Regulação da Glicolise

Pontos onde as enzimas catalizam reações irreversíveis ∆G

Reações Irreversíveis

Glicose + ATP Glicose 6-Fosfato + ADP + H+Hexokinase

Frutose, 6-Fosfato + ATP

Frutose 1, 6-bifosfato + ADP + H+

Fosfofrutokinase

Fosfoenolpiruvato+ ADP + H+

Piruvato + ATPPiruvato kinase

*

Aumento de ATP inibe e diminui a afinidade pelo substratoAumento de AMP reverte essa inibiçãoAumento de citrato - inibe

Piruvato kinase inibida pelo aumento de ATP

Hexokinase inibida por glicose 6 fosfato (exceto no fígado)

*

Regulação da via glicolítica

Hexoquinase X GlicoquinasePhosphofructoquinasePiruvato Kinase

O Respirômetro de WarburgDécada de 20

Coloca o substrato

Papel de filtro com KOH

Tecido Meio de cultura

Fluido com cor

•Detecta CO2 Produzido•Detecta o O2 Consumido

Glicose + 6O2 6CO2 + 6 H2O + Energia

CO2 KHCO3

Pressão no frascoLeitura do líquido

KOH + CO2 KHCO3

Qual o destino do Piruvato na presença de O2 ?

0 5 10 15 20Tempo (min)

A

Moles CO2 produzidos

40 3 2 1 0

A: Piruvato (C3) + 3O2 3CO2 + 3 H2O

Szent – Györg (1930) testa os ácidos C4•Malato•Oxalacetato•Succinato•Fumarato

Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos

Músculo de peito de pombo

B

B

Onde o CO2 esta sendo produzido?Não era na fermentação ...

Enzima da respiraçãocitocromo

Moles CO2 produzidos

Moles CO2 produzidos

Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos

Não eram consumidos na reação Efeito catalítico na respiração dos tecidos

3210

3210

0 6 12 18 24 30

0 6 12 18 24 30

Sir Hans-Krebs (1935)Testa ácidos dicarboxílicos de 5 carbonos - Alfa cetoglutarato

Sir Hans-Krebs (1937)Testa ácidos dicarboxílicos de 6 carbonos

•Citrato•Aconitato•IsocitratoPiruvato

Piruvato

3C + 4C = 7CPiruvato + ac. dicarboxilicos

Não funciona

6C citrato

5C α-cetoglutarato

4C malato

4C succinato

4C fumarato

4C oxalacetato

Raciocínio de Krebs

3C piruvato7C ?

CO2

CO2

Raciocínio de Krebs

6C citrato

5C α-cetoglutarato

4C malato

4C succinato

4C fumarato

4C oxalacetato

3C piruvato

CO2

CO2

CO2

2C acetil co-A

Micrografia eletronica do complexo da piruvato desidrogenase, isoloda de E. coli

Descarboxilação oxidativa

Citrato Sintetaseamarelo - oxalacetatovermelho - carboxymethyl-CoA

Condensação

Desidratação Hidratação

Descarboxilação oxidativa

Fosforilação

Desidrogenação

Hidratação

Desidrogenação

Saldo Energético do Ciclo de Krebs

Complexo INADH : ubiquinona oxidoredutase

Complexo IISuccinato desidrogenase

Ubiquinona

Complexo IIIUbiquinona:citocromo c oxidoredutase

Complexo IVCitocromo oxidase

Reações de oxi-redução

Transferência de elétrons

a) Como elétrons

Fe+2 + Cu+2 Fe+3 + Cu+1

b) Como átomos de hidrogênio

AH2 A + 2e 2H+

c) Como íon hidreto (:H - )

d) Combinação direta com O2

R-CH2 + 1/2O2 R-CH2-OH

NAD

FAD

State 4(resting)

State 3(fully active)