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Fundamentos de Fundamentos de Engenharia Engenharia Genética Genética

Fundamentos de Engenharia Genética. Revisões rDNA Materiais Vectores DNA a clonar Enzimas de Restrição Ligases do DNA Células hospedeiras Procedimento

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Fundamentos de Fundamentos de Engenharia GenéticaEngenharia Genética

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RevisõesrDNA

Materiais Procedimento

Vectores

DNA a clonar

Enzimas de Restrição

Ligases do DNA

Células hospedeiras

1º Isolamento dos DNAs(Vector + DNA a clonar)

2º Endonucleases + Vector + DNA

3º Fragmento + Vector+ Ligase

4º Vector + célula hospedeira

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cDNA

DNA polimerase

1

(Poli T)

CTAG GATC

Iniciador 2

5’

CTAG GATC

Imagem do manual – pág. 219

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Bibliotecas de DNA

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Bibliotecas Bibliotecas genómicasgenómicas

Bibliotecas de Bibliotecas de cDNAcDNA

Material Material genético genético

manipuladomanipulado Condição do DNACondição do DNA

Material a clonarMaterial a clonar

Função da Função da bibliotecabiblioteca

DNA mRNA

Natural

Artificial

Fragmentos de DNA (Intrões e Exões)

Genes isolados (Exões)

•Replicação•Armazenamento

•Replicação•Armazenamento•Síntese proteica

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Impressões Digitais Genéticas

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Exemplo:Paternidade

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Actividade prática:

• Como construir uma biblioteca genómica/ cDNA de um ser de outro planeta?

• CSI - Episódio 35 – A sonâmbula