EFICIÊNCIA DE DOIS PROTOCOLOS DE IATF … · Comparação da Taxa de Concepção com os animais que apresentaram corpo lúteo (CL) e Estro. BE - tratamento com benzoato de estradiol

INSTITUTO DE ZOOTECNIA PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM PRODUÇÃO ANIMAL SUSTENTÁVEL

EFICIÊNCIA DE DOIS PROTOCOLOS DE IATF UTILIZANDO

BENZOATO DE ESTRADIOL OU GnRH

Vinicius Antonio Pelissari Poncio

Nova Odessa Fevereiro – 2012

i

GOVERNO DO ESTADO DE SÃO PAULO

SECRETARIA DE AGRICULTURA E ABASTECIMENTO AGÊNCIA PAULISTA DE TECNOLOGIA DOS AGRONEGÓCIOS




Vinicius Antonio Pelissari Poncio

Keila Maria Roncato Duarte

Rafael Herrera Alvarez

Nova Odessa Fevereiro, 2012

Dissertação apresentada ao Programa de Pós-

graduação do Instituto de Zootecnia, APTA/SAA,

como parte dos requisitos para obtenção do título

de Mestre em Produção Animal Sustentável.

ii

Ficha elaborada pelo Núcleo de Informação e Documentação do Instituto de Zootecnia

Bibliotecária responsável – Ana Paula dos Santos Galletta - CRB8/7166

Poncio, Vinicius Antonio Pelissari P795e Eficiência de dois protocolos de Iatf utilizando benzoato de

estradiol ou GnRH. / Vinicius Antonio Pelissari Poncio. Nova Odessa - SP, 2012.

56p. : il.

Dissertação (Mestrado) - Instituto de Zootecnia. APTA/SAA.

Orientador: Prof. Dra. Keila Maria Roncato Duarte.

1. Bovinos - Inseminação artificial. 2. Fêmeas sincronizadas. 3. Estradiol. I. Duarte, Keila Maria Roncato. II. Título.

CDD 636.20824

iii

GOVERNO DO ESTADO DE SÃO PAULO

SECRETARIA DE AGRICULTURA E ABASTECIMENTO AGÊNCIA PAULISTA DE TECNOLOGIA DOS AGRONEGÓCIOS


Certificado de aprovação



Vinicius Antonio Pelissari Poncio Orientadora: Keila Maria Roncato Duarte

Co-orientador: Rafael Herrera Alvarez

Aprovado como parte das exigências para obtenção de título de MESTRE em produção Animal sustentável, pela Comissão Examinadora:

Profa.Dra. Keila Maria Roncato Duarte Instituto de Zootecnia – APTA/SAA

Dr. Fabio Morato Monteiro

Instituto de Zootecnia – APTA/SAA

Dr. Daniel Jesus Cardoso de Oliveira Polo de Andradina– APTA/SAA

Data da realização: 08 de fevereiro de 2012 Presidente da Comissão Examinadora Profa.Dra. Keila Maria Roncato Duarte

iv

Dedicatória

A minha esposa Camila, pelo seu amor, companheirismo e dedicação,

sempre vibrando por todas minhas conquistas.

Aos meus familiares, pela ajuda no decorrer deste percurso.

v

Agradecimentos

Ao Instituto de Zootecnia por oferecer o curso, e aos Docentes e

Funcionários da Pós-Graduação.

A minha orientadora Dra. Keila Maria Roncato Duarte pela dedicação,

comprometimento, paciência e companheirismo.

Ao meu co-orientador Dr. Rafael Herrera Alvarez pelo experimento e

apoio técnico do meu trabalho.

As Bancas de Qualificação e Defesa pelas correções e sugestões que

enriqueceram meu trabalho.

Aos colegas de curso em especial ao Alfredo por todos bons momentos

vividos nesses anos todos.

A todos os estagiários e funcionários do laboratório.

Em fim a todos que de alguma forma colaborou para o termino de mais

uma fase da minha vida.

Muito Obrigado.

vi

Sumário

SUMÁRIO ......................................................................................................... vi

LISTA DE FIGURAS .................................. ..................................................... viii

LISTA DE TABELAS .................................. ...................................................... ix

EFICIÊNCIA DE DOIS PROTOCOLOS DE IATF UTILIZANDO BE NZOATO

DE ESTRADIOL OU GNRH .............................. ................................................. x

RESUMO............................................................................................................ x

PERFORMANCE OF TWO FTAI PROTOCOLS USING OESTRADIOL

BENZOATE OR GNRH .................................. ................................................... xi

ABSTRACT .......................................... ............................................................. xi

CAPÍTULO 1 – CONSIDERAÇÕES GERAIS ................. ................................... 1

1. INTRODUÇÃO ............................................................................................... 1

2. REVISÃO DE LITERATURA .......................... ............................................... 6

2.1. FISIOLOGIA DO CICLO ESTRAL EM BOVINO ......... ............................ 6

2.1.1. HORMÔNIOS ENVOLVIDOS NO CICLO ESTRAL ....... ................... 7

2.2. INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL ....................... .......................................... 11

2.3. INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL EM TEMPO FIXO (IATF) .. ...................... 12

2.3.1. PROTOCOLOS DE IATF ......................... ....................................... 13

2.3.1.1. PROTOCOLO UTILIZANDO BENZOATO DE ESTRADIOL ... 14

2.3.1.2. PROTOCOLO OVSYNCH ........................................................ 15

2.3.1.3. PROTOCOLO CO-SYNCH 7 DIA ................. ........................... 16

2.3.1.4. PROTOCOLO CO-SYNCH 5 DIA ................. ........................... 18

vii

2.4. QUALIDADE DOS PRODUTOS DE ORIGEM ANIMAL ...... ................. 19

2.4.1. SUSTENTABILIDADE E MERCADO IMPORTADOR DA CAR NE

BRASILEIRA ........................................ ..................................................... 21

2.4.2. RESÍDUO DE AGENTE ANABÓLICO ................ ............................ 24

2.4.3. MÉTODOS PARA DETECÇÃO DE RESÍDUOS DE

ANABOLIZANTES ..................................... ............................................... 25

3. REFERÊNCIAS ............................................................................................ 27

CAPÍTULO 2 – EFICIÊNCIA DE DOIS PROTOCOLOS DE IATF UTILIZANDO

BENZOATO DE ESTRADIOL OU GNRH ..................... ................................... 32

RESUMO.......................................................................................................... 32

PERFORMANCE OF TWO FTAI PROTOCOLS USING OESTRADIOL

BENZOATE OR GNRH .................................. .................................................. 33

ABSTRACT .......................................... ............................................................ 33

1. INTRODUÇÃO ............................................................................................. 34

2. MATERIAL E MÉTODOS ............................. ............................................... 37

2.1. LOCAL E ANIMAIS .............................. ................................................. 37

2.2. TRATAMENTOS .................................. .................................................. 38

2.3. VARIÁVEIS ANALISADAS ......................... .......................................... 39

2.4. ANÁLISE ESTATÍSTICA .......................... ............................................. 40

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO ......................... .......................................... 41

3.1. ANÁLISE DOS RESULTADOS ....................... ...................................... 46

3.2. ANÁLISE ESTATÍSTICA .......................... ............................................. 49

4. CONCLUSÃO ...................................... ........................................................ 51

5. REFERÊNCIAS ............................................................................................ 52

viii

Lista de Figuras

Figura 1

Controle hormonal do ciclo estral de fêmeas pelo eixo hipotálamo-hipófise-ovários. FSH: hormônio folículo estimulante; GnRH: hormônio liberador de gonadotrofinas; LH: hormônio luteinizante (DIB et al, 2008). 8

Figura 2

Representação esquemática das variações, na concentração dos principais hormônios que regulam o ciclo estral em bovinos (CNPGC EMBRAPA, 2011) 10

Figura 3 Protocolo de IATF utilizando Benzoato de Estradiol (Arquivo Pessoal). 14

Figura 4 Protocolo Ovsynch utilizando GnRH (Arquivo Pessoal). 15

Figura 5 Protocolo Co-synch 7 dias utilizando GnRH (Arquivo Pessoal). 17

Figura 6 Protocolo Co-synch 5 dias utilizando GnRH (Arquivo Pessoal). 18

Figura 7

Protocolo de IATF com Benzoato de Estradiol utilizado no experimento (arquivo pessoal). 38

Figura 8 Protocolo de IATF com GnRH utilizado no experimento (arquivo pessoal). 39

Figura 9 Taxa de Concepção dos Grupos Estudados. 46

Figura 10 Comparação da Manifestação do Estro com a Taxa de Concepção. 47

Figura 11

Presença do CL no Inicio do Protocolo, Manifestação do Estro e Taxa de Concepção 48

ix

Lista de Tabelas

Tabela 1 Resultados observados no grupo 1 (Benzoato de Estradiol) 42

Tabela 2 Resultados observados no grupo 2 (GnRH) 42

Tabela 3

Comparação da Taxa de Concepção com os animais que apresentaram corpo lúteo (CL) e Estro. BE - tratamento com benzoato de estradiol e GnRh - Hormônimo estimulante de gonadotrofina 46

Tabela 4 Frequência Observada para o Teste Qui-quadrado 49

Tabela 5 Frequência Esperada para o Teste Qui-quadrado 49

x



Resumo

A inseminação Artificial (IA) tornou-se uma das principais biotecnologias

reprodutivas de impacto econômico na produção de bovinos, aumentando a

produção de carne e leite por hectare. O emprego de alguns fármacos

disponíveis no mercado possibilitou essa biotecnologia, sem o

comprometimento na fertilidade do estro induzido. Assim, inúmeros protocolos

hormonais vêm sendo desenvolvidos para realização da inseminação artificial

em tempo pré-determinado, ou seja, em tempo fixo com taxas de concepção

aceitáveis. O emprego de alguns fármacos, dentre eles o Benzoato de

Estradiol, disponíveis no mercado possibilitou essa biotecnologia, sem o

comprometimento na fertilidade do estro induzido. A União Européia pela

Diretiva 2003/74/CE, proibiram o uso de estradiol e seus derivados para a

finalidade de sincronização do cio em animais de produção. Neste trabalho,

foram utilizadas 70 novilhas e 20 vacasda raça nelore divididas aleatoriamente

em dois grupos utilizando dois protocolos de Inseminação Artificial em tempo

fixo (IATF), um com Benzoato de Estradiol e outro com gonadorelina, o GnRH

(Hormônio Liberador de Gonadotrofina). Os animais, após a IATF, foram

avaliados quanto a presença de Corpo Lúteo, estro, taxa de concepção e em

ambos protocolos os resultados foram semelhantes e sem diferença

significativa, com a taxa de concepção (prenhez no primeiro serviço) em 32%

nas novilhas e 50% nas vacas, sem diferença significativa em teste de chi-

quadrado a 5 %, com ambos os protocolos de IATF. Estes resultados, do ponto

de vista econômico visando o mercado europeu, são bastante vantajosos, uma

vez que a Comunidade Européia está restringindo a importação de carnes e

co-produtos que tenham utilizado estradiol na sua produção.

Palavras – chave: IATF, estradiol, União Européia, GnRH

xi

PERFORMANCE OF TWO FTAI PROTOCOLS USING

OESTRADIOL BENZOATE OR GNRH

Abstract

Artificial Insemination (AI) became one of the major biotechnologies with

economic impact over the livestock production (cattle and dairy).The use of

some products enables such technology, without compromising fertility of

induced estrus. In this way, several hormonal protocols are being developed to

perform the AI in a pre-determined period of time, at a fixed time with

conception rates acceptable. The use of some products, among them oestradiol

benzoate, a common product in the veterinary field, enabled this technology,

without compromises the induced estrus fertility. Therefore, European Union,

throughout Directive 2003/74/CE forbids the use of oestradiol and its derivates

products to aim the estrus synchronization in livestock animals, mainly bovine.

In this work 70 heifers and 20 cows, all Nellore, randomly divided into two

groups were submitted to two Artificial insemination at Fixed Time (AIFT), one

group using oestradiol benzoate and another using gonadoreline- the GnRH

(Gonadotrofine Hormone inducer). After AIFT, animals were evaluated for

presence of Luteous Body, heat, conception rate and for both protocols, results

were similar, with no significant differences, presenting a conception rate (

pregnancy at the first service) of 32 % for heifers and 50% for cows, with no

significant difference on the chi-squared test at 5 %. Such results present an

advantage looking at the economic point of view, aiming the European market,

once the European Community is restricting importation of meat and co-

products which had used oestradiol during its production.

Key-words: Key-words: European Union, FTAI, GnRH, oestradiol

1

CAPÍTULO 1 – CONSIDERAÇÕES GERAIS

1. INTRODUÇÃO

O rebanho nacional de bovinos em 2010 chegou a 209,5 milhões de

cabeças, um aumento de 2,1% em relação a 2009, com maiores concentrações

no Centro-Oeste, Norte e Sudeste. A produção de leite bovino chegou a 30,7

bilhões de litros, um acréscimo de 5,5% e foram abatidas 29,265 milhões de

cabeças de bovinos, representando um aumento de 4,3% em relação ao ano

anterior (IBGE/PPM, 2010). O Brasil possui o maior rebanho bovino comercial

do mundo e hoje é o primeiro país no ranking de exportação de carne bovina.

Temos as maiores extensões de terras aptas a agricultura. Apesar de todas

essas facilidades, a taxa de prenhez dos rebanhos brasileiros, ficam em torno

de 60%, e com intervalo de parto de até 2 anos (SILVA, 2007).

2

Com uma demanda crescente de carne e leite e pelo mercado mais

competitivo e globalizado, os produtores estão sendo forçados a buscar novas

tecnologias para tornar a pecuária mais eficiente. A eficiência econômica da

pecuária de leite ou corte, esta vinculada a produção de bezerros. Neste

contexto, a eficiência reprodutiva desempenha um papel de grande

importância, pois sem a reprodução não temos a produção, tornando assim a

atividade inviável.

Durante os últimos anos, novas tecnologias aplicadas à reprodução

animal vêm contribuindo de maneira importante para o melhoramento genético.

A inseminação artificial (IA) se tornou uma das principais biotecnologias

reprodutivas de impacto econômico na produção de bovinos, apesar de ser a

mais utilizada, apenas 10% das fêmeas em idade reprodutiva são inseminadas

no Brasil (ASBIA, 2011).

O Brasil é um dos países que mais utiliza a IA, com grande expansão a

partir da década de 70. No Brasil, a IA, cresce anualmente: de 2000 a 2004,

houve um crescimento da utilização da técnica de IA de 42,7%, em gado de

corte, e de 10,5%, em gado de leite (DIB et al, 2008).

Como toda metodologia, a IA possui algumas limitações. Apesar de sua

simplicidade, a IA necessita de rígido controle nas diferentes etapas, desde o

monitoramento do rebanho (livre de doenças transmissíveis, sem animais

subférteis e com registros de vacinações, nascimentos, abortos e estros) e a

seleção do reprodutor doador do sêmen, com observação das características

de raça, produção, estado sanitário (livre de doenças), defeitos genéticos e

cromossômicos (cariótipo), até o processamento tecnológico do sêmen e a

3

necessidade de um inseminador bem treinado para a realização da técnica

(DUARTE, 2008).

No Brasil, um dos fatores que prejudica o desempenho reprodutivo é a

baixa taxa de serviço, provocada principalmente, pela ausência de ciclicidade

de fêmeas (anestro) e por falhas de detecção de estro. A detecção de estro

desprende tempo e requer pessoal treinado. Além disso, fêmeas zebuínas

apresentam estro de curta duração (cerca de 10-11 horas) e que, geralmente, é

manifestado durante à noite, dificultando, ainda mais, a detecção e a utilização

da IA tradicional (NICIURA, 2008).

Devido a essas limitações, tornou-se de grande interesse econômico, o

desenvolvimento de tratamentos que tem por objetivo a indução e/ou

sincronização do ciclo estral. O emprego de alguns fármacos disponíveis no

mercado, possibilitou essa biotecnologia sem o comprometimento na fertilidade

do estro induzido. Assim, inúmeros protocolos hormonais vêm sendo

desenvolvidos para realização da inseminação artificial em tempo pré-

determinado, ou seja, em tempo fixo (IATF) com taxas de concepção

aceitáveis.

Na IATF, são utilizados tratamentos hormonais que controlam o

momento da ovulação e possibilitam que a inseminação seja realizada num

momento pré-determinado (tempo fixo), sem a necessidade de observação de

cio (NICIURA, 2008).

Segundo Machado et al. (2006) aumentar a taxa de serviço é uma meta

imperativa quando se objetiva elevar a eficiência reprodutiva, uma vez que a

4

taxa de prenhez é o produto da taxa de serviço e da taxa de concepção. Neste

cenário, a indução da ovulação apresenta grande importância, a qual permite

efetuar a inseminação artificial em tempo fixo e aumentar a taxa de serviço

para 100%. Uma vez obtidas altas taxas de serviço, é importante assegurar a

fecundação do ovócito. Caso a inseminação ocorra em perfeita sincronização

com a ovulação, verificam-se elevadas taxas de concepção.

Os métodos de sincronização compreendem o uso de drogas que agem

ao nível hipotalâmico-hipofisário e/ou gonadal, Os protocolos de IATF hoje

mais utilizados em bovinos são os com o uso do estradiol (Benzoato de

Estradiol), embora outros países utilizem o GnRH em substituição ao estradiol,

este hormônio ainda tem um custo elevado para os padrões brasileiros.

Do ponto de vista do mercado de exportações, a União Européia tem se

mostrado mais preocupada com as questões de saúde e sustentabilidade,

impondo assim uma série de restrições aos produtos cárneos.

A sincronização da ovulação é uma estratégia importante para melhorar

a eficiência reprodutiva em bovinos. Dentre alguns hormônios utilizados nos

protocolos de IATF está o estradiol e/ou seus derivados. A União Européia

(UE) e outros países, pela Diretiva 2003/74/CE, proibiram o uso de estradiol e

seus derivados para a finalidade de sincronização do cio em animais de

produção a partir de 14 de outubro de 2006 (LANE et al., 2008).

Já o Mercado Norte Americano não impõe nenhuma restrição, incluindo

a liberação do uso de anabolizantes para a produção de carnes. Desta forma, a

avaliação de protocolos de IATF (Inseminação Artificial em Tempo Fixo)

5

utilizando diferentes hormônios pode nos direcionar para o mercado almejado,

obedecendo a quaisquer restrições impostas.

Tendo em vista a restrição da hormonioterapia pelos países da União

Européia, os hormônios usados nos protocolos de IATF deverão ser revistos,

ou seja, devemos elaborar outros protocolos eficazes, estes sem o uso do

estradiol (em especial o 17β estradiol), para podermos continuar utilizando esta

ferramenta reprodutiva importante, sem causar restrições comerciais e riscos à

saúde humana.

Este trabalho visa a comparação de dois protocolos de IATF usando

Benzoato de Estradiol e GnRH e avaliando a eficiência reprodutiva desses

animais (Taxa de Concepção). Portanto, avaliar uma fonte alternativa para a

substituição do estradiol nos protocolos de IATF, hormônio este que é proibido

pela UE, devido a relatos de contaminação de carne e leite.

6

2. REVISÃO DE LITERATURA

2.1. Fisiologia do Ciclo Estral em Bovino

Ciclo estral é o período compreendido entre dois estros, de duração

variável, porém em torno de 17 a 21 dias, apresentando fases bastante

evidentes e caracterizadas por modificações na genitália tanto interna como

externa, assim como no comportamento da fêmea. Quanto ao desenvolvimento

do ciclo estral as vacas são classificadas como poliéstricas anuais. As fases do

ciclo podem ser didaticamente divididas em pró-estro, estro, metaestro ep

diestro (REECE, 1996).

Estro é o período em que a fêmea aceita ser montada pelo macho. As

glândulas uterinas, cervicais e vaginais secretam grande quantidade de muco

de consistência viscosa. A vagina e a vulva tornam-se edemaciadas e dilatadas

7

e a cérvix está relaxada. O tempo de duração de estro é em média de 18

horas. Metaestro é a fase que sucede ao estro. As células epiteliais que

revestem o folículo que se rompeu do ovário sofrem rápida hipertrofia,

tornando-se luteinizadas e formando o corpo lúteo. Visualmente pode ser

perceptível um corrimento hemorrágico junto ao muco do estro. O tempo de

duração do metaestro é em torno de 3 a 4 dias. Diestro é o período entre estros

sucessivos e é denominado pelo corpo lúteo cíclico. As glândulas uterinas

estão ativas, a musculatura uterina esta relaxada, a cérvix contraída e a vagina

encontra-se com os lábios enrugados. O tempo de duração do diestro é em

torno de 10 a 13 dias. Pró-estro é a fase em que ocorre a regressão do corpo

lúteo e o recrutamento folicular para uma nova ovulação, o tempo de duração

do pró-estro é de 5 a 7 dias. (ARTHUR, 1979).

2.1.1. Hormônios Envolvidos no Ciclo Estral

Hormônios são substâncias que produzidas numa célula e são capazes

de exercer efeito local ou em órgãos distantes. A remoção do órgão de origem

causa a ausência de seu efeito e a reposição via exógena com a mesma

substância, no animal cujo órgão de origem foi removido, restabelece seus

efeitos. A ação no tecido alvo depende de estruturas conhecidas com

receptores, nas quais o hormônio deve se ligar para exercer sua função

(ALVES.et.al, 2007) (Figura 1).

Receptores geralmente são moléculas glicoprotéicas presentes no

interior (citoplasma) ou em membranas plasmáticas das células alvo. São

estruturas dinâmicas, ou seja, que podem aumentar ou diminuir de quantidade

8

em determinados momentos, ou mesmo estarem presentes ou ausentes em

um tecido dependendo da fase reprodutiva na qual o animal se encontra.

Muitas vezes, a potência ou atividade de um hormônio, está relacionada mais

ao número de receptores para o mesmo, que a sua concentração sanguínea ou

estrutura molecular (ALVES.et.al, 2007).

Figura 1 - Controle hormonal do ciclo estral de fêmeas pelo eixo hipotálamo-hipófise-

ovários. FSH: hormônio folículo estimulante; GnRH: hormônio liberador de

gonadotrofinas; LH: hormônio luteinizante (DIB et al, 2008).

• GnRH: hormônio liberador de gonadotrofinas. É produzido no

hipotálamo, uma estrutura presente no sistema nervoso central (SNC), e é

estimulado pelo aumento do estradiol, atingindo a hipófise pelo sistema porta

hipotalomo-hipofisario. Sua função básica é estimular a liberação de

9

gonadotrofinas, o FSH de forma constitutiva e o LH de forma pulsátil, pela

hipófise, hormônios estes responsáveis pelo crescimento, maturação, ovulação

e luteinização folicular (PALHANO, 2008).

• FSH: hormônio folículo estimulante. É produzido pela hipófise (ou

pituitária), sendo secretado em resposta ao GnRH. Atua principalmente ao

nível dos ovários onde exerce as seguintes funções principais:

desenvolvimento folicular, produção de estrógeno (E2) pelos folículos,

produção de inibina por folículos no final do desenvolvimento, aumento dos

receptores de LH no folículos (HAFEZ, 2004 ).

• LH: hormônio luteinizante. É produzido pela hipófise (ou pituitária),

sendo secretado em resposta ao GnRH. Atua principalmente ao nível dos

ovários onde exerce as seguintes funções principais: promover a ovulação e

formação do corpo lúteo e secreção inicial de progesterona (HAFEZ,2004)

• Ocitocina: promove as contrações uterinas em sinergismo com a

PGF2α no trabalho de parto e promove a ejeção ao atuar nas células da

glândula mamária (PALHANO, 2008).

• Estrógeno: denominado também de esteróide ovariano. É produzido

pelos folículos em desenvolvimento, tem várias funções dentro e fora do

sistema genital. As principais são: indução da manifestação do estro (SNC),

aumento da vascularização, contrações e secreções do genital e controle das

secreções de GnRH e junto com a inibina bloqueia a secreção de FSH,

fazendo um feedback positivo para a secreção do LH (PALHANO, 2008).

10

• Progesterona (P4): é também um esteróide ovariano, produzido pelo

corpo lúteo por ação do LH (em algumas espécies também é produzido pela

placenta). A nível de hipotálamo exerce um efeito feedback negativo sobre o

controle da atividade tônica da secreção de GnRH. As glândulas são

ativamente secretoras, produzindo um líquido formado por proteínas séricas e

específicas do útero, glicoproteínas, minerais, dos quais são essenciais para

nutrição do zigoto durante a fase de fixação (HAFEZ, 2004)

• Prostaglandina: é produzida pelo útero e secretada de forma pulsátil,

interfere na regulação neuroendócrina do ciclo estral mediante seu efeito

luteolítico, provocando a queda da progesterona (PALHANO, 2008).

Figura 2 - Representação esquemática das variações, na concentração dos principais

hormônios que regulam o cicio estral em bovinos (CNPGC EMBRAPA, 2011)

11

2.2. Inseminação Artificial

O melhoramento genético em rebanhos bovinos é baseado na seleção

de indivíduos com maior desenvolvimento ponderal, rendimento de carcaça,

capacidade de conversão alimentar, habilidade materna, fertilidade e

precocidade sexual, possibilitando o aumento da produtividade. Assim, uma

eficiente disseminação deste material genético proporciona maior retorno

econômico para a atividade.

Durante os últimos anos, novas tecnologias aplicadas à reprodução

animal vêm contribuindo de maneira importante para o melhoramento genético.

A inseminação artificial (IA) se tornou uma das principais biotecnologias

reprodutivas de impacto econômico na produção de bovinos, embora apresente

essas vantagens, apenas 10% das fêmeas em idade reprodutiva são

inseminadas no Brasil (ASBIA, 2011).

O Brasil é um dos países que mais utiliza a IA, com grande expansão a

partir da década de 70. No Brasil, a IA, cresce anualmente: de 2000 a 2004,

houve um crescimento da utilização da técnica de IA de 42,7%, em gado de

corte, e de 10,5%, em gado de leite (DIB et al, 2008).

A Inseminação Artificial nada mais é que a deposição mecânica do

sêmen no útero da fêmea. Em bovinos a quantidade de sêmen utilizado varia

entre 0,25 a 0,5 mL (de sêmen com diluente). As suas vantagens são: rápida

difusão de material genético superior, diminuição de riscos com animais e o

homem, uso de animais já mortos, controle sanitário, cruzamento ente raças,

etc, e suas desvantagens: mão de obra qualificada, material e detecção do cio

(PEREIRA, 2009).

12

2.3. Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF)

No Brasil, um dos fatores que prejudica o desempenho reprodutivo é a

baixa taxa de serviço, provocada principalmente, pela ausência de ciclicidade

de fêmeas (anestro) e por falhas de detecção de estro. A detecção de estro

despende tempo e requer pessoal treinado. Além disso, fêmeas zebuínas

apresentam estro de curta duração (cerca de 10-11 horas) e que, geralmente, é

manifestado durante à noite, dificultando ainda mais, a detecção e a utilização

da IA tradicional. Entretanto, esses problemas podem ser contornados pela

utilização da biotécnica de IATF (DIB et al., 2008).

A inseminação artificial é uma ferramenta extremamente importante no

processo de melhoramento genético do rebanho. No entanto, uma das grandes

limitações à sua expansão tem sido o custo e a falha associados aos trabalhos

de observação de cio por longo período de tempo. Como resultado, a eficiência

reprodutiva de rebanhos de corte em que se usa inseminação artificial em geral

é baixa, pois as taxas de serviço são insatisfatórias (VALLE, 1991; MACHADO

et al., 2006).

Com o objetivo de concentrar o período de manifestação de cio e

ovulação, possibilitando uma melhor utilização da inseminação artificial,

diversos métodos de controle foram desenvolvidos. Estes têm também

colaborado na implementação de outras tecnologias avançadas em

reprodução, como a transferência de embriões. Todavia, o sucesso de um

programa de sincronização de cio e ovulação está na dependência do uso

correto dessa metodologia (VALLE, 1991).

13

Nesse sentido, a indução e/ou sincronização de estro como

biotecnologia reprodutiva surge como uma ferramenta de manejo auxiliar, para

o aumento da eficiência produtiva e econômica da atividade pecuária. Através

da sincronização, o período de inseminação artificial (IA) pode ser reduzido de

21 dias para o mínimo de algumas horas, no caso da inseminação artificial em

tempo fixo (IATF), dependendo do método escolhido. Quando aplicada na

primeira estação reprodutiva possibilita incrementar o índice de repetição de

cria nas primíparas, principalmente por concentrar as parições no início da

temporada (BRAGANÇA, 2007).

A sincronização do estro pode ser obtida separadamente ou em

combinação através da inibição da ovulação, indução da ovulação ou ainda

pela indução ou atraso da regressão do corpo lúteo. Os métodos de

sincronização incluem a administração de hormônios naturais ou sintéticos via

oral, injeção intramuscular, implante subcutâneo/intravaginal, além do manejo

adequado dos animais, o qual inclui um correto manejo nutricional e um

desmame no período mais apropriado (SANTOS, 2002).

2.3.1. Protocolos de IATF

Os métodos de sincronização compreendem o uso de drogas que agem

ao nível hipotalâmico-hipofisário e/ou gonadal, podendo ser diferenciado neste

trabalho pelo uso ou não do estradiol.

14

2.3.1.1. Protocolo Utilizando Benzoato de Estradiol

O protocolo mais utilizado na bovinocultura brasileira é o que utiliza o

Benzoato de Estradiol (BE) (Figura 3), devido ao seu menor custo, comparado

aos que utilizam GnRH.

Figura 3 - Protocolo de IATF utilizando Benzoato de Estradiol (Arquivo Pessoal).

Este protocolo inicia com a aplicação de uma fonte intravaginal de

progesterona (P4) e a aplicação do Benzoato de Estradiol (BE) no dia zero

(D0), esse procedimento tem por finalidade a regressão folicular, pois altas

concentrações de estradiol na presença de progesterona, promovem a

regressão folicular e a emergência de uma nova onda de crescimento dos

mesmos.

Após oito dias (D8), é removida a fonte de progesterona (P4) e aplicado

a prostaglandina (PGF2α), isso vai simular a luteolise, ou seja, a quebra do

corpo lúteo (P4) pela prostaglandina (PGF2α).

15

No dia nove (D9) é aplicado novamente uma fonte de estradiol (BE) para

agora dar aporte ao desenvolvimento e maturação do folículo dominante.

No dia dez (D10), ou seja, trinta e seis horas após a aplicação do

estradiol, é feita a inseminação artificial (IA). Esse período de 36 horas é o

tempo que o folículo dominante leva para acabar sua maturação e ocorre a

ovulação.

2.3.1.2. Protocolo Ovsynch

Foi o primeiro protocolo que substituiu o estradiol pelo GnRH, foi

desenvolvido na Universidade da Flórida (WOLFENSON et al., 1994) e de

Wisconsin (PURSLEY et al., 1995), desenvolveram um protocolo experimental

de sincronização da ovulação (denominado Ovsynch pelo grupo de Wisconsin),

o qual permite a inseminação em tempo prefixado, sem necessidade de

observação do estro (ALVAREZ, 2003) (Figura 4).

Figura 4 - Protocolo Ovsynch utilizando GnRH (Arquivo Pessoal).

16

Este protocolo inicia com a aplicação do GnRH (Hormônio Liberador de

Gonadotrofina) no dia zero (D0), esse procedimento tem por finalidade a

emergência de uma nova onda de crescimento folicular. No protocolo Ovsynch

não utiliza uma fonte de progesterona, pois o animal deve ter um corpo lúteo,

ou seja, estar ciclando.

Após sete dias (D7), é aplicado a prostaglandina (PGF2α), isso vai

resultar na luteolise, ou seja, a quebra do corpo lúteo (P4) pela prostaglandina

(PGF2α).

No dia nove (D9) é aplicado uma fonte de GnRH para estimular a

secreção do FSH e do LH e dar aporte ao desenvolvimento, maturação e

ovulação do folículo dominante.

Após 12 a 16 horas é feita a inseminação artificial (IA).

2.3.1.3. Protocolo Co-synch 7 dia

O protocolo Co-synch 7 dia é recomendado para vacas e novilhas, a IA

ocorre de 60 a 66 horas após a remoção da progesterona (BEEFREPRO,

2011).

Esse protocolo é a variação do Ovsynch que utiliza uma fonte de

progesterona, ou seja, simula a presença de um corpo lúteo, e não precisa

mais saber se o animal esta ciclando (Figura 5).

17

Figura 5 - Protocolo Co-synch 7 dias utilizando GnRH (Arquivo Pessoal).


Gonadotrofina) e a introdução de uma fonte de progesterona (P4) no dia zero

(D0), esse procedimento tem por finalidade a regressão e o crescimento de

uma nova onda folicular, semelhante ao protocolo BE.

Após sete dias (D7), é feita a retirada da fonte de progesterona (P4) e é

aplicado a prostaglandina (PGF2α), isso vai resultar na luteolise, ou seja, a

quebra do corpo lúteo (P4) pela prostaglandina (PGF2α).

No dia oito (D8) é aplicado uma fonte de GnRH para estimular a



Após 36 a 40 horas da ultima aplicação do GnRH é feita a inseminação

artificial (IA), dia nove mais 12 horas (D9).

18

2.3.1.4. Protocolo Co-synch 5 dia

O protocolo Co-synch 5 dias é baseado no de 7 dias, a diferença básica

é que a fonte de progesterona é mantida por apenas 5 dias, ou seja, essa

redução de 2 dias pode obter um oócito mais jovem e de melhor qualidade.

Segundo Chebel et al. (2008) e Bridges et al. (2008), o protocolo Co-

synch 5 dias deve fazer 2 aplicações de prostaglandina (PGF2α), uma na

retirada da fonte de progesterona e a outra 12 hora depois, isso ocorre devido

ao corpo lúteo, por ser precoce, não ter uma resposta eficiente a uma só dose

de prostaglandina, não ocorrendo a luteólise.

Figura 6 - Protocolo Co-synch 5 dias utilizando GnRH (Arquivo Pessoal).


Gonadotrofina) e a introdução de uma fonte de progesterona (P4) no dia zero

(D0), esse procedimento tem a mesma finalidade do protocolo com 7 dia.

19

Após cinco dias (D5), é feita a retirada da fonte de progesterona (P4) e é

aplicado a prostaglandina (PGF2α), isso vai resultar na luteolise, ou seja, a

quebra do corpo lúteo (P4) pela prostaglandina (PGF2α).

Após doze horas é feita a segunda aplicação da prostaglandina

(PGF2α).

No dia seis (D6) é aplicado uma fonte de GnRH para estimular a



Após 36 a 40 horas da ultima aplicação do GnRH é feita a inseminação

artificial (IA), dia sete mais 12 horas (D7).

2.4. Qualidade dos Produtos de Origem Animal

Com os consumidores cada vez mais exigentes com a qualidade dos

alimentos, além das características tangíveis como cor, tamanho e ausência de

defeitos, outros padrões passaram a ter grande influência no mercado, como

as questões ambientais (local do cultivo, praticas culturais, resíduos etc.) e a

responsabilidade social (direito, saúde e segurança no trabalho e

desenvolvimento rural).

Dentre as carnes das diversas espécies de mamíferos e aves mais

utilizadas na alimentação humana, a bovina não é a mais consumida, mas é,

provavelmente, a mais valorizada e preferida. A suína é a mais consumida

devido à enorme produção da China e ao tamanho da população de

consumidores daquele país, enquanto a produção de carne de aves,

20

basicamente de frangos, cresce continuamente nas estatísticas globais,

respondendo rapidamente aos incrementos de demanda por proteína animal de

boa qualidade e baixo custo.Com uma tradição de quase um século na

exportação de carne bovina, o Brasil vem conquistando, nos últimos 10 anos,

uma posição de grande destaque no cenário internacional (Instituto FNP.

2005).

Para Euclides Filho (2005), o fortalecimento e a ampliação dos

mercados com aumento do consumo interno requerem esforços de todos os

segmentos na implementação das boas práticas de produção, com a

introdução do APPCC (Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle) -

Campo, das boas práticas de fabricação na indústria, rastreabilidade e de

manuseio adequado pelo setor de distribuição.

A rastreabilidade é uma ferramenta que permite identificar dados e fatos

referentes a um produto durante o ciclo de sua cadeia produtiva, baseando-se

no registro histórico dos acontecimentos que a envolvem (LIRANI, 2005). O

Brasil tem um sistema de rastreabilidade que vem sendo implantado pelo

MAPA - Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, a partir da

Instrução Normativa (IN) nº 1/2002, de 09/01/2002, que instituiu o SISBOV –

Sistema Brasileiro de Identificação e Certificação Bovina e Bubalina.

O Protocolo EUREPGAP IFA. EUREP (Euro-Retailer Produce Working

Group) é a sigla do nome de um grupo formado, em 1997, por atacadistas e

varejistas europeus, que desenvolveu, em 2002, o Protocolo EUREPGAP IFA

com o objetivo de estimular a implementação de sistemas agrícolas e de

produção de animais levando em consideração as boas práticas de produção,

21

a segurança alimentar, bem como a minimização dos impactos adversos ao

meio-ambiente e a proteção social do trabalhador (Globalgep, 2011)

A Comissão do Codex Alimentarius executa o Programa Conjunto da

FAO/OMS sobre Normas Alimentares, cujo objetivo é proteger a saúde dos

consumidores e garantir práticas eqüitativas no comércio de alimentos. O

Codex Alimentarius (do latim Lei ou Código dos Alimentos) é uma coletânea de

normas alimentares adotadas internacionalmente e apresentadas de modo

uniforme (CARDOSO et al., 1999).

2.4.1. Sustentabilidade e Mercado Importador da Car ne Brasileira

Nas fêmeas bovinas, o estradiol apresenta papel fundamental na

fisiologia reprodutiva, particularmente na regulação do ciclo estral e na

ovulação. O estradiol é utilizado em biotécnicas como sincronização de cio,

superovulação, transferência de embriões, entre outros procedimentos

(BARUSELLI et al., 2002), contudo normativas recentes da Comunidade

Européia vem colocando o β-estradiol na lista de produtos proibidos para uso

em animais criados para produção de carne, por ser uma substância que vai

contra as diretrizes de bem estar animal (COMISSÃO DAS COMUNIDADES

EUROPÉIAS, 2007).

O parecer do Comitê Científico das Medidas Veterinárias Relacionadas

com a Saúde Pública, de 30 de Abril de 1999, sobre os riscos potenciais para a

saúde humana decorrentes dos resíduos de hormonais presentes na carne e

nos produtos à base de carne de bovino (revisto em 3 de Maio de 2000 e

22

confirmado em 10 de Abril de 2002), concluiu que existe um grande conjunto

de provas recentes que sugerem que o estradiol 17β tem de ser considerado

como um cancerígeno total, na medida em que tem por efeito estimular o

aparecimento e o crescimento de tumores, e que os dados atualmente

disponíveis não permitem um cálculo quantitativo do risco para a saúde

humana. Consequentemente a Diretiva 96/22/CE foi alterada pela Diretiva

2003/74/CE para, entre outros, proibir permanentemente a utilização de

estradiol 17β enquanto promotor de crescimento e a reduzir substancialmente

todas as outras circunstâncias em que esta substância pode ser administrada a

todos os animais de criação para fins terapêuticos ou zootécnicos, na

pendência de um exame mais aprofundado da situação em termos factuais e

científicos e das práticas veterinárias nos Estados-Membros (Diretiva, 2008).

O artigo 11-A da Diretiva 96/22/CE impunha à Comissão a

apresentação, até 14 de Outubro de 2005, de um relatório sobre a

disponibilidade de medicamentos veterinários alternativos aqueles contendo

estradiol 17β para animais destinados à produção de alimentos, para fins

terapêuticos. A Comissão solicitou pareceres periciais e elaborou o relatório

científico relevante, que foi enviado ao Parlamento Europeu e ao Conselho em

11 de Outubro de 2005. Esse relatório conclui que o estradiol 17β não é

essencial na criação de animais para produção de alimentos, visto que a

utilização por veterinários das alternativas disponíveis (especialmente as

prostaglandinas) já é bastante comum nos Estados-Membros e que a proibição

total da utilização de estradiol 17β em animais para produção de alimentos não

produziria um impacto na criação e no bem-estar animal, ou este seria apenas

insignificante (Diretiva, 2008).

23

Foi prevista uma derrogação temporária para a utilização de estradiol

17β para a indução do estro nos bovinos, equinos, ovinos ou caprinos até 14

de Outubro de 2006. Dado que existem produtos alternativos eficazes, que já

são utilizados, e no sentido de garantir um elevado nível de proteção da saúde

humana na Comunidade, aquela derrogação não deverá ser renovada

(Diretiva, 2008).

É inserido o seguinte artigo: Artigo 11-B. A Comissão, em colaboração

com os Estados-Membros, organiza uma campanha de informação e

sensibilização sobre a proibição total da utilização de estradiol 17 β nos

animais para produção de alimentos, destinada às organizações de agricultores

e veterinários na União Européia, bem como às organizações fora do território

da União Européia que estejam direta ou indiretamente envolvidas na

exportação para esta de alimentos de origem animal abrangidos pelo âmbito de

aplicação da presente diretiva (Diretiva, 2008).

Atualmente, de acordo com o exposto na Diretiva nº 96/22/CE do

Conselho, a UE proíbe a importação, a comercialização e o uso de substâncias

naturais ou artificiais com atividade anabolizante, ou mesmo outras dotadas

dessa atividade, mas desprovidas de caráter hormonal, para fins de

crescimento e ganho de peso em animais de produção, com permissão

exclusiva para fins terapêuticos, como a sincronização do estro, transferência

de embriões, melhoramento genético e pesquisa experimental em medicina

veterinária.

Em países como os EUA, Austrália, Nova Zelândia e Argentina, com

produtividade de carne elevada e que atendem a mercados exigentes em

24

qualidade é permitido o uso de compostos anabolizantes naturais como a

testosterona, a progesterona e o 17-β estradiol e de compostos sintéticos tais

como o zeranol e o acetato de trembolona. Nesses países, os LMRs dos

compostos sintéticos são controlados no fígado e músculos dos animais aos

quais se fez a administração. Esses valores foram estabelecidos pela Food and

Agriculture Organization – FAO e pela World Health Organization - WHO

(DUARTE et al., 2002).

2.4.2. Resíduo de Agente Anabólico

No mundo moderno, grande parte da segurança alimentar repousa no

controle de remanescentes residuais nos alimentos, em decorrência do uso de

pesticidas, ou drogas veterinárias, ou por acidentes envolvendo contaminantes

ambientais. Resíduos de anabolizantes em carnes trazem sérios problemas de

saúde pública. De acordo com Epstein (1990), 3000 crianças em Porto Rico

tiveram sérios problemas de desenvolvimento sexual prematuro e cistos

ovarianos devido à ingestão de produtos cárneos com resíduos de zeranol.

Segundo o Comitê Misto do Codex Alimentarius/ FAO/ WHO, a ingestão

de alimentos contaminados por anabolizantes pode levar ao aparecimento de

distúrbios endócrinos como indução de puberdade precoce em crianças,

avanços na idade óssea com repercussões negativas no crescimento,

modificação dos caracteres sexuais, bem como cânceres principalmente no

fígado e pâncreas (CARDOSO et al., 1999).

25

De acordo com Rosa e Dode (1987), a via de administração mais

utilizada em bovinos é o implante em parte não comestível da carcaça, como

por exemplo, na orelha. A administração oral ou injeção (oleosa ou cristalina)

aumenta a possibilidade de abusos e a ocorrência de resíduos em tecidos

comestíveis, o que torna um problema de saúde pública.

2.4.3. Métodos para Detecção de Resíduos de Anaboli zantes

A determinação de resíduos de agentes anabolizantes em material

biológico é uma tarefa difícil. Para tal, os métodos utilizados, para serem

considerados satisfatórios, deverão preencher uma série de requisitos entre os

quais: ser adequado a uma rotina regular realizada por pessoa qualificada;

permitir o manuseio de um grande número de amostras num pequeno espaço

de tempo, para poder ser usado como um instrumento de fiscalização; ser

seletivo para o composto, de modo a evitar falsos positivos; quantificar, de

forma inequívoca, a concentração do composto presente; permitir tanto a

quantificação do composto livre quanto seu conjugado; não ser muito oneroso,

para não inviabilizar as análises de vigilância sanitária (PLAIZIER, 1993;

EECKHOUT et al., 1998).

Muitos métodos satisfazem alguns desses itens, mas nenhum satisfaz a

todos. É possível, entretanto, conseguir resultados bastante satisfatórios com

métodos que preencham a maioria desses requisitos.

Geralmente, para a detecção de resíduos de anabolizantes, dois tipos de

métodos podem ser usados: (1) os imunoensaios tais como radioimunoensaio

26

(RIA) e método imunoenzimático (ELISA), os quais são rotineiramente usados

para detecção e (2) métodos físico-químicos, por cromatografia (CG-EM,

CCDAE), os quais são usados para determinações quantitativas e como

métodos de referência (HOFFMAN e BLIETZ, 1983; LONE, 1997).

Segundo o MAPA no MEMO SCR/DIPOA N° 32/2005 descrev e sobre o

PNCR (Plano Nacional de Controle de Resíduos), onde os animais suspeitos

de contaminação com anabolizantes são submetidos ao exame ante-mortem,

observando anormalidades (aumento na glândula mamaria e do tecido adiposo,

vestígios de implantes, cicatriz na orelha, etc), é coletado a tireóide desse

animais e enviada para análise laboratorial.

Atendendo aos requisitos de sustentabilidade, o MAPA descreve que “A

sustentabilidade envolve desenvolvimento econômico, social e respeito ao

equilíbrio e às limitações dos recursos naturais. De acordo com o relatório da

Comissão Mundial sobre Meio Ambiente e Desenvolvimento, criada pela ONU

em 1983, o desenvolvimento sustentável visa "ao atendimento das

necessidades do presente, sem comprometer a possibilidade de as gerações

futuras atenderem às próprias necessidades". (MEMO, 2005).

27

3. REFERÊNCIAS

.........Higiene dos Alimentos – Textos Básicos / Organização Pan-Americana

da Saúde; Agência Nacional de Vigilância Sanitária; Food and Agriculture

Organization of the United Nations. – Brasília: Organização Pan-Americana da

Saúde, 2006. 64 p.: il.

ALVES, B.G et.al; Curso de Transferência de Embriões , 47p, Uberlandia,

2007

ALVAREZ, R.H. et al. Eficácia do tratamento Ovsynch associado à

inseminação artificial prefixada em rebanhos Bos taurus e Bos indicus.

Pesquisa Agropecuária Brasileira , v.38, n.2, p.6, 2003.

ARTHUR, H.G. Reprodução e Obstetrícia em Veterinária . Guanabara, 4 ed.,

1979.

BARUSELLI, P.S. et al. ; Efeito de diferentes protocolos de inseminação

artificial em tempo fixo na eficiência reprodutiva de vacas de corte

lactantes.Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.26, n. 3, p. 218-221,

2002.

28

BRAGANÇA, J.F.M. Estratégias hormonais de indução/sincronização de

estro em novilhas de corte entre 12 e 14 meses de i dade. 2007. Tese

(doutorado) – Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, 2007.67p.

BRIDGES, G.A. et.al. Decreasing the interval between GnRH and PGF2a from

7 to 5 days and lengthening proestrus increases timed-AI pregnancy rates in

beef cows. Theriogenology , v.69, p.843–851, 2008.

CARDOSO, O.M.C.; SILVA, T.J.P.; SANTOS, W.L.M. Ocorrência de resíduos

de dietilestilbestrol e zeranol em fígado de bovinos abatidos no Brasil. Ciência

e Tecnologia de Alimentos , v.19, n.3, p.1001–1014, 1999.

CHEBEL RC, et al.. Effect of reducing the period of follicle dominance in a

timed A.I. protocol on reproduction of dairy cows. Journal of Animal Science,

v. 86, (Suppl), 2008.

COMISSÃO DAS COMUNIDADES EUROPEIAS, Bruxelas, 4.6.2007. COM

(2007) http://ec.europa.eu/food/animal/resources/publications

DIB, C.C, et.al; Boletim Tecnico, 51. Inseminação Artificial , 2008. 71p.

DIB, C.C, Manejo sanitário e instalações zootécnicas . In: DIB et al. Boletim

Tecnico, 51. Inseminação Artificial , 2008. Capitulo 2, p. 5-14.

DIRECTIVA 2008/97/CE DO PARLAMENTO EUROPEU E DO CONSELHO de

19 de Novembro de 2008 Jornal Oficial da União Européia.

DUARTE,K.M.R et.al. Resíduos de anabolizantes na produção animal:

importância e métodos de detecção Ciência Rural , v.32, n.4, p.731-737, 2002.

DUARTE, K.M.R Histórico e aplicações da inseminação artificial . In: DIB et

al. Boletim Tecnico, 51. Inseminação Artificial , 2008. Capitulo 1, p. 1-4.

EECKHOUT, N.J. van, PETEGHEM, C.H. van, HELBO, V.C. New database on

hormone and veterinary drug residue determination in animal products. The

Analyst, v.123, n.12, p.2423-2427, 1998.

29

EUCLIDES FILHO, K. Carne bovina, competição global e mercado doméstico.

Visão Agrícola , n.3 – Bovinos, p.4-7, 2005.

EPSTEIN, S.S. Chemical additives in beef industry. Section on environmental

health policy. International Journal of Health Services , v.20, n.2, p.277-280,

1990.

HAFEZ,E.S.E.; HAFEZ,B. Reprodução Animal 7 ed., Botucatu:Manole, 2004,

513p.

HOFFMAN, B., BLIETZ, C. Application of radioimmunoassay (RIA) for the

determination of residues of anabolic sex hormones. Journal of Animal

Science , v.57, n.1, p.239-246, 1983.

INSTITUTO FNP. Anualpec 2005. São Paulo: Instituto FNP Consultoria e

Comércio, 2005. 340 p.

LANE, E.A.; AUSTIN,E.J.; CROWEB,C. Oestrous synchronisation in cattle-

Current options following the EU regulations restricting use of oestrogenic

compounds in food-producing animals: A review Animal Reproduction

Science , v.109, p.1-16, 2008.

LIRANI, A.C. Rastreabilidade, uma exigência comercial. Visão Agrícola , n.3 –

Bovinos, p.97-99, 2005.

LONE, K.P. Natural Sex steroids and their xenobiotic analogs in animal

production: growth, carcass quality, pharmacokinetics, metabolism, mode of

action, residues, methods and epidemiology. Critical Review in Food Science

and Nutrition , v.37, n.2, p.93-209, 1997.

MACHADO, R. et al. Sincronização da ovulação em vacas da raça nelore e

seus efeitos na função ovariana. Embrapa Pecuária Sudeste, 2006.

MEMO SCR/DIPOA N° 32/2005, Ministério da Agricultur a, Pecuária e

Abastecimento, Plano Nacional de Controle de Resíduos, 2005

30

NICIURA, S.C.M, Anatomia e fisiologia da reprodução de fêmeas bovin as,

In: DIB et al. Boletim Tecnico, 51. Inseminação Artificial , 2008. Capitulo 3, p.

15-27.

PALHANO, H.B Reprodução em Bovinos , LF livros de veterinária, 2 edição,

2008, 249p.

PEREIRA, V.C. Inseminação artificiale sincronização de cio em bov inos ,

2009. p 25.

PLAIZIER, J.C.B. Validation of the FAO/IAEA RIA kit for the measurament of

progesterone in skim milk and blood plasma. Viena : IAEA-TECDOC – 708,

june 1993, p.151- 156.

PURSLEY, J. R.; MEE, M. O.; WILTBANK, M. C. Synchronization of ovulation

in dairy cows using PGF2a and GnRH. Theriogenology , v. 44, n. 7, p. 915-923,

1995.

REECE, O.W. Fisiologia de Animais Domésticos . São Paulo:ROCA,1996,

289p.

ROSA, G.O., DODE, M.A.N. Hormônios anabolizantes – revisão. Revista

Criadores, v.56; n.686, p.129-137, 1987.

SANTOS, B.R.C. Hormonioterapia na reprodução . Universidade Federal do

rio Grande do Sul. Porto Alegre, 2002. p 68.

SILVA, A.S. et al Avaliação do custo beneficio da inseminação artificial

convencional e em tempo fixo de fêmeas bovinas pluríparas de corte. Revista

Brasileira de Reprodução Animal, v.31, n.4, p.443-445 2007.

VALLE, E.R. O ciclo estral de bovinos e métodos de controle. Campo

Grande EMBRAPA CNPGC, 1991.

WOLFENSON, D. et al. The effect of a GnRH analogue on the dynamics of

follicular development and synchronization of estrus in lactating cyclic dairy

cows. Theriogenology , v. 42, n. 4, p. 633-644, 1994.

31

http://www.cnpgc.embrapa.br/publicacoes/doc/doc48/03cicloestral.html, acesso

em 20/11/2011

http://www.ibge.gov.br/home/estatistica/economia/ppm/2010/default.shtm

acesso em 15/11/2011

http://www.asbia.org.br/ acesso em 21/11/2011

http://WWW.beefrepro.unl.edu/.../2010estrusovulationprotocol, acesso em

29/12/2011.

http://www2.globalgap.org/about.html, acesso em 29/12/2011.

32

CAPÍTULO 2 – EFICIÊNCIA DE DOIS PROTOCOLOS DE IATF

UTILIZANDO BENZOATO DE ESTRADIOL OU GnRH

Resumo

Neste trabalho, foram utilizadas 70 novilhas e 20 vacas da raça nelore

divididas aleatoriamente em dois grupos utilizando dois protocolos de

Inseminação Artificial em tempo fixo (IATF), um com Benzoato de Estradiol e

outro com gonadorelina, o GnRH (Hormônio Liberador de Gonadotrofina). Os

animais, após a IATF, foram avaliados quanto a presença de Corpo Lúteo,

estro, taxa de concepção e em ambos protocolos os resultados foram

semelhantes e sem diferença significativa, com a taxa de concepção (prenhez

no primeiro serviço) em 32% nas novilhas e 50% nas vacas, sem diferença

significativa em teste de chi-quadrado a 5 %, com ambos os protocolos de

IATF. Estes resultados, do ponto de vista econômico visando o mercado

europeu, são bastante vantajosos, uma vez que a Comunidade Européia está

restringindo a importação de carnes e co-produtos que tenham utilizado

estradiol na sua produção.

Palavras-chave: estradiol, IATF, taxa de concepção

33

PERFORMANCE OF TWO FTAI PROTOCOLS USING

OESTRADIOL BENZOATE OR GNRH

Abstract

In this work 70 heifers and 10 cows, all Nelore, randomly divided into two

groups were submitted to two Artificial insemination at Fixed Time (AIFT), one

group using oestradiol benzoate and another using gonadoreline- the GnRH

(Gonadotrofine Hormone inducer). After AIFT, animals were evaluated for

presence of Luteous Body, heat, conception rate and for both protocols, results

were similar, with no significant differences, presenting a conception rate (

pregnancy at the first service) of 32 % for heifers and 50% for cows with no

statistical significant difference in a chi-squared test at 5%. Such results

represent an advantage looking at the economic point of view, aiming the

European market, once the European Community is restricting importation of

meat and co-products which had used oestradiol during its production.

Key-words: AIFT, conception rate, oestradiol

34

1. INTRODUÇÃO

O rebanho nacional de bovinos em 2010 chegou a 209,5 milhões de

cabeças, um aumento de 2,1% em relação a 2009, com maiores concentrações

no Centro-Oeste, Norte e Sudeste, a produção de leite bovino chegou a 30,7

bilhões de litros, um acréscimo de 5,5% e foram abatidas 29.265 milhões de

cabeças de bovinos, representando um aumento de 4,3% em relação ao ano

anterior (IBGE/PPM, 2010). Com uma demanda crescente de carne e leite e

pelo mercado mais competitivo e globalizado, os produtores estão sendo

forçados a buscar novas tecnologias para tornar a pecuária mais eficiente.

A eficiência econômica da pecuária de leite ou corte, esta vinculada a

produção de bezerros. Neste contexto, a reprodução desempenha um papel de

grande importância.

35

A inseminação Artificial (IA) tornou-se uma das principais biotecnologias

reprodutiva de impacto econômico na produção de bovinos por possibilitar a

utilização em massa de indivíduos de genética superior e viabilizar os vários

cruzamentos de raças hoje disponíveis, aumentando a produção de carne e

leite por hectare. Embora apresente essas vantagens, apenas 10% das fêmeas

em idade reprodutiva são inseminadas no Brasil. As principais limitações

impostas ao emprego dessa biotecnologia referem-se às falhas na detecção do

estro, a puberdade tardia e ao longo período de anestro pós-parto (ASBIA,

2011).

Devido a essas limitações, tornou-se de grande interesse econômico nos

últimos anos, o desenvolvimento de tratamentos que tem por objetivo a indução

e/ou sincronização do ciclo estral. O emprego de alguns fármacos disponíveis

no mercado possibilitou essa biotecnologia, sem o comprometimento na

fertilidade do estro induzido. Assim, inúmeros protocolos hormonais vêm sendo

desenvolvidos para realização da inseminação artificial em tempo pré-

determinado, ou seja, em tempo fixo com taxas de concepção aceitáveis.

Do ponto de vista do mercado de exportações, a União Européia tem se

mostrado mais preocupada com as questões de saúde e sustentabilidade,

impondo assim uma série de restrições ao produtos cárneos, principalmente,

que chegam ao continente. A sincronização da ovulação é uma estratégia

importante para melhorar a eficiência reprodutiva em bovinos. Dentre alguns

hormônios utilizados nos protocolos de IATF está o estradiol e/ou seus

derivados. A União Européia (UE) e outros países, pela Diretiva 2003/74/CE,

proibiram o uso de estradiol e seus derivados para a finalidade de

36

sincronização do cio em animais de produção a partir de 14 de outubro de 2006

( LANE et.al. 2008).

Já o Mercado Norte Americano não impõe nenhuma restrição , incluindo

a liberação do uso de anabolizantes para a produção de carnes. Desta forma, a

avaliação de protocolos de IATF (Inseminação Artificial em Tempo Fixo)

utilizando diferentes hormônios pode nos direcionar para o mercado almejado,

obedecendo a quaisquer restrições impostas.

Tendo em vista a restrição da hormonioterapia pelos países da União

Européia, os hormônios usados nos protocolos de IATF deverão ser revistos,

ou seja, devemos elaborar outros protocolos eficazes, estes sem o uso do

estradiol (em especial o 17β estradiol), para podermos continuar lançando mão

dessa ferramenta reprodutiva importante, sem causar restrições comerciais e

riscos à saúde humana.

Este trabalho visa a comparação de dois protocolos de IATF usando

estradiol e GnRH e avaliando a eficiência reprodutiva desses animais.

Portanto, avaliar uma fonte alternativa para a substituição do estradiol nos

protocolos de IATF, hormônio que será proibido pela UE, devido a relatos de

contaminação de carne e leite.

37

2. MATERIAL E MÉTODOS

2.1. Local e animais

O presente estudo foi realizado em uma propriedade no município de

São Pedro, interior de São Paulo, com clima tropical de altitude, com

temperatura média anual de 22 °C e altitude de 608 metros, onde foram

utilizadas 90 novilhas da raça nelore divididas aleatoriamente em dois grupos

(Grupo 1, Benzoato de Estradiol n=45 e Grupo 2, GnRH n=45). Todos os

animais foram mantidos a pasto de Panicum maximum, cultivar Tanzânia,

suplementados com sal mineral e com manejo convencional de gado de corte,

o experimento teve por finalidade comparar dois protocolos de IATF, um

convencional, usando dentre outros hormônios o benzoato de estradiol, e o

segundo, substituindo o benzoato de estradiol por uma gonadorelina, o GnRH

(Hormônio Liberador de Gonadotrofina).

38

2.2. Tratamentos

O tratamento hormonal do Grupo 1, Benzoato de Estradiol começou no

dia 05/10/09 com a introdução de uma fonte intravaginal de progesterona e a

aplicação de 2mL de benzoato de estradiol (dia zero D0), no dia 13/10/09

retiramos a fonte de progesterona e aplicamos 2mL de prostaglandina (dia oito

D8), no dia 14/10/09 aplicamos 2mL de benzoato de estradiol (dia nove D9) e

no dia 15/10/09 IATF (dia dez D10); todos os tratamentos hormonais foram

feitos no período da manhã e a IATF no período da tarde (Figura 7) .

Figura 7 Protocolo de IATF com Benzoato de Estradiol utilizado no experimento

(arquivo pessoal).

P4 = dispositivo intravaginal com 1g de progesterona ( Primer – tecnopec – São Paulo – Br) E2 = 1mg Benzoato de Estradiol (Estrogin – Farmavet – São Paulo – Br) PGF = 0,150mg (2mL) de d-Cloprostenol ( Prolise – ARSA – Buenos Aires – Ag) IATF = Inseminação Artificial em Tempo Fixo

O tratamento hormonal do Grupo 2, GnRH, começou no dia 08/10/09

com a introdução de uma fonte intravaginal de progesterona e a aplicação de

1mL de GnRH (dia zero D0), no dia 13/10/09 retiramos a fonte de progesterona

e aplicamos 2mL de prostaglandina (dia cinco D5), no dia 14/10/09 foi aplicado

39

1mL de GnRH e observação de cio (dia seis D6) e no dia 15/10/09 a tarde IATF

(dia sete D7),(Figura 8).

Figura 8 - Protocolo de IATF com GnRH utilizado no experimento (arquivo pessoal).

P4 = dispositivo intravaginal com 1g de progesterona ( Primer – tecnopec – São Paulo – Br) GnRH = 0,1mg (1mL) de Gonadorelina ( Fertagyl - Intervet - São Paulo – Br) PGF = 0,150mg (2mL) de d-Cloprostenol ( Prolise – ARSA – Buenos Aires – Ag) IATF = Inseminação Artificial em Tempo Fixo

2.3. Variáveis analisadas

As variáveis observadas no trabalho foram:

• Presença do CL no inicio do protocolo de IATF: esta variável mostra um

indicativo de ciclicidade do animal. A presença do CL foi avaliada por palpação

trans retal no dia do inicio dos tratamentos hormonais dos animais estudados.

• Manifestação do estro no momento da IATF: esta variável mostra se o

animal manifestou ou não o estro. Essa variável foi medida no momento da

inseminação artificial, pela presença do muco cervical e pela facilidade em

transpassar os anéis cervicais.

40

• Taxa de concepção: esta variável mostra quantos animais ficaram

prenhes no primeiro serviço (IATF). A taxa de concepção foi obtida pelo exame

de ultrasonografia trans retal, o mesmo foi executado pelo Pqc Nelcio Antonio

Tonizza de Carvalho, APTA – Pólo Vale do Ribeira, com um aparelho mindray

DP-2200 VET.

2.4. Análise estatística

Foi utilizado o teste de probabilidade, o qui-quadrado, para análise dos

dados obtidos e avaliação do nível de significância dos resultados a 5%.

41

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

O uso do Benzoato de Estradiol no protocolo, tem por finalidade

promover o estimulo da secreção do FSH (Hormônio Folículo Estimulante),

para o crescimento folicular, e do LH (Hormônio Luteinizante), para promover a

maturação e ovulação do folículo. Altas concentrações de estrógeno na

presença de progesterona promoverão a regressão folicular e posteriormente

com a retirada da progesterona e a formação de um folículo dominante esse

estrógeno estimulará a maturação e ovulação, ou seja, o estro.

O uso do GnRH no protocolo tem a mesma finalidade do estradiol no

Grupo 1, promover o crescimento, maturação e ovulação do folículo, ou seja, a

manifestação de cio. Por ser um hormônio liberador de gonadotrofinas ele

estimula a secreção de FSH e LH.

A escolha do protocolo com Benzoato de Estradiol foi devido a utilização

em larga escala deste hormônio no Brasil, isso ocorre devido a falta de

conhecimento e a grande diferença de preço entre o GnRH. Por sua vez o

protocolo com GnRH (Co-synch), tem uma variação em dias de utilização da

42

fonte de progesterona, segundo Chebel (2008) e Bridges (2008), o protocolo

com 5 dias produz oócitos mais jovens e de melhor qualidade.

As variáveis analisadas foram: Presença do CL, esta variável foi medida

por palpação trans retal, apesar de não ser a forma mais confiável, é a de

maior utilização e menor custo; Manifestação do cio, esta variável foi medida

pela observação do muco cervical e a facilidade da IA; E a Taxa de Concepção

que foi a variável mais importante do estudo, afinal quanto maior a taxa de

concepção, melhor é o protocolo de IATF (Tabelas 1 e 2).

Tabela 1- Resultados observados no grupo 1 (Benzoato de Estradiol)

N IDADE PESO CL ESTRO PRENHA

NOVILHAS 35 24,6 309 23 (65,70%) 19 (54,30%) 11 (31,50%)

VACAS 10 58,5 410 2 (20%) 3 (30%) 5 (50%)

TOTAL 45 41,6 359,5 25 (55,60%) 22 (48,90%) 16 (35,60%)

N- número de animais; CL- presença de corpo lúteo

Tabela 2- Resultados observados no grupo 2 (GnRH)

N IDADE PESO CL ESTRO PRENHA

NOVILHAS 35 24,3 330 24 (68,50%) 11 (31,50%) 11 (31,50%)

VACAS 10 65,3 418 7 (70%) 2 (20%) 5 (50%)

TOTAL 45 44,8 374 31 (68,90%) 13 (28,90%) 16 (35,60%)

N- número de animais; CL- presença de corpo lúteo

43

As tabelas 1 e 2 revelam os dados observados no grupo 1 (Benzoato de

Estradiol) e no grupo 2 (GnRH) respectivamente, onde podemos visualizar o

numero de animais, as médias de idade e peso e as variáveis estudadas (CL,

Estro e Taxa de Concepção.

O uso dos dispositivos intravaginais liberadores de P4 associado ao BE

é um tratamento hormonal bastante utilizado para a IATF, tanto em bovinos de

leite como de corte; e seu emprego otimiza os índices reprodutivos atenuando

problemas de manejo como falha na detecção de cio (BÓ et al., 2003).

A associação do estradiol nos tratamentos com progesterona foi

realizado quando se descobriu que o estrógeno induzia a regressão luteal

(WILTBANK et al., 1961). Durante a década de 90, observou se que além do

efeito luteolítico, o estradiol também suprimia o desenvolvimento de folículos

antrais. A aplicação do E2 associada ao CIDR, em novilhas ovariectomizadas,

resultou num pico das concentrações de estrógeno 13,4±1,24 horas após o

início do tratamento; e este pico suprime as concentrações de FSH por 64

horas (BÓ et al., 1993). A administração do BE em associação com P4 induz a

atresia do folículo dominante nos ovários dentro de 36 horas (BURKE et al.,

2003), mas a emergência de uma nova onda de crescimento folicular ocorre

em média de 4,3 ± 0,2 dias depois (BÓ et al., 1993; Bó et al., 1995).

Estudos in vivo com animais ovariectomizados demonstraram que 2

horas após a inserção do dispositivo intravaginal (CIDR) os níveis plasmáticos

de P4 atingem seu pico (6ng mL-1). Este pico é mantido por 48 horas e então

as concentrações vão declinando gradativamente, se mantendo em níveis

aproximados de 3 ng mL-1até a retirada do dispositivo (MUNRO, 1987). Outros

44

autores relatam amplas variações (4,2 a 7,2 ng mL-1) nos níveis plasmáticos de

P4 dos animais ovariectomizados tratados com CIDR (PETTERSON;

HENDERSON, 1990; MACMILLAN; PETERSON, 1993). Durante o período de

tratamento (9 dias) o CIDR liberou aproximadamente 1,1 g de P4 . Portanto as

variações nas concentrações plasmáticas de P4 durante o período de inserção

do dispositivo não é devido a variações nas quantidades de progesterona

liberada, mas sim na habilidade dos animais tratados em metabolizar este

esteróide (PETTERSON; HENDERSON, 1990). Em vacas ovariectomizadas

tratadas com o dispositivo intravaginal DIB, o pico (5-6mg mL-1) das

concentrações de progesterona foi alcançado dentro de 1-3 horas após a

inserção do mesmo. Essas concentrações foram mantidas por

aproximadamente 2 dias, declinando gradualmente, se estabilizando em 2-3 ng

mL-1, até a retirada do dispositivo (BÓ et al., 2003).

A administração de benzoato de estradiol em situações em que os níveis

de P4 estão abaixo de 1,0 ng mL-1, induz o aparecimento do pico ovulatório de

LH 16 a 24 horas após (BÓ et al., 1995).

O tratamento com GnRH induz a ovulação do folículo dominante

(THATCHER et al., 1993), possibilitando a emergência de uma nova onda de

crescimento folicular aproximadamente 2 dias depois (TWAGIRAMUNGU et

al.,1995). Porém, o momento do desenvolvimento folicular em que o GnRH é

aplicado influencia a taxa de ovulação nos animais tratados ( DUNN et al.,

1985). Vasconcelos et al.(1999), observaram que a porcentagem de vacas que

ovularam a primeira injeção de GnRH no protocolo Ovsynch, foi menor ( 23%)

nos animais que estavam entre os dias 1 e 4 do ciclo estral, e maior (96%) nos

45

que estavam entre os dias 5 e 9. Silcox et al. (1993), relataram que o GnRH

induziu a ovulação em 100% dos folículos, quando estes se encontravam na

fase de crescimento (>10 mm) , em 33%, quando estavam na fase de platô e

0% (nenhuma ovulação) quando encontravam-se em atresia. Em novilhas,

obteve-se taxa de ovulação de 75%, quando a aplicação de GnRH foi feita

durante a fase de crescimento do folículo dominante, porém a taxa de ovulação

declinou para 44% quando o folículo dominante encontrava-se na fase estática

ou em regressão (MARTINEZ et al., 2002).

A taxa de ovulação de novilhas tratadas com GnRH (D0) geralmente

situa-se em torno de 56% (PURSLEY et al., 1995) ou 50% (MARTINEZ et al.,

2002) e é alta (17,3%) a incidência de animais que manifestam estro antes da

aplicação da PGF2α ( ROY; TWAGIRAMUNGU, 1999). Willians et al. (2002)

relataram que 28,9% das novilhas Bos indicus tratadas com protocolos

Ovsynch (GnRH- PGF2α-GnRH) exibiram estro entre a primeira aplicação de

GnRH e o tempo determinado para IATF. A incidência de estros prematuros e

de baixa fertilidade em novilhas tratadas com GnRH, é devido a inconsistência

na resposta a primeira aplicação de GnRH (MARTINEZ et al., 2000). Essa

variabilidade na resposta à aplicação de GnRH, talvez possa ser explicada pelo

fato do ciclo estral de novilhas ter a predominância de 3 ondas de crescimento

folicular (FORTUNE, 2001; CASTILHO et al., 2000), o que, aumentaria as

chances de no momento da aplicação do GnRH, não haver um folículo apto a

ovular, consequentemente, a sincronização do desenvolvimento folicular,

decorrente da ovulação induzida pelo GnRH, estaria comprometida

(MARTINEZ et al., 2000).

46

Tabela 3- Comparação da Taxa de Concepção com os animais que

apresentaram corpo lúteo (CL) e Estro. BE - tratamento com benzoato de

estradiol e GnRh - Hormônimo estimulante de gonadotrofina

CL ESTRO

Novilha BE 10/23 (43%) 6/19 (32%)

Vaca BE 1/2 (50%) 2/3 (67%)

Novilha GnRH 9/24 (38%) 5/11 (45%)

Vaca GnRH 3/7 (43%) 2/2 (100%)

A tabela 3 é um comparativo entre as variáveis estudadas, ou seja,

revela quantos animais que estavam ciclando ou que apresentaram estro,

ficaram prenhas.

3.1. Análise dos Resultados

Figura 9- Taxa de Concepção dos Grupos Estudados.

47

A Figura 9 mostra que a taxa de concepção dos dois tratamentos foi a

mesma, mesmo com varias alterações em outros parâmetros avaliados a taxa

de concepção dos dois grupos não foi alterada. Segundo Bridges (2008) em

seu experimento, usando o protocolo co-synch em vacas e novilhas, não

obteve diferença significativa na taxa de prenhez.

GnRH Novilha GnRH Vaca EstradiolNovilha Estradiol Vaca

32%

20%

54%

30%32%

50%

32%

50%

Manifestação do Cio Taxa de concepção

Figura 10 - Comparação da Manifestação do Estro com a Taxa de Concepção.

A Figura 10 mostra que a manifestação do estro no grupo tratado com

GnRH foi menor nas duas categorias de animais estudados. Isso está

relacionado à segunda dose do GnRH ser aplicado próximo ao momento da

IATF (12 horas antes), contudo não alterando o resultado da taxa de

concepção.

Moreira (2002) tratando vacas Nelore paridas e solteiras (sem bezerros)

com o protocolo Crestar, avaliou a eficiência do BE, GnRH e eCG na

sincronização da ovulação. Não houve diferença na taxa de ovulação entre os

48

três hormônios testados. Além de ser uma opção mais barata, o BE, induz um

comportamento estral mais caracterizado (considerável descarga de muco e

melhor abertura da cérvix) comparado com animais tratados com GnRH e eCG

(MARTINEZ et al., 2002).

Figura 11- Presença do CL no Inicio do Protocolo, Manifestação do Estro e Taxa de

Concepção

Segundo Martinez ( 2000), em seu experimento usando os mesmos dois

protocolos, observou uma manifestação de estro maior no grupo tratado com

Benzoato de Estradiol. Na Figura 11 podemos comparar as variáveis

estudadas, ou seja, presença do CL como indicativo de ciclicidade,

manifestação do estro como indicativo da sincronização do estro e a taxa de

concepção.

O grupo 2 (GnRH) foi o que obteve maiores índices de animais com

presença de CL no inicio dos tratamentos, e o grupo 1 (benzoato de Estradio)

foi o que obteve maiores índices de manifestação do estro. Como dito

49

anteriormente, todos esses parâmetros diferenciados, não alterou a taxa de

concepção. Segundo Kim (2005), os tratamentos com GnRH apresentou

melhor taxa de prenhez, sincronia do estro e crescimento folicular e um melhor

folículo pré-ovulatorio,comparado com os protocolos utilizando Benzoato de

Estradiol, em vacas de leite. Colazo (2004) mostrou em seu trabalho que não

teve diferença significativa na taxa de concepção de novilhas tratadas com

protocolos usando GnRH e ECP respectivamente.

3.2. Análise Estatística

A análise estatística dos dados foi realizada utilizando o teste qui-

quadrado (GOMES, 2009), para frequência das variáveis " prenhez X

tratamento"( Tabelas 4 e 5).

Tabela 4 – Frequência Observada para o Teste Qui-quadrado

PRENHA N PRENHA TOTAL BE NOVILHAS 11 24 35

BE VACA 5 5 10 GnRH NOVILHAS 11 24 35

GnRH VACA 5 5 10 TOTAL 32 58 90

Tabela 5 – Frequência Esperada para o Teste Qui-quadrado

PRENHA N PRENHA BE NOVILHAS 12,45 22.56

BE VACA 3,56 6,45 GnRH

NOVILHAS 12,45 22.56 GnRH VACA 3,56 6,45

50

O valor encontrado para o teste qui-quadrado foi 0,5410 e o tabelado

para 3 graus de liberdade a 5% é 7,82. Portanto, não há diferença significativa

a 5 % entre os dois protocolos ( GOMES, 2009).

51

4. CONCLUSÃO

Podemos observar que os tratamentos com benzoato de estradiol e

GnRH não mostraram diferença na taxa de concepção, de novilhas ou vacas.

52

5. REFERÊNCIAS

BO, G.A.; NASSER, L.F.; ADAMS, G.P.; PIERSON, R.A.; MAPLETOFT R.J.

Effect of estradiol valerate on ovarian follicles emergence of follicular waves

and circulating gonadotropins in heifers. Theriogenology . V.40, p.225-239,

1993.

BO, G.A. et al. Ovarian follicular wave emergence after treatment with

progestogen and estradiol in cattle. Animal Reproduction Science, v.39,

p.193-204, 1995.

BÓ, G.A.; BARUSELLI, P.S.; MARTINEZ, M.F. Pattern and manipulation of

follicular development in Bos Indicus cattle. Animal Reproduction Science,

v.78, p.307-326, 2003.

BRIDGES,G.A.et.al. Decreasing the interval between GnRH and PGF2a from 7

to 5 days and lengthening proestrus increases timed-AI pregnancy rates in beef

cows. Theriogenology , v.69, p. 843–851, 2008.

53

BURKE, C.R.et al. Estradiol benzoate delays new follicular wave emergence in

a dose-dependent manner after ablation of the dominant ovarian follicle in

cattle. Theriogenology, v.60, p.647-658, 2003.

CASTILHO, C. et al. Synchronization of ovulation in crossbred dairy heifers

using gonadotrophin-releasing hormone agonist, prostaglandin F2α and human

chorionic gonadotrophin or estradiol benzoate. Brazilian Journal of Medical

Biological Research, v.33, p.91-101, 2000.

CHEBEL, R.C. et al. ,. Effect of reducing the period of follicle dominance in a

timed A.I. protocol on reproduction of dairy cows. Journal of Animal Science,

v. 86 (Suppl.), 2008.

COLAZO,M.G. et.al. Fertility following fixed-time AI in CIDR-treated beef heifers

given GnRH or estradiol cypionate and fed diets supplemented with flax seed or

sunflower seed. Theriogenology, v. 61, p.1115–1124, 2004.

DUNN, R.T.; SMITH, M.F.; GARVERICK, H.A.; FOLEY, C.W. Effect of 72 h calf

removal and/or gonadotropin releasing hormone on luteinizing hormone release

and ovarian activity in postpartum beef cows. Theriogenology, v.23, p.767-

776, 1985.

FORTUNE J.E. et al. Differentiation of dominant versus subordinate follicles in

cattle. Biology of Reproduction . v.5, p.648-654, 2001.

GOMES, F. P. Curso de estatística experimental . 15ed. Piracicaba: FEALQ,

2009. 451p.

54

KIM,U.,et.al. Follicular wave emergence, luteal function and synchrony of

ovulation following GnRH or estradiol benzoate in a CIDR-treated, lactating

Holstein cows. Theriogenology, v.63, p.260–268, 2005.

LANE, E.A.; AUSTIN,E.J.;CROWEB,C. Oestrous synchronisation in cattle-

Current options following the EU regulations restricting use of oestrogenic

compounds in food-producing animals: A review Animal Reproduction

Science , v.109, p.1-16, 2008.

MACMILLAN, K.L., PETERSON, A.J. A new intravaginal progesterone realising

device for cattle (CIDR - B) for estrous synchronization, increasing pregnancy

rates and the treatment of post-partum anestrous .Animal reproduction

Science , v.33, p.1-25, 1993.

MARTINEZ, M.F. et al. Estrus synchronization and pregnancy rates in beef

cattle given CIDR-B, prostaglandin and estradiol or GnRH. Canadian

Veterinary Journal, v.41, p.786–90, 2000.

MARTINEZ, M.F. et al. Induction of follicular wave emergence for estrus

synchronization and artificial insemination in heifers. Theriogenology, v.54,

p.757-69, 2000.

MARTINEZ, M.F. et al The use of progestins in regimens for fixed-time artificial

insemination in beef cattle. Theriogenology , v.57, p.1049-1059, 2002.

55

MOREIRA, R.J.C. Uso do protocolo CRESTAR em tratamentos utilizando

benzoato de estradiol, PGF2 α, PMSG e GnRH para controle do ciclo estral

e ovulação em vacas de corte. Piracicaba, 2002, 48p. dissertação de

mestrado (Mestre em Agronomia) – Escola Superior de Agricultura Luiz

Queiroz – Universidade de São Paulo.

MUNRO, R.K. Concentrations of plasma progesterone in cows after treatment

with 3 types of progesterone pessaries. Australian Veterinary Journal, v64,

p.385-386, 1987.

PETTERSON, A.J.; HENSERSON, H.C. Plasma progesterone concentrations

in ovariectomized dairy cows treated with a CIDR-B breedin devide. Journal of

Reproduction and Fertility, v.43, p.315, 1990, Suppl.

PURSLEY, J.R.; MEE, M.O.; WILTBANK, M.C. Synchronization of ovulation in

dairy cattle using GnRH and PGF2α. Theriogenology , v.44, p.915-23, 1995.

SILCOX, R.W.; POWELL, K.L.; KISER. T.E. Ability of dominant follicle (DF) to

respond exogenous GnRH administration is dependent on their stage of

development. Journal of Animal Science, v.71, p.219, 1993 (Abstract).

THATCHER, W.W.; DROST, M.; SAVIO, J.D.; MACMILLAN, K.L.; ENTWISTLE,

K.W.; SCHIMITT, E.J.; DE LA SOTA, R.L.; MORRIS, G.R. New clinical uses of

GnRH and its analogues in cattle. Animal Reproduction Science , v.33, p.27-

49, 1993.

TWAGIRAMUNGU, H.; GUILBAULT, L.A.; DUFOUR, J.J. Synchronization of

ovarian follicular waves with a gonadotropin-releasing hormone agonist to

56

increase the precision of estrus in cattle: A review. Journal of Animal Science,

v.73, p.3141-51, 1995.

VASCONCELOS, J.L. et al. Synchronization rate, size of the ovulatory follicle,

and pregnancy rate after synchronization of ovulation beginning on different

days of the estrous cycle in lactating dairy cows. Theriogenology, v.52,

p.1067-1078, 1999.

WILLIAMS, S.W.; STANKO, R.L.; AMSTALDEN, M.; WILLIANS, G.L.

Comparison of three approaches for synchronization of ovulation for timed

artificial insemination in Bos indicus influenced cattle managed on tha Texas

gulf coasts Journal of Animal Science, v. 80, p.1173-1178, 2002.

WILTBANK, J.N; INGALLS, J.E.; ROWDEN, W.W. Effects of various forms and

levels of estrogens alone or in combination with gonadotrophins on the estrous

cycle of beef heifers. Journal of Animal Science , v.20, p.341-346, 1961.

http://www.ibge.gov.br/home/estatistica/economia/ppm/2010/default.shtm

acesso em 15/11/2011

http://www.asbia.org.br/ acesso em 21/11/2011

Documents

EFICIÊNCIA DE DOIS PROTOCOLOS DE IATF … · Comparação da Taxa de Concepção com os animais que apresentaram corpo lúteo (CL) e Estro. BE - tratamento com benzoato de estradiol