Deficiência de Glicose-6-Fosfato

Artigo

Deficincia de Glicose-6-Fosfato Desidrogenase em AdultosRosngela Torres da Silva1, Marli Auxiliadora Coutinho Iglessias2, Isaac Dantas de Medeiros3, Isabelle Medeiros Bezerra4, Tereza Maria Dantas de Medeiros5 1 - Aluna concluinte do Curso de Farmcia Habilitao Anlises Clinicas, UFRN 2 - Mestranda do Curso de Ps-Graduao em Cincias Farmacuticas, UFRN 3 - Bolsista de Iniciao Cientfica 4 - Tenente Farmacutica Laboratrio de Anlises Clnicas do Esquadro de Sade da Base Area de Natal 5 - Professor Adjunto da disciplina Hematologia Clnica, Departamento de Anlises Clnicas e Toxicolgicas, UFRN

ResumoA glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PD) uma enzima importante no metabolismo eritrocitrio e est envolvida no mecanismo antioxidante da clula. A deficincia de G-6-PD mais freqente a eritroenzimopatia, sendo devida principalmente a mutaes pontuais no gene que se encontra no brao longo do cromossomo X. As manifestaes clnicas mais comuns so hemlise induzida por frmacos e ictercia neonatal. Com o objetivo de determinar a prevalncia da deficincia de G-6-PD em adultos do sexo masculino, no perodo de julho a dezembro de 2005 foram examinadas 594 amostras de sangue de civis e militares do sexo masculino com idade mdia de 28,4 4,2 anos atendidos no Laboratrio de Anlises Clnicas do Esquadro de Sade da Base Area de Natal. A atividade enzimtica foi determinada pelo teste de reduo da metahemoglobina (teste de Brewer), sendo as amostras com atividade deficiente submetidas ao teste de Brewer modificado para avaliao semiquantitativa. Foram identificados 22 indivduos deficientes correspondendo a uma prevalncia de 3,7% na populao em geral e 1%, 6% e 7,4% entre os brancos, pardos e negros, respectivamente. Os resultados mostram a importncia da triagem de indivduos portadores da eritroenzimopatia em nossa populao, contribuindo para o esclarecimento sobre a doena e suas possveis manifestaes clnicas. Palavras-chave: Glicose-6-fosfato desidrogenase, teste de reduo da metahemoglobina eritroenzimopatia

SummaryGlucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency in adults Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G-6-PD) is an important enzyme of the erythrocyte metabolism and related to antioxidant pathway of the cell. G-6-PD deficiency is the most common erythroenzymopathy and it is mainly due to punctual mutations in the gene which is located in the X chromosome. The most common clinical manifestations are hemolytic anemia related to drugs and neonatal jaundice. In the period between July and December 2005, 594 blood samples from military and civil individuals with an average age of 28,4 4,2 were analyzed with the purpose of determining the prevalence of G-6-PD deficiency among patients from the Health Squadron of Natal Air Force Base. Enzyme activity was measured by the methemoglobin reduction test (Brewers test) and the samples with deficient activity were submitted to Brewers test modified for semiquantitative measurement. It were identified 22 deficient individuals representing a prevalence of 3,7% in the group and 1,0%, 6,0% and 7,4% in white, mulatto and negro groups, respectively. These findings show the importance of the screening for G-6-PD deficient individuals among our people and the necessity of the explanation about the disease and its possible clinical manifestations to them. Keywords: Glucose-6-phosphate dehydrogenase, methemoglobin reduction test, erythroenzymopathy

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NewsLab - edio 79 - 2006

Introduo

eletrofortica mais rpida que a enzima normal (G-6-PD B). Ela principalmente encontrada no continente africano, sendo tambm freqente nos pases do sul da Europa e no continente americano devido s migraes da populao africana para esses continentes (4). A variante Mediterrnea est includa na classe II, apresenta uma mobilidade eletrofortica semelhante a da enzima normal (G-6-PD B) e o prottipo de uma deficincia enzimtica mais severa do que a proporcionada pela G-6-PD Africana. As populaes portadoras dessa variante so principalmente as descendentes de italianos, gregos, espanhis, rabes e judeus podendo tambm ser encontrada entre os indianos e a populao da Indonsia (2, 5). A maioria dos indivduos deficientes apresenta-se inteiramente assintomticos e desenvolvem sintomas apenas quando expostos a situaes onde h uma condio de estresse. As manifestaes clnicas mais comuns so anemia hemoltica aguda devido ao uso de frmacos (sulfas e sulfonas, antimalricos, nitrofuranos e vrios analgsicos e antipirticos, como a acetanilida e a aspirina), infeco ou ingesto de fava e ictercia neonatal (3). A hemlise comea geralmente aps dois ou trs dias do incio do uso do frmaco, apresenta-se predominantemente intravascular e caracteristicamente associada

enzima citoplasmtica codificada por um gene localizado na regio telomrica do brao longo do cromossomo sexual X (banda Xq28) constitudo por 13 xons e 12 ntrons (1, 2). Est envolvida diretamente na produo de NADPH durante a via da hexosemonofosfato na medida em que catalisa a primeira reao dessa via transformando a glicose-6fosfato em 6-fosfoglucono--lactona. O NADPH obtido atua na glutationa fazendo com que permanea no seu estado reduzido, forma ideal para desempenhar seu papel na proteo da clula contra agentes oxidantes (3). A deficincia de G-6-PD uma das doenas genticas mais comuns, afetando mais de 400 milhes de pessoas em todo o mundo. Essa eritroenzimopatia apresenta o padro de herana ligado ao sexo sendo devida principalmente a mutaes pontuais no gene que codifica a enzima, levando troca de aminocidos na estrutura da mesma (3). Atualmente so conhecidas mais de 440 variantes da G-6-PD. No entanto, as variantes deficientes mais comumente encontradas so as variantes Africana (G-6-PD A-) e Mediterrnea. A variante Africana (G-6-PD A-) est includa na classe III e apresenta uma mobilidade

A

glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PD) uma


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O presente estudo teve como objetivo determinar a prevalncia da deficincia de glicose-6-fosfato desidrogenase em adultos do sexo masculino.

Casustica e MtodosA populao do estudo foi constituda por 594 indivduos, militares e civis, ambos do sexo masculino, Figura 1 Percentual da populao estudada por etnia servidores da Base Area de Natal, atendidos no Laboratrio de Anlises Clnicas do Esquadro de Sade no perodo compreendido entre julho e dezembro do ano de 2005 para a realizao de exames de rotina. Todos os participantes foram informados acerca da pesquisa e assinaram o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido segundo a Resoluo 196/96 do Conselho Nacional de Sade. De cada paciente foi obtida uma amostra de sangue com Figura 2. Percentual da populao estudada por naturalidade com hemoglobinria. Alm do tipo de variante enzimtica envolvida, outros fatores influem na suscetibilidade e severidade da hemlise frente a um frmaco, tais como: integridade metablica do eritrcito; dose, absoro, metabolismo e excreo do frmaco; efeito do frmaco ou seu metablito na atividade enzimtica; idade do paciente e diferenas genticas na farmacocintica (2). A ictercia neonatal geralmente aparece do primeiro ao quarto dia de vida, mais ou menos no mesmo perodo ou um pouco mais cedo do que a ictercia fisiolgica (2, 3). No Brasil, a prevalncia da deficincia de G-6-PD alcana valores entre 3 a 10% dependendo do sexo, etnia e regio da populao estudada sendo as variantes Africana e Mediterrnea as mais freqentemente encontradas (6, 7, 8, 9, 10). anticoagulante (EDTA) para a realizao dos exames de rotina. Aps a realizao desses exames, as amostras foram transportadas devidamente acondicionadas em banho de gelo para o laboratrio de Hematologia do Departamento de Anlises Clnicas e Toxicolgicas da Universidade Federal do Rio Grande do Norte e mantidas sob refrigerao a 4C at a realizao dos testes laboratoriais para a determinao enzimtica. Todas as amostras, em um pe-

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rodo mximo de 48 horas aps a coleta, foram analisadas inicialmente mediante o teste de reduo da metahemoglobina (11). As amostras que apresentaram atividade enzimtica deficiente foram confirmadas pelo teste de Brewer para avaliao semiquantitativa (12). A anlise estatstica dos dados foi realizada mediante clculo do percentual das variveis analisadas.

a naturalidade, a prevalncia da deficincia de G-6-PD foi semelhante em ambos os grupos (Tabela 2). A prevalncia obtida encontra-se em conformidade com outros estudos realizados em diversas regies do Brasil. Na cidade de Campinas, um estudo conduzido por Ramalho & Beiguelman (13) analisando o sangue de doadores de sangue do sexo masculino atravs do teste de reduo da metahemoglobina,

Resultados e DiscussoA populao estudada foi constituda de 594 indivduos do sexo masculino com idade mdia de 28,4 4,2 anos. De acordo com a etnia, 290 (48,8%) eram brancos, 250 (42,1%) pardos e 54 (9,1%) negros (Figura 1). Considerando-se a naturalidade, 384 (64,6%) eram do Rio Grande do Norte e 210 (35,4%) oriundos de outros estados da federao brasileira. A anlise das amostras pela metodologia empregada demonstrou que 572 (96,3%) indivduos tinham atividade de G-6-PD normal e 22 (3,7%) apresentavam atividade deficiente (Tabela 1). Todas as amostras que apresentaram atividade deficiente pelo teste de Brewer (11) foram confirmadas pelo teste de Brewer modificado para avaliao semiquantitativa (12), no havendo discordncia entre ambos. Levando-se em considerao

encontrou uma prevalncia de 3,5% de deficincia de G-6-PD. Resultados semelhantes foram observados em estudos posteriores realizados em recm-nascidos da mesma cidade (9, 14). Estudos realizados nas regies Norte e Nordeste do pas tambm demonstram uma prevalncia de deficincia de G-6PD em torno de 3% (7, 15). Analisando por grupo tnico, verificou-se que a maior prevalncia encontrada foi entre os indivduos negros (7,4%). A segunda maior prevalncia encontrada foi entre indivduos de cor parda (6%) e a menor prevalncia obtida foi entre indivduos de etnia branca. Vrios estudos tm revelado uma maior prevalncia da deficincia de G-6-PD entre os indivduos de etnia negra. Lewgoy & Salzano (16) estudando a populao de Porto Alegre encontraram uma prevalncia de 9,3% entre os homens negros. Resultado semelhante foi obtido por


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Tabela 1. Prevalncia da deficincia de glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PD) em 594 indivduos estudados de acordo com a etnia Atividade de G-6-PD Normal N Branco Pardo Negro Total 290 250 54 594 287 235 50 572 % 99,0 94,0 92,6 96,3 N 03 15 04 22 Deficiente % 1,0 6,0 7,4 3,7

Grupo tnico

Total de amostras analisadas

Tabela 2. Prevalncia da deficincia de glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PD) em 594 indivduos estudados de acordo com a naturalidade Atividade de G-6-PD Normal N Rio Grande do Norte Outros Estados da Federao Brasileira Total 384 210 594 369 203 572 % 96,1 96,7 96,3 N 15 07 22 Deficiente % 3,9 3,3 3,7

Naturalidade

Total de amostras analisadas

Tabela 3. Mdia e desvio padro da atividade enzimtica da G-6-PD entre indivduos normais e deficientes determinada pelo teste de Brewer modificado Atividade G-6-PD (% da atividade normal) Indivduos normais Mdia Desvio padro Nmero de amostras 97,2 0,7 30 Indivduos deficientes 14,2 1,5 22

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Beiguelman et al (13) observando uma prevalncia de 9,64% entre indivduos de etnia negra portadores de hansenase. Saldanha et al (17), Ramalho & Beiguelman (8), Azevedo et al. (6) e Ramalho (9), de igual forma, verificaram o mesmo achado em seus trabalhos com prevalncias de deficincia de G-6-PD entre indivduos negros de 8,2%, 10,42%, 11,39% e 10,3%, respectivamente. Entretanto, no presente estudo a prevalncia encontrada entre os indivduos negros no pode ser estendida para a populao norte-riograndense visto que todos os deficientes de G-6-PD de cor negra identificados so oriundos de outros estados da Federao. No processo de colonizao do Rio Grande do Norte a participao da etnia negra foi limitada (18). Dados do censo demogrfico realizado pelo IBGE (19) mostram que a populao do Rio Grande do Norte apresenta-se constituda por 1.171.699 indivduos brancos, 1.454.665 pardos, 126.441 negros, 2.374 amarelos, 3.168 indgenas e 19.161 indivduos sem cor ou raa declaradas, totalizando 2.777.508 habitantes. Todos os indivduos identificados com a eritroenzimopatia foram notificados individualmente, recebendo alm do resultado do exame um carto de identificao de portador de deficincia de glicose-6-fosfato desidrogenase. A importncia da identificao

de deficientes de G-6-PD diz respeito ao fato de que seus portadores, geralmente do sexo masculino, podem manifestar uma crise hemoltica aguda de intensidade varivel na presena de agentes oxidantes de origem endgena ou exgena. Assim, por exemplo, a hemlise dos deficientes de G-6-PD pode ser desencadeada por frmacos (sulfas e sulfonas, antimalricos, nitrofuranos e vrios analgsicos e antipirticos, como a acetanilida e a aspirina), por alimentos (leguminosa Vicea fava, enlatados ricos em nitritos) e outros fatores do meio ambiente (naftalina, nitritos volteis) (10). A atividade enzimtica da glicose-6-fosfato desidrogenase, determinada pelo teste de Brewer modificado (12), mostrou valor mdio de 14,2 1,5% da atividade normal entre os 22 indivduos deficientes e 97,2 0,7% em 30 indivduos com atividade enzimtica normal escolhidos aleatoriamente (Tabela 3). Os valores de referncia para a atividade enzimtica da G-6-PD estabelecidos para esse teste variam de 70 a 100% da atividade normal (indivduos no-deficientes) e abaixo de 70% da atividade normal (indivduos deficientes). Dentre os exames laboratoriais disponveis para a deteco dos deficientes de G-6-PD, o teste de reduo da metahemoglobina, ou teste de Brewer, um dos mais adequados para estudos populacio-


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nais por ser extremamente simples e econmico, uma vez que utiliza apenas reagentes de baixo custo, ou seja, nitrito de sdio, glicose e azul de metileno (20). Os resultados encontrados nesse estudo mostram a importncia da triagem de indivduos portadores da eritroenzimopatia em nossa populao contribuindo para o esclarecimento sobre a doena e suas possveis manifestaes

clnicas, pois embora esses indivduos normalmente apresentem-se assintomticos, eles podem manifestar hemlise de graus variveis quando fazem uso de alguns frmacos ou quando expostos a uma condio de estresse.

AgradecimentosAo Coronel Mdico Nelson Lus Foggiatto Silveira, Comandante do Esquadro de Sade da Base Area de Natal, ao Major Farmacutico Geraldo Provido Ottaviani, chefe do Laboratrio de Anlises Clnicas do Esquadro de Sade da Base Area de Natal pelo apoio necessrio realizao desse trabalho, e aos demais profissionais farmacuticos e tcnicos de laboratrio pela coleta e disponibilidade das amostras de sangue para o estudo.

Correspndencia para:Profa. Dra. Tereza Maria Dantas de Medeiros [email protected]

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