Especificidade• Formação de um complexo enzima-substrato específico

– Pontes de hidrogênio, interações hidrofóbicas e iônicas– Depende da estrutura tridimensional

Energia de Ligação• A formação de cada interação

fraca no complexo ES é acompanhada da liberação de uma pequena quantidade de energia livre que estabiliza a interação

• Energia de ligação (ΔGB) – Principal fonte de energia livre

utilizada pelas enzimas para diminuição da ΔG‡

Especificidade

Chave e Fechadura

• O módulo SH2 - liga-se à tirosina fosfatada, que se adapta ao sítio ativo da enzima tal como uma chave faz a sua fechadura.

Chave e Fechadura• Emil Fischer, 1894

• Hipótese enganadora quando aplicada a catálise enzimática

• Enzimas complementares seriam inibidores

• Complementar ao estado de transição

Encaixe Induzido• Prevê um sítio de ligação não totalmente pré-formado, mas sim

moldável à molécula do substrato;

• A enzima se ajustaria à molécula do substrato na sua presença

Encaixe Induzido

Grupos Catalíticos

• Catálise geral ácido-base– Ocorre com a participação de aminoácidos com cadeias laterais

ionizáveis, capazes de doar ou liberar prótons durante a catálise para estabilizar os intermediários (H+, OH-)

Grupos Catalíticos

• Catálise Covalente– Resulta do ataque

nucleofílico ou eletrofílico de um radical do sítio catalítico sobre o substrato, ligando-o covalentemente à enzima e induzindo a sua transformação em produto.

Frutose 2,6-bifosfatase

Grupos Catalíticos

• Catálise por Íon Metálico– Metais firmemente ligados ao sítio catalítico interagem entre a

enzima e o substrato estabilizando o estado de transição

Mecanismo de Ação da Quimiotripsina

• Grupos catalíticos específicos contribuindo para catálise: ácido–base, covalente

Covalente

Ac.-Base

Efeito do pH na Atividade Enzimática

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Efeito do pH na Atividade Enzimática

– A ionização de aminoácidos (aa) pode provocar modificações na conformação da enzima.

pH > pI• pH do meio esta alcalino;• concentração reduzida de íons

H+ no meio; os aa liberam H+, ficando eletricamente negativo.

pH < pI• pH do meio esta ácido;• excesso de íons H+ no meio; os

aa recebem H+, ficando eletricamente positivo.

Efeito da Temperatura na Atividade Enzimática

quimiotripsina de porco enzima isolada de um camarão do Alaskaenzima isolada de uma bactéria de fontes termais