aula7 - SisNe · Title: Microsoft Word - aula7.doc Created Date: 4/17/2017 1:03:21 PM

5915756 – Introdução à Neurociência Computacional – Antonio Roque – Aula 7

1

Células com Extensão Espacial: O Modelo do Cabo

Para neurônios com extensão espacial, o potencial de membrana varia de ponto para ponto

ao longo da célula, de maneira que ela não pode ser tratada como uma estrutura

isopotencial. Um modelo que leve em consideração a geometria do neurônio deve ser

construído.

Boa parte de uma célula nervosa, seu axônio e dendritos, pode ser modelada por finos e

longos cabos cilíndricos condutores de eletricidade revestidos por uma membrana isolante.

Em particular, os dendritos costumam ser modelados como cabos elétricos passivos, ou

seja, cujas condutâncias não dependem da voltagem. A teoria a ser desenvolvida aqui se

aplica a eles.

A propagação de corrente elétrica por cabos condutores cilíndricos foi estudada no Século

XIX por Lord Kelvin e outros com o intuito de modelar a propagação do potencial elétrico

nos cabos telegráficos submarinos que uniam a Grã-Bretanha aos Estados Unidos. A

equação obtida por eles para descrever o comportamento do potencial elétrico ao longo de

um cabo assim é conhecida como equação do cabo.

Essa equação começou a ser usada na modelagem do fluxo de corrente em axônios por

Matteucci e Herman, no início do Século XX, dando origem ao modelo conhecido como

modelo do condutor central (Kernleitermodel em alemão, ou core conductor model em

inglês). Nas décadas de 1960 e 1970, o modelo do condutor central foi aplicado com

grande sucesso por Rall à modelagem da propagação de potenciais de membrana por

dendritos passivos, dando origem aos modernos modelos quantitativos de neurônios

individuais com estrutura espacial.

Modelo do condutor cilíndrico para uma célula

Como o sistema de coordenadas natural para a modelagem de um cabo cilíndrico é o

sistema cilíndrico, no qual as coordenadas de um ponto no espaço são descritas pela tríade

(r, θ, z), dá-se abaixo um desenho ilustrando este sistema de coordenadas.


2

Hipóteses do modelo (para uma discussão mais detalhada dessas hipóteses, recomenda-se

a leitura do capítulo 2 do livro de Koch (1999), indicado na Bibliografia):

1. Os campos magnéticos podem ser desconsiderados.

2. A membrana celular é uma fronteira anular cilíndrica que separa dois condutores de

corrente elétrica, as soluções intracelular e extracelular, que serão consideradas como

homogêneas, isotrópicas e obedecendo à lei de Ohm.

3. Todas as variáveis elétricas têm simetria cilíndrica, ou seja, não dependem do ângulo θ

(veja a figura acima).

4. As correntes nos condutores externo e interno fluem apenas na direção longitudinal z.

A corrente pela membrana flui apenas na direção radial r.

5. Em uma dada posição longitudinal z ao longo da célula, os condutores interno e externo

são equipotenciais. Portanto, a única variação de potencial na direção radial r acontece

através da membrana.

A partir dessas hipóteses, pode-se construir um modelo como o ilustrado na figura a

seguir.


3

Variáveis usadas para descrever as propriedades elétricas do modelo: • ( )tzie , = corrente total fluindo longitudinalmente na direção positiva de z pelo condutor

externo (unidades: µA).

• ( )tzii , = corrente total fluindo longitudinalmente na direção positiva de z pelo condutor

interno (unidades: µA).

• ( )tzJm , = densidade de corrente de membrana fluindo do condutor interno para o

externo (unidades: µA/cm2).

• ( )tzKm , = corrente de membrana por unidade de comprimento fluindo do condutor

interno para o externo (unidades: µA/cm).

• ( )tzKe , = corrente por unidade de comprimento devida a fontes externas fluindo

radialmente pelo condutor externo (unidades: µA/cm). A inclusão desta corrente nos

permite representar a corrente aplicada por eletrodos externos à superfície da célula.

Um termo similar também poderia ser adicionado para representar a corrente radial

aplicada por eletrodos internos.

• ( )tzVm , = Potencial de membrana, definido como o potencial no interior da célula

menos o potencial no exterior (unidades: mV).

• ( )tzVi , = Potencial do condutor interno (unidades: mV).


4

• ( )tzVe , = Potencial do condutor externo (unidades: mV).

• re = Resistência específica por unidade de comprimento do condutor externo (unidades:

Ω/cm).

• ri = Resistência específica por unidade de comprimento do condutor interno (unidades:

Ω/cm).

• a = Raio do anel cilíndrico.

Para se lembrar do significado das resistências específicas por unidade de comprimento,

pense num condutor cilíndrico de comprimento l e área da base A; a sua resistência R pode

ser escrita como: rlAlR == ρ . Portanto, r = ρ/A. (unidades de ρ: Ω.cm; unidades de r:

Ω/cm). r é uma resistência por unidade de comprimento.

A partir dessas variáveis, podemos construir um modelo de circuito elétrico equivalente

para o modelo do cilindro condutor:

As variáveis elétricas têm que obedecer às leis de Kirchoff, assim como à lei de Ohm.

Aplicando a lei da corrente de Kirchoff para o nó (a):

( ) ( ) ( ) ztzKtzzitzi mii Δ+Δ+= ,,, . (1)

Para tornar mais clara a relação entre o modelo de circuito elétrico e a geometria do

modelo do condutor cilíndrico, considere o desenho abaixo:


5

O desenho mostra um detalhe do condutor interno para o cálculo da lei das correntes de

Kirchoff para o nó (a), Equação (1). A corrente longitudinal fluindo pelo meio interno que

passa pela “tampa” em z do cilindro acima é ( )( )tzii , e a que passa pela “tampa” em z + Δz

é ( )( )tzzii ,Δ+ . A corrente que passa radialmente pela superfície do cilindro é indicada pela

densidade de corrente de membrana ( )( )tzJm , , de maneira que a corrente total passando

pela membrana pode ser expressa como:

( ) ( ) ( ) .,, 2, ztzKtzJzatzi mmm Δ=Δ= π

A Equação (1) representa o fato de que a carga não se acumula no elemento de volume

cilíndrico: a soma das correntes que entram e que saem do elemento cilíndrico tem que ser

zero: ( ) ( ) ( )tzitzzitzi mii ,,, +Δ+= .

A lei da corrente de Kirchoff aplicada ao nó (d) nos dá:

( ) ( ) ( ) ( ) .,,,, ztzKtzziztzKtzi eeme Δ+Δ+=Δ+ . (2) Aplicando a lei de Ohm ao pedaço de circuito entre (a) e (b):

( ) ( ) ( )tzzizrtzzVtzV iiii , . ,, Δ+Δ=Δ+− . (3)

Esta equação também pode ser interpretada em termos do desenho para um pedaço do

condutor interno feito acima. Lembrando que a resistência do pedaço condutor deve ser

2azR ii πρΔ= , onde ρi é a resistividade do meio interno (citoplasma): 2az

Rr iii πρ

=Δ

=

e

( ) ( ) ( ) ( )., ,,, tzzizrtzziRtzzVtzV iiiiii Δ+Δ=Δ+=Δ+−

Aplicando a Lei de Ohm também para o pedaço de circuito externo entre (d) e (c):


6

( ) ( ) ( )., ,, tzzizrtzzVtzV eeee Δ+Δ=Δ+− (4)

Rearranjando os termos nas equações (1), (2), (3) e (4) e dividindo por Δz:

( ) ( ) ( )tzKz

tzitzzim

ii ,,, −=Δ

−Δ+; (5)

( ) ( ) ( ) ( )tzKtzK

ztzitzzi

emee ,,,, −=

Δ

−Δ+; (6)

( ) ( ) ( )tzzir

ztzVtzzV

iiii ,,, Δ+−=

Δ−Δ+

; (7)

( ) ( ) ( )tzzir

ztzVtzzV

eeee ,,, Δ+−=

Δ−Δ+

. (8)

Tomando o limite Δz → 0 nas equações acima obtemos equações diferenciais que

expressam a relação entre corrente e voltagem para todos os pontos do modelo do

condutor cilíndrico.

( ) ( )tzKztzi

mi ,, −=∂

∂; (9)

( ) ( ) ( )tzKtzKztzi

eme ,,, −=∂

∂; (10)

( ) ( )tzirztzV

iii ,, −=∂

∂; (11)

( ) ( )tzirztzV

eee ,, −=∂

∂. (12)

As equações (9) e (10) indicam que as variações nas correntes longitudinais externa e

interna são causadas pela corrente radial (pela membrana ou pelo meio externo) por

unidade de comprimento.

Já as equações (11) e (12) expressam as relações entre potencial e corrente para os meios

intra- e extra-celular.


7

O potencial de membrana em um ponto z do condutor cilíndrico em um dado instante de

tempo t é definido por:

( ) ( ) ( )tzVtzVtzV eim ,,, −= (potencial dentro menos potencial fora).

Tomando a derivada parcial de ( )tzVm , em relação a z:

( ) ( ) ( )ztzV

ztzV

ztzV eim

∂

∂−

∂

∂=

∂

∂ ,,,

Substituindo nesta equação as equações (11) e (12),

( ) ( ) ( )tzirtzirztzV

eeiim ,,, +−=∂

∂. (13)

Note o que a Equação (13) nos diz: que a variação do potencial de membrana se dá no

sentido oposto ao do fluxo de corrente interna e no mesmo sentido do fluxo de corrente

externa ao condutor. Isto decorre do fato de se ter definido o potencial de membrana como

o potencial dentro da célula menos o potencial fora da célula.

Seria desejável, no entanto, ter uma equação que relacionasse o potencial de membrana Vm

à corrente passando através da membrana Km. Esta equação pode ser obtida da seguinte

maneira:

Tome a derivada da Equação (13) em relação a z,

( ) ( ) ( )ztzir

ztzir

ztzV i

ie

em

∂

∂−

∂

∂=

∂

∂ ,, , 2

2

.

Substitua nesta equação as equações (9) e (10),

( ) ( ) ( )( ) ( )

( ) ( ) ( ) ( ).,,,

,,,,

2

2

2

2

tzKrtzKrrztzV

tzKrtzKtzKrztzV

eemiem

miemem

−+=∂

∂⇒

⇒+−=∂

∂

(14)

A Equação (14) incorpora as equações (9), (10), (11) e (12). Ela é chamada de equação do

cilindro condutor, pois representa uma síntese do modelo do condutor cilíndrico proposto

para modelar a célula.


8

A Equação (14) é completamente geral, independente das propriedades elétricas da

membrana (capacitância, resistência etc.). Combinando o modelo construído aqui com o

construído na aula 5 para uma membrana passiva temos o seguinte esquema.

Neste desenho:

- gm = condutância específica da membrana por unidade de comprimento (unidades:

S/cm);

- cm = capacitância específica da membrana por unidade de comprimento (unidades:

F/cm).

Note que gm = Gm.πa = (1/Rm).πa e que cm = Cm.πa, onde Gm é a condutância específica da

membrana por unidade de área (unidades: S/cm2), Rm é a resistência específica da

membrana por unidade de área (unidades: Ωcm2) e Cm é a capacitância específica da

membrana por unidade de área (unidades: F/cm2).

A corrente de membrana por unidade de comprimento, ( )tzKm , , pode ser escrita como:

( ) ( ) ( )( )rep,, , VtzVgttzVcKKtzK mmmmRmCmm −+∂

∂=+= . (15)

Substituindo esta equação na equação do cilindro condutor, Equação (14), temos uma

combinação dos dois modelos construídos até o momento:

( ) ( ) ( ) ( ) ( )( ) ( )tzKrVtzVmgrrttzVmcrr

ztzVm

eemiemie ,, , , rep2

2

−−++∂

∂+=

∂

∂. (16)

Esta é a chamada Equação do Cabo.


9

Definindo duas constantes:

mmm

m CRgc ==τ (constante de tempo)

e

( ) mie grr += 1λ (constante de espaço),

a equação do cabo pode ser reescrita como:

( ) ( ) ( ) ( )tzkrVtzVmttzVm

ztzVm

ee ,,,, 2

rep2

22 λτλ −−+

∂∂

=∂

∂. (17)

Como já visto antes, a constante de tempo τ não depende das dimensões da célula. Isto

quer dizer que a constante de tempo é a mesma para células grandes ou pequenas feitas

com uma membrana do mesmo material.

Já a constante de espaço λ depende das dimensões da célula. Para ver isso, vamos assumir,

por simplicidade, que re


10

A constante espacial determina quão rapidamente o potencial varia ao longo do cabo

(dimensão z), enquanto que a constante de tempo determina quão rapidamente o potencial

varia ao longo do tempo t.

A equação do cabo é uma equação diferencial parcial de primeira ordem no tempo e de

segunda ordem no espaço, de mesmo tipo que a equação de difusão. A sua solução permite

que se calcule o potencial de membrana para cada ponto da membrana de um neurônio a

partir de uma distribuição espacial inicial de voltagem (condição inicial, V(z, t) = V(z, 0)) e

de condições de contorno apropriadas impostas. As condições de contorno especificam o

que acontece com o potencial de membrana em um nó, onde o cabo se ramifica, ou em um

terminal, onde ele acaba.

Concretamente, em um nó de ramificação o potencial V deve ser contínuo e a corrente

longitudinal (ao longo do cabo) deve ser conservada, de maneira que a corrente chegando

em um nó deve ser igual à corrente saindo pelos ramos partindo do nó. Já em um terminal,

as condições de contorno são diferentes. Por exemplo, uma condição de contorno razoável

para um terminal é a de que não deve haver fluxo de corrente longitudinal para fora do

terminal.

Soluções da Equação do Cabo para Alguns Casos Vamos assumir que re


11

Após um período inicial em que a voltagem V se comporta de forma transiente, vamos

supor que ela atinge um estado estacionário em que os valores de V ao longo do espaço

não variem mais no tempo pelo restante do período em que a corrente constante

permanecer aplicada. Neste caso, podemos escrever V(z, t) = V(z).

Neste caso, podemos desprezar a parte temporal da equação do cabo e obter a sua versão

estacionária (note que agora a derivada parcial em relação a z vira uma derivada total),

022

2 =−VdzVd

λ . (19)

A solução geral para esta equação diferencial ordinária pode ser expressa na forma (teste

que ela é de fato solução derivando-a duas vezes e substituindo na equação): λλ //)( zz BeAezV += − , (20)

onde as constantes A e B dependem das condições de contorno. Vamos considerar dois

casos com condições de contorno diferentes, o caso do cabo semi-infinito, que se estende

de z = 0 a z = ∞, e o caso do cabo finito, que se estende de z = 0 a z = l.

Cabo semi-infinito

Vamos supor para este caso que, para z = 0, V está fixo em V0. Para garantir que o

potencial permaneça finito à medida que a distância z vá para o infinito, deve-se fazer a

constante B igual a zero em (20). Desta forma, a solução final para este caso é (note que A

deve ser igual a V0) λ/

0)(zeVzV −= . (21)

Esta solução deixa claro porque λ é chamada de constante de espaço, a voltagem é

atenuada exponencialmente com a distância de acordo com λ.

Por outro lado, poderíamos ter considerado que a corrente em z = 0 é mantida em um valor

constante I0. Da Equação (13), temos que

( ) ( )zirdzzVd

iim −=

. (22)


12

Substituindo (20) nesta equação (de novo, fazendo B = 0) e considerando que quando z =

0, ii = I0, obtemos:

λλz

i eIrzV−

= 0)( . (23)

Define-se a resistência de entrada de um cabo como o potencial no estado estacionário

dividido pela corrente constante injetada. Portanto, para z = 0 a resistência de entrada vale,

ii rIIr

IVR λ

λ===

0

0

0in

)0(,

ou

imim

i

mi Rd

Ra

Raa

R ρπ

ρπρπ

ρ23232in

22

12

=== . (24)

A condutância de entrada para o cabo semi-infinito é, portanto:

imRdGρ

π

2

23

in = . (25)

Estas quantidades, resistência e condutância de entrada de uma célula, são úteis para a

construção de modelos biofisicamente detalhados de neurônios (como veremos mais

adiante).

Cabo finito

Vamos supor de novo para este caso que V(0) = V0. Com relação à outra

extremidade do cabo, existem várias possíveis condições de contorno. Três delas são: (i) Extremidade selada, em que nenhuma corrente longitudinal pode passar pela

extremidade, de maneira que (dV/dx)|x=l = 0;

(ii) Curto circuito ou extremidade aberta, em que o valor da voltagem na extremidade

está fixo em 0 para permitir a passagem de qualquer corrente;

(iii) Extremidade com vazamento, que é uma mistura das duas anteriores em que alguma

corrente pode passar, mas não toda.


13

Para facilitar a análise e evitar as divisões por λ nas exponenciais, é conveniente passar

para a variável adimensional Z ≡ z/λ. A variável Z é chamada de distância eletrotônica ao

longo do cabo. Nesta nova variável, a solução (20) fica escrita como ZZ BeAeZV += −)( . (26)

Outra variável adimensional útil é o chamado comprimento eletrotônico do cabo: se um

cabo tiver comprimento l e constante de espaço λ, o seu comprimento eletrotônico L é

definido como a razão entre o seu comprimento e a sua constante de espaço: L = l/λ. Note

que na extremidade do cabo Z = L.

Para a condição de extremidade selada, a condição de contorno fica (lembre-se que

def(x)/dx = (df(x)/dx).ef(x)):

LLL

LZ

AeBBeAedZdV 20 −−

=

=⇒=+−= .

Substituindo este resultado na equação (26), ( )( ) )cosh(2)( ZLAeeeAeZV LZLZLL −=+= −−−−− ,

onde se usou a identidade cosh(x) = (ex + e-x)/2. Usando agora a condição V(0) = V0,

)cosh(2)cosh(2 00 L

eVALAeVL

L =⇒= − .

Substituindo este valor de A na equação para V(Z), chegamos à solução final para este caso

)cosh()cosh()( 0

LZLVZV −= . (27)

Para a condição de extremidade em curto-circuito ou aberta, as condições de contorno são

V(L) = 0 e V(0) = V0, de maneira que um cálculo similar ao feito acima resulta na solução,

)senh()senh(

)( 0LZLV

ZV−

= , (28)

onde se usou a identidade senh(x) = (ex - e-x)/2.

Exercício: Deduza a expressão da Equação (28).


14

A figura abaixo mostra o comportamento de V(Z) para as três situações estudadas, cabo

semi-infinito (equação 23), cabo finito com extremidade selada (equação 27) e cabo finito

com extremidade em curto-circuito ou aberta (equação 28). Nos casos dos cabos finitos,

com extremidade selada e extremidade aberta, usou-se L = 1. Note que a condição de

extremidade selada implica numa atenuação menos acentuada que a condição de cabo

infinito, enquanto que a condição de extremidade aberta implica numa atenuação mais

acentuada.

Bibliografia:

• Koch, C., Biophysics of Computation: information processing in single neurons.

Oxford University Press, Oxford, 1999.

• Rall, W. and Agmon-Snir, H., Cable theory for dendritic neurons. In: Koch, C. and

Segev, I., Methods in Neuronal Modeling: from ions to networks. (2nd Ed.), MIT Press,

Cambridge, MA, 1998. Chapter 2, pp. 27-92.


15

Apêndice 1: Resistência de entrada para o cabo finito

A definição operacional de resistência de entrada é a seguinte: insere-se na membrana de

uma célula um eletrodo que injeta corrente Ii e, a uma distância pequena comparada com

λ, insere-se outro eletrodo para medir a voltagem de membrana. No limite em que a

distância entre os dois eletrodos vai para zero, podemos escrever,

)()(zIzVR

iin = .

Como visto acima, a resistência de entrada para o cabo semi-infinito é

imi RdrR ρ

πλ 23in

2== .

Note que a resistência de entrada do cabo semi-infinito é constante para todo o cabo

infinito e homogêneo. Vamos passar a escrevê-la como R∞:

imi RdrRR ρ

πλ 23in

2==≡ ∞∞ .

De maneira equivalente, temos a condutância de entrada do cabo semi-infinito:

imi Rd

rG

ρ

πλ 21 23==∞ .

Para a situação mais realista de um cabo finito, podemos calcular a sua resistência de

entrada da maneira apresentada a seguir:

Da equação (13) temos,

( ) ( )zirdzzVd

ii−=

,

que implica que,

( ) ( )⎟⎠

⎞⎜⎝

⎛−=dzzVd

rtzi

ii

1, .

Escrevendo esta equação em termos de Z = z/λ (dz = λdZ):

( ) ( )⎟⎠

⎞⎜⎝

⎛−=dZZVd

rtzi

ii

1,λ .


16

Lembrando que riλ é a resistência de entrada de um cabo semi-infinito com as mesmas

características do nosso cabo finito, podemos escrever,

( ) ( )⎟⎠

⎞⎜⎝

⎛−= ∞ dZZVdGtzii

, . (A1)

Em particular, supondo que a corrente é injetada no ponto Z = 0,

( )⎟⎟⎠

⎞⎜⎜⎝

⎛−=

=∞

00

ZdZZVdGI . (A2)

A partir desta equação pode-se deduzir uma expressão para a condutância (e a resistência)

de entrada de um cabo finito. Por exemplo, para o caso de um cabo com extremidade

selada para o qual, segundo a equação (27),

)cosh()cosh()( 0

LZLVZV −= ,

obtemos, derivando esta expressão (lembre-se que dcosh(x) = senh(x)),

( )( )

( )LVGLLVGI tanh

coshsenh

000 ∞∞ == ,

o que nos dá,

( )LGVIG tanh0

0in ∞== , (A3)

e, para Rin,

( )LRIVR coth0

0in ∞== . (A4)

Um raciocínio análogo nos dá, para a condição de extremidade aberta em que V(Z) é dado

pela equação (28),

( )LGG cothin ∞= (A5) e

( )LRR tanhin ∞= . (A6)


17

Apêndice 2: Solução para o cabo finito com extremidade com vazamento

Para a condição de extremidade com vazamento, fica mais conveniente escrever a solução

geral (equação 26) na forma,

( ) ( )ZLBZLBZV −+−= senhcosh)( 21 , (A7) que pode ser obtida de (26) usando as definições de cosh(z) e senh(z),

( ) ( )2

senh ;2

coshzzzz eezeez

−− −=

+=

e fazendo A = (B1 – B2)/2 e B = (B1 + B2)/2.

Aplicando as condições de contorno, V(0) = V0 e V(L) = VL à equação (A7), obtemos

(mostre como exercício),

( ) ( ) ( )( )L

ZVZLVZV L

senhsenhsenh0 +−= . (A8)

A corrente que vaza pelo cabo em Z = L é dada por,

L

LL RVi = .

Com o auxílio da equação (A1), ela também pode ser escrita como,

( )LZ

L dZtZVd

Ri

=∞

−=, 1

.

Igualando as duas expressões para iL:

LZ

LL dZ

tZdVRRV

=∞−=

),(. (A9)

De (A8) temos,

)senh()cosh(0

LLVV

dZdV L

LZ

+−=

=,

que substituída em (A9) nos dá,

⎥⎦

⎤⎢⎣

⎡

+=

∞ )cosh()senh(0 LRLR

RVVL

LL . (A10)


18

Substituindo (A10) em (A8) e utilizando algumas identidades para as funções

trigonométricas hiperbólicas (senh(a-b) = senh(a)cosh(b) – senh(b)cosh(a); cosh(a-b) =

cosh(a)cosh(b) – senh(a)senh(b); senh2(a) + cosh2(a) = 1), obtemos finalmente:

( )( ) ⎥⎦

⎤⎢⎣

⎡

+

−+−=

∞

∞

)senh()cosh()senh()cosh()( 0 LRRLZLRRZLVZV

L

L. (A11)

Esta é a solução geral para a voltagem de estado estacionário em um pedaço de cabo finito

de comprimento eletrotônico L.

A partir dela podemos deduzir uma expressão para a resistência de entrada do cabo finito.

A resistência de entrada, Rin, é definida como

0in I

VR = .

Usando a equação (A1),

( )0

0, 1

=∞

−=ZdZ

tZVdR

I .

Derivando (A11) em relação a Z, depois fazendo Z = 0 e substituindo na equação acima,

obtemos:

⎥⎦

⎤⎢⎣

⎡

+

+=

∞

∞∞ )tanh(

)tanh(LRRLRRRR

L

Lin . (A12)

As equações (A11) e (A12) são as expressões gerais para a voltagem e a resistência de

entrada de um cabo finito. Note que as soluções particulares para V(Z) e Rin para a

extremidade fechada e a extremidade aberta podem ser obtidas a partir de (A11) e (A12)

fazendo RL igual a ∞ ou 0, respectivamente. Além disso, no limite em que L → ∞

recuperamos as equações para o caso do cabo semi-infinito.

Documents

aula7 - SisNe · Title: Microsoft Word - aula7.doc Created Date: 4/17/2017 1:03:21 PM