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Febre do Nilo Ocidental

eletrônicoEPIDEMIOLÓGICO

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Primeiro inquérito sorológico em aves migratórias e nativas do Parque Nacional da Lagoa do Peixe/RS para detecção do vírus do

Nilo OcidentalIntrodução

A Febre do Nilo Ocidental é uma encefalite viral causada por um Flavivírus, que acomete principalmente aves e ocasionalmente o homem e cavalos. A transmissão desta enfermidade se dá através da picada de mosquitos hematófagos e tem comoprincipais disseminadores as aves.

A doença foi identificada pela primeira vez em Uganda, em 1937. Na década de 50, verificou-se em Israel a primeira epidemia, sendo reconheci-da como o vírus do Nilo Ocidental, o causador de uma meningoencefalite severa. Subseqüentemente sua presença foi novamente identificada em Israel, bem como na Índia, Egito e outros países da África. Em 1974, ocor-reu na África do Sul a maior epidemia conhecida causada por este agente. Na década de 90 ocorreram surtos nos seguintes países: Argélia (1994), Romênia (1996-1997), República Checa (1997), República Democrática do Congo (1998), Rússia (1999), Israel (2000).

Nos EUA, a doença vem ocorrendo desde 1999 e, em 2002, já foram identificados 4.156 casos com 284 óbitos.

A maioria das populações de aves migratórias que fazem do Brasil uma área de invernada são provenientes das colônias de reprodução da costa leste norte-americana e canadense. Chegam ao norte do país a partir de setembro e à costa do Rio Grande do Sul, em novembro. Muitos jovens e adultos que não irão reproduzir naquele ano, permanecem no Brasil até que A SVS, preocupada com a possibilidade da entrada do vírus causador da febre do Nilo Ocidental, vem desde o início do ano passado desenvol-

vendo as seguintes atividades para estruturação da vigilância e controle da Febre do Nilo Ocidental no território brasileiro.1. Participação de dois técnicos do SVS, na oficina de trabalho em Vigilância

da Febre do Nilo Ocidental realizado em Trinidad e Tobago, abril 2002 (Abril/Maio/2002).

2. Levantamento de aves mortas, sem causa definida, nos dois últimos anos, nos principais zoológicos do país.(Abril/2002).

3. Estabelecimento de Portaria Interministerial entre o Ministério da Saúde, Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento e Ministério do Meio Ambiente, que dispõe sobre a criação do Comitê Executivo para implantar e coordenar o Sistema de Vigilância da Febre do Nilo Ocidental (Setembro/2002).

4. Treinamento de equipe técnica no Centro de Vigilância Ambiental do Recife/PE e na Ilha de Itamaracá/PE, para realização do Primeiro Inquérito Sorológico em Aves Migratórias do País(Outubro/2002).

5. Realização do Primeiro Inquérito Sorológico em Aves Migratórias e Nativas do Parque Nacional da Lagoa do Peixe-RS para detecção do Vírus da Febre do Nilo Ocidental(Novembro/2002).

6. Desenvolvimento do Guia de Vírus da Febre do Nilo Ocidental (Novembro/2002).

7. Realização do Primeiro Inquérito Sorológico em Aves Migratórias e Residentes de Galinhos-RN para detecção do Vírus do Nilo Ocidental e outros vírus (Abril/maio 2003).

Extraído do Boletim Eletrônico EPIDEMIOLÓGICO

Ano 03, NO 130/05/2003Pag. 3 a 12

2 - SVS - Boletim eletrônico EPIDEMIOLÓGICO

Febre do Nilo Ocidental (continuação)

8. Realização do Primeiro Inquérito Sorológico em Andorinhas estejam aptos à reprodução. Existem pou-cos relatos na literatura sobre o período de incubação da doença nas aves, entretanto o período de viremia nestes animais é de 1 a 4 dias, onde a partir daí a maioria adquire imunidade. Por serem as aves migratórias os principais reservatórios do vírus, como parte da implan-tação da vigilância em aves se fez necessário a realização de inquérito sorológico nesses animais. da Refinaria de Petróleo/REMAN em Manaus para detecção do Vírus do Nilo Ocidental e outros vírus (Setembro/2003).

9. Realização de Monitoramento Sorológico em Aves Migratórias e Residentes na Coroa do Avião/PE para detecção do vírus do Nilo Ocidental e outros vírus (Influenza Aviária e Newcastle) (set/out/nov de 2003 e fev/mar/abr de 2004).Por fim uma Reunião Nacional com os Coordenadores

Estaduais de Epidemiologia e Zoonoses das SES para dis-cussão da Estruturação da Vigilância no País.

LocalO Parque Nacional da Lagoa do Peixe, localiza-se na

costa gaúcha, com limites entre os municípios de Tavares, Mostardas e

São José do Norte, cerca de 240km de Porto Alegre/RS, entre o Oceano Atlântico e a Lagoa dos Patos (Foto 1).

O Parque constitui um dos mais espetaculares refúgios de aves que migram mais de 8.000km, concentrando-se na área por mais de quatro meses.

A migração se dá com os indivíduos ainda não sexual-mente imaturos, os quais permanecem no território brasilei-ro quase o ano inteiro; os demais ali descansam, recuperando as energias gastas na migração, realizando ciclos de mudas (trocas de penas), acumulando reservas para suas extensas jornadas de volta, à caminho da reprodução, no Ártico Ca-nadense ou no sul do continente sul-americano.

A quantidade de animais que migra para a área, a diver-sidade de espécies e a infra-estrutura do local, foram fatores importantes para a determinação do local a ser realizado o inquérito.

Período• 31 de outubro a 13 de novembro de 2002

Para a escolha do período a ser realizado o inquérito, foi observado a época do ano do início da migração das aves do hemisfério norte e a fase da lua, devido a captura ser realizada no período noturno, das 22:00 ás 6:00hs e a escuridão ser um fator facilitador para a captura.

Participantes• Médicos Veterinários

- Francisco Anilton Alves Araújo/SVS – Coordenador- Marcelo Yoshito Wada/SVS - EPI_SUS- Égon Vieira da Silva/Ministério da Agricultura,

Pecuária e Abastecimento- Georges Cavalcanti e Cavalcante/Sociedade de

Zoológicos do Brasil- Vivyanne Santiago Magalhães/UFRPE- Geraldo Vieira de Andrade Filho/CVA/Prefeitura do

Recife• Farmacêuticos-Bioquímicos

- Sueli Guerreiro Rodrigues/IEC/SVS- Lívia Caricio Martins/IEC/SVS

• Biólogos- Carmem Elisa Fedrizzi/UFRPE- Adriano Scherer/Cemave/Ibama

- Leonardo Vianna Mohr/Cemave/Ibama- Marco Antônio Barreto de Almeida/Secretaria de

Saúde/RS• Auxiliares Técnicos

- Basílio Silva Buna/Instituto Evandro Chagas/SVS- Luís Roberto de Oliveira Costa - IEC/SVS- Shrerezino Barbosa Scherer - Cemave/Ibama- Ricardo da Silva Teixeira Vianna - SVS

Promoção e Instituições Participantes• Secretaria de Vigilância em Saúde

- Departamento de Vigilância Epidemiológica- Instituto Evandro Chagas

• Fundação Nacional de Saúde- Coordenação Regional do Rio Grande do Sul

• Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento

• Ministério do Meio Ambiente• Ibama

- Superintendência do Rio Grande do Sul- Parque Nacional da Lagoa do Peixe- Cemave

• Secretaria de Saúde do Rio Grande do Sul• Sociedade de Zoológicos do Brasil

ObjetivoRealizar inquérito sorológico amostral em aves migrató-

rias e nativas da Lagoa do Peixe/RS para detecção da presença de anticorpos para o vírus do Nilo Ocidental.

Financiamento• Fundação Nacional de Saúde

Desenvolvimento das atividadesA chegada ao local se deu no dia primeiro de novembro,

quando a equipe procurou se alojar para dar início as ativi-dades ainda no primeiro momento.

Devido a distância da cidade mais próxima ser de cerca de 40km que deveriam ser percorridos na praia, e as atividades serem desenvolvidas no período da noite se fez necessário Foto 1 - Lagoa do Peixe

Boletim eletrônico EPIDEMIOLÓGICO - SVS - 3

improvisar como alojamento uma escola e uma pequena cabana como laboratório (Foto 2 e Foto 3).

Retirada de animais das redesO uso de redes e a retirada dos animais presos nelas

pressupõe uma certa habilidade dos técnicos para não cau-sar danos nas aves. A quantidade de aves que ela permite capturar é bastante grande e os técnicos necessitam de um grande conhecimento ornitológico (Foto 6 e Foto 7).

A cada duas horas eram feitas vistorias nas redes onde os animais eram retirados e levados para o laboratório para se-rem processados (identificação, biometria e coleta de sangue).

TriagemNo momento da retirada dos animais das redes eles eram

colocados em caixas, separados por espécie, para evitar que as mais agressivas não viessem a ferir as outras (Foto 8).

BiometriaPara realização da biometria foi utilizada uma ficha espe-

cífica, preparada em conjunto pelos técnicos que participa-ram do inquérito. A ficha possuía dados biológicos referentes

Foto 2 - Laboratório

Foto 3 - Alojamento

Colocação de redesForam colocadas 32 redes ornitológicas de captura de

aves, em dois locais de pouso e alimentação das aves, per-fazendo uma área de 320 metros em linha reta. Estas redes eram abertas durante a noite e fechadas durante o dia (Foto 4 e Foto 5).

Foto 4 - Colocação das redes

Foto 5 - Redes colocadas

Foto 6 - Ave apreendida - batuira de bando (C. semipalmatus)

Foto 7 - Retir brancoada da ave - maçarico (Calidris alba)



a: espécie, status (ave nova, recapturada, recuperada e anilha destruída), idade, sexo, plumagem, número da anilha, muda, medidas (asa, tarso, cauda, cúlmen total e narina ponta), peso e quantidade de sangue coletada.

Todas as aves capturadas foram anilhadas conforme normas internacionais, entretanto aquelas já anilhadas eram anotadas na ficha o número das anilhas e observadas a procedência.

A coleta de dados tem como objetivo principal conhecer as espécies capturadas e a procedência dos animais anilha-dos em outras partes do mundo, auxiliar na determinação da quantidade de sangue a ser coletada além de definir em que fase de desenvolvimento estes animais se encontram.

Toda a responsabilidade da biometria ficou a cargo dos biólogos da equipe (Foto 9 e Foto 10).

Este procedimento foi realizado pelos médicos veteriná-rios da equipe, devidamente treinados (Foto 11 e Foto 12).• A quantidade de sangue a ser coletado, dependia do peso

corporal da ave, isto é, foi padronizado a quantidade máxima de sangue, como 1% do peso do animal.

• A coleta de sangue foi realizada utilizando seringa de insulina heparinizada, e feita preferencialmente na veia jugular ou na veia basílica (alar).

• O sangue foi colocado em flaconetes etiquetados, centrifugado e congelados em nitrogênio líquido para envio ao laboratório de diagnóstico (Instituto Evandro Chagas).

• A etiqueta possuía um número que correspondia a anilha colocada ou já existente na perna do animal.

Resultados obtidos1. Aves apreendidas

Foram apreendidas 556 aves, de 19 espécies diferentes, das quais, foi coletado sangue de 522 (93,9%) animais. Destas espécies, vale considerar que já foram isolados vírus nos

Foto 8 - Separação das aves Foto 9 - Medição da asa

Foto 10 - Medição da narina ponta - piru-piru (Haematopus palliatus)

Foto 11 - Punção da jugular - maçarico-de-bico-virado (Limosa haemastica)

Foto 12 - Punção da veia basílica



EEUU, segundo OPAS (http://www.paho.org/Portuguese/HCP/HCT/VBD/wnv-guidelines.htm) em 3 delas; Calidris alba, Arenaria interpres e Rynchops niger (Foto 13).

57 aves recuperadas, 55 (96,5%) são provenientes do leste dos EEUU e duas (3,5%) de Portugal. Vale considerar que a anilha de uma das aves recuperadas encontrava-se semi-destruída, dificultando assim a identificação precisa do local de origem da numeração da mesma (Foto 17).

Chama a atenção que 10,3% do total de animais captura-dos já haviam sido anilhados em outros países, confirmando a migração a partir das áreas onde o vírus do Nilo Ocidental tem circulado.

4. Aves observadasAlém do trabalho de rotina de captura, apreensão, bio-

metria, necropsia, coleta de material dos animais domésti-

Foto 13 - Contenção da ave - talha-mar (Rynchops niger)

Considerando o projeto inicial, onde a perspectiva de captura era de pelo menos 14 espécies diferentes de aves mi-gratórias e residentes com uma amostra de 704 animais, além de 100 amostras de espécies não relacionadas inicialmente, não houve considerável mudança nas espécies propostas inicialmente, coincidindo com 42,1% da proposta inicial. Entretanto, a meta inicial do número de aves a serem apre-endidas por espécie foi cumprida nas Calidris canutus, Sterna hirundo (Foto 14) e Sterna trudeaui e a Limosa haemastica em 34%, fato que deve ser considerado que a queda destes animais nas redes ocorre de uma forma aleatória (Foto 15).

2. Aves recapturadasForam considerados recapturados os animais previa-

mente capturados e anilhados pelo grupo durante a viagem. Considerando as 556 aves trabalhadas, 13 delas foram re-capturadas (2,3%) do total. Sendo, oito Sterna hirundo, duas Sterna trudeaui, uma Sterna nilotica, uma Arenaria interpres e um Calidris canutus (Foto 16).

3. Aves recuperadasForam consideradas como recuperadas as aves apeendi-

das em outros locais e apreendidos durante o trabalho. Das

Foto 14 - Bando de trinta-réis-boreal (Sterna hirundo)

Foto 15 - Contenção da ave - trinta-réis-de-bico-amarelo (Sterna eurygnatha)

Quadro 1 - Nome científico e popular, status e quantidade de aves capturadas

Foto 16 - Contenção e localização da anilha - maçarico-de-papo-amarelo (Calidris canuttus)



Foto 18 - Carcará (Carcara piancus)

Foto 19 - Garça-moura (Ardea cocoi)

Foto 17 - Contenção da ave - trinta-réis-boreal (Sterna hirundo)

Quadro 2 - Aves recuperadas segundo espécie, nome popular e procedência

cos, coleta de mosquitos e ectoparasitos, foi realizado um trabalho de observação das aves, utilizando binóculos, com um objetivo de subsidiar o inquérito sorológico tendo em vista que muitas das espécies de aves observadas não foram capturadas e que existe a possibilidade das mesmas serem provenientes de áreas com circulação do vírus do Nilo Oci-dental (Foto 18 e Foto 19).

Neste sentido, o Quadro 3 mostra 81 espécies de aves observadas na área do Parque, 10 das quais, o vírus do Nilo Ocidental já foi isolado nos EEUU, com objetivo de relacionar que espécies seriam mais importantes de serem monitoradas no país.

5. Animais mortos observadosDurante o período de desenvolvimento das atividades

foram encontrados centenas de pingüins (Sphenicus magella-nicus) mortos na praia, além de cinco aves do tipo pardela-

boreal (Puffinus puffinus), três tartarugas, três toninhas e um lobo marinho. Fato considerado, normal, nesta época do ano, pelos pesquisadores do Ibama.

Houve a tentativa de realização de necropsia de alguns destes animais (pinguins), entretanto devido ao avançado estado de decomposição que eles se encontravam só foi possível nas pardela-boreal (Puffinus puffinus) (Foto 20).

6. Necropsias realizadasForam realizadas necropsias em 16 aves e coletado frag-

mentos de cérebro, coração, fígado, baço e rim. O material foi devidamente conservado em nitrogênio líquido e enca-minhado para o Instituto Evandro Chagas/Funasa para ten-tativa de isolamento do vírus. Além disto, o objetivo da coleta

de material de animais mortos é correlacionar os resultados laboratoriais com os resultados da sorologia (Quadro 4).

Vale considerar que nada fora do normal foi observado macroscopicamente nos animais necropsiados. Cinco ani-


Quadro 3 - Lista de aves observadas segundo espécie, nome popular, status e isolamento do vírus do Nilo Ocidental nos EUA


mais necropsiados foram encontrados mortos na praia e o restante foram a óbito em decorrencia da captura, tendo portanto sido encontrados mortos na praia e os outros foram a óbito. É importante considerar que não houve nenhuma morte de ave devido o manuseio indevido, stress, biometria ou coleta de sangue (Foto 21).

Foto 20 - Pardela-boreal (Putfinus putfinus) encontrada morta

Quadro 4 - Aves necropsiadas segundo nome científico, nome popular e quantidade

Foto 21 - Necrópsia



7. Coleta de sangue de animais domésticosA Diretora do Parque visitou o líder da comunidade

de pescadores para informar sobre o trabalho que estava sendo realizado e solicitar o apoio no sentido de permitir a realização de coleta de sangue dos animais domésticos da comunidade (Foto 22 e Foto 23).

Foto 22 - Punção da jugular de um equino

Foto 23 - Punção da veia basílica (alar) do pato

8. Mosquitos capturadosPelo fato da transmissão da doença ocorrer através da

picada de mosquito, considerou-se importante a captura destes animais na área. Vale ressaltar que não foi feito levantamento entomológico, e sim capturas esporádi-cas diurnas e noturnas no intuito de conhecer a fauna presente no momento e local da captura das aves. Estes insetos foram encaminhados ao Instituto Evandro Cha-gas/Funasa para identificação e tentativa de isolamento do vírus (Foto 24).

Foto 24 - Material para captura dos mosquitos

Quadro 6 - Lotes de mosquitos preparados para tentativas de isolamento viral

Foram capturados 445 mosquitos, de dois gêneros dife-rentes, sendo 416 (93,5%) Aedes albifasciatus e 29 (6,5%) Culex spp. O Culex spp, destes mosquitos, não foi possível a identificação até espécie, devido os mesmos terem chegado ao laboratório em condições inadequadas (Quadro 6).

Aedes albifasciatus é uma espécie zoofílica comum en-contrada no sul do continente americano, apresentando im-portância por atacar animais e o homem, principalmente no verão chuvoso, época em que se reproduz. Sua criação é dada em locais planos onde hajam depressões temporárias. Pode ser encontrado em áreas peridomiciliares e domiciliares.

9. Ectoparasitos capturadosConsiderando o alto grau de infestação por ectoparasitos

de algumas aves capturadas e levando em conta a possibili-dade destes animais também serem vetores do vírus do Nilo Ocidental e de outras enfermidades exóticas em nosso meio, foram coletados 26 espécimes a partir de 10 aves, os quais estão sendo identificados para determinar se são piolhos hematófagos ou mastigadores (alimentam de penas e esca-mas) na Universidade Federal Rural de Pernambuco pelas técnicas Jackeline Biankue de Oliveira (médica veterinária), Magnólia da Conceição Nunes Botelho (bióloga) e Mirian Dowell de Brito (bióloga).

10. Resultados laboratoriaisO material coletado foi encaminhado para o Instituto

Evandro Chagas/SVS, laboratório de referência para arboví-rus, para realização do teste de inibição da hemaglutinação e tentativa de isolamento do vírus. Nem o vírus do Nilo Oci-dental ou outro vírus foi isolado dos espécimes inoculados.


Quadro 5 - Animais coletados segundo espécie e quantidade de indivíduos


Entretanto, o teste de inibição da hemaglutinação detectou a presença de anticorpos IH para os vírus Mayaro, Oropou-che, Encefalite Equina do Leste (E.E.E), Cacicaporé, Rocio, Tacaiúma, Dengue 1 e Encefalite St. Louis. Ressalta-se que os soros foram também testados e mostraram resultados negativos para os seguintes arbovírus: Encefalite, Eqüina do Oeste, Mucambo, Guaroa, Turlock, Maguari, Catu, Carapa-ru, Bussuquara e Ilhéus.

O maior percentual de detecção foi de anticorpos foi para o antígeno do vírus Mayaro, em 68 aves, ou seja 13% da amostra, sendo em 12 espécies de aves migratórias diferentes e três espécies de aves residentes e duas galinhas. Além deste, foram detectados anticorpos para os seguintes vírus:• Oropouche: em quatro aves, sendo de três residentes no

país Haematopus palliatus e uma migratória Rynchops Niger.

• Cacicaporé: em duas aves migratórias, Sterna hirundo.• Vírus da E.E.E.: em oito aves, sendo seis migratórias:

Calidris canutus (1), Arenaria interpres (2), Sterna hi-rundo (3), Tringa flavipes (1) e uma residente, a Sterna trudeaui.

• Vírus Rocio: em duas aves migratórias, S. hirundo (2) e uma residente S. trudeaui (1).

• Vírus Tacaiúma: em uma ave migratória da espécie A. interpres.

• Vírus da Encefalite de St. Louis: em um cão e uma galinha.

• Vírus Dengue 1: em um cão e em uma S. superciliares, sugerindo uma reação cruzada com outros vírus e que deverá ser esclarecida através do teste de soroneutrali-zação.

ConclusõesApós análise dos resultados sorológicos pode-se concluir

que é possível que estes animais tenham tido contato com os referidos arbovírus ou vírus relacionados, se infectaram e criaram anticorpos, não existindo risco de transmissão atual dos mesmos à população. No entanto, devem ser to-madas medidas para estruturação da vigilância, prevenção e controle destas enfermidades, tais como, controle do ve-

Quadro 7 - Número de aves capturadas com sorologia positiva segundo espécie e tipo de vírus

tor, e práticas do uso de repelentes, proteção das casas pela utilização de tela nas portas e janelas para evitar a entrada de mosquitos, tendo em vista que foi detectada presença de anticorpos nas espécies de aves residentes no país do tipo Haematopus palliatus, Limosa haemastica, Rynchops niger, Sterna superciliares e Sterna trudeaui sugerindo que os vírus podem ter circulado na área de residência dessas aves. A de-tecção de anticorpos em aves e animais residentes mostrou a necessidade de realização de outros inquéritos na mesma área. O primeiro foi o “Inquérito entomológico na área do Parque Nacional da Lagoa do Peixe-RS” com o objetivo de conhecer a fauna entomológica local e a realização de testes laboratoriais na tentativa de isolamento viral nos mosquitos capturados (Abril de 2003).

O segundo foi o “Inquérito sorológico em humanos para arbovírus em população da área do Parque da Lagoa do Peixe” com o objetivo de estabelecer a existência ou não de contato com os arbovírus detectados entre aves e animais domésticos da região (junho de 2003). Os resultados de ambos os inquéritos estão sendo processados no Instituto Evandro Chagas.

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AutoresFrancisco Anilton Alves Araújo - SVS/MSMarcelo Yoshito Wada - SVS/MSÉgon Vieira da Silva - Min. da Agricultura, Pecuária e Abas-tecimentoGeorges Cavalcanti e Cavalcante - Soc. Zoológicos do BrasilVivyanne Santiago Magalhães - UFRPEGeraldo Vieira de Andrade Filho - CVA/Prefeitura de RecifeSueli Guerreiro Rodrigues - IEC/SVS/MS

Livia Carício Martins - IEC/SVS/MSCarmem Elisa Fedrizzi - UFRPEAdriano Scherer - Cemave/IbamaLeonardo Vianna Mohr - Cemave/IbamaMarco Antonio Barreto de Almeida - SES/RSBasílio Silva Buna - IEC/SVS/MSLuís Roberto de Oliveira Csota - IEC/SVS/MSSherezino Barbosa Scherer - Cemave/IbamaRicardo da Silva Vianna - SVS/MSVera Lúcia Gattas - SVS/MS


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