Licenciatura em Química

Determinação de Colesterol em Ovos

Nilópolis, 18/02/2013

Larissa L. de Araujo

Prof. Márcio

Disciplina: Bioquímica

Objetivo

Determinar a presença de colesterol na gema de ovos de galinha

Materiais e Reagentes

4 bequeres de 50 mL; Placa de aquecimento; Pipeta de 2mL e 5mL; Papel de filtro; Funil; Álcool etílico absoluto; Álcool etílico 50%;

Éter etílico; Éter petróleo; Hidróxido de potássio alcoólico

a 40%; Anidrido acético; Clorofórmio; Acido sulfúrico concetrado.

Procedimento

Acresentou-se em um béquer de 50mL aproximadamente 4mL de gema de ovo, em seguida adicionou-se 20mL de uma mistura 3:1 de álcool a 50% e éter. Em constante agitação aproximadamente 5 min, depois filtrou-se. Recolheu-se 10 mL da amostra, levou-se a aquecimento ate sua secura

Adicionou-se ao resíduo 6 mL de etanol e 12mL de solução de KOH alcoólica a 40%, misturou-se e aqueceu por aproximadamente 15 min. Após o resfriamento adicionou-se em um funil de separação 10 ml de éter de petróleo. Em agitação cuidadosa eliminando todo o gás, dentou e separou a as fases liquidas, coletando apenas a fase inferior.

Lavou-se a fase eterica com 10 mL de álcool a 50%, sendo eleminada a fase alcoólica. Em seguida a fase eterica lavada foi levada a placa de aquecimento ate sua secura.

Ao resíduo foi adicionado 2 mL de cloroformiu que foi vertido em porções iguais em 2 tubos. Em seguida foram realizados os ensaios especifico de Liberman Boucharf e Salkowski.

Introdução

O colesterol é um tipo de lipídeo (Figura 1) encontrado naturalmente em nosso organismo, fundamental para o seu funcionamento normal. O colesterol é o componente estrutural das membranas celulares em todo nosso corpo e está presente no cérebro, nervos, músculos, pele, fígado, intestinos e coração. Nosso corpo usa o colesterol para produzir vários hormônios, vitamina D e ácidos biliares

que ajudam na digestão das gorduras. 70% do colesterol é fabricado pelo nosso próprio organismo, no fígado, enquanto que os outros 30% vêm da dieta.

Figura 1 Estrutura do colesterol

Por que é importante entender o colesterol?

Quando em excesso (hipercolesterolemia), o colesterol pode se depositar nas paredes das artérias, que são os vasos que levam sangue para os órgãos e tecidos, determinando um processo conhecido com arteriosclerose. Se esse depósito ocorre nas artérias coronárias, pode ocorrer angina (dor no peito) e infarto do miocárdio. Se ocorre nas artérias cerebrais pode provocar acidente vascular cerebral. Portanto o colesterol alto é um fator de risco para o desenvolvimento de doenças cardiovasculares.

O colesterol do organismo tem duas origens: a produção endógena do seu próprio corpo e o colesterol proveniente da alimentação. O corpo produz colesterol no fígado e esse colesterol produzido é capaz de suprir quase toda necessidade do organismo. O restante necessário deve ser proveniente do que você come. O colesterol está presente em carnes, leites e derivados, manteiga e gema de ovo. Comer muitos alimentos com colesterol pode fazer seus níveis de colesterol no corpo subirem, o que é conhecido por hipercolesterolemia.

Método de Liebermann-Burchard

A reação se processa quando o ácido sulfúrico concentrado é adicionado à uma solução de colesterol em anidrido acético. As cores produzidas variam do vermelho ao violeta e ao azul esverdeado. A cor esverdeada é devida a formação de um derivado sulfônico do colesterol (Figura 2).

Figura 2 Formação do derivado sulfônico na reação de Liebermann-Burchard

Método de Salkowski

É semelhante ao de Liebermann-Burchard, quando o ácido sulfúrico concentrado é adicionado a uma solução de clorofórmio de colesterol, a fase de clorofórmio mostra uma cor azul para vermelho e a camada de ácido apresenta uma fluorescência verde.

Resultado e Discussão

Devido à formação de resíduos durante o procedimento, foi realizada uma filtragem, durante este processo perdeu-se aproximadamente metade da amostra. Com isso os reagentes foram reduzidos a metade com o intuito de minimizar o erro do resultado. Os resultados obtidos são de caráter qualitativo, visto que não se tinha a solução padrão de colesterol. Desta forma, utilizaram-se dois métodos semelhantes a modo comparativo.

Método de Liebermann-Burchard

Foi observado o aparecimento de uma cor azul escura indicado assim há presença de colesterol no ovo. Com relação aos níveis de colesterol, pode-se observar que o ovo branco apresentou menores concentrações deste constituinte. Já o ovo escuro foi o que apresentou maior concentração de colesterol, quando comparados.

Método de Salkowski

Não foi realizado esse teste, devido ao erro dos operadores que não realizaram a separação da amostra. Todavia o resultado do ovo branco também foi positivo com o aparecimento de um anel vermelho claro entre a fase liquida. Com relação ao ovo escuro esperava-se há formação de um anel, porem com coloração mais intensa que o outro, visto que no ensaio anterior confirma maior concentração.

Conclusão

Portanto pode-se concluir que a maior concentração de colesterol foi encontrada no ovo escuro. A diferença é significativa, uma vez que o colesterol encontra-se intimamente relacionado com o desenvolvimento de doenças cardiovasculares, torna-se de grande importância o consumo de alimentos com concentrações menores deste composto.

Referencias

LEHNINGER, A.L. Principios de Bioquímica . 3ª ed. , São Paulo. 2002. 725p.

http://www.biotecnologia.com.br/revista/bio19/19_5.pdf

http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/guia_praticas.htm