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Dra. Graziele Moraes Losso PhD, Diretora do setor de Biologia Molecular Laboratório Mantis
Pesquisadora da Universidade Federal do Paraná- UFPR/HC
Declaro que:
• Já recebi com speaker da indústria farmacêutica Merck ;
• Nos últimos cinco anos Não realizei pesquisas financiada por
empresas farmacêuticas ou de equipamentos;
• Não há conflitos de interesses com nem uma indústria
farmacêutica.
“O câncer pode ser considerado uma doença
genética e a identificação e caracterização dos
genes alterados é fundamental para compreensão
das bases moleculares da doença”
(Ferreira e Rocha,2010)
•Para o ano de 2030, estimativas apontam que onúmero de casos novos anuais de câncer no
mundo seja da ordem de 21,4 milhões, sendocerca de 60% destes, em países em desenvolvimento.
( INCA, 2014; PARKIN et al. 2001).
TUMOR
“O teste da Familia RAS é uma ferramenta molecular essencial que
permite aos médicos selecionar geneticamente quais pacientes com
CCRm irão responder as terapias alvo anti-EGFR"
RAS é um grupo de genes que codifica as proteínas que
participam da via de sinalização do receptor do factor de
crescimento epidérmico (EGFR).
A via de sinalização é importante no desenvolvimento e
progressão do câncer.
Karapetis CS, et al. K-ras mutations and benefit from cetuximab in advanced colorectal cancer. N Engl J Med 2008;359:1757-65.
Genes envolvidos no teste:
KRAS
Exon3Exon4Exon2
NRAS
Exon3Exon4Exon2
Códon 12
Códon 13 Códon 59
Códon 61
Códon 12
Códon 13Códon 59
Códon 61
Códon 117
Códon 146
40% mutações
Códon 117
Códon 146
17% mutações
N, Eng J Med 369:1023, 2013: Ciardiello et al. 2014; Stintzing et al 2014; Peeters et al 2014.
Houve um aumento do interesse no papel dos biomarcadores na
oncologia, incluindo o papel do status RAS como um biomarcador
de CCRm.
As metodologias utilizadas para realização do teste são:
pirosequenciamento, sequenciamento (sanger) e sequenciamento
de nova geração.
A determinação do status RAS no tumor auxilia o médico na
abordagem terapêutica mais eficaz.
Ramos FJ, et al. Understanding the predictive role of Kras for epidermal growth factor receptor-targeted
therapies in colorectal cancer. Clin Colorectal Cancer 2008;7(S2):S52-7.
Os genes da familia Ras normal (Wild-type) ou mutado.
Proteínas Ras (Wild-type) são ativas por um curto período,
quando o EGFR é estimulado.
O estado de RAS de um tumor pode ser indicativo de
prognóstico e preditivo de resposta a certas drogas.
DiFiore F, et al. Clinical relevance of KRAS mutation detection in metastatic colorectal cancer treated by
cetuximab plus chemotherapy. Br J Cancer 2007;96:1166-9.
As proteínas RAS desempenham um papel central no
desenvolvimento do tumor, estando envolvidas na proliferação,
sobrevivência, metástase e angiogênese
Baselga J. Why the epidermal growth factor receptor? The rationale for cancer therapy. Oncologist 2002;7(S4):2-8. .
Extração do DNA tumoral
Biópsia
Tecido parafinado
Xilol 100ul
65°C 30’EOTH 100%
EOTH 95%
EOTH 70% Água Destilada
50 µl DNA
(QIAmp® DNA FFPE Tissue Handbook – Qiagen).
HIDRATAÇÃO
LOSSO, 2014
• Pyrosequenciamento
• Sequenciamento (Sanger)
• Sequenciamento de nova Geração
Pacientes CCRm com RAS selvagem podem se beneficiar com terapias alvo anti-EGFR;
Pacientes com tumores com KRAS mutado não beneficiam de terapia anti-EGFR;
A presença de mutações de NRAS,BRAF bem como mutações KRAS adicionais, estão associadas a falta de resposta à terapia anti-EGFR.
1 Köhne CH, et al. Cetuximab with chemotherapy as 1st-line treatment for metastatic colorectal cancer: A meta-analysis of the CRYSTAL and OPUS studies according to KRAS and BRAF mutation
status. ASCO GI 2010, Abstract No. 406
2 Ramos FJ, et al. Understanding the predictive role of K-ras for epidermal growth factor receptor-targeted therapies in colorectal cancer. Clin Colorectal Cancer 2008;7(S2):S52−7.
3 Custodio A and Felie J. Prognostic and predictive biomarkers for epidermal growth factor receptor-targeted therapy in colorectal cancer: beyond KRAS mutations. Crit Rev Oncol Hematal
2013;85:45−81.
O status RAS no tumor do paciente permite que o
tratamento seja individual e personalizado.
KRAS
MSI-H
BRAF
Resistência à 5-fluorouracil (5FU);
Marcador de suscetibilidade herdada (gástrico,útero);
Melhor prognóstico e sobrevida.
Terapia anti-EGFR;
Marcador de agressividade tumoral.
Marcador de agressividade tumoral;
Exclusão de Lynch;
Terapia anti-EGFR.
