Cromatografia Circular Plana (Pefeiffer)

A cromatografia “em geral” é uma técnica quantitativa que tem por finalidade a identificação de substâncias e a purificação de misturas.

Cromatografia de Pfeiffer

É um método criado por Ehrenfried Pfeiffer em meados do século XX utilizado como meio para determinar a qualidade de substancias extraídas do solo, compostos orgânicos e alimentos.

Pfeiffer também foi um dos pioneiros da Agricultura Biodinâmica e ajudou a formar a “Biodynamic Farming & Gardening Association”.

Pfeiffer escreveu o livro "Chromatography Applied to Quality Testing" com 44 paginas incluindo 56 fotografias coloridas. Esse livro é uma revisão sobre todos os aspectos da cromatografia circular plana, detalhando experimentações e estudos sobre a determinação da qualidade de solos e biocompostos.

O que é a Cromatografia do Solo de Pfeiffer?

● Cromatografia de Pfeiffer é um método de análise qualitativa de solos e compostos que pode ser realizado em qualquer lugar a baixo custo e de forma rápida (Jairo Restepro).

● A Cromatgrafia de Pfeiffer foi desenhada para observar e testemunhar a vitalidade e equilíbrio dos diferentes componentes que contribuem para a formação e estabilização do solo, enfatizando o papel dos microrganismos na fertilidade do solo (http://www.cristallizzazione.it/).

O que se busca, então, em um cromatograma?

Busca-se a leitura da “qualidade de vida do solo” em determinado momento que é facilmente visualizado em um cromatograma através da harmonia de cores e desenhos entre todos os diferentes componentes (mineral, orgânico, energético, eletromagnético) do solo.

Preparo de cromatogramas

Materiais

● Soda Cáustica 1% (SOLUÇÃO EXTRATORA)● Nitrato de Prata 0,5% (SOLUÇÃO REVELADORA)● Balança de Precisão com sensibilidade de 0,1 gramas● Papel de filtro comum● Peneira plástica de cozinha● Tecido Voal● Agulha hipodérmica● Caixa Escura de Papelão revestida com papel alumínio, por

fora, como proteção contra a luz UV● Copo plástico● Agulha hipodérmica● Régua

PREPARO DA SOLUÇÃO DA AMOSTRA DE SOLO

● Retire uma amostra de 250 gramas de solo e peneire com a peneira de cozinha para retirar pedras e gravetos. Depois peneire o mesmo solo com tecido voal até obter 5 gramas de amostra de solo.

● Após realizado o processo anterior, adicione 50 ml de Soda Cáustica 1% a amostra de 5 gramas dentro de um copo descartável.

● Para misturar a soda e fazer a extração total da vida do solo, é necessário mover o vaso de forma circular 6 vezes para a direita, seguida de 6 vezes para a esquerda. Devendo ser repetida 6 vezes cada conjunto direito-esquerda. Com isso as partículas chocam e a extração é completa.

● Deixar descansar durante quinze minutos e repetir a “6 x 6 x 6”.● Deixar descansar durante sessenta minutos e repetir a “ 6 x 6 x 6”.● Deixar descansar durante seis horas e repetir a “ 6 x 6 x 6”.

● Lembre-se que o solo possui substâncias complexas que, se agitado violentamente forma espumas inconvenientes.

● Nesta solução é feita a análise, por isso não se pode mover mais a amostra, pois as argilas e limos, se suspensos, impedem uma boa corrida ao tapar os poros do papel no cromatograma.

PREPARO DO PAPEL FILTRO PARA IMPREGNAÇÃO

● Faça um furo no meio do papel filtro (utilize uma agulha hipodérmica) e dois furos a 4 cm e 6 cm de distância do centro.

● Aumente o buraco do centro utilizando um parafuso (2mm).

● Corte um pedaço de outro papel filtro 2 cm x 2 cm e enrole em forma de canudo. Coloque-o dentro do buraco do meio do papel filtro.

Impregnação do papel filtro

● Colocar uma placa de Petri pequena dentro de uma placa maior e enchê-la até a metade com a solução de Nitrato de Prata 0,5%.

Coloque o papel filtro em cima e espere a solução chegar ao ponto de 4 cm.

Retire o canudinho com cuidado e coloque o papel filtro para secar dentro da caixa escura de papelão. A secagem leva aproximadamente 6 horas.

● Após o término das mexidas, retire aproximadamente 5 ml da superfície da solução e repita o processo de impregnação anterior. Só que dessa vez até o buraco de 6 cm. Após a impregnação leve para secar na caixa escura.

Algumas soluções de solo são escuras, espessas e não correm no papel impregnado, por causa da riqueza e tipo de matéria orgânica (açúcares & húmus) solúvel. Neste caso, após constatação, é conveniente tomar 5 ml do sobrenadante e misturar com 5 ml de solução de Soda Cáustica a 1%.

Em sua tese doutoral a bióloga Nicola Hassold-Piezunka cita Balzer (1989) e Bangert (1993) diminuíram o peso da amostra de compostos para 2,5 gramas (em 50 ml de Soda Cáustica a 1%).

Interpretação

Um cromatograma se divide em 3 zonas de interpretação

- 1 - coroa periférica- 2 - atividade enzimática (ácidos húmicos- fúlvicos)- 3 - zona intermediária- 4 - substância orgânica acizentada- 5 - área interna- 6 – estado do solo- 7 - zona central- 8 - quaisquer poluentes químicos (cores: rosa, roxo, verde, azul)- 9 - buraco de embebição- 10 - borda do disco (diâmetro 15 centímetros)

Zona Central – Indicadora das condições de desenvolvimento das atividades fermentativas micro(biológica) com formas desde a ausência da zona, as cores que variam do preto (mínimo metabolismo microbiano aeróbico e máxima fermentação anaeróbica) ao prata maior plenitude no metabolismo microbiano aeróbico e harmonia estrutural.

● Amostra “sem vida” + 2NaOH + 2AgNO3 2NaN03 + 2AgOH Ag2O precipitado negro

● Amostra “com vida” + 2NaOH + 2AgNO3 2NaN03 + 2AgOH + 4NH4OH 2[Ag(NH3)2]OH cor Prata

Zona Intermediária – Indicadora das condições de desenvolvimento mineral, desde um círculo linear (membrana inorgânica sem vida) até total integração com as outras zonas. Suas cores variam do mínimo no preto ao máximo no ouro e laranja.

Zona Externa ou periférica – É a zona das proteínas (enzimas e vitaminas) desde a ausência da zona, até sua forma, largo e cores que variam do castanho escuro até a Prata.

Nesta zona pode-se ver a parte das substâncias complexas de alto peso molecular (proteínas, vitaminas, enzimas) ativas do solo formadas pela ação dos microrganismos.

Bibliografias

● http://www.agribionotizie.it/AGRIBIO2011/RUBRICHE/pfeiffer.htm

● http://cursoagriculturaorganica2013.blogspot.com.br/2013/08/novembro-organico-brasil-gira-de-6-25.html

● http://chromatographyexperiments.blogspot.com.br/p/chromatography-capillary-analysis-and.html

● http://www.cristallizzazione.it/k_zucchine_comparazione_chr&k_ph.html

● Cartilha da Saúde do Solo (Cromatografia de Pfeiffer) Edição Juquira Candiru Satyagraha, 2011, Porto Alegre

FIM