Embed Size (px)
Citation preview
09/04/2018
1
Efeito da variabilidade genética do gene Efeito da variabilidade genética do gene Efeito da variabilidade genética do gene Efeito da variabilidade genética do gene
da hormona de crescimento sobre a da hormona de crescimento sobre a da hormona de crescimento sobre a da hormona de crescimento sobre a
produção de leite em ovelhas das raças produção de leite em ovelhas das raças produção de leite em ovelhas das raças produção de leite em ovelhas das raças
Saloia e Saloia e Saloia e Saloia e AssafAssafAssafAssaf....
Marques *, MR, Belo, A.T., Pereira, E.A., Belo, C.C.
A hormona de crescimento (GH)
GH1 e GH2-N sintetizadas pela pituitária - controlo
metabólico do crescimento e da produção de leite
GH2-Z sintetizada pela placenta - controlo metabólico da
gestação e do crescimento fetal
No fígado estimula a produção de IGF-1
A GH e a IGF-1 controlam:
- o desenvolvimento da glândula mamária e a
a lactogénese
- a mobilização das reservas corporais
09/04/2018
2
O gene da GH: Polimórfico em ovinos, caprinos e bovinos.
Mutações descritas em ovinos
podem modificar: o péptido sinal
a proteína transmembranar
a estabilidade da proteína (por perdas/ganho de
locais de fosforilação, acetilação ou sulfatação)
Avaliar a variabilidade genética do gene GHem rebanhos das raças ovinas Saloia e Assaf explorados na região de Portalegre
Estabelecer associações entre os padrões conformacionais encontrados no gene da GHe parâmetros de produção de leite.
09/04/2018
3
Colheita de sangue e extração de ADN
Saloias
• 89 ovelhas genotipadas
• 43 com lactações válidas
• 1 criador
Assaf
• 199 ovelhas genotipadas (2 criadores)
• 133 com registos produtivos disponíveis (1 criador)
Análise de ADN por PCR-SSCP
Amplificação dos fragmento de ADN (tamanhos entre 100 e 400 pb)
Separação electroforéticaem gel de agarose
Separação electroforéticaem gel de poliacrilamida
Revelação das bandas de ADN (coloração com nitrato de prata)
M 1 2 3 M 1 2 3 M 1 2 3 M 1 2 3
09/04/2018
4
Análise estatística modelo linear misto:
����� = � + �� + �� + �1(����� − �̅) + �1(����� − �̅)2 + �2(����� − �̅) + �2(����� − �)2
+ �������� + ��� + �����
����� = � + �� + �� + �1(����� − �̅) + �1(����� − �̅)2 + �2(����� − �̅) + �2(����� − �)2
+ �������� + ��� + �����
����� : observação (P150, Ptotal ou DurL) no animal l no ano i com o tipo de parto j e
com o padrão conformacional k no exão considerado;
µ : média geral; ��: efeito fixo do ano; �� : efeito fixo do tipo de parto;
β1(xijkl -x#) e �1(����� − �̅)2: efeitos linear e quadrático da covariável número da lactação;
β2(xijkl -x#) e �2(����� − �̅)2 efeitos linear e quadrático da covariável mês de parto;
��������: efeito aleatório do animal;
��ã��: efeito fixo do padrão SSCP do exão considerado;
����� : erro aleatório.
Variabilidade genética do gene GH por PCR-SSCP
5’ 3’
09/04/2018
5
Frequências Saloias
Assaf
89%
11%
Ex1
A
B
47%
16%
36%
1%
Ex2
A
B
C
D
10%
16%
1%
21%
8%
26%
17%
1%
Ex3A
B
C
D
E
F
G
H
I
94%
6%
Ex4
A
B 53%24%
5%
12%6%
Ex5A
B
C
D
E
F
G
H
I
J
K
57%
10%
30%
3%
EX1
A
B
C
D
37%
21%
15%
9%
5%
6%6% 1%
EX2A
B
C
D
E
F
G
H
25%
22%
4%2%
13%3%
21%
8% 2%
EX3A
B
C
D
E
F
G
H
I
85%
15%
EX4
A
B
26%
20%
8%6%1%
2%
27%
5%
3%2%
EX5A
B
C
D
E
F
G
H
I
J
K
Saloias
Assaf
89%
11%
A
B
50%
7%
38%
5%
A
B
C
D
50
70
90
110
130
150
A B C D
Litr
os
em
15
0 d
ias
de
la
cta
ção
Saloias
a
ab
ab
b
325
345
365
385
405
425
A B C D
Litr
os
em
15
0 d
ias
de
la
cta
ção
Assaf
Padrões SSCP
09/04/2018
6
0
50
100
150
200
250
300
A B C D
Litr
os
Padrões SSCP
Saloias
a
abb
c
350
400
450
500
550
600
650
A B C DLi
tro
s
Padrões SSCP
Assaf
50
70
90
110
130
150
A B C D F H I J
Litr
os
em
15
0 d
ias
de
la
cta
ção
Saloias
ab ab
a
c
abc abc
bc
325
345
365
385
405
425
A B C D F H I J
Litr
os
em
15
0 d
ias
de
la
cta
ção
Assaf
Saloias
Assaf
Padrões SSCP
14%
24%
10%7%
1%1%
33%
6%4%
EX5 A
B
C
D
E
F
G
H
I
J
K
53%
24%
5%
12%
6%
A
B
C
D
E
F
G
H
I
J
K
09/04/2018
7
0
50
100
150
200
250
300
A B C D F H I J
Litr
os
Padrão SSCP
Saloias
aa a
a
aa
b
400
450
500
550
600
650
700
A B C D F H I J
Litr
os
Padrão SSCP
Assaf
b
a
150
170
190
210
230
250
270
290
Saloias Assaf
Dia
s d
e la
cta
ção
Exão 4
A B
bab
a
ab
150
170
190
210
230
250
270
290
310
Saloia Assaf
Dia
s d
e la
cta
ção
Exão 5
A B C D F H I J
Duração da lactaçãoDuração da lactaçãoDuração da lactaçãoDuração da lactação
09/04/2018
8
Existe grande variabilidade genética no gene GHnos rebanhos das raças ovinas Saloia e Assafestudados
Ovelhas Assaf: maior número de padrões que as Saloias em todos
os exões do gene GH, exceto no exão 4
A variabilidade do gene GH observada está de acordo
com a observada previamente em outras raças ovinas
Ovelhas Saloias: Não foi encontrada associação significativa entre
os padrões SSCP e a produção leiteira
os exões 4 e 5 da GH influenciaram a duração da lactação
Ovelhas Assaf: Padrão D no exão 1 - em média + 37 L de leite em 150
dias de lactação que as com o padrão A.
Padrão D ou J no exão 5 - em média + 50 L de leite em 150 dias de lactação que as com os padrões A, B ou C.
Não existe correlação entre os padrões dos vários exões
e a duração da lactação
09/04/2018
9
PROJETO
ALT20-03-0145-FEDER-000019
Marcadores éticos
para a odução e qualidade do leite em elhas
da raça Assaf.
O projeto visa:
- gerar novos conhecimentos sobre os efeitos de genes do eixo
somatotrófico na produção e composição do leite, a duração da
lactação, aptidão tecnológica e rendimento queijeiro em
ovelhas Assaf
- identificar mutações a serem usadas em programas de seleção
- contribuir para aumentar o conhecimento técnico e científico e
a sustentabilidade económica da produção de leite de ovelha
no Alentejo.
09/04/2018
10
Aos criadores de ovinos Saloios e Assaf.
À FCT:
• Projeto PRAXIS XXI 3/3.2/CA/1991/95
Ao Alentejo 2020, Portugal 2020 e FEDER:
• Projeto ALT20-03-0145-FEDER-000019
Obrigada pela Obrigada pela Obrigada pela Obrigada pela vossa vossa vossa vossa
atençãoatençãoatençãoatenção!!!!
