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Regulação da Glicolise
Pontos onde as enzimas catalizam reações irreversíveis ∆G
Reações Irreversíveis
Glicose + ATP Glicose 6-Fosfato + ADP + H+Hexokinase
Frutose, 6-Fosfato + ATP
Frutose 1, 6-bifosfato + ADP + H+
Fosfofrutokinase
Fosfoenolpiruvato+ ADP + H+
Piruvato + ATPPiruvato kinase
*
Aumento de ATP inibe e diminui a afinidade pelo substratoAumento de AMP reverte essa inibiçãoAumento de citrato - inibe
Piruvato kinase inibida pelo aumento de ATP
Hexokinase inibida por glicose 6 fosfato (exceto no fígado)
*
Regulação da via glicolítica
Hexoquinase X GlicoquinasePhosphofructoquinasePiruvato Kinase
O Respirômetro de WarburgDécada de 20
Coloca o substrato
Papel de filtro com KOH
Tecido Meio de cultura
Fluido com cor
•Detecta CO2 Produzido•Detecta o O2 Consumido
Glicose + 6O2 6CO2 + 6 H2O + Energia
CO2 KHCO3
Pressão no frascoLeitura do líquido
KOH + CO2 KHCO3
Qual o destino do Piruvato na presença de O2 ?
0 5 10 15 20Tempo (min)
A
Moles CO2 produzidos
40 3 2 1 0
A: Piruvato (C3) + 3O2 3CO2 + 3 H2O
Szent – Györg (1930) testa os ácidos C4•Malato•Oxalacetato•Succinato•Fumarato
Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos
Músculo de peito de pombo
B
B
Onde o CO2 esta sendo produzido?Não era na fermentação ...
Enzima da respiraçãocitocromo
Moles CO2 produzidos
Moles CO2 produzidos
Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos
Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos
3210
3210
0 6 12 18 24 30
0 6 12 18 24 30
Sir Hans-Krebs (1935)Testa ácidos dicarboxílicos de 5 carbonos - Alfa cetoglutarato
Sir Hans-Krebs (1937)Testa ácidos dicarboxílicos de 6 carbonos
•Citrato•Aconitato•IsocitratoPiruvato
Piruvato
3C + 4C = 7CPiruvato + ac. dicarboxilicos
Não funciona
6C citrato
5C α-cetoglutarato
4C malato
4C succinato
4C fumarato
4C oxalacetato
Raciocínio de Krebs
3C piruvato7C ?
CO2
CO2
Raciocínio de Krebs
6C citrato
5C α-cetoglutarato
4C malato
4C succinato
4C fumarato
4C oxalacetato
3C piruvato
CO2
CO2
CO2
2C acetil co-A
Micrografia eletronica do complexo da piruvato desidrogenase, isoloda de E. coli
Descarboxilação oxidativa
Citrato Sintetaseamarelo - oxalacetatovermelho - carboxymethyl-CoA
Condensação
Desidratação Hidratação
Descarboxilação oxidativa
Fosforilação
Desidrogenação
Hidratação
Desidrogenação
Saldo Energético do Ciclo de Krebs
Complexo INADH : ubiquinona oxidoredutase
Complexo IISuccinato desidrogenase
Ubiquinona
Complexo IIIUbiquinona:citocromo c oxidoredutase
Complexo IVCitocromo oxidase
Reações de oxi-redução
Transferência de elétrons
a) Como elétrons
Fe+2 + Cu+2 Fe+3 + Cu+1
b) Como átomos de hidrogênio
AH2 A + 2e 2H+
c) Como íon hidreto (:H - )
d) Combinação direta com O2
R-CH2 + 1/2O2 R-CH2-OH
NAD
FAD
State 4(resting)
State 3(fully active)
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