatildeo sonora capaz de aumentar as concentraccedilotildees de cortisol

seacuterico em catildees estando abaixo dos limites que possam causar danos ao aparelho

auditivo (ISING et al 1999)

O estiacutemulo sonoro foi emitido por um aparelho de som (Pioneer home theater

DVD 120w RMS) com 5 caixas de som acopladas Cada animal foi posicionado a um

metro das caixas de som Para observaccedilatildeo das reaccedilotildees comportamentais cada animal foi

contido apenas por uma guia solta de 15 m podendo reagir e se locomover

naturalmente sem intervenccedilotildees

viii

ABSTRACT

FRANZINI Carla Caroline de Souza Autonomic and behavioural responses to noise

acute stress in companion dogs with phobia of thunder andor fireworks sounds 2015 p 105 Thesis (MA in Physiological Sciences) Institute of Biology Federal Rural

University of Rio de Janeiro Seropeacutedica RJ 2015

Stress is a situation caused by a challenge in which a body is subject And despite the

stress response is essential for homeostasis the persistence of the stressor stimulus or

exaggerated response can induce deleterious consequences A phobia is considered an

anxiety disorder where the fear (emotional state in response to a situation of danger) is

persistent and excessive which results in increased reactivity to stress In this context

many stimuli are considered stressors in dogs and the exposure to noise stimuli as

thunder and fireworks is a natural choice for the study of reactivity to stress Thus we

have evaluated the reactivity of companion dogs with history of phobia of the thunder

sounds andor fireworks to an acute acoustic stress model by analysing the variability

of Cardiac Interval (VCI) and behavioural parameters We used 28 companion dogs

different breeds 2 to 6 years old weighing 10 to 30 kg with no signs of other diseases

from volunteers owners of City of Seropeacutedica-RJ The dogs were selected by

questionnaire on the intensity of the fear of thunder and fireworks divided in phobic or

not phobic and between the stimuli sound of thunder or fireworks The sound stimulus

consisted of a standardized recording from 25 minutes to a maximum intensity of

sound of 103-104 dB For the analysis of VCI RR intervals were recorded through

frequency meter (Polar reg RS800CX model) stored and analysed using CardioSeries

241 sofware We also evaluated the profile of the owners general characteristics

(weight age race and gender) and handling of animals No differences were found in

the socioeconomic profile of the owners or general characteristics or animal handling

between phobic and non-phobic dogs The sound stimulus (thunder or fireworks) was

able to induce a significant increase in LF HF ratio in both non-phobic animals and

phobic animals However the magnitude of the sound-induced increase in the LFHF

was significantly higher in phobic than in non-phobic animals The acute sound stress

model produced an increase in the behaviour of surveillance trembling and hiding Only

phobic animals submitted to fireworks sound model had significantly more intense

behavioural responses than non-phobic dogs in the behaviours Shivering Hiding

Surveillance and Salivation Behavioural responses described by the owners and shown

by dogs during the stress model were correlated only in the behaviours Shivering and

Hiding Significant correlation was found between the ratio values LF HF and the

following behavioural parameters induced by sound in the laboratory Panting

Shivering Hiding Escape Shockwave Surveillance Salivation and Startle The sound

model was able to induce behavioural and autonomic responses of stress and it shown a

good tool to measure the magnitude of stress responses in the companion dogs with

history of phobia of thunder and fireworks sounds and it can be used in the study of new

therapeutic targets

Keywords stress in dogs variability of cardiac interval behaviour noise phobia

ix

LISTA DE TABELAS E FIGURAS

Tabela 1 Descriccedilatildeo dos 14 paracircmetros comportamentais analisados 31

Tabela 2 Perfil geral dos proprietaacuterios 33

Tabela 3 Perfil dos proprietaacuterios dos catildees segundo os grupos natildeo-foacutebicos e foacutebicos 34

Tabela 4Caracteriacutesticas gerais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 35

Tabela 5 Caracteriacutesticas de manejo dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 36

Tabela 6 Caracteriacutesticas comportamentais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 38

Tabela 7 Paracircmetros comportamentais avaliados no experimento 47

Tabela 8 Correlaccedilatildeo entre paracircmetros comportamentais avaliados pelos proprietaacuterios e

os avaliados durante o experimento 51

Figura 1Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA 8

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC 13

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional 19

Figura 4 Conexotildees nuacutecleo central da amiacutegdala 20

Figura 5 Esquema do protocolo experimental 25

Figura 6 Catildeo no momento do som 26

Figura 7 Componentes do Polar modelo RS800CX 27

Figura 8 Tela inicial do programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 9 Graacutefico confeccionado pelo programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 10 Tela do programa CardioSeries demonstrando a razatildeo entre os componentes de

frequecircncia LF e HF a partir da FFT 30

Figura 11 Paracircmetros avaliados segundo proprietaacuterio 40

Figura 12 Razatildeo LFHF de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos a sons de Trovatildeo eou Fogos de

Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 41

Figura 13 LF (componente de baixa frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos submetidos ao

estresse sonoro agudo atraveacutes de sons de Trovatildeo e Fogos de Artifiacutecio 42

Figura 14 HF (componente de alta frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo-foacutebicos a sons de

Trovatildeo eou Fogos de Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 44

Figura 15 FC (Frequecircncia Cardiacuteaca Meacutedia) dos catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

Figura 16 RMSSD (raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado) de catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

x

Figura 17 Oito dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 49

Figura 18 Seis dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 50

Figura 19 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e os paracircmetros comportamentais segundo os proprietaacuterios 53

Figura 20 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e a razatildeo LFHF 54

xi

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS

AC Adenilatociclase

ACh Acetilcolina

ACTH Hormocircnio adrenocorticotroacutefico

AVP Vasopressina

CCP Corpos Celulares Preacute-ganglionares

CEUA Comissatildeo de Eacutetica no Uso de Animais

CRH Hormocircnio liberador de corticotropina

dB decibeacuteis

DCF Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas

DPA Departamento de Parasitologia Animal

FC Frequecircncia Cardiacuteaca

FFT Transformada Raacutepida de Fourier

GR Receptor de Glicocorticoacuteides

HF Frequecircncia alta

HHA Eixo Hipotaacutelamo Hipoacutefise Adrenal

IRR Intervalos RR

LC Locus Coeruleus

LF Frequecircncia baixa

MR Receptor de Mineralocorticoacuteide

NAV Nodo Atrioventricular

NA Noradrenalina

NS Nodo Sinoatrial

PKA Proteiacutena quinase dependente de AMPc

PVN Nuacutecleo Paraventricular do Hipotaacutelamo

RMSSD raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado

SAM Sistema Simpato-adreno-medular

SNA Sistema Nervoso Autocircnomo

SNC Sistema Nervoso Central

SNP Sistema Nervoso Parassimpaacutetico

SNS Sistema Nervoso Simpaacutetico

xii

SRD Sem raccedila definida

STDRR Desvio padratildeo de todos os intervalos RR do segmento

UFRRJ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

VIC Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco

xiii

SUMAacuteRIO

DEDICATOacuteRIA v

AGRADECIMENTOS vi

RESUMO vii

LISTA DE TABELAS E FIGURAS ix

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS xi

1 INTRODUCcedilAtildeO 1

11 Justificativa 3

12 Objetivos 4

121 Geral 4

122 Especiacuteficos 4

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 5

21 Estresse 5

22 Fisiologia do estresse 6

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse 10

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca 10

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) 12

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees 14

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees 16

26 Fobia em catildees 18

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS 22

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental 22

32 Animais 22

321 Consideraccedilotildees eacuteticas 23

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som 23

33 Procedimentos Experimentais 24

xiv

331 Estiacutemulo Sonoro 25

34 Grupos experimentais 26

35 Coletas de sangue 26

36 Uso do Frequenciacutemetro 27

37 Anaacutelise Espectral da VIC 27

38 Anaacutelise Comportamental 30

39 Anaacutelise Estatiacutestica 31

4 RESULTADOS 33

41 Perfil dos proprietaacuterios e caracteriacutesticas gerais dos animais 33

42 Anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco 41

43 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 46

44 Correlaccedilotildees entre os dados 51

5 DISCUSSAtildeO 55

51 Perfil dos proprietaacuterios e manejo dos animais 55

52 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e o estresse sonoro agudo 59

53 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 61

54 Correlaccedilotildees entre dados 62

55 O Modelo de Estresse Sonoro Agudo em Catildees 63

6 CONCLUSOtildeES 65

7 REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 67

8 ANEXOS 77

ANEXO 1 Ficha geral de cadastro 77

ANEXO 2 Ficha Neuroloacutegica 81

ANEXO 3 Ficha de avaliaccedilatildeo de Fobia 83

ANEXO 4 Folder de divulgaccedilatildeo 85

ANEXO 5 Termo de Consentimento 86

xv

ANEXO 6 Ficha de Protocolo Experimental 88

1

1 INTRODUCcedilAtildeO

Situaccedilotildees de estresse e medo fazem parte da vida de todos os animais e as

reaccedilotildees fisioloacutegicas provocadas por elas satildeo essenciais para sobrevivecircncia no meio

selvagem mas tambeacutem na vida urbana para aqueles animais que foram domesticados

acompanhando o homem em sua caminhada de vida em sociedade

A espeacutecie canina foi a que mais se envolveu com o homem tornando-se um

animal domeacutestico e dependente de cuidados sendo alvo de problemas sociais

ambientais e de sauacutede puacuteblica quando abandonados ou em vida livre pelas cidades e

comunidades

Essa relaccedilatildeo criada ao longo dos tempos entre os catildees e o homem trouxe para

os dias atuais um viacutenculo afetivo de ambas as espeacutecies modificando e ateacute selecionando

atraveacutes das raccedilas o comportamento canino acentuando caracteriacutesticas que podem estar

influenciando a forma dos catildees de lidar com as situaccedilotildees de estresse e medo no

cotidiano

A fisiologia do comportamento regula-se baseada nos estiacutemulos externos aos

quais o animal estaacute sujeito conforme suas necessidades de sobrevivecircncia e ateacute de bem

estar Dessa forma o estresse vem a ser responsaacutevel por modelar o comportamento de

um indiviacuteduo conforme seu modo de vida e sua exposiccedilatildeo a esses estiacutemulos

O estresse como mecanismo de adaptaccedilatildeo a situaccedilotildees adversas eacute extremamente

importante na manutenccedilatildeo da vida pois sem esse mecanismo qualquer situaccedilatildeo

desfavoraacutevel poderia causar morte imediata sendo a capacidade de responder

rapidamente a uma situaccedilatildeo de perigo uma importante caracteriacutestica da evoluccedilatildeo dos

seres

Mais especificamente em situaccedilotildees de estresse o organismo de um indiviacuteduo

redistribui sua energia e o sistema locomotor e sensorial satildeo priorizados em detrimento

de outros (reprodutivo digestivo e imune) fazendo assim com que a resposta

momentacircnea seja eficiente O problema comeccedila quando haacute a persistecircncia destas

situaccedilotildees e ou dessas respostas causando prejuiacutezo aos sistemas deprimidos

A influecircncia dos estiacutemulos sonoros tem demonstrado importacircncia cliacutenica na

espeacutecie canina jaacute que leva diversos indiviacuteduos a sofrerem alteraccedilotildees comportamentais e

2

neuroendoacutecrinas que podem evoluir para graves distuacuterbios comportamentais e

fisioloacutegicos como a fobia Em alguns casos de estresse crocircnico severo podem ocorrer

danos neurais doenccedilas gastrointestinais aleacutem da diminuiccedilatildeo da resposta imune

A fobia eacute descrita como um medo acentuado irracional persistente e excessivo

claramente discerniacutevel de objetos seres lugares ou situaccedilotildees de forma desproporcional

e exagerada acompanhada de comportamento de fuga esquiva antecipaccedilatildeo e intenso

sofrimento que geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase

fisioloacutegica mas que leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas

ao medo coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o

eixo Hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HPA) na liberaccedilatildeo de glicocorticoides e o sistema

nervoso simpaacutetico

Na fobia os limiares de ativaccedilatildeo dos circuitos neurais de medo estatildeo reduzidos

podendo ser observado no indiviacuteduo clara hiperexcitabilidade hipervigilacircncia e

aumento da responsividade comportamental aos estiacutemulos Idealmente os graus de

ativaccedilotildees seriam proporcionais agrave ameaccedila e uma adaptaccedilatildeo agrave situaccedilatildeo normalizaria a

resposta de estresse diminuindo-a conforme a ameaccedila desaparecesse o que natildeo ocorre

na fobia

Os criteacuterios para o diagnoacutestico de fobia em humanos costumam usar termos

que se referem a sintomas emocionais envolvendo sentimentos e estados de consciecircncia

subjetivos o que difiacuteculta a abordagem cientifica e cliacutenica nos animais Poreacutem as

alteraccedilotildees dos paracircmetros comportamentais e fisioloacutegicos dos sistemas

neuroendoacutecrinos envolvidos nesses distuacuterbios satildeo um caminho de estudo e pesquisa

Dessa forma os niacuteveis de estresse podem ser avaliados atraveacutes da mensuraccedilatildeo

de paracircmetros fisioloacutegicos e comportamentais Em vaacuterias espeacutecies o paracircmetro mais

utilizado eacute a dosagem de cortisol Aleacutem desse a anaacutelise da variabilidade do intervalo

cardiacuteaco (VIC) vem se mostrando um paracircmetro importante e natildeo invasivo para avaliar

o balanccedilo simpato-vagal em indiviacuteduos submetidos a estiacutemulos potencialmente

desafiadores As alteraccedilotildees comportamentais analisadas em conjunto com as anaacutelises

citadas a cima formam uma importante fonte de dados ainda natildeo correlacionadas nos

estudos mais recentes

Contudo o presente estudo teve como objetivo avaliar as respostas autonocircmicas

e comportamentais induzidas pelo estresse sonoro agudo em catildees de companhia com

3

histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O modelo de estresse utilizado

consiste em um meacutetodo natildeo invasivo e seguro uma vez que cada animal foi submetido

a um estiacutemulo sonoro (sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio) de curta duraccedilatildeo (25 min) a

uma intensidade sonora maacutexima de 1039 dB natildeo sendo capaz de causar efeitos

deleteacuterios para a audiccedilatildeo dos animais

Para tal foram utilizados 28 catildees de diversas raccedilas dos quais 16 eram

historicamente foacutebicos a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e 12 natildeo apresentavam

qualquer sinal de medo a esses sons Os animais foram dividos ainda entre submetidos

ao som de trovatildeo e submetidos ao som de fogos de artifiacutecio

Foram avaliados o balanccedilo simpato-vagal atraveacutes da mensuraccedilatildeo da VIC e 14

paracircmetros comportamentais aleacutem da coleta de amostras sanguiacuteneas em 6 momentos

para posterior anaacutelise dos niacuteveis seacutericos de cortisol

11 Justificativa

Animais e humanos satildeo constantemente submetidos a situaccedilotildees de estresse no

seu cotidiano Em catildees vaacuterios estiacutemulos podem ser considerados geradores de estresse

e sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio tecircm se mostrado estiacutemulos estressores importantes

devido agrave frequente ocorrecircncia de fobia a esses sons nesta espeacutecie

O tema escolhido eacute de grande importacircncia na atualidade uma vez que satildeo

necessaacuterias mais pesquisas sobre o efeito do estresse em humanos e animais Neste

sentido a avaliaccedilatildeo dos paracircmetros fisioloacutegicos em situaccedilotildees de estresse eacute uma forma

de estudar e compreender melhor os distuacuterbios relacionados ao estresse e traccedilar novos

caminhos terapecircuticos

Eacute relevante para a Medicina Veterinaacuteria e para a aacuterea de sauacutede como um todo

pois modelos de estresse sonoro agudo podem ser uacuteteis na verificaccedilatildeo da reatividade ao

estresse aleacutem de serem pouco invasivos e de relativa faacutecil execuccedilatildeo

4

12 Objetivos

121 Geral

Verificar as respostas fisioloacutegicas ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

122 Especiacuteficos

Avaliar o perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios as caracteriacutesticas gerais e

comportamentais e o manejo dos animais em catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

Avaliar a resposta autonocircmica a partir da anaacutelise espectral da variabilidade do

intervalo cardiacuteaco de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos

de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar a resposta comportamental de catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre o comportamento dos animais relatado pelos

proprietaacuterios durante a ocorrecircncia natural de trovotildees ou fogos e os comportamentos

exibidos pelos catildees em resposta ao modelo de estresse sonoro em laboratoacuterio

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre paracircmetros autonocircmicos e comportamentais em

catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

5

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

21 Estresse

O fisiologista Claude Bernard em 1872 definiu o conceito de meio interno pela

primeira vez como um princiacutepio do equiliacutebrio dinacircmico do meio interno essencial para

a sobrevivecircncia (FRANCI 2005)

Apesar disso foi Walter Canon em 1929 o responsaacutevel por definir esse

conceito da condiccedilatildeo de equiliacutebrio do meio interno criado por Claude Bernard com o

termo homeostase Aleacutem de ter reconhecidoos agentes desafiadores da homeostase

como fiacutesicos e emocionais e elaborado o conceito de ldquoreaccedilatildeo de emergecircnciardquo que

ocorre quando haacute um desafio capaz de ativar a liberaccedilatildeo de noradrenalina de terminais

nervosos simpaacuteticos e adrenalina da medula da adrenal (FRANCI 2005)

E mais recentemente entre 1946 e 1976 o fisiologista canadense Hans Selye

definiu ldquoa situaccedilatildeo gerada pelo desafio ao qual um organismo estaria submetidordquo com o

termo estresse E ao ocorrerem controveacutersias conceituais uma vez que natildeo se podia

distinguir a causa do efeito ele criou o termo estressor para designar o agente causador

(estiacutemulo) e manteve o termo estresse para designar a condiccedilatildeo gerada pelo estiacutemulo

desafiador (FRANCI 2005)

A resposta a um estiacutemulo estressor eacute fundamental para a homeostase de um ser

vivo e sua sobrevivecircncia Nas condiccedilotildees de estresse o organismo reage por meio da

ativaccedilatildeo e desativaccedilatildeo do mecanismo de controle de vaacuterias funccedilotildees para recuperar e

manter a homeostase No entanto essas respostas podem ser insuficientes para

restabelecer ou manter a homeostase ou podem ser exageradas representando risco de

doenccedilas Portanto o estresse pode ser definido como a soma de respostas fiacutesicas e

mentais causadas por determinados estiacutemulos externos e que permitem ao indiviacuteduo

superar determinadas exigecircncias do meio-ambiente (FRANCI 2005)

A reaccedilatildeo de estresse maximiza o gasto de energia que ajuda a preparar o corpo

para atender a uma situaccedilatildeo ameaccediladora ou desafiadora em que o indiviacuteduo tende a

mobilizar um grande esforccedilo a fim de lidar com o evento No entanto enquanto uma

certa quantidade de estresse eacute necessaacuteria para a sobrevivecircncia o estresse prolongado

pode afetar adversamente a sauacutede (BERNARD amp KRUPAT 1994)

6

Em situaccedilotildees de estresse ocorre a ativaccedilatildeo de duas principais vias o eixo

hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) atraveacutes do aumento da produccedilatildeo de cortisol e o

sistema nervoso simpaacutetico atraveacutes da liberaccedilatildeo de catecolaminas (Noradrenalina

Adrenalina)

A desregulaccedilatildeo de qualquer um desses sistemas de estresse pode levar a

distuacuterbios fisioloacutegicos de vaacuterios outros sistemas incluindo os sistemas imunoloacutegico

cardiovascular funccedilatildeo metaboacutelica e comportamento levando a maacute adaptaccedilatildeo da

resposta ao estresse (MARQUES et al 2010)

22 Fisiologia do estresse

Os estiacutemulos estressores podem ser definidos como aqueles que desafiam a

homeostase Esses estiacutemulos geram respostas que variam de acordo com a duraccedilatildeo e

intensidade e ainda com a predisposiccedilatildeo geneacutetica e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo

Os estiacutemulos causadores de estresse podem ser classificados em quatro grupos

estressores fiacutesicos e quiacutemicos (calor frio barulho radiaccedilatildeo intensa e substacircncias

toacutexicas) psicoloacutegicos (medo e frustraccedilatildeo) sociais (um ambiente hostil e rompimento de

relaccedilotildees) e os que alteram a homeostase vegetativa como em casos de exerciacutecio intenso

e hemorragias Quanto agrave duraccedilatildeo os estiacutemulos causadores de estresse podem ser ainda

classificados como agudos ou crocircnicos (PACAacuteK amp PALKOVITS 2001)

Moberg (2000) propotildee um modelo para compreensatildeo do estresse em toda

espeacutecie animal que sugere uma resposta bioloacutegica ao estresse a partir de trecircs estaacutegios

gerais

1ordm O reconhecimento de um estiacutemulo estressante

2deg A defesa bioloacutegica contra o estiacutemulo estressante

3deg As consequecircncias da resposta de estresse

Esta resposta ao estressor iraacute abranger aspectos cognitivos comportamentais e

fisioloacutegicos (MARGIS et al 2003)

Em uma situaccedilatildeo de estresse satildeo ativados o sistema simpato-adrenomedular

gerando o aumento da secreccedilatildeo de catecolaminas e logo excitaccedilatildeo raacutepida do sistema

cardiovascular ocasionando um aumento da frequecircncia cardiacuteaca e da pressatildeo arterial E

7

o outro eixo ativado eacute o hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) levando ao aumento na

produccedilatildeo de cortisol e naturalmente mobilizaccedilatildeo de energia (ULRICH-LAI amp

HERMAN 2009) (Figura 1)

As respostas de emergecircncia ativadas pelo SAM ocorrem quando o organismo se

prepara para a defesa ou ataque excretando adrenalina Entatildeoo suprimento de sangue eacute

desviado para os muacutesculos havendo elevaccedilatildeo do deacutebito cardiacuteaco total e da

redistribuiccedilatildeo sanguiacutenea aumentando a oferta de nutrientes e oxigecircnio para as estruturas

vitais A pressatildeo arterial se eleva e os bronquiolos se dilatam tornando a respiraccedilatildeo

mais raacutepida e profunda para retirada do dioacutexido de carbono excedente As funccedilotildees

digestivas e secretoacuterias diminuem aleacutem da reaccedilatildeo de aliacutevio com a liberaccedilatildeo de qualquer

excesso da bexiga e intestino A taxa metaboacutelica aumenta e a liberaccedilatildeo de endorfinas

diminue a sensibilidade agrave dor e os sentidos satildeo mantidos em estado de alerta

(ROGERSON 1997)

8

Figura 1 Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA A ativaccedilatildeo do sistema simpato-adrenomedular

(SAM) e do eixo do hipotaacutelamo hipoacutefise adrenal (HHA) como sistemas primaacuterios para a

manutenccedilatildeo e restabelecimento da homeostase A exposiccedilatildeo ao estressor resulta em ativaccedilatildeo de

neurocircnios preacute-ganglionares simpaacuteticos na coluna intermediolateral da medula espinhal

toracolombar (T1 a L2) Estes neurocircnios preacute-ganglionares se projetam para gacircnglios preacute e para

vertebrais que entatildeo terminam em oacutergatildeos alvo e nas ceacutelulas cromafins da medula da adrenal

Esta ativaccedilatildeo simpaacutetica (em ciacuterculos) representa a resposta claacutessica de luta e fuga que foi

primariamente caracterizada por Walter Cannon e colaboradores no iniacutecio do seacuteculo passado e

leva a um aumento dos niacuteveis de adrenalina (proveniente da adrenal) e de noradrenalina dos

terminais simpaacuteticos aumento da frequecircncia e da forccedila de contraccedilatildeo do coraccedilatildeo vasoconstriccedilatildeo

perifeacuterica e mobilizaccedilatildeo de energia O tocircnus parassimpaacutetico tambeacutem eacute mobilizado durante o

estresse No sistema parassimpaacutetico (em estrelas) representa a ativaccedilatildeo de nuacutecleos preacute-

ganglionares cracircnios-sacrais ativam nuacutecleos poacutes-ganglionares localizados proacuteximos aos oacutergatildeos

inervados com efeito geralmente oposto ao sistema simpaacutetico Para o eixo HHA a exposiccedilatildeo ao

estressor ativa neurocircnios hipofisiotroacuteficos no nuacutecleo paraventricular do hipotaacutelamo (PVN) que

secretam hormocircnios de liberaccedilatildeo como hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH) e

vasopressina (AVP) na circulaccedilatildeo porta da eminecircncia meacutedia Estes hormocircnios liberadores atuam

na hipoacutefise anterior para promover a secreccedilatildeo de hormocircnio adrenocorticotroacutefico (ACTH) que

atua no coacutertex da adrenal (zona fasciculata) para iniciar a siacutentese e liberaccedilatildeo dos hormocircnios

glicocorticoacuteides Os glicocorticoacuteides circulantes promovem a mobilizaccedilatildeo de energia estocada e

potencializam numerosos efeitos simpaacuteticos como a vasoconstriccedilatildeo perifeacuterica Aleacutem disso o

coacutertex da adrenal eacute diretamente inervado pelo sistema simpaacutetico que regula a liberaccedilatildeo de

glicocorticoacuteides Entatildeo a ativaccedilatildeo do sistema simpaacutetico e do eixo HHA tem accedilotildees

complementares no organismo incluindo a mobilizaccedilatildeo de energia e a manutenccedilatildeo da pressatildeo

arterial durante o estresse (Adaptado de ULRICH-LAI amp HERMAN 2009)

CRH

AVP

9

As respostas ao estresse que envolvem emoccedilatildeo passaratildeo por avaliaccedilatildeo afetiva

onde a informaccedilatildeo seraacute processada e interpretada para se estimar o potencial de ameaccedila

Esta avaliaccedilatildeo afetiva iraacute determinar o padratildeo de respostas e o tipo de defesa de acordo

com a histoacuteria pessoal aprendizado e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo que entatildeo faraacute

a avaliaccedilatildeo da capacidade para lidar com a situaccedilatildeo e organizaccedilatildeo da resposta

(MARGIS et al 2003)

A intensidade da resposta eacute que determina se o animal estaacute sofrendo de estresse

ou eacute meramente experimentado um episoacutedio breve em sua vida sem nenhum impacto

significativo ao seu bem-estar

Circuitos neurais espinais e supra espinais estatildeo envolvidos nas respostas de

estresse Os supra espinais processam as informaccedilotildees vindas das vias somatossensoriais

e viscerossensoriais e elaboram as respostas atraveacutes do taacutelamo hipotaacutelamo aacuterea preacute-

optica estruturas liacutembicas e sistemas amineacutergicos e natildeo amineacutergicos do tronco cerebral

Os neurocircnios do PVN secretores de hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH)

e vasopressina com os neurocircnios catecolamineacutergicos do locus coeruleus (LC) (o nuacutecleo

com maior densidade de neurocircnios noradreneacutergicos com papel fundamental no

desencadeamento da resposta ao estresse e reaccedilotildees de fuga) inervam o hipocampo a

amiacutegdala e o neocortex aleacutem de nuacutecleos do rafe (5-HT) e grupamentos celulares da

medula e ponte compondo assim um dos principais reguladores centrais de resposta ao

estresse na ativaccedilatildeo do eixo HHA e SNS (FRANCI 2005)

O eixo HHA eacute ativado por diferentes categorias de estresse como traumaacutetico

inflamatoacuterio e psicoloacutegico E o estresse psicoloacutegico tem regulaccedilatildeo por estruturas

liacutembicas que exercem atividade modulatoacuteria sobre o eixo (ULRICH-LAI amp HERMAN

2009)

O PVN monitora sinais relacionados com o estado emocional atraveacutes de sinais

metaboacutelicos como a composiccedilatildeo plasmaacutetica O CRH o principal neurotransmissor

coordenador das alteraccedilotildees psicoloacutegicas e comportamentais relacionadas ao estresse eacute

sintetizado no PVN e liberado nos capilares da eminecircncia meacutedia juntamente com a

vasopressina (AVP) e alcanccedilam diretamente a hipoacutefise anterior via circulaccedilatildeo portal

hipotalacircmica-hipofisaacuteria que por sua vez estimula na hipoacutefise a liberaccedilatildeo do hormocircnio

adrenocorticotroacutefico (ACTH) (MORMEgraveDE et al 2006)

10

O ACTH eacute sintetizado por ceacutelulas especializadas da hipoacutefise anterior vai para a

corrente sanguiacutenea e estimula o coacutertex da glacircndula adrenal (na zona fasciculada) que

sintetiza o glicocorticoide atraveacutes de esteroides derivados do colesterol O cortisol eacute o

glicocorticoacuteide ativo do eixo para catildees gatos e humanos e a corticosterona para

paacutessaros e roedores (MORMEgraveDE et al 2006)

Esse hormocircnio final do eixo HHA interage com as ceacutelulas atraveacutes da ligaccedilatildeo a

dois receptores o receptor glicocorticoide (GR) e o receptor de mineralocorticoide

(MR) O receptor GR eacute encontrado na maioria dos tecidos do corpo incluindo a maioria

das aacutereas do enceacutefalo No rim e em outros tecidos a aldosterona liga-se ao MR durante a

regulaccedilatildeo da reabsorccedilatildeo de soacutedio mas o MR tambeacutem estaacute presente no hipocampo onde

ocorre a ligaccedilatildeo do cortisol Estes complexos esteroacuteide-receptores entatildeo interagem

com o DNA para iniciar ou para reprimir a transcriccedilatildeo de genes especiacuteficos a fim de

regular a siacutentese de proteiacutenas que provoca alteraccedilotildees fisioloacutegicas em resposta ao

estresse

O cortisol tem 10 vezes mais afinidade ao MR que ao GR Em niacuteveis baixos ou

em situaccedilotildees de ausecircncia de estresse a maior parte do cortisol liga-se aos MRs no

ceacuterebro (principalmente no hipocampo) e modula a atividade basal do eixo HHA e o

aparecimento de resposta ao estresse Com a elevaccedilatildeo dos niacuteveis de cortisol ocorre um

aumento de ligaccedilotildees nos receptores GR reduzindo a atividade do eixo HHA

(mecanismo de ldquofeed-backrdquo negativo) No entanto a ativaccedilatildeo crocircnica deste receptor

estaacute ligada a vaacuterios distuacuterbios cognitivos relativos ao estresse (DE KLOET et al 1999)

Proteger o organismo de possiacuteveis danos eacute um dos papeis principais das

respostas hormonais a situaccedilotildees de estresse E seus principais hormocircnios satildeo a

adrenalina de secreccedilatildeo raacutepida pelo envolvimento na reaccedilatildeo de luta ou fuga e o

corticosteroacuteides na restauraccedilatildeo e na reparaccedilatildeo dos sistemas agindo na segunda linha de

defesa regulando as respostas inflamatoacuteria e imune (MC EWEN 2000)

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca

11

O Nodo Sinoatrial (NS) apresenta a frequecircncia de disparo mais intensa no

coraccedilatildeo estimulando outros locais como os nodos atrioventriculares que principiam

seus proacuteprios impulsos eleacutetricos E com a ausecircncia de influecircncias hormonais ou neurais

a frequecircncia cardiacuteaca (FC) permanece equivalente agrave frequecircncia de disparos do NS ou

seja constante (STAUSS 2007)

Os sistemas nervoso simpaacutetico (SNS) e parassimpaacutetico (SNP) estatildeo

constantemente ativados regulando a atividade cardiacuteaca com a predominacircncia de um ou

outro conforme a situaccedilatildeo Em repouso a predominacircncia eacute vagal o que em humanos

leva a respostas raacutepidas de no maacuteximo 5 segundo na FC diminuindo-a em poucos

batimentos Jaacute as respostas da ativaccedilatildeo simpaacutetica ocorrem apoacutes cinco segundos

aumentando progressivamente chegando a sua resposta maacutexima de aumento da FC

apoacutes 20 a 30 segundos (HAINSWORTH 1995)

No entanto os sistemas simpaacutetico e parassimpaacutetico atuam de forma simultacircnea

na regulaccedilatildeo da atividade cardiacuteaca onde o aumento da atividade vagal natildeo resulta tatildeo

logo na reduccedilatildeo da atividade simpaacutetica e vice-versa (VON BORELL et al 2007)

Quando o SNS eacute ativado as fibras nervosas promovem a descarga de

noradrenalina (NA) nos aacutetrios e ventriacuteculos que por sua vez juntamente com a

adrenalina liberada pela adrenal estimula os receptores β1 adreneacutergicos presentes no

coraccedilatildeo ativando atraveacutes de uma proteiacutena G excitatoacuteria (Gs) a enzima adenilato ciclase

(AC) agrave produzir AMPc Seu aumento intracelular leva agrave ativaccedilatildeo da proteiacutena quinase

dependente de AMPc aumentando as correntes de canais iocircnicos de Ca+2

e Na+

acelerando a velocidade de despolarizaccedilatildeo levando ao aumento da frequecircncia de

disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas do NA desencadeando o aumento da

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Do mesmo modo o miocaacuterdio atrial o nodo aacutetrio-ventricular e o NS satildeo

inervados pelas fibra nervosa parassimpaacutetica dos nervos vagos liberando acetilcolina

(ACh) ativando receptores M2 que estatildeo acoplados a uma proteiacutena G inibitoacuteria (Gi)

inibindo a siacutentese de AMPc intracelular reduzindo a atividade da PKA Aleacutem de a ACh

ativar uma corrente de efluxo de K+ gerando uma hiperpolarizaccedilatildeo da membrana

levando ao aumento do limiar de ativaccedilatildeo do potencial de accedilatildeo sinusal o que reduz a

12

frequecircncia de disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas sinusais diminuindo por fim a

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Existem diferenccedilas no tempo de resposta da ativaccedilatildeo dos ramos simpaacutetico e

parassimpaacutetico que ocorrem em certo modo pela liberaccedilatildeo lenta de noradrenalina nos

terminais nervosos simpaacuteticos e pelas fibras preacute-ganglionares vagais serem

mielinizadas contribuindo para uma transmissatildeo eleacutetrica mais raacutepida Aleacutem das

diferenccedilas anatocircmicas entre os ramos como eacute o caso dos corpos celulares preacute-

ganglionares do parassimpaacutetico localizados dentro do coraccedilatildeo enquanto que os corpos

celulares preacute-ganglionares simpaacuteticos se localizam no gacircnglio paravertebral (VON

BORELL et al 2007)

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC)

A manutenccedilatildeo da homeostase do sistema cardiovascular eacute resultado da oscilaccedilatildeo

riacutetmica de componentes regulatoacuterios da atividade cardiacuteaca onde se observa intervalos

irregulares de tempo entre os batimentos consecutivos (VON BORELL et al 2007)

A anaacutelise da variabilidade do intervalo cardiacuteaco pode ser realizada atraveacutes dos

iacutendices no domiacutenio do tempo e da frequecircncia

No domiacutenio do tempo cada intervalo entre um batimento cardiacuteaco e outro pode

ser medido em milissegundos e no domiacutenio da frequecircncia as flutuaccedilotildees riacutetmicas podem

caracterizar os estados de repouso e atividade influindo na seacuterie cronoloacutegica contida

entre os intervalos tornando possiacutevel a mensurar a atividade do SNA (HOSHI 2009

SONG et al 2006)

Os dados satildeo obtidos atraveacutes da gravaccedilatildeo dos intervalos entre batimentos

cardiacuteacos feitos por frequenciacutemetros capazes de detectar em milissegundos (ms) o

tempo entre os batimentos e armazenaacute-los (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al

2007)

A teacutecnica utilizada com esse objetivo eacute chamada de anaacutelise espectral e consiste

no uso de algoritmos matemaacuteticos como eacute o caso da transformada raacutepida de fourier

(FFT) para obter diagramas dimensionais Dispondo em um graacutefico os componentes

oscilatoacuterios de frequecircncia da VIC no eixo X e a amplitude dos componentes oscilatoacuterios

no eixo Y permitindo atraveacutes dessa teacutecnica determinar a forccedila espectral das

frequecircncias baixas e altas da VIC

13

Nesse contexto os dois Sendo assim os dois componentes de frequecircncia principais satildeo

divididos atraveacutes da anaacutelise espectral em Frequecircncia baixa (LF) caracterizado pelo

espectro de 004 a 015Hz e Frequecircncia alta (HF) situada na faixa de 015 a 04 Hz na

anaacutelise espectral (KAWASE et al 2002 VON BORELL et al 2007 PICCIRILLO et

al 2009)

Quando os IRR satildeo dispostos em uma escala de tempo um graacutefico eacute

confeccionado e as oscilaccedilotildees formadas representam a accedilatildeo dos diferentes componentes

regulam os pulsos cardiacuteacos onde as frequecircncias mais altas representam a atividade

riacutetmica resultante da ativaccedilatildeo parassimpaacutetica e as mais baixas exibem aquelas

resultantes da atividade simpaacutetica (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al 2007)

(Figura 2)

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC Variabilidade do intervalo cardiacuteaco em um indiviacuteduo

jovem durante o repouso e quando em movimento A seacuterie temporal de intervalos RR estaacute

Repouso Movimento

14

disposta nos graacuteficos do topo Os graacuteficos centrais ilustram a presenccedila de dois componentes

principais da densidade espectral LF e HF Durante o movimento o componente LF se torna

predominante em relaccedilatildeo ao repouso Os graacuteficos na base da figura demonstram a distribuiccedilatildeo

relativa dos dois componentes (representada pela aacuterea) (MALLIANI 1997)

A razatildeo entre os dois componentes de frequecircncia eacute calculada a partir dos valores

obtidos de LF e HF resultando em valor que representa o balanccedilo entre a atividade

simpaacutetica e parassimpaacutetica aleacutem de possibilitar a decomposiccedilatildeo dos componentes

espectrais atraveacutes do caacutelculo das frequecircncias centrais desses componentes que se

situam impliacutecitos no sinal da variabilidade (PAGANI et al 1986 LOMBARDI et

al1996 LOMBARDI 1997 MALLIANI et al 1997 VON BORELL et al 2007

HARADA et al 2005)

A anaacutelise espectral da VIC natildeo acessa o tocircnus autonocircmico cardiacuteaco mas sim o

seu balanccedilo o que justifica a ocorrecircncia de alteraccedilotildees na capacidade do coraccedilatildeo de

responder a esses estiacutemulos quando haacute alteraccedilotildees crocircnicas na atividade autonocircmica

Nesses casos natildeo seria aplicaacutevel a anaacutelise espectral da VIC (STAUSS 2007

PICCIRILLO et al 2009)

Deste modo a anaacutelise espectral da VIC tem como principal utilidade a funccedilatildeo de

indicadora da atividade autonocircmica em resposta ao estresse psicoloacutegico e fiacutesico (VON

BORELL et al 2007) E quando eacute aplicada no estudo das alteraccedilotildees agudas da

atividade autonocircmica cardiacuteaca essa anaacutelise eacute utilizada de maneira a obter dados

fidedignos onde diante de uma resposta ao estresse psicoloacutegico pode ser observado um

aumento agudo na atividade cardiacuteaca simpaacutetica caracterizado pelo aumento do

componente LF com provavelmente baixa ou nenhuma alteraccedilatildeo do componente HF

(STAUSS 2007)

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees

O oacutergatildeo auditivo dentre outras funccedilotildees se caracteriza especialmente por seu

desempenho no reconhecimento de situaccedilotildees ameaccediladoras estando em funcionamento

ininterrupto atraveacutes da conexatildeo direta do ouvido interno com os mecanismos neurais de

ldquoluta ou fugardquo Esse sistema eacute capaz de diferenciar sons de frequecircncias e intensidades

relevantes para a sobrevivecircncia do indiviacuteduo em seu meio ambiente (WESTMAN amp

WALTERS 1981)

15

A percepccedilatildeo do som colabora no balanccedilo homeostaacutetico do sistema nervoso

central influenciando consequentemente o equiliacutebrio fisioloacutegico de forma geral atraveacutes

dos centros autonocircmicos e neuroendoacutecrinos do hipotaacutelamo variando em resposta

conforme o significado do estiacutemulo sonoro e sua intensidade previsibilidade

variabilidade e complexidade

Nesse contexto as respostas fundamentais ao som satildeo de orientaccedilatildeo reflexo de

surpresa e de defesa Sendo a resposta de orientaccedilatildeo fundamental por ser a reaccedilatildeo

comportamental de busca pela fonte sonora permitindo que o indiviacuteduo se prepare para

a resposta necessaacuteria e caso o reconhecimento do som mostre ser esse de baixa

significacircncia a habituaccedilatildeo iraacute ocorrer diminuindo o grau da reaccedilatildeo

Jaacute o reflexo de surpresa iraacute ocorrer em resposta a sons repentinos de alta

intensidade e caraacuteter assustador podendo ser atenuado quando o indiviacuteduo sabe que ele

iraacute ocorrer e podendo ser exacerbado em situaccedilotildees de tensatildeo medo e de abalo

emocional

E a resposta de defesa acontece em resposta a sons de significado intensidade e

duraccedilatildeo relacionados agrave ameaccedila onde haacute excitaccedilatildeo emocional e preparaccedilatildeo dos sistemas

para a accedilatildeo consistindo na resposta de estresse (WESTMAN amp WALTERS 1981)

Alguns sons adquirem significado particular para o indiviacuteduo representando

perigo em potencial assim como os sons de caracteriacutesticas ameaccediladoras Mas

geralmente o significado conotativo de um som potencialmente ameaccedilador estaacute no fato

de ser desconhecido e apresentar mudanccedilas raacutepidas de intensidade aleacutem das associaccedilotildees

extra-auditivas relacionadas a ele Aleacutem disso a previsibilidade desse estiacutemulo sonoro

tambeacutem poderaacute constituir um fator determinante na resposta jaacute que sons imprevisiacuteveis

caracterizam-se como um estiacutemulo estressor maior desencadeando uma reduccedilatildeo geral

de performance e uma baixa toleracircncia a frustraccedilotildees (WESTMAN amp WALTERS

1981)

Os catildees particularmente apresentam muita sensibilidade a estiacutemulos sonoros

visto que seu sistema auditivo eacute extremamente desenvolvido especialmente com a

funccedilatildeo de caccedila e guarda Poreacutem a resposta de defesa exagerada dos indiviacuteduos dessa

espeacutecie tem sido relatada principalmente aos sons de fogos de artifiacutecio trovatildeo e tiro de

16

armas de fogo Provavelmente o caraacuteter imprevisiacutevel a conotaccedilatildeo negativa que a

espeacutecie apresenta a esses sons e a intensidade proacutexima ao limiar de audiccedilatildeo possa

justificar tal reaccedilatildeo (HYDBRING et al 2004)

E eacute com base nessa reaccedilatildeo desmedida que os estiacutemulos sonoros como os sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio vecircm sendo utilizados como modelos de estresse em catildees

(HYDBRING et al 2004 ENGELAND et al 1990) Representando uma opccedilatildeo para o

estudo da reatividade ao estresse que pode ser comparada ao modelo de estresse

acuacutestico de sobressalto em ratos

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees

Ao iniciar um estudo a respeito de uma espeacutecie deve-se ter em mente que cada

sujeito analisado natildeo eacute um sistema inerte e fechado mas sim um somatoacuterio de eventos

que possibilitam ter um exame mais amplo e completo das interaccedilotildees do animal com o

ambiente (SULTAN 2003 BATESON et al 2004)

Assim o estudo comportamental se mostra uma importante ferramenta pois

permite entender que processos bioloacutegicos satildeo compostos por eventos fisioloacutegicos e

psicoloacutegicos natildeo havendo exclusatildeo entre eles mas sim uma sobreposiccedilatildeo com fortes

correlaccedilotildees (HARVERBEKE et al 2008 BEERDA 1999 SPANGENBERG 2006

MONTANHA et al 2009) Conhecer a etologia canina iraacute permitir uma melhor

utilizaccedilatildeo do animal respeitando seus limites e possibilitando a manutenccedilatildeo fiacutesica e

mental dentro dos padrotildees de bem-estar da espeacutecie (SNOWDON 1999 DAWNKINS

1989 DARWIN 2004)

Com relaccedilatildeo ao bem-estar Broom amp Johnson (1993) e Broom amp Fraser (2010)

definem como o estado de um animal em relaccedilatildeo agraves suas tentativas de se adaptar ao

meio em que vive Para os animais domeacutesticos principalmente para os animais de

companhia esse eacute um conceito que muitas vezes pode ser confundido e mal aplicado

pelo homem agrave medida que esse confronta a realidade do animal com a sua proacutepria

passando a adequar paracircmetros humanos a esses animais

Os catildees satildeo marcados pela socializaccedilatildeo baseada em relaccedilotildees familiares com

organizaccedilotildees flexiacuteveis e respostas a um liacuteder aleacutem de possuiacuterem necessidade de

17

ambientes complexos e variados marcadamente importantes na vida gregaacuteria de seus

ancestrais (BROOM amp FRASER 2010)

Pensando nisso um manejo inadequado pode ter consequecircncias que variam

desde alteraccedilotildees comportamentais a quadros patoloacutegicos tendo como agravantes

alteraccedilotildees substanciais nos seus niacuteveis de bem-estar

Poreacutem o estudo do comportamento animal ainda se mostra bastante pioneiro jaacute

que as pesquisas cientiacuteficas a niacutevel cliacutenico comeccedilaram a ser realizados haacute poucas

deacutecadas em animais com problemas comportamentais

Dessa forma se faz presente a necessidade de um maior desenvolvimento de

estudos e pesquisas nesse sentido visto que os problemas comportamentais satildeo

apontados como a principal causa de abandono ou morte de animais de companhia

apresentando maior nuacutemero de relatos do que as doenccedilas infecciosas neoplaacutesicas e

metaboacutelicas concomitantes (OVERALL et al 2001)

A relaccedilatildeo homem-animal eacute muito antiga mas eacute pouco estudada E isso faz com

que o diagnoacutestico e o tratamento dos distuacuterbios comportamentais sejam dificultados

Muitas vezes a origem dos problemas comportamentais estaacute ligada ao tipo de

relacionamento existente entre o homem e o seu animal E isso acontece porque os

animais passam por processos de humanizaccedilatildeo para se adaptarem ao modo e ao estilo de

vida do seu proprietaacuterio nem que para isso tenham que modificar as suas caracteriacutesticas

naturais (OVERALL et al 2001)

Embora os catildees apresentem uma flexibilidade comportamental as exigecircncias

criadas pelos seus proprietaacuterios podem desencadear conflitos e frustraccedilotildees que levam ao

aparecimento de problemas comportamentais (OVERALL et al 2001)

Com frequecircncia o stress ou a ansiedade estatildeo relacionados com o ambiente e

mostram que o limiar entre normal e anormal varia entre indiviacuteduos (BEAVER 2005)

O rompimento da homeostase pode resultar de estimulaccedilatildeo interna externa ou

ambos E o potencial de ruptura da homeostase aumenta com a magnitude do desafio

(APPLEBY amp PLUIJMAKERS 2004) Dessa forma sendo a fobia um transtorno de

reaccedilotildees exageradas e desproporcionais ao real grau de importacircncia do estimulo

18

estressor podemos sugerir que o indiviacuteduo foacutebico eacute mais susceptiacutevel ao estresse de

forma geral reagindo com paracircmetros mais facilmente alterados

26 Fobia em catildees

Medo e ansiedade satildeo funccedilotildees adaptativas de sobrevivecircncia que sinalizam para o

organismo a presenccedila de perigo em potencial no ambiente O medo eacute a resposta

imediata acionada por um evento ou objeto potencialmente nocivo e ansiedade envolve

processos cognitivos mais complexos como antecipaccedilatildeo e preocupaccedilatildeo com

hipervigilacircncia diante de um perigo iminente no ambiente (FEINSTEIN et al 2011)

Entre as respostas comportamentais e fisioloacutegicas claacutessicas imediatas do medo

destacam-se o congelamento sobressalto aumento da frequecircncia cardiacuteaca alteraccedilotildees da

pressatildeo arterial e aumento da vigilacircncia Satildeo respostas comportamentais e perceptivas

que facilitam as respostas defensivas como a fuga e esquiva de forma apropriada afim

de reduzir o perigo ou lesatildeo (CHUDASAMA 2009)

O neurocircuito do medo envolve principalmente a amiacutegdala estrutura cerebral

responsaacutevel pela detecccedilatildeo geraccedilatildeo e manutenccedilatildeo das emoccedilotildees relacionadas ao medo e

ansiedade Eacute uma estrutura complexa pertencente ao sistema liacutembico que consiste em

aproximadamente 10 nuacutecleos que coordenam respostas apropriadas agrave ameaccedila e ao

perigo atraveacutes das respostas comportamentais cardiovasculares e endoacutecrinas ao

estresse (ROSEN amp SCHULKIN 1998)

A amiacutegdala faz ligaccedilotildees entre as aacutereas do coacutertex cerebral e recebe informaccedilotildees

de todos os sistemas sensoriais permite a integraccedilatildeo da informaccedilatildeo proveniente das

diversas aacutereas atraveacutes de conexotildees excitatoacuterias e inibitoacuterias

Os nuacutecleos basolaterais satildeo as principais portas de entrada da amiacutegdala

recebendo informaccedilotildees sensoriais e auditivas vindas do taacutelamo coacutertex sensorial e

associativo (Figura 3) Ele estaacute sob tocircnica inibiccedilatildeo GABAeacutergica e quando bloqueada

esta inibiccedilatildeo resulta em aumento do comportamento de ansiedade com ativaccedilatildeo

cardiovascular simpaticamente mediada (KESSLER et al 2005)

19

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional A informaccedilatildeo

sensoacuteria eacute transmitida para o taacutelamo atraveacutes da via leminiscal A aferecircncia auditiva chega na

divisatildeo ventral do nuacutecleo geniculado medial e projeta-se para o coacutertex auditivo primaacuterio

enquanto outras vias extra leminiscais carreiam informaccedilotildees auditivas para outras partes do

taacutelamo como a divisatildeo medial do nuacutecleo geniculado medial e nuacutecleos intralaminares

posteriores que se projetam tanto para o coacutertex auditivo primaacuterio quanto para o coacutertex auditivo

associativo assim como para os nuacutecleos basolaterias da amiacutegdala Essa via do taacutelamo para

amiacutegdala eacute implicada na aprendizagem emocional (IVERSEN et al 2003)

A amiacutegdala ventrolateral em seres humanos eacute mais sensiacutevel aos estiacutemulos

negativos (especialmente se os estiacutemulos sinalizam informaccedilatildeo negativa iminente) E a

amiacutegdala centromedial (CMA) dorsal tem projeccedilotildees principalmente subcorticais

especialmente aquelas ligadas ao hipotaacutelamo lateral e substacircncia cinzenta periaquedutal

(PAG) Essas projeccedilotildees podem explicar em parte as respostas fisioloacutegicas associadas

ao medo com o hipotaacutelamo (Figura 4) (KESSLER et al 2005)

Kandel 2003

20

Figura 4 Conexotildees diretas entre o nuacutecleo central da amiacutegdala e uma variedade de aacutereas

hipotalacircmicas e do tronco encefaacutelico envolvidas no medo e na ansiedade (IVERSEN et al

2003)

O Locus coeruleus importante nuacutecleo com grande densidade de neurocircnios

noradreneacutergicos com papel no desencadeamento da resposta ao estresse e das reaccedilotildees de

fuga tem tambeacutem papel importante no controle do medo A desregulaccedilatildeo desse nuacutecleo

parece ter relaccedilatildeo com o aparecimento do pacircnico e fobias em humanos (CHARNEY

1984) certamente atraveacutes de sua ligaccedilatildeo ao sistema liacutembico (CHARNEY 1984)

Medos podem desenvolver-se gradualmente e pode haver variaccedilatildeo na resposta

Em contraste fobias geralmente se desenvolvem rapidamente e uma vez desenvolvidas

haacute pouca mudanccedila em sua apresentaccedilatildeo entre as seacuteries Situaccedilotildees indutoras de fobia ou

satildeo evitadas a todo custo pelo foacutebico ou se inevitaacutevel satildeo suportadas com intensa

ansiedade e sofrimento (OVERALL 2010)

A Associaccedilatildeo Norte Americana de Psiquiatria no manual de diagnoacutestico e

estatiacutestica de transtornos mentais (DSM-IV-TR 2002) e a CID-10 (1993) definem em

humanos fobias especiacuteficas como medos irracionais excessivos acentuados e

persistentes revelados pela presenccedila ou antecipaccedilatildeo de um objeto situaccedilatildeo ou

atividade foacutebica especiacutefica de forma desproporcional acompanhados de

comportamentos de fuga esquiva antecipaccedilatildeo ansiosa e intenso sofrimento

Geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase fisioloacutegica

mas leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas ao medo

21

coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o eixo

HHA e o Sistema Nervoso Simpaacutetico

Em catildees natildeo haacute ateacute o momento descrito na literatura uma definiccedilatildeo oficial para

tal transtorno

As fobias satildeo transtornos de ansiedade de difiacutecil cura e geralmente a memoacuteria

de uma resposta foacutebica pode desencadear outros transtornos de ansiedade Dessa forma

o tratamento tem importacircncia natildeo soacute pela questatildeo do bem-estar e qualidade de vida

mas tambeacutem devido a seus componentes de comorbidade (OVERALL 2010)

Resposta exagerada a sons de trovatildeo estatildeo entre as doenccedilas comportamentais

mais comumente associados com pacircnico ou fobia em catildees Ocorre geralmente em

todas as raccedilas embora natildeo existam dados sobre a incidecircncia relativa destes problemas

(OVERALL et al 2001 DUNHAM amp FRANK 2001 VOITH amp BORCHELT 1985)

A fobia agrave sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio constitui uma classe que apresenta

resposta extrema repentina e profunda e que apesar de existir uma variaccedilatildeo consideraacutevel

nas respostas dos catildees (BEERDA SCHILDER VAN HOOFF VRIES 1997) no geral

se manifesta com comportamentos de ansiedade associados com atividades acentuadas

do sistema nervoso simpaacutetico Os comportamentos podem incluir catatonia ou mania

concomitante com diminuiccedilatildeo da sensibilidade ou capacidade de resposta agrave dor ou

estiacutemulos sociais aleacutem de fuga vocalizaccedilatildeo salivaccedilatildeo micccedilatildeo defecaccedilatildeo tremores

comportamentos autodestrutivos e ateacute convulsotildees (OVERALL 2010 SHULL-

SELCER amp STAGG 1991)

Jaacute se sabe que existe um fator hereditaacuterio para esse tipo de fobia e embora os

mecanismos pelos quais ela ocorre ainda natildeo sejam compreendidos parece estar em

alguma alteraccedilatildeo na forma como a informaccedilatildeo eacute processada entre a amiacutegdala e o coacutertex

(OVERALL 2010)

E como ansiedade medos e fobias satildeo queixas comportamentais comuns e

problemaacuteticas dos donos de catildees a falta de tratamento pode resultar no rompimento do

viacutenculo humano-animal e posterior abandono desistecircncia ou ateacute mesmo eutanaacutesia do

catildeo afetado (MILLS etal 2003)

22

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental

Os procedimentos experimentais foram realizados na Estaccedilatildeo experimental de

Parasitologia Veterinaacuteria do Departamento de Parasitologia Animal (DPA) da

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) e no Laboratoacuterio de Fisiologia

Animal do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas (DCF) da UFRRJ Todos os

procedimentos estatildeo de acordo com a lei de bem-estar animal Instruccedilatildeo Normativa ndeg

56 de 2008 O presente experimento encontra-se aprovado pelo Comitecirc de Eacutetica na

Pesquisa da UFRRJ CEUA-IB nordm 2308347962014-14

32 Animais

Foram entrevistados 35 proprietaacuterios de catildees entre os quais foram selecionados

28 com 2 a 6 anos de idade pesando de 10 a 30 Kg doacuteceis saudaacuteveis com vacinas e

vermifugaccedilatildeo em dia do muniacutecipio de Seropeacutedica-RJ

Proprietaacuterios de animais com medo de sons de trovatildeo e fogos de artificio

interessados em participar do estudo e proprietaacuterios de animais sem medo convidados a

participar do estudo incialmente responderam a um formulaacuterio de cadastro dos

animais contendo dados gerais e histoacuterico de respostas comportamentais em geral

(Anexo 1) Em seguida os animais foram submetidos a um exame cliacutenico baacutesico que

constitiu em inspeccedilatildeo palpaccedilatildeo auscultaccedilatildeo e termometria retal e um exame

neuroloacutegico para descartar doenccedilas concomitantes (Anexo 2) Foram dispensados

animais arredios agressivos com peso ou idade fora da faixa estabelecida no criteacuterio de

seleccedilatildeo e animais doentes Os animais selecionados foram caracterizados como foacutebicos

e natildeo-foacutebicos a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio e entatildeo submetidos uma uacutenica vez ao

modelo de estresse sonoro A caracterizaccedilatildeo de animais foacutebicos foi realizada conforme

as respostas dos proprietaacuterios ao questionaacuterio de reaccedilotildees comportamentais aos sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009 CROWELL-

DAVIS 2003) (Anexo 3)

23

Meios de divulgaccedilatildeo do estudo atraveacutes de folder e cartazes de divulgaccedilatildeo do projeto

veiculado pela internet e afixado em diversos estabelecimentos veterinaacuterios no

municiacutepio e pela UFRRJ (Anexo 4)

Avaliaccedilatildeo comportamental atraveacutes de entrevista com o proprietaacuterio (questionaacuterio

adaptado de OVERALL 1997) (Anexo 1)

321 Consideraccedilotildees eacuteticas

A participaccedilatildeo no estudo ocorreu somente com a autorizaccedilatildeo dos entrevistados

mediante um termo de consentimento em que se garantia plena liberdade para

interromper a participaccedilatildeo quando desejado (Anexo 5) Natildeo houve riscos agrave sauacutede fiacutesica

ou mental dos animais que participaram do projeto

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som

Os catildees foram selecionados para compor os grupos conforme as respostas ao

questionaacuterio comportamental previamente preenchido pelo proprietaacuterio

O questionaacuterio especiacutefico para medo de sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio

(Anexo 3) eacute composto de alguns paracircmetros comportamentais comuns em catildees foacutebicos

como atitude destrutiva eliminaccedilatildeo inadequada salivaccedilatildeo excessiva vocalizaccedilatildeo

esconder passadas arfar procurar pelo proprietaacuterio auto-trauma tremor Esses

parametros foram ainda classificados em escala de 0 (comportamento nunca observado)

a 5 (comportamento frequente e grave) (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009

CROWELL-DAVIS 2003)

Os catildees foram considerados aptos a participarem do grupo Foacutebicotrovatildeo e

Foacutebicosfogos quando

Apresentaram pelo menos trecircs dos comportamentos anteriores durante

o som de trovatildeo ou fogos de artifiacutecio com escore igual ou maior que 3

ou algum item com escore maacuteximo (5)

Ou as atitudes do animal no momento do som apresentaram risco a sauacutede

e integridade fiacutesica

E quando as respostas comportamentais foram apresentadas na maior

parte do tempo durante o estiacutemulo

24

33 Procedimentos Experimentais

O protocolo experimental foi realizado individualmente iniciando-se sempre agraves

9 horas da manhatilde Um pesquisador acompanhado de um pesquisador colaborador

realizou todo o protocolo experimental sem se ausentar em nenhuma etapa do

experimento

Dias antes do experimento os animais foram submetidos a um exame cliacutenico e

os proprietaacuterios responderam a questionaacuterios (Anexo 1 e 3) referentes ao manejo e

comportamento do animal

A partir dos dados dos questionaacuterios os animais foram classificados conforme

as respostas dadas referente ao medo de trovatildeo e fogos de artiacutefiacutecio entre animais com

histoacuterico comportamental de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Foacutebicos) e

animais historicamente natildeo foacutebicos a esses sons (Natildeo-foacutebicos)

No dia do experimento cada animal foi submetido a inserccedilatildeo de um cateacuteter de

silicone endovenoso para coleta de sangue ainda em sua moradia (amostra 1 casa) e a

colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro (Polar Pro Trainer RS800CX) Os animais permaneceram

com o frequenciacutemetro durante todo o protocolo experimental

Apoacutes a colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro os animais permaneceram no mesmo local

por 10 minutos para adaptaccedilatildeo ao frequeciacutemetro e registro dos dados de VIC do

momento basal 1 (casa) Em seguida cada animal foi transportado para o laboratoacuterio

onde foi executado o modelo de estresse sonoro agudo O transporte foi realizado

acondicionando o animal numa caixa de transporte num carro de passeio com

ventilaccedilatildeo adequada

Apoacutes a chegada ao local do experimento os animais permaneceram na sala sem

manipulaccedilatildeo e sem interaccedilatildeo por parte dos pesquisadores por 30 minutos para registro

dos dados de VIC do momento basal 2 (laboratoacuterio) Em seguida foi coletada a

segunda amostra de sangue (amostra 2 laboratoacuterio)

O estiacutemulo sonoro consistiu numa gravaccedilatildeo de sons de trovatildeo e outra de sons de

fogos de artifiacutecio numa intensidade sonora maacutexima de 103-104 dB e duraccedilatildeo de 2

minutos e 30 segundos (MACCARIELLO 2012)

Durante e apoacutes o fim do estiacutemulo sonoro cada animal permaneceu sem qualquer

manipulaccedilatildeo A terceira coleta de sangue foi realizada 5 minutos apoacutes o teacutermino do

estresse (amostra 3) a quarta aos 15 minutos (amostra 4) a quinta aos 30 minutos

(amostra 5) e a sexta coleta aos 60 minutos apoacutes o teacutermino do estresse (amostra 6)

25

A filmagem foi realizada durante todo o experimento para registrar as reaccedilotildees

comportamentais

Apoacutes a uacuteltima coleta o polar foi retirado e o animal levado de volta para sua

casa no mesmo transporte e nas mesmas condiccedilotildees em que veio

Figura 5 Esquema do protocolo experimental

331 Estiacutemulo Sonoro

Os estiacutemulos sonoros consistiram de uma gravaccedilatildeo com duraccedilatildeo de 2 minutos e

30 segundos de sons de trovatildeo mixados alternadamente a partir de dois arquivos

sonoros no formato wave (ldquovery loud thunder close thunder crackrdquo e ldquohigh quality

stereo sound of a major thunder clap during a stormrdquo) e outra gravaccedilatildeo de sons de

fogos de artifiacutecio mixado de um arquivo sonoro no formato wave (ldquocontinuous

fireworkrdquo) adquiridos no endereccedilo eletrocircnico httpwwwsound-effectcom

O formato utilizado possui a vantagem de ser uma gravaccedilatildeo que preserva todas

as variaccedilotildees de frequecircncia do som original A intensidade do som foi padronizada

atraveacutes de um decibeliacutemetro modelo BK Precision 732A Sound Level Meters a 103-

104 dB por ser uma pressatildeo sonora capaz de aumentar as concentraccedilotildees de cortisol

seacuterico em catildees estando abaixo dos limites que possam causar danos ao aparelho

auditivo (ISING et al 1999)

O estiacutemulo sonoro foi emitido por um aparelho de som (Pioneer home theater

DVD 120w RMS) com 5 caixas de som acopladas Cada animal foi posicionado a um

metro das caixas de som Para observaccedilatildeo das reaccedilotildees comportamentais cada animal foi

contido apenas por uma guia solta de 15 m podendo reagir e se locomover

naturalmente sem intervenccedilotildees

ix

LISTA DE TABELAS E FIGURAS

Tabela 1 Descriccedilatildeo dos 14 paracircmetros comportamentais analisados 31

Tabela 2 Perfil geral dos proprietaacuterios 33

Tabela 3 Perfil dos proprietaacuterios dos catildees segundo os grupos natildeo-foacutebicos e foacutebicos 34

Tabela 4Caracteriacutesticas gerais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 35

Tabela 5 Caracteriacutesticas de manejo dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 36

Tabela 6 Caracteriacutesticas comportamentais dos animais natildeo-foacutebicos e foacutebicos 38

Tabela 7 Paracircmetros comportamentais avaliados no experimento 47

Tabela 8 Correlaccedilatildeo entre paracircmetros comportamentais avaliados pelos proprietaacuterios e

os avaliados durante o experimento 51

Figura 1Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA 8

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC 13

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional 19

Figura 4 Conexotildees nuacutecleo central da amiacutegdala 20

Figura 5 Esquema do protocolo experimental 25

Figura 6 Catildeo no momento do som 26

Figura 7 Componentes do Polar modelo RS800CX 27

Figura 8 Tela inicial do programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 9 Graacutefico confeccionado pelo programa Polar Pro Trainer 5reg 28

Figura 10 Tela do programa CardioSeries demonstrando a razatildeo entre os componentes de

frequecircncia LF e HF a partir da FFT 30

Figura 11 Paracircmetros avaliados segundo proprietaacuterio 40

Figura 12 Razatildeo LFHF de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos a sons de Trovatildeo eou Fogos de

Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 41

Figura 13 LF (componente de baixa frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo foacutebicos submetidos ao

estresse sonoro agudo atraveacutes de sons de Trovatildeo e Fogos de Artifiacutecio 42

Figura 14 HF (componente de alta frequecircncia) de catildees Foacutebicos e Natildeo-foacutebicos a sons de

Trovatildeo eou Fogos de Artifiacutecio submetidos ao estresse sonoro agudo 44

Figura 15 FC (Frequecircncia Cardiacuteaca Meacutedia) dos catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

Figura 16 RMSSD (raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado) de catildees submetidos ao estresse sonoro agudo 45

x

Figura 17 Oito dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 49

Figura 18 Seis dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 50

Figura 19 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e os paracircmetros comportamentais segundo os proprietaacuterios 53

Figura 20 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e a razatildeo LFHF 54

xi

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS

AC Adenilatociclase

ACh Acetilcolina

ACTH Hormocircnio adrenocorticotroacutefico

AVP Vasopressina

CCP Corpos Celulares Preacute-ganglionares

CEUA Comissatildeo de Eacutetica no Uso de Animais

CRH Hormocircnio liberador de corticotropina

dB decibeacuteis

DCF Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas

DPA Departamento de Parasitologia Animal

FC Frequecircncia Cardiacuteaca

FFT Transformada Raacutepida de Fourier

GR Receptor de Glicocorticoacuteides

HF Frequecircncia alta

HHA Eixo Hipotaacutelamo Hipoacutefise Adrenal

IRR Intervalos RR

LC Locus Coeruleus

LF Frequecircncia baixa

MR Receptor de Mineralocorticoacuteide

NAV Nodo Atrioventricular

NA Noradrenalina

NS Nodo Sinoatrial

PKA Proteiacutena quinase dependente de AMPc

PVN Nuacutecleo Paraventricular do Hipotaacutelamo

RMSSD raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado

SAM Sistema Simpato-adreno-medular

SNA Sistema Nervoso Autocircnomo

SNC Sistema Nervoso Central

SNP Sistema Nervoso Parassimpaacutetico

SNS Sistema Nervoso Simpaacutetico

xii

SRD Sem raccedila definida

STDRR Desvio padratildeo de todos os intervalos RR do segmento

UFRRJ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

VIC Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco

xiii

SUMAacuteRIO

DEDICATOacuteRIA v

AGRADECIMENTOS vi

RESUMO vii

LISTA DE TABELAS E FIGURAS ix

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS xi

1 INTRODUCcedilAtildeO 1

11 Justificativa 3

12 Objetivos 4

121 Geral 4

122 Especiacuteficos 4

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 5

21 Estresse 5

22 Fisiologia do estresse 6

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse 10

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca 10

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) 12

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees 14

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees 16

26 Fobia em catildees 18

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS 22

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental 22

32 Animais 22

321 Consideraccedilotildees eacuteticas 23

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som 23

33 Procedimentos Experimentais 24

xiv

331 Estiacutemulo Sonoro 25

34 Grupos experimentais 26

35 Coletas de sangue 26

36 Uso do Frequenciacutemetro 27

37 Anaacutelise Espectral da VIC 27

38 Anaacutelise Comportamental 30

39 Anaacutelise Estatiacutestica 31

4 RESULTADOS 33

41 Perfil dos proprietaacuterios e caracteriacutesticas gerais dos animais 33

42 Anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco 41

43 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 46

44 Correlaccedilotildees entre os dados 51

5 DISCUSSAtildeO 55

51 Perfil dos proprietaacuterios e manejo dos animais 55

52 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e o estresse sonoro agudo 59

53 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 61

54 Correlaccedilotildees entre dados 62

55 O Modelo de Estresse Sonoro Agudo em Catildees 63

6 CONCLUSOtildeES 65

7 REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 67

8 ANEXOS 77

ANEXO 1 Ficha geral de cadastro 77

ANEXO 2 Ficha Neuroloacutegica 81

ANEXO 3 Ficha de avaliaccedilatildeo de Fobia 83

ANEXO 4 Folder de divulgaccedilatildeo 85

ANEXO 5 Termo de Consentimento 86

xv

ANEXO 6 Ficha de Protocolo Experimental 88

1

1 INTRODUCcedilAtildeO

Situaccedilotildees de estresse e medo fazem parte da vida de todos os animais e as

reaccedilotildees fisioloacutegicas provocadas por elas satildeo essenciais para sobrevivecircncia no meio

selvagem mas tambeacutem na vida urbana para aqueles animais que foram domesticados

acompanhando o homem em sua caminhada de vida em sociedade

A espeacutecie canina foi a que mais se envolveu com o homem tornando-se um

animal domeacutestico e dependente de cuidados sendo alvo de problemas sociais

ambientais e de sauacutede puacuteblica quando abandonados ou em vida livre pelas cidades e

comunidades

Essa relaccedilatildeo criada ao longo dos tempos entre os catildees e o homem trouxe para

os dias atuais um viacutenculo afetivo de ambas as espeacutecies modificando e ateacute selecionando

atraveacutes das raccedilas o comportamento canino acentuando caracteriacutesticas que podem estar

influenciando a forma dos catildees de lidar com as situaccedilotildees de estresse e medo no

cotidiano

A fisiologia do comportamento regula-se baseada nos estiacutemulos externos aos

quais o animal estaacute sujeito conforme suas necessidades de sobrevivecircncia e ateacute de bem

estar Dessa forma o estresse vem a ser responsaacutevel por modelar o comportamento de

um indiviacuteduo conforme seu modo de vida e sua exposiccedilatildeo a esses estiacutemulos

O estresse como mecanismo de adaptaccedilatildeo a situaccedilotildees adversas eacute extremamente

importante na manutenccedilatildeo da vida pois sem esse mecanismo qualquer situaccedilatildeo

desfavoraacutevel poderia causar morte imediata sendo a capacidade de responder

rapidamente a uma situaccedilatildeo de perigo uma importante caracteriacutestica da evoluccedilatildeo dos

seres

Mais especificamente em situaccedilotildees de estresse o organismo de um indiviacuteduo

redistribui sua energia e o sistema locomotor e sensorial satildeo priorizados em detrimento

de outros (reprodutivo digestivo e imune) fazendo assim com que a resposta

momentacircnea seja eficiente O problema comeccedila quando haacute a persistecircncia destas

situaccedilotildees e ou dessas respostas causando prejuiacutezo aos sistemas deprimidos

A influecircncia dos estiacutemulos sonoros tem demonstrado importacircncia cliacutenica na

espeacutecie canina jaacute que leva diversos indiviacuteduos a sofrerem alteraccedilotildees comportamentais e

2

neuroendoacutecrinas que podem evoluir para graves distuacuterbios comportamentais e

fisioloacutegicos como a fobia Em alguns casos de estresse crocircnico severo podem ocorrer

danos neurais doenccedilas gastrointestinais aleacutem da diminuiccedilatildeo da resposta imune

A fobia eacute descrita como um medo acentuado irracional persistente e excessivo

claramente discerniacutevel de objetos seres lugares ou situaccedilotildees de forma desproporcional

e exagerada acompanhada de comportamento de fuga esquiva antecipaccedilatildeo e intenso

sofrimento que geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase

fisioloacutegica mas que leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas

ao medo coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o

eixo Hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HPA) na liberaccedilatildeo de glicocorticoides e o sistema

nervoso simpaacutetico

Na fobia os limiares de ativaccedilatildeo dos circuitos neurais de medo estatildeo reduzidos

podendo ser observado no indiviacuteduo clara hiperexcitabilidade hipervigilacircncia e

aumento da responsividade comportamental aos estiacutemulos Idealmente os graus de

ativaccedilotildees seriam proporcionais agrave ameaccedila e uma adaptaccedilatildeo agrave situaccedilatildeo normalizaria a

resposta de estresse diminuindo-a conforme a ameaccedila desaparecesse o que natildeo ocorre

na fobia

Os criteacuterios para o diagnoacutestico de fobia em humanos costumam usar termos

que se referem a sintomas emocionais envolvendo sentimentos e estados de consciecircncia

subjetivos o que difiacuteculta a abordagem cientifica e cliacutenica nos animais Poreacutem as

alteraccedilotildees dos paracircmetros comportamentais e fisioloacutegicos dos sistemas

neuroendoacutecrinos envolvidos nesses distuacuterbios satildeo um caminho de estudo e pesquisa

Dessa forma os niacuteveis de estresse podem ser avaliados atraveacutes da mensuraccedilatildeo

de paracircmetros fisioloacutegicos e comportamentais Em vaacuterias espeacutecies o paracircmetro mais

utilizado eacute a dosagem de cortisol Aleacutem desse a anaacutelise da variabilidade do intervalo

cardiacuteaco (VIC) vem se mostrando um paracircmetro importante e natildeo invasivo para avaliar

o balanccedilo simpato-vagal em indiviacuteduos submetidos a estiacutemulos potencialmente

desafiadores As alteraccedilotildees comportamentais analisadas em conjunto com as anaacutelises

citadas a cima formam uma importante fonte de dados ainda natildeo correlacionadas nos

estudos mais recentes

Contudo o presente estudo teve como objetivo avaliar as respostas autonocircmicas

e comportamentais induzidas pelo estresse sonoro agudo em catildees de companhia com

3

histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O modelo de estresse utilizado

consiste em um meacutetodo natildeo invasivo e seguro uma vez que cada animal foi submetido

a um estiacutemulo sonoro (sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio) de curta duraccedilatildeo (25 min) a

uma intensidade sonora maacutexima de 1039 dB natildeo sendo capaz de causar efeitos

deleteacuterios para a audiccedilatildeo dos animais

Para tal foram utilizados 28 catildees de diversas raccedilas dos quais 16 eram

historicamente foacutebicos a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e 12 natildeo apresentavam

qualquer sinal de medo a esses sons Os animais foram dividos ainda entre submetidos

ao som de trovatildeo e submetidos ao som de fogos de artifiacutecio

Foram avaliados o balanccedilo simpato-vagal atraveacutes da mensuraccedilatildeo da VIC e 14

paracircmetros comportamentais aleacutem da coleta de amostras sanguiacuteneas em 6 momentos

para posterior anaacutelise dos niacuteveis seacutericos de cortisol

11 Justificativa

Animais e humanos satildeo constantemente submetidos a situaccedilotildees de estresse no

seu cotidiano Em catildees vaacuterios estiacutemulos podem ser considerados geradores de estresse

e sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio tecircm se mostrado estiacutemulos estressores importantes

devido agrave frequente ocorrecircncia de fobia a esses sons nesta espeacutecie

O tema escolhido eacute de grande importacircncia na atualidade uma vez que satildeo

necessaacuterias mais pesquisas sobre o efeito do estresse em humanos e animais Neste

sentido a avaliaccedilatildeo dos paracircmetros fisioloacutegicos em situaccedilotildees de estresse eacute uma forma

de estudar e compreender melhor os distuacuterbios relacionados ao estresse e traccedilar novos

caminhos terapecircuticos

Eacute relevante para a Medicina Veterinaacuteria e para a aacuterea de sauacutede como um todo

pois modelos de estresse sonoro agudo podem ser uacuteteis na verificaccedilatildeo da reatividade ao

estresse aleacutem de serem pouco invasivos e de relativa faacutecil execuccedilatildeo

4

12 Objetivos

121 Geral

Verificar as respostas fisioloacutegicas ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

122 Especiacuteficos

Avaliar o perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios as caracteriacutesticas gerais e

comportamentais e o manejo dos animais em catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

Avaliar a resposta autonocircmica a partir da anaacutelise espectral da variabilidade do

intervalo cardiacuteaco de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos

de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar a resposta comportamental de catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre o comportamento dos animais relatado pelos

proprietaacuterios durante a ocorrecircncia natural de trovotildees ou fogos e os comportamentos

exibidos pelos catildees em resposta ao modelo de estresse sonoro em laboratoacuterio

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre paracircmetros autonocircmicos e comportamentais em

catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

5

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

21 Estresse

O fisiologista Claude Bernard em 1872 definiu o conceito de meio interno pela

primeira vez como um princiacutepio do equiliacutebrio dinacircmico do meio interno essencial para

a sobrevivecircncia (FRANCI 2005)

Apesar disso foi Walter Canon em 1929 o responsaacutevel por definir esse

conceito da condiccedilatildeo de equiliacutebrio do meio interno criado por Claude Bernard com o

termo homeostase Aleacutem de ter reconhecidoos agentes desafiadores da homeostase

como fiacutesicos e emocionais e elaborado o conceito de ldquoreaccedilatildeo de emergecircnciardquo que

ocorre quando haacute um desafio capaz de ativar a liberaccedilatildeo de noradrenalina de terminais

nervosos simpaacuteticos e adrenalina da medula da adrenal (FRANCI 2005)

E mais recentemente entre 1946 e 1976 o fisiologista canadense Hans Selye

definiu ldquoa situaccedilatildeo gerada pelo desafio ao qual um organismo estaria submetidordquo com o

termo estresse E ao ocorrerem controveacutersias conceituais uma vez que natildeo se podia

distinguir a causa do efeito ele criou o termo estressor para designar o agente causador

(estiacutemulo) e manteve o termo estresse para designar a condiccedilatildeo gerada pelo estiacutemulo

desafiador (FRANCI 2005)

A resposta a um estiacutemulo estressor eacute fundamental para a homeostase de um ser

vivo e sua sobrevivecircncia Nas condiccedilotildees de estresse o organismo reage por meio da

ativaccedilatildeo e desativaccedilatildeo do mecanismo de controle de vaacuterias funccedilotildees para recuperar e

manter a homeostase No entanto essas respostas podem ser insuficientes para

restabelecer ou manter a homeostase ou podem ser exageradas representando risco de

doenccedilas Portanto o estresse pode ser definido como a soma de respostas fiacutesicas e

mentais causadas por determinados estiacutemulos externos e que permitem ao indiviacuteduo

superar determinadas exigecircncias do meio-ambiente (FRANCI 2005)

A reaccedilatildeo de estresse maximiza o gasto de energia que ajuda a preparar o corpo

para atender a uma situaccedilatildeo ameaccediladora ou desafiadora em que o indiviacuteduo tende a

mobilizar um grande esforccedilo a fim de lidar com o evento No entanto enquanto uma

certa quantidade de estresse eacute necessaacuteria para a sobrevivecircncia o estresse prolongado

pode afetar adversamente a sauacutede (BERNARD amp KRUPAT 1994)

6

Em situaccedilotildees de estresse ocorre a ativaccedilatildeo de duas principais vias o eixo

hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) atraveacutes do aumento da produccedilatildeo de cortisol e o

sistema nervoso simpaacutetico atraveacutes da liberaccedilatildeo de catecolaminas (Noradrenalina

Adrenalina)

A desregulaccedilatildeo de qualquer um desses sistemas de estresse pode levar a

distuacuterbios fisioloacutegicos de vaacuterios outros sistemas incluindo os sistemas imunoloacutegico

cardiovascular funccedilatildeo metaboacutelica e comportamento levando a maacute adaptaccedilatildeo da

resposta ao estresse (MARQUES et al 2010)

22 Fisiologia do estresse

Os estiacutemulos estressores podem ser definidos como aqueles que desafiam a

homeostase Esses estiacutemulos geram respostas que variam de acordo com a duraccedilatildeo e

intensidade e ainda com a predisposiccedilatildeo geneacutetica e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo

Os estiacutemulos causadores de estresse podem ser classificados em quatro grupos

estressores fiacutesicos e quiacutemicos (calor frio barulho radiaccedilatildeo intensa e substacircncias

toacutexicas) psicoloacutegicos (medo e frustraccedilatildeo) sociais (um ambiente hostil e rompimento de

relaccedilotildees) e os que alteram a homeostase vegetativa como em casos de exerciacutecio intenso

e hemorragias Quanto agrave duraccedilatildeo os estiacutemulos causadores de estresse podem ser ainda

classificados como agudos ou crocircnicos (PACAacuteK amp PALKOVITS 2001)

Moberg (2000) propotildee um modelo para compreensatildeo do estresse em toda

espeacutecie animal que sugere uma resposta bioloacutegica ao estresse a partir de trecircs estaacutegios

gerais

1ordm O reconhecimento de um estiacutemulo estressante

2deg A defesa bioloacutegica contra o estiacutemulo estressante

3deg As consequecircncias da resposta de estresse

Esta resposta ao estressor iraacute abranger aspectos cognitivos comportamentais e

fisioloacutegicos (MARGIS et al 2003)

Em uma situaccedilatildeo de estresse satildeo ativados o sistema simpato-adrenomedular

gerando o aumento da secreccedilatildeo de catecolaminas e logo excitaccedilatildeo raacutepida do sistema

cardiovascular ocasionando um aumento da frequecircncia cardiacuteaca e da pressatildeo arterial E

7

o outro eixo ativado eacute o hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) levando ao aumento na

produccedilatildeo de cortisol e naturalmente mobilizaccedilatildeo de energia (ULRICH-LAI amp

HERMAN 2009) (Figura 1)

As respostas de emergecircncia ativadas pelo SAM ocorrem quando o organismo se

prepara para a defesa ou ataque excretando adrenalina Entatildeoo suprimento de sangue eacute

desviado para os muacutesculos havendo elevaccedilatildeo do deacutebito cardiacuteaco total e da

redistribuiccedilatildeo sanguiacutenea aumentando a oferta de nutrientes e oxigecircnio para as estruturas

vitais A pressatildeo arterial se eleva e os bronquiolos se dilatam tornando a respiraccedilatildeo

mais raacutepida e profunda para retirada do dioacutexido de carbono excedente As funccedilotildees

digestivas e secretoacuterias diminuem aleacutem da reaccedilatildeo de aliacutevio com a liberaccedilatildeo de qualquer

excesso da bexiga e intestino A taxa metaboacutelica aumenta e a liberaccedilatildeo de endorfinas

diminue a sensibilidade agrave dor e os sentidos satildeo mantidos em estado de alerta

(ROGERSON 1997)

8

Figura 1 Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA A ativaccedilatildeo do sistema simpato-adrenomedular

(SAM) e do eixo do hipotaacutelamo hipoacutefise adrenal (HHA) como sistemas primaacuterios para a

manutenccedilatildeo e restabelecimento da homeostase A exposiccedilatildeo ao estressor resulta em ativaccedilatildeo de

neurocircnios preacute-ganglionares simpaacuteticos na coluna intermediolateral da medula espinhal

toracolombar (T1 a L2) Estes neurocircnios preacute-ganglionares se projetam para gacircnglios preacute e para

vertebrais que entatildeo terminam em oacutergatildeos alvo e nas ceacutelulas cromafins da medula da adrenal

Esta ativaccedilatildeo simpaacutetica (em ciacuterculos) representa a resposta claacutessica de luta e fuga que foi

primariamente caracterizada por Walter Cannon e colaboradores no iniacutecio do seacuteculo passado e

leva a um aumento dos niacuteveis de adrenalina (proveniente da adrenal) e de noradrenalina dos

terminais simpaacuteticos aumento da frequecircncia e da forccedila de contraccedilatildeo do coraccedilatildeo vasoconstriccedilatildeo

perifeacuterica e mobilizaccedilatildeo de energia O tocircnus parassimpaacutetico tambeacutem eacute mobilizado durante o

estresse No sistema parassimpaacutetico (em estrelas) representa a ativaccedilatildeo de nuacutecleos preacute-

ganglionares cracircnios-sacrais ativam nuacutecleos poacutes-ganglionares localizados proacuteximos aos oacutergatildeos

inervados com efeito geralmente oposto ao sistema simpaacutetico Para o eixo HHA a exposiccedilatildeo ao

estressor ativa neurocircnios hipofisiotroacuteficos no nuacutecleo paraventricular do hipotaacutelamo (PVN) que

secretam hormocircnios de liberaccedilatildeo como hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH) e

vasopressina (AVP) na circulaccedilatildeo porta da eminecircncia meacutedia Estes hormocircnios liberadores atuam

na hipoacutefise anterior para promover a secreccedilatildeo de hormocircnio adrenocorticotroacutefico (ACTH) que

atua no coacutertex da adrenal (zona fasciculata) para iniciar a siacutentese e liberaccedilatildeo dos hormocircnios

glicocorticoacuteides Os glicocorticoacuteides circulantes promovem a mobilizaccedilatildeo de energia estocada e

potencializam numerosos efeitos simpaacuteticos como a vasoconstriccedilatildeo perifeacuterica Aleacutem disso o

coacutertex da adrenal eacute diretamente inervado pelo sistema simpaacutetico que regula a liberaccedilatildeo de

glicocorticoacuteides Entatildeo a ativaccedilatildeo do sistema simpaacutetico e do eixo HHA tem accedilotildees

complementares no organismo incluindo a mobilizaccedilatildeo de energia e a manutenccedilatildeo da pressatildeo

arterial durante o estresse (Adaptado de ULRICH-LAI amp HERMAN 2009)

CRH

AVP

9

As respostas ao estresse que envolvem emoccedilatildeo passaratildeo por avaliaccedilatildeo afetiva

onde a informaccedilatildeo seraacute processada e interpretada para se estimar o potencial de ameaccedila

Esta avaliaccedilatildeo afetiva iraacute determinar o padratildeo de respostas e o tipo de defesa de acordo

com a histoacuteria pessoal aprendizado e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo que entatildeo faraacute

a avaliaccedilatildeo da capacidade para lidar com a situaccedilatildeo e organizaccedilatildeo da resposta

(MARGIS et al 2003)

A intensidade da resposta eacute que determina se o animal estaacute sofrendo de estresse

ou eacute meramente experimentado um episoacutedio breve em sua vida sem nenhum impacto

significativo ao seu bem-estar

Circuitos neurais espinais e supra espinais estatildeo envolvidos nas respostas de

estresse Os supra espinais processam as informaccedilotildees vindas das vias somatossensoriais

e viscerossensoriais e elaboram as respostas atraveacutes do taacutelamo hipotaacutelamo aacuterea preacute-

optica estruturas liacutembicas e sistemas amineacutergicos e natildeo amineacutergicos do tronco cerebral

Os neurocircnios do PVN secretores de hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH)

e vasopressina com os neurocircnios catecolamineacutergicos do locus coeruleus (LC) (o nuacutecleo

com maior densidade de neurocircnios noradreneacutergicos com papel fundamental no

desencadeamento da resposta ao estresse e reaccedilotildees de fuga) inervam o hipocampo a

amiacutegdala e o neocortex aleacutem de nuacutecleos do rafe (5-HT) e grupamentos celulares da

medula e ponte compondo assim um dos principais reguladores centrais de resposta ao

estresse na ativaccedilatildeo do eixo HHA e SNS (FRANCI 2005)

O eixo HHA eacute ativado por diferentes categorias de estresse como traumaacutetico

inflamatoacuterio e psicoloacutegico E o estresse psicoloacutegico tem regulaccedilatildeo por estruturas

liacutembicas que exercem atividade modulatoacuteria sobre o eixo (ULRICH-LAI amp HERMAN

2009)

O PVN monitora sinais relacionados com o estado emocional atraveacutes de sinais

metaboacutelicos como a composiccedilatildeo plasmaacutetica O CRH o principal neurotransmissor

coordenador das alteraccedilotildees psicoloacutegicas e comportamentais relacionadas ao estresse eacute

sintetizado no PVN e liberado nos capilares da eminecircncia meacutedia juntamente com a

vasopressina (AVP) e alcanccedilam diretamente a hipoacutefise anterior via circulaccedilatildeo portal

hipotalacircmica-hipofisaacuteria que por sua vez estimula na hipoacutefise a liberaccedilatildeo do hormocircnio

adrenocorticotroacutefico (ACTH) (MORMEgraveDE et al 2006)

10

O ACTH eacute sintetizado por ceacutelulas especializadas da hipoacutefise anterior vai para a

corrente sanguiacutenea e estimula o coacutertex da glacircndula adrenal (na zona fasciculada) que

sintetiza o glicocorticoide atraveacutes de esteroides derivados do colesterol O cortisol eacute o

glicocorticoacuteide ativo do eixo para catildees gatos e humanos e a corticosterona para

paacutessaros e roedores (MORMEgraveDE et al 2006)

Esse hormocircnio final do eixo HHA interage com as ceacutelulas atraveacutes da ligaccedilatildeo a

dois receptores o receptor glicocorticoide (GR) e o receptor de mineralocorticoide

(MR) O receptor GR eacute encontrado na maioria dos tecidos do corpo incluindo a maioria

das aacutereas do enceacutefalo No rim e em outros tecidos a aldosterona liga-se ao MR durante a

regulaccedilatildeo da reabsorccedilatildeo de soacutedio mas o MR tambeacutem estaacute presente no hipocampo onde

ocorre a ligaccedilatildeo do cortisol Estes complexos esteroacuteide-receptores entatildeo interagem

com o DNA para iniciar ou para reprimir a transcriccedilatildeo de genes especiacuteficos a fim de

regular a siacutentese de proteiacutenas que provoca alteraccedilotildees fisioloacutegicas em resposta ao

estresse

O cortisol tem 10 vezes mais afinidade ao MR que ao GR Em niacuteveis baixos ou

em situaccedilotildees de ausecircncia de estresse a maior parte do cortisol liga-se aos MRs no

ceacuterebro (principalmente no hipocampo) e modula a atividade basal do eixo HHA e o

aparecimento de resposta ao estresse Com a elevaccedilatildeo dos niacuteveis de cortisol ocorre um

aumento de ligaccedilotildees nos receptores GR reduzindo a atividade do eixo HHA

(mecanismo de ldquofeed-backrdquo negativo) No entanto a ativaccedilatildeo crocircnica deste receptor

estaacute ligada a vaacuterios distuacuterbios cognitivos relativos ao estresse (DE KLOET et al 1999)

Proteger o organismo de possiacuteveis danos eacute um dos papeis principais das

respostas hormonais a situaccedilotildees de estresse E seus principais hormocircnios satildeo a

adrenalina de secreccedilatildeo raacutepida pelo envolvimento na reaccedilatildeo de luta ou fuga e o

corticosteroacuteides na restauraccedilatildeo e na reparaccedilatildeo dos sistemas agindo na segunda linha de

defesa regulando as respostas inflamatoacuteria e imune (MC EWEN 2000)

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca

11

O Nodo Sinoatrial (NS) apresenta a frequecircncia de disparo mais intensa no

coraccedilatildeo estimulando outros locais como os nodos atrioventriculares que principiam

seus proacuteprios impulsos eleacutetricos E com a ausecircncia de influecircncias hormonais ou neurais

a frequecircncia cardiacuteaca (FC) permanece equivalente agrave frequecircncia de disparos do NS ou

seja constante (STAUSS 2007)

Os sistemas nervoso simpaacutetico (SNS) e parassimpaacutetico (SNP) estatildeo

constantemente ativados regulando a atividade cardiacuteaca com a predominacircncia de um ou

outro conforme a situaccedilatildeo Em repouso a predominacircncia eacute vagal o que em humanos

leva a respostas raacutepidas de no maacuteximo 5 segundo na FC diminuindo-a em poucos

batimentos Jaacute as respostas da ativaccedilatildeo simpaacutetica ocorrem apoacutes cinco segundos

aumentando progressivamente chegando a sua resposta maacutexima de aumento da FC

apoacutes 20 a 30 segundos (HAINSWORTH 1995)

No entanto os sistemas simpaacutetico e parassimpaacutetico atuam de forma simultacircnea

na regulaccedilatildeo da atividade cardiacuteaca onde o aumento da atividade vagal natildeo resulta tatildeo

logo na reduccedilatildeo da atividade simpaacutetica e vice-versa (VON BORELL et al 2007)

Quando o SNS eacute ativado as fibras nervosas promovem a descarga de

noradrenalina (NA) nos aacutetrios e ventriacuteculos que por sua vez juntamente com a

adrenalina liberada pela adrenal estimula os receptores β1 adreneacutergicos presentes no

coraccedilatildeo ativando atraveacutes de uma proteiacutena G excitatoacuteria (Gs) a enzima adenilato ciclase

(AC) agrave produzir AMPc Seu aumento intracelular leva agrave ativaccedilatildeo da proteiacutena quinase

dependente de AMPc aumentando as correntes de canais iocircnicos de Ca+2

e Na+

acelerando a velocidade de despolarizaccedilatildeo levando ao aumento da frequecircncia de

disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas do NA desencadeando o aumento da

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Do mesmo modo o miocaacuterdio atrial o nodo aacutetrio-ventricular e o NS satildeo

inervados pelas fibra nervosa parassimpaacutetica dos nervos vagos liberando acetilcolina

(ACh) ativando receptores M2 que estatildeo acoplados a uma proteiacutena G inibitoacuteria (Gi)

inibindo a siacutentese de AMPc intracelular reduzindo a atividade da PKA Aleacutem de a ACh

ativar uma corrente de efluxo de K+ gerando uma hiperpolarizaccedilatildeo da membrana

levando ao aumento do limiar de ativaccedilatildeo do potencial de accedilatildeo sinusal o que reduz a

12

frequecircncia de disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas sinusais diminuindo por fim a

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Existem diferenccedilas no tempo de resposta da ativaccedilatildeo dos ramos simpaacutetico e

parassimpaacutetico que ocorrem em certo modo pela liberaccedilatildeo lenta de noradrenalina nos

terminais nervosos simpaacuteticos e pelas fibras preacute-ganglionares vagais serem

mielinizadas contribuindo para uma transmissatildeo eleacutetrica mais raacutepida Aleacutem das

diferenccedilas anatocircmicas entre os ramos como eacute o caso dos corpos celulares preacute-

ganglionares do parassimpaacutetico localizados dentro do coraccedilatildeo enquanto que os corpos

celulares preacute-ganglionares simpaacuteticos se localizam no gacircnglio paravertebral (VON

BORELL et al 2007)

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC)

A manutenccedilatildeo da homeostase do sistema cardiovascular eacute resultado da oscilaccedilatildeo

riacutetmica de componentes regulatoacuterios da atividade cardiacuteaca onde se observa intervalos

irregulares de tempo entre os batimentos consecutivos (VON BORELL et al 2007)

A anaacutelise da variabilidade do intervalo cardiacuteaco pode ser realizada atraveacutes dos

iacutendices no domiacutenio do tempo e da frequecircncia

No domiacutenio do tempo cada intervalo entre um batimento cardiacuteaco e outro pode

ser medido em milissegundos e no domiacutenio da frequecircncia as flutuaccedilotildees riacutetmicas podem

caracterizar os estados de repouso e atividade influindo na seacuterie cronoloacutegica contida

entre os intervalos tornando possiacutevel a mensurar a atividade do SNA (HOSHI 2009

SONG et al 2006)

Os dados satildeo obtidos atraveacutes da gravaccedilatildeo dos intervalos entre batimentos

cardiacuteacos feitos por frequenciacutemetros capazes de detectar em milissegundos (ms) o

tempo entre os batimentos e armazenaacute-los (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al

2007)

A teacutecnica utilizada com esse objetivo eacute chamada de anaacutelise espectral e consiste

no uso de algoritmos matemaacuteticos como eacute o caso da transformada raacutepida de fourier

(FFT) para obter diagramas dimensionais Dispondo em um graacutefico os componentes

oscilatoacuterios de frequecircncia da VIC no eixo X e a amplitude dos componentes oscilatoacuterios

no eixo Y permitindo atraveacutes dessa teacutecnica determinar a forccedila espectral das

frequecircncias baixas e altas da VIC

13

Nesse contexto os dois Sendo assim os dois componentes de frequecircncia principais satildeo

divididos atraveacutes da anaacutelise espectral em Frequecircncia baixa (LF) caracterizado pelo

espectro de 004 a 015Hz e Frequecircncia alta (HF) situada na faixa de 015 a 04 Hz na

anaacutelise espectral (KAWASE et al 2002 VON BORELL et al 2007 PICCIRILLO et

al 2009)

Quando os IRR satildeo dispostos em uma escala de tempo um graacutefico eacute

confeccionado e as oscilaccedilotildees formadas representam a accedilatildeo dos diferentes componentes

regulam os pulsos cardiacuteacos onde as frequecircncias mais altas representam a atividade

riacutetmica resultante da ativaccedilatildeo parassimpaacutetica e as mais baixas exibem aquelas

resultantes da atividade simpaacutetica (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al 2007)

(Figura 2)

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC Variabilidade do intervalo cardiacuteaco em um indiviacuteduo

jovem durante o repouso e quando em movimento A seacuterie temporal de intervalos RR estaacute

Repouso Movimento

14

disposta nos graacuteficos do topo Os graacuteficos centrais ilustram a presenccedila de dois componentes

principais da densidade espectral LF e HF Durante o movimento o componente LF se torna

predominante em relaccedilatildeo ao repouso Os graacuteficos na base da figura demonstram a distribuiccedilatildeo

relativa dos dois componentes (representada pela aacuterea) (MALLIANI 1997)

A razatildeo entre os dois componentes de frequecircncia eacute calculada a partir dos valores

obtidos de LF e HF resultando em valor que representa o balanccedilo entre a atividade

simpaacutetica e parassimpaacutetica aleacutem de possibilitar a decomposiccedilatildeo dos componentes

espectrais atraveacutes do caacutelculo das frequecircncias centrais desses componentes que se

situam impliacutecitos no sinal da variabilidade (PAGANI et al 1986 LOMBARDI et

al1996 LOMBARDI 1997 MALLIANI et al 1997 VON BORELL et al 2007

HARADA et al 2005)

A anaacutelise espectral da VIC natildeo acessa o tocircnus autonocircmico cardiacuteaco mas sim o

seu balanccedilo o que justifica a ocorrecircncia de alteraccedilotildees na capacidade do coraccedilatildeo de

responder a esses estiacutemulos quando haacute alteraccedilotildees crocircnicas na atividade autonocircmica

Nesses casos natildeo seria aplicaacutevel a anaacutelise espectral da VIC (STAUSS 2007

PICCIRILLO et al 2009)

Deste modo a anaacutelise espectral da VIC tem como principal utilidade a funccedilatildeo de

indicadora da atividade autonocircmica em resposta ao estresse psicoloacutegico e fiacutesico (VON

BORELL et al 2007) E quando eacute aplicada no estudo das alteraccedilotildees agudas da

atividade autonocircmica cardiacuteaca essa anaacutelise eacute utilizada de maneira a obter dados

fidedignos onde diante de uma resposta ao estresse psicoloacutegico pode ser observado um

aumento agudo na atividade cardiacuteaca simpaacutetica caracterizado pelo aumento do

componente LF com provavelmente baixa ou nenhuma alteraccedilatildeo do componente HF

(STAUSS 2007)

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees

O oacutergatildeo auditivo dentre outras funccedilotildees se caracteriza especialmente por seu

desempenho no reconhecimento de situaccedilotildees ameaccediladoras estando em funcionamento

ininterrupto atraveacutes da conexatildeo direta do ouvido interno com os mecanismos neurais de

ldquoluta ou fugardquo Esse sistema eacute capaz de diferenciar sons de frequecircncias e intensidades

relevantes para a sobrevivecircncia do indiviacuteduo em seu meio ambiente (WESTMAN amp

WALTERS 1981)

15

A percepccedilatildeo do som colabora no balanccedilo homeostaacutetico do sistema nervoso

central influenciando consequentemente o equiliacutebrio fisioloacutegico de forma geral atraveacutes

dos centros autonocircmicos e neuroendoacutecrinos do hipotaacutelamo variando em resposta

conforme o significado do estiacutemulo sonoro e sua intensidade previsibilidade

variabilidade e complexidade

Nesse contexto as respostas fundamentais ao som satildeo de orientaccedilatildeo reflexo de

surpresa e de defesa Sendo a resposta de orientaccedilatildeo fundamental por ser a reaccedilatildeo

comportamental de busca pela fonte sonora permitindo que o indiviacuteduo se prepare para

a resposta necessaacuteria e caso o reconhecimento do som mostre ser esse de baixa

significacircncia a habituaccedilatildeo iraacute ocorrer diminuindo o grau da reaccedilatildeo

Jaacute o reflexo de surpresa iraacute ocorrer em resposta a sons repentinos de alta

intensidade e caraacuteter assustador podendo ser atenuado quando o indiviacuteduo sabe que ele

iraacute ocorrer e podendo ser exacerbado em situaccedilotildees de tensatildeo medo e de abalo

emocional

E a resposta de defesa acontece em resposta a sons de significado intensidade e

duraccedilatildeo relacionados agrave ameaccedila onde haacute excitaccedilatildeo emocional e preparaccedilatildeo dos sistemas

para a accedilatildeo consistindo na resposta de estresse (WESTMAN amp WALTERS 1981)

Alguns sons adquirem significado particular para o indiviacuteduo representando

perigo em potencial assim como os sons de caracteriacutesticas ameaccediladoras Mas

geralmente o significado conotativo de um som potencialmente ameaccedilador estaacute no fato

de ser desconhecido e apresentar mudanccedilas raacutepidas de intensidade aleacutem das associaccedilotildees

extra-auditivas relacionadas a ele Aleacutem disso a previsibilidade desse estiacutemulo sonoro

tambeacutem poderaacute constituir um fator determinante na resposta jaacute que sons imprevisiacuteveis

caracterizam-se como um estiacutemulo estressor maior desencadeando uma reduccedilatildeo geral

de performance e uma baixa toleracircncia a frustraccedilotildees (WESTMAN amp WALTERS

1981)

Os catildees particularmente apresentam muita sensibilidade a estiacutemulos sonoros

visto que seu sistema auditivo eacute extremamente desenvolvido especialmente com a

funccedilatildeo de caccedila e guarda Poreacutem a resposta de defesa exagerada dos indiviacuteduos dessa

espeacutecie tem sido relatada principalmente aos sons de fogos de artifiacutecio trovatildeo e tiro de

16

armas de fogo Provavelmente o caraacuteter imprevisiacutevel a conotaccedilatildeo negativa que a

espeacutecie apresenta a esses sons e a intensidade proacutexima ao limiar de audiccedilatildeo possa

justificar tal reaccedilatildeo (HYDBRING et al 2004)

E eacute com base nessa reaccedilatildeo desmedida que os estiacutemulos sonoros como os sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio vecircm sendo utilizados como modelos de estresse em catildees

(HYDBRING et al 2004 ENGELAND et al 1990) Representando uma opccedilatildeo para o

estudo da reatividade ao estresse que pode ser comparada ao modelo de estresse

acuacutestico de sobressalto em ratos

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees

Ao iniciar um estudo a respeito de uma espeacutecie deve-se ter em mente que cada

sujeito analisado natildeo eacute um sistema inerte e fechado mas sim um somatoacuterio de eventos

que possibilitam ter um exame mais amplo e completo das interaccedilotildees do animal com o

ambiente (SULTAN 2003 BATESON et al 2004)

Assim o estudo comportamental se mostra uma importante ferramenta pois

permite entender que processos bioloacutegicos satildeo compostos por eventos fisioloacutegicos e

psicoloacutegicos natildeo havendo exclusatildeo entre eles mas sim uma sobreposiccedilatildeo com fortes

correlaccedilotildees (HARVERBEKE et al 2008 BEERDA 1999 SPANGENBERG 2006

MONTANHA et al 2009) Conhecer a etologia canina iraacute permitir uma melhor

utilizaccedilatildeo do animal respeitando seus limites e possibilitando a manutenccedilatildeo fiacutesica e

mental dentro dos padrotildees de bem-estar da espeacutecie (SNOWDON 1999 DAWNKINS

1989 DARWIN 2004)

Com relaccedilatildeo ao bem-estar Broom amp Johnson (1993) e Broom amp Fraser (2010)

definem como o estado de um animal em relaccedilatildeo agraves suas tentativas de se adaptar ao

meio em que vive Para os animais domeacutesticos principalmente para os animais de

companhia esse eacute um conceito que muitas vezes pode ser confundido e mal aplicado

pelo homem agrave medida que esse confronta a realidade do animal com a sua proacutepria

passando a adequar paracircmetros humanos a esses animais

Os catildees satildeo marcados pela socializaccedilatildeo baseada em relaccedilotildees familiares com

organizaccedilotildees flexiacuteveis e respostas a um liacuteder aleacutem de possuiacuterem necessidade de

17

ambientes complexos e variados marcadamente importantes na vida gregaacuteria de seus

ancestrais (BROOM amp FRASER 2010)

Pensando nisso um manejo inadequado pode ter consequecircncias que variam

desde alteraccedilotildees comportamentais a quadros patoloacutegicos tendo como agravantes

alteraccedilotildees substanciais nos seus niacuteveis de bem-estar

Poreacutem o estudo do comportamento animal ainda se mostra bastante pioneiro jaacute

que as pesquisas cientiacuteficas a niacutevel cliacutenico comeccedilaram a ser realizados haacute poucas

deacutecadas em animais com problemas comportamentais

Dessa forma se faz presente a necessidade de um maior desenvolvimento de

estudos e pesquisas nesse sentido visto que os problemas comportamentais satildeo

apontados como a principal causa de abandono ou morte de animais de companhia

apresentando maior nuacutemero de relatos do que as doenccedilas infecciosas neoplaacutesicas e

metaboacutelicas concomitantes (OVERALL et al 2001)

A relaccedilatildeo homem-animal eacute muito antiga mas eacute pouco estudada E isso faz com

que o diagnoacutestico e o tratamento dos distuacuterbios comportamentais sejam dificultados

Muitas vezes a origem dos problemas comportamentais estaacute ligada ao tipo de

relacionamento existente entre o homem e o seu animal E isso acontece porque os

animais passam por processos de humanizaccedilatildeo para se adaptarem ao modo e ao estilo de

vida do seu proprietaacuterio nem que para isso tenham que modificar as suas caracteriacutesticas

naturais (OVERALL et al 2001)

Embora os catildees apresentem uma flexibilidade comportamental as exigecircncias

criadas pelos seus proprietaacuterios podem desencadear conflitos e frustraccedilotildees que levam ao

aparecimento de problemas comportamentais (OVERALL et al 2001)

Com frequecircncia o stress ou a ansiedade estatildeo relacionados com o ambiente e

mostram que o limiar entre normal e anormal varia entre indiviacuteduos (BEAVER 2005)

O rompimento da homeostase pode resultar de estimulaccedilatildeo interna externa ou

ambos E o potencial de ruptura da homeostase aumenta com a magnitude do desafio

(APPLEBY amp PLUIJMAKERS 2004) Dessa forma sendo a fobia um transtorno de

reaccedilotildees exageradas e desproporcionais ao real grau de importacircncia do estimulo

18

estressor podemos sugerir que o indiviacuteduo foacutebico eacute mais susceptiacutevel ao estresse de

forma geral reagindo com paracircmetros mais facilmente alterados

26 Fobia em catildees

Medo e ansiedade satildeo funccedilotildees adaptativas de sobrevivecircncia que sinalizam para o

organismo a presenccedila de perigo em potencial no ambiente O medo eacute a resposta

imediata acionada por um evento ou objeto potencialmente nocivo e ansiedade envolve

processos cognitivos mais complexos como antecipaccedilatildeo e preocupaccedilatildeo com

hipervigilacircncia diante de um perigo iminente no ambiente (FEINSTEIN et al 2011)

Entre as respostas comportamentais e fisioloacutegicas claacutessicas imediatas do medo

destacam-se o congelamento sobressalto aumento da frequecircncia cardiacuteaca alteraccedilotildees da

pressatildeo arterial e aumento da vigilacircncia Satildeo respostas comportamentais e perceptivas

que facilitam as respostas defensivas como a fuga e esquiva de forma apropriada afim

de reduzir o perigo ou lesatildeo (CHUDASAMA 2009)

O neurocircuito do medo envolve principalmente a amiacutegdala estrutura cerebral

responsaacutevel pela detecccedilatildeo geraccedilatildeo e manutenccedilatildeo das emoccedilotildees relacionadas ao medo e

ansiedade Eacute uma estrutura complexa pertencente ao sistema liacutembico que consiste em

aproximadamente 10 nuacutecleos que coordenam respostas apropriadas agrave ameaccedila e ao

perigo atraveacutes das respostas comportamentais cardiovasculares e endoacutecrinas ao

estresse (ROSEN amp SCHULKIN 1998)

A amiacutegdala faz ligaccedilotildees entre as aacutereas do coacutertex cerebral e recebe informaccedilotildees

de todos os sistemas sensoriais permite a integraccedilatildeo da informaccedilatildeo proveniente das

diversas aacutereas atraveacutes de conexotildees excitatoacuterias e inibitoacuterias

Os nuacutecleos basolaterais satildeo as principais portas de entrada da amiacutegdala

recebendo informaccedilotildees sensoriais e auditivas vindas do taacutelamo coacutertex sensorial e

associativo (Figura 3) Ele estaacute sob tocircnica inibiccedilatildeo GABAeacutergica e quando bloqueada

esta inibiccedilatildeo resulta em aumento do comportamento de ansiedade com ativaccedilatildeo

cardiovascular simpaticamente mediada (KESSLER et al 2005)

19

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional A informaccedilatildeo

sensoacuteria eacute transmitida para o taacutelamo atraveacutes da via leminiscal A aferecircncia auditiva chega na

divisatildeo ventral do nuacutecleo geniculado medial e projeta-se para o coacutertex auditivo primaacuterio

enquanto outras vias extra leminiscais carreiam informaccedilotildees auditivas para outras partes do

taacutelamo como a divisatildeo medial do nuacutecleo geniculado medial e nuacutecleos intralaminares

posteriores que se projetam tanto para o coacutertex auditivo primaacuterio quanto para o coacutertex auditivo

associativo assim como para os nuacutecleos basolaterias da amiacutegdala Essa via do taacutelamo para

amiacutegdala eacute implicada na aprendizagem emocional (IVERSEN et al 2003)

A amiacutegdala ventrolateral em seres humanos eacute mais sensiacutevel aos estiacutemulos

negativos (especialmente se os estiacutemulos sinalizam informaccedilatildeo negativa iminente) E a

amiacutegdala centromedial (CMA) dorsal tem projeccedilotildees principalmente subcorticais

especialmente aquelas ligadas ao hipotaacutelamo lateral e substacircncia cinzenta periaquedutal

(PAG) Essas projeccedilotildees podem explicar em parte as respostas fisioloacutegicas associadas

ao medo com o hipotaacutelamo (Figura 4) (KESSLER et al 2005)

Kandel 2003

20

Figura 4 Conexotildees diretas entre o nuacutecleo central da amiacutegdala e uma variedade de aacutereas

hipotalacircmicas e do tronco encefaacutelico envolvidas no medo e na ansiedade (IVERSEN et al

2003)

O Locus coeruleus importante nuacutecleo com grande densidade de neurocircnios

noradreneacutergicos com papel no desencadeamento da resposta ao estresse e das reaccedilotildees de

fuga tem tambeacutem papel importante no controle do medo A desregulaccedilatildeo desse nuacutecleo

parece ter relaccedilatildeo com o aparecimento do pacircnico e fobias em humanos (CHARNEY

1984) certamente atraveacutes de sua ligaccedilatildeo ao sistema liacutembico (CHARNEY 1984)

Medos podem desenvolver-se gradualmente e pode haver variaccedilatildeo na resposta

Em contraste fobias geralmente se desenvolvem rapidamente e uma vez desenvolvidas

haacute pouca mudanccedila em sua apresentaccedilatildeo entre as seacuteries Situaccedilotildees indutoras de fobia ou

satildeo evitadas a todo custo pelo foacutebico ou se inevitaacutevel satildeo suportadas com intensa

ansiedade e sofrimento (OVERALL 2010)

A Associaccedilatildeo Norte Americana de Psiquiatria no manual de diagnoacutestico e

estatiacutestica de transtornos mentais (DSM-IV-TR 2002) e a CID-10 (1993) definem em

humanos fobias especiacuteficas como medos irracionais excessivos acentuados e

persistentes revelados pela presenccedila ou antecipaccedilatildeo de um objeto situaccedilatildeo ou

atividade foacutebica especiacutefica de forma desproporcional acompanhados de

comportamentos de fuga esquiva antecipaccedilatildeo ansiosa e intenso sofrimento

Geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase fisioloacutegica

mas leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas ao medo

21

coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o eixo

HHA e o Sistema Nervoso Simpaacutetico

Em catildees natildeo haacute ateacute o momento descrito na literatura uma definiccedilatildeo oficial para

tal transtorno

As fobias satildeo transtornos de ansiedade de difiacutecil cura e geralmente a memoacuteria

de uma resposta foacutebica pode desencadear outros transtornos de ansiedade Dessa forma

o tratamento tem importacircncia natildeo soacute pela questatildeo do bem-estar e qualidade de vida

mas tambeacutem devido a seus componentes de comorbidade (OVERALL 2010)

Resposta exagerada a sons de trovatildeo estatildeo entre as doenccedilas comportamentais

mais comumente associados com pacircnico ou fobia em catildees Ocorre geralmente em

todas as raccedilas embora natildeo existam dados sobre a incidecircncia relativa destes problemas

(OVERALL et al 2001 DUNHAM amp FRANK 2001 VOITH amp BORCHELT 1985)

A fobia agrave sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio constitui uma classe que apresenta

resposta extrema repentina e profunda e que apesar de existir uma variaccedilatildeo consideraacutevel

nas respostas dos catildees (BEERDA SCHILDER VAN HOOFF VRIES 1997) no geral

se manifesta com comportamentos de ansiedade associados com atividades acentuadas

do sistema nervoso simpaacutetico Os comportamentos podem incluir catatonia ou mania

concomitante com diminuiccedilatildeo da sensibilidade ou capacidade de resposta agrave dor ou

estiacutemulos sociais aleacutem de fuga vocalizaccedilatildeo salivaccedilatildeo micccedilatildeo defecaccedilatildeo tremores

comportamentos autodestrutivos e ateacute convulsotildees (OVERALL 2010 SHULL-

SELCER amp STAGG 1991)

Jaacute se sabe que existe um fator hereditaacuterio para esse tipo de fobia e embora os

mecanismos pelos quais ela ocorre ainda natildeo sejam compreendidos parece estar em

alguma alteraccedilatildeo na forma como a informaccedilatildeo eacute processada entre a amiacutegdala e o coacutertex

(OVERALL 2010)

E como ansiedade medos e fobias satildeo queixas comportamentais comuns e

problemaacuteticas dos donos de catildees a falta de tratamento pode resultar no rompimento do

viacutenculo humano-animal e posterior abandono desistecircncia ou ateacute mesmo eutanaacutesia do

catildeo afetado (MILLS etal 2003)

22

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental

Os procedimentos experimentais foram realizados na Estaccedilatildeo experimental de

Parasitologia Veterinaacuteria do Departamento de Parasitologia Animal (DPA) da

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) e no Laboratoacuterio de Fisiologia

Animal do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas (DCF) da UFRRJ Todos os

procedimentos estatildeo de acordo com a lei de bem-estar animal Instruccedilatildeo Normativa ndeg

56 de 2008 O presente experimento encontra-se aprovado pelo Comitecirc de Eacutetica na

Pesquisa da UFRRJ CEUA-IB nordm 2308347962014-14

32 Animais

Foram entrevistados 35 proprietaacuterios de catildees entre os quais foram selecionados

28 com 2 a 6 anos de idade pesando de 10 a 30 Kg doacuteceis saudaacuteveis com vacinas e

vermifugaccedilatildeo em dia do muniacutecipio de Seropeacutedica-RJ

Proprietaacuterios de animais com medo de sons de trovatildeo e fogos de artificio

interessados em participar do estudo e proprietaacuterios de animais sem medo convidados a

participar do estudo incialmente responderam a um formulaacuterio de cadastro dos

animais contendo dados gerais e histoacuterico de respostas comportamentais em geral

(Anexo 1) Em seguida os animais foram submetidos a um exame cliacutenico baacutesico que

constitiu em inspeccedilatildeo palpaccedilatildeo auscultaccedilatildeo e termometria retal e um exame

neuroloacutegico para descartar doenccedilas concomitantes (Anexo 2) Foram dispensados

animais arredios agressivos com peso ou idade fora da faixa estabelecida no criteacuterio de

seleccedilatildeo e animais doentes Os animais selecionados foram caracterizados como foacutebicos

e natildeo-foacutebicos a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio e entatildeo submetidos uma uacutenica vez ao

modelo de estresse sonoro A caracterizaccedilatildeo de animais foacutebicos foi realizada conforme

as respostas dos proprietaacuterios ao questionaacuterio de reaccedilotildees comportamentais aos sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009 CROWELL-

DAVIS 2003) (Anexo 3)

23

Meios de divulgaccedilatildeo do estudo atraveacutes de folder e cartazes de divulgaccedilatildeo do projeto

veiculado pela internet e afixado em diversos estabelecimentos veterinaacuterios no

municiacutepio e pela UFRRJ (Anexo 4)

Avaliaccedilatildeo comportamental atraveacutes de entrevista com o proprietaacuterio (questionaacuterio

adaptado de OVERALL 1997) (Anexo 1)

321 Consideraccedilotildees eacuteticas

A participaccedilatildeo no estudo ocorreu somente com a autorizaccedilatildeo dos entrevistados

mediante um termo de consentimento em que se garantia plena liberdade para

interromper a participaccedilatildeo quando desejado (Anexo 5) Natildeo houve riscos agrave sauacutede fiacutesica

ou mental dos animais que participaram do projeto

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som

Os catildees foram selecionados para compor os grupos conforme as respostas ao

questionaacuterio comportamental previamente preenchido pelo proprietaacuterio

O questionaacuterio especiacutefico para medo de sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio

(Anexo 3) eacute composto de alguns paracircmetros comportamentais comuns em catildees foacutebicos

como atitude destrutiva eliminaccedilatildeo inadequada salivaccedilatildeo excessiva vocalizaccedilatildeo

esconder passadas arfar procurar pelo proprietaacuterio auto-trauma tremor Esses

parametros foram ainda classificados em escala de 0 (comportamento nunca observado)

a 5 (comportamento frequente e grave) (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009

CROWELL-DAVIS 2003)

Os catildees foram considerados aptos a participarem do grupo Foacutebicotrovatildeo e

Foacutebicosfogos quando

Apresentaram pelo menos trecircs dos comportamentos anteriores durante

o som de trovatildeo ou fogos de artifiacutecio com escore igual ou maior que 3

ou algum item com escore maacuteximo (5)

Ou as atitudes do animal no momento do som apresentaram risco a sauacutede

e integridade fiacutesica

E quando as respostas comportamentais foram apresentadas na maior

parte do tempo durante o estiacutemulo

24

33 Procedimentos Experimentais

O protocolo experimental foi realizado individualmente iniciando-se sempre agraves

9 horas da manhatilde Um pesquisador acompanhado de um pesquisador colaborador

realizou todo o protocolo experimental sem se ausentar em nenhuma etapa do

experimento

Dias antes do experimento os animais foram submetidos a um exame cliacutenico e

os proprietaacuterios responderam a questionaacuterios (Anexo 1 e 3) referentes ao manejo e

comportamento do animal

A partir dos dados dos questionaacuterios os animais foram classificados conforme

as respostas dadas referente ao medo de trovatildeo e fogos de artiacutefiacutecio entre animais com

histoacuterico comportamental de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Foacutebicos) e

animais historicamente natildeo foacutebicos a esses sons (Natildeo-foacutebicos)

No dia do experimento cada animal foi submetido a inserccedilatildeo de um cateacuteter de

silicone endovenoso para coleta de sangue ainda em sua moradia (amostra 1 casa) e a

colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro (Polar Pro Trainer RS800CX) Os animais permaneceram

com o frequenciacutemetro durante todo o protocolo experimental

Apoacutes a colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro os animais permaneceram no mesmo local

por 10 minutos para adaptaccedilatildeo ao frequeciacutemetro e registro dos dados de VIC do

momento basal 1 (casa) Em seguida cada animal foi transportado para o laboratoacuterio

onde foi executado o modelo de estresse sonoro agudo O transporte foi realizado

acondicionando o animal numa caixa de transporte num carro de passeio com

ventilaccedilatildeo adequada

Apoacutes a chegada ao local do experimento os animais permaneceram na sala sem

manipulaccedilatildeo e sem interaccedilatildeo por parte dos pesquisadores por 30 minutos para registro

dos dados de VIC do momento basal 2 (laboratoacuterio) Em seguida foi coletada a

segunda amostra de sangue (amostra 2 laboratoacuterio)

O estiacutemulo sonoro consistiu numa gravaccedilatildeo de sons de trovatildeo e outra de sons de

fogos de artifiacutecio numa intensidade sonora maacutexima de 103-104 dB e duraccedilatildeo de 2

minutos e 30 segundos (MACCARIELLO 2012)

Durante e apoacutes o fim do estiacutemulo sonoro cada animal permaneceu sem qualquer

manipulaccedilatildeo A terceira coleta de sangue foi realizada 5 minutos apoacutes o teacutermino do

estresse (amostra 3) a quarta aos 15 minutos (amostra 4) a quinta aos 30 minutos

(amostra 5) e a sexta coleta aos 60 minutos apoacutes o teacutermino do estresse (amostra 6)

25

A filmagem foi realizada durante todo o experimento para registrar as reaccedilotildees

comportamentais

Apoacutes a uacuteltima coleta o polar foi retirado e o animal levado de volta para sua

casa no mesmo transporte e nas mesmas condiccedilotildees em que veio

Figura 5 Esquema do protocolo experimental

331 Estiacutemulo Sonoro

Os estiacutemulos sonoros consistiram de uma gravaccedilatildeo com duraccedilatildeo de 2 minutos e

30 segundos de sons de trovatildeo mixados alternadamente a partir de dois arquivos

sonoros no formato wave (ldquovery loud thunder close thunder crackrdquo e ldquohigh quality

stereo sound of a major thunder clap during a stormrdquo) e outra gravaccedilatildeo de sons de

fogos de artifiacutecio mixado de um arquivo sonoro no formato wave (ldquocontinuous

fireworkrdquo) adquiridos no endereccedilo eletrocircnico httpwwwsound-effectcom

O formato utilizado possui a vantagem de ser uma gravaccedilatildeo que preserva todas

as variaccedilotildees de frequecircncia do som original A intensidade do som foi padronizada

atraveacutes de um decibeliacutemetro modelo BK Precision 732A Sound Level Meters a 103-

104 dB por ser uma pressatildeo sonora capaz de aumentar as concentraccedilotildees de cortisol

seacuterico em catildees estando abaixo dos limites que possam causar danos ao aparelho

auditivo (ISING et al 1999)

O estiacutemulo sonoro foi emitido por um aparelho de som (Pioneer home theater

DVD 120w RMS) com 5 caixas de som acopladas Cada animal foi posicionado a um

metro das caixas de som Para observaccedilatildeo das reaccedilotildees comportamentais cada animal foi

contido apenas por uma guia solta de 15 m podendo reagir e se locomover

naturalmente sem intervenccedilotildees

x

Figura 17 Oito dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 49

Figura 18 Seis dos paracircmetros comportamentais induzidos pelo som em catildees de companhia

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo 50

Figura 19 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e os paracircmetros comportamentais segundo os proprietaacuterios 53

Figura 20 Correlaccedilatildeo entre os paracircmetros comportamentais induzidos pelo som no laboratoacuterio

e a razatildeo LFHF 54

xi

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS

AC Adenilatociclase

ACh Acetilcolina

ACTH Hormocircnio adrenocorticotroacutefico

AVP Vasopressina

CCP Corpos Celulares Preacute-ganglionares

CEUA Comissatildeo de Eacutetica no Uso de Animais

CRH Hormocircnio liberador de corticotropina

dB decibeacuteis

DCF Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas

DPA Departamento de Parasitologia Animal

FC Frequecircncia Cardiacuteaca

FFT Transformada Raacutepida de Fourier

GR Receptor de Glicocorticoacuteides

HF Frequecircncia alta

HHA Eixo Hipotaacutelamo Hipoacutefise Adrenal

IRR Intervalos RR

LC Locus Coeruleus

LF Frequecircncia baixa

MR Receptor de Mineralocorticoacuteide

NAV Nodo Atrioventricular

NA Noradrenalina

NS Nodo Sinoatrial

PKA Proteiacutena quinase dependente de AMPc

PVN Nuacutecleo Paraventricular do Hipotaacutelamo

RMSSD raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado

SAM Sistema Simpato-adreno-medular

SNA Sistema Nervoso Autocircnomo

SNC Sistema Nervoso Central

SNP Sistema Nervoso Parassimpaacutetico

SNS Sistema Nervoso Simpaacutetico

xii

SRD Sem raccedila definida

STDRR Desvio padratildeo de todos os intervalos RR do segmento

UFRRJ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

VIC Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco

xiii

SUMAacuteRIO

DEDICATOacuteRIA v

AGRADECIMENTOS vi

RESUMO vii

LISTA DE TABELAS E FIGURAS ix

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS xi

1 INTRODUCcedilAtildeO 1

11 Justificativa 3

12 Objetivos 4

121 Geral 4

122 Especiacuteficos 4

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 5

21 Estresse 5

22 Fisiologia do estresse 6

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse 10

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca 10

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) 12

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees 14

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees 16

26 Fobia em catildees 18

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS 22

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental 22

32 Animais 22

321 Consideraccedilotildees eacuteticas 23

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som 23

33 Procedimentos Experimentais 24

xiv

331 Estiacutemulo Sonoro 25

34 Grupos experimentais 26

35 Coletas de sangue 26

36 Uso do Frequenciacutemetro 27

37 Anaacutelise Espectral da VIC 27

38 Anaacutelise Comportamental 30

39 Anaacutelise Estatiacutestica 31

4 RESULTADOS 33

41 Perfil dos proprietaacuterios e caracteriacutesticas gerais dos animais 33

42 Anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco 41

43 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 46

44 Correlaccedilotildees entre os dados 51

5 DISCUSSAtildeO 55

51 Perfil dos proprietaacuterios e manejo dos animais 55

52 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e o estresse sonoro agudo 59

53 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 61

54 Correlaccedilotildees entre dados 62

55 O Modelo de Estresse Sonoro Agudo em Catildees 63

6 CONCLUSOtildeES 65

7 REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 67

8 ANEXOS 77

ANEXO 1 Ficha geral de cadastro 77

ANEXO 2 Ficha Neuroloacutegica 81

ANEXO 3 Ficha de avaliaccedilatildeo de Fobia 83

ANEXO 4 Folder de divulgaccedilatildeo 85

ANEXO 5 Termo de Consentimento 86

xv

ANEXO 6 Ficha de Protocolo Experimental 88

1

1 INTRODUCcedilAtildeO

Situaccedilotildees de estresse e medo fazem parte da vida de todos os animais e as

reaccedilotildees fisioloacutegicas provocadas por elas satildeo essenciais para sobrevivecircncia no meio

selvagem mas tambeacutem na vida urbana para aqueles animais que foram domesticados

acompanhando o homem em sua caminhada de vida em sociedade

A espeacutecie canina foi a que mais se envolveu com o homem tornando-se um

animal domeacutestico e dependente de cuidados sendo alvo de problemas sociais

ambientais e de sauacutede puacuteblica quando abandonados ou em vida livre pelas cidades e

comunidades

Essa relaccedilatildeo criada ao longo dos tempos entre os catildees e o homem trouxe para

os dias atuais um viacutenculo afetivo de ambas as espeacutecies modificando e ateacute selecionando

atraveacutes das raccedilas o comportamento canino acentuando caracteriacutesticas que podem estar

influenciando a forma dos catildees de lidar com as situaccedilotildees de estresse e medo no

cotidiano

A fisiologia do comportamento regula-se baseada nos estiacutemulos externos aos

quais o animal estaacute sujeito conforme suas necessidades de sobrevivecircncia e ateacute de bem

estar Dessa forma o estresse vem a ser responsaacutevel por modelar o comportamento de

um indiviacuteduo conforme seu modo de vida e sua exposiccedilatildeo a esses estiacutemulos

O estresse como mecanismo de adaptaccedilatildeo a situaccedilotildees adversas eacute extremamente

importante na manutenccedilatildeo da vida pois sem esse mecanismo qualquer situaccedilatildeo

desfavoraacutevel poderia causar morte imediata sendo a capacidade de responder

rapidamente a uma situaccedilatildeo de perigo uma importante caracteriacutestica da evoluccedilatildeo dos

seres

Mais especificamente em situaccedilotildees de estresse o organismo de um indiviacuteduo

redistribui sua energia e o sistema locomotor e sensorial satildeo priorizados em detrimento

de outros (reprodutivo digestivo e imune) fazendo assim com que a resposta

momentacircnea seja eficiente O problema comeccedila quando haacute a persistecircncia destas

situaccedilotildees e ou dessas respostas causando prejuiacutezo aos sistemas deprimidos

A influecircncia dos estiacutemulos sonoros tem demonstrado importacircncia cliacutenica na

espeacutecie canina jaacute que leva diversos indiviacuteduos a sofrerem alteraccedilotildees comportamentais e

2

neuroendoacutecrinas que podem evoluir para graves distuacuterbios comportamentais e

fisioloacutegicos como a fobia Em alguns casos de estresse crocircnico severo podem ocorrer

danos neurais doenccedilas gastrointestinais aleacutem da diminuiccedilatildeo da resposta imune

A fobia eacute descrita como um medo acentuado irracional persistente e excessivo

claramente discerniacutevel de objetos seres lugares ou situaccedilotildees de forma desproporcional

e exagerada acompanhada de comportamento de fuga esquiva antecipaccedilatildeo e intenso

sofrimento que geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase

fisioloacutegica mas que leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas

ao medo coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o

eixo Hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HPA) na liberaccedilatildeo de glicocorticoides e o sistema

nervoso simpaacutetico

Na fobia os limiares de ativaccedilatildeo dos circuitos neurais de medo estatildeo reduzidos

podendo ser observado no indiviacuteduo clara hiperexcitabilidade hipervigilacircncia e

aumento da responsividade comportamental aos estiacutemulos Idealmente os graus de

ativaccedilotildees seriam proporcionais agrave ameaccedila e uma adaptaccedilatildeo agrave situaccedilatildeo normalizaria a

resposta de estresse diminuindo-a conforme a ameaccedila desaparecesse o que natildeo ocorre

na fobia

Os criteacuterios para o diagnoacutestico de fobia em humanos costumam usar termos

que se referem a sintomas emocionais envolvendo sentimentos e estados de consciecircncia

subjetivos o que difiacuteculta a abordagem cientifica e cliacutenica nos animais Poreacutem as

alteraccedilotildees dos paracircmetros comportamentais e fisioloacutegicos dos sistemas

neuroendoacutecrinos envolvidos nesses distuacuterbios satildeo um caminho de estudo e pesquisa

Dessa forma os niacuteveis de estresse podem ser avaliados atraveacutes da mensuraccedilatildeo

de paracircmetros fisioloacutegicos e comportamentais Em vaacuterias espeacutecies o paracircmetro mais

utilizado eacute a dosagem de cortisol Aleacutem desse a anaacutelise da variabilidade do intervalo

cardiacuteaco (VIC) vem se mostrando um paracircmetro importante e natildeo invasivo para avaliar

o balanccedilo simpato-vagal em indiviacuteduos submetidos a estiacutemulos potencialmente

desafiadores As alteraccedilotildees comportamentais analisadas em conjunto com as anaacutelises

citadas a cima formam uma importante fonte de dados ainda natildeo correlacionadas nos

estudos mais recentes

Contudo o presente estudo teve como objetivo avaliar as respostas autonocircmicas

e comportamentais induzidas pelo estresse sonoro agudo em catildees de companhia com

3

histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O modelo de estresse utilizado

consiste em um meacutetodo natildeo invasivo e seguro uma vez que cada animal foi submetido

a um estiacutemulo sonoro (sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio) de curta duraccedilatildeo (25 min) a

uma intensidade sonora maacutexima de 1039 dB natildeo sendo capaz de causar efeitos

deleteacuterios para a audiccedilatildeo dos animais

Para tal foram utilizados 28 catildees de diversas raccedilas dos quais 16 eram

historicamente foacutebicos a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e 12 natildeo apresentavam

qualquer sinal de medo a esses sons Os animais foram dividos ainda entre submetidos

ao som de trovatildeo e submetidos ao som de fogos de artifiacutecio

Foram avaliados o balanccedilo simpato-vagal atraveacutes da mensuraccedilatildeo da VIC e 14

paracircmetros comportamentais aleacutem da coleta de amostras sanguiacuteneas em 6 momentos

para posterior anaacutelise dos niacuteveis seacutericos de cortisol

11 Justificativa

Animais e humanos satildeo constantemente submetidos a situaccedilotildees de estresse no

seu cotidiano Em catildees vaacuterios estiacutemulos podem ser considerados geradores de estresse

e sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio tecircm se mostrado estiacutemulos estressores importantes

devido agrave frequente ocorrecircncia de fobia a esses sons nesta espeacutecie

O tema escolhido eacute de grande importacircncia na atualidade uma vez que satildeo

necessaacuterias mais pesquisas sobre o efeito do estresse em humanos e animais Neste

sentido a avaliaccedilatildeo dos paracircmetros fisioloacutegicos em situaccedilotildees de estresse eacute uma forma

de estudar e compreender melhor os distuacuterbios relacionados ao estresse e traccedilar novos

caminhos terapecircuticos

Eacute relevante para a Medicina Veterinaacuteria e para a aacuterea de sauacutede como um todo

pois modelos de estresse sonoro agudo podem ser uacuteteis na verificaccedilatildeo da reatividade ao

estresse aleacutem de serem pouco invasivos e de relativa faacutecil execuccedilatildeo

4

12 Objetivos

121 Geral

Verificar as respostas fisioloacutegicas ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

122 Especiacuteficos

Avaliar o perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios as caracteriacutesticas gerais e

comportamentais e o manejo dos animais em catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

Avaliar a resposta autonocircmica a partir da anaacutelise espectral da variabilidade do

intervalo cardiacuteaco de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos

de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar a resposta comportamental de catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre o comportamento dos animais relatado pelos

proprietaacuterios durante a ocorrecircncia natural de trovotildees ou fogos e os comportamentos

exibidos pelos catildees em resposta ao modelo de estresse sonoro em laboratoacuterio

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre paracircmetros autonocircmicos e comportamentais em

catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

5

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

21 Estresse

O fisiologista Claude Bernard em 1872 definiu o conceito de meio interno pela

primeira vez como um princiacutepio do equiliacutebrio dinacircmico do meio interno essencial para

a sobrevivecircncia (FRANCI 2005)

Apesar disso foi Walter Canon em 1929 o responsaacutevel por definir esse

conceito da condiccedilatildeo de equiliacutebrio do meio interno criado por Claude Bernard com o

termo homeostase Aleacutem de ter reconhecidoos agentes desafiadores da homeostase

como fiacutesicos e emocionais e elaborado o conceito de ldquoreaccedilatildeo de emergecircnciardquo que

ocorre quando haacute um desafio capaz de ativar a liberaccedilatildeo de noradrenalina de terminais

nervosos simpaacuteticos e adrenalina da medula da adrenal (FRANCI 2005)

E mais recentemente entre 1946 e 1976 o fisiologista canadense Hans Selye

definiu ldquoa situaccedilatildeo gerada pelo desafio ao qual um organismo estaria submetidordquo com o

termo estresse E ao ocorrerem controveacutersias conceituais uma vez que natildeo se podia

distinguir a causa do efeito ele criou o termo estressor para designar o agente causador

(estiacutemulo) e manteve o termo estresse para designar a condiccedilatildeo gerada pelo estiacutemulo

desafiador (FRANCI 2005)

A resposta a um estiacutemulo estressor eacute fundamental para a homeostase de um ser

vivo e sua sobrevivecircncia Nas condiccedilotildees de estresse o organismo reage por meio da

ativaccedilatildeo e desativaccedilatildeo do mecanismo de controle de vaacuterias funccedilotildees para recuperar e

manter a homeostase No entanto essas respostas podem ser insuficientes para

restabelecer ou manter a homeostase ou podem ser exageradas representando risco de

doenccedilas Portanto o estresse pode ser definido como a soma de respostas fiacutesicas e

mentais causadas por determinados estiacutemulos externos e que permitem ao indiviacuteduo

superar determinadas exigecircncias do meio-ambiente (FRANCI 2005)

A reaccedilatildeo de estresse maximiza o gasto de energia que ajuda a preparar o corpo

para atender a uma situaccedilatildeo ameaccediladora ou desafiadora em que o indiviacuteduo tende a

mobilizar um grande esforccedilo a fim de lidar com o evento No entanto enquanto uma

certa quantidade de estresse eacute necessaacuteria para a sobrevivecircncia o estresse prolongado

pode afetar adversamente a sauacutede (BERNARD amp KRUPAT 1994)

6

Em situaccedilotildees de estresse ocorre a ativaccedilatildeo de duas principais vias o eixo

hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) atraveacutes do aumento da produccedilatildeo de cortisol e o

sistema nervoso simpaacutetico atraveacutes da liberaccedilatildeo de catecolaminas (Noradrenalina

Adrenalina)

A desregulaccedilatildeo de qualquer um desses sistemas de estresse pode levar a

distuacuterbios fisioloacutegicos de vaacuterios outros sistemas incluindo os sistemas imunoloacutegico

cardiovascular funccedilatildeo metaboacutelica e comportamento levando a maacute adaptaccedilatildeo da

resposta ao estresse (MARQUES et al 2010)

22 Fisiologia do estresse

Os estiacutemulos estressores podem ser definidos como aqueles que desafiam a

homeostase Esses estiacutemulos geram respostas que variam de acordo com a duraccedilatildeo e

intensidade e ainda com a predisposiccedilatildeo geneacutetica e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo

Os estiacutemulos causadores de estresse podem ser classificados em quatro grupos

estressores fiacutesicos e quiacutemicos (calor frio barulho radiaccedilatildeo intensa e substacircncias

toacutexicas) psicoloacutegicos (medo e frustraccedilatildeo) sociais (um ambiente hostil e rompimento de

relaccedilotildees) e os que alteram a homeostase vegetativa como em casos de exerciacutecio intenso

e hemorragias Quanto agrave duraccedilatildeo os estiacutemulos causadores de estresse podem ser ainda

classificados como agudos ou crocircnicos (PACAacuteK amp PALKOVITS 2001)

Moberg (2000) propotildee um modelo para compreensatildeo do estresse em toda

espeacutecie animal que sugere uma resposta bioloacutegica ao estresse a partir de trecircs estaacutegios

gerais

1ordm O reconhecimento de um estiacutemulo estressante

2deg A defesa bioloacutegica contra o estiacutemulo estressante

3deg As consequecircncias da resposta de estresse

Esta resposta ao estressor iraacute abranger aspectos cognitivos comportamentais e

fisioloacutegicos (MARGIS et al 2003)

Em uma situaccedilatildeo de estresse satildeo ativados o sistema simpato-adrenomedular

gerando o aumento da secreccedilatildeo de catecolaminas e logo excitaccedilatildeo raacutepida do sistema

cardiovascular ocasionando um aumento da frequecircncia cardiacuteaca e da pressatildeo arterial E

7

o outro eixo ativado eacute o hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) levando ao aumento na

produccedilatildeo de cortisol e naturalmente mobilizaccedilatildeo de energia (ULRICH-LAI amp

HERMAN 2009) (Figura 1)

As respostas de emergecircncia ativadas pelo SAM ocorrem quando o organismo se

prepara para a defesa ou ataque excretando adrenalina Entatildeoo suprimento de sangue eacute

desviado para os muacutesculos havendo elevaccedilatildeo do deacutebito cardiacuteaco total e da

redistribuiccedilatildeo sanguiacutenea aumentando a oferta de nutrientes e oxigecircnio para as estruturas

vitais A pressatildeo arterial se eleva e os bronquiolos se dilatam tornando a respiraccedilatildeo

mais raacutepida e profunda para retirada do dioacutexido de carbono excedente As funccedilotildees

digestivas e secretoacuterias diminuem aleacutem da reaccedilatildeo de aliacutevio com a liberaccedilatildeo de qualquer

excesso da bexiga e intestino A taxa metaboacutelica aumenta e a liberaccedilatildeo de endorfinas

diminue a sensibilidade agrave dor e os sentidos satildeo mantidos em estado de alerta

(ROGERSON 1997)

8

Figura 1 Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA A ativaccedilatildeo do sistema simpato-adrenomedular

(SAM) e do eixo do hipotaacutelamo hipoacutefise adrenal (HHA) como sistemas primaacuterios para a

manutenccedilatildeo e restabelecimento da homeostase A exposiccedilatildeo ao estressor resulta em ativaccedilatildeo de

neurocircnios preacute-ganglionares simpaacuteticos na coluna intermediolateral da medula espinhal

toracolombar (T1 a L2) Estes neurocircnios preacute-ganglionares se projetam para gacircnglios preacute e para

vertebrais que entatildeo terminam em oacutergatildeos alvo e nas ceacutelulas cromafins da medula da adrenal

Esta ativaccedilatildeo simpaacutetica (em ciacuterculos) representa a resposta claacutessica de luta e fuga que foi

primariamente caracterizada por Walter Cannon e colaboradores no iniacutecio do seacuteculo passado e

leva a um aumento dos niacuteveis de adrenalina (proveniente da adrenal) e de noradrenalina dos

terminais simpaacuteticos aumento da frequecircncia e da forccedila de contraccedilatildeo do coraccedilatildeo vasoconstriccedilatildeo

perifeacuterica e mobilizaccedilatildeo de energia O tocircnus parassimpaacutetico tambeacutem eacute mobilizado durante o

estresse No sistema parassimpaacutetico (em estrelas) representa a ativaccedilatildeo de nuacutecleos preacute-

ganglionares cracircnios-sacrais ativam nuacutecleos poacutes-ganglionares localizados proacuteximos aos oacutergatildeos

inervados com efeito geralmente oposto ao sistema simpaacutetico Para o eixo HHA a exposiccedilatildeo ao

estressor ativa neurocircnios hipofisiotroacuteficos no nuacutecleo paraventricular do hipotaacutelamo (PVN) que

secretam hormocircnios de liberaccedilatildeo como hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH) e

vasopressina (AVP) na circulaccedilatildeo porta da eminecircncia meacutedia Estes hormocircnios liberadores atuam

na hipoacutefise anterior para promover a secreccedilatildeo de hormocircnio adrenocorticotroacutefico (ACTH) que

atua no coacutertex da adrenal (zona fasciculata) para iniciar a siacutentese e liberaccedilatildeo dos hormocircnios

glicocorticoacuteides Os glicocorticoacuteides circulantes promovem a mobilizaccedilatildeo de energia estocada e

potencializam numerosos efeitos simpaacuteticos como a vasoconstriccedilatildeo perifeacuterica Aleacutem disso o

coacutertex da adrenal eacute diretamente inervado pelo sistema simpaacutetico que regula a liberaccedilatildeo de

glicocorticoacuteides Entatildeo a ativaccedilatildeo do sistema simpaacutetico e do eixo HHA tem accedilotildees

complementares no organismo incluindo a mobilizaccedilatildeo de energia e a manutenccedilatildeo da pressatildeo

arterial durante o estresse (Adaptado de ULRICH-LAI amp HERMAN 2009)

CRH

AVP

9

As respostas ao estresse que envolvem emoccedilatildeo passaratildeo por avaliaccedilatildeo afetiva

onde a informaccedilatildeo seraacute processada e interpretada para se estimar o potencial de ameaccedila

Esta avaliaccedilatildeo afetiva iraacute determinar o padratildeo de respostas e o tipo de defesa de acordo

com a histoacuteria pessoal aprendizado e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo que entatildeo faraacute

a avaliaccedilatildeo da capacidade para lidar com a situaccedilatildeo e organizaccedilatildeo da resposta

(MARGIS et al 2003)

A intensidade da resposta eacute que determina se o animal estaacute sofrendo de estresse

ou eacute meramente experimentado um episoacutedio breve em sua vida sem nenhum impacto

significativo ao seu bem-estar

Circuitos neurais espinais e supra espinais estatildeo envolvidos nas respostas de

estresse Os supra espinais processam as informaccedilotildees vindas das vias somatossensoriais

e viscerossensoriais e elaboram as respostas atraveacutes do taacutelamo hipotaacutelamo aacuterea preacute-

optica estruturas liacutembicas e sistemas amineacutergicos e natildeo amineacutergicos do tronco cerebral

Os neurocircnios do PVN secretores de hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH)

e vasopressina com os neurocircnios catecolamineacutergicos do locus coeruleus (LC) (o nuacutecleo

com maior densidade de neurocircnios noradreneacutergicos com papel fundamental no

desencadeamento da resposta ao estresse e reaccedilotildees de fuga) inervam o hipocampo a

amiacutegdala e o neocortex aleacutem de nuacutecleos do rafe (5-HT) e grupamentos celulares da

medula e ponte compondo assim um dos principais reguladores centrais de resposta ao

estresse na ativaccedilatildeo do eixo HHA e SNS (FRANCI 2005)

O eixo HHA eacute ativado por diferentes categorias de estresse como traumaacutetico

inflamatoacuterio e psicoloacutegico E o estresse psicoloacutegico tem regulaccedilatildeo por estruturas

liacutembicas que exercem atividade modulatoacuteria sobre o eixo (ULRICH-LAI amp HERMAN

2009)

O PVN monitora sinais relacionados com o estado emocional atraveacutes de sinais

metaboacutelicos como a composiccedilatildeo plasmaacutetica O CRH o principal neurotransmissor

coordenador das alteraccedilotildees psicoloacutegicas e comportamentais relacionadas ao estresse eacute

sintetizado no PVN e liberado nos capilares da eminecircncia meacutedia juntamente com a

vasopressina (AVP) e alcanccedilam diretamente a hipoacutefise anterior via circulaccedilatildeo portal

hipotalacircmica-hipofisaacuteria que por sua vez estimula na hipoacutefise a liberaccedilatildeo do hormocircnio

adrenocorticotroacutefico (ACTH) (MORMEgraveDE et al 2006)

10

O ACTH eacute sintetizado por ceacutelulas especializadas da hipoacutefise anterior vai para a

corrente sanguiacutenea e estimula o coacutertex da glacircndula adrenal (na zona fasciculada) que

sintetiza o glicocorticoide atraveacutes de esteroides derivados do colesterol O cortisol eacute o

glicocorticoacuteide ativo do eixo para catildees gatos e humanos e a corticosterona para

paacutessaros e roedores (MORMEgraveDE et al 2006)

Esse hormocircnio final do eixo HHA interage com as ceacutelulas atraveacutes da ligaccedilatildeo a

dois receptores o receptor glicocorticoide (GR) e o receptor de mineralocorticoide

(MR) O receptor GR eacute encontrado na maioria dos tecidos do corpo incluindo a maioria

das aacutereas do enceacutefalo No rim e em outros tecidos a aldosterona liga-se ao MR durante a

regulaccedilatildeo da reabsorccedilatildeo de soacutedio mas o MR tambeacutem estaacute presente no hipocampo onde

ocorre a ligaccedilatildeo do cortisol Estes complexos esteroacuteide-receptores entatildeo interagem

com o DNA para iniciar ou para reprimir a transcriccedilatildeo de genes especiacuteficos a fim de

regular a siacutentese de proteiacutenas que provoca alteraccedilotildees fisioloacutegicas em resposta ao

estresse

O cortisol tem 10 vezes mais afinidade ao MR que ao GR Em niacuteveis baixos ou

em situaccedilotildees de ausecircncia de estresse a maior parte do cortisol liga-se aos MRs no

ceacuterebro (principalmente no hipocampo) e modula a atividade basal do eixo HHA e o

aparecimento de resposta ao estresse Com a elevaccedilatildeo dos niacuteveis de cortisol ocorre um

aumento de ligaccedilotildees nos receptores GR reduzindo a atividade do eixo HHA

(mecanismo de ldquofeed-backrdquo negativo) No entanto a ativaccedilatildeo crocircnica deste receptor

estaacute ligada a vaacuterios distuacuterbios cognitivos relativos ao estresse (DE KLOET et al 1999)

Proteger o organismo de possiacuteveis danos eacute um dos papeis principais das

respostas hormonais a situaccedilotildees de estresse E seus principais hormocircnios satildeo a

adrenalina de secreccedilatildeo raacutepida pelo envolvimento na reaccedilatildeo de luta ou fuga e o

corticosteroacuteides na restauraccedilatildeo e na reparaccedilatildeo dos sistemas agindo na segunda linha de

defesa regulando as respostas inflamatoacuteria e imune (MC EWEN 2000)

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca

11

O Nodo Sinoatrial (NS) apresenta a frequecircncia de disparo mais intensa no

coraccedilatildeo estimulando outros locais como os nodos atrioventriculares que principiam

seus proacuteprios impulsos eleacutetricos E com a ausecircncia de influecircncias hormonais ou neurais

a frequecircncia cardiacuteaca (FC) permanece equivalente agrave frequecircncia de disparos do NS ou

seja constante (STAUSS 2007)

Os sistemas nervoso simpaacutetico (SNS) e parassimpaacutetico (SNP) estatildeo

constantemente ativados regulando a atividade cardiacuteaca com a predominacircncia de um ou

outro conforme a situaccedilatildeo Em repouso a predominacircncia eacute vagal o que em humanos

leva a respostas raacutepidas de no maacuteximo 5 segundo na FC diminuindo-a em poucos

batimentos Jaacute as respostas da ativaccedilatildeo simpaacutetica ocorrem apoacutes cinco segundos

aumentando progressivamente chegando a sua resposta maacutexima de aumento da FC

apoacutes 20 a 30 segundos (HAINSWORTH 1995)

No entanto os sistemas simpaacutetico e parassimpaacutetico atuam de forma simultacircnea

na regulaccedilatildeo da atividade cardiacuteaca onde o aumento da atividade vagal natildeo resulta tatildeo

logo na reduccedilatildeo da atividade simpaacutetica e vice-versa (VON BORELL et al 2007)

Quando o SNS eacute ativado as fibras nervosas promovem a descarga de

noradrenalina (NA) nos aacutetrios e ventriacuteculos que por sua vez juntamente com a

adrenalina liberada pela adrenal estimula os receptores β1 adreneacutergicos presentes no

coraccedilatildeo ativando atraveacutes de uma proteiacutena G excitatoacuteria (Gs) a enzima adenilato ciclase

(AC) agrave produzir AMPc Seu aumento intracelular leva agrave ativaccedilatildeo da proteiacutena quinase

dependente de AMPc aumentando as correntes de canais iocircnicos de Ca+2

e Na+

acelerando a velocidade de despolarizaccedilatildeo levando ao aumento da frequecircncia de

disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas do NA desencadeando o aumento da

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Do mesmo modo o miocaacuterdio atrial o nodo aacutetrio-ventricular e o NS satildeo

inervados pelas fibra nervosa parassimpaacutetica dos nervos vagos liberando acetilcolina

(ACh) ativando receptores M2 que estatildeo acoplados a uma proteiacutena G inibitoacuteria (Gi)

inibindo a siacutentese de AMPc intracelular reduzindo a atividade da PKA Aleacutem de a ACh

ativar uma corrente de efluxo de K+ gerando uma hiperpolarizaccedilatildeo da membrana

levando ao aumento do limiar de ativaccedilatildeo do potencial de accedilatildeo sinusal o que reduz a

12

frequecircncia de disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas sinusais diminuindo por fim a

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Existem diferenccedilas no tempo de resposta da ativaccedilatildeo dos ramos simpaacutetico e

parassimpaacutetico que ocorrem em certo modo pela liberaccedilatildeo lenta de noradrenalina nos

terminais nervosos simpaacuteticos e pelas fibras preacute-ganglionares vagais serem

mielinizadas contribuindo para uma transmissatildeo eleacutetrica mais raacutepida Aleacutem das

diferenccedilas anatocircmicas entre os ramos como eacute o caso dos corpos celulares preacute-

ganglionares do parassimpaacutetico localizados dentro do coraccedilatildeo enquanto que os corpos

celulares preacute-ganglionares simpaacuteticos se localizam no gacircnglio paravertebral (VON

BORELL et al 2007)

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC)

A manutenccedilatildeo da homeostase do sistema cardiovascular eacute resultado da oscilaccedilatildeo

riacutetmica de componentes regulatoacuterios da atividade cardiacuteaca onde se observa intervalos

irregulares de tempo entre os batimentos consecutivos (VON BORELL et al 2007)

A anaacutelise da variabilidade do intervalo cardiacuteaco pode ser realizada atraveacutes dos

iacutendices no domiacutenio do tempo e da frequecircncia

No domiacutenio do tempo cada intervalo entre um batimento cardiacuteaco e outro pode

ser medido em milissegundos e no domiacutenio da frequecircncia as flutuaccedilotildees riacutetmicas podem

caracterizar os estados de repouso e atividade influindo na seacuterie cronoloacutegica contida

entre os intervalos tornando possiacutevel a mensurar a atividade do SNA (HOSHI 2009

SONG et al 2006)

Os dados satildeo obtidos atraveacutes da gravaccedilatildeo dos intervalos entre batimentos

cardiacuteacos feitos por frequenciacutemetros capazes de detectar em milissegundos (ms) o

tempo entre os batimentos e armazenaacute-los (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al

2007)

A teacutecnica utilizada com esse objetivo eacute chamada de anaacutelise espectral e consiste

no uso de algoritmos matemaacuteticos como eacute o caso da transformada raacutepida de fourier

(FFT) para obter diagramas dimensionais Dispondo em um graacutefico os componentes

oscilatoacuterios de frequecircncia da VIC no eixo X e a amplitude dos componentes oscilatoacuterios

no eixo Y permitindo atraveacutes dessa teacutecnica determinar a forccedila espectral das

frequecircncias baixas e altas da VIC

13

Nesse contexto os dois Sendo assim os dois componentes de frequecircncia principais satildeo

divididos atraveacutes da anaacutelise espectral em Frequecircncia baixa (LF) caracterizado pelo

espectro de 004 a 015Hz e Frequecircncia alta (HF) situada na faixa de 015 a 04 Hz na

anaacutelise espectral (KAWASE et al 2002 VON BORELL et al 2007 PICCIRILLO et

al 2009)

Quando os IRR satildeo dispostos em uma escala de tempo um graacutefico eacute

confeccionado e as oscilaccedilotildees formadas representam a accedilatildeo dos diferentes componentes

regulam os pulsos cardiacuteacos onde as frequecircncias mais altas representam a atividade

riacutetmica resultante da ativaccedilatildeo parassimpaacutetica e as mais baixas exibem aquelas

resultantes da atividade simpaacutetica (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al 2007)

(Figura 2)

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC Variabilidade do intervalo cardiacuteaco em um indiviacuteduo

jovem durante o repouso e quando em movimento A seacuterie temporal de intervalos RR estaacute

Repouso Movimento

14

disposta nos graacuteficos do topo Os graacuteficos centrais ilustram a presenccedila de dois componentes

principais da densidade espectral LF e HF Durante o movimento o componente LF se torna

predominante em relaccedilatildeo ao repouso Os graacuteficos na base da figura demonstram a distribuiccedilatildeo

relativa dos dois componentes (representada pela aacuterea) (MALLIANI 1997)

A razatildeo entre os dois componentes de frequecircncia eacute calculada a partir dos valores

obtidos de LF e HF resultando em valor que representa o balanccedilo entre a atividade

simpaacutetica e parassimpaacutetica aleacutem de possibilitar a decomposiccedilatildeo dos componentes

espectrais atraveacutes do caacutelculo das frequecircncias centrais desses componentes que se

situam impliacutecitos no sinal da variabilidade (PAGANI et al 1986 LOMBARDI et

al1996 LOMBARDI 1997 MALLIANI et al 1997 VON BORELL et al 2007

HARADA et al 2005)

A anaacutelise espectral da VIC natildeo acessa o tocircnus autonocircmico cardiacuteaco mas sim o

seu balanccedilo o que justifica a ocorrecircncia de alteraccedilotildees na capacidade do coraccedilatildeo de

responder a esses estiacutemulos quando haacute alteraccedilotildees crocircnicas na atividade autonocircmica

Nesses casos natildeo seria aplicaacutevel a anaacutelise espectral da VIC (STAUSS 2007

PICCIRILLO et al 2009)

Deste modo a anaacutelise espectral da VIC tem como principal utilidade a funccedilatildeo de

indicadora da atividade autonocircmica em resposta ao estresse psicoloacutegico e fiacutesico (VON

BORELL et al 2007) E quando eacute aplicada no estudo das alteraccedilotildees agudas da

atividade autonocircmica cardiacuteaca essa anaacutelise eacute utilizada de maneira a obter dados

fidedignos onde diante de uma resposta ao estresse psicoloacutegico pode ser observado um

aumento agudo na atividade cardiacuteaca simpaacutetica caracterizado pelo aumento do

componente LF com provavelmente baixa ou nenhuma alteraccedilatildeo do componente HF

(STAUSS 2007)

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees

O oacutergatildeo auditivo dentre outras funccedilotildees se caracteriza especialmente por seu

desempenho no reconhecimento de situaccedilotildees ameaccediladoras estando em funcionamento

ininterrupto atraveacutes da conexatildeo direta do ouvido interno com os mecanismos neurais de

ldquoluta ou fugardquo Esse sistema eacute capaz de diferenciar sons de frequecircncias e intensidades

relevantes para a sobrevivecircncia do indiviacuteduo em seu meio ambiente (WESTMAN amp

WALTERS 1981)

15

A percepccedilatildeo do som colabora no balanccedilo homeostaacutetico do sistema nervoso

central influenciando consequentemente o equiliacutebrio fisioloacutegico de forma geral atraveacutes

dos centros autonocircmicos e neuroendoacutecrinos do hipotaacutelamo variando em resposta

conforme o significado do estiacutemulo sonoro e sua intensidade previsibilidade

variabilidade e complexidade

Nesse contexto as respostas fundamentais ao som satildeo de orientaccedilatildeo reflexo de

surpresa e de defesa Sendo a resposta de orientaccedilatildeo fundamental por ser a reaccedilatildeo

comportamental de busca pela fonte sonora permitindo que o indiviacuteduo se prepare para

a resposta necessaacuteria e caso o reconhecimento do som mostre ser esse de baixa

significacircncia a habituaccedilatildeo iraacute ocorrer diminuindo o grau da reaccedilatildeo

Jaacute o reflexo de surpresa iraacute ocorrer em resposta a sons repentinos de alta

intensidade e caraacuteter assustador podendo ser atenuado quando o indiviacuteduo sabe que ele

iraacute ocorrer e podendo ser exacerbado em situaccedilotildees de tensatildeo medo e de abalo

emocional

E a resposta de defesa acontece em resposta a sons de significado intensidade e

duraccedilatildeo relacionados agrave ameaccedila onde haacute excitaccedilatildeo emocional e preparaccedilatildeo dos sistemas

para a accedilatildeo consistindo na resposta de estresse (WESTMAN amp WALTERS 1981)

Alguns sons adquirem significado particular para o indiviacuteduo representando

perigo em potencial assim como os sons de caracteriacutesticas ameaccediladoras Mas

geralmente o significado conotativo de um som potencialmente ameaccedilador estaacute no fato

de ser desconhecido e apresentar mudanccedilas raacutepidas de intensidade aleacutem das associaccedilotildees

extra-auditivas relacionadas a ele Aleacutem disso a previsibilidade desse estiacutemulo sonoro

tambeacutem poderaacute constituir um fator determinante na resposta jaacute que sons imprevisiacuteveis

caracterizam-se como um estiacutemulo estressor maior desencadeando uma reduccedilatildeo geral

de performance e uma baixa toleracircncia a frustraccedilotildees (WESTMAN amp WALTERS

1981)

Os catildees particularmente apresentam muita sensibilidade a estiacutemulos sonoros

visto que seu sistema auditivo eacute extremamente desenvolvido especialmente com a

funccedilatildeo de caccedila e guarda Poreacutem a resposta de defesa exagerada dos indiviacuteduos dessa

espeacutecie tem sido relatada principalmente aos sons de fogos de artifiacutecio trovatildeo e tiro de

16

armas de fogo Provavelmente o caraacuteter imprevisiacutevel a conotaccedilatildeo negativa que a

espeacutecie apresenta a esses sons e a intensidade proacutexima ao limiar de audiccedilatildeo possa

justificar tal reaccedilatildeo (HYDBRING et al 2004)

E eacute com base nessa reaccedilatildeo desmedida que os estiacutemulos sonoros como os sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio vecircm sendo utilizados como modelos de estresse em catildees

(HYDBRING et al 2004 ENGELAND et al 1990) Representando uma opccedilatildeo para o

estudo da reatividade ao estresse que pode ser comparada ao modelo de estresse

acuacutestico de sobressalto em ratos

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees

Ao iniciar um estudo a respeito de uma espeacutecie deve-se ter em mente que cada

sujeito analisado natildeo eacute um sistema inerte e fechado mas sim um somatoacuterio de eventos

que possibilitam ter um exame mais amplo e completo das interaccedilotildees do animal com o

ambiente (SULTAN 2003 BATESON et al 2004)

Assim o estudo comportamental se mostra uma importante ferramenta pois

permite entender que processos bioloacutegicos satildeo compostos por eventos fisioloacutegicos e

psicoloacutegicos natildeo havendo exclusatildeo entre eles mas sim uma sobreposiccedilatildeo com fortes

correlaccedilotildees (HARVERBEKE et al 2008 BEERDA 1999 SPANGENBERG 2006

MONTANHA et al 2009) Conhecer a etologia canina iraacute permitir uma melhor

utilizaccedilatildeo do animal respeitando seus limites e possibilitando a manutenccedilatildeo fiacutesica e

mental dentro dos padrotildees de bem-estar da espeacutecie (SNOWDON 1999 DAWNKINS

1989 DARWIN 2004)

Com relaccedilatildeo ao bem-estar Broom amp Johnson (1993) e Broom amp Fraser (2010)

definem como o estado de um animal em relaccedilatildeo agraves suas tentativas de se adaptar ao

meio em que vive Para os animais domeacutesticos principalmente para os animais de

companhia esse eacute um conceito que muitas vezes pode ser confundido e mal aplicado

pelo homem agrave medida que esse confronta a realidade do animal com a sua proacutepria

passando a adequar paracircmetros humanos a esses animais

Os catildees satildeo marcados pela socializaccedilatildeo baseada em relaccedilotildees familiares com

organizaccedilotildees flexiacuteveis e respostas a um liacuteder aleacutem de possuiacuterem necessidade de

17

ambientes complexos e variados marcadamente importantes na vida gregaacuteria de seus

ancestrais (BROOM amp FRASER 2010)

Pensando nisso um manejo inadequado pode ter consequecircncias que variam

desde alteraccedilotildees comportamentais a quadros patoloacutegicos tendo como agravantes

alteraccedilotildees substanciais nos seus niacuteveis de bem-estar

Poreacutem o estudo do comportamento animal ainda se mostra bastante pioneiro jaacute

que as pesquisas cientiacuteficas a niacutevel cliacutenico comeccedilaram a ser realizados haacute poucas

deacutecadas em animais com problemas comportamentais

Dessa forma se faz presente a necessidade de um maior desenvolvimento de

estudos e pesquisas nesse sentido visto que os problemas comportamentais satildeo

apontados como a principal causa de abandono ou morte de animais de companhia

apresentando maior nuacutemero de relatos do que as doenccedilas infecciosas neoplaacutesicas e

metaboacutelicas concomitantes (OVERALL et al 2001)

A relaccedilatildeo homem-animal eacute muito antiga mas eacute pouco estudada E isso faz com

que o diagnoacutestico e o tratamento dos distuacuterbios comportamentais sejam dificultados

Muitas vezes a origem dos problemas comportamentais estaacute ligada ao tipo de

relacionamento existente entre o homem e o seu animal E isso acontece porque os

animais passam por processos de humanizaccedilatildeo para se adaptarem ao modo e ao estilo de

vida do seu proprietaacuterio nem que para isso tenham que modificar as suas caracteriacutesticas

naturais (OVERALL et al 2001)

Embora os catildees apresentem uma flexibilidade comportamental as exigecircncias

criadas pelos seus proprietaacuterios podem desencadear conflitos e frustraccedilotildees que levam ao

aparecimento de problemas comportamentais (OVERALL et al 2001)

Com frequecircncia o stress ou a ansiedade estatildeo relacionados com o ambiente e

mostram que o limiar entre normal e anormal varia entre indiviacuteduos (BEAVER 2005)

O rompimento da homeostase pode resultar de estimulaccedilatildeo interna externa ou

ambos E o potencial de ruptura da homeostase aumenta com a magnitude do desafio

(APPLEBY amp PLUIJMAKERS 2004) Dessa forma sendo a fobia um transtorno de

reaccedilotildees exageradas e desproporcionais ao real grau de importacircncia do estimulo

18

estressor podemos sugerir que o indiviacuteduo foacutebico eacute mais susceptiacutevel ao estresse de

forma geral reagindo com paracircmetros mais facilmente alterados

26 Fobia em catildees

Medo e ansiedade satildeo funccedilotildees adaptativas de sobrevivecircncia que sinalizam para o

organismo a presenccedila de perigo em potencial no ambiente O medo eacute a resposta

imediata acionada por um evento ou objeto potencialmente nocivo e ansiedade envolve

processos cognitivos mais complexos como antecipaccedilatildeo e preocupaccedilatildeo com

hipervigilacircncia diante de um perigo iminente no ambiente (FEINSTEIN et al 2011)

Entre as respostas comportamentais e fisioloacutegicas claacutessicas imediatas do medo

destacam-se o congelamento sobressalto aumento da frequecircncia cardiacuteaca alteraccedilotildees da

pressatildeo arterial e aumento da vigilacircncia Satildeo respostas comportamentais e perceptivas

que facilitam as respostas defensivas como a fuga e esquiva de forma apropriada afim

de reduzir o perigo ou lesatildeo (CHUDASAMA 2009)

O neurocircuito do medo envolve principalmente a amiacutegdala estrutura cerebral

responsaacutevel pela detecccedilatildeo geraccedilatildeo e manutenccedilatildeo das emoccedilotildees relacionadas ao medo e

ansiedade Eacute uma estrutura complexa pertencente ao sistema liacutembico que consiste em

aproximadamente 10 nuacutecleos que coordenam respostas apropriadas agrave ameaccedila e ao

perigo atraveacutes das respostas comportamentais cardiovasculares e endoacutecrinas ao

estresse (ROSEN amp SCHULKIN 1998)

A amiacutegdala faz ligaccedilotildees entre as aacutereas do coacutertex cerebral e recebe informaccedilotildees

de todos os sistemas sensoriais permite a integraccedilatildeo da informaccedilatildeo proveniente das

diversas aacutereas atraveacutes de conexotildees excitatoacuterias e inibitoacuterias

Os nuacutecleos basolaterais satildeo as principais portas de entrada da amiacutegdala

recebendo informaccedilotildees sensoriais e auditivas vindas do taacutelamo coacutertex sensorial e

associativo (Figura 3) Ele estaacute sob tocircnica inibiccedilatildeo GABAeacutergica e quando bloqueada

esta inibiccedilatildeo resulta em aumento do comportamento de ansiedade com ativaccedilatildeo

cardiovascular simpaticamente mediada (KESSLER et al 2005)

19

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional A informaccedilatildeo

sensoacuteria eacute transmitida para o taacutelamo atraveacutes da via leminiscal A aferecircncia auditiva chega na

divisatildeo ventral do nuacutecleo geniculado medial e projeta-se para o coacutertex auditivo primaacuterio

enquanto outras vias extra leminiscais carreiam informaccedilotildees auditivas para outras partes do

taacutelamo como a divisatildeo medial do nuacutecleo geniculado medial e nuacutecleos intralaminares

posteriores que se projetam tanto para o coacutertex auditivo primaacuterio quanto para o coacutertex auditivo

associativo assim como para os nuacutecleos basolaterias da amiacutegdala Essa via do taacutelamo para

amiacutegdala eacute implicada na aprendizagem emocional (IVERSEN et al 2003)

A amiacutegdala ventrolateral em seres humanos eacute mais sensiacutevel aos estiacutemulos

negativos (especialmente se os estiacutemulos sinalizam informaccedilatildeo negativa iminente) E a

amiacutegdala centromedial (CMA) dorsal tem projeccedilotildees principalmente subcorticais

especialmente aquelas ligadas ao hipotaacutelamo lateral e substacircncia cinzenta periaquedutal

(PAG) Essas projeccedilotildees podem explicar em parte as respostas fisioloacutegicas associadas

ao medo com o hipotaacutelamo (Figura 4) (KESSLER et al 2005)

Kandel 2003

20

Figura 4 Conexotildees diretas entre o nuacutecleo central da amiacutegdala e uma variedade de aacutereas

hipotalacircmicas e do tronco encefaacutelico envolvidas no medo e na ansiedade (IVERSEN et al

2003)

O Locus coeruleus importante nuacutecleo com grande densidade de neurocircnios

noradreneacutergicos com papel no desencadeamento da resposta ao estresse e das reaccedilotildees de

fuga tem tambeacutem papel importante no controle do medo A desregulaccedilatildeo desse nuacutecleo

parece ter relaccedilatildeo com o aparecimento do pacircnico e fobias em humanos (CHARNEY

1984) certamente atraveacutes de sua ligaccedilatildeo ao sistema liacutembico (CHARNEY 1984)

Medos podem desenvolver-se gradualmente e pode haver variaccedilatildeo na resposta

Em contraste fobias geralmente se desenvolvem rapidamente e uma vez desenvolvidas

haacute pouca mudanccedila em sua apresentaccedilatildeo entre as seacuteries Situaccedilotildees indutoras de fobia ou

satildeo evitadas a todo custo pelo foacutebico ou se inevitaacutevel satildeo suportadas com intensa

ansiedade e sofrimento (OVERALL 2010)

A Associaccedilatildeo Norte Americana de Psiquiatria no manual de diagnoacutestico e

estatiacutestica de transtornos mentais (DSM-IV-TR 2002) e a CID-10 (1993) definem em

humanos fobias especiacuteficas como medos irracionais excessivos acentuados e

persistentes revelados pela presenccedila ou antecipaccedilatildeo de um objeto situaccedilatildeo ou

atividade foacutebica especiacutefica de forma desproporcional acompanhados de

comportamentos de fuga esquiva antecipaccedilatildeo ansiosa e intenso sofrimento

Geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase fisioloacutegica

mas leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas ao medo

21

coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o eixo

HHA e o Sistema Nervoso Simpaacutetico

Em catildees natildeo haacute ateacute o momento descrito na literatura uma definiccedilatildeo oficial para

tal transtorno

As fobias satildeo transtornos de ansiedade de difiacutecil cura e geralmente a memoacuteria

de uma resposta foacutebica pode desencadear outros transtornos de ansiedade Dessa forma

o tratamento tem importacircncia natildeo soacute pela questatildeo do bem-estar e qualidade de vida

mas tambeacutem devido a seus componentes de comorbidade (OVERALL 2010)

Resposta exagerada a sons de trovatildeo estatildeo entre as doenccedilas comportamentais

mais comumente associados com pacircnico ou fobia em catildees Ocorre geralmente em

todas as raccedilas embora natildeo existam dados sobre a incidecircncia relativa destes problemas

(OVERALL et al 2001 DUNHAM amp FRANK 2001 VOITH amp BORCHELT 1985)

A fobia agrave sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio constitui uma classe que apresenta

resposta extrema repentina e profunda e que apesar de existir uma variaccedilatildeo consideraacutevel

nas respostas dos catildees (BEERDA SCHILDER VAN HOOFF VRIES 1997) no geral

se manifesta com comportamentos de ansiedade associados com atividades acentuadas

do sistema nervoso simpaacutetico Os comportamentos podem incluir catatonia ou mania

concomitante com diminuiccedilatildeo da sensibilidade ou capacidade de resposta agrave dor ou

estiacutemulos sociais aleacutem de fuga vocalizaccedilatildeo salivaccedilatildeo micccedilatildeo defecaccedilatildeo tremores

comportamentos autodestrutivos e ateacute convulsotildees (OVERALL 2010 SHULL-

SELCER amp STAGG 1991)

Jaacute se sabe que existe um fator hereditaacuterio para esse tipo de fobia e embora os

mecanismos pelos quais ela ocorre ainda natildeo sejam compreendidos parece estar em

alguma alteraccedilatildeo na forma como a informaccedilatildeo eacute processada entre a amiacutegdala e o coacutertex

(OVERALL 2010)

E como ansiedade medos e fobias satildeo queixas comportamentais comuns e

problemaacuteticas dos donos de catildees a falta de tratamento pode resultar no rompimento do

viacutenculo humano-animal e posterior abandono desistecircncia ou ateacute mesmo eutanaacutesia do

catildeo afetado (MILLS etal 2003)

22

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental

Os procedimentos experimentais foram realizados na Estaccedilatildeo experimental de

Parasitologia Veterinaacuteria do Departamento de Parasitologia Animal (DPA) da

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) e no Laboratoacuterio de Fisiologia

Animal do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas (DCF) da UFRRJ Todos os

procedimentos estatildeo de acordo com a lei de bem-estar animal Instruccedilatildeo Normativa ndeg

56 de 2008 O presente experimento encontra-se aprovado pelo Comitecirc de Eacutetica na

Pesquisa da UFRRJ CEUA-IB nordm 2308347962014-14

32 Animais

Foram entrevistados 35 proprietaacuterios de catildees entre os quais foram selecionados

28 com 2 a 6 anos de idade pesando de 10 a 30 Kg doacuteceis saudaacuteveis com vacinas e

vermifugaccedilatildeo em dia do muniacutecipio de Seropeacutedica-RJ

Proprietaacuterios de animais com medo de sons de trovatildeo e fogos de artificio

interessados em participar do estudo e proprietaacuterios de animais sem medo convidados a

participar do estudo incialmente responderam a um formulaacuterio de cadastro dos

animais contendo dados gerais e histoacuterico de respostas comportamentais em geral

(Anexo 1) Em seguida os animais foram submetidos a um exame cliacutenico baacutesico que

constitiu em inspeccedilatildeo palpaccedilatildeo auscultaccedilatildeo e termometria retal e um exame

neuroloacutegico para descartar doenccedilas concomitantes (Anexo 2) Foram dispensados

animais arredios agressivos com peso ou idade fora da faixa estabelecida no criteacuterio de

seleccedilatildeo e animais doentes Os animais selecionados foram caracterizados como foacutebicos

e natildeo-foacutebicos a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio e entatildeo submetidos uma uacutenica vez ao

modelo de estresse sonoro A caracterizaccedilatildeo de animais foacutebicos foi realizada conforme

as respostas dos proprietaacuterios ao questionaacuterio de reaccedilotildees comportamentais aos sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009 CROWELL-

DAVIS 2003) (Anexo 3)

23

Meios de divulgaccedilatildeo do estudo atraveacutes de folder e cartazes de divulgaccedilatildeo do projeto

veiculado pela internet e afixado em diversos estabelecimentos veterinaacuterios no

municiacutepio e pela UFRRJ (Anexo 4)

Avaliaccedilatildeo comportamental atraveacutes de entrevista com o proprietaacuterio (questionaacuterio

adaptado de OVERALL 1997) (Anexo 1)

321 Consideraccedilotildees eacuteticas

A participaccedilatildeo no estudo ocorreu somente com a autorizaccedilatildeo dos entrevistados

mediante um termo de consentimento em que se garantia plena liberdade para

interromper a participaccedilatildeo quando desejado (Anexo 5) Natildeo houve riscos agrave sauacutede fiacutesica

ou mental dos animais que participaram do projeto

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som

Os catildees foram selecionados para compor os grupos conforme as respostas ao

questionaacuterio comportamental previamente preenchido pelo proprietaacuterio

O questionaacuterio especiacutefico para medo de sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio

(Anexo 3) eacute composto de alguns paracircmetros comportamentais comuns em catildees foacutebicos

como atitude destrutiva eliminaccedilatildeo inadequada salivaccedilatildeo excessiva vocalizaccedilatildeo

esconder passadas arfar procurar pelo proprietaacuterio auto-trauma tremor Esses

parametros foram ainda classificados em escala de 0 (comportamento nunca observado)

a 5 (comportamento frequente e grave) (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009

CROWELL-DAVIS 2003)

Os catildees foram considerados aptos a participarem do grupo Foacutebicotrovatildeo e

Foacutebicosfogos quando

Apresentaram pelo menos trecircs dos comportamentos anteriores durante

o som de trovatildeo ou fogos de artifiacutecio com escore igual ou maior que 3

ou algum item com escore maacuteximo (5)

Ou as atitudes do animal no momento do som apresentaram risco a sauacutede

e integridade fiacutesica

E quando as respostas comportamentais foram apresentadas na maior

parte do tempo durante o estiacutemulo

24

33 Procedimentos Experimentais

O protocolo experimental foi realizado individualmente iniciando-se sempre agraves

9 horas da manhatilde Um pesquisador acompanhado de um pesquisador colaborador

realizou todo o protocolo experimental sem se ausentar em nenhuma etapa do

experimento

Dias antes do experimento os animais foram submetidos a um exame cliacutenico e

os proprietaacuterios responderam a questionaacuterios (Anexo 1 e 3) referentes ao manejo e

comportamento do animal

A partir dos dados dos questionaacuterios os animais foram classificados conforme

as respostas dadas referente ao medo de trovatildeo e fogos de artiacutefiacutecio entre animais com

histoacuterico comportamental de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Foacutebicos) e

animais historicamente natildeo foacutebicos a esses sons (Natildeo-foacutebicos)

No dia do experimento cada animal foi submetido a inserccedilatildeo de um cateacuteter de

silicone endovenoso para coleta de sangue ainda em sua moradia (amostra 1 casa) e a

colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro (Polar Pro Trainer RS800CX) Os animais permaneceram

com o frequenciacutemetro durante todo o protocolo experimental

Apoacutes a colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro os animais permaneceram no mesmo local

por 10 minutos para adaptaccedilatildeo ao frequeciacutemetro e registro dos dados de VIC do

momento basal 1 (casa) Em seguida cada animal foi transportado para o laboratoacuterio

onde foi executado o modelo de estresse sonoro agudo O transporte foi realizado

acondicionando o animal numa caixa de transporte num carro de passeio com

ventilaccedilatildeo adequada

Apoacutes a chegada ao local do experimento os animais permaneceram na sala sem

manipulaccedilatildeo e sem interaccedilatildeo por parte dos pesquisadores por 30 minutos para registro

dos dados de VIC do momento basal 2 (laboratoacuterio) Em seguida foi coletada a

segunda amostra de sangue (amostra 2 laboratoacuterio)

O estiacutemulo sonoro consistiu numa gravaccedilatildeo de sons de trovatildeo e outra de sons de

fogos de artifiacutecio numa intensidade sonora maacutexima de 103-104 dB e duraccedilatildeo de 2

minutos e 30 segundos (MACCARIELLO 2012)

Durante e apoacutes o fim do estiacutemulo sonoro cada animal permaneceu sem qualquer

manipulaccedilatildeo A terceira coleta de sangue foi realizada 5 minutos apoacutes o teacutermino do

estresse (amostra 3) a quarta aos 15 minutos (amostra 4) a quinta aos 30 minutos

(amostra 5) e a sexta coleta aos 60 minutos apoacutes o teacutermino do estresse (amostra 6)

25

A filmagem foi realizada durante todo o experimento para registrar as reaccedilotildees

comportamentais

Apoacutes a uacuteltima coleta o polar foi retirado e o animal levado de volta para sua

casa no mesmo transporte e nas mesmas condiccedilotildees em que veio

Figura 5 Esquema do protocolo experimental

331 Estiacutemulo Sonoro

Os estiacutemulos sonoros consistiram de uma gravaccedilatildeo com duraccedilatildeo de 2 minutos e

30 segundos de sons de trovatildeo mixados alternadamente a partir de dois arquivos

sonoros no formato wave (ldquovery loud thunder close thunder crackrdquo e ldquohigh quality

stereo sound of a major thunder clap during a stormrdquo) e outra gravaccedilatildeo de sons de

fogos de artifiacutecio mixado de um arquivo sonoro no formato wave (ldquocontinuous

fireworkrdquo) adquiridos no endereccedilo eletrocircnico httpwwwsound-effectcom

O formato utilizado possui a vantagem de ser uma gravaccedilatildeo que preserva todas

as variaccedilotildees de frequecircncia do som original A intensidade do som foi padronizada

atraveacutes de um decibeliacutemetro modelo BK Precision 732A Sound Level Meters a 103-

104 dB por ser uma pressatildeo sonora capaz de aumentar as concentraccedilotildees de cortisol

seacuterico em catildees estando abaixo dos limites que possam causar danos ao aparelho

auditivo (ISING et al 1999)

O estiacutemulo sonoro foi emitido por um aparelho de som (Pioneer home theater

DVD 120w RMS) com 5 caixas de som acopladas Cada animal foi posicionado a um

metro das caixas de som Para observaccedilatildeo das reaccedilotildees comportamentais cada animal foi

contido apenas por uma guia solta de 15 m podendo reagir e se locomover

naturalmente sem intervenccedilotildees

xi

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS

AC Adenilatociclase

ACh Acetilcolina

ACTH Hormocircnio adrenocorticotroacutefico

AVP Vasopressina

CCP Corpos Celulares Preacute-ganglionares

CEUA Comissatildeo de Eacutetica no Uso de Animais

CRH Hormocircnio liberador de corticotropina

dB decibeacuteis

DCF Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas

DPA Departamento de Parasitologia Animal

FC Frequecircncia Cardiacuteaca

FFT Transformada Raacutepida de Fourier

GR Receptor de Glicocorticoacuteides

HF Frequecircncia alta

HHA Eixo Hipotaacutelamo Hipoacutefise Adrenal

IRR Intervalos RR

LC Locus Coeruleus

LF Frequecircncia baixa

MR Receptor de Mineralocorticoacuteide

NAV Nodo Atrioventricular

NA Noradrenalina

NS Nodo Sinoatrial

PKA Proteiacutena quinase dependente de AMPc

PVN Nuacutecleo Paraventricular do Hipotaacutelamo

RMSSD raiz quadrada da meacutedia das diferenccedilas entre intervalos entre batimentos

consecutivos elevadas ao quadrado

SAM Sistema Simpato-adreno-medular

SNA Sistema Nervoso Autocircnomo

SNC Sistema Nervoso Central

SNP Sistema Nervoso Parassimpaacutetico

SNS Sistema Nervoso Simpaacutetico

xii

SRD Sem raccedila definida

STDRR Desvio padratildeo de todos os intervalos RR do segmento

UFRRJ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

VIC Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco

xiii

SUMAacuteRIO

DEDICATOacuteRIA v

AGRADECIMENTOS vi

RESUMO vii

LISTA DE TABELAS E FIGURAS ix

LISTA DE ABREVIACcedilOtildeES SIGLAS E SIacuteMBOLOS xi

1 INTRODUCcedilAtildeO 1

11 Justificativa 3

12 Objetivos 4

121 Geral 4

122 Especiacuteficos 4

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA 5

21 Estresse 5

22 Fisiologia do estresse 6

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse 10

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca 10

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) 12

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees 14

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees 16

26 Fobia em catildees 18

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS 22

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental 22

32 Animais 22

321 Consideraccedilotildees eacuteticas 23

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som 23

33 Procedimentos Experimentais 24

xiv

331 Estiacutemulo Sonoro 25

34 Grupos experimentais 26

35 Coletas de sangue 26

36 Uso do Frequenciacutemetro 27

37 Anaacutelise Espectral da VIC 27

38 Anaacutelise Comportamental 30

39 Anaacutelise Estatiacutestica 31

4 RESULTADOS 33

41 Perfil dos proprietaacuterios e caracteriacutesticas gerais dos animais 33

42 Anaacutelise da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco 41

43 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 46

44 Correlaccedilotildees entre os dados 51

5 DISCUSSAtildeO 55

51 Perfil dos proprietaacuterios e manejo dos animais 55

52 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC) e o estresse sonoro agudo 59

53 Anaacutelise das reaccedilotildees comportamentais induzidas pelo som 61

54 Correlaccedilotildees entre dados 62

55 O Modelo de Estresse Sonoro Agudo em Catildees 63

6 CONCLUSOtildeES 65

7 REFEREcircNCIAS BIBLIOGRAacuteFICAS 67

8 ANEXOS 77

ANEXO 1 Ficha geral de cadastro 77

ANEXO 2 Ficha Neuroloacutegica 81

ANEXO 3 Ficha de avaliaccedilatildeo de Fobia 83

ANEXO 4 Folder de divulgaccedilatildeo 85

ANEXO 5 Termo de Consentimento 86

xv

ANEXO 6 Ficha de Protocolo Experimental 88

1

1 INTRODUCcedilAtildeO

Situaccedilotildees de estresse e medo fazem parte da vida de todos os animais e as

reaccedilotildees fisioloacutegicas provocadas por elas satildeo essenciais para sobrevivecircncia no meio

selvagem mas tambeacutem na vida urbana para aqueles animais que foram domesticados

acompanhando o homem em sua caminhada de vida em sociedade

A espeacutecie canina foi a que mais se envolveu com o homem tornando-se um

animal domeacutestico e dependente de cuidados sendo alvo de problemas sociais

ambientais e de sauacutede puacuteblica quando abandonados ou em vida livre pelas cidades e

comunidades

Essa relaccedilatildeo criada ao longo dos tempos entre os catildees e o homem trouxe para

os dias atuais um viacutenculo afetivo de ambas as espeacutecies modificando e ateacute selecionando

atraveacutes das raccedilas o comportamento canino acentuando caracteriacutesticas que podem estar

influenciando a forma dos catildees de lidar com as situaccedilotildees de estresse e medo no

cotidiano

A fisiologia do comportamento regula-se baseada nos estiacutemulos externos aos

quais o animal estaacute sujeito conforme suas necessidades de sobrevivecircncia e ateacute de bem

estar Dessa forma o estresse vem a ser responsaacutevel por modelar o comportamento de

um indiviacuteduo conforme seu modo de vida e sua exposiccedilatildeo a esses estiacutemulos

O estresse como mecanismo de adaptaccedilatildeo a situaccedilotildees adversas eacute extremamente

importante na manutenccedilatildeo da vida pois sem esse mecanismo qualquer situaccedilatildeo

desfavoraacutevel poderia causar morte imediata sendo a capacidade de responder

rapidamente a uma situaccedilatildeo de perigo uma importante caracteriacutestica da evoluccedilatildeo dos

seres

Mais especificamente em situaccedilotildees de estresse o organismo de um indiviacuteduo

redistribui sua energia e o sistema locomotor e sensorial satildeo priorizados em detrimento

de outros (reprodutivo digestivo e imune) fazendo assim com que a resposta

momentacircnea seja eficiente O problema comeccedila quando haacute a persistecircncia destas

situaccedilotildees e ou dessas respostas causando prejuiacutezo aos sistemas deprimidos

A influecircncia dos estiacutemulos sonoros tem demonstrado importacircncia cliacutenica na

espeacutecie canina jaacute que leva diversos indiviacuteduos a sofrerem alteraccedilotildees comportamentais e

2

neuroendoacutecrinas que podem evoluir para graves distuacuterbios comportamentais e

fisioloacutegicos como a fobia Em alguns casos de estresse crocircnico severo podem ocorrer

danos neurais doenccedilas gastrointestinais aleacutem da diminuiccedilatildeo da resposta imune

A fobia eacute descrita como um medo acentuado irracional persistente e excessivo

claramente discerniacutevel de objetos seres lugares ou situaccedilotildees de forma desproporcional

e exagerada acompanhada de comportamento de fuga esquiva antecipaccedilatildeo e intenso

sofrimento que geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase

fisioloacutegica mas que leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas

ao medo coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o

eixo Hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HPA) na liberaccedilatildeo de glicocorticoides e o sistema

nervoso simpaacutetico

Na fobia os limiares de ativaccedilatildeo dos circuitos neurais de medo estatildeo reduzidos

podendo ser observado no indiviacuteduo clara hiperexcitabilidade hipervigilacircncia e

aumento da responsividade comportamental aos estiacutemulos Idealmente os graus de

ativaccedilotildees seriam proporcionais agrave ameaccedila e uma adaptaccedilatildeo agrave situaccedilatildeo normalizaria a

resposta de estresse diminuindo-a conforme a ameaccedila desaparecesse o que natildeo ocorre

na fobia

Os criteacuterios para o diagnoacutestico de fobia em humanos costumam usar termos

que se referem a sintomas emocionais envolvendo sentimentos e estados de consciecircncia

subjetivos o que difiacuteculta a abordagem cientifica e cliacutenica nos animais Poreacutem as

alteraccedilotildees dos paracircmetros comportamentais e fisioloacutegicos dos sistemas

neuroendoacutecrinos envolvidos nesses distuacuterbios satildeo um caminho de estudo e pesquisa

Dessa forma os niacuteveis de estresse podem ser avaliados atraveacutes da mensuraccedilatildeo

de paracircmetros fisioloacutegicos e comportamentais Em vaacuterias espeacutecies o paracircmetro mais

utilizado eacute a dosagem de cortisol Aleacutem desse a anaacutelise da variabilidade do intervalo

cardiacuteaco (VIC) vem se mostrando um paracircmetro importante e natildeo invasivo para avaliar

o balanccedilo simpato-vagal em indiviacuteduos submetidos a estiacutemulos potencialmente

desafiadores As alteraccedilotildees comportamentais analisadas em conjunto com as anaacutelises

citadas a cima formam uma importante fonte de dados ainda natildeo correlacionadas nos

estudos mais recentes

Contudo o presente estudo teve como objetivo avaliar as respostas autonocircmicas

e comportamentais induzidas pelo estresse sonoro agudo em catildees de companhia com

3

histoacuterico de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio O modelo de estresse utilizado

consiste em um meacutetodo natildeo invasivo e seguro uma vez que cada animal foi submetido

a um estiacutemulo sonoro (sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio) de curta duraccedilatildeo (25 min) a

uma intensidade sonora maacutexima de 1039 dB natildeo sendo capaz de causar efeitos

deleteacuterios para a audiccedilatildeo dos animais

Para tal foram utilizados 28 catildees de diversas raccedilas dos quais 16 eram

historicamente foacutebicos a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio e 12 natildeo apresentavam

qualquer sinal de medo a esses sons Os animais foram dividos ainda entre submetidos

ao som de trovatildeo e submetidos ao som de fogos de artifiacutecio

Foram avaliados o balanccedilo simpato-vagal atraveacutes da mensuraccedilatildeo da VIC e 14

paracircmetros comportamentais aleacutem da coleta de amostras sanguiacuteneas em 6 momentos

para posterior anaacutelise dos niacuteveis seacutericos de cortisol

11 Justificativa

Animais e humanos satildeo constantemente submetidos a situaccedilotildees de estresse no

seu cotidiano Em catildees vaacuterios estiacutemulos podem ser considerados geradores de estresse

e sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio tecircm se mostrado estiacutemulos estressores importantes

devido agrave frequente ocorrecircncia de fobia a esses sons nesta espeacutecie

O tema escolhido eacute de grande importacircncia na atualidade uma vez que satildeo

necessaacuterias mais pesquisas sobre o efeito do estresse em humanos e animais Neste

sentido a avaliaccedilatildeo dos paracircmetros fisioloacutegicos em situaccedilotildees de estresse eacute uma forma

de estudar e compreender melhor os distuacuterbios relacionados ao estresse e traccedilar novos

caminhos terapecircuticos

Eacute relevante para a Medicina Veterinaacuteria e para a aacuterea de sauacutede como um todo

pois modelos de estresse sonoro agudo podem ser uacuteteis na verificaccedilatildeo da reatividade ao

estresse aleacutem de serem pouco invasivos e de relativa faacutecil execuccedilatildeo

4

12 Objetivos

121 Geral

Verificar as respostas fisioloacutegicas ao estresse sonoro agudo em catildees de

companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

122 Especiacuteficos

Avaliar o perfil socioeconocircmico dos proprietaacuterios as caracteriacutesticas gerais e

comportamentais e o manejo dos animais em catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

Avaliar a resposta autonocircmica a partir da anaacutelise espectral da variabilidade do

intervalo cardiacuteaco de catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos

de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar a resposta comportamental de catildees de companhia com histoacuterico de fobia

a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre o comportamento dos animais relatado pelos

proprietaacuterios durante a ocorrecircncia natural de trovotildees ou fogos e os comportamentos

exibidos pelos catildees em resposta ao modelo de estresse sonoro em laboratoacuterio

Avaliar se haacute correlaccedilatildeo entre paracircmetros autonocircmicos e comportamentais em

catildees de companhia com histoacuterico de fobia a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio

submetidos a um modelo de estresse sonoro agudo

5

2 REVISAtildeO BIBLIOGRAacuteFICA

21 Estresse

O fisiologista Claude Bernard em 1872 definiu o conceito de meio interno pela

primeira vez como um princiacutepio do equiliacutebrio dinacircmico do meio interno essencial para

a sobrevivecircncia (FRANCI 2005)

Apesar disso foi Walter Canon em 1929 o responsaacutevel por definir esse

conceito da condiccedilatildeo de equiliacutebrio do meio interno criado por Claude Bernard com o

termo homeostase Aleacutem de ter reconhecidoos agentes desafiadores da homeostase

como fiacutesicos e emocionais e elaborado o conceito de ldquoreaccedilatildeo de emergecircnciardquo que

ocorre quando haacute um desafio capaz de ativar a liberaccedilatildeo de noradrenalina de terminais

nervosos simpaacuteticos e adrenalina da medula da adrenal (FRANCI 2005)

E mais recentemente entre 1946 e 1976 o fisiologista canadense Hans Selye

definiu ldquoa situaccedilatildeo gerada pelo desafio ao qual um organismo estaria submetidordquo com o

termo estresse E ao ocorrerem controveacutersias conceituais uma vez que natildeo se podia

distinguir a causa do efeito ele criou o termo estressor para designar o agente causador

(estiacutemulo) e manteve o termo estresse para designar a condiccedilatildeo gerada pelo estiacutemulo

desafiador (FRANCI 2005)

A resposta a um estiacutemulo estressor eacute fundamental para a homeostase de um ser

vivo e sua sobrevivecircncia Nas condiccedilotildees de estresse o organismo reage por meio da

ativaccedilatildeo e desativaccedilatildeo do mecanismo de controle de vaacuterias funccedilotildees para recuperar e

manter a homeostase No entanto essas respostas podem ser insuficientes para

restabelecer ou manter a homeostase ou podem ser exageradas representando risco de

doenccedilas Portanto o estresse pode ser definido como a soma de respostas fiacutesicas e

mentais causadas por determinados estiacutemulos externos e que permitem ao indiviacuteduo

superar determinadas exigecircncias do meio-ambiente (FRANCI 2005)

A reaccedilatildeo de estresse maximiza o gasto de energia que ajuda a preparar o corpo

para atender a uma situaccedilatildeo ameaccediladora ou desafiadora em que o indiviacuteduo tende a

mobilizar um grande esforccedilo a fim de lidar com o evento No entanto enquanto uma

certa quantidade de estresse eacute necessaacuteria para a sobrevivecircncia o estresse prolongado

pode afetar adversamente a sauacutede (BERNARD amp KRUPAT 1994)

6

Em situaccedilotildees de estresse ocorre a ativaccedilatildeo de duas principais vias o eixo

hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) atraveacutes do aumento da produccedilatildeo de cortisol e o

sistema nervoso simpaacutetico atraveacutes da liberaccedilatildeo de catecolaminas (Noradrenalina

Adrenalina)

A desregulaccedilatildeo de qualquer um desses sistemas de estresse pode levar a

distuacuterbios fisioloacutegicos de vaacuterios outros sistemas incluindo os sistemas imunoloacutegico

cardiovascular funccedilatildeo metaboacutelica e comportamento levando a maacute adaptaccedilatildeo da

resposta ao estresse (MARQUES et al 2010)

22 Fisiologia do estresse

Os estiacutemulos estressores podem ser definidos como aqueles que desafiam a

homeostase Esses estiacutemulos geram respostas que variam de acordo com a duraccedilatildeo e

intensidade e ainda com a predisposiccedilatildeo geneacutetica e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo

Os estiacutemulos causadores de estresse podem ser classificados em quatro grupos

estressores fiacutesicos e quiacutemicos (calor frio barulho radiaccedilatildeo intensa e substacircncias

toacutexicas) psicoloacutegicos (medo e frustraccedilatildeo) sociais (um ambiente hostil e rompimento de

relaccedilotildees) e os que alteram a homeostase vegetativa como em casos de exerciacutecio intenso

e hemorragias Quanto agrave duraccedilatildeo os estiacutemulos causadores de estresse podem ser ainda

classificados como agudos ou crocircnicos (PACAacuteK amp PALKOVITS 2001)

Moberg (2000) propotildee um modelo para compreensatildeo do estresse em toda

espeacutecie animal que sugere uma resposta bioloacutegica ao estresse a partir de trecircs estaacutegios

gerais

1ordm O reconhecimento de um estiacutemulo estressante

2deg A defesa bioloacutegica contra o estiacutemulo estressante

3deg As consequecircncias da resposta de estresse

Esta resposta ao estressor iraacute abranger aspectos cognitivos comportamentais e

fisioloacutegicos (MARGIS et al 2003)

Em uma situaccedilatildeo de estresse satildeo ativados o sistema simpato-adrenomedular

gerando o aumento da secreccedilatildeo de catecolaminas e logo excitaccedilatildeo raacutepida do sistema

cardiovascular ocasionando um aumento da frequecircncia cardiacuteaca e da pressatildeo arterial E

7

o outro eixo ativado eacute o hipotaacutelamo-hipoacutefise-adrenal (HHA) levando ao aumento na

produccedilatildeo de cortisol e naturalmente mobilizaccedilatildeo de energia (ULRICH-LAI amp

HERMAN 2009) (Figura 1)

As respostas de emergecircncia ativadas pelo SAM ocorrem quando o organismo se

prepara para a defesa ou ataque excretando adrenalina Entatildeoo suprimento de sangue eacute

desviado para os muacutesculos havendo elevaccedilatildeo do deacutebito cardiacuteaco total e da

redistribuiccedilatildeo sanguiacutenea aumentando a oferta de nutrientes e oxigecircnio para as estruturas

vitais A pressatildeo arterial se eleva e os bronquiolos se dilatam tornando a respiraccedilatildeo

mais raacutepida e profunda para retirada do dioacutexido de carbono excedente As funccedilotildees

digestivas e secretoacuterias diminuem aleacutem da reaccedilatildeo de aliacutevio com a liberaccedilatildeo de qualquer

excesso da bexiga e intestino A taxa metaboacutelica aumenta e a liberaccedilatildeo de endorfinas

diminue a sensibilidade agrave dor e os sentidos satildeo mantidos em estado de alerta

(ROGERSON 1997)

8

Figura 1 Ativaccedilatildeo do SAM e do eixo HHA A ativaccedilatildeo do sistema simpato-adrenomedular

(SAM) e do eixo do hipotaacutelamo hipoacutefise adrenal (HHA) como sistemas primaacuterios para a

manutenccedilatildeo e restabelecimento da homeostase A exposiccedilatildeo ao estressor resulta em ativaccedilatildeo de

neurocircnios preacute-ganglionares simpaacuteticos na coluna intermediolateral da medula espinhal

toracolombar (T1 a L2) Estes neurocircnios preacute-ganglionares se projetam para gacircnglios preacute e para

vertebrais que entatildeo terminam em oacutergatildeos alvo e nas ceacutelulas cromafins da medula da adrenal

Esta ativaccedilatildeo simpaacutetica (em ciacuterculos) representa a resposta claacutessica de luta e fuga que foi

primariamente caracterizada por Walter Cannon e colaboradores no iniacutecio do seacuteculo passado e

leva a um aumento dos niacuteveis de adrenalina (proveniente da adrenal) e de noradrenalina dos

terminais simpaacuteticos aumento da frequecircncia e da forccedila de contraccedilatildeo do coraccedilatildeo vasoconstriccedilatildeo

perifeacuterica e mobilizaccedilatildeo de energia O tocircnus parassimpaacutetico tambeacutem eacute mobilizado durante o

estresse No sistema parassimpaacutetico (em estrelas) representa a ativaccedilatildeo de nuacutecleos preacute-

ganglionares cracircnios-sacrais ativam nuacutecleos poacutes-ganglionares localizados proacuteximos aos oacutergatildeos

inervados com efeito geralmente oposto ao sistema simpaacutetico Para o eixo HHA a exposiccedilatildeo ao

estressor ativa neurocircnios hipofisiotroacuteficos no nuacutecleo paraventricular do hipotaacutelamo (PVN) que

secretam hormocircnios de liberaccedilatildeo como hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH) e

vasopressina (AVP) na circulaccedilatildeo porta da eminecircncia meacutedia Estes hormocircnios liberadores atuam

na hipoacutefise anterior para promover a secreccedilatildeo de hormocircnio adrenocorticotroacutefico (ACTH) que

atua no coacutertex da adrenal (zona fasciculata) para iniciar a siacutentese e liberaccedilatildeo dos hormocircnios

glicocorticoacuteides Os glicocorticoacuteides circulantes promovem a mobilizaccedilatildeo de energia estocada e

potencializam numerosos efeitos simpaacuteticos como a vasoconstriccedilatildeo perifeacuterica Aleacutem disso o

coacutertex da adrenal eacute diretamente inervado pelo sistema simpaacutetico que regula a liberaccedilatildeo de

glicocorticoacuteides Entatildeo a ativaccedilatildeo do sistema simpaacutetico e do eixo HHA tem accedilotildees

complementares no organismo incluindo a mobilizaccedilatildeo de energia e a manutenccedilatildeo da pressatildeo

arterial durante o estresse (Adaptado de ULRICH-LAI amp HERMAN 2009)

CRH

AVP

9

As respostas ao estresse que envolvem emoccedilatildeo passaratildeo por avaliaccedilatildeo afetiva

onde a informaccedilatildeo seraacute processada e interpretada para se estimar o potencial de ameaccedila

Esta avaliaccedilatildeo afetiva iraacute determinar o padratildeo de respostas e o tipo de defesa de acordo

com a histoacuteria pessoal aprendizado e experiecircncias preacutevias do indiviacuteduo que entatildeo faraacute

a avaliaccedilatildeo da capacidade para lidar com a situaccedilatildeo e organizaccedilatildeo da resposta

(MARGIS et al 2003)

A intensidade da resposta eacute que determina se o animal estaacute sofrendo de estresse

ou eacute meramente experimentado um episoacutedio breve em sua vida sem nenhum impacto

significativo ao seu bem-estar

Circuitos neurais espinais e supra espinais estatildeo envolvidos nas respostas de

estresse Os supra espinais processam as informaccedilotildees vindas das vias somatossensoriais

e viscerossensoriais e elaboram as respostas atraveacutes do taacutelamo hipotaacutelamo aacuterea preacute-

optica estruturas liacutembicas e sistemas amineacutergicos e natildeo amineacutergicos do tronco cerebral

Os neurocircnios do PVN secretores de hormocircnio liberador de corticotrofina (CRH)

e vasopressina com os neurocircnios catecolamineacutergicos do locus coeruleus (LC) (o nuacutecleo

com maior densidade de neurocircnios noradreneacutergicos com papel fundamental no

desencadeamento da resposta ao estresse e reaccedilotildees de fuga) inervam o hipocampo a

amiacutegdala e o neocortex aleacutem de nuacutecleos do rafe (5-HT) e grupamentos celulares da

medula e ponte compondo assim um dos principais reguladores centrais de resposta ao

estresse na ativaccedilatildeo do eixo HHA e SNS (FRANCI 2005)

O eixo HHA eacute ativado por diferentes categorias de estresse como traumaacutetico

inflamatoacuterio e psicoloacutegico E o estresse psicoloacutegico tem regulaccedilatildeo por estruturas

liacutembicas que exercem atividade modulatoacuteria sobre o eixo (ULRICH-LAI amp HERMAN

2009)

O PVN monitora sinais relacionados com o estado emocional atraveacutes de sinais

metaboacutelicos como a composiccedilatildeo plasmaacutetica O CRH o principal neurotransmissor

coordenador das alteraccedilotildees psicoloacutegicas e comportamentais relacionadas ao estresse eacute

sintetizado no PVN e liberado nos capilares da eminecircncia meacutedia juntamente com a

vasopressina (AVP) e alcanccedilam diretamente a hipoacutefise anterior via circulaccedilatildeo portal

hipotalacircmica-hipofisaacuteria que por sua vez estimula na hipoacutefise a liberaccedilatildeo do hormocircnio

adrenocorticotroacutefico (ACTH) (MORMEgraveDE et al 2006)

10

O ACTH eacute sintetizado por ceacutelulas especializadas da hipoacutefise anterior vai para a

corrente sanguiacutenea e estimula o coacutertex da glacircndula adrenal (na zona fasciculada) que

sintetiza o glicocorticoide atraveacutes de esteroides derivados do colesterol O cortisol eacute o

glicocorticoacuteide ativo do eixo para catildees gatos e humanos e a corticosterona para

paacutessaros e roedores (MORMEgraveDE et al 2006)

Esse hormocircnio final do eixo HHA interage com as ceacutelulas atraveacutes da ligaccedilatildeo a

dois receptores o receptor glicocorticoide (GR) e o receptor de mineralocorticoide

(MR) O receptor GR eacute encontrado na maioria dos tecidos do corpo incluindo a maioria

das aacutereas do enceacutefalo No rim e em outros tecidos a aldosterona liga-se ao MR durante a

regulaccedilatildeo da reabsorccedilatildeo de soacutedio mas o MR tambeacutem estaacute presente no hipocampo onde

ocorre a ligaccedilatildeo do cortisol Estes complexos esteroacuteide-receptores entatildeo interagem

com o DNA para iniciar ou para reprimir a transcriccedilatildeo de genes especiacuteficos a fim de

regular a siacutentese de proteiacutenas que provoca alteraccedilotildees fisioloacutegicas em resposta ao

estresse

O cortisol tem 10 vezes mais afinidade ao MR que ao GR Em niacuteveis baixos ou

em situaccedilotildees de ausecircncia de estresse a maior parte do cortisol liga-se aos MRs no

ceacuterebro (principalmente no hipocampo) e modula a atividade basal do eixo HHA e o

aparecimento de resposta ao estresse Com a elevaccedilatildeo dos niacuteveis de cortisol ocorre um

aumento de ligaccedilotildees nos receptores GR reduzindo a atividade do eixo HHA

(mecanismo de ldquofeed-backrdquo negativo) No entanto a ativaccedilatildeo crocircnica deste receptor

estaacute ligada a vaacuterios distuacuterbios cognitivos relativos ao estresse (DE KLOET et al 1999)

Proteger o organismo de possiacuteveis danos eacute um dos papeis principais das

respostas hormonais a situaccedilotildees de estresse E seus principais hormocircnios satildeo a

adrenalina de secreccedilatildeo raacutepida pelo envolvimento na reaccedilatildeo de luta ou fuga e o

corticosteroacuteides na restauraccedilatildeo e na reparaccedilatildeo dos sistemas agindo na segunda linha de

defesa regulando as respostas inflamatoacuteria e imune (MC EWEN 2000)

23 Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco Durante o Estresse

231Regulaccedilatildeo autonocircmica da atividade cardiacuteaca

11

O Nodo Sinoatrial (NS) apresenta a frequecircncia de disparo mais intensa no

coraccedilatildeo estimulando outros locais como os nodos atrioventriculares que principiam

seus proacuteprios impulsos eleacutetricos E com a ausecircncia de influecircncias hormonais ou neurais

a frequecircncia cardiacuteaca (FC) permanece equivalente agrave frequecircncia de disparos do NS ou

seja constante (STAUSS 2007)

Os sistemas nervoso simpaacutetico (SNS) e parassimpaacutetico (SNP) estatildeo

constantemente ativados regulando a atividade cardiacuteaca com a predominacircncia de um ou

outro conforme a situaccedilatildeo Em repouso a predominacircncia eacute vagal o que em humanos

leva a respostas raacutepidas de no maacuteximo 5 segundo na FC diminuindo-a em poucos

batimentos Jaacute as respostas da ativaccedilatildeo simpaacutetica ocorrem apoacutes cinco segundos

aumentando progressivamente chegando a sua resposta maacutexima de aumento da FC

apoacutes 20 a 30 segundos (HAINSWORTH 1995)

No entanto os sistemas simpaacutetico e parassimpaacutetico atuam de forma simultacircnea

na regulaccedilatildeo da atividade cardiacuteaca onde o aumento da atividade vagal natildeo resulta tatildeo

logo na reduccedilatildeo da atividade simpaacutetica e vice-versa (VON BORELL et al 2007)

Quando o SNS eacute ativado as fibras nervosas promovem a descarga de

noradrenalina (NA) nos aacutetrios e ventriacuteculos que por sua vez juntamente com a

adrenalina liberada pela adrenal estimula os receptores β1 adreneacutergicos presentes no

coraccedilatildeo ativando atraveacutes de uma proteiacutena G excitatoacuteria (Gs) a enzima adenilato ciclase

(AC) agrave produzir AMPc Seu aumento intracelular leva agrave ativaccedilatildeo da proteiacutena quinase

dependente de AMPc aumentando as correntes de canais iocircnicos de Ca+2

e Na+

acelerando a velocidade de despolarizaccedilatildeo levando ao aumento da frequecircncia de

disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas do NA desencadeando o aumento da

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Do mesmo modo o miocaacuterdio atrial o nodo aacutetrio-ventricular e o NS satildeo

inervados pelas fibra nervosa parassimpaacutetica dos nervos vagos liberando acetilcolina

(ACh) ativando receptores M2 que estatildeo acoplados a uma proteiacutena G inibitoacuteria (Gi)

inibindo a siacutentese de AMPc intracelular reduzindo a atividade da PKA Aleacutem de a ACh

ativar uma corrente de efluxo de K+ gerando uma hiperpolarizaccedilatildeo da membrana

levando ao aumento do limiar de ativaccedilatildeo do potencial de accedilatildeo sinusal o que reduz a

12

frequecircncia de disparo de potenciais de accedilatildeo das ceacutelulas sinusais diminuindo por fim a

frequecircncia cardiacuteaca (CURI amp PROCOPIO 2009)

Existem diferenccedilas no tempo de resposta da ativaccedilatildeo dos ramos simpaacutetico e

parassimpaacutetico que ocorrem em certo modo pela liberaccedilatildeo lenta de noradrenalina nos

terminais nervosos simpaacuteticos e pelas fibras preacute-ganglionares vagais serem

mielinizadas contribuindo para uma transmissatildeo eleacutetrica mais raacutepida Aleacutem das

diferenccedilas anatocircmicas entre os ramos como eacute o caso dos corpos celulares preacute-

ganglionares do parassimpaacutetico localizados dentro do coraccedilatildeo enquanto que os corpos

celulares preacute-ganglionares simpaacuteticos se localizam no gacircnglio paravertebral (VON

BORELL et al 2007)

232 A Anaacutelise espectral da Variabilidade do Intervalo Cardiacuteaco (VIC)

A manutenccedilatildeo da homeostase do sistema cardiovascular eacute resultado da oscilaccedilatildeo

riacutetmica de componentes regulatoacuterios da atividade cardiacuteaca onde se observa intervalos

irregulares de tempo entre os batimentos consecutivos (VON BORELL et al 2007)

A anaacutelise da variabilidade do intervalo cardiacuteaco pode ser realizada atraveacutes dos

iacutendices no domiacutenio do tempo e da frequecircncia

No domiacutenio do tempo cada intervalo entre um batimento cardiacuteaco e outro pode

ser medido em milissegundos e no domiacutenio da frequecircncia as flutuaccedilotildees riacutetmicas podem

caracterizar os estados de repouso e atividade influindo na seacuterie cronoloacutegica contida

entre os intervalos tornando possiacutevel a mensurar a atividade do SNA (HOSHI 2009

SONG et al 2006)

Os dados satildeo obtidos atraveacutes da gravaccedilatildeo dos intervalos entre batimentos

cardiacuteacos feitos por frequenciacutemetros capazes de detectar em milissegundos (ms) o

tempo entre os batimentos e armazenaacute-los (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al

2007)

A teacutecnica utilizada com esse objetivo eacute chamada de anaacutelise espectral e consiste

no uso de algoritmos matemaacuteticos como eacute o caso da transformada raacutepida de fourier

(FFT) para obter diagramas dimensionais Dispondo em um graacutefico os componentes

oscilatoacuterios de frequecircncia da VIC no eixo X e a amplitude dos componentes oscilatoacuterios

no eixo Y permitindo atraveacutes dessa teacutecnica determinar a forccedila espectral das

frequecircncias baixas e altas da VIC

13

Nesse contexto os dois Sendo assim os dois componentes de frequecircncia principais satildeo

divididos atraveacutes da anaacutelise espectral em Frequecircncia baixa (LF) caracterizado pelo

espectro de 004 a 015Hz e Frequecircncia alta (HF) situada na faixa de 015 a 04 Hz na

anaacutelise espectral (KAWASE et al 2002 VON BORELL et al 2007 PICCIRILLO et

al 2009)

Quando os IRR satildeo dispostos em uma escala de tempo um graacutefico eacute

confeccionado e as oscilaccedilotildees formadas representam a accedilatildeo dos diferentes componentes

regulam os pulsos cardiacuteacos onde as frequecircncias mais altas representam a atividade

riacutetmica resultante da ativaccedilatildeo parassimpaacutetica e as mais baixas exibem aquelas

resultantes da atividade simpaacutetica (LOMBARDI 1997 VON BORELL et al 2007)

(Figura 2)

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC

Figura 2 Anaacutelise espectral da VIC Variabilidade do intervalo cardiacuteaco em um indiviacuteduo

jovem durante o repouso e quando em movimento A seacuterie temporal de intervalos RR estaacute

Repouso Movimento

14

disposta nos graacuteficos do topo Os graacuteficos centrais ilustram a presenccedila de dois componentes

principais da densidade espectral LF e HF Durante o movimento o componente LF se torna

predominante em relaccedilatildeo ao repouso Os graacuteficos na base da figura demonstram a distribuiccedilatildeo

relativa dos dois componentes (representada pela aacuterea) (MALLIANI 1997)

A razatildeo entre os dois componentes de frequecircncia eacute calculada a partir dos valores

obtidos de LF e HF resultando em valor que representa o balanccedilo entre a atividade

simpaacutetica e parassimpaacutetica aleacutem de possibilitar a decomposiccedilatildeo dos componentes

espectrais atraveacutes do caacutelculo das frequecircncias centrais desses componentes que se

situam impliacutecitos no sinal da variabilidade (PAGANI et al 1986 LOMBARDI et

al1996 LOMBARDI 1997 MALLIANI et al 1997 VON BORELL et al 2007

HARADA et al 2005)

A anaacutelise espectral da VIC natildeo acessa o tocircnus autonocircmico cardiacuteaco mas sim o

seu balanccedilo o que justifica a ocorrecircncia de alteraccedilotildees na capacidade do coraccedilatildeo de

responder a esses estiacutemulos quando haacute alteraccedilotildees crocircnicas na atividade autonocircmica

Nesses casos natildeo seria aplicaacutevel a anaacutelise espectral da VIC (STAUSS 2007

PICCIRILLO et al 2009)

Deste modo a anaacutelise espectral da VIC tem como principal utilidade a funccedilatildeo de

indicadora da atividade autonocircmica em resposta ao estresse psicoloacutegico e fiacutesico (VON

BORELL et al 2007) E quando eacute aplicada no estudo das alteraccedilotildees agudas da

atividade autonocircmica cardiacuteaca essa anaacutelise eacute utilizada de maneira a obter dados

fidedignos onde diante de uma resposta ao estresse psicoloacutegico pode ser observado um

aumento agudo na atividade cardiacuteaca simpaacutetica caracterizado pelo aumento do

componente LF com provavelmente baixa ou nenhuma alteraccedilatildeo do componente HF

(STAUSS 2007)

24 Estiacutemulo Sonoro em Catildees

O oacutergatildeo auditivo dentre outras funccedilotildees se caracteriza especialmente por seu

desempenho no reconhecimento de situaccedilotildees ameaccediladoras estando em funcionamento

ininterrupto atraveacutes da conexatildeo direta do ouvido interno com os mecanismos neurais de

ldquoluta ou fugardquo Esse sistema eacute capaz de diferenciar sons de frequecircncias e intensidades

relevantes para a sobrevivecircncia do indiviacuteduo em seu meio ambiente (WESTMAN amp

WALTERS 1981)

15

A percepccedilatildeo do som colabora no balanccedilo homeostaacutetico do sistema nervoso

central influenciando consequentemente o equiliacutebrio fisioloacutegico de forma geral atraveacutes

dos centros autonocircmicos e neuroendoacutecrinos do hipotaacutelamo variando em resposta

conforme o significado do estiacutemulo sonoro e sua intensidade previsibilidade

variabilidade e complexidade

Nesse contexto as respostas fundamentais ao som satildeo de orientaccedilatildeo reflexo de

surpresa e de defesa Sendo a resposta de orientaccedilatildeo fundamental por ser a reaccedilatildeo

comportamental de busca pela fonte sonora permitindo que o indiviacuteduo se prepare para

a resposta necessaacuteria e caso o reconhecimento do som mostre ser esse de baixa

significacircncia a habituaccedilatildeo iraacute ocorrer diminuindo o grau da reaccedilatildeo

Jaacute o reflexo de surpresa iraacute ocorrer em resposta a sons repentinos de alta

intensidade e caraacuteter assustador podendo ser atenuado quando o indiviacuteduo sabe que ele

iraacute ocorrer e podendo ser exacerbado em situaccedilotildees de tensatildeo medo e de abalo

emocional

E a resposta de defesa acontece em resposta a sons de significado intensidade e

duraccedilatildeo relacionados agrave ameaccedila onde haacute excitaccedilatildeo emocional e preparaccedilatildeo dos sistemas

para a accedilatildeo consistindo na resposta de estresse (WESTMAN amp WALTERS 1981)

Alguns sons adquirem significado particular para o indiviacuteduo representando

perigo em potencial assim como os sons de caracteriacutesticas ameaccediladoras Mas

geralmente o significado conotativo de um som potencialmente ameaccedilador estaacute no fato

de ser desconhecido e apresentar mudanccedilas raacutepidas de intensidade aleacutem das associaccedilotildees

extra-auditivas relacionadas a ele Aleacutem disso a previsibilidade desse estiacutemulo sonoro

tambeacutem poderaacute constituir um fator determinante na resposta jaacute que sons imprevisiacuteveis

caracterizam-se como um estiacutemulo estressor maior desencadeando uma reduccedilatildeo geral

de performance e uma baixa toleracircncia a frustraccedilotildees (WESTMAN amp WALTERS

1981)

Os catildees particularmente apresentam muita sensibilidade a estiacutemulos sonoros

visto que seu sistema auditivo eacute extremamente desenvolvido especialmente com a

funccedilatildeo de caccedila e guarda Poreacutem a resposta de defesa exagerada dos indiviacuteduos dessa

espeacutecie tem sido relatada principalmente aos sons de fogos de artifiacutecio trovatildeo e tiro de

16

armas de fogo Provavelmente o caraacuteter imprevisiacutevel a conotaccedilatildeo negativa que a

espeacutecie apresenta a esses sons e a intensidade proacutexima ao limiar de audiccedilatildeo possa

justificar tal reaccedilatildeo (HYDBRING et al 2004)

E eacute com base nessa reaccedilatildeo desmedida que os estiacutemulos sonoros como os sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio vecircm sendo utilizados como modelos de estresse em catildees

(HYDBRING et al 2004 ENGELAND et al 1990) Representando uma opccedilatildeo para o

estudo da reatividade ao estresse que pode ser comparada ao modelo de estresse

acuacutestico de sobressalto em ratos

25 Alteraccedilotildees comportamentais em catildees

Ao iniciar um estudo a respeito de uma espeacutecie deve-se ter em mente que cada

sujeito analisado natildeo eacute um sistema inerte e fechado mas sim um somatoacuterio de eventos

que possibilitam ter um exame mais amplo e completo das interaccedilotildees do animal com o

ambiente (SULTAN 2003 BATESON et al 2004)

Assim o estudo comportamental se mostra uma importante ferramenta pois

permite entender que processos bioloacutegicos satildeo compostos por eventos fisioloacutegicos e

psicoloacutegicos natildeo havendo exclusatildeo entre eles mas sim uma sobreposiccedilatildeo com fortes

correlaccedilotildees (HARVERBEKE et al 2008 BEERDA 1999 SPANGENBERG 2006

MONTANHA et al 2009) Conhecer a etologia canina iraacute permitir uma melhor

utilizaccedilatildeo do animal respeitando seus limites e possibilitando a manutenccedilatildeo fiacutesica e

mental dentro dos padrotildees de bem-estar da espeacutecie (SNOWDON 1999 DAWNKINS

1989 DARWIN 2004)

Com relaccedilatildeo ao bem-estar Broom amp Johnson (1993) e Broom amp Fraser (2010)

definem como o estado de um animal em relaccedilatildeo agraves suas tentativas de se adaptar ao

meio em que vive Para os animais domeacutesticos principalmente para os animais de

companhia esse eacute um conceito que muitas vezes pode ser confundido e mal aplicado

pelo homem agrave medida que esse confronta a realidade do animal com a sua proacutepria

passando a adequar paracircmetros humanos a esses animais

Os catildees satildeo marcados pela socializaccedilatildeo baseada em relaccedilotildees familiares com

organizaccedilotildees flexiacuteveis e respostas a um liacuteder aleacutem de possuiacuterem necessidade de

17

ambientes complexos e variados marcadamente importantes na vida gregaacuteria de seus

ancestrais (BROOM amp FRASER 2010)

Pensando nisso um manejo inadequado pode ter consequecircncias que variam

desde alteraccedilotildees comportamentais a quadros patoloacutegicos tendo como agravantes

alteraccedilotildees substanciais nos seus niacuteveis de bem-estar

Poreacutem o estudo do comportamento animal ainda se mostra bastante pioneiro jaacute

que as pesquisas cientiacuteficas a niacutevel cliacutenico comeccedilaram a ser realizados haacute poucas

deacutecadas em animais com problemas comportamentais

Dessa forma se faz presente a necessidade de um maior desenvolvimento de

estudos e pesquisas nesse sentido visto que os problemas comportamentais satildeo

apontados como a principal causa de abandono ou morte de animais de companhia

apresentando maior nuacutemero de relatos do que as doenccedilas infecciosas neoplaacutesicas e

metaboacutelicas concomitantes (OVERALL et al 2001)

A relaccedilatildeo homem-animal eacute muito antiga mas eacute pouco estudada E isso faz com

que o diagnoacutestico e o tratamento dos distuacuterbios comportamentais sejam dificultados

Muitas vezes a origem dos problemas comportamentais estaacute ligada ao tipo de

relacionamento existente entre o homem e o seu animal E isso acontece porque os

animais passam por processos de humanizaccedilatildeo para se adaptarem ao modo e ao estilo de

vida do seu proprietaacuterio nem que para isso tenham que modificar as suas caracteriacutesticas

naturais (OVERALL et al 2001)

Embora os catildees apresentem uma flexibilidade comportamental as exigecircncias

criadas pelos seus proprietaacuterios podem desencadear conflitos e frustraccedilotildees que levam ao

aparecimento de problemas comportamentais (OVERALL et al 2001)

Com frequecircncia o stress ou a ansiedade estatildeo relacionados com o ambiente e

mostram que o limiar entre normal e anormal varia entre indiviacuteduos (BEAVER 2005)

O rompimento da homeostase pode resultar de estimulaccedilatildeo interna externa ou

ambos E o potencial de ruptura da homeostase aumenta com a magnitude do desafio

(APPLEBY amp PLUIJMAKERS 2004) Dessa forma sendo a fobia um transtorno de

reaccedilotildees exageradas e desproporcionais ao real grau de importacircncia do estimulo

18

estressor podemos sugerir que o indiviacuteduo foacutebico eacute mais susceptiacutevel ao estresse de

forma geral reagindo com paracircmetros mais facilmente alterados

26 Fobia em catildees

Medo e ansiedade satildeo funccedilotildees adaptativas de sobrevivecircncia que sinalizam para o

organismo a presenccedila de perigo em potencial no ambiente O medo eacute a resposta

imediata acionada por um evento ou objeto potencialmente nocivo e ansiedade envolve

processos cognitivos mais complexos como antecipaccedilatildeo e preocupaccedilatildeo com

hipervigilacircncia diante de um perigo iminente no ambiente (FEINSTEIN et al 2011)

Entre as respostas comportamentais e fisioloacutegicas claacutessicas imediatas do medo

destacam-se o congelamento sobressalto aumento da frequecircncia cardiacuteaca alteraccedilotildees da

pressatildeo arterial e aumento da vigilacircncia Satildeo respostas comportamentais e perceptivas

que facilitam as respostas defensivas como a fuga e esquiva de forma apropriada afim

de reduzir o perigo ou lesatildeo (CHUDASAMA 2009)

O neurocircuito do medo envolve principalmente a amiacutegdala estrutura cerebral

responsaacutevel pela detecccedilatildeo geraccedilatildeo e manutenccedilatildeo das emoccedilotildees relacionadas ao medo e

ansiedade Eacute uma estrutura complexa pertencente ao sistema liacutembico que consiste em

aproximadamente 10 nuacutecleos que coordenam respostas apropriadas agrave ameaccedila e ao

perigo atraveacutes das respostas comportamentais cardiovasculares e endoacutecrinas ao

estresse (ROSEN amp SCHULKIN 1998)

A amiacutegdala faz ligaccedilotildees entre as aacutereas do coacutertex cerebral e recebe informaccedilotildees

de todos os sistemas sensoriais permite a integraccedilatildeo da informaccedilatildeo proveniente das

diversas aacutereas atraveacutes de conexotildees excitatoacuterias e inibitoacuterias

Os nuacutecleos basolaterais satildeo as principais portas de entrada da amiacutegdala

recebendo informaccedilotildees sensoriais e auditivas vindas do taacutelamo coacutertex sensorial e

associativo (Figura 3) Ele estaacute sob tocircnica inibiccedilatildeo GABAeacutergica e quando bloqueada

esta inibiccedilatildeo resulta em aumento do comportamento de ansiedade com ativaccedilatildeo

cardiovascular simpaticamente mediada (KESSLER et al 2005)

19

Figura 3 Vias envolvidas no processamento da informaccedilatildeo emocional A informaccedilatildeo

sensoacuteria eacute transmitida para o taacutelamo atraveacutes da via leminiscal A aferecircncia auditiva chega na

divisatildeo ventral do nuacutecleo geniculado medial e projeta-se para o coacutertex auditivo primaacuterio

enquanto outras vias extra leminiscais carreiam informaccedilotildees auditivas para outras partes do

taacutelamo como a divisatildeo medial do nuacutecleo geniculado medial e nuacutecleos intralaminares

posteriores que se projetam tanto para o coacutertex auditivo primaacuterio quanto para o coacutertex auditivo

associativo assim como para os nuacutecleos basolaterias da amiacutegdala Essa via do taacutelamo para

amiacutegdala eacute implicada na aprendizagem emocional (IVERSEN et al 2003)

A amiacutegdala ventrolateral em seres humanos eacute mais sensiacutevel aos estiacutemulos

negativos (especialmente se os estiacutemulos sinalizam informaccedilatildeo negativa iminente) E a

amiacutegdala centromedial (CMA) dorsal tem projeccedilotildees principalmente subcorticais

especialmente aquelas ligadas ao hipotaacutelamo lateral e substacircncia cinzenta periaquedutal

(PAG) Essas projeccedilotildees podem explicar em parte as respostas fisioloacutegicas associadas

ao medo com o hipotaacutelamo (Figura 4) (KESSLER et al 2005)

Kandel 2003

20

Figura 4 Conexotildees diretas entre o nuacutecleo central da amiacutegdala e uma variedade de aacutereas

hipotalacircmicas e do tronco encefaacutelico envolvidas no medo e na ansiedade (IVERSEN et al

2003)

O Locus coeruleus importante nuacutecleo com grande densidade de neurocircnios

noradreneacutergicos com papel no desencadeamento da resposta ao estresse e das reaccedilotildees de

fuga tem tambeacutem papel importante no controle do medo A desregulaccedilatildeo desse nuacutecleo

parece ter relaccedilatildeo com o aparecimento do pacircnico e fobias em humanos (CHARNEY

1984) certamente atraveacutes de sua ligaccedilatildeo ao sistema liacutembico (CHARNEY 1984)

Medos podem desenvolver-se gradualmente e pode haver variaccedilatildeo na resposta

Em contraste fobias geralmente se desenvolvem rapidamente e uma vez desenvolvidas

haacute pouca mudanccedila em sua apresentaccedilatildeo entre as seacuteries Situaccedilotildees indutoras de fobia ou

satildeo evitadas a todo custo pelo foacutebico ou se inevitaacutevel satildeo suportadas com intensa

ansiedade e sofrimento (OVERALL 2010)

A Associaccedilatildeo Norte Americana de Psiquiatria no manual de diagnoacutestico e

estatiacutestica de transtornos mentais (DSM-IV-TR 2002) e a CID-10 (1993) definem em

humanos fobias especiacuteficas como medos irracionais excessivos acentuados e

persistentes revelados pela presenccedila ou antecipaccedilatildeo de um objeto situaccedilatildeo ou

atividade foacutebica especiacutefica de forma desproporcional acompanhados de

comportamentos de fuga esquiva antecipaccedilatildeo ansiosa e intenso sofrimento

Geralmente natildeo envolvem uma ameaccedila imediata para a homeostase fisioloacutegica

mas leva o indiviacuteduo a um estresse agudo com respostas condicionadas ao medo

21

coordenadas pelo sistema liacutembico que atua ativando entre outros sistemas o eixo

HHA e o Sistema Nervoso Simpaacutetico

Em catildees natildeo haacute ateacute o momento descrito na literatura uma definiccedilatildeo oficial para

tal transtorno

As fobias satildeo transtornos de ansiedade de difiacutecil cura e geralmente a memoacuteria

de uma resposta foacutebica pode desencadear outros transtornos de ansiedade Dessa forma

o tratamento tem importacircncia natildeo soacute pela questatildeo do bem-estar e qualidade de vida

mas tambeacutem devido a seus componentes de comorbidade (OVERALL 2010)

Resposta exagerada a sons de trovatildeo estatildeo entre as doenccedilas comportamentais

mais comumente associados com pacircnico ou fobia em catildees Ocorre geralmente em

todas as raccedilas embora natildeo existam dados sobre a incidecircncia relativa destes problemas

(OVERALL et al 2001 DUNHAM amp FRANK 2001 VOITH amp BORCHELT 1985)

A fobia agrave sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio constitui uma classe que apresenta

resposta extrema repentina e profunda e que apesar de existir uma variaccedilatildeo consideraacutevel

nas respostas dos catildees (BEERDA SCHILDER VAN HOOFF VRIES 1997) no geral

se manifesta com comportamentos de ansiedade associados com atividades acentuadas

do sistema nervoso simpaacutetico Os comportamentos podem incluir catatonia ou mania

concomitante com diminuiccedilatildeo da sensibilidade ou capacidade de resposta agrave dor ou

estiacutemulos sociais aleacutem de fuga vocalizaccedilatildeo salivaccedilatildeo micccedilatildeo defecaccedilatildeo tremores

comportamentos autodestrutivos e ateacute convulsotildees (OVERALL 2010 SHULL-

SELCER amp STAGG 1991)

Jaacute se sabe que existe um fator hereditaacuterio para esse tipo de fobia e embora os

mecanismos pelos quais ela ocorre ainda natildeo sejam compreendidos parece estar em

alguma alteraccedilatildeo na forma como a informaccedilatildeo eacute processada entre a amiacutegdala e o coacutertex

(OVERALL 2010)

E como ansiedade medos e fobias satildeo queixas comportamentais comuns e

problemaacuteticas dos donos de catildees a falta de tratamento pode resultar no rompimento do

viacutenculo humano-animal e posterior abandono desistecircncia ou ateacute mesmo eutanaacutesia do

catildeo afetado (MILLS etal 2003)

22

3 MATERIAIS E MEacuteTODOS

31 Local de Execuccedilatildeo do Trabalho Experimental

Os procedimentos experimentais foram realizados na Estaccedilatildeo experimental de

Parasitologia Veterinaacuteria do Departamento de Parasitologia Animal (DPA) da

Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) e no Laboratoacuterio de Fisiologia

Animal do Departamento de Ciecircncias Fisioloacutegicas (DCF) da UFRRJ Todos os

procedimentos estatildeo de acordo com a lei de bem-estar animal Instruccedilatildeo Normativa ndeg

56 de 2008 O presente experimento encontra-se aprovado pelo Comitecirc de Eacutetica na

Pesquisa da UFRRJ CEUA-IB nordm 2308347962014-14

32 Animais

Foram entrevistados 35 proprietaacuterios de catildees entre os quais foram selecionados

28 com 2 a 6 anos de idade pesando de 10 a 30 Kg doacuteceis saudaacuteveis com vacinas e

vermifugaccedilatildeo em dia do muniacutecipio de Seropeacutedica-RJ

Proprietaacuterios de animais com medo de sons de trovatildeo e fogos de artificio

interessados em participar do estudo e proprietaacuterios de animais sem medo convidados a

participar do estudo incialmente responderam a um formulaacuterio de cadastro dos

animais contendo dados gerais e histoacuterico de respostas comportamentais em geral

(Anexo 1) Em seguida os animais foram submetidos a um exame cliacutenico baacutesico que

constitiu em inspeccedilatildeo palpaccedilatildeo auscultaccedilatildeo e termometria retal e um exame

neuroloacutegico para descartar doenccedilas concomitantes (Anexo 2) Foram dispensados

animais arredios agressivos com peso ou idade fora da faixa estabelecida no criteacuterio de

seleccedilatildeo e animais doentes Os animais selecionados foram caracterizados como foacutebicos

e natildeo-foacutebicos a sons de trovatildeofogos de artifiacutecio e entatildeo submetidos uma uacutenica vez ao

modelo de estresse sonoro A caracterizaccedilatildeo de animais foacutebicos foi realizada conforme

as respostas dos proprietaacuterios ao questionaacuterio de reaccedilotildees comportamentais aos sons de

trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009 CROWELL-

DAVIS 2003) (Anexo 3)

23

Meios de divulgaccedilatildeo do estudo atraveacutes de folder e cartazes de divulgaccedilatildeo do projeto

veiculado pela internet e afixado em diversos estabelecimentos veterinaacuterios no

municiacutepio e pela UFRRJ (Anexo 4)

Avaliaccedilatildeo comportamental atraveacutes de entrevista com o proprietaacuterio (questionaacuterio

adaptado de OVERALL 1997) (Anexo 1)

321 Consideraccedilotildees eacuteticas

A participaccedilatildeo no estudo ocorreu somente com a autorizaccedilatildeo dos entrevistados

mediante um termo de consentimento em que se garantia plena liberdade para

interromper a participaccedilatildeo quando desejado (Anexo 5) Natildeo houve riscos agrave sauacutede fiacutesica

ou mental dos animais que participaram do projeto

322 Caracterizaccedilatildeo de fobia a som

Os catildees foram selecionados para compor os grupos conforme as respostas ao

questionaacuterio comportamental previamente preenchido pelo proprietaacuterio

O questionaacuterio especiacutefico para medo de sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio

(Anexo 3) eacute composto de alguns paracircmetros comportamentais comuns em catildees foacutebicos

como atitude destrutiva eliminaccedilatildeo inadequada salivaccedilatildeo excessiva vocalizaccedilatildeo

esconder passadas arfar procurar pelo proprietaacuterio auto-trauma tremor Esses

parametros foram ainda classificados em escala de 0 (comportamento nunca observado)

a 5 (comportamento frequente e grave) (Adaptado de COTTAM amp DOGMAN 2009

CROWELL-DAVIS 2003)

Os catildees foram considerados aptos a participarem do grupo Foacutebicotrovatildeo e

Foacutebicosfogos quando

Apresentaram pelo menos trecircs dos comportamentos anteriores durante

o som de trovatildeo ou fogos de artifiacutecio com escore igual ou maior que 3

ou algum item com escore maacuteximo (5)

Ou as atitudes do animal no momento do som apresentaram risco a sauacutede

e integridade fiacutesica

E quando as respostas comportamentais foram apresentadas na maior

parte do tempo durante o estiacutemulo

24

33 Procedimentos Experimentais

O protocolo experimental foi realizado individualmente iniciando-se sempre agraves

9 horas da manhatilde Um pesquisador acompanhado de um pesquisador colaborador

realizou todo o protocolo experimental sem se ausentar em nenhuma etapa do

experimento

Dias antes do experimento os animais foram submetidos a um exame cliacutenico e

os proprietaacuterios responderam a questionaacuterios (Anexo 1 e 3) referentes ao manejo e

comportamento do animal

A partir dos dados dos questionaacuterios os animais foram classificados conforme

as respostas dadas referente ao medo de trovatildeo e fogos de artiacutefiacutecio entre animais com

histoacuterico comportamental de fobia a sons de trovatildeo e fogos de artifiacutecio (Foacutebicos) e

animais historicamente natildeo foacutebicos a esses sons (Natildeo-foacutebicos)

No dia do experimento cada animal foi submetido a inserccedilatildeo de um cateacuteter de

silicone endovenoso para coleta de sangue ainda em sua moradia (amostra 1 casa) e a

colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro (Polar Pro Trainer RS800CX) Os animais permaneceram

com o frequenciacutemetro durante todo o protocolo experimental

Apoacutes a colocaccedilatildeo do frequenciacutemetro os animais permaneceram no mesmo local

por 10 minutos para adaptaccedilatildeo ao frequeciacutemetro e registro dos dados de VIC do

momento basal 1 (casa) Em seguida cada animal foi transportado para o laboratoacuterio

onde foi executado o modelo de estresse sonoro agudo O transporte foi realizado

acondicionando o animal numa caixa de transporte num carro de passeio com

ventilaccedilatildeo adequada

Apoacutes a chegada ao local do experimento os animais permaneceram na sala sem

manipulaccedilatildeo e sem interaccedilatildeo por parte dos pesquisadores por 30 minutos para registro

dos dados de VIC do momento basal 2 (laboratoacuterio) Em seguida foi coletada a

segunda amostra de sangue (amostra 2 laboratoacuterio)

O estiacutemulo sonoro consistiu numa gravaccedilatildeo de sons de trovatildeo e outra de sons de

fogos de artifiacutecio numa intensidade sonora maacutexima de 103-104 dB e duraccedilatildeo de 2

minutos e 30 segundos (MACCARIELLO 2012)

Durante e apoacutes o fim do estiacutemulo sonoro cada animal permaneceu sem qualquer

manipulaccedilatildeo A terceira coleta de sangue foi realizada 5 minutos apoacutes o teacutermino do

estresse (amostra 3) a quarta aos 15 minutos (amostra 4) a quinta aos 30 minutos

(amostra 5) e a sexta coleta aos 60 minutos apoacutes o teacutermino do estresse (amostra 6)

25

A filmagem foi realizada durante todo o experimento para registrar as reaccedilotildees

comportamentais

Apoacutes a uacuteltima coleta o polar foi retirado e o animal levado de volta para sua

casa no mesmo transporte e nas mesmas condiccedilotildees em que veio

Figura 5 Esquema do protocolo experimental

331 Estiacutemulo Sonoro

Os estiacutemulos sonoros consistiram de uma gravaccedilatildeo com duraccedilatildeo de 2 minutos e

30 segundos de sons de trovatildeo mixados alternadamente a partir de dois arquivos

sonoros no formato wave (ldquovery loud thunder close thunder crackrdquo e ldquohigh quality

stereo sound of a major thunder clap during a stormrdquo) e outra gravaccedilatildeo de sons de

fogos de artifiacutecio mixado de um arquivo sonoro no formato wave (ldquocontinuous

fireworkrdquo) adquiridos no endereccedilo eletrocircnico httpwwwsound-effectcom

O formato utilizado possui a vantagem de ser uma gravaccedilatildeo que preserva todas

as variaccedilotildees de frequecircncia do som original A intensidade do som foi padronizada

atraveacutes de um decibeliacutemetro modelo BK Precision 732A Sound Level Meters a 103-

104 dB por ser uma pressatildeo sonora capaz de aumentar as concentraccedilotildees de cortisol

seacuterico em catildees estando abaixo dos limites que possam causar danos ao aparelho

auditivo (ISING et al 1999)

O estiacutemulo sonoro foi emitido por um aparelho de som (Pioneer home theater

DVD 120w RMS) com 5 caixas de som acopladas Cada animal foi posicionado a um

metro das caixas de som Para observaccedilatildeo das reaccedilotildees comportamentais cada animal foi

contido apenas por uma guia solta de 15 m podendo reagir e se locomover

naturalmente sem intervenccedilotildees