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Aula prática I ----------------- Microbiologia Médica ---------------- dia:19/08/2010
Nome: Juliana Cardoso Gomes dos Santos.
Nesta aula, fizemos cultura de bactérias na placa de petri e coloração de
gram.
Cultura de bactérias na placa de petri.
O primeiro passo foi limpar a bancada com álcool 70% em seguida ligar o bico
de bussen, posteriormente pegamos um swab estéril e fomos para o local de
coleta, no qual o grupo se dividiu para diversos locais da faculdade, sendo tais
locais:
→ Telefone público
→ Banheiro feminino
→ Cédula de dinheiro
→ Bancada da cantina
→ Vidro da Xerox
→ Banheiro Masculino
→ Bebedouro
→ Pele de uma aluna da classe
→ Garganta de uma aluna da classe
Foi passado o swabe estéril sobre esses locais, e em seguida retornamos ao
laboratório. Continuamente, por trás do bico de busen abrimos cuidadosamente
a placa já contendo o meio de cultura ECA ( a base de proteínas e
carboidratos), e então roletamos em forma da zigue-zague, o swabe sobre o
meio de cultura sólido, sucessivamente fechamos a placa, e a colocamos na
estufa no dia 19/08/2010 ás 9:30 pm na estufa, numa temperatura de
aproximadamente 36ºC. Lembrando que a placa foi devidamente identificada e
o swab descartado em seguida.
Coloração de gram.
Primeiro fizemos a fixação da amostra na lâmina, que ocorreu da seguinte
forma:
→ Identificamos a lâmina
→ Um circulo de giz por traz da da lâmina
→ Flambar a alça de platina e esperar esfriar
→ Contamina a alça e em seguida contamina a lâmina
→ Passa a lâmina cerca de 3 vezes na chama de fogo, para que o material
fixar
Depois da lâmina fixada, é feita a coloração de gram, seguindo os seguintes
passos:
→ Mergulhe a lâmina no CRISTAL VIOLETA, durante 60 segundos. Tal
reagente cora as bactérias de azul;
→ Mergulhe a lâmina no LUGOL (solução mordente), durante 60 segundos. Tal
solução forma o complexo de CV + I.
→ Mergulhe no ÁLCOOL 95%, durante 10 segundos. Este reagente descolorir
as bactérias gram negativas.
→ Mergulhe a lâmina na FLUXINA, durante 30 segundos. Este reagente irá
colorir as bactérias gram negativas de vermelho.
→ Por fim coloca a lâmina para secar.
OBS.: ENTRE UM PASSO E OUTRO, A LÂMINA FOI DEVIDAMENTE LAVADA
COM ÁGUA DESTILADA.
Resultados
Para a visualização do microscópio, após a lâmina secar, passa se o óleo de
imersão, e a visualização ocorre numa lente de 1000:
→ Primeira lâmina foi o banheiro feminino: diplobacilo gram negativos.
→ Lâmina que já estava pronta no laboratório: streptococcus gram positivos em
cadeia.
→ Lâmina da garganta: bacilos gram negativos.
→ Lâmina feita da placa de Petri: colônia de fugos.
“ AS OUTRAS LÂMINAS NÃO FORAM VISUALIZADAS, DEVIDO TER
ACABADO O TEMPO DA AULA”
Aula prática II --------------- Microbiologia Médica ---------------- dia: 02/09/2010