INFECÇÃO PELO VÍRUS EPSTEIN-BARR EM

INFLAMAÇÃO CRÔNICA DE GRANULOMA PERIAPICAL

UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA

FACULDADE DE ODONTOLOGIA

PROGRAMA DE EDUCAÇÃO TUTORIAL

Bolsista: Camila Lima Silva

INTRODUÇÃOPERIODONTITE PERIAPICAL

Caracteriza-se por danos tecidos de suporte e por progressiva reabsorção óssea alveolar em torno das área apicais de dentes afetados;

É causada por uma infecção bacteriana mista na cavidade oral;

A cárie é considerada uma das principais fontes da infecção;

SIQUEIRA; RÔÇAS, 2009.

NAIR, 2004.

GRANULOMA PERIAPICAL A inflamação crônica devido a

periodontite periapical pode levar a formação de granulomas periapicais;

Tecido granulomatoso contendo células inflamatórias e grande quantidade de microvasos;

O tecido granulomatoso é rodeado por osso alveolar no ápice do dente, e a fonte de infecção é limitada aos canais dos dentes . BRITO et al, 2012 ; TAKEICHI et al, 1998 ; IHAN et al, 2009.

INTRODUÇÃO

Herpesvírus oncogênico

Mononucleose infecciosa , Linfoma de Burkitt, Doença de Hodgkin e Linfoma de células T

Epstein-Barr x Reações inflamatórias

Presença do EBV na periodontite periapical relacionada à injúria do tecido e danos às células

O vírus Epstein-Barr em granulomas periapical parece ser importante na reação imune periapical e na promoção de nova terapia farmacológica

VÍRUS EPSTEIN-BARR (EBV)

KUPPERS, 2003.

SINN; DITTMER, 2009

OBJETIVO O propósito desse estudo foi avaliar se o vírus

Epstein-Barr está presente em granulomas periapicais e em infiltrados inflamatórios.

MATERIAIS E MÉTODOS PACIENTES: 40 pacientes (9 homens e 31 mulheres ; 24-78 anos) encaminhados do Departamento

de Endodontia da Faculdade de Odontologia Hospitalar de Nihon (Tóquio – Japão)

Pacientes apresentavam Periodontite Periapical persistente

Sintomas clínicos: - ausência de dor latejante - dor à palpação da mucosa ao redor do ápice - dor à percussão

Imagem radiolúcida ao redor do ápice de todos os dentes

Pacientes não apresentavam doença sistêmica e não utilizaram antibióticos durante 6 meses prévios.

Extração de tecido gengival saudável de 10 pacientes

MATERIAIS E MÉTODOS EXAME PATOLÓGICO DAS AMOSTRAS Lesões periapicais e tecido gengival saudável removidos

cirurgicamente e mensurados em aproximadamente 0,82 e 0,44cm de diâmetro, respectivamente.

Tecidos preparados e corados com hematoxilina e eosina.

Áreas seccionadas selecionadas aleatoriamente de pelo menos 3 regiões diferentes em cada amostra.

Secções analisadas em microscópio a luz.

MATERIAIS E MÉTODOS

ANÁLISE QUANTITATIVA DO DNA DO EBV O vírus das amostras de granuloma

periapical foram detectados utilizando PCR em tempo real

Para determinação do número de cópias de DNA do EBV foi feita curva padrão, utilizando gráficos de semi-log.

MATERIAIS E MÉTODOS HIBRIDIZAÇÃO IN SITU PARA DETECTAR EBER O EBER é expresso em células latentes infectadas

pelo EBV, utilizado como marcador para detecção do vírus em tecidos

Utilizaram-se sondas específicas para o EBER

Secções de linfomas malignos foram utilizados como controle positivo para a hibidrização do EBER

granuloma periapical n=9 tecido gengival saudável n=5

MATERIAIS E MÉTODOS

ANÁLISE IMUNOHISTOQUÍMICA Determinar localização do LMP-1 nas

células de granulomas periapicais e tecido gengival saudável examinados

Para revelar o LMP-1 foi utilizado sistema de cores

MATERIAIS E MÉTODOS ANÁLISE ESTATÍSTICA Programa SPSS versão 15.0

A comparação entre granuloma periapical e tecido gengival saudável foi feita com o teste Mann-Whitney U

RESULTADOS EXAMINAÇÃO PATOLÓGICA DAS AMOSTRAS amostras. Das 40 leões periapicais, 32 exibiram tecido granulomatoso:

- microvasos

- células inflamatórias

Espécimes diagnósticados como GRANULOMAS PERIAPICAIS

Tecido gengival saudável apresentou mais fibras colágenas e menos células inflamatórias do que os granulomas periapicais

RESULTADOS ANÁLISE QUANTITATIVA DAS CÓPIAS DE DNA DO EBV Dos 32 granulomas periapicais, 25 (78,1%) espécimes exibiram presença do EBV

A média da cópia de DNA do EBV foi aproximadamente 8,688.01/µg.

O DNA do EBV não foi encontrado em tecido gengival saudável

Taxa de detecção do EBV em granulomas periapicais significativamente mais elevada que a taxa de detecção em tecido gengival saudável (p=0.0001)

RESULTADOS HIBRIDIZAÇÃO IN SITU DO EBER E IMUNOHISTOQUÍMICA DO

LMP-1 6 dos 9 granulomas periapicais (66,7%) revelaram expressão positiva

para o EBER

EBER localizado em núcleo e citoplasma de linfócitos B e células plasmáticas

Tecido gengival não apresentou positividade parar o EBER

RESULTADOS HIBRIDIZAÇÃO IN SITU DO EBER E IMUNOHISTOQUÍMICA PARA

O LMP-1 Todos os granulomas periapicais positivos para o EBER

apresentaram coloração positiva para o LMP-1

O LMP-1 foi expresso em linfócitos B e células plasmáticas

DISCUSSÃO

Taxa de detecção do EBV varia de 54, 6% a 85,7%Taxa de detecção do EBV = 78,1%

Diferentes métodos de detecção, estado da doença ou características regionais

Taxa de detecção do EBV relativamente maior

DISCUSSÃOMediana da cópia de DNA do EBV em granulomas = 8,688.01/µg Cópias de DNA do EBV em tecido gengival saudável não foi detectada

Granulomas periapicais incluem níveis extremamente elevados de EBV

O vírus Epstein-Barr pode ser importante na iniciação da inflamação periapical e no prolongamento da inflamação por conta do dano tecidual

Nível elevado de EBV em granulomas contribuem para reações imunes

As lesões inflamatórias localizadas podem ser reservatórios de EBV para infecções sistêmicas

REFERÊNCIAS Makino K, Takeichi O, Hatori K, Imai K,

Ochiai K, Ogiso B (2015) Epstein-Barra Infection Virus Infectin in Chronically Inflamed Periapical Granulomas. PloS ONE 10(4): e0121548. doi: 10.1371/journal. Pone.0121548