crescimento microbiano

7/17/2019 crescimento microbiano

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Crescimento e

Metabolismo

Bacteriano

http://universitas.usal.es/web/fundacion/universitas/es/sistemas/microacua/Demo1/fotos/entrenamiento_placas/ejemplo3.jpg

http://www.chemlab.pt/fotos_artigos/51BC4_macconkey-200.jpg

http://universitas.usal.es/web/fundacion/universitas/es/sistemas/microacua/Demo1/fotos/entrenamiento_placas/ejemplo5.jpg



“O crescimento

microbiano é definido não

em termos de tamanho

celular, mas como o

aumento do número de

células, que ocorre por

divisão celular”

A divisão celular nas bactérias geralmenteocorre por Divisão Binária e às vezes por

brotamento



Fatores Necessários para oCrescimento Bacteriano

FÍSICOS QUÍMICOS

Temperatura

pH

Pressão OsmóticaAtmosfera Gasosa

Carbono

Nitrogênio

Enxofre e Fósforo Oligoelementos



Temperatura

Fatores Fís icos



Temperatura Ótima de Crescimento

A temperatura na qual uma espécie de

microrganismo cresce mais rapidamente



• Bactérias crescem melhor em pH neutro (6,5 – 7,5).

• Bactérias acidófilas – crescem em pH ácido.

• Fungos crescem em pH mais ácido do que as

bactérias - geralmente 5 – 6.

• Culturas em laboratório – produzem ácidos que

interferem com seu próprio crescimento.

• Sais de fosfato são utilizados para a manutenção do

pH do meio – não são tóxicos e fornecem nutriente

essencial para o crescimento.

pH



pHVibr io

cholerae E. co li



Pressão Osmótica



Não Halófilo Altas concentrações

de soluto dissolvido

(sal/açúcar) exercem

pressão osmótica

suficiente para matar

ou inibir crescimento

microbiano

Pressão Osmótica



Atmosfera Gasosa



O2 + e- O2- Radical

superóxido

2 O2- + 2H+ O2 + H2O2

O2

-

+ H2O2 O2 + OH

-2

+ OH

Catalase: 2H2O2 → 2H2O + O2

Peroxidase: H2O2 + 2H+ → 2H

2O

SOD

Formas Tóxicas do Oxigênio (O2)

Peróxido de

Hidrogênio

Radical

Hidroxila



Pseudomonas aeruginosa CrescimentoBacteriano

Aeróbio Obrigatório

São aqueles micro-organismos que sócrescem na presença de oxigênio por utilizarem este composto como receptor finalde elétrons. Esses micro-organismos sãocapazes de crescer em uma atmosfera padrão

de 21% de oxigênio.



Anaeróbio Obrigatório

CrescimentoBacteriano

Ausência deCrescimentoBacteriano

O2Clostr id ium tetani

Tétano

São aqueles micro-organismos que podemser mortos pelo oxigênio, e que nãoutilizam ele para suas reações de produção

de energia.



Microaerófilo


Campylobacter jejun i

São micro-organismos que só crescemem atmosfera contendo concentraçãode oxigênio menor que a encontrada noar atmosférico.



Anaeróbio Facultativo

Escher ichia col i


São aqueles micro-organismos que crescemna presença do ar atmosférico, mas podemtambém crescer na sua ausência. Eles nãorequerem o oxigênio para o crescimento,embora possam utilizá-los para a produção

de energia em suas reações químicas.



Fato res Quím icos

Fonte de Carbono

Compostos Orgânicos CO2

BactériasAutotróficas

BactériasHeterotróficas

Necessário para a síntese de todos os compostos

orgânicos necessários para a viabilidade celular.

Carbono



Parte essencial dos aminoácidos

Nitrogênio

Proteínas

Fontes de Nitrogênio



Enxofre e Fósforo

Enxofre

Síntese de ácidos nucléicos

Fosfolipídios das membranas celulares

ATP

Fósforo

Aminoácidos: Cisteína, Cistina e Metionina

Vitamina: Tiamina e Biotina



Oligoelementos

•Elementos traço

•Elementos minerais são essenciais para

atividade de algumas enzimas (co-fatores)

•Geralmente presentes na água!

•Podem ser adicionados ao meio de cultura

Molibidenio fixação do nitrogênio



Meios de CulturaMaterial nutriente preparado para o

crescimento de micro-organismos emlaboratório.

Os micro-organismos introduzidos em um meio de

cultura são chamados de inóculo.

Os micro-organismos que crescem dentro ou sobre

um meio de cultura são denominados de cultura.

Q t E t d Fí i



Líquido

Sólido

Quanto ao Estado Físico:

Ágar 2%

CaldoEstéril

Caldo comcrescimentobacteriano

AspectoTurvo

http://www.chemlab.pt/fotos_artigos/51BC4_macconkey-200.jpg



Colônia

ColôniaMassa visível de células bacterianas teoricamente

originada do crescimento uma única célula.

Unidade Formadora de Colônia UFC

As colônias bacterianas freqüentemente tem aparênciadiferente o que permite distinguir um micro-organismo

do outro.



Meio Quimicamente Definido

Quanto à Composição:

Meio de cultura cuja composição exata é conhecida.



Meio Complexo

Meio de cultura cuja composição química exata não é conhecida.

Freqüentemente utilizado para o isolamento de bactérias

heterotróficas na rotina dos laboratórios de microbiologia.

M i E i id



Meio Enriquecido

À base do meio, é adicionado sangue de cavalo, carneiro ou coelhoem temperatura alta, o que faz com que as hemácias lisem, liberandohemina e hematina, compostos fundamentais para o crescimento dos

microrganismos exigentes.

Ágar Chocolate

É um caldo ou meio sólido que contém um suprimentode nutrientes especiais que promovem o crescimento de

organismos fastidiosos (Haemophi lus ssp., Neisseria ssp.)



J d A óbi



Os meios de cultura

contendo bactérias anaeróbiasdevem ser incubados em jarrasseladas contendo substânciasquímicas que removam o oxigênio

do ar e gerem dióxido de carbono.

Jarra de Anaeróbiose

5% O2 e 18% CO2

Envelope contendo:Bicarbonato de sódio +

Boroidreto de sódio

H2O

CO2

H2 + O2 → H2OCatalisador

(Paládio)



As culturas são introduzidos na câmara

através de um vedador de ar, e o técnico faz uso de

luvas acopladas para manipular as culturas.

Câmara de Anaerobiose

85% N2,10% H2 e 5% CO2



Meio Seletivo e Diferencial

•Seletivo: Favorecer o crescimento da bactéria de

interesse e impedir o crescimento de outras.

•Diferencial: facilita a identificação da bactéria de

interesse quando outras estão presentes no meio de cultura.



Meio Seletivo

Ágar Thayer-Martin

Seletivo para espécies patogênicas de Neisseria

É um meio de cultivo destinados para o isolamento deNeisseria gono rrhoeae e Neisseria meningit i dis , pois contém emsua fórmula antibióticos que inibem o crescimento deNeisserias saprófitas e outras bactérias, quando em amostrascolhidas de sítios contaminados.



Ágar Cetrimida

A cetrimida (brometo de cetiltrimetilamina) é um compostoamónio quaternário, que inibe uma vasta variedade de outrosorganismos, incluindo outras espécies de Pseudomonas e

organismos relacion ados.

Utilizado para o isolamento seletivo daPseudomonas aerug inosa proveniente de amostrasclínicas e outros materiais.



Meio Diferencial

Ágar Sangue

(5% de Sangue de Carneiro)

-Hemólise:Hemólise

Total

-Hemólise:Hemólise

Parcial

-Hemólise:Ausência de

Hemólise

M i S l ti Dif i l



Ágar MacConkey

Lac -

Meio Seletivo e Diferencial

Sais biliares e cristal violeta – Impede ocrescimento de bactérias Gram-positivas

Carboidrato – Lactose

Indicador de pH – Vermelho neutroLac +

F d C i t B t i



Fases do Crescimento Bacteriano



Medida do CrescimentoMicrobiano

Diretos Indiretos

Contagem em Placa

Filtração

Contagem Direta aoMicroscópio

Turbidimetria

Atividade Metabólica

Peso Seco

C t Pl



Contagem em Placa

DiluiçãoSeriada

1,59x105 UFC

por mL

T bidi t i



Turbidimetria



Metabolismo



Catabolismo e Anabolismo

R i ã



Respiração

38 ATP

F t ã



Fermentação

Streptococcus,

Lactobaci l lus e

Baci l lus

Saccharomyces

(Levedura)

Propionibacter ium

Escher ichia,

Salmonel la

Clost r id ium

Klebisiel la,

Enterobacter

2 ATP



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