Doseamento das granzimas A e B na sarcoidose pulmonar

Preview:

Citation preview

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

111

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

Doseamento das granzimas A e B na sarcoidosepulmonar (estudo experimental)

Granzymes A and B in pulmonary sarcoidosis

(experimental study)

Recebido para publicação/received for publication: 05.01.17Aceite para publicação/accepted for publication: 05.03.24

����������������� ��� ������� ������� ������ ���������������������������������������������������� �������������� �������� ��������� ��������������� ������������������������������� � �� ������ �� ���� !� �� �� �� ������ "�������#� ����������������������� ��������������#����������� $� �%&��� "�� ������� �������

Artigo OriginalOriginal Article

����������������������'�� ���������( ���)��*������+���'�� �������������'������������#'�*��+(�� ���������������� ����*��������*���������������+��������������,��� �'�#������������'����������������,�� ����� ��� ��� ���� (�"����'������� �+����'��������������,��������� ������(�����'�������'� ������(��

1 Professora Auxilar de Fisiopatologia/Patologia Geral da Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra2 Aluna da Licenciatura em Medicina, na Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra3 Técnico Superior de 1ª Classe4 Assistente Hospitalar Graduada de Pneumologia5 Técnica Superior de 2ª Classe6 Professora Auxilar de Biologia Molecular/Bioquímica da Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra7 Professora Associada de Fisiopatologia/Patologia Geral da Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra.Serviços, directores e endereços:

Instituto de Patologia Geral da Faculdade de Medicina da Universidade de CoimbraDirectora: Prof. Doutora Anabela Mota PintoRua Larga3004-504 Coimbra

Centro de Pneumologia do Hospital da Universidade de CoimbraDirector: Prof. Doutor Manuel Fontes Baganha. Hospital da Universidade de CoimbraPraceta Mota Pinto3000 Coimbra

Marília Dourado1

Joana Bento2

Luís Mesquita3

Alcide Marques4

Sofia Vale-Pereira5

Ana Bela Sarmento Ribeiro6

Anabela Mota Pinto7

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

112

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

����%�������������������������#'��� ������(�' ����'����*����� ���� �'�����( � �����������#'�������� ������ ��� ��������� !��'������ �( � �'��������������(��������������' ���������������#����������������������������'� ��#'��������-����' ��������,�������' ������.������#��*������� ��)����( ����������������������������������� ��������������'����!������/0���������-1���0���*��� ��� ��� �����2����' �����.� ��� ��� ��( � �� ��� ��� �������� ������ �/� ��345 ���������*���������*�����������������'6���*���������������������������������7� ���389 ��������*����������������� ���399 ���������������*������������������'���������(������'��� ���������������� �������*����/�����7����������'6�:8�;<48�=>49�?<9=�:�+��35�5559=���:8�;<48�=>49�?<9=�:� +��35�5558@��-����' ���+�����'���������(������'���� �����������7���������� �������*����/���2����' �.����*��������(�+���������� ���7���������������� �������*���/���2����' ������*��������(�����������#+�*���>/�����������������������������������������( �2����' �����.����������������������������#�������������((�������(�� ����'������������������������(�� �������( ������������������� ����A�������������������������'����.�-�

��������������� ��������� ����������

���� �����6� ������������ ��#���������� ��������������' ���������' �.

����� � ���� ����� �� ��(�� ����� �#���� �� � ������B ��������� ������ ����� � .�� ��������� ���������� ��������� ������ ������ �� ��������� ��������� ��� �������������� �������+�� C���� �� � ����������������� �!�"���6�7�������������� ������.�������������� ������� �� �� �������� ��#����������� ����������D������ ������������������������� �� �������������������������#$���"$�����%�����6�1���E������ #�������!��6������������ �����/ ���345F���������+������7 ��389� ����������� ��� ����� ���� ������� ����� F�����+���� �7 �� �399� ������ �� � ����������� ���� �G������ +�� � ������� � ������ ���(������ �����#��������"�����������������#�������(����������������H45I��7����+�� �� ����� ���� ������(��� ����� � ������� ������ ���#�� ����F���������� ������.�����-1��������$���6� �� �������� � ����� ��&� �����(���+���� ����� ����� �7���� �������� ����� �/���7�������������� ������ ����&� �����(�����+�� ������ ����������������7���7��� ������+�� ��� �� � �/���� ������ �� .� ��&� �����(�����+�� ���� ���E��������������7��7�������� ����� �/F� �� ������ �� �� �������� � ������������(�������� �7��� �������� ����� ��/�����+��"����� ����������������� �������������+���� ���&� ���������+�� �� � �������� � �����+(�� ���������������(����������������� ���(�� ������ ������� �&�J&�������� � �������� �� ������ #� ����--.��

��������������� ��������� ����������

�$�$��$��!'$���������������������������#���������������� ����������� ��.

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

113

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

����������������������������������(�� ����'������+�� ������������������� �����'�� ������( ���)��*���������'����*����������((�������������( ���'�����������������45+@5'��������������������� ����(�"����1�� ��� �������������'� ����������� #'� ���������( ���������������� ����������*���(���#'��������������( �*������� �+�����' ����'��,�����9�8�4�@�K�L��������'�����������#���������(�������������'���� ������������� ���� ������#�#��!������������������(�����������+���'�#'����+����(�� ����+������� ������*�������������������������������������+��#�� �"��� ��� (��� ��� (�� ������ �(������� �8������������������� �������+���� �������'�*��� ���������� �( � �������� ����'���������+����(��� ��������������������������������������������� ���������������( ����� �����(�� ����'��������������#�� (��� ��� ����9�8�4�� �������������( �����'�������������(�� �������#�� ���� ����������'� ��)�'� ����� ��� !��+������ ��������������!������������+�������������( ��������9�;�1���� ������8��=��:����*��������#�������+ ����� �����( �(� ��'� �������(��������������������������������� ����'+������ �*���� ����(�� ��� !�������( � ��+������������(�����������������#��������������������'��( ��������8�:�� �����+���������� ������������������������*������ ��� ��� ������ ����� ������� #��+ �����������#��(��� ����������( � ������+���� ����� ���� ��� ���������,�������(����������������������������#����'�������+���������*�������������������������������)�( ���������'����������� #����( ����� �(� ��'��*�����*����%����('���������+���������� ����������������8�;�=�:�?�95�99�

��������� ��������� �� � �� ����� ��(�� ��������������������� ������� ���������� �������������� ���������� "�� ��� �(��������E���� � "���"��� ���� #���� �������� ����(�"�������(��!���&������45+@5�������A��(������� ��������������+����� ������� � ������� ��� ���������# � �� ������ ���� � �� #������ ���������������� ����(�������,9�8�4�@�K�D��������������������M ��������������&�������������������� ������� ������ � �� �������� ��������&����������������(���������� ���������� ����������(������ �"��� ���� �� ��M����� ���� ������ ����� � �"��������������&����������(�� ������������� �8F�������� ���� �� ����������� ���������� �"���� ����������� � ���+������������� �����������������������E(���������������E ���������������������������� ������� ��� ���� ��� �������� �����(�� �������������&�����������9�8�4��������� ���� �� ��� �������� ��&���(�� ���� ��� �����+�� ���� ��� ������������� �� !���M����� � � �� �������� ����&���� ������� !������ �� � � ������������������������9�;�� � ������� �����8�=�:� (��� ����E��� ��+ ��������� �����������M�����(� �����������������������������(������� ��� �� �����������������(����� ���!���M������������(����������������"���� �������������� ��� ��������� �� ����8�:���������"�� C����������������� ����+������ �� �� ���� ���� ������ � #�����������������&����������E�������������"���������&�N����������(����������+������ ����� � �� �������#����� ���������������������������"������������ � ���������������M��������������������� +#���� � � �� � �� (� E����� ���� � �� �

A sarcoidose é umadoença inflamatóriacrónicagranulomatosa,multissistémica, deetiologiadesconhecida

Em alguns estudosfoi possíveldeterminar algumgrau de incidênciafamiliar para asarcoidose

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

114

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

%����(����&� �� ����� ����M����� ��� �+�������������������8�;�=�:�?�95�99��D���������������������������� #� � ��� ������������� ��������� ��!������������������������#&��������������+�� �����������"�������������������+�E(����������������$�� ����������������"���������������������!����������� ������C ������E ��������������� ���������������������&������������� �����#�������� ���� �������� ����(������������ ������������� ��������������E������ ����������������� ����������(����E������ ��������� ���� � � ��� ���(�������,��� ���(�������.;�98�94�9@��L&��������������� �� �� �� ����������� 9� �1-9 �� ��+��������� ;� �1-; � � �� (������ � ������� ������,/O+α ��� ���� �� ������ �������� ��� �������� ��(�� ������� ������������,����+���� ���(������+��(��+ ��������� ���������� �������������������� ,�9� ���#���������� � ���(������� ,P����Q�9 ;�95�98�9;��������������������� ��������N� ���"��� ��� �� �� ����������������������"������������ ����������������"�������������(��������������� �N�� ���(����R���E���������������� ������� ��������+�� ����� ��� �������� "���"��� ������ ������ �������� ������������� ����(�"��+� ��� ��������� �! ����� � ���������������R��� ����� ���(�"�����������������������������B����������(&������/�� ��� ���� �� ������� � ������� ���������������������������������������������������������������������#�S�+"������ �� "�� ������ �� (����������� �#����������������������7��� ��������������� ������������������������� �����+ ���� ���� � ������� ������������ �����+����4�@�

������������������(������������� ��!��+��������������� ��1���#������������������������������������������� ���*��������*���������������(�����������������1�����������������������������#�(�����(���!������������������ #��( � ��� ����� ����������� ������� ��� ��� ��+���� ��� ��#��������� ������� ��� �� ����������������������������������� ������������� �� ���� �( � ��� �������� �( ����������������'���������������#'�� ����� �(� ,� �' ����'��� ���.� �' ���+�'��;�98�94�9@�� L������� �'��)����� ����� ��������)���9��1�9 ��������)���;��1�; �������� ������������(������α�,/Oα����'����� +������������ ��������(�� ����'����������������������1����������+��(�� ����'����+(���� �����#'���������������( ��'��,�9���#����������� �(� ,� �' ����'��� ����9 ;�95�98�9;�2������ ������ ���������� ��� ��� ���������� ����*���� ������� ������ ��� �������+�����( ����������������������(������������������ ��� ��������� ���(��������� �(� �������������� �����'�� ����������������������'�����������'�� ��,������������������ ���� (�"����'� �((�����!� ����( �������� �������������������'����)���������' ���������1�� ��� ������ ��� ������ �(� ����������������� ��� �����'���� ������ �������� ��*������( �#����������� ���������������#���������*��������������(�����������'��(��� ��������������'� #������� 1�� ����� *�'��' ��� ����'� ���� ����� ��� ��� �+�����'� ����������� #'� �� ���������� ����+�����'�������4�@�1������������������������������������ �+���'� ��(���������� #'� �'������ ����������������� ����-������((������ ����'�(�#��+��������#��#��������������*�����������

O granulomaepitelióide (...) não é,(...) específico dasarcoidose

As estruturasgranulomatosas, àmedida queaumentam detamanho, vãodistorcendo aarquitectura normaldos órgãos, o quealtera a sua função

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

115

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

/��� ��&���� ������������ �&� ��(����������������������� ���������������� ���������+��������E�������A�������������#�����+�(�#���� ��� ����� �(����� ������ ������ ���������� � "�� �� ������ �� ��+����;�9=�9:�9?�$�(�"������������ �����������R������������B �������#����������������E������ �� ���(����������� ���� ���� �����������(�������� ����������������+ ������� ��������&����� ������ ����#���+� ������ ��������� ������������������������������������� ��������������R������������ N�� �� ������ �������� ��������� ����� ���!������ ��������������+��������� %���� ��� �� � �� ����������� ���E������������� �������������4�@�85�89�������B �������#����������� ������������������ �� ����������� � �� ������������� ������������� �������������� ��������� � �� ������ �� �������� "��� #�����������������(�����������������(������������������M � �������#��������������������$��%&���� ������������"�� ������� �������� ���%� � � ����� ������#��������������� ���������������������� �����������������������������"�%����(����� �� ������� ��������� ��������7���������� ����M ��������������� ������������ ��������#�����������&����� ������� �� �� ��(��R�� ����������������� ���� ��������������� ���������� #� �����%�����������������88�84���������� ��� ����� �! ������� ��� ��� �"�� �� � � ����#�E�� � ������ #��������������� ��� �������� � ����� ��(���������������� � ������� ���������������������������� ���� ��������� ��������+�� �� ������� � "��� �� #� ���(�������������� �� ���������� ��� ������ ������ � ��� ���� ������� "��� � �� ��

�' ��� ����'��( �'�����;�9=�9:�9?�,������������( ����������������� ���#�+�����'�#�������� ��������������' ����'+������������ �� ���������������������+������ �'�����'���� �� �������� �����'���� ����#���� ��� ��� ������� ����� � ����������+���������� ��' ����� �,��� ����������� ��������� ��� ��� ���������������������������������#�����+�������������������*�����������'��������������������������������������� '4��@��85��89�,�� ����(�"����'������#������'����� +����(���������������� ������������� �+���'��������������� ���� ����( �������� ����� �( � -����' � ��� ��*������ ��+�����������#���( ����������(���������������(��������������������*���� �������#����� �����������( � ��������� 1�� ������#��� ������������������� ��������� ��)���#�� �)��*�����*������������+���#������������� ���������(������������ �����������(�����������+����������%��+��('���� ��� �� ��� ����� ����� ���'����� #���( ���' ������#������(�������������#���������� ��)����( �����������+����� ����� ��� ������ ��(�������� ��� ����������� �������������������������������+�������%�����88�84��2����' ��������!� +��� �( � ��' �� ����� ���� #�� ����� �����*���� #���������� ���� ��� ��� ���������( � ��'���������������� ������ �� ��� ��+���������������������������������� ���#�'�1�����������!�������'�����������������������������'�����������'��( �����������������' ����������� �� �����*�����*�������(�� ����� #� �����#�� (��� ������������� ������ �����������( ���������2����' ���������������������' ��2����' �������.����������#'��'��+��!���,� �' ����'����#'���������)���������

É frequente oaparecimento dealterações de algunsparâmetroslaboratoriaissanguíneos

As granzimas são umexemplo das enzimasa que se tematribuído um papelbiológico crescentena modulação demecanismosfisiopatológicos

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

116

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

�������������&����� �� ���������������� ������������ ����� �� ����� ���� � ����� � ������������������������� ������ ��� ���� ��� ���� ���������� ���������������� ������.��������������������(�������,�������!������������������������ � ���� � ���� ���� ��(��������� ��+���(������DA/ �������� ���������� �����++��� ���� � ��B������ �������� &������%���� ����� ���(�����������������������+������������������#����������!��������� ��� !���������88�84�8@�8K�8;�� ��� ��(������(������� ��� ������ ��� ������ ��� ���� �����#�����������������������������+����������+������(�� ����������������� #��������� ��������� �����������(�����>������ �������N� ������������������������+���������������� ���������������������� �������������������������O��>O���-8;�8=�8:�T ��������������������������+�������������+�� ������� ����������� ���#��������������+������� �� ������ ! ���� �� ������� ��� �������� ��� ������� �1�� �� ������ � ��������������� #��"�E ����� �� ���� (�� ��!�� ���������(���R��(������������������������� ��������� ��������� ��� �������� ����&��������������������(�� ������������������� ������������������������������������������� ������ #������>���������� ����������8:�8?���������� ��.���������������������������������!��E�������� #���������������+ ��� �� #� �� ���� ���� ����E����� �� ����������������������� �����������������������%��������������������+���45�49�48�44�� �"������ �� ������ ���� ������������� ������������������ � ����� �"��������������������� #�������(������ ������������ ���� � � ����� ��������������� �����������8?�4@�T ������ � ���������������� �������

��� #'� ���' ������������ �����������DA/ ��,�'������������������' ������'������ ��� ��������� ������� *�����(������������(���������������������������#����#'� !���������� ��� ��� !���������������� ��88�84�� 8@�� 8K�� 8;�� D�(������ (������������������( ������' ������������#������������ ��� ������������ �������� ��� (�� �+������( ������������� #������,�����+���� ��(����>�����' � ������� ���� ������#'������������( ��������������������+�����������( ���� ����*�'���( ������������������*����O��>O���-8;��8=��8:���������������������������������' �*������������*�����'����������#������������������������)���������������' ��1�� ��������������������#���� ���������������������!������������'����������������(���+������������������� ��,�'����������������� ������������������������������������� ������ ��(�� ������ ��� ��� ����������( ��������������������������������(�� #���� ����� ��>��� #'� �� �������+�����������8:�8?�2����' �.� ������ ���������� #'� ������+������( ����!������������������ #����������#�#�'������#'����������������� ���+�����������������#����"����'������������� ������� ��� ����� ����������� �%�+����45�49�48�44�� *���� �����' ��� ������� ���������������#'��� ������ ������������������������( ���� #������� ���+���������(��������#'��� ������ ������������������������'�(��8?�4@����� ���������������( ������' �����������+������ ��!������������������� ����+������ �������� ��!���,�������'���+������*����� �������� ��� ����������(7/����������������������(�����������������(�� ���� ��� � �������� ���� ��� ��� �+������ ��� ������ ��� ��� (��� �( � �!�����

As granzimas sãoenzimas, proteinasesde serina

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

117

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

�� ��!�� �������� ��������� ��� ��E��������&� ���� ��������� ��!�� ��,����� ������#�����"�������� ���������������7/���������������������+�������� � ������� � � ����� � ���+��������������������������(�������������!������4@��������������M������E�������� +��!�� ��,6� �� ����E��� ��,�� �� ����E��JA2+8� � ������E�����9�� �� ������ ���������� ��7/��� �/A84+�9 �� ���#� �� ����+������������������������������F����(�� ��� �� ������� ������� �� ��� ������ �� ���4@�������(�������,��%���� ����� ���� ����+(�������������� ������������� �����#��+����� ��� ������� �� �����������9�;�:�� $����E��� "�� ���������������(�������������������������������� ������(����� ��+(�(��������� ��� �� ������� �� ���������(�� �������� ������� �� ��������� ��������� ������������������� ��� � ����#����+������!������������ �P�E"���������+���Q���� �����E"���������� �#�������+�������--.� ���������(������� � �������(��������� �� � �� �������� ��(�� ������� ������+���D���! ������������� ������� ��� !����������� �� ���� �� ��������(�� �������� ������� ��� ����(����� ��� ����� ������������������������� ������ �������+������ ����� �� �������� � �!������� ��������(�������,������������������������ �� ���� ��������� � ��� ���� ��������� � ������� ����������� �� �����! ���� �� ,/O+� �� 1-;� � �� 1-:88�

8;�4K�4;�4=�4:�4?�� ��� ������ ����� �.�� ��� ��!����������� �� � ����� ��������� ���������������� ���������������� ����"������� � ��&���������E������ �����!���������88�@5�@9�,��� ���������������#��B���������+

�����4@����� �������� ���� �������� ��� ����,��� ��!�������,������������JA2+8� ��� ������� �������� �����' ��� ����+��������7/����/A84+�9 ������#���������������'��( ��������������������� �����������������#������������������� 4@�,� �' ����'���� �������*���� ��� ����+������������� �����#����������� ������������������������ ��9�;�:��1�� ��������#������������������������������(��������������� � �����(���������������(������������� ���������( � ��� ��(�� ����'����+����� ���������������������( �������� ���,���������( ������' �����!����������#����������������������P���� ����"���Q���������#���������������������.�- ����������(�������(������'�*���������(�� ����'������� #'� ��������� ���� O��� !� ��������' ���������!����������������� ���������� ��� ��(�� ����'� ��������� ����+����� ��� ���������� #'� ��� ��)��*� ������ ���������������������'�����( ����+��������� ������� ��� ������������ ��!�������������( �,��' ����'������������������ ��� ����������� �( � ���� ��������� ����� ��������������������( ����������'��+)�������������,/O+�1-;����1-:�(���!+� ��88��8;��4K��4;��4=��4:��4?��2����' �������.������� !����������� ������ ���� ���� #� ��+����� ��� ���������������� � �������( �������������'��������������������������(����!����������� ����!88��@5��@9�,�)�������������������������#�������(,��' ���'���������������� ���*�����������.������' ��������#'������������+#����#'�����������( ���������������!���������������*����� ��'�����#� ���+���������!����������������� ��88�@8�@4���� ���)��*�������,��' ����'���������'������������������������( ������' �������.��� ��� �� ��������� ��� �'�������� ����

As granzimas A e B,no meio extracelular,podem estarenvolvidas nadestruição e naremodelação detecidos

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

118

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

(�������,����������� �F�������������� �����.������������������������������#���������� �����������������������!���+������������"������ ������#�������� ��� !���������88�@8�@4F� ��#��� "�� ��������� ���(����&���� ,� ��� ������� �����������R����������� ������.����������������+�� �� ������� � ����� ���������� ����C������ �� ��������#����+������ � ������ D��� ��� ������� �����+� �+������(��������� �����������+������� �����E��� � ������ ����� �.� ������� ������������� �����

�������������#%�������������#�����(��� �������������������������� ������������ �.� ��� ����� � ����� �� � ����������� ������������������������E����������� �� ������� ��#���������� ���� ����F������� ������������������������� �������������� ��P���R�Q�������������������#�������������������������

������D���� ������������#%�������� ���& ���� �������������������E������;8�����E�����"�������� � ���������� ��� ����#����� �������������� ���M��������62����+������������&������ 6���������E�����45�����E������ #�������!������ ��� �����88������� E�� ��9:������+ &!� ��@@����� ��� �"��!�����E�������������������2����+���������������7 6�U���������89�����E������ #�������!������ ��� ���� � ;4�?� ����� � E�� �� @5� ����� + &!� ��:=����� ���� �������������� ������(�������������� ��� � �������������

����������������#���(������#��������� ��)����( ����������O���������������*������� ��� �����#�����������������( ������' �������.������������*�������+ ����'������������

���������,���� ���( ���������'�*����� ���������������������( ������' �������.��������� ��( � ��� ����'� ����������� ���������������������������#��� ��������������#������'� ��)���( ������������*������+ ���������'� �������� ����� �������' ��������P�������Q��( ��������+������#����������� ���������������������+���'�

��������

,������������#%������*��������������( �;8�����������*����������������)����� ��� ��� ���'�� ,�'�*�� ���� ��������������6/�� �����������2����� �/� 6��� ����( �45���#%�����( �#�����!��*���������+��������( �88�'����� ��� � �9:�H� �!�+ � �@@ ��*������������(����������������� +��������D��������������2������D� 6��� �����(89� ���������� �( �#���� �!��*���� ��� ��+��������( �;4�?�'����� ��� � �@5�H� �!�+ � �:= ��*�����������(���������� ����'��������'��#���������������*��������������������� ��������(�� ������D������2����� �D 6��� �����( �99� ���+��������( �#�����!��*��������������(4;�4� '���� � ��� � � 8;� H� �!� � � ;@'��� �� *���� ��������� �( � ��� ����'� ���+��������,����������*�������(�� �� �������+����������������������( ����D�� ������'T������( ���� #���T�������'�����������

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

119

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

� ���(�� �������������������� ������2����+���� �7 6� �� ������ ���� 99����E���� � � #��� ��� �!���� �� � �� �����4;�4������� E�� ��8;������+� &+!� �� ;@ �� �� � ����������� � ����������� �������������(��� ������������������������������� ��������������D�� �+������.� ���J��������� ��T�������� ��� #���D����+��N����������������������������(������� � ����!� �� ��� :��� ������ "�� �� �!��� � ��������� N� � +��������� #������������"���������N� �����(������� �� 4555� �� � ������ 95 �������� �� �������� ���� ������+�� ������,���� ��� � �������� ��� ��� ����(�+������ (��� � �������� �� H45I�� ���� N� ���������������������������#�����������

������(���$��������)�$*"�$�+�����

)�$*"�$�,

T���+�����������(� ��� �����������-1��6�� � ���������,A����-.��� �� ����������� &�������������� ��� �"���������� �!������ ��� � ������ �� ��������� ������������� ���������� ����+������ ��� "����������������� ������������ �������#����������������������+����� ������+�� � �� ������ � ����#������ �������� ��� �#����B������ ��� ��������� ������������� � ������ �� �T>- � (���� �����������������������������������7� ��� ����(����������

(���$��������-+./

G����������� �����������(��� ��������������� � ������ �������� �� � ��#������

.������ �����( ������!� ���'�:���*���)��(�� ��������������������(�������+������� ��� ��� � � ������� #(��� #������������������(������4�555�� ���(���95 ��������(���*�������� �*�������������������'���#����� ����*��)������H45I������������������������#������'��������

�����

#�$��������0 �1�$*����+�$��,

����-1�������������������(����*����(�������������6����-.�D��0����� �����)��������' ������ ��������( �������*����'������*�������������' �!�������������� ��� ��� ������� #'� ��� ����+�����' ��������������#�'������������������(��� ���������V�����������#�������( ��������������)��*��������#������������*�����*��(�� �����#+���#���� �( � ���������,�� �������������( ������' ��T>- �*����� ���#'���+������������( �����������'���7 �*�������#��������

#�$��������0 �-+./

,����*�������������#'��'������� ������+����� ��'� �( � (��� ��������*���� �'��������#������ � /+W4+�8+(��'� ���'��'X+-+���'�����'���'�'���'���� �O�D22 � ��� ��+������� *���� ��� (����*���� �������6O�D22�+Y����+Y�O�D�Z�2�'�'���'����O�D22��'���'������������������������#���#�����( �4@5� ��������T>- ���+�����'��������� �������� ���#'���)�������������'��( ������������#�������������+������

#�$��������0 ��"��*���

,����*�������������#'�����������'���������#�� ����� �������K@;� ��*������#��+������ ���������� �(� ����������

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

120

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

����������/+W4+�8+(��'� ���'��'X+-+���'��+���'���'�'���'�����O�D22 ���������� ���������������6�O�D22�+Y����+Y�O�DZZ�2�'�'���'���������������O�D22������������ �����������#����B�������4@5� �����������������T>- ����� ���������� ��������� ����������������������#�����������

(���$������$��"��*"�$

O�+������ ��������#�� �����������������K@;� ���� �� �����������#���������� ���������� ����� �� ������� �������� (��� !+������ � �>-�

+2�"������$�3��"!$

������������(��� ������(����������� �(�������&��������� ����������������� ���#%�����������������������>�����+ ��������E��������� ��������� (��� � ���������� �������� ������� ����� <� ����+������ ��� �������� ���������� ����� �� �������� ��������������P�����Q���������&�����������������������&���� �����������(��(��������������N���&���������������E��������������+�� �� ������ ��≤5�5K� ��������+�� ��������(��������

������������ ��������� �#����� ������ �"�� ��������� ����� �T>- � ��&� �����(�������+ ��� �� ����� ��[5�5K � ��� �������������E�� ���� ����� �� � ����������� ����� �7 � �:8�K?<48�=5 � "������ ������ �� � �� ���(����� ��� ��������������������7 ��49�98<�8?�: ���� ����������������������&�����/ ��49�?@<<9=�:: � �O���� 9 �� �� ��&���� � �������

�'�����������,�� ������*��� !����� �� �>-�

-�$�"��"!$��$$���"�

,���������*�������(��������A������(��!���\�����������������*�����������������'>����'����,�� �������*�� ������ ������ �����������<�����������������( ������ ������������������]���+,�������� ������+������(�������'����#�*���*����������,� ����������������'����*��� ��#'�����������������������( �������������������,��������≤5�5K�*����������������������'�����(������

������,�� ������� �#����� �������� ��������� �T>- � �������'� ��� �����(������'� ��+����� ��[5�5K � ��� ����������( ��������*������� ����'�������������D ��:8�K?<48�=5 *��� �� ����*���� ����� ��� ��� �����+��������������������D� ��49�98<�8?�: ���*������������'����������������/� ��49�?@<9=�: �� �O���� 9 ��,�� ����'���� �( � ��������� �+�����������*������ ��'���( �������������������������,��(�����������������(�����������������������*����#����*����� +��������������'����������������������'�������������������*���������������������+�������*�����������#�����������������������������#������'� ��)���( ���� ����'�����������-����' � �������'� � �>- �� ����� �����+����'�����*��������(����������������������D ���98�K<K�@ ���������������D� ���?�=�<4�: ������ �����������������#�������������/� ��=�K<9�? ��O���8 �,������'�����( ����������������������*�������������' �������������(����������������

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

121

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

Fig. 1 – Graphic representation of average SACE (U/L)

activity. Enzyme activity was determined by spectro-

photometry; readings were made using a wavelength of

340 nm. It can be observed that the group of sarcoidosis

patients (Sarcoidosis Patient) has increased statistical sig-

nificance (p<0.05) of ACE activity (82.59±32.70) compared

to the behaviour of the Healthy Control group (31.94±17.88)

and the Patient Control group (31.12± 29.8).

���E������ ������� �� � �� ����� ��������������������������(������������#���������� ����������������(�������������"��������� ����������������� ������ ��������� ���� � ��� ������ ��������� ���&��� �� ��+���� �������� �������� �����#�������"������������ #� � ������� ��#���������� � ����������� ����������������������� ��� �>- ��������������� ���� �������� �� ��������(������������������7 ��98�K<K�@ ������������7 ��?�=�<�4�: ���� �������� ���� ����#�����������������/ ��=�K<9�? �O����8 �����&����������������E������ �������"�� ���� ��� �� �������� ������R������(��������������������������������������������� �����������������������"�� ���&� �������� "�� �� ������ �� ����������������� � ���������#����������C����������������� ������ ��������������� �#� ���!���������������������(������

�( ������������'��������������( ����+������+�������� ����'���������'���������������������' � ����� ���������� �� ��(��� ��#���+���'� ��)���( ���� ����'���������'�����+��������������#��������������((��������������� #�*�� ����������� ��� ���+�������������� ����'���������'�,�� ������������� �( � �����' ��� �T>- ���*�������(���������������������������D �:9�@<9=�= ��� ���������������(�� ����������/� ��95:�5<4:�4 ��V����������'����( ������������������#��*��� ����O����4 ���*��������'�����( ������������������������ ����� ��'��((���� ��� ���� ��������+����������'��(������������������'������'���� �( � ��������������( � �����' �.�O����@ ����*�����������T>- ���������������� ������� �D � �99;?<84�K � ��� �D� �99=�5<45�8 �*��������(������'�����*���� ������������������������#�������������/� ��94K�8<4;�K ������'�����( ������+����������������������(�� ������������

Fig. 1 – Representação gráfica da actividade média daSACE (U/L). A actividade enzimática foi determinada porespectrofotometria, as leituras foram efectuadas a umcomprimento de onda de 340 nm. É possível observar queno grupo constituído pelos doentes com sarcoidose (DoenteSarcoidose) há aumento estatisticamente significativo(p<0,05) da actividade ACE (82,59±32,70) comparati-vamente ao grupo Controlo Saudável (31,94± 17,88) e aogrupo Controlo Doente (31,12± 29,8).

Controlo Saudável

Controlo Doente

Doente Sarcoidose

Healthy Control

Patient Control

Sarcoidosis Patient

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

122

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

Fig. 3 – Graphic representation of average concentration

of granzyme A expressed in U/L and determined by ELISA.

As can be observed, in the Patient Sarcoidosis group there

is a reduction with statistical significance (p<0.05) in the

concentration of granzyme A (81.4±17.7) when compared

to that observed in the Healthy Control group (108.0±38.3).

In relation to the Patient Control group there were no sig-

nificant statistical differences observed.

Fig. 2 – Representação gráfica da actividade média dalisozima (mg/L). A actividade enzimática foi determinadapor turbidimetria; as leituras foram efectuadas a umcomprimento de onda de 546 nm. É possível observar queno grupo constituído por doentes com sarcoidose (DoenteSarcoidose) (12,5±5,4) e no grupo constituído por doentescom patologia pulmonar sem componente granulomatosa(Controlo Doente) (9,7 ±3,8), há aumento estatisticamentesignificativo (p<0,05) da actividade enzimática compara-tivamente com o grupo Controlo Saudável (7,5±1,9). Nãose observaram diferenças estatisticamente significativasentre os grupos Doente Sarcoidose e Controlo Doente.

���� ��������� ��� ����� � ������������ ����������������������� ������������ �� ������ �� �� �T>- �������� � �������� �����(�������� �������� �7 � �:9�@<9=�= �� �� �������� ���� ������(����������������/ ��95:�5<4:�4 "�������(������&������������&��������+

����������,������������( ���� ����'������������������*�'����'���"��������� #���������( ������+���� ���� ��� �������� ��!�����'� ��������� ������J�*���� ���� �( � ��� ������#�#���������� ��)����������(����������������������������������'�����*�������������!���

Fig. 2 – Graphic representation of average lisozyme acti-

vity (mg/L). Enzyme activity was determined by turbidimetry;

readings were made using a wavelength of 456 nm. It can

be observed that in the group of sarcoidosis patients (Sar-

coidosis Patient) (12.5±5.4) and in the group of patients

with non-granulomatous pulmonary pathology (Patient Con-

trol) (9.7 ±3.8) there is a significant statistical increase

(p<0.05) in enzyme activity compared to the healthy con-

trol group (7.5±1.9). There were no significant differences

observed betwween the Sarcoidosis Patient and Patient

Control groups.

Fig. 3 – Representa-se na forma gráfica a concentraçãomédia da granzima A expressa em U/L e determinada porELISA. Como se pode observar, no grupo designado porDoentes Sarcoidose há diminuição, com significadoestatístico (p<0,05) da concentração da granzima A(81,4±17,7), quando comparada com a observada no grupoControlo Saudável (108,0±38,3). Relativamente ao grupoControlo Doente, não se observaram diferençasestatisticamente significativas.

Controlo Saudável

Controlo Doente

Doente Sarcoidose

Lisozima Lisozyme

Healthy Control

Patient Control

Sarcoidosis Control

Controlo Saudável

Controlo Doente

Doente Sarcoidose

Granzima A

Healthy Control

Patient Control

Sarcoidosis Control

Granzyme A

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

123

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

Fig. 4 – Representa-se na forma gráfica a concentraçãomédia da granzima B expressa em U/L e determinada porELISA. Como se pode observar, a concentração dagranzima B nos grupos designados por Doentes Sarcoidose(116,9±23,5) e Controlo Doente (117,0±30,2) apresentadiminuição, com significado estatístico (p<0,05), quandocomparada com a determinada no grupo Controlo Saudável(135,2±36,5). A comparação da concentração da granzimaB dos grupos Doente Sarcoidose e Controlo Doente nãodemonstrou diferenças estatisticamente significativas.

� ��� �O���� 4 F� ��� �������� �� ��&���� �������� ���E������ ���� ������ ���� ��(����������(������������������������� ����� ����������R�������������� ��&���� �� ������������ � ������ ��.�O����@ � ��������"��������������������T>- �������������7 ��99;�?<84�K ����7 �99=�5<45�8 � ��&� �����(������� ��� � �+��E�� "����� �� ������ �� � �� �����+��������#�����������������/ ��94K�8<4;�K ��� ��&���� � �������� ���E������ ���� ���+(�� ��������������R��

����������������������������������� ������� � ���(&������"������� #���������������E����������������� ������!�������������������/�������������� ���� ����+����#���������������E���������E(������������� � ��� ��� ������ ���� ��+ ����� (���� �� ����������� ��� �����R��������������!�����@@�@K������������!������

��������������������@@��@K��,�'�������#��+��������!���������( ������'������������+���� ������ ���( ����������,�'��(����� ���� ����� �������� ����������� ��� �������(��������� ������� ��� ��� (�� ������ �(������������������ ��@K�1�� ����� ����� ((����� ���� #� ���������� ������ ��� �� � �������������������� ���� �����������#������'������#������ ��� ��� ��������� �(� �������+�����*�����������������������#����������.�-�����'�����*���������*���������#�������+(�� ��������'�������������������������'��(����������J�*���� ���� ����( ����������� ������' �������������*�����������������������������#������'�����������(����������� ��� �"����� ,��� #��������� ��)�����������(���������P�������Q��(�������� ������� ��� ������������ �������������!��� ��������������������'�,������������+������������' ����� ��� ��� �( � ��� ���� � �������� #��������� ��)��� ��� ����� ��������'�� ,���� ��' �

Fig. 4 – Graphic representation of average concentration

of granzyme B expressed in U/L and determined by ELISA.

As can be observed, the concentration of granzyme B in

the Sarcoidosis Patient (1169±23.5) group and Healthy

Control group (117.0±30.2) present significantly significant

reduction (p<0.05) when compared to that of the Healthy

Control group (135.2±36.5). The comparison of concentra-

tion of granzyme B in the Sarcoidosis Patient and Patient

Control groups did not demonstrate statistically significant

differences.

O diagnóstico dasarcoidosepulmonar, nemsempre fácil, requera combinação dosdados clínicos e dosdiversos meiosauxiliares dediagnóstico

Controlo Saudável

Controlo Doente

Doente Sarcoidose

Granzima B

Healthy Control

Patient Control

Sarcoidosis Control

Granzyme B

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

124

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

#������������ ����� ���(����������������� ������ G(��� �� ���� �������� ��������R�����(���R����������� ����������(�� ��������������� ���������������@K�/���C��� �����������M ���������������(�������"���������� ���������������"���� ����� � ���������������#������#�+��������� ����� �� ����������� �� ����������� ��� �������������� ���� (�"����� ����E�������--.�����%����&���������� ���#��� ��(�� ��R�� ����� ���!� ��� ������������������������������������������ ������������������ ���������"�� �� �����"������ �����&����� ��E������ ������ ������������ ��#��������� ��� ���������������� ��������#������������������� ���� ����������������� ��P���R�Q� ��������� ������� � ������ ������������� !��� ������� ��#�� ��������������� ��� �� � ��������� �� ��������������� ���� ���� ��������#���������� ����� � ����B����� ����� ����������� ������� ��� "�� ��������� �� �����(�� ����� ������������1� �������������11����� ����+��R��(������������� ���������� ������+�������������������������������������/������� �� ���������� ������� �� �� #� ���������������������������� ������&����������������������������������� ��������(�������,��7@�����(� ��� �������������� �����������������������(����������������������1O�����+��������(��+��� @K�� �� "�� ������#��� ����� �� �� ���� ���������������������� ����������� � ���������� � � #� � P ������Q� ��#���������� ������������ � �� ��� "�� �� �������� ���� �� � ��������� �� ������������ ��������������(������� ������������������������� ������������������ ������+

*����������'�����������(�� �������( ������+������1���������������11�����������'��������������������������'��������#'����������(������������������� ��1������������(������������������������������#'������( ���� ����'���������#'��������������( ����������� ����,��' ����'����7@���+��(��*����������������(���' ������������������������������( �����������(�������( �������1O�����+��������(����� @K�*�����������#��������������������������+����������A���� ����( ����������#�����*����#���������#������'� ��)����������������������������'��( ��������������+�����������' ����(�������#������(������'�������������� ��( ���������*�����������������'��� ���� ���*���� ��� �#���� ��� ��� ������������#%������������������*������(�� + ����'����+������� ��������� ����'���+������'�� ��� ���'���� ����� ��������� ��������� �( � #�*�� @5^+?5^� �(����85�@K�@;�@=�@:�@?����� ��������'� ������ ����(����������������������������������+��������( ������' �#'�����������������( ������������������� ��K��D������,A����9??:K5�(����������������(���������+������� �( � ���+��(�� ����'� �'��)����*�������������������������������������+�������*����*���� ��� �������'� ����������� ������#��� ��� ��� ���� ��� �(������� ��������������� � ���� ���������������������( ���(�� ����'��������'�������������@@�@K�G�������#����������������'� ��������� �����(������'� ������������ ������� ��� �����������'� ��[5�5�K � ��� ����������( ��������*���� ��� ����'� ����������� �� ���� ��������#������������� �����������������������������( ���������*�������+�����+�� ������ ��� ����'� ��������'�� ��� ���� #

O doseamento deSACE temdemonstrado ser umbom “marcador”laboratorial nasarcoidose

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

125

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

�� ����� ���"�����#����� ������������� ����� � � ����� �� � ������������ �������(�� ������������������ �������� ��������� �"�������������������������������@5+?5^���������85�@K�@;�@=�@:�@?�����(������+����� �� %&� (��� �(�����N����� �������� � N� ������� �� ��� ������ �������� ��������� �� ������� ������������K��D������,A��������9??:K5����(����� � "�� �� ����� ��(��������� �����������������������+��(�� ����������"����������������������������� ��"��������������� �������&�������#�������� �� ������� ���� �� ������� ������ �� ��� ��� ���� ������� � �#� �������� �� �������� ��(�� ������� ����������@@�@K��������������#�������������� ���+����� � �� ���� ���������� ��� �����(���+����������������������[5�5K ����������������� ������������� �������� +�������� ����� ����#�������������������������� ������� �����������������E����� ����� �� ����������� ��� ����� ���������� ��������� ��������������������#�������� �� O���� 9���� ����� ����������������������� ������������&������� �� � ��� ��������� � ������������85�89�@K�@:�K9�������������������� ������������������� �����"��������������������������������E������ ����E������&����� �� ���� ������ ��������E�� �������� �� � ����������� ��� ������ � ��(�� ����� �������� ������� ������� ���+���� ���������������M������������(���+���� ��� ����#��!�������&���������������E���������&���� ���������� �������"������������ ���������#���������������E��"�� ����������#�����������������������#�+���������������������� ������������� ����� ����� �������������������

������������9��,��������������������'����������������������������)�����*������(��������(�������������85�89��@K��@:��K9� �����������������'��( ���������������� ��'�������������� �������( ������'� ��#%���� ������������( ���������*�������+��(�� �+���'���������������� ��������� ����'���+������'�����������������������(������'��*��������������'������'�����( �����������+��������� �������������'��� ������������������������������#����#������'� ��)������������#��� ������������#������'������+�����( ���� ����'������������-����' �����������������' �������#' ����'��� ����������������������������1��������(�����������#���������������'�������'������������'����'���'�����( � ������'+�������� �( � �� #�������� *������ �������'��� +����������#���������������� �� �������'������������( �����#%�������������'������� ������ ����� ��� ��' � ���� ��(�� ����� (��������� ��� ��� ������� �� ��'� �(*�������������'�����������������(�����(���!� �����������'�����������'��( ���+(�� ����'����������� ��� ����������������#'�� �����(�� ����'����������������( ���(�� �������-����' ��������'����#���������������� ��)���( ���(�� �+���'� �������'��*���� ��� ��� ��� ��#������'� ���������������( ��� ���� ����'�������1����������������'������#����������������#+�*�������' �������������"��>�������'��(��� ������' ��((����������������������+����((������������#'���#��������@K��@;�,������'�����( ���������( ������' ��������'�����������'����*���O����8������� ��������#�*�����������������������'������(��������+����� ��� ��� ����������� �������� ��� ��������*��������������� ����'�������*���+���� ��(�� ����'� �� �������� ��� ����������������#���������������'��������������

A lisozima é umaenzima catiónicaproduzida porcélulas da linhamonocítica/macrofágica egranulocítica

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

126

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

�������������������� ����E����> ����(&�������������E������D������������������#���+��������(�����������������"��������������������� �������������E��������#���������� ��#����� �2�� +���������� ����� #� ����"���� �� ������������E��������� �� �������� �����������+�"�� �� ��� �� ������ � ������ ������(���R������������ ��� ���������"����� �������������� ��� ����������� �� �����! ���� ��� (�������������� � �������(�� ���������� �����"���������������+#����� ���� �������� � �����(�� ���������������������������(�� ��������������+���������� ��� �������������� ��� ������� � �������� ��(�� ������� �� ������� ��#���������� ��� ����������� ���� ������������ �������$�����������+ ���������������������������������������� �� ��� �E"���� ������>�������� ������� ����������������������������(������� ��� �� �������� � ���� � ��#���+����@K�K8��� ��&���� ��� ��������� �� �������� ������� ���������#����� ���������O����8 ���� �� �������� ���� �������� �� ������������� ��� �����(�������� ��� ������ ����� �� � ��������� � �� � ������� ������������ ��� ��������(�� �+�������������� �������#��������������������������&�����[5�5K ��/���������+����� �(����� �����(�������� "����� ��� ������ �� �������� �� ����� ���������������� ������������ ������������������ �������������� ��������������� ���������������������� � � � #��� ��� ������� ��������E��� ���������� �������������� ������������� � ��������� ��� ����� �� ��������+ ��� �� � �� �#������ ���� ����E������&����� ����� "�� �� ��� ���� �

��[5�5K ��,���*�����������(�������((���*����� ����������'�*����� ����������������( ��������������������*������������*���� ���'���� ��� ����'� ��������'�,�� ������� ��� �����' � �������'� ��� #�����������( ���������*�������'������� ����'��������'����*������� ����'�������������� �������������#������������'���#+%����� ������� ����� �������� �����' � ��+�����'������#�����������������������(��� ����'� ������� ����������,�� �������#���� #'� ���� ��� ���������*���� ������������� ��� ���� �� ��'� ��(�� ������ ����������������(�����������@K����������������� ����'���� �( � ��������� ��������� ��������� ����'��� � �������� ������ ��� ��+������ *���� ��� ����'� ������������ ����������������'��( ���� ������' �����#��������������(���������������(������+�������������� ���������������( ������' �����+���� �� �����(������ ������������ ���������[5�5K ��������������( ���������*�������+����������� ���������������*������������'�����������������������#� ��� ��O����4�1��O����@���(������������ ���� ����(��� ���������������( ������' �.��*�����#�����������������������( ������' �.��� � �������*���� �� �����(������ ������������((���� ��[5�5K �� #���� ��� ��������*�������������������������*�������+�������+ ��������� ����'���������'���� ������������ �����������������,�������' �������� �������������#'�����������������( �,��' ����'�������������)���������������������������������� ���� ��� ���� �'������� ����'���� ���� ����(���������� � ����*�����*� ���������� ����� ���������( ������������( ����+��(�� �+���'��'��)�������������,/O+�1-;����1-:

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

127

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

���������������� �����&����������� �� �#� � ���������������� ����� ������ 7� ������ �� � ������� �������� ��� ����� ���� ���� �#������� ���� ����+������ ���� �� ��(�� ����� ����� �� ���+�������� � ��������@K�� D��� ������ ����� ���&���� � �������� ���E������ ���&��� ���������� ������"���������������+ ������� ������������� ������������������� � ������ �� ���&� ����������� � ��������������������������� ������������������������������������� �������+������� �������� ���������� ��� �����(�+������� ��[5�5K � ��� ������ ��������E�� ���������� ������������� �������� ��������(���������������������������&����� ��������#���������O����4�/��O����@��"�����(�������� �������������������������������� ��.���� ���#������"������������������������ ��.��&� � ���E��� �� � �(����� ����������+ ��� �����(�������� ��[5�5K �� ������ ���������� ������������ ������������ �������������� ���������������� �������� �������� ��� �� � �� ������ ����������� ������������ ����������������������#��������� ������������ ��� ���(������� ,� � �������������� ��������� ����������+�������������������������!��������������(���R��� "�� ����� ��� �� ��� ������� �� ���+�������������������+��(�� ����������� ���,/O+�1-;��1-:������������� ���������� ������ ��88�8=�8:�K4�� �� ������ ��.������N� ������������+��������������������� ������ #���������!��E���������������� �� ���� ����������� ��� ����E����������C��� �������� �������������� �� ��#����������������� ���������E���������+�����.���� � #�����(� E���������E���

����������������( ������� �����������8�8=��8:��K4��2����' �.��������������( � ��� ������ ���� #'� ���������� �������� � #�������!����������������������� �� ���������������������������������,��������������� ��� ���� #'� �������� �( � ����#������ �( � �����2����' �� ��� �'���������������.����� #���(�������+���������������� (� ��'�.��+8�� ,���� �������� ���������������������( �����������(�� ��( �.��.��������������������������� �������+����� #����*���� ��� (����� �(� �'��+���� ��������������+���������� ��+������ ��� �������� ��� ��� ����������� �(����������������������#'����������K4��K@�2����' �����������������������#���#' ������ ������������������'�!�����8?��4@��KK�/���������#���������' ������������������� �� ������ �������������� #���� �������#������������"����������� �����������.�-88�@8�K;�K=��*����� ������� ��������#�+���'��������������������'�!������� ��+������� ((��� ��� ��� ������� 4=�� 4:�� ,��� ���� ���� �������'� #'� ��� �����"���� ��� ����� ���'�� ����� #� ��(���� (��!� ���� ��� ��� ��� ��� ��������� ��� ����������������,���������( ������' �������.������!����������� ������ ��� ���� ��� ��� ��+)��*��� ��������#����'� �( � ���� ��+������� ��� � �����(�� ����'� �������#������������������������������������������ (��� !� ��� ��� ������������*����� ��� ��)�����*����������'��( �����'+7))�������9??:@8��*�������'���������������������2����' � ����� ��� #���������� ��"���������(��������������( ��������������/0�����'����!���-, ������������*�'��������������'>�������'��( ��������@8�������������( �2����' ������.�*�(����������� ���(���������*�����.L���

As granzimas sãoserinaproteaseslibertadas pordesgranulação doslinfócitos T e decélulas natural killer

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

128

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

���+������������ .��+8�� 7���� ������ ���������(�� �������(�� ������������.����.���� "�� ����� ��������� ��� #���� ������������� ���#��������������� ���� ������� ������ ��+������������� ���+ �������������������������������� ����� ������� ���� �������4�K@�� �� ������ ����� #� � ����� �� ���� �������� ��� ��� ����� ��� ��������� ����� ��� �����+����8?�4@�KK�/ ��������������� �����#���������� ���������+������D����������������������+(������ � �� ������� �E"����� #���������� � ���������� ����--.�88�@8�K;�K=����"�������������#�������������� ����� �����!��� � ���� � (���� ������� ��������� �4=�4:���������� ������� ��+ ��� ���� �������� ����� ���� ��������&� ��� ���������� ���� ! ����� �� ���!�����������������������&�������E������� ������� � ������ ����� �.� ��� ��!��������������+������� ������������#���+�� � ����� ����� � �� �������� � �+����(�� ������� �#������ � ������������R����������������� ������! ������������������"������������������ ������������'+7))�����������9??:@8�� "��������������������������E���������� �������E"�����#������������� �(����������������������������������/0�-,�������!���� ������� �������������������>�������� �� ����@8�� /E���������������� �����.� (��� ���+������������ ���������� � ��(���������.L��L1J+9�����E"�������������������� ���������� ���������� ������� #� ����--.���������� �����������(��E�������� ���� ���������������+��#����� �DJ �� /�� DJ�� �� ������ �� ������������ ������������������"��������������(� ��� ������ ������������+

J1L+9����������������"��������������*������ �����������������������������.�-��(��������*�����' ����'�����������������*����'�����������'���� ������� �JD �� 1��JD�2����' ��� ������ ��� ���� �������'�*���� ��� �������� �(������ ��� ��� ��� ������ ��������������������������'��������������� ������ ��88�@8�K;�K=��,���� ������������������� ����� ��� �������'� �( �2����' ��� ���������'���������������( ��������������.�-�*��������������������������������������� ���2����' ��� ��� ��� ����� ��� ����������' 88����������������������'�#'�.���)�0�����855@@4����*������#������������� ����+������ ��� ���� ���� �( � �����' �.��)�����.�-������*�������(������'�������� ������������(���������� ������������#%����� ,�� �������� ������� ����� ��� ����������������� ���������� �����' �.� ��+(�� �� �� �������� ��'���������������� ����*����� ��� ����� �������� ��� ��� #� ���+(�� @4�������������������������������������( �#��������' ��� ���.� ��� ��� ������ ���(���������'����!����'��#������������������*�����������������*������ ���������*�������#�������������������������' ������� ��'���������������� ��������� �( � ������88��,���������������� ��������������( ������' ������.������#��������������������>����� �������( ��������' �������������(�������������������������������+(�!��( ������������������� ����'��������+�����������( �������������������������J�*���� ����� ���� �����#���� *����������������'��������((������������ �������'������������(������������+������ �((������ ��������'� �(��� ��� ��O�����4����@��*������������������� ��+������� ��� ��� (�� ������ �( � ����������

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

129

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

������ ���� ���� ����� ��� (��������+�������88�@8�K;�K=����� � �����������(�� � �����"�������������������� ������&(��� ��� ������������� �� � ��� �E������������������--.�����"��� �������������������"�������������� ����������� ������ �������� ��������88�D���������������������������.���)�0������855@@4�� �������� ��� ��#�S�"�����(������������������������������ ��. � --.��� ���+�� �#������ �� ��������(�������������������� �������� ���� ����������������������������� ������� ������� ���� � "��� ����� ������������������� �� ������ ��.�� ����� � ����� (��������������� � ������ �� "��� ���������� � ���� ��������� �������� � �����(�� ��@4������������������������ ���������������"����������� ����"����������� ��.���� ����� ����������!�������������#��+��������������������"����&��������� � ������� ������� "�� ����#� � �� ������� ��� � � ����� ������� ��� �������(�������������������� ��88����� ������������������������������������ �����.���&� ����� ���������� �� � �� ����� ���+�������>����� ��������� ��������+���� �������������������(�������� ��(�!���� ���� �������� �� ��������� ���� �����������������������������������/��������������������������&�����"������������� ������ ��� � (���� �� �� ��+��������������(��������������� ����+�������(���������������� ��������(�+����������(���������O�����4��@����"�����&����������� ����������� ���(�� ������������� �� ������������� �������� �� ��&���� �������� ���E������� ���� (��� ����E�����(�� ��� ���� ��������� �� "�� ��� �������������� �� � �� � ������ �����E�� ���

������� ����,��������������'�����( ������+����������������*������������#��������(�� ��������������*����������������������� +��� �( � ����� ���'�#���� ����((�������J�*+���������� ���������������( ������' .�������� ��������*����� ���������*���+���� �����(������ ��� ��� �����!� ��� ����������������������(�������(��������������+����� ������*��� �� ���� ��� ��� �����'�������������������������� ������� ���� ��������� ��#����(�� �������������� ��������( ����� �������������������#�������*�(����������+ ������������������������������� ��������*�������( �������'������������*���������������������������� �)���������#�����������' �.������������#�����(����#������'� ��)�� ������ ��������������+�������1��������������������������(���(��+��������������� ��������������� ����+ �����( ���' �����.�-����������������'�#����� ��(�� ��������� ������� ���( ��������������(�� ����'��������

�����������1��������������*��������� �����������������'����*������������������'������+������*���� ����������� ��� �����(������'� ��+�������������������*����*��#�������������������������'��������������*���������#������������,��������*����������+����������((�� ������ ���������( � �+��������������' ���������� �����������+���#�����������������������#������'� ���+��������( ������������-����' � �������'� ���*�� ����������� ��� ���������( � ��(�����������+������� ������+ ����'�������������*��������������������+��#�� ��(������ (��� �((������� ��������#�*�� ��� ����'� ����������� ��� ���+

Os resultadossugerem aparticipação quer dagranzima A quer dagranzima B nosmecanismos decitotoxicidade celularobservados nasarcoidose

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

130

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

����� ��� ����(������� /�� �������� ��������������������������� ��.��������������R�� "��� #���� � � �����(������� � �� ����!� ��+�� �� �����(��B��������E������ ��� ������ P��������� ���Q"������� �������� �����������P���+���������&��Q������ ���� ��������� "��� #���� ��� +������������� �����(�� ������� ����"��� ��� �� !������ �� � ������� ���� �����E�����������������R��(����������������������+������ ������� ���������� ����+��������������"�����&���������������+������������������������E���"���������� �.����������������� � ���������#�����+�����C������������������ ���� ��������� �����������������������&����� ���������"�� ����� �������� �� #� �� ���� ���+ ����� ��� ��� ��� �--.�� ����� "������ �������������� ����������(�� �+�R�� ��#�� �� �������� �� �������� ��(��+ �����������������#���������� ���

����������� �������������� ���� ������������������������� ��������"���������������� ���� ����� �� � ��������� ��&�����(������� ����� ������ ����������"�� �#���& ��� ���� ������� ������� ���+����� � ������ �� � �� ��#������ ������������ �����E���� �� "�� ���� �� ���������������(�� ������������������+ ���� ���� ��� �� � �� ��� ������#���� �������������������������� � �������+��������#����������������������� �������� �� ������ �� �������������R�������������������������� �+����� ���� ������� �������� ��(��������� "����� � �� ���� ����E��� ������� ����� �������������(�����������������������+ ������������������� ���������������������

�������������� ����'���������'�,�������������������������( ������' ������.���������������������������(�����*�����'��������'�����������'������������*� (��� ��� ��*���� �( � ������������� ��+���������������������������������������'��������' ���������� ��������(������������( � ��� ����'� ������������J�*���� ���������#����� ��� �������������(���� ���+���'��������#���������O�����'��*��������*������������*��������'����������������� #���������� +���������������'��(���#%�������� ��� ���� ����( �.�-��������(�����������(�+���������������������

������ ������ ������!�������"�������#���������$%&'(

�� �����)� � ��*� ���� ������ ��"����

A actividade SACEnos doentes comsarcoidose estásignificativamenteaumentada

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

131

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

�� ��(������������������������������+ ������.���������������(���������E������"����� ���������� �������� ���� ����� �� � ������ �������R��� #���� ��������� "��� ���� ������ �� � �� � ��������������������� ������������ ��������������������������������������� ����������������������(����������������E����������������������� ���� �������O���� ����������E ���������������������� �� ������ �� ����� �� �C ��� �� �������������������������� �� ��� ���� � --.�� ����� ����������� �����������������������

���+������ ��� �������% ��������&�� ��,�'����� �-.�

$%&'(� �� /������ ������ � �� ��*� ���� ���� ��

)� � �0

�������������������� !"9��������)������������'������������� ��� ����+ ����( �������������_�1����A�8554F8K468+4�8��GA�7��.�����2���/��A�2�����7�����������D��1�����������(��� ����������� ��������������������( ����+�������`�_�1���A�8554F8K46@+9=�4��/�����V���(���� �����(���������� ����������+����1�6�D�������'�+�.���������'�� ����-����6�V.��������� ���'�-�F�9??:����69KF����9K=+9=8�@��������������_� ��-�*��,����������������� +����1�6�D�������'��8�������#����6�A��#'F�8555����6@F����4K+;5�K��A��(�� ���a� �����G����� D��Aa���+A'���)�.�7�������,��V�� �0��������)�A�����������������+���+���������' ����� �������' ������ �����(� ���������������( �������������_�1���A�8559F�8@?6==+:4�;��A��(��V�b���������Aa���+U����� �_��,��'��)�����*��)��������������������������������������_�1���A�8554F8K469:+45�=��.�%� �����G'#��)���A�%���A��D��������__���A������)A_��1��������A���G�������((�����������������������+��6���K+'������'������������ �����������������+������� �_���� ����9??=F9@K�4 684@+8@9�:��7��A�2������7������b��O��'����.����_-��-' ���'D������������D����.����GA����� �����'��( �(� �����

�����������������T0��,����!�8555FKK6=K9+=K@�?��.�%� �����G'#��)��� 1��������A���O����)�AA�,�� �����.V��G��� ���A7��.�����������������O�+ ������ ����������� �( � ������������ �� ���+���������������� ���'��( � ����������� ������� ��� � _�G�����������A�8559F9;@685:K+85?9�95�� _�Aa���+U����� �� ����������6� � ��������+������������������������������������������������G��_�9??:F98�4 6=9;+=4:�99��A�-��������.���������������-��2������������������������������G���_�8555F9;�@ 6�=;:+=:5�98��7����G�A������,��� ����( ������������H�(�� ��#������������������( ���*��_�1���A�8554F8K4649+@5�94��c����J_���V����� ��A���.) ���_O��.�'�'�,��.� ���.-������������6�����'�����( �������#�����#'#����������������� �G��G���7���9?==F99;6�?K9+?K@�9@��2��'�V�J��������)����'�����G2��D�� ����'����+�������6� �� ������ ���� #'� !���� ����� ,+�' ����'���������'����������( �������������'��/������_A�9?:9F45K�: 6@8?+@4@�9K��������������� ������2���'��)������������������� ���G���1�(���9??:F9469:@+9?;�9;��7����G�A������O�� ���_7��-���A���/�#��DV�2����.A��L'���D�� �� ����������� !���������(1-+98� ���������*����,�9� �'��)������(���� ��� �������� ����'�������������_�1 �����9??;F9K;6@?K8+@?;5�9=��������V��������V�� �������0��G����_��-��+�����D��0���A+���0��)���-���'��)�������������+���� '��#�������� ��� ��������� ��� ������+������� ����'�������� ��(�� �������D����������( �,�9���,�8��'��)��������������������#�������( ��� ����������(�������� �_�D������9??@F9@K6995K+9994�9:�� 1���A��� ���������A���'��)��>�� �)�������� ��� � ����'� ��� ��#���������� 1 �����,��'9???�_��F85�= 645=+498�9?��L��#��_��L��)� �0��G��������'��' ��� ���������+��������������+�� ����������������������������*�������+ ����'������������������������9??@F996984+98K�85��A�����0��,�)�������0��O�)�����c��G����( �#���� �+���� ��)�������������������#������ ��/������G�����8558F;5�? 69=@9+9=@;�89��2������A��A�����������A���.�����������.��������UG��D��������2��� #����7��A�����2��.�������D�G�������D����� �������( �������������������� ��)��( �������������'�����������������������������������_-�#�1�����855@F;@�9 6K=+;8�88��2�'�A�,� #��'��V��#��)��A����� ���c��J��)

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

132

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

����2����' � �������'� ��� ��� ��(�� � ����� ��� ������������#'���������������������������#������_�1 �����8555F9;K64?;;+4?;?�84��.��#����_�_��������������������O���������)�7G�J�����_.�2������ �����,/A��.��*��-���0�����������+������(�������������' �!��������������������� �������������������(�((������7:Z�,�������� ��(������ �����+��(��� ���� D/��� 8558F955�K 68;K=+8;;8�8@�� _���&��D�����.��)�*������������� ���AA��,��((�������������#�������( ������' �����������' .�����'����!���,��' ����'�+ �����������������+�� ���#'����"�����'��( �����������������_�1 ����8558F4869?:5+9?:K�8K��A������7��,�������_����(� ��'��( ��������������� �'���� �������� �( � �'���'���� ,� �' ����'���� ���9?:=F@?6;=?+;:K�8;��A��)�_�� '����,�������_���2����' �6�!�����������������������������������������������1 ����,��'�9??KF9;�@ 6858+85;�8=�� ������� J���� ����� 0�#�'����� ��� 0�������� 0�0��� ����c��������J��/�)�%� ��J��T������������(�*����������*�'���( ���(����>�����' ����O��->O��������������������������'���������'��� ��� �_G������������A�8555F9;9684=+8@4�8:�� �������( � V������ 1)���+0����� ��� 7�(��� .���� ���� ���J��� O�� J\�����2A��2����' �.� ����(����6�������������!������������� ������' �����+�������������������.����855@F954�4 695??+995@�8?�� 0������� J�������� ����� D�� G���)����� �G�2����' ��6�������������*������( ��� ������' ��+���������� ����������� �DA/� �� .���� 855@F954�4 699=;�45��G����������c����_��_��� ����������*���/������������ ,�����)� �D�� D�������� 2��� ������������� A�A�����)� ���,�������������#�*��������)��+9K��������' �.�!����������������������������(���%�+������,����������1 �����855@F986954+95:�49������������J����_V��A�������7A��V������ ��G-��G�����_J��-'�,_��2����' �.����'������������������� �'����!��� �' ����'�+����� ����������� 1 ����G��9??KF9@;6899�48�� .������ -��� J������� ��� 7���� G�� ���� �� L0�G�� �*� '�G��U����.��������/��������������������(����+�������(���%������#'� ���� ����( � �����G/��(�����(�������������' �.� ���������/������ _A�8559F4@@�94 6?@=+?K@�

44��_a�������������D����)���A��-�� ���A����������A�L�����������-��J�� ���V������ �,.��U����������+��������( �� ������������������������������������������������)��'������������������D����/������������T��9??=F?@�8 6;?K+=55�4@��_�'�-�#� ����O���b��/������*��6���������' �+#� #������������1 �����8554F9K6KK4+KK?�4K��AA��� ����0�� ��A7��D�����A��2�'����A���,+���������������������������9��������������'��1L6��������������#�����(��� ����������( ��' ����'���������� ��������� #�� ��� #������ 1 ������'9??9F=4699=+99?�4;��A������1� ����J��������A��7�����JG��������G�.����� _7�� D���(���� ��� ������� G�� ,������� _�2����' ���������������)���9�d+������������' ��_�!��A�9??KF9:969?9=+9?88�4=��-���������*���O��������_�����������/��G���DA�J�����V7��0�� ���2G���!����������������������( ���+ ��� �����' ����A����'�� ����������� #'� �����' ��������+��� #����_�1 �����9??;F9K;68K:K+8K?5�4:��-���������*���0�� ���2G��J�����V��O����!���_�� �!����������� ���������� �( � �� ��� �����' ��� 1�2����' ���������1-����1-:��������������(�#��#������������������������������1 �����9??;F9=969K?+9;4�4?��J��������������� �����0_��.��*�+-���A��/������D���� �����_A��,�������_��A�����7��,����������+���������' ��������������������������������#�������#�������������������#'����� #����.���� �_9??;F49K6?4?+?@K�@5�������������_�O��������b�����e��,��#���_��J���7��V��)���T��J�����V-��J� ��������' �.������������� �������'���� ��� ����!� �'������� #'�������'����_�1 �����9??4F9K9�98 6=9;9+=9=9�@9��AA��� ������ ���J2��O�����T��������_��Aa���+J� ���)�J0��0�� ��A7��������'���'����,+((�+����������������� ���������������������������!���+�������� ����!����������'����+��)���������������1 ������'�9?:=F;5689?+845�@8�������#���J������'+7))�����J�����V-��V��#��)�A��V���D���0� ���_���*��)��_2���������!�����+�����������' �������.������ ���6���������( ������������ �������,-� �������� ��� ������ ��� ��� ������ _1 �����9??:F9;564;95+4;9;�@4��0���.���)��.f������.��-��0����� ������0a���A��L�����*�_���-��� ����V��1��������������' �.Z�' ����'��� ��� ����#�� �����' � #���������������������( ������������������������*��������������� ��

� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � �

Vol XI N.º 2 Março/Abril 2005

133

�������� ��������������������������� ����������������� �������������Marília Dourado, Joana Bento, Luís Mesquita, Alcide Marques, Sofia Vale-Pereira, Ana Bela Sarmento Ribeiro, Anabela Mota Pinto

������!��1 �����855@F94;�4 6K@8+K@:�@@�� ��%�����G���)�����+0���� ����7��%�+L�����AD�A����D2J��7����A��D����������(�������( ���(�� + ����'� ��)������ ����������������'�(����������� ����+ ������������������������� �8554���F@?�? 69K95+9K9=�@K���'����.�������-� #�������V�������.��.��������� ���(��������� �(� ����������� �A���(��������#������"��� ��� ������� ��� �����g�� ������A� 1�+�����D���� �8559F9K8�9 64@+4:�@;��.�����.��/*���������������������+�����������' 6� (�� � ��� ��� ������ ������� �-�#�A8558F@5�4 68K;+8;K�@=�������#��T��,������J��.���� ������������������+�������������������A�9??=F9:�@ 6:8=+:@8�@:��.����+.������.��.�����.������������+������+������' 6����������������������������#������'�������+�������������� ���������#����������(�����������G������-�#�����9??9F8:�K+; 644=+4K;�@?��-�����LA�����6���'�����������'�������� �������������� ��� ���������� �( � �'�� ��� ������� ������������� �� ��� ����� ��!����'� �����#'� ��������������������G�����D����A�9??5F:9�? 6;59+;94�K5����,A�D�����/���A2��0��#���._��,����,�L�����A�� _VA��,�� ((��� �( � ����+�����������'�� � ����#������ ��� ���+� ��� ����+��(�� ����'�'��)��������������1 ������'�9??:F?@64=;+4=?�K9��A��(�� ����� ���������������+���������� �+

�' �������' ������ �������������*������� ����'����������6�� ������������������'��� �_�D��� �+����� ����8554F4�@ 6844+8@4�K8����G��� ���0���)����A�������(��A������ ����O�J� ����'���' �����������������#��������������������� ��G��������-�#�9?=:F:�@ 6899+849�K4�� _����� �� ,�������� 2����' �6� �� (� ��'� �(�' ����'�� ������� ����� ��������� 2�� � .���8559F8�98 6G��*�459@�9+459@�=�K@�� G�#���L�,���������c����eJ��,��#��� _�� ���� D�2��'���,�������������������0��O��������_��2�����+ ���� )������6� ����*�'�� (��� �����' � .+������������������_��!��A�9??=F9:;�: 69484+9449�KK�� 7���� b������ .��(��� D_�� 2��#��� �J�-�#� ���_��2����' �������.������'�������� ������������������������� ����������������+ ����'���'�����D����/������������T���8559F?:�95 6K=@;+K9�K;��1_A����.����V���D���V��#��)��A�����������_�V���� �DA�������'�-J���J��)�����1�������'�+� ���������( �����#�������' �������.����������+ ��'��'�� ������������(�������(�������������������+������,����������D����9??:F4564?=8+4?=@�K=��,�)�DD������'+7))����-��0�����A���.���O��� O������� �_�� J��)� ���� ,�� ����� �( � ����#������' ������.���������������� ������'������(�����( ���������*������� ��������������� �G� �������!��1 �����9???F�99;64;;�

Recommended