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INDICE
RESUMEN…………………………………………………………………... 1 INTRODUCCION…………………………………………………………… 2 ORIGEN DE LA ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA 1.1 Origen de la Enfermedad……………………………………………. 3 1.2 Definición………………………………………………………………. 4
PRION
2.1 Etiología………………………………………………………………... 5 2.2 Prion: Agente Causal………………………………………………… 6 2.3 Características de los Priones……………………………………... 7 2.4 Neuroinvasión del Prion…………………………………………….. 8
TRANSMISION DE LA EEB
3.1 Factores Predisponentes…………………………………………… 9 3.2 Transmisión…………………………………………………………… 10 3.3 Huésped………………………………………………………………... 12 3.4 Cuadro Clínico………………………………………………………… 12 3.4.1 Periodo de incubación…………………………………………. 12 3.4.2 Signos clínicos………………………………………………….. 12 3.5 Lesiones………………………………………………………………... 13 3.5.1 Topografía de las lesiones…………………………………….. 14 3.6 Diagnostico……………………………………………………………. 15 3.6.1 Western Blot…………………………………………………….. 15 3.6.2 Inmunohistoquimico……………………………………………. 15 3.6.3 Elisa……………………………………………………………… 16 3.6.4 Diagnostico diferencial…………………………………………. 16 3.7 Tratamiento……………………………………………………………. 16 3.8 Prevención…………………………………………………………….. 16 3.8.1 Reglamento establecido en los países afectados para el
control y erradicación de la EEB………………………………………….. 17
3.9 Situación Actual en México de la EEB……………………………. 18
HIPOTESIS 4.1 Hipótesis Nula………………………………………………………… 19
MATERIALES Y METODOS
5.1 Obtención del Tallo Cerebral en Rastro………………………….. 20 5.2 Envió de Muestras a Laboratorio………………………………….. 25
RESULTADOS………………………………………………….. 27
CONCLUSIONES………………………………………………. 28
GLOSARIO…………………………………………………….... 29
BIBLIOGRAFIA……………………………………………….... 30
INDICE DE FIGURAS
FIG. 1 Estructura tridimensional de la proteína priónica……………. 7 FIG. 2 Neuroinvasión………………………………………………………. 9 FIG. 3 Origen de la epidemiologia de EEB en Reino Unido………… 11 FIG. 4. Histopatología de un cerebro con EEB………………………... 14
INDICE DE TABLAS
Tabla.1 Infectividad de los tejidos……………………….……………… 4
INDICE DE FOTOGRAFIAS
FOTO. 1 Cuchara Especial………………………………………………... 20 FOTO. 2 Vista Lateral de la Cabeza de un Bovino……………………. 21 FOTO. 3 Cabeza en Posición Decúbito-Caudal……………………….. 21 FOTO. 4 Separación de los Pares Craneales con el Dedo………….. 21 FOTO. 5 Separación de los Pares Craneales con el Dedo………….. 21 FOTO. 6 Separación de los Pares Craneales con Pinzas…………… 22 FOTO. 7 Separación de los Pares Craneales con Pinzas…………… 22 FOTO. 8 Introducción de la Cuchara con la Punta Hacia Abajo…… 22 FOTO. 9 Giro de la Cuchara en 180º…………………………………….. 23 FOTO.10 Giro de la Cuchara en 180º……………………………………. 23 FOTO.11 Extracción Casi Total del Tallo Cerebral…………………… 23 FOTO. 12 Diferentes Tallos Cerebrales………………………………… 24 FOTO. 13 Complicaciones en la Extracción del Tallo Cerebral……. 24 FOTO. 14 Muestra del Tallo Cerebral…………………………………… 25 FOTO. 15 Empaque y Envió de la Muestra…………………………….. 25 FOTO. 16 Sistema para la Identificación de la Muestra……………... 26
1
RESUMEN
Para detectar la posible presencia de Encefalopatía Espongiforme Bovina en la
región de Torreón, Coahuila, se tomaron un total de 683 muestras de tallos
cerebrales en un periodo comprendido de enero de 2010 a abril del mismo año.
Estos tallos cerebrales se obtuvieron en el rastro municipal planta tipo inspección
federal (TIF) número (243) ubicado en la ciudad de Torreón, Coahuila.
Estos tallos cerebrales fueron enviados al laboratorio de nivel 2 de la comisión
México-Estados Unidos para la prevención de la fiebre aftosa y otras
enfermedades exóticas en los animales (CPA) ubicado en Torreón, Coahuila, para
su diagnostico.
Los resultados fueron negativos a EEB de todos los tallos cerebrales enviados.
Palabras clave: Detección, prevención de Encefalopatía Espongiforme Bovina
(EEB), enfermedad neurodegenerativa, histopatología.
2
INTROCUCCION
La encefalopatía espongiforme bovina (EEB) es una enfermedad neurológica
mortal del ganado vacuno que fue reconocida por primera vez en Gran Bretaña en
1986. Los signos clínicos, la propagación y la transmisión de esta enfermedad
indican que se debe a un agente transmisible poco común que se ha denominado
de momento prion, para expresar que se trata de una proteína infecciosa. (10)
Ante la emergencia sanitaria mundial por la presencia de la Encefalopatía
Espongiforme Bovina (EEB) en continentes distintos al Europeo y la posibilidad de
que la (EEB) pudiese ser detectada en el Continente Americano, los gobiernos de
Argentina, Brasil, Colombia, Chile, México, Paraguay, Perú y Uruguay, solicitaron
a la FAO asistencia técnica para evaluar y fortalecer sus sistemas para prevenir la
enfermedad. La FAO aprobó el proyecto TCP/RLA/0177, cuya primera actividad
fue la realización de la “Consulta Técnica de Especialistas en EEB”, la cual fue
organizada conjuntamente entre el SAG y la FAO. (7)
La Encefalopatía Espongiforme Bovina (EEB) es considerada una zoonosis y
enfermedad emergente, y a pesar que no se ha reportado en nuestro país; por la
naturaleza de su propagación, en un escenario mundial, con un comercio
globalizado, nos plantea tener presente el riesgo de infección por EEB. Esta
condición potencial de riesgo, exige estrategias y políticas acordes con un
desarrollo sostenible y un enfoque de riesgo. Actualmente México lleva a cabo un
programa de vigilancia de neuropatías en rumiantes, el cual consiste por una lado
en la recolección de muestras de encéfalo de bovinos, caprinos y ovinos que
muestren signos de la enfermedad nerviosa (vigilancia pasiva), considerando los
aspectos, clínicos, epidemiológicos y evaluación del impacto en la salud humana.
(4)
3
ORIGEN DE LA ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
1.1 Origen de la Enfermedad.
La Encefalopatía Espongiforme Bovina fue confirmada por primera vez en 1986,
en el Reino Unido de Gran Bretaña e Irlanda del Norte y actualmente se
encuentra distribuida en la mayor parte de los países de Europa, además de
Israel, Japón, Canadá y Estados Unidos. (7)
Hace varias décadas que se conoce que el prión causaba en las ovejas una
enfermedad neurológica incurable llamada scrapie, muy extendida en Gran
Bretaña. Sin embargo, los despojos de estas ovejas fueron empleados en la
elaboración de piensos destinados a la engorda de ganado vacuno en la creencia
de que la enfermedad resultaba inofensiva para la especie bovina. Muy al
contrario, la enfermedad sí afectó al ganado vacuno. (6)
Considerando que el período de incubación de la enfermedad, entre 3-5 años, un
factor que probablemente influyó en la aparición de la enfermedad fue el cambio
que se practicó en los sistemas de procesamiento de las harinas de carne y
huesos entre 1981-1982, que consistió en la disminución del uso de solventes de
hidrocarbonos y la disminución de las temperaturas de tratamiento, esto pudo
resultar en un aumento de la supervivencia del agente infectante. La infectividad
del agente de EEB se ha demostrado en el cerebro, la médula espinal y en la
retina de animales afectados en forma natural y además de estos tejidos, en
animales infectados experimentalmente se ha demostrado infectividad en el íleon
terminal. De acuerdo con el documento de la Organización Mundial de la Salud,
con participación de la OlE, la infectividad de los tejidos y fluidos bovinos se ha
dividido en cuatro categorías dependiendo del mayor o menor grado de
probabilidades de ser infectantes. (12)
4
Categoría I Alta infectividad Cerebro, medula espinal, ojo.
Categoría II Infectividad media Bazo, amígdalas, ganglios linfáticos, pituitaria adrenal, duramadre, placenta, colón distal.
Categoría III Infectividad baja Nervios periféricos, mucosa nasal, timo, médula ósea, hígado, pulmón, páncreas.
Categoría IV Infectividad no detectable Músculo esquelético, corazón, glándula mamaria, sangre, suero, heces, riñón, tiroides, glándula salival, saliva, ovario, útero, testículo, tejidos fetales, calostro, leche, bilis, hueso, cartílago, tejido conectivo, piel, pelo y orina.
Tabla 1: Infectividad de los tejidos. (12)
1.2 Definición. La Encefalopatía espongiforme bovina (EEB), también llamada popularmente "mal
de la vaca loca", es una enfermedad mortal, degenerativa de curso subagudo o
crónico, que afecta al sistema nervioso central de los bovinos e impone por
razones éticas la eutanasia de los animales afectados. (1)
Es una afección degenerativa del sistema nervioso central de los bovinos
incurable, que caracteriza por la aparición de síntomas nerviosos en los animales
adultos tanto machos como hembras, que progresivamente concluye con la
muerte del animal. (7)
La enfermedad está causada por un agente transmisible no convencional que es
una proteína infecciosa denominada “prion”
Esta enfermedad se caracteriza por tener un periodo de incubación entorno a los
4-5 años.
Los síntomas de esta enfermedad están motivados por la acumulación del prion
en las células neuronales, originando la muerte celular. Un análisis microscópico
revela lesiones como vacuolas que dan al tejido nervioso un aspecto de esponja.
(17)
5
Esta enfermedad pertenece al grupo de enfermedades denominadas
Encefalopatías Espongiformes Transmisibles (EETs) como el Scrapie o Prurigo
Lumbar de los ovinos y la Enfermedad Crónica Desgastante de los venados y
renos. Se postula que el agente causal de la EEB es el mismo que provoca el
Scrapie ovino, el cual logro adaptarse a los bovinos; sin embargo, no ha sido
caracterizado completamente y se cree que es una partícula proteica infecciosa
(prion) de menor tamaño que un virus. (20)
Las EETs o TSEs, también son conocidas como enfermedades prionicas son una
familia extraña, de progreso lento y desordenes neurodegenerativos que afectan
uniformemente a humanos y animales. Todas estas enfermedades tienen
periodos de incubación de meses o años entre la infección y la aparición de
signos clínicos.(14)
PRION
2.1 Etiología. Su causa parece ser una proteína infecciosa a la que se ha llamado “Prión”
carente de ADN, muy resistente al calor, a los rayos ultravioleta y a los
desinfectantes químicos que habitualmente inactivan a los virus. Se trata de una
partícula aún más pequeña que un virus, un agente infectante no habitual y se
asemeja al agente responsable de una enfermedad que afecta a las cabras y
ovejas: el “scrapie” o prurigo lumbar.
Las vacas se contagiarían al comer piensos elaborados con restos de otros
animales. (3)
6
2.2 Prion: Agente Causal. El término "prion" es usado para describir el agente infeccioso responsable de las
encefalopatías espongiformes transmisibles. La palabra deriva de "proteinaceous
infectious particle", definición propuesta por StanleyB. Prusiner. (14)
Los priones se han definido como “pequeñas partículas proteínicas infecciosas las
cuales son resistentes a la inactivación por procedimientos que modifican los
ácidos nucleicos”. Los priones se forman a partir de una proteína proteasa-
resistente anormal o PrPres. Estos priones solo se han conseguido en el cerebro,
columna vertebral y retina de ganado infectado. La acumulación de PrPres en
células cerebrales, alterará la función de las células y eventualmente las matará.
Las enfermedades causadas por los priones se llaman corrientemente
encefalopatía espongiforme debido a la apariencia histopatológica postmortem del
cerebro el cual contiene grandes vacuolas (apariencia semejante a una esponja)
en la corteza cerebral y cerebelo. (23)
Los priones están presentes en distintos tejidos, como las fibras musculares, los
linfocitos, pero particularmente es abundante en el tejido nervioso. En los sujetos
enfermos se observa la presencia de una isoforma anormal, llamada "scrapie
prion protein" (PrPSc) o "BSE prion protein" (PrPBSE), según sea el caso. (17)
Esta proteína anormal proviene de la modificación de la proteína normal o PrPc.
Las dos proteínas, la isoforma aberrante y la normal, difieren en su estructura
espacial, pero también en su distinta resistencia al ataque por las enzimas
digestivas; mientras la PrPc es digerida, la PrPsc/PrPBSE no se ve afectada por
los jugos digestivos.
De acuerdo con lo anterior, una infección comienza con la ingestión o la
inoculación de la isoforma aberrante, PrP*, la cual promueve la conversión de la
proteína normal, PrPc, en proteína anormal. PrPsc. La recién formada proteína
anormal produce la conversión de más proteína normal, en la isoforma aberrante,
disparando una reacción en cadena con acumulación de PrPsc. (2)
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2.4 Neuroinvasión del Prion. Se denomina neuroinvasión al proceso por el cual los priones migran desde el
sitio de inoculación, por ejemplo, el aparato digestivo (ingesta de derivados
bovinos contaminados), hasta el sistema nervioso central donde causan la
sintomatología y la alteración histológica clásica de estas enfermedades.(2)
Los datos sugieren que la invasión por el prión se produce en dos etapas:
La primera de ellas (linfoinvasión) comprende el pasaje a través de la mucosa
gastrointestinal, aparentemente a nivel de las placas de Peyer del intestino. Las
células linfáticas que fagocitan al prión, viajan a otros órganos como el bazo, las
tonsilas o los linfonódulos. En esos órganos, que están bien inervados, tiene lugar
la primera replicación de la isoforma anormal PrPsc. Para que la infección desde
tejidos periféricos tenga éxito, estos deben expresar el gen PrP.
En una segunda etapa (neuroinvasión), la PrPsc asciende retrógradamente por
los axones que inervan a estos órganos linfáticos, alcanzado la médula espinal y
finalmente al encéfalo. A pesar de ser escasos los datos sobre esta etapa de la
propagación del prión, se ha demostrado la utilización de los nervios del sistema
nervioso autónomo para la propagación del prión.
Ambas etapas dependen de la presencia de linfocitos B. Se postula que su
función principal es el mantenimiento de las células dendríticas foliculares del
bazo y de los linfonódulos, por la producción de la linfotoxina-ß. (2)
9
Figura 2: Neuroinvasión: Las enfermedades prionicas tales como el Scrapie se manifiestan como una afección del SNC. Luego de ingresar por la vía digestiva el prion debe atravesar el epitelio intestinal, probablemente a través de las células M. Antes de llegar al cerebro ellos colonizan varios órganos. Los experimentos de Aucouturier y colaboradores, indican que las células dendríticas foliculares aisladas de bazos de ratones infectados pueden inducir la enfermedad cuando son inyectados intravenosamente en ratones inmunodeficientes Rag-1+, sugiriendo a las células dendríticas como posible ruta para la neuroinvasión. (2)
TRANSMISION DE LA ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
3.1 Factores predisponentes. A finales de los 80s Cols y Well descubrieron cambios espongiformes en el
cerebro de una vaca afectada de EEB. El origen de la epidemia de la EEB podría
estar relacionado con un cambio en el proceso de la explotación ganadera a
principios de los 80. De forma que los priones de la EEB no fueron inactivados
antes de alimentar a los bovinos con carne y huesos procedentes de otros
animales infectados. (6)
En la Gran Bretaña se suspendió en los 80s, el tratamiento de extracción de grasa
con solventes hidrocarbonados (hexano) en la elaboración de harinas de carne y
hueso, se cambio el proceso utilizando sistemas de bajas temperaturas. (10)
10
A principios de los 80s se incremento la población de ganado ovino en la Gran
Bretaña en un 16%, por lo que aumento el número de rebaños infectados con
Scrapie, por la tanto el número de ovejas infectadas con esta enfermedad, las
cuales se incluyeron en la elaboración de harinas de carne y hueso. (11)
Los científicos creen que esta enfermedad se transmite a los bovinos por la
alimentación con desechos de animales procesados de bovinos u ovinos
infectados. El prion es resistente a los procesamientos comerciales de
desactivación tales como el tratamiento térmico. (1)
El ganado lechero es mas susceptible a esta enfermedad que le ganado de
carne, ya que le ganado lechero recibe más raciones concentradas que pueden
contener harina de carne y huesos. (10)
3.2 Transmisión. La hipótesis que se ha aceptado como cierta es que la enfermedad ha llegado al
ganado vacuno a través de los piensos empleados en su alimentación. Hace
varias décadas que se conoce que el prión causaba en las ovejas una
enfermedad neurológica incurable llamada scrapie, muy extendida en Gran
Bretaña. Sin embargo, los desechos de estas ovejas fueron empleados en la
elaboración de piensos destinados al engorde de ganado vacuno en la creencia
de que la enfermedad resultaba inofensiva para la especie bovina. Muy al
contrario, la enfermedad sí afectó al ganado vacuno. (4)
La EEB sí ha traspasado la barrera entre especies y ha infectado a las personas a
través del consumo de material de riesgo proveniente de vacas que padecen la
enfermedad. (16)
Las investigaciones epidemiológicas realizadas, descartaron el contacto directo
entre bovino y ovejas, como una fuente de exposición a la infección para el
ganado. Por otra parte, los estudios realizados en la Gran Bretaña, no han
informado la transmisión horizontal de la EBB entre ganado sano y ganado
enfermo y por lo tanto animales importados, no pueden ser referidos como una
fuete de infección para el ganado nativo, excepto que sus despojos hayan sido
utilizados en la alimentación animal. (12)
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3.3 Huésped. La encefalopatía Espongiforme Bovina en condiciones naturales, afecta tanto al
ganado de leche como al ganado de carne, aunque se presenta con mayor
frecuencia en el ganado productor de leche debido a que este recibe más
raciones concentradas que pueden contener harinas de carne y huesos. (10)
3.4 Cuadro Clínico. 3.4.1 Periodo de Incubación. El promedio de edad de aparición de la EEB es de 5 años, con un rango que varía
de los 2 años hasta el límite de vida comercial del ganado. (18)
El periodo de incubación es de 3 a 5 años. En condiciones experimentales, se
puede inocular la enfermedad en bovinos de 5 meses, observando los primeros
síntomas después de un periodo de 37 semanas. (18)
3.4.2 Signos Clínicos. Dado que los signos clínicos aparecen a partir de los 3 a 5 años, la EEB solo se
puede observar en animales adultos. Los signos pueden durar de 1 a 6 meses o
hasta más de un año. Los signos nerviosos de los animales afectados de pueden
dividir en tres aspectos:
a) Comportamiento: Nervioso, miedo, cambio de comportamiento hacia la
gente conocida (agresividad), incremento en el lamido de la nariz y
sacudido de la cabeza, patadas, alteración del estado social en el hato. b) Sensibilidad: Hipersensibilidad al sonido, luz, tacto, especialmente de la
cabeza y cuello. El animal patea al ser tocado en sus extremidades.
c) Postura y movimientos: postura anormal de la cabeza, dificultad para
levantarse, ataxia, debilidad muscular espontanea, marcha insegura,
caídas continuas. Se pude concluir que los signos más frecuentes en los tres grupos son: aprensión,
frenesí, ataxia, temblores, caídas, hiperestesia táctil y auditiva, posición anormal
de la cabeza y agresividad. (20)
13
Signos no neurológicos: Otros signos menos frecuentes son la disminución de
la producción láctea, perdida de la condición corporal, exoftalmos, salivación,
lacrimacion, actitud de lamer los objetos.
Todos los estudios concuerdan que la enfermedad se presenta repentinamente en
animales adultos, de cualquier raza y sexo, y que el cuadro clínico puede variar
ligeramente de unos animales a otros. Además de la signología ya mencionada
se han detectado de forma más inconstante los siguientes signos: perdida rápida
de la condición corporal, aun conservando el apetito, descenso en la producción
de leche y rigidez de las orejas. (9)
3.5 Lesiones. Las lesiones que provocan las EET se producen únicamente a nivel del sistema
nervioso central. Concretamente en la EEB se inicia en los núcleos del tronco del
encéfalo , principalmente en la zona del puente y bulbo raquídeo o medula
oblongada, afectando principalmente al núcleo del tracto espinal del nervio
trigémino. sin embargo , en el examen histológico se observa un incremento en
número y en tamaño de los astrocitos , vacuolizacion neuronal, que consiste en
acumulación de vacuolas simples o múltiples en el citoplasma de las células ,
precisamente por el aspecto de esponja que presenta el cerebro infectado son
denominados espongiformes . (15)
La encefalopatía Espongiforme Bovina no presenta lesiones macroscópicas
significativas, las alteraciones más importantes solo son más apreciables
mediante el estudio histopatológico del Sistema Nervioso Central, en el que
domina un cuadro de degeneración espongiforme.
Las lesiones más significativas son los cambios degenerativos bilaterales y
simétricos en la materia gris del tallo cerebral y en el neurópilo se encuentran
numerosas microcavidades que recuerdan la imagen de una esponja, lo que se
conoce como degeneración espongiforme. Estas microcavidades pueden ser
simples o múltiples y presentar una forma ovalada o esférica. (20)
14
Las lesiones que se observan en animales afectados por EEB, se localizan
simétricamente en determinados centros nerviosos, especialmente en la medula
oblonga, siendo el núcleo dorsal del nervio vago, núcleo del tracto solitario y del
tracto espinal del nervio trigémino, los frecuentemente afectados.
Es de destacar que las encefalopatías no se acompañan de lesiones
inflamatorias: no aparece encefalitis. (22)
Figura 4: histopatología de un cerebro de bovino afectado con EEB. (9)
3.5.1 Topografía de las Lesiones de EBB. Las lesiones de EEB están limitadas a la sustancia gris del SNC. Su localización
anatómica concierne esencialmente a núcleos del tronco del encéfalo, también se
puede hallar en la sustancia gris de la medula espinal, corteza cerebral o
cerebelo. (24)
En el bovino, las lesiones se localizan principalmente en el tronco del encéfalo,
particularmente en la protuberancia anular y bulbo raquídeo. También puede
afectar anteriormente al mesencéfalo y posteriormente a la medula espinal.
En la mayoría de los casos las lesiones son simétricas, contrariamente a lo que
ocurre con el scrapie ovino en el que las lesiones son generalmente asimétricas.
No puede existir correlación entre absoluta entre la gravedad de los síntomas y la
severidad de las lesiones. (24)
15
3.6 Diagnostico. La manera de confirmar la enfermedad es a través de la observación
microscópica del tejido nervioso central del animal muerto o sacrificado, mediante
la observación de las lesiones específicas, reconfirmando la misma con una
prueba inmunoquímica (Western blot), y/o Inmunohistoquímicas, para determinar
la presencia de la proteína prion modificada PrPSc
. Hasta el presente no existe
ninguna prueba preclínica, o que pueda utilizarse para realizar el diagnóstico en el
animal vivo. El 99.6 % de los casos positivos a EEB pueden confirmarse
examinando una sección de la medula o bulbo raquídeo. (19)
3.6.1 Western Blot (WB).
La PrPsc también puede ser detectada mediante la extracción y purificación de
la proteína proveniente de tejido cerebral fresco o congelado, para este propósito
la parte de cerebro elegida es la parte de tronco del encéfalo caudal.
La fracción proteica se purifica mediante el tratamiento con proteinasa K y
después se separa mediante electroforesis en un gel de poliacrilamida, que se
trasfiere a un papel de nitrocelulosa. Dicho papel es enfrentado a anticuerpos anti
PrPsc específicos, conjugados con peroxidasa.(9)
3.6.2 Inmunohistoquimico.
Este tipo de prueba pretende poner en evidencia la PrPsc , ya que hemos visto
puede ser parte del agente infeccioso en sí mismo. Se puede emplear el mismo
cerebro fijado con formol utilizado para el estudio anatomopatologico.
La exposición de los epitopos de PrPsc puede aumentarse tratando las muestras
con calor tras ser cortadas del bloque de parafina y fijadas con formol, puede
destruir la agregación de la proteína debida al ceso. Un anticuerpo dirigido contra
PrPsc conjugado con peroxidasa se aplica en la sección desnaturalizada.(9)
16
3.6.3 Elisa
En la mayoría de las infecciones, el ELISA se presenta como una alternativa muy
adecuada para examinar un elevado número de muestras rápidamente y con un
grado de sensibilidad alto, sin embargo, para la EEB todavía no se optimizado
una prueba de Elisa que haya reunido la aprobación general. La prueba de
ELISA que goza de mayor aceptación es la propuesta por el equipo de Holanda,
se utilizan anticuerpos anti-PrP específicos y aprovecha la resistencia parcial de
la PrPsc a la proteasa y el aumento de la inmuno-reactividad de la PrPsc ante la
desnaturalización. (9)
3.6.4 Diagnostico diferencial.
Rabia
Listeriosis
Meningoencefalitis tromboembólica
Enfermedad de Aujeszky
Intoxicación por plantas y químicos
Deficiencias minerales (Síndrome de la vaca caída) (5)
3.7 Tratamiento
No existe ningún tratamiento eficaz procediendo al aislamiento y sacrificio de los
animales sospechosos se debe evitar dañar el tejido cerebral que se utilizará para
el diagnóstico. (10)
3.8 Prevención.
La única fuente de infección que hasta el momento se conoce, son los alientos
concentrados que contienen harinas de carne y huesos contaminados con el
agente del Scrapie. No se ha encontrado ningún elemento que respalde la
transmisión horizontal de bovino a bovino, a la vertical de padres a hijos. (4)
17
Existen dos formas en la que los países libres de EEB podrían ser afectados.
A través de la importación de animales vivos o de alimentos concentrados
contaminados de Scrapie, o de EEB de otros países.
Permitiendo que el Scrapie de un país, afecte a su ganado vacuno. Por lo
tanto, la EEB puede ser prevenida mediante una reglamentación sanitaria
de las autoridades de Salud Animal, que prevea las dos estas dos
circunstancias. (20)
3.8.1 Reglamento establecido en los países afectados para el control y erradicación de la EEB.
La EEB es considerada como enfermedad de declaración obligatoria.
Se prohíbe la utilización de proteínas procedentes de rumiantes, en la
alimentación de rumiantes.
Sacrificio de todo animal sospechoso de padecer EEB y destrucción de los
cadáveres.
Aprobación de una compensación económica por sacrificio que cubra el
50% del valor del animal en el mercado.
Orden de destrucción de la leche procedente de vacas afectadas de EEB.
Prohibición total para el consumo humano de cerebro, médula espinal,
bazo, tonsilas e intestino vacuno, excluidos los procedentes de terneros
menores de 6 meses.
Los ganaderos deben de mantener por lo menos durante 10 años los
registros de sus animales relativos a raza, sexo, número de identificación y
fecha de nacimiento de cada ternera y así como registros de movilización
animal.
Recomendación a los fabricantes de medicamentos, cosméticos y
alimentos infantiles para que excluyan de sus productos los derivados de
origen rumiante. (20)
18
3.9 Situación actual en México de la EEB.
México se encuentra libre de la EEB y Scrapie, se lleva a cabo un programa
específico de vigilancia de neuropatías en rumiantes. Esta vigilancia consiste por
un lado en la recolección de muestras de encéfalos de bovinos, ovinos y caprinos
que muestren signos de la enfermedad nerviosa (vigilancia pasiva).
El SENASICA (CPA) de la SAGARPA ha implementado una serie de medidas
para evitar la entrada de la EEB al país:
Restricciones a la importación de rumiantes vivos, productos y
subproductos, procedentes de países afectados o de riesgo indeterminado.
Los casos clínicos de enfermedad nerviosa en bovinos, son de denuncia
obligatoria inmediata y sometida a examen de laboratorio.
Publicación de la Norma Oficial Mexicana NOM-061-ZOO-1999,
Especificaciones zoosanitarias de los productos alimenticios para consumo
animal.
Publicación de la Norma Oficial Mexicana NOM-060-ZOO-1999,
Especificaciones zoosanitarias para la transformación de despojos
animales y su empleo en la alimentación animal.
Estas normas indican que:
“Queda prohibida la utilización de harinas de carne y hueso de origen rumiante en
la elaboración de alimentos balanceados para rumiantes”. (5)
19
HIPOTESIS
La región de Torreón, Coahuila se encuentra libre de Encefalopatía Espongiforme
Bovina, a pesar que existe una constante entrada de ganado principalmente de la
raza holstein (ganado lechero) procedente de Estados Unidos de Norteamérica y
Canadá, debido a una estrecha supervisión de la CPA y demás dependencias
encargadas de ellos.
Hasta ahora no se han reportado casos positivos de EEB en los tallos cerebrales
recolectados y analizados por la técnica de histopatología e inmunohistoqumica.
4.1 Hipótesis nula. Dada la posibilidad de que se reporte algún caso positivo de EEB, puede tener
relación con la importación de bovinos y caprinos de otros países y al relajamiento
de los puntos de inspección de nuestro país (barreras de protección
zoosanitarias).
20
MATERIALES Y METODO 5.1 Obtención del Tallo Cerebral en Rastro
(Técnica de la cucharilla)
Botas, overol, mandil, lentes protectores o careta de protección, así como
guantes de látex.
Cuchara especial.
Tijeras rectas.
Pinzas de disección con dientes de ratón.
Bolsa hermética (ziploc)
Plumón indeleble.
Hielera de tamaño adecuado. (5)
Fotografía 1: Cuchara especial para la obtención del tallo cerebral. (5)
21
Procedimiento: 1.- Una vez separada la cabeza del cuerpo del animal a nivel de la articulación
atlanto-occipital, hay que colocarla sobre una superficie limpia con la cara hacia
abajo. (5)
Fotografía 2 (5) Fotografía 3 (5)
En las fotografías 2,3: se puede observar la forma adecuada de poner la cabeza del bovino sobre
una mesa (decúbito) para la correcta extracción del tallo cerebral.
2.- Separar los pares craneales con un dedo o con la ayuda de las pinzas de ratón
y tijeras. (5)
Fotografía 4 (5) Fotografía 5 (5)
En las fotografías 4,5: se puede observar cómo se separan los pares craneales con la ayuda del
dedo índice.
22
Fotografía 6 (5) Fotografía 7 (5)
En las fotografías 6,7: se observa cómo se separan los pares craneales con ayuda de las pinzas
de ratón y con unas tijeras rectas.
3.- Introducir la cucharilla a través de la parte superior del agujero magno con la
punta hacia abajo. (5)
Fotografía 8 (5)
En esta fotografía se puede observar cómo se introduce la cuchara con la punta hacia abajo, por
la parte superior del foramen.
23
4.- Una vez que la cucharilla haya llegado hasta el tope (cresta esfeno-occipital),
realizar un giro de 180° hacia la derecha y posteriormente hacia la izquierda. (5)
Fotografía 9 (5) Fotografía 10 (5)
En las fotografías 9,10: se observa el giro de 180º que se le debe de dar a la cuchara una vez
introducida a la izquierda como a la derecha.
5.- Extraer la cucharilla obteniendo únicamente el puente y la médula oblonga con
el óbex. (5)
Fotografía 11(5)
En esta fotografía podemos observar cómo se extrae el tallo cerebral con la ayuda de la cuchara.
24
Fotografía 12 (5) Aquí se presentan diferentes tallos cerebrales, la forma en que pueden ser extraídos.
6.- En caso de atorarse, desprender con pinzas y tijeras los nervios craneales XII, XI y X (hipogloso, espinal accesorio y vago) de las meninges y retirar el tallo cerebral. (5)
Fotografía 13 (5) En caso de tener alguna complicación con la extracción del tallo cerebral, con ayuda de las pinzas y tijeras desprender los pares craneales, para su extracción.
25
7.- En caso de encontrar coágulos alrededor del tallo cerebral, eliminarlos con pinzas o tijeras. (5)
Fotografía 14 (5) El tallo cerebral debe de estar limpio de coágulos de sangre, en caso de tenerlos retirarlos con ayuda de pinzas o tijeras.
5.2 Envió de muestras a Laboratorio. Las muestras de tallo cerebral de almacenan en unas bolsas de cierre hermético
(ziploc) identificándolas con un plumón indeleble, asignándole un número
correspondiente, para ser enviadas al laboratorio. Estas muestras son
conservadas en refrigeración dentro de una hielera.
Fotografía 15
Los tallos cerebrales deben ser depositados en bolsa de cierre hermético con su previa
identificación y almacenados en una hielera.
26
Cada muestra colectada deberá incluir la información epidemiológica por medio
del sistema para el envió de muestras CPA-ST-F048 de vigilancia epidemiológica
de la EEB; identificados con el mismo número utilizado en las muestras en
refrigeración.
Fotografía 16: pagina del sistema CPA-ST-F048 de vigilancia epidemiológica de la EEB.
COMISION MEXICO-ESTADOS UNIDOS PARA LA PREVNECION DE LA FIEBRE AFTOSA Y OTRAS ENFERMEDADES EXOTICAS
EN LOS ANIMALES. (CPA).
27
RESULTADOS En el siguiente cuadro se puede observar los resultados del laboratorio de los
tallos cerebrales enviados para el diagnostico de EEB mediante histopatología en
la región de Torreón, Coahuila.
Estas muestras fueron tomadas en el rastro municipal planta Tif (243) en Torreón,
Coahuila.
REGION TOTAL DE MUESTRAS
ENVIADAS AL LABORATORIO
NUEMERO DE CASOS POSITIVOS
NUMERO DE CASOS NEGATIVOS
TORREON, COAH. Planta Tif (243)
683 0 683
28
CONCLUSIONES Se puede concluir que la presencia de Encefalopatía Espongiforme Bovina en la
región de Torreón, Coahuila es nula debido a las barreras de defensa que operan
actualmente en nuestro país.
El riesgo de importar animales de países afectados con EEB es mínimo, a causa
de los requisitos de importación que exige México. Así mismo el país ha
prohibido la importación y el consumo de harinas de carne, sangre, hueso para el
consumo de rumiantes de países afectados con Scrapie y EBB.
La ausencia de tallos cerebrales en encéfalos enviados, imposibilitan el
diagnostico de EEB por histopatología, por tanto se debe tener conocimiento de la
técnica para así, obtener el encéfalo completo.
29
GLOSARIO
EEB: Encefalopatía Espongiforme Bovina.
Prion: Pequeña partícula proteica infecciosa, las cuales son resistentes a la
inactivación que modifican los ácidos nucleicos.
Pienso: Alimento elaborado para el ganado el cual se obtiene de las mezclas de
productos de origen vegetal o animal en su estado natural, frescos o conservados,
o de sustancias orgánicas o inorgánicas, contengan o no aditivos, que estén
destinados a la alimentación animal por vía oral en forma de piensos completos o
de piensos complementarios.
Solventes: Son compuestos orgánicos basados en el elemento químico Carbono.
Ellos producen efectos similares a los del alcohol o los anestésicos. Estos efectos
se producen a través de la inhalación de sus vapores.
Infectividad: La capacidad de una agente patógeno (prion) para invadir un
organismo y provocar lesiones irreversibles.
Vacuolas: Lesiones del tejido nervioso que le da aspecto de esponja.
EETs: Encefalopatías Espongiformes Transmisibles.
PrPc: Proteína normal.
PrPº: Isoforma aberrante.
PrPsc: Proteína anormal.
Inoculación: Introducción, transmisión, de un prion a un organismo.
Neuroinvasión: Proceso por el cual los priones migran al sitio de inoculación.
Frenesí: Delirio, el animal esta exaltado, perturbado.
Hiperestesia: el animal tiene una sensibilidad excesiva y dolorosa al tacto y a la
audición.
30
BIBLIOGRAFIA
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prion gene promoter region that influence classical bovine spongiform
encephalopathy susceptibility are not applicable to other transmisible spongiform
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