BACILOS GRAM NEGATIVOS IDENTIFICAÇÃO LABORATORIAL

BACILOS GRAM NEGATIVOS

IDENTIFICAÇÃO LABORATORIAL

Profa. Cláudia de Mendonça SouzaMicrobiologia Clínica

Depto de Patologia, Faculdade de Medicina, UFF

Mais de 30 gêneros e mais de 130 espécies descritas.

Encontradas no trato gastrintestinal de animais e seres humanos.

Bactérias mais isoladas a partir de amostras clínicas.

Exemplos: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabillis, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Salmonella, Shigella.

Infecções: urinária, pulmonar, bacteremia, meningite, gastrointestinal, entre outras.

ColôniasLactose negativas

ColôniasLactose positivas

Composição: Peptona, lactose, sais biliares, cloreto de sódio, cristal violeta, agar, vermelho neutro, água.

Composição: Peptona, lactose, eosina, azul de metileno, agar, água.

Composição: peptona, lactose, sais biliares, cloreto de sódio, tiossulfato de sódio, citrato de amônio férrico, fucsina ácida, azul de timol, agar, água.

ColôniasLactose negativas (H2S +/ -)

ColôniasLactose positivas

BACILOS GRAM NEGATIVOS

AGAR TRÍPLICE AÇÚCAR FERRO - TSI

Utilização dos 3 açúcaresGlicose, Lactose e Sacarose

Utilização apenas da glicose

Produção de H2S

Indol - Indol +

Sulfeto positivo

Urease

Fenilalamina Desaminase

Citrato

+ -

- +

+ + -

Positivo

Negativo

Descarboxilação de aminoácidos: Lisina, Arginina e Ornitina

Meio de Clark & Lubs

+ Vermelho de Metila

-naftol e KOH 40%

MEIO RUGAI

Kit de EPM MILI: Série de 7 testes em 2 tubos para identificação bioquímica de enterobactérias

Produção de gás, H2S, urease, L-triptofano desaminase

Motilidade, indol, lisina descarboxilase

BACILOS GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES (BGNNF)

Grupo heterogêneo de bactérias aeróbias, não esporulados, que não utilizam carboidratos ou não os degradam através da fermentação (15 famílias).

Principais gêneros: Pseudomonas, Acinetobacter, Burkolderia, Stenotrophomonas.

Meio O/F: Oxidação/Fermentação

BACILOS GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES (BGNNF)

Móveis, flagelos polaresPseudomonas, Burkolderia,Stenotrophomonas,Ralstonia

Móveis, flagelos peritríquiosAlcaligenes, Achromobacter,Oligella

Imóveis, oxidase positivosOligella, Flavobacterium,Cryseobacterium

Imóveis, oxidase negativosAcinetobacter

MOBILIDADE/OXIDASE

Pseudomonas aeruginosa

Bacilo Gram negativo.

Móvel.

Aeróbio estrito.

Pertence ao grupo fluorescente do gênero (pioverdina): P. aeruginosa, P. fluorescens e P. putida

Produz pigmentos hidrossolúveis como a pioverdina, piocianina, piorrubina ou piomelanina

Espécie de maior importância clínica entre os BGNNF

IMPORTÂNCIA CLÍNICA

http://gsbs.utmb.edu/microbook/ch027.htm

Pseudomonas aeruginosaDiagnóstico Laboratorial

Colônias grandes (mucóides ou secas), achatadas, com bordas irregulares, odor de “uva”

Citocromo-oxidase positiva (10 segundos)

Produção de piocianina

Pseudomonas aeruginosa

Diagnóstico Laboratorial

Crescimento em MacConkey (lactose -) Mobilidade (gota pendente)

Crescimento a 42oC

Descarboxilação da arginina

Agar Mac Conkey

Acinetobacter spp

Distribuição ampla no solo e na água.

Resistência à dessecação.

Cerca de 17 espécies descritas.

Espécie mais freqüente em amostras biológicas: A. baumannii (A. calcoaceticus-A. baumnannii)

Importante patógeno hospitalar

Pneumonias associadas a ventilação mecânica, infecção urinária, bacteremia, infecção de pele e feridas.

Acinetobacter spp. Cocobacilo Gram-negativo.* Aeróbio estrito, imóvel. Não possui a enzima citocromo-oxidase. Colônias convexas, bordas regulares.

* Características morfo-tintoriais semelhantes às dos gêneros Moraxella e Neisseria.

Cresce bem em MacConkey (lactose +).

A. baumannii catalase positivo.

Acinetobacter spp.

PATÓGENOS OPORTUNISTAS QUE APRESENTAM RESISTÊNCIA INTRÍNSECA &

ADQUIRIDA A VÁRIOS ANTIMICROBIANOS

BACILOS GRAM NEGATIVOS

CLSI: padronização de testes (BGNNF) apenas para Pseudomonas aeruginosa (16-18h), Acinetobacter spp., Burkolderia cepacia e S. maltophilia (20-24h).