RECUPERAÇÃO CELULAR NO PROCESSAMENTO DO SANGUE DE CORDÃO UMBILICAL UTILIZANDO

EQUIPAMENTO AUTOMATIZADO

RECUPERAÇÃO CELULAR NO PROCESSAMENTO DO SANGUE DE CORDÃO UMBILICAL UTILIZANDO

EQUIPAMENTO AUTOMATIZADO

IntroduçãoIntroduçãoIntroduçãoIntrodução

Forte A¹, KühnTIBB², Sekiya EJ2, Almeida KA2 , Santucci R2, Alves A²1CordCell – Células Tronco do Sangue de Cordão Umbilical

2Instituto de Ensino e Pesquisa São Lucas

Forte A¹, KühnTIBB², Sekiya EJ2, Almeida KA2 , Santucci R2, Alves A²1CordCell – Células Tronco do Sangue de Cordão Umbilical

2Instituto de Ensino e Pesquisa São Lucas

ObjetivoObjetivoObjetivoObjetivo

EstudoEstudo retrospectivoretrospectivo dede FevereiroFevereiro aa JulhoJulho dede 20092009,, dosdosprocessamentosprocessamentos dodo sanguesangue dodo cordãocordão umbilicalumbilical efetuadosefetuados pelapela

Material e MétodosMaterial e MétodosMaterial e MétodosMaterial e Métodos

DescreverDescrever asas taxastaxas dede recuperaçãorecuperação celularcelular obtidasobtidas pelapela utilizaçãoutilizaçãodede equipamentoequipamento automatizadoautomatizado SepaxSepax--BiosafeBiosafe..

AA técnicatécnica dede reduçãoredução dodo volumevolume coletadocoletado dodo sanguesangue dodo cordãocordãoumbilicalumbilical ee placentárioplacentário (SCUP)(SCUP) parapara posteriorposterior criopreservaçãocriopreservação eearmazenamentoarmazenamento apresentaapresenta característicascaracterísticas essenciaisessenciais comocomodiminuiçãodiminuição dada adiçãoadição dede soluçãosolução crioprotetoracrioprotetora ee menormenor riscorisco dedeincompatibilidadeincompatibilidade ABO/RhABO/Rh emem transplantestransplantes alogênicosalogênicos,, devidodevido oobaixobaixo volumevolume dede hemáciashemácias nana bolsabolsa armazenadaarmazenada ee uniformidadeuniformidadedodo congelamentocongelamento.. OO grandegrande obstáculoobstáculo emem realizarrealizar aa reduçãoredução dodovolumevolume éé oo índiceíndice dede perdaperda celularcelular durantedurante esseesse processoprocesso.. AACordCellCordCell CélulasCélulas TroncoTronco dodo CordãoCordão UmbilicalUmbilical investindoinvestindo ememtecnologiatecnologia parapara aprimoramentoaprimoramento dada separaçãoseparação dasdas célulascélulas dodo SCUPSCUPadquiriuadquiriu oo equipamentoequipamento automatizadoautomatizado SEPAXSEPAX-- BiosafeBiosafe..

processamentosprocessamentos dodo sanguesangue dodo cordãocordão umbilicalumbilical efetuadosefetuados pelapelaCordCellCordCell SãoSão PauloPaulo.. AlíquotasAlíquotas dada bolsabolsa dede coletacoleta foramforam retiradasretiradaspreviamentepreviamente aoao inícioinício dada separaçãoseparação ee concentraçãoconcentração dasdas célulascélulas--troncotronco dodo cordãocordão umbilicalumbilical ee aoao finalfinal dodo processamentoprocessamento paraparacontagemcontagem dede célulascélulas nucleadasnucleadastotaistotais.. AA quantificaçãoquantificação celularcelular foifoi realizadarealizada emem contadorcontadorautomáticoautomático (Mythic(Mythic1818 OrphéeOrphée)) ee confirmadaconfirmada pelapela contagemcontagem ememcâmaracâmara dede NeubauerNeubauer.. OO processamentoprocessamento automatizadoautomatizado foifoirealizadorealizado nono equipamentoequipamento SepaxSepax BiosafeBiosafe,, VersãoVersão 170170,, protocoloprotocoloUCBUCB--HESHES ee oo kitkit CSCS--530530..33.. EmEm casoscasos dede processamentoprocessamento comcomconcentraçãoconcentração dasdas célulascélulas emem bolsabolsa dede 250250 mLmL ((BaxterBaxter®)®) foifoiutilizadoutilizado oo SterileSterile ConectionConection DeviceDevice dentrodentro dada capelacapela dede fluxofluxolaminarlaminar parapara conexãoconexão nono KitKit.. AA técnicatécnica automatizadaautomatizada dede reduçãoreduçãodede volumevolume comcom buffybuffy--coatcoat dede 4242mLmL (Bolsa(Bolsa 250250 mLmL BaxterBaxter®)®) foifoiutilizadautilizada emem unidadesunidades comcom concentraçõesconcentrações celularescelulares prépré--processamentoprocessamento entreentre 66,,55 aa 88,,55 xx101088 ee buffybuffy--coatcoat dede 2525 mLmL ememconcentraçõesconcentrações acimaacima dede 88,,55 xx101088 (bolsa(bolsa BiBi--partidapartida PALL®)PALL®).. NãoNãohouvehouve manipulaçãomanipulação dasdas bolsasbolsas queque apresentaramapresentaram celularidadecelularidadeabaixoabaixo dede 66,,55 xx101088.. ApósApós oo processamento,processamento, foifoi retiradaretirada alíquotaalíquotadodo plasmaplasma parapara controlecontrole microbiano(BACT/ALERTmicrobiano(BACT/ALERT PEDIATRICPEDIATRIC ®)®)

ResultadosResultadosResultadosResultados

OO rendimentorendimento médiomédio foifoi 9090%% quandoquando oo númeronúmero celularcelular inicialinicial eraerasuperiorsuperior aa 88,,55 xx101088.. TambémTambém apresentaramapresentaram altaalta taxataxa dederecuperaçãorecuperação celularcelular 9292%% asas amostrasamostras comcom faixafaixa celularcelular entreentre 66,,55--88,,55 xx101088 .. NãoNão houvehouve contaminaçãocontaminação microbianamicrobiana emem nenhumnenhum casocasoanalisadoanalisado..

ConclusãoConclusãoConclusãoConclusão

OO equipamentoequipamento SepaxSepax BiosafeBiosafe éé fundamentalfundamental nana contribuiçãocontribuição dada qualidadequalidade dada separaçãoseparação dasdas célulascélulas--troncotronco contidascontidas nono sanguesanguedodo cordãocordão umbilicalumbilical coletadocoletado devidodevido aa homogeneidadehomogeneidade dasdas recuperaçõesrecuperações celularescelulares apósapós oo estabelecimentoestabelecimento dede faixasfaixas dedecelularidadecelularidade iniciaisiniciais.. AtribuirAtribuir faixasfaixas dede celularidadecelularidade permitiupermitiu tambémtambém aa obtençãoobtenção dede taxastaxas dede recuperaçãorecuperação celularcelular muitomuitosuperioressuperiores (em(em tornotorno dede 9191,,2727%%)) dasdas divulgadasdivulgadas normalmentenormalmente nana literaturaliteratura específicaespecífica..

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